Effaith Hypothermia Therapiwtig yn Erbyn Anafiadau Arennol Mewn Model Llygoden Fawr O Ataliad y Galon Asphyxial: Α Ffocws Ar Gyfradd Goroesi, Pathoffisioleg Ac Ensymiau Gwrthocsidiol
Mar 25, 2022
SO EUN KIM1*, HA- SHIN IFANC2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Haniaethol.
Er bod camweithrediad aml-organ yn gysylltiedig â chyfradd goroesi ar ôl ataliad y galon (ca), mae mwyafrif yr astudiaethau hyd yma wedi canolbwyntio ar galonnau ac ymennydd, ac ychydig o astudiaethau sydd wedi ystyried methiant arennol. Amcan yr astudiaeth bresennol, felly, oedd archwilio effeithiau hypothermia therapiwtig ar gyfradd goroesi, pathoffisioleg, ac ensymau gwrthocsidiol mewn arennau llygod mawr yn dilyn CA asphyxial. Cafodd llygod mawr eu haberthu un diwrnod ar ôl CA. Y gyfradd oroesi, a amcangyfrifwyd gan ddefnyddio dadansoddiad Kaplan-Meier, oedd 42.9 y cant un diwrnod ar ôl ca. Fodd bynnag, cynyddodd hypothermia, a ysgogwyd yn dilyn ca y gyfradd goroesi yn sylweddol (71.4 y cant). mewn llygod mawr normothermia gyda ca, cynyddwyd lefel nitrogen wrea serwm gwaed yn sylweddol un diwrnod ar ôl ca. yn ogystal, cynyddwyd lefel creatinin serwm yn sylweddol undydd ar ôl CA. Fodd bynnag, mewn llygod mawr CA sy'n agored i hypothermia, gostyngodd lefelau nitrogen wrea a creatinin yn sylweddol yn dilyn ca. Datgelodd staenio histocemegol gynnydd amserol sylweddol mewn anafiadau arennol ar ôl i'r grŵp normothermia ddioddef ca. Fodd bynnag, bu gostyngiad sylweddol yn yr anaf arennol yn y grŵp hypothermia. Datgelodd dadansoddiad imiwn-histocemegol o'r aren ostyngiad sylweddol mewn ensymau gwrthocsidiol (copr-sinc superoxide dismutase, superoxide dismutase manganîs, glutathione peroxidase, a catalase) gydag amser yn y grŵp normothermia. Fodd bynnag, yn y grŵp hypothermia, codwyd yr ensymau hyn yn sylweddol yn dilyn ca. gyda'i gilydd, datgelodd y canlyniadau fod camweithrediad arennol yn dilyn ca asphyxial wedi'i gysylltu'n gryf â'r gyfradd goroesi cynnar, a bod hypothermia therapiwtig yn lleihau anafiadau arennol trwy fecanweithiau gwrthocsidiol effeithiol.
Geiriau allweddol: ataliad cardiaidd asffyxial, syndrom ataliad y galon ar ôl y galon, triniaeth hypothermia, aren, histopatholeg, ensymau gwrthocsidiol
Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche colli perlysiau ymerodraethyn atalclefyd yr arennau, cliciwch yma i gael y sampl
Rhagymadrodd
Mae ataliad cardiaidd (ca), a elwir hefyd yn arestiad cardiopwlmonaidd neu arestiad cylchrediad y gwaed, yn golygu bod cylchrediad gwaed arferol yn dod i ben yn sydyn oherwydd methiant y galon i bwmpio gwaed yn ddigonol (1). ca achosi isgemia corff cyfan, sy'n achosi niwed i organau lluosog, gan gynnwys yr ymennydd, y galon, yr arennau a'r afu. Mae mwyafrif yr astudiaethau ymchwil yn cynnwys ca dros yr hanner canrif ddiwethaf wedi canolbwyntio ar wella cyfradd dychweliad llwyddiannus cylchrediad digymell (roSc), gyda chynnydd sylweddol (2-4). Er y gall dadebru ar unwaith wella RoSc, mae'r gyfradd goroesi gyda phrognosis gwael yn bryder (5-7). Mae syndrom ataliad y galon ar ôl ataliad y galon (PcaS) yn cyfeirio at ganlyniadau pathoffisiolegol RoSc yn dilyn adfywio cardio-pwlmonaidd llwyddiannus (cPr) yn dilyn ca (8). PcaS yw prif achos y gostyngiad mewn goroesi yn dilyn RoSc (9). Dim ond 30 y cant (5) yw'r gyfradd goroesi PcaS cyfnod cynnar mewn cleifion. Nid oes amheuaeth nad yw'r galon a'r ymennydd yn organau pwysig yn PcaS. Yn y cyfamser, anaml y mae astudiaethau wedi ymchwilio i fethiant arennol yn dilyn ca (1,10,11). Mae swyddogaeth arennol â nam dros dro yn gyffredin mewn cleifion sy'n goroesi ca (12). Nid yw mynychder ac effaith camweithrediad yr arennau yn dilyn ca wedi'u disgrifio'n dda (13). yn ogystal, awgrymodd ein hastudiaeth flaenorol y gallai'r gyfradd goroesi cynnar isel yn dilyn roSc mewn astudiaethau arbrofol (14) fod yn gysylltiedig yn gryf â methiant arennol fel anaf acíwt i'r arennau. un o achosion mwyaf cyffredin anaf acíwt i'r arennau yw ca (15). Mae anaf acíwt i'r arennau yn PcaS cyffredin sy'n datblygu mewn ~30 y cant o gleifion yn yr ysbyty â ca (16).
Mae rhywogaethau ocsigen adweithiol (roS) yn cynnwys cyfres o ganolraddau ocsigen, gan gynnwys yr anion superocsid radical rhydd (o2•-), hydrogen perocsid anradical (H2o2), y radical rhydd hydrocsyl adweithiol iawn (OH•), perocsynitrit (onoo ) , ac ocsigen singlet (1o2) (17). Datgelwyd bod RoS yn chwarae rhan hanfodol mewn sawl cyflwr arennol arbrofol, megis methiant arennol isgemig acíwt, gwrthodiad impiad arennol, glomerulonephritis acíwt, a chlefydau arennol gwenwynig (18). Mae tystiolaeth sylweddol yn cefnogi synthesis RoS yn syth ar ôl strôc isgemig acíwt (19) a cnawdnychiant myocardaidd acíwt (20). Gwyddys bod RoS yn bwysig mewn clefydau isgemig, megis strôc a chnawdnychiad myocardaidd. Er enghraifft, dywedodd Hackenhaar et al (21) fod RoS yn cael ei gynhyrchu yng ngwaed cleifion â PcaS; fodd bynnag, anaml y mae astudiaethau wedi ymchwilio i ffurfiant roS yn yr aren yn dilyn ca yn ystod y cyfnod ôl-PcaS cynnar (22,23).
Am y rheswm hwn, rhagdybiwyd bod RoS yn bwysig mewn anafiadau i'r arennau yn dilyn ca ac yn cyfrannu at y gyfradd oroesi isel yng nghamau cynnar PcaS. I archwilio'r ddamcaniaeth hon, ysgogwyd ca asphyxial mewn llygod mawr a gwelwyd y gyfradd goroesi yn ystod camau cynnar PcaS. yn ogystal, perfformiwyd hypothermia ar unwaith ac wedi'i ohirio i gynyddu'r gyfradd goroesi isel sy'n gysylltiedig â PcaS yn dilyn RoSc. At hynny, dadansoddwyd y camweithrediad arennol yn histopatholegol ac aseswyd y newidiadau a achosir gan roS, megis superoxide dismutase copr-sinc (Sod-1), manganîs superoxide dismutase (Sod-2), catalase (caT), a glutathione peroxidase (GPX). trwy ddadansoddiad imiwn-histocemegol yn dilyn RoSc.
cistanche pharma special
Defnyddiau a dulliau
Anifeiliaid a grwpiau arbrofol.Cafwyd cyfanswm o 62 o lygod mawr Sprague-Dawley (Sd) gwrywaidd (pwysau, 270-300 g; oedran, 10 wythnos) o ganolfan anifeiliaid arbrofol prifysgol genedlaethol Jeonbuk (iksan, gweriniaeth Corea). Cawsant eu cartrefu ar dymheredd o 23±2˚C a lleithder o 60±10 y cant o dan gylchred golau/tywyll 12-h. Cawsant fynediad am ddim i fwyd a dŵr. cymeradwywyd pob protocol arbrofol yn seiliedig ar weithdrefnau moesegol a gofal gwyddonol gan bwyllgor gofal a defnydd anifeiliaid sefydliadol prifysgol genedlaethol Jeonbuk (rhif cymeradwyaeth JBnu 2020-084).
Cafodd anifeiliaid arbrofol eu haenu mewn tri chategori [grŵp llawdriniaeth ffug, ca o dan normothermia, a thriniaeth ca a hypothermia (HT)] fel a ganlyn: i) grŵp I, grŵp ffug (n{0}}) yn cael ei gynnal o dan amodau normothermia heb ca; ii) grŵp ii, grŵp normothermia heb driniaeth hypothermia (33˚C) yn dilyn CA (n=17); a iii) grŵp iii (n=40), grŵp a gafodd ca o dan normothermia ac a gafodd eu trin â HT ar ôl ca am 2 h (n=17), 4 h (n=13) a 6 h (n=10) yn dilyn roSc, lle cafodd yr holl lygod mawr eu hailgynhesu i normothermia.
Sefydlu CA a CPR.Ca a cPr eu perfformio fel y disgrifiwyd yn flaenorol (24,25) gyda mân addasiadau (Ffig. 1). Yn gryno, anestheteiddiwyd y llygod mawr ag isoflurane 2-3 y cant a'u hawyru'n fecanyddol i gynnal resbiradaeth gan ddefnyddio peiriant anadlu cnofilod (cyfarpar Harvard). Er mwyn monitro dirlawnder ocsigen ymylol (Spo2), roedd stiliwr dirlawnder ocsigen ocsimetreg pwls (Nonin Medical, inc.) ynghlwm wrth y droed chwith. Cadwyd tymheredd y corff ar 37±0.5˚C yn ystod ac ar ôl llawdriniaeth ca. Er mwyn monitro newidiadau electrocardiogram (ecG), gosodwyd stilwyr electrocardiograffeg (cytiva) ar yr aelodau i ddarparu data tri phlwm, a gafodd eu monitro'n barhaus. Cafodd y rhydweli femoral chwith a'r wythïen femoral dde eu tunio ar wahân i fonitro'r pwysedd rhydwelïol cymedrig (MaP) (MLT 1050/d; AInstruments, ltd.) a chwistrelliad mewnwythiennol.
Yn dilyn cyfnod sefydlogi 5-munud, gweinyddwyd vecuronium bromid (2 mg / kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) yn fewnwythiennol, stopiwyd anesthesia a thynnwyd awyru mecanyddol yn ôl. defnyddiwyd MaP o dan 25 mm-Hg a gweithgaredd trydan di-bwls dilynol i ddiffinio CA (25,26). Cadarnhawyd CA am 3-4 munud yn dilyn pigiad bromid vecuronium. am 5 munud yn dilyn ca, cychwynnwyd cPr trwy roi chwistrelliad bolws o epineffrîn yn fewnwythiennol (0.005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) a sodiwm bicarbonad (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) ac yna awyru mecanyddol gyda ocsigen 100 y cant a chywasgiadau brest â llaw ar gyfradd o 300/min nes i MaP gyrraedd 60 mm-Hg a gwelwyd gweithgaredd electrocardiograffig. . unwaith yr oedd yr anifail yn sefydlog yn hemodynamig ac yn anadlu'n ddigymell (fel arfer am 1 awr ar ôl RoSc), tynnwyd y cathetrau a chafodd yr anifail ei ddileu.
Rheoli tymheredd ymhlith y grwpiau.Roedd tymheredd corff y grŵp normothermia yn cael ei gynnal ar 37±0.5˚C yn ystod ac ar ôl y llawdriniaeth CA a'i gynnal nes bod y llygod mawr yn cael eu haberthu yn unol â'r amserlen. yn y grŵp hypothermia, sefydlwyd ca ar dymheredd arferol; yna, cynhaliwyd tymheredd y corff gyda phecynnau iâ a gwyntyllau ar 33±0.5˚C yn syth ar ôl CPR am 2, 4, a 6 h, a chawsant eu hailgynhesu'n gyflym gyda'r pad gwresogi tan y tymheredd a ddymunir ( Cyflawnwyd 37±0.5˚C). Yna dychwelwyd y llygod mawr i'w cewyll nes iddynt gael eu haberthu un diwrnod ar ôl CPR/roSc. Cafodd tymheredd y corff ei fonitro gan ddefnyddio synhwyrydd tymheredd rhefrol (27).
Dadansoddiad biocemegol serwm.Defnyddiwyd chwistrelliad mewnperitoneol o 30 mg/kg sodiwm pentobarbital (JW Pharm co., ltd.) i anestheteiddio pob anifail. Casglwyd gwaed o wythiennau abdomenol pob anifail ym mhob grŵp. Casglwyd serwm trwy allgyrchiad gwaed (2,774 xg, 15 munud, 4˚C) a'i gadw ar -80˚C tan ddadansoddiad. Pennwyd lefelau nitrogen wrea gwaed (Bun) a creatinin yn y serwm yn unol â dulliau a amlinellwyd gan Ffederasiwn Rhyngwladol cemeg glinigol (28) gan ddefnyddio dadansoddwr cemegol awtomataidd Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). cynhaliwyd yr holl brofion yn driphlyg gan ddefnyddio'r serwm ffres.
Prosesu meinwe.Anestheteiddiwyd y llygod mawr yn ddwfn gan chwistrelliad mewnperitoneol o 200 mg/kg sodiwm pentobarbital (JW Pharm co., Ltd.), a chawsant eu darlifo'n drawscardiaidd â 0.1 M o halwynog wedi'i glustogi ffosffad (PBS; pH 7.4), wedi'i ddilyn gan baraformaldehyd 4 y cant mewn 0.1 M o glustogfa ffosffad (PB; pH 7.4). Roedd yr arennau'n cael eu hynysu oddi wrth bob anifail a'u gosod gyda 4 y cant o baraformaldehyd mewn 0.1 M PB (pH 7.4) ar dymheredd ystafell yn ystod yr wythnos 1, yna'n cael eu sleisio'n sagittally, eu mewnosod mewn paraffin, a'u torri (6 µm).
Hematocsilin ac eosin (H&E), Asid-Schiff Cyfnodol (PAS), a staen trichrome Masson.Perfformiwyd staenio H&e i archwilio newidiadau patholegol yn yr arennau yn unol â gweithdrefn a ddisgrifiwyd yn flaenorol (29). Perfformiwyd staenio PaS i archwilio newidiadau mewn glomeruli yn unol â gweithdrefnau a ddisgrifiwyd yn flaenorol (30-32). Defnyddiwyd dull staenio trichrome Masson ar gyfer diffinio anaf tiwbaidd, gan ystyried ymlediad tiwbaidd, atroffi tiwbaidd, ffurfio cast tiwbaidd, gwagio, dirywiad, ffibrosis interstitial, a sloughing celloedd epithelial tiwbaidd, neu dewychu pilen islawr tiwbaidd yn unol â gweithdrefnau a ddisgrifiwyd eisoes (33). ,34).
gwerthusodd cyfanswm o 2 batholegydd profiadol newidiadau histopatholegol mewn modd dwbl-ddall. cipiwyd delweddau o 10 darn/llygoden fawr wedi'u staenio ar chwyddhadau x400 gan ddefnyddio microsgop golau Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). Dadansoddwyd cyfanswm o 10 maes ym mhob adran. Perfformiwyd dadansoddiad histopatholegol o friwiau arennol yn unol â gweithdrefnau a ddisgrifiwyd yn flaenorol (35,36). Yn gryno, cafodd briwiau eu categoreiddio fel dim briwiau microsgopig arwyddocaol (nSMl), briwiau lleiaf, ysgafn, cymedrol, neu farcio, yn y drefn honno, wedi'u graddio gan ddefnyddio'r raddfa ganlynol gyda'r prawf dall: normal, 0 pwynt;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Diffiniwyd briwiau glomerwlaidd gan golli elfennau cellog, cwymp y lwmen capilari, deunydd hyalin amorffaidd gyda neu heb adlyniadau i gapsiwl Bowman (30-32) a'u sgorio gan y graddfeydd rhifol canlynol: dim difrod, { {7}} pwynt; ysgafn iawn, 1 pwynt; ysgafn, 2 bwynt; cymedrol, 3 phwynt; a difrifol, 4 pwynt. Sgoriwyd yr anaf tiwbaidd gan y system sgorio ganlynol: dim anaf tiwbaidd, 0 pwynt; 1-9 y cant o'r tiwbiau wedi'u hanafu, 1 pwynt; 10-25 y cant o'r tiwbiau wedi'u hanafu, 2 bwynt; 26-50 y cant o'r tiwbiau wedi'u hanafu, 3 phwynt; 51-75 y cant o'r tiwbiau wedi'u hanafu, 4 pwynt; ac o leiaf 76 y cant o tiwbiau eu hanafu, 5 pwynt (33,34).
Malondialdehyde (MDA).Gwerthuswyd crynodiad mda yn y cortecs arennol yn unol â phrotocol a ddisgrifiwyd yn flaenorol (23,37,38). yn fyr, perfformiwyd homogeneiddio a centrifugio'r meinweoedd arennol ar 8,832 xg am 10 munud ar 4˚C, a chasglwyd yr uwchnatant a'i storio ar -80˚C ar gyfer dadansoddiad MDA. Penderfynwyd ar gynnwys MDA yn unol â chyfarwyddiadau pecyn assay TBarS (cat. rhif. 10009055; cwmni cemegol cayman).
Imiwnohistocemeg (IHC) ar gyfer ensymau gwrthocsidiol. Perfformiwyd iHc gyda Sod-1, Sod-2, caT, a GPX i astudio newidiadau mewn imiwn-adweithedd gwrthocsidiol yn yr aren. iHc yn cael ei gyflawni yn ol ein dull a ddisgrifiwyd yn flaenorol (22). Yn gryno, cafodd yr adrannau (6 µm) eu deor â phrif gafr gwrth-Sod1 (1:500; rhif cathod. SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), gafr gwrth-Sod2 (1:1 ,000; cath. rhif. SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), cwningen gwrth-caT (1:1,000; cath. rhif. ab16731; Abcam) a chwningen gwrth-GPX ( 1:1,000; cath. rhif ab22604; Abcam) dros nos ar 4˚C, ac yna'r gwrth-gwningen wedi'i chyfuno â biotinylated (1:250; cath. rhif. Ba-1000-1.5; Labordai fector , gan gynnwys) a'r gwrth-gafr gwrth-gyfunedig biotinylated-conjugated (1:250; cath. rhif. Ba-5000-1.5; Vector Laboratories, Inc.) gwrthgyrff eilaidd am 2 h ar 24˚C a ddatblygwyd gan ddefnyddio Vectastain aBc (labordai Vector , gan gynnwys). Yna, cawsant eu delweddu gyda datrysiad 3,3'-diaminobenzidine (mewn byffer Tris-HCl 0.1 M).
Defnyddiwyd microsgop Leica dM 2500 i ddelweddu'r adrannau gyda chwyddhad o x400. Dewiswyd cyfanswm o 10 adran/llygod mawr a chipiwyd 10 maes. Defnyddiwyd meddalwedd dadansoddi trothwy delwedd fersiwn 1.52a (Sefydliad Iechyd Cenedlaethol) i fesur y cant ( y cant ) o ddwysedd optegol cymharol ( gwialen ).
Dadansoddiad ystadegol.Ailadroddwyd pob arbrawf yn driphlyg. Defnyddiwyd Graph Pad Prism fersiwn 5.0 (GraphPad Software, inc.) i ddadansoddi'r data, a fynegwyd fel y modd ± gwall safonol y gwerthoedd cymedrig (SeM). Dadansoddwyd goroesi gan ddefnyddio ystadegau Kaplan-Meier a'r prawf rheng log. Cymharwyd MaP ac ocsigen ymylol gan ddefnyddio mesurau un-a dwy ffordd dro ar ôl tro o ddadansoddi amrywiant i asesu effaith amser. Er mwyn pennu arwyddocâd gwahaniaethau, cynhaliwyd dadansoddiadau post hoc gan ddefnyddio prawf Tukey ar gyfer pob cymariaethau lluosog pâr. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Canlyniadau
Newidiadau ffisiolegol, y gyfradd goroesi, a newidynnau biocemegol serwm. Nid oedd unrhyw wahaniaeth ystadegol arwyddocaol ymhlith y grwpiau o ran nodweddion gwaelodlin, gan gynnwys pwysau'r corff, MaP, a Spo2 (Tabl i a Ffig. 2). Digwyddodd anwythiad ca 3-4 munud yn dilyn chwistrelliad mewnwythiennol o vecuronium bromid (2 mg/kg). Cadarnhawyd CA gydag ecG isoelectric, Spo2, a MaP, a newidiodd y rhain yn ôl y disgwyl yn ôl y protocol arbrofol (Ffig. 2a-c). fel y datgelwyd yn Ffig. 2d, roedd tymheredd y corff yn wahanol ymhlith yr holl grwpiau yn dilyn RoSc, fel y datgelwyd yn Ffig. 3, gwerthuswyd cyfradd goroesi pob grŵp undydd ar ôl ca. Cyfradd Grŵp ii oedd 42.9 y cant.
Yng ngrŵp iii, y gyfradd yn dilyn 2 h-HT oedd 42.9 y cant, y gyfradd yn dilyn 4 h-HT oedd 57.1 y cant a'r gyfradd yn dilyn 6 h-HT oedd 71.4 y cant. yn yr arbrawf hwn, nid oedd unrhyw wahaniaeth rhwng y llygod mawr yng Ngrŵp ii a'r llygod mawr â 2 h-HT yng Ngrŵp iii.
fel y dangosir yn Ffig. 4B, lefel y Bun serwm yng Ngrŵp i oedd 13.8 mg/dl un diwrnod ar ôl ca. yng ngrŵp ii, cynyddwyd lefel y Bun yn sylweddol i 35.3 mg/dl. yng Ngrŵp iii, lefel y Bun oedd 3{{10}}.7 mg/dl yn dilyn 2 h-HT, 25.0 mg/dl yn dilyn 4 h-HT, a 22.7 mg/ dl yn dilyn 6 h-HT. yn ogystal, fel y datgelwyd yn Ffig. 4c, lefel creatinin serwm Grŵp I oedd {{20}}.23 mg/dl. yng ngrŵp ii, cynyddwyd y lefel creatinin yn sylweddol i 0.43 mg/dl. yng ngrŵp iii, roedd y lefelau creatinin yn is na'r hyn a welwyd yn Grŵp ii fel a ganlyn: 0.39 mg / dl yn dilyn 2 h-HT, 0.37 mg / dl yn dilyn 4 h-HT, a 0.36 mg / dl yn dilyn 6 h-HT.
Canfyddiadau histopatholegol. yng Ngrŵp I (ffug), datgelwyd strwythurau histolegol cyfan gan H&e, PaS, a staen trichrome Masson (Ffig. 5A). Ni chanfuwyd y ffibrosis rhyngosodol ym mhob grŵp, yn y cyfamser, yng Ngrŵp ii, archwiliwyd histopatholeg arennol ca-anwythol ar un diwrnod yn dilyn RoSc gan ddefnyddio H&e, PaS, a staen trichrome Masson. Cynyddwyd anaf difrifol i'r arennau a achoswyd gan CA yn sylweddol yn y tiwbiau a'r glomerwli procsimol; yn arbennig, roedd ffiniau brwsh y celloedd epithelial tiwbaidd arennol wedi'u herydu'n ddifrifol (Ffig. 5a a B). yn ogystal, yn y grŵp hwn, roedd capilarïau glomerwlaidd wedi'u hamledu â chelloedd ymfflamychol, ac roedd oedema interstitial a necrosis tiwbaidd arennol acíwt yn ddifrifol o gymharu â'r rhai a welwyd yn Grŵp I (Ffig. 5a).
yng Ngrŵp iii, cafodd anaf i'r arennau ei wanhau un diwrnod ar ôl RoSc (Ffig. 5a a B). yn benodol, bu gostyngiad sylweddol mewn anaf a achosir gan ca yn y tiwbiau procsimol yn dilyn 6 h-HT o gymharu â'r hyn a welwyd yn Grŵp ii. yn ogystal, lleihawyd ehangiad lleol y tiwbiau procsimol o'i gymharu â'r hyn a ddatgelwyd yn Grŵp ii (Ffig. 5A). Ar gyfer y glomeruli, gwnaeth 6 h-HT wanhau anaf glomerwlaidd yn sylweddol o'i gymharu â'r hyn a ddatgelwyd yn Grŵp ii (Ffig. 5a a B).
Lefel MDA. fel y datgelwyd yn Ffig. 4a, cynyddwyd lefel Mda yn y cortecs arennol yn sylweddol ar un diwrnod yn dilyn ca yng Ngrŵp ii o'i gymharu â Grŵp i. Fodd bynnag, yng Ngrŵp III, gostyngwyd lefel MDA yn sylweddol ar ôl 4 h- a 6 h-HT. bu gostyngiad hefyd yn y 2 h-HT, ond nid oedd unrhyw wahaniaeth ystadegol arwyddocaol o'i gymharu â Grŵp ii.
Canfyddiadau imiwn-adweithedd ensymau gwrthocsidiol.
Yng Ngrŵp I, gwerthuswyd imiwneiddiadau arferol Sod-1, Sod-2, GPX, a catT, gan ddatgelu eu bod wedi'u lleoli'n bennaf yn y tiwbiau (Ffig. 6a). yng Ngrŵp ii, Sod-1, Sod-2, GPX a CAT, gostyngwyd yn sylweddol yr imiwneddweithredoedd un diwrnod yn dilyn RoSc o gymharu â'r rhai a ddatgelwyd yn Grŵp i (Ffig. 6a a B).
yng Ngrŵp iii, Sod-1, Sod-2, GPX, ac nid oedd imiwn-actifeddau catT yn dilyn 2 h-HT yn sylweddol wahanol i'r rhai a welwyd yn Grŵp ii (Ffig. 6a a B). yn achos 4 h-HT, roedd y pedwar imiwn-adweithedd yn sylweddol uwch na'r rhai a ddatgelwyd yng Ngrŵp ii (Ffig. 6a a B), gan ddangos, yn benodol, bod imiwn-adweithedd GPX yn sylweddol uwch o'i gymharu â'r imiwn-adweithedd eraill. yn achos 6 h-HT, roedd yr holl imiwn-adweithedd yn uwch na'r rhai a nodwyd yn y llygod mawr a gafodd 4 h-HT, gan ddatgelu bod gwialen pob imiwn-adweithedd Sod-1, Sod-2, GPX, a catT yn 78.4, 67.4, 86.5 a 79.5 y cant , yn y drefn honno, o gymharu â Grŵp i (Ffig. 6a a B).
herba epimedium sagittatum
Trafodaeth
Mewn astudiaethau anifeiliaid, y galon a'r ymennydd yw'r organau yr effeithir arnynt fwyaf yn dilyn anaf isgemia/atlifiad (i/r) ar ôl ca (39,40). serch hynny, mae rhai astudiaethau wedi nodi bod anaf acíwt i'r arennau yn cael effaith ar adferiad niwrolegol (41,42). Felly, mae'n bwysig ymchwilio i anaf acíwt i'r arennau yn dilyn ca a cPr . yn yr astudiaeth bresennol, defnyddiwyd llygod mawr Sd gwrywaidd sy'n oedolion ar gyfer ca asphyxial trwy chwistrellu bromid vecuronium. Cadarnhawyd CA 3-4 munud ar ôl sefydlu asffycsia a pherfformiwyd cPr 5 munud ar ôl ca. Newidiwyd MaP, ecG, a Spo2 yn ôl y disgwyl yn ystod ca ac yn dilyn roSc. yn ein hastudiaeth bresennol, roedd y gyfradd oroesi yng Ngrŵp iii yn 42.9 y cant un diwrnod yn dilyn roSc mewn llygod mawr a oedd yn agored i 2 h-HT, 57.1 y cant mewn llygod mawr a gafodd eu trin â 4 h-HT, a 71.4 y cant mewn llygod mawr a oedd yn destun 6 h-HT. dywedodd che et al (26) fod y gyfradd oroesi yn 40 y cant ddau ddiwrnod yn dilyn RoSc mewn model llygod mawr o asphyxial ca. yn ogystal, adroddodd Wang et al (43) mewn llygod mawr, bod y cyfuniad o hypothermia a levosimendan (sensitizer calsiwm ac agorwr sianel potasiwm) yn dilyn RoSc wedi cynyddu cyfraddau goroesi yn sylweddol. Yn seiliedig ar y canfyddiadau hyn, gall HT mewn llygod mawr â cha gynyddu'r gyfradd goroesi ychydig ddyddiau ar ôl RoSc. Fodd bynnag, mewn bodau dynol, prin y bydd HT ar ôl ca yn cynyddu'r gyfradd goroesi yn dilyn RoSc (44).
adroddwyd camweithrediad arennol mewn 12-28 y cant o gleifion â ca yn dilyn dadebru llwyddiannus (13). yn ogystal, datblygodd anaf acíwt i'r arennau mewn 43 y cant o gleifion wedi'u dadebru ar ôl ca, a digwyddodd mwy na 75 y cant o'r penodau hyn o fewn tri diwrnod yn dilyn ca (45). mewn modelau anifeiliaid, cafodd anaf acíwt i'r arennau a achoswyd gan i/R (hy, ROSC yn dilyn CA) ei wanhau'n sylweddol gan HT (43,46,47). Er enghraifft, nododd Tissier et al (47) wanhad sylweddol o friwiau arennau gan HT mewn model cwningen o ca, yn seiliedig ar histopatholeg a microsgopeg electron, o gymharu â'r grŵp rheoli. yn ein hastudiaeth bresennol, mae'n debyg bod sgoriau briw glomerwlaidd a thiwbaidd histopatholegol yr arennau yng Ngrŵp ii wedi'u gwella un diwrnod ar ôl RoSc. yn y grŵp hwn, cynyddwyd lefelau serwm Bun a creatinin yn sylweddol yn dilyn ROSC o gymharu â'r grŵp ffug (Grŵp i). Roedd y canlyniadau hyn yn debyg i ganlyniadau astudiaethau blaenorol yn ymwneud â modelau ca cŵn, cwningod a moch bach (47-49). Felly, cynyddwyd anaf i'r arennau'n ddifrifol yn y cyfnod cynnar yn dilyn ca mewn anifeiliaid arbrofol. yn ein hastudiaeth bresennol, gostyngwyd briwiau glomerwlaidd a thiwbaidd arennol a sgorau histopatholegol Grŵp iii yn sylweddol yn dilyn 4 h- a 6 h-HT un diwrnod yn dilyn RoSc o gymharu â Grŵp ii. Adroddodd Ribeiro et al (46) a Souza et al (50) fod HT yn effeithiol mewn modelau anifeiliaid o anaf i/r arennol. Penderfynodd Islam et al (23) a Jawad et al (22) fod HT yn lleihau difrifoldeb yr anaf i'r arennau ac yn cynyddu'r gyfradd goroesi mewn model asphyxial ca. Awgrymodd y canfyddiadau fod gan HT effaith amddiffynnol arennol sylweddol, a oedd yn gysylltiedig â chyfradd goroesi uwch.
Mae ensymau gwrthocsidiol mewndarddol yn bennaf yn cynnwys Sods, CAT, a GPX. Mae'r ensymau hyn yn darparu llinell amddiffyn gyntaf yn erbyn o2•‑ ac OH•. Mae SOD-1 a SOD-2 yn darparu amddiffyniad yn erbyn straen ocsideiddiol trwy gataleiddio dadrithiad o2•‑ i o2 a H2o2 (51). mae straen ocsideiddiol yn ffactor hanfodol mewn anaf i organau a chamweithrediad hemodynamig yn ystod PcaS a chynhyrchu RoS yn ystod anaf i/r. Mae gweithgaredd ensymau gwrthocsidiol yn cael ei newid gan anaf i/r yn dilyn ca (21). datgelodd ein hastudiaeth fod lefelau Sod-1, Sod-2, GPX, a caT wedi gostwng yn dilyn RoSc yng Ngrŵp ii o gymharu â Grŵp i. Mae lefelau'r ensymau gwrthocsidiol hyn yn cael eu lleihau yn dilyn i / r, sy'n achosi difrod celloedd a marwolaeth oherwydd bwyta gwrthocsidyddion mewndarddol o ganlyniad i ryddhau roS (52).
Adroddodd Xia et al (53) fod mwy o weithgarwch gwrthocsidiol ym meinweoedd arennau llygod sy'n agored i HT mewn anaf i/r arennol. Gwelodd Hackenhaar et al (21) gynnydd sylweddol yng ngweithgaredd Sod-1, Sod-2, GPX, a caT ar ôl 6, 12, 36, a 72-h HT mewn bodau dynol yn dilyn roSc. mewn astudiaethau blaenorol gan ddefnyddio model llygod mawr o asphyxial ca, adroddodd Islam et al (23) fod HT yn dilyn ca yn lleihau straen ocsideiddiol yn yr aren, a dywedodd Jawad et al (22) fod HT yn dilyn ca yn amddiffyn yr aren rhag anaf a achosir gan ca, gan ddangos bod nrf2/Ho‑1 wedi cynyddu yn yr aren. yn ein hastudiaeth bresennol, cynyddwyd imiwn-adweithedd Sod-1, Sod-2, GPX, a catT yn sylweddol yn dilyn 4 h-HT a 6 h-HT yn Grŵp iii o'u cymharu â Grŵp ii, sy'n awgrymu bod ensymau gwrthocsidiol wedi'u hactifadu gan HT a lleihau y straen ocsideiddiol.
Yn seiliedig ar ganlyniadau goroesi, histopatholeg, biocemegol ac imiwn-histocemegol yr astudiaeth hon, penderfynwyd bod camweithrediad arennol yn gyffredin ac yn gysylltiedig â marwolaethau yng nghamau cynnar PcaS yn dilyn RoSc, yn ein model llygod mawr o asphyxial ca. Fodd bynnag, gostyngodd 4 h- neu 6 h-HT yn dilyn ROSC anaf arennol yn sylweddol, gan awgrymu bod HT yn cymell actifadu ensymau gwrthocsidiol, megis Sod-1, Sod-2, GPX, a caT, gan arwain at lai o straen ocsideiddiol yn yr arennau. o ganlyniad, rhagdybiwyd bod HT yn lleihau anaf arennol trwy fecanwaith gwrthocsidiol ac yn cynyddu'r gyfradd goroesi cynnar. Fodd bynnag, mae angen dadansoddiad o blotiau gorllewinol i egluro mecanwaith anaf arennol a HT mewn ca yn dilyn RoSc. Mae hyn yn gyfyngiad posibl ar yr astudiaeth bresennol ac yn tanlinellu'r angen am astudiaethau pellach.
myricetin
1 adran Meddygaeth Frys, sefydliad ymchwil Meddygaeth Glinigol o brifysgol genedlaethol Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2coleg y sefydliad ymchwil Meddygaeth Filfeddygol a Bioddiogelwch, prifysgol genedlaethol Jeonbuk, san, Jeollabuk-do 54596;
3adran Gwyddor Biofeddygol a sefydliad ymchwil Biowyddoniaeth a Biotechnoleg, Prifysgol Hallym, chuncheon, Gangwon-do 24252;
4adran Llawfeddygaeth, Ysbyty prifysgol cenedlaethol Kangwon,
Ysgol Feddygaeth, prifysgol genedlaethol Kangwon, chuncheon, Gangwon-do 24289; 5adran Niwrobioleg, Ysgol Feddygaeth, prifysgol genedlaethol Kangwon, chuncheon, Gangwon-do 24341, gweriniaeth Corea
Diolchiadau
amherthnasol.
Ariannu
Cefnogwyd yr astudiaeth bresennol gan y Rhaglen Ymchwil Gwyddoniaeth Sylfaenol trwy Sefydliad ymchwil cenedlaethol Corea a ariennir gan y Weinyddiaeth addysg (rhifau grant nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696, a nrF-2021r1F1a1059992).
Argaeledd data a deunyddiau
Mae'r setiau data a ddefnyddiwyd a/neu a ddadansoddwyd yn ystod yr astudiaeth gyfredol ar gael gan yr awdur cyfatebol ar gais rhesymol.
Cyfraniadau awduron
Roedd SeK, HYS, MHW, a HJT yn gyfrifol am ddylunio arbrofol, caffael data, dadansoddi data, ac ysgrifennu llawysgrifau. Perfformiodd eYl, YJY, rHK, JHc, a TKl yr arbrofion a dadansoddi data. Perfformiodd dca, BYP, JcY, SKH, ac iSK y dadansoddiad data a gwneud sylwadau beirniadol ar holl broses yr astudiaeth. mae pob awdur wedi darllen a chymeradwyo'r llawysgrif derfynol. Mae HYS a HJT yn cadarnhau dilysrwydd yr holl ddata crai.
Cymeradwyaeth foesegol a chaniatâd i gymryd rhan
cymeradwywyd pob protocol arbrofol yn seiliedig ar weithdrefnau moesegol a gofal gwyddonol gan Bwyllgor Gofal a Defnydd Anifeiliaid Sefydliadol prifysgol genedlaethol Jeonbuk (rhif cymeradwyaeth JBnu 2020-084; Jeonju, De Korea).
Caniatâd y claf i gyhoeddi
amherthnasol.
Diddordebau cystadleuol
Mae'r awduron yn datgan nad oes ganddynt unrhyw fuddiannau cystadleuol.
Cyfeiriadau
1. Girotra S, chan PS, a Bradley SM: Gofal ar ôl dadebru yn dilyn ataliad ar y galon y tu allan i'r ysbyty ac yn yr ysbyty. Calon 101: 1943-1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS, a Cha KC: Mae cyfwng diffibrilio byrrach yn hyrwyddo canlyniadau diffibrilio a dadebru llwyddiannus. dadebru 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a a Papadimitriou l: albwmin wedi'i addasu gan isgemia yn rhagweld canlyniad adfywio cardio-pwlmonaidd: astudiaeth arbrofol. dadebru 81:591-595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se, ac Angelos MG: gofyniad ocsigen yn ystod adfywio cardio-pwlmonaidd (cPr) i effeithio ar ddychwelyd cylchrediad digymell. dadebru 80:951-955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a a carrillo Á; iberoamerican Ataliad y galon pediatrig Rhwydwaith astudio riBePci: Ar ôl dychwelyd ffactorau cylchrediad digymell sy'n gysylltiedig â marwolaethau mewn ataliad cardiaidd pediatrig yn yr ysbyty: astudiaeth arsylwadol aml-ganolfan arfaethedig. gofal crit 18:607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, dod yn S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F a cariou a: Syndrom ataliad y galon: O ddadebru ar unwaith i ganlyniad hirdymor. ann gofal dwys 1:45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan YH, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et al: Syndrom ataliad ar y galon wedi'r galon: epidemioleg, pathoffisioleg, triniaeth a phrognostigiaeth. datganiad consensws gan y pwyllgor cyswllt rhyngwladol ar ddadebru (Cymdeithas y Galon America, cyngor dadebru Awstralia a Seland Newydd, cyngor dadebru Ewropeaidd, Sefydliad y Galon a Strôc Canada, Sefydliad y Galon Interamericanaidd, cyngor dadebru Asia, a Chyngor dadebru De Affrica ); pwyllgor gofal cardiofasgwlaidd brys cymdeithas y galon America; y cyngor ar lawdriniaeth gardiofasgwlaidd ac anesthesia; y cyngor ar ofal cardio-pwlmonaidd, amlawdriniaethol a chritigol; y cyngor ar gardioleg glinigol; a'r Cyngor Strôc. cylchrediad 118: 2452-2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et al: Syndrom ataliad y galon ar ôl y galon: epidemioleg, pathoffisioleg, triniaeth, a prognostigiaeth. Datganiad Gwyddonol gan y Pwyllgor Cyswllt Rhyngwladol ar ddadebru; pwyllgor gofal cardiofasgwlaidd brys cymdeithas y galon America; y cyngor ar lawdriniaeth gardiofasgwlaidd ac anesthesia; y cyngor ar ofal cardio-pwlmonaidd, amlawdriniaethol a chritigol; y cyngor ar gardioleg glinigol; y cyngor ar Strôc. dadebru 79: 350-79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, newid Md a dezfulian c: Camweithrediad myocardaidd a sioc ar ôl ataliad y galon. Mae BioMed yn cynnwys 2015: 314796, 2015.
10. Madl c a Holzer M: Gweithrediad yr ymennydd ar ôl dadebru o ataliad ar y galon. gofal crit curropin 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je, a Trzeciak S: Camweithrediad organau lluosog ar ôl dychwelyd cylchrediad digymell mewn syndrom ataliad cardiaidd post. gofal crit Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, collwyr H, lagger an a Müllner M: Effaith hypothermia therapiwtig ysgafn ar swyddogaeth arennol ar ôl adfywio cardio-pwlmonaidd mewn dynion. dadebru 60:253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW a Rittenberg Jc; Gwasanaeth ar ôl ataliad y galon: mae camweithrediad arennol yn gyffredin yn dilyn dadebru o ataliad ar y galon y tu allan i'r ysbyty. dadebru 84:1371-1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: newidiadau mewn histopatholeg a lefelau ffactor necrosis tiwmor- yng nghalonnau llygod mawr yn dilyn ataliad cardiaidd asffyxial. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, et al; Dechrau a diwedd Ymchwilwyr Therapi Cefnogol ar gyfer yr Arennau (BEST Arennau): methiant arennol acíwt mewn cleifion difrifol wael: astudiaeth amlwladol, amlganolfan. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J a Singhal Pc: Nifer yr achosion a phenderfynyddion methiant arennol acíwt yn dilyn adfywio cardio-pwlmonaidd. intern bwa Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a a Blaidd G: rhywogaethau ocsigen adweithiol a achosir gan angiotensin ii a'r aren. J am Soc Nephrol 18:2439-2446, 2007.
18. Baud l ac ardaillou r: rhywogaethau ocsigen adweithiol: Cynhyrchu a rôl yn yr aren. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r , Fernández-Gajardo r , Gutiérrez r , Matamala JM, carrasco r , Miranda-Merchak a a Feuerhake W: straen ocsideiddiol a phathoffisioleg strôc isgemig: cyfleoedd therapiwtig newydd. Targedau Cyffuriau Anhwylder Niwrol CNS 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n a Moin S: difrod DNA uwch, straen ocsideiddiol, a system amddiffyn ymateb nam a achoswyd mewn cleifion â chwythiad myocardaidd. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.
