Effeithiau Detholiad Cistanche Deserticola Ar Ymateb Pidyn Erectile mewn Llygod Mawr Ysbaddu

Crynodeb:Cistanche deserticola(CD) wedi'i ystyried fel asiant tonig ar swyddogaeth atgenhedlu ers miloedd o flynyddoedd. Effeithiau dyfyniad CD arerectile pidynymchwiliwyd i'r ymateb yn yr astudiaeth bresennol. Ar ôl llawdriniaeth ysbaddu, roedd llygod mawr yn cael eu trin yn fewngastrig gyda detholiad CD ({{{0}}.45, 0.90 ac 1.8 g/kg) bob dydd am bedair wythnos.Codiad pidynmesurwyd yr ymateb a chafodd yr hormonau serwm eu profi ar ddiwedd yr arbrawf. Gwerthuswyd bod yerectilelatencydaeth yn hwy ac yhyd erectileyn sylweddol fyrrach mewn llygod mawr wedi'u sbaddu o gymharu â rheolaethau ffug. Fodd bynnag, roedd detholiad CD yn byrhau'rlatency erectileac ymestyn hyd y erectile i leihau effeithiau negyddol sbaddu. Ar y dos o 0.9g/kg, roedd detholiad CD yn rheoleiddio dull crynodiad hormon luteinizing serwm i lefel arferol mewn llygod mawr wedi'u sbaddu. Roedd y canfyddiadau hyn yn dangos bod CD wedi hwyluso ymateb codiad y pidyn ac wedi modiwleiddio lefel hormonau serwm i ryw raddau.

Geiriau allweddol:Cistanche deserticola; ymateb erectile; ysbaddu; hormon

I gael rhagor o fanylion am cistanche gwella gweithrediad rhywiol

RHAGARWEINIAD

CistancheHoffmg. Mae Et Link, un o genynnau'r teulu Orobanchaceae, wedi'i ddosbarthu'n bennaf yn yr aridlands a'r anialwch yn hemisffer y gogledd, fel Inner Mongolia,Xinjiang, Rhanbarthau ymreolaethol Ningxia ofChina, ac Iran, India, Mongolia, ac ati Mae'r rhywogaethau Cistanches yn perthyn i'r perlysiau parasit lluosflwydd, sy'n aml yn glynu at wreiddiau planhigion gosod tywod fel Haloxylox ammodendron, H. persicum, Kalidium foliatum a phlanhigion Tamarix, ac ati (Jiang a Tu 2009).Mae Herba Cistanche, coesyn rhywogaeth Cistanche, wedi'i hystyried yn donig uwchraddol ac wedi ennill yr anrhydedd o "Ginseng yr anialwch". Ymhlith rhywogaethau Cistanche, mae Cistanche deserticola YC MA wedi'i nodi fel prif ddeunydd ffynhonnell Cistanche (Stefanova et al.2011). Fodd bynnag, oherwydd gor-gynaeafu yn y blynyddoedd diwethaf, mae adnoddau naturiol y gwyllt C. deserticola (CD) yn ddiffygiol sydd wedi'i gasglu fel un o'r planhigion Dosbarth II sydd angen eu hamddiffyn yn Tsieina, felly mae rhywogaethau eraill o'r genws hwn, megis C. salsa a C. sinensis, hefyd yn cael eu defnyddio fel amnewidion mewn rhai ardaloedd. O'r cofnod cyntaf yn ShenNong's Chinese Material Medica (compendium ancientpharmacological), credir bod CD yn cryfhau'r aren ac yn bywiogi'r "Yang" mewn ymarfer clinigol o dan theori meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol, yr honnir ei bod yn effeithiol ar gyfer atgenhedlu, datblygiad a swyddogaeth ffrwythlondeb. Yn y cyfamser, mae CD hefyd wedi'i ferwi â chig dafad, tatws neu reis i gynhyrchu bwyd tonic i drin nam a achosir gan or-straen am gannoedd o flynyddoedd, sy'n awgrymu ei fod yn ddiogel i'w gymryd ar lafar (Xiong et al.2013). Fodd bynnag, mae'r defnyddiau anecdotaidd hyn yn bodoli'n bennaf yn incunabula Tsieineaidd, gyda gwybodaeth wyddonol gyfyngedig yn cael ei thrafod o ran cysyniadau ffarmacolegol modern. Mae camweithrediad erectile (ED) yn gyflwr a nodweddir gan naill ai codi'r pidyn yn annigonol neu godiad nad yw'n para'n ddigon hir mewn oedolion gwrywaidd (Cohan andKorenman 2000). ). Mewn ymateb i gyfryngau modern, soffistigedig, cemegol, bu diddordeb o'r newydd mewn chwilio am feddyginiaeth effeithiol a diogel o blanhigion i drin ED (Adimoelja 2000). Nododd astudiaeth flaenorol (Liuet al. 2009) fod CD electuary yn cyflymu codiad pidyn mewn llygod mawr arferol, fodd bynnag, nid oedd unrhyw ddata yn ymwneud ag effaith CD ar gamweithrediad codiad. am ymchwilio i ED (Tombal 2005). Felly, ymgymerwyd â'r astudiaeth bresennol i werthuso effeithiau posibl CD yn erbyn ED trwy ymchwilio i'r cuddni codiad a'r parhad mewn llygod mawr wedi'u sbaddu.

DEUNYDDIAU A DULLIAU

 Chemicals and materials Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >Prynwyd 98 y cant gan y Sefydliadau Cenedlaethol ar gyfer Rheoli Bwyd a Chyffuriau (Beijing, Tsieina). Prynwyd methanol gradd HPLC gan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, UDA). Cynhyrchwyd dŵr wedi'i buro gan ddefnyddio System 3 Integral MilliporeMilli-Q a System Milli-Q Q-POD (Bedford, MA, UDA). Prynwyd coesynnau C. deserticola o Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (GuangDong, China) a'u malu'n bowdr mân gyda apulverizer a basiwyd trwy ddadansoddiad gogor 60mesh a pharatoi deunydd planhigionPennwydEchinacoside ac acteoside cynnwys powdr CD yn dilyn ein dull blaenorol (Zhao et al.2011). Yna, berwi pob 100 g o bowdr sych mewn 1.5 L dŵr am 1.5 h. Gan oeri ar dymheredd ystafell, cafodd gwirod cymysg ei allgyrchu ar 2000 rpm am 10 munud (Eppendorf 5810R, yr Almaen) a chafodd y gwaddod ei ail-echdynnu ddwywaith o dan yr un cyflwr. Crynhowyd yr uwchlifau cyfunol gan anweddydd cylchdro gwactod (Heidolph laborota 4001- yn effeithlon, yr Almaen) ar 60 gradd, ac yna'n lyophilized ac yn cynhyrchu tua 42 y cant o bowdr echdynnu sych. Wrth gynnal yr arbrawf anifeiliaid dilynol, diddymwyd y darn sych â dŵr wedi'i buro ar dymheredd yr ystafell.

Anifeiliaid arbrofol

Cafwyd llygod mawr Sprague-Dawley gwrywaidd sy'n oedolion (200-220g) gan Medicine Experimental Animal

Canolfan TalaithGuangdong (Guangzhou, PR China), wedi'i gynnal mewn chwarteri a reolir gan dymheredd gyda 12-awr o olau/cylchoedd tywyll ar dymheredd ystafell ({{}} gradd ) a lleithder cyson (40-70 y cant) yn SPF (penodol di-batogen) labordy a bwyd ad libitum. Roedd y gweithdrefnau arbrofol yn cydymffurfio â Chanllaw'r Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol ar gyfer Gofalu a Defnyddio Anifeiliaid Labordy.

Wythnos cyn ei roi, cafodd hanner cant o lygod mawr SD gwrywaidd eu hanestheteiddio â sodiwm pentobarbital yn fewnberitoneol (40 mg/kg) (Jung et al. 1999) a dyrannwyd pum grŵp ar hap: ac eithrio llygod mawr yn y grŵp a weithredir â ffug (Sham), cafodd y gweddill eu sbaddu'n ddwyochrog drwy'r dull sgrotol (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Yn y cyfamser, gweinyddwyd y grwpiau a gafodd eu trin â CD yn fewngastrig gyda 0.45g/kg (dos isel o echdyniad CD, LCD ynghyd â Cas), 0.9g/kg (dos canolrifol o ddyfyniad CD, MCD a Cas) a 1.8g/kg (dos uchel o CD dyfyniad, HCD a Cas) dyfyniad CD, yn y drefn honno, tra bod y grwpiau ffug a sbaddu yn cael eu gweinyddu gyda'r swm cyfatebol o ddŵr yn unig. Cymerwyd mesuriad pwysau'r corff ar ddechrau'r weithdrefn ac yna bob wythnos. Cafodd yr holl lygod mawr laparotomi yn syth ar ôl marwolaeth i gael gwared â'r organau canlynol, a phwysodd yr organau canlynol yn ddiweddarach: chwarennau rhagputial, fesigl arloesol, chwarren brostad a chyhyr elevator ani.

Mesur ymateb erectile pidyn

Aseswyd gweithrediad codiad llygod mawr ym mhob grŵp yn dilyn y dulliau blaenorol (Ji et al. 2009, Luo et al.2006). Yn gryno, gosodwyd electrod deubegwn dur di-staen (System Caffael a Dadansoddi Data BL420F, TmeTechnology Co, Ltd, Chengdu, PR China) yn ofalus ar y pidyn nes iddo gael ei godi gyda'r ysgogiad trydan pwls (5 V) 0.2 s. Cofnodwyd yr amser o symbyliad i godiad fel hwyrni codiad y pidyn.Pan arsylwyd ar yr ymateb codiad pidyn, gellid tynnu'r electrod yn ôl o'r pidyn, a chofnodwyd hyd yr amser codiad y pidyn fel hyd y codiad.

Samplu gwaed a dadansoddi hormonau serwm

Anestheteiddiwyd llygod mawr â sodiwm pentobarbitalintraperitoneol (40mg/kg) (Jung et al. 1999).

Tynnwyd samplau gwaed a'u ceulo ar 4 gradd am 4 awr, a chasglwyd y serwm ohono trwy allgyrchu ar 4000rpm am 5 munud ar 4 gradd (Eppendorf 5810 R, yr Almaen) a'i storio ar unwaith mewn rhewgell -20 gradd tan dadansoddiad pellach. Mesurwyd cyfanswm lefelau LH a FSH gan ddefnyddio citiau radioimmunoassay (RIA) masnachol (Beijing NorthInstitute of Biological Technology, Beijing, China) gan gyfeirio at gyfarwyddiadau'r gwneuthurwr (Matsumoto etal. 1986). Yn seiliedig ar y dechneg imiwn ymbelydrol cystadleuol, defnyddiwyd yr I125-labelu LH (neu FSH) yn yr assay. Yn fyr, ychwanegwyd asiant 100µl I125-label LH ​​(neu FSH) at sampl serwm 100µl a'i ddeor Gwrthgorff cwningen wedi'i buro 100µl ar 4 gradd (neu 37 gradd) dros nos. Yna, ychwanegwyd asiant gwahanu imiwnedd gwrth-gwningen asyn i'r cymhleth antigen-gwrthgorff a'i allgyrchu (3500rpm, 15 munud) i wahanu 125I-LH (neu FSH) am ddim ac wedi'i rwymo â gwrthgyrff. Wedi hynny, mesurwyd ymbelydredd y gwaddod wrth gownter assay radio imiwnedd (DMF-96, Zhongcheng trydanol datblygu technoleg Co., Ltd., Hefei, Tsieina). Roedd terfynau sensitifrwydd yr LH a'r FSHassay ill dau yn 1.0mIU/ml.

DADANSODDIAD YSTADEGOL

Gwnaed dadansoddiad data gan ddefnyddio meddalwedd fersiwn 16 SPSS.

Mynegwyd gwerthoedd fel cymedrig ± gwyriad safonol (SD). Dadansoddwyd data parametrig gan ddefnyddio dadansoddiadau unffordd o amrywiant (ANOVA) wedi'i ddilyn gan brofion LSD post hoc. Dadansoddwyd data anparametrig gan brawf Kruskal-Wallis. Ystyriwyd gwahaniaethau yn ystadegol arwyddocaol os oedd y gwyriad tebygolrwydd yn llai na 0.05.

CANLYNIADAU

Penderfyniad meintiol ar gynnwys echinacoside andacetonide o bowdr CD

Roedd cynnwys echinacoside ac asetonid mewn powdr CD yn 1.27±0.01 y cant a 0.52±0.003 y cant , a oedd yn cydymffurfio â gofyniad Pharmacopoeia Tsieineaidd. Dangoswyd y HPLCchromatogram o bowdr CD yn ffig. 1 .

(4.6mm×250 mm, 5 µm, Waters, Aberdaugleddau, MA, UDA); cyfnod symudol: 0.5 y cant (V/V) hydoddiant dyfrllyd asid asetig(A) a methanol ( B) ingradient (0min, A: B=25:75; 10-30 mun, A: B=40: 60; 30 mun, A: B=0: 100); cyfradd llif: 1ml/munud; tonfedd ditectif: 330 nm; tymheredd: 30.

Ffig. 2: Cudd-wybodaeth codiad pidyn a hyd mewn llygod mawr. Mynegir data fel y cymedr ± SD (n=10). ##p<0.01 relative="" to="" sham-operated="" group,=""><0.01 relative="" to="" castrated="" group.="" abbreviation="" (below):="" sham,="" sham-operated="" group;="" cas,="" castration="" control="" group;="" lcd="" +cas="" (0.45g/kg),="" mcd="" +cas="" (0.9g/kg)="" and="" hcd="" +cas="" (1.8g/kg),="" three="" groups="" of="" cd="" extract="" treated="" in="" castrated="">

Ffig. 3: Effeithiau dyfyniad CD ar grynodiadau LH serwm mewn llygod mawr wedi'u hysbaddu. Mynegir data fel y cymedr ± SD (n=10). #p<0.05 relative="" to="" sham-operated="" group,="" *=""><0.05 relative="" to="" castrated="" group.="" body="" weights="" and="" relative="" accessory="" organs="" weights="" shown="" in="" table="" 1,="" all="" rats="" were="" of="" similar="" initial="" body="" weights="" with="" an="" increase="" from="" day="" 1="" to="" day="" 28.="" however,="" mean="" values="" in="" castrated="" group="" increased="" from="" 216.8±9.2="" g="" to="" 251.4±12.7,="" 283.3±15.1,="" 306.8±15.4="" and="" 322.2±18.4="" g,="" gaining="" less="" weights="" compared="" to="" the="" sham="" operated="" counterparts=""><0.05). there="" were="" no="" statistical="" difference="" between="" sham="" group="" and="" cd="" treated="">

Ymhellach, roedd pwysau cymharol cymedrig chwarren y cyn-putial, y chwarren brostad a'r fesigl arloesol a llygod mawr wedi'u hysbaddu cyhyrau levator ani yn sylweddol is (t<0.05) than="" those="" of="" normal="" controls,="" respectively.="" compared="" with="" the="" rats="" castrated="" only,="" the="" relative="" values="" of="" these="" organs="" weight="" tended="" to="" be="" higher="" under="" the="" treatment="" of="" cd="" extract.="" erectile="" response="" assessment="" in="" contrast="" to="" sham="" group,="" castration="" made="" the="" rats="" spend="" more="" time="" gaining="" penis="" erection="" under="" electric="" stimulation=""><0.01). however,="" the="" erectile="" latency="" was="" shortened="" by="" cd="" extract,="" exhibiting="" a="" significant="" decrease="" by="" 52.7%="" in="" lcd="" +cas="" group=""><0.01), 73.5%="" in="" mcd="" +cas="" group=""><0.01) and="" 74.5%="" in="" hcd="" +cas="" group=""><0.01), respectively.="" furthermore,="" castration="" shortened="" the="" erectile="" duration="" with="" the="" mean="" value="" of="" 37.2±17.3="" s="" compared="" to="" sham="" operated="" group=""><0.01). however,="" the="" erectile="" duration="" in="" rats="" was="" significantly="" prolonged="" approximately="" by="" 2.6-fold="" in="" mcd="" +cas="" group=""><0.01) and="" 2.1-fold="" in="" hcd="" +cas="" group=""><0.01). it="" showed="" no="" strict="" dose-related="" correlation.="" (fig.="">

Lefelau hormonau serwm

Wedi'i ddadansoddi gan assay RIA, y crynodiad serwm cyfartalog o LH mewn llygod mawr wedi'u hysbaddu oedd 2.50±0.34mIU/ml, gan ddangos cynnydd o'i gymharu â rheolaeth ffug (t).<0.05). however,="" the="" value="" descended="" about="" 49.2%="" in="" mcd="" +cas="" group="" relative="" to="" that="" in="" castrated="" control=""><0.05) (fig.="" 3).="" shown="" in="" fig.="" 4,="" no="" statistical="" differences="" were="" observed="" among="" all="" groups="" on="" fsh="">

TRAFODAETH

Dangosodd ein canlyniadau fod ysbaddiad wedi ymestyn cuddni codiad y pidyn yn sylweddol ac wedi byrhau hyd yr hydrectil, gydag organsatrophy atodol rhyfeddol. Fodd bynnag, hwylusodd dyfyniad CD y pidyn ymateb erectile a modiwleiddio y lefel LH ​​serwm i someextent mewn llygod mawr sbaddu.The codiad digymell yn cael ei ysgogi yn bennaf andmaintained gan androgen drwy cellog, moleciwlaidd, andphysiologic mecanweithiau, yn cynnwys y ymlacio ofcavernosal cyhyrau llyfn (Traish et al. 2007,). Talha et al.2007). Mae lefelau testosterone annigonol yn arwain at ostyngiad yn ei ymlacio (McClure 1988), sydd yn unol â hynny yn arwain at analluedd mewn dynion (Bivalacqua et al. 2000).

Yn arbennig mewn llygod mawr, fe'i cynhelir gan ystod eang o grynodiadau systemictestosterone fel {{0}} y cant , ac islaw hynny mae ymateb theerectile yn cael ei wanhau mewn dull dos-ddibynnol (Armagan et al. 2006). Yn yr astudiaeth bresennol, roedd crynodiad thetestosterone mewn cylchrediad yn rhy isel i gwrdd â'r terfyn sensitifrwydd (0.02ng/ml) yn yr holl lygod mawr wedi'u hysbaddu (ni ddangoswyd y data yn y canlyniadau). Fodd bynnag, gwnaeth CDextract fyrhau cuddni codi'r pidyn yn sylweddol ar dri dos ac ymestyn hyd yr erectile ar 0.90g/kg a 1.8 g/kg. Mae'n debyg mai canlyniad effaith tebyg i androgen oedd CD a grybwyllwyd mewn rhai astudiaethau blaenorol (He et al. 1996a, He et al. 1996b). newidiadau mewn statws endocrin (Trisomboon et al. 2007, Jang et al. 2011).

Roedd lefel athreshold o destosteron yn bodoli, ac islaw hynny roedd metaboliaeth yr organau hyn wedi'i atal (Trachtenberg1985). Cadarnhawyd yn ein hastudiaeth fod ysbaddiad wedi achosi i bwysau'r organau atgenhedlu affeithiwr ostwng oherwydd diffyg testosterona. Mae testosteron yn cael ei gyfrinachu'n bennaf gan testis Leydig cellland a reoleiddir gan hormonau hypophysial, megis hormon asluteinizing (LH) a hormon ysgogol ffoligl (FSH), sy'n chwarae rôl bwysig o ran cynnal swyddogaeth pidyn yr anifeiliaid sydd wedi'u sbaddu (Robert et al. 2004). Gan fod yr echel hypothalamws-pituitary-gonad (HPG) yn fecanwaith rheoli adborth dolen gaeedig, gall lefelau hormonau gonadal isel reoleiddio secretion LH a FSH yn eu tro (Morales et al. 2004). Mae ein hastudiaeth wedi ymchwilio bod lefel serwm LH wedi cynyddu'n sylweddol mewn llygod mawr wedi'u sbaddu ac yna'n disgyn i'r lefelau arferol trwy ddyfyniad CD ar 0.90 g/kg, a gytunwyd â'r casgliad blaenorol bod lefel LH ​​uwch yn gysylltiedig â risg uwch o gamweithrediad erectile (Kupelian et al. 2006).

Yn y testis, mae LH yn ysgogi synthesis a rhyddhau testosteron, y mae rheolaeth yr adborth ohono yn gymharol gyson, tra bod FSH yn gweithredu'n uniongyrchol ar gelloedd Sertoli ar gyfer maeth gyda chymhlethdod rheoli adborth (Hellqvist et al. 2008). Roedd y canfyddiadau hyn yn cynnig mwy o gefnogaeth i'r dybiaeth bod CDexpressed effaith tebyg i androgen, a allai fod yn bennaf gyfrifol am leihau serwm LH yn fwy naFSH.Yn arsylwi ar hyn o bryd, dylanwad ysbaddu ar ddatblygiad pwysau corff mewn llygod mawr gwrywaidd yn debyg i'r canfyddiadau mewn astudiaeth flaenorol (Christoffersen et al. 2006), tra'n groes i'r canlyniadau mewn llygod mawr benywaidd (Pantaleão etal. 2010). Nid oedd detholiad CD yn gallu gwella pwysau'r corff yn sylweddol, a oedd yn ôl pob tebyg oherwydd hyd y driniaeth annigonol neu'r effeithiau cymhleth ar statws iechyd cyffredinol. Hwylusodd dyfyniad CD ymateb erectile y pidyn trwy fyrhau'r hwyrni erectile ac ymestyn hyd yr erectile mewn llygod mawr wedi'u sbaddu. Mae'n debyg bod yr effeithiau hyn oherwydd yr effaith tebyg i androgen, a ategwyd gan arsylwi bod detholiad CD yn normaleiddio'r crynodiadau LH hyn yn enwedig ar y dos o 0.90g / kg.

Fodd bynnag, mae angen tystiolaeth ychwanegol i ddangos effaith dyfyniad CD yn erbyn lefelau ED athypothalamig a limbig a gellid cael mwy o sylw i'r feddyginiaeth draddodiadol werthfawr hon yn y byd modern.