Archwilio Potensial Gwymon Gwlad yr Iâ Detholiad a Gynhyrchir Gan Gaeau Trydan Pwls Dyfrllyd - Echdynnu â Chymorth Ar Gyfer Cymwysiadau Cosmetig Rhan 2

Cysylltwchoscar.xiao@wecistanche.comam fwy o wybodaeth

2.4. Galluoedd Gwrthocsidiol Detholiad Gwymon Gwlad yr Iâ

Roedd gan A.esculenta y gweithgaredd sborion DPPH cryfaf ymhlith echdynion crai y tair rhywogaeth o algâu (t<0.05), with="" scavenging="" effects="" higher="" than="" 90%(table="" 3).="" compared="" with="" the="" different="" standard="" solutions,="" a.esculenta="" showed="" comparable="" scavenging="" activity="" as="" 100ug/ml="" of="" ascorbic="" acid="" (87.9%),="" gallic="" acid="" (91.0%),="" and="" α-tocopherol="" (87.9%).="" our="" results="" were="" in="" agreement="" with="" recent="" studies="" [50],="" which="" also="" reported="" a="" positive="" antioxidant="" activity="" of="" a.esculenta="" extracts.="" surprisingly,="" no="" significant="" differences="" in="" antioxidant="" activity="" were="" observed="" between="" the="" different="" extraction="" methods="" tested="" (p="">0.05). Disgwyliwyd y byddai darnau PEF yn dangos gwell gwerthoedd gwrthocsidiol na'r darnau a gynhyrchir gyda'r echdynnu traddodiadol poeth gan fod astudiaethau eraill wedi dangos y gallai technegau gwyrdd (fel echdynnu gyda chymorth microdon neu echdynnu ensymatig) osgoi dadelfennu cyfansoddion bioactif yn effeithiol, gan arddangos uwch. gweithgareddau gwrthocsidiol [59,60].

Astudiwyd hefyd allu echdynion gwymon i leihau ïon fferrig (Fe8#) i ïon fferrus (Fe2 plws ) a'r gallu i sborionu'r ABTS radical, gan y dull FRAP ac ABTS, yn y drefn honno. Dangosodd canlyniadau FRAP dueddiadau tebyg i DPPH, gan ddangos bod gan A. esculenta y gallu cryfaf i leihau ïonau fferrig ( Fe3 plus ) i ïonau fferrus ( Fe2 plws ) ymhlith echdynion crai y tair rhywogaeth o algâu ( t.<0.05). however,="" a="" different="" behavior="" was="" found="" for="" the="" abts.="" all="" seaweed="" extracts="" showed="" a="" similar="" ability="" to="" scavenge="" the="" radical="" abts="" (p="">0.05), sy'n nodi bod y rhywogaethau hyn yn ôl pob tebyg yn cynnwys rhai cyfansoddion effeithlon sy'n gyfrifol am eu gweithgaredd sborion.

Cliciwch yma i wybod mwy

Yn gyffredinol, gwyddys bod algâu brown yn cyflwyno potensial gwrthocsidiol uwch o gymharu â theuluoedd coch a gwyrdd [61]. Dangosodd ein canlyniadau hefyd fod echdynion dyfrllyd o A. esculenta yn arddangos gweithgareddau gwrthocsidiol effeithiol o ran chwilota radicalau rhydd a lleihau pŵer, gan awgrymu y gallai A. esculenta o bosibl fod yn adnodd ar gyfer gwrthocsidyddion naturiol. Gallai'r gweithgaredd gwrthocsidiol uchel a welwyd ar gyfer darnau A.esculenta fod yn gysylltiedig â chynnwys uchel y cyfansoddion ffenolig a bennir yn y darnau algâu brown. Mewn llawer o astudiaethau, mae gweithgaredd gwrthocsidiol echdynion algâu wedi'i briodoli i'r cyfansoddion ffenolig, gan ddangos cydberthynas gadarnhaol rhwng cynnwys ffenolig a chynhwysedd sborion yn bennaf â DPPH [62,63]. Cafwyd canlyniadau cydberthynas tebyg yn yr astudiaeth gyfredol ar gyfer echdynion A.esculenta (gweler gwell trafodaeth yn Adran 2.6. Cydberthynas rhwng cyfansoddion cemegol a phriodweddau bioactif).

2.5.Gweithgareddau Ataliol Enswmatig Detholiad o Wymon Gwlad yr Iâ

Dangosodd echdynion gwymon Gwlad yr Iâ effeithiau ataliol cadarnhaol tuag at yr holl ensymau a brofwyd (Tabl 4), gan agor llwybrau newydd ar gyfer ymelwa ar atalyddion ensymatig naturiol o adnoddau algâu. Hyd eithaf ein gwybodaeth, dyma’r tro cyntaf i weithgareddau ataliol ensymatig echdynion gwymon Gwlad yr Iâ a gynhyrchwyd gan PEF gael eu profi.

prynu cistanche

2.5.1. Gweithgaredd Atal Collagenase

Dangosodd echdynion A.esculenta ataliad collagenase positif yn amrywio o 68 i 91 y cant , tra bod darnau P. palmaria ac U. Lactuca yn arddangos gweithgareddau ataliad di-nod yn erbyn colagnase (Tabl 4). uwch na epigallocatechin -3-gallate(EGCG) datrysiad safonol (63.2 y cant) ac yn debyg i safon gadarnhaol a ddarperir gan y pecyn ensymatig masnachol (74.9 y cant ). Canfyddiad pwysig oedd bod y darnau A.esculenta a gynhyrchwyd gan y PEF yn dangos ataliad collagenase o 91 y cant, gan ddangos gweithgaredd hyd yn oed yn uwch na'r atalydd a ddarperir gan y pecyn masnachol. Dylid tynnu sylw at y ffaith mai dim ond yn yr echdynion dŵr a gynhyrchwyd gan PEF y gwelwyd y gweithgaredd hwn ac nid gan y cyfuniad o PEF a HW. Gellir esbonio'r ymddygiad hwn gan y posibilrwydd y gallai'r broses dŵr poeth gael effaith negyddol ar y cyfansoddion sy'n gyfrifol am atal gweithgaredd colagenas. Fodd bynnag, mae angen astudiaethau ychwanegol i esbonio'r canlyniadau hyn oherwydd cymhlethdod echdynion algaidd crai. Mae'r grŵp ymchwil uchod yn gweithio ar hyn o bryd ar adnabod y moleciwlau ataliad mewn echdynion A.esculenta i ddeall yn well yr effeithiau cadarnhaol hyn a gynhyrchir gan y PEF.

Gall Cistanche gwrth-heneiddio

Mae canlyniadau atal collagenase gan echdynion A.esculenta yn unol â data blaenorol, lle mae A.esculenta yn cael ei ddefnyddio mewn detholiadau masnachol oherwydd ei effaith gwrth-heneiddio. Mae diraddio colagen yn digwydd gyda heneiddio oherwydd gweithgaredd colagenas, gan arwain at wrinkles ar y croen. Mae atal collagenase gan gyfansoddion sy'n digwydd yn naturiol yn gyfle diddorol ar gyfer cynhyrchion gwrth-heneiddio. Er enghraifft, mae SEPPIC, cyflenwr cynhwysion ar gyfer y diwydiant colur, yn cynnig detholiad lipoffilig o A.esculenta (Kalpariane AD) [64].

2.5.2. Gweithgaredd Atal Elastase

Only the crude extracts of A.esculenta inhibited elastase, exhibiting activities higher than 70% of inhibition (Table 4). However, the anti-elastase activities of A.esculenta extracts did not statistically differ among extraction methods (p>{{0}}.05). O'i gymharu â datrysiadau quercetin, atalydd elastase adnabyddus a ddangosodd ataliad 100 y cant ar 1 mM a 58.7 y cant ar 0.5 mM, roedd perfformiad darnau o A. esculenta yn uchel.

Mae Elastase yn ensym proteinas a all leihau elastin trwy dorri bondiau peptid penodol. O ganlyniad, gellir defnyddio ataliad gweithgaredd elastase yn yr haen dermis i gynnal elastigedd croen [65]. Mae llawer o echdynion planhigion wedi'u nodi fel atalyddion elastase [17]; fodd bynnag, ychydig o ymchwiliadau sydd wedi'u cynnal ar yr ataliad elastase o adnoddau algâu. Yn ôl data llenyddiaeth, gwyddys bod polyffenolau a dynnwyd o blanhigion yn atalyddion elastase a hyaluronidase cryf [66]. Nododd astudiaeth ddiweddar fod y fflorotanninau, y math o tannin mewn algâu brown, darnau o feiciau môr-wiail Eisenia, ac alga brown Ecklonia cava, o fudd i'r croen trwy leihau'r gweithgaredd elastase yn sylweddol [67]. Dangosodd y darnau A.esculenta a gynhyrchwyd yn yr astudiaeth hon y gwerthoedd TPC a TFC uchaf o'u cymharu â'r rhywogaethau eraill a astudiwyd (Tabl 4), felly gallai hyn fod y rheswm pam nad oedd y darnau dyfrllyd o P. palmaria ac U. Lactuca yn dangos gwrth- gweithgareddau elastase. I gadarnhau'r ddamcaniaeth hon, cynhaliwyd dadansoddiad cydberthynas Pearson, sy'n awgrymu bod y gweithgareddau gwrth-ensymatig yn cydberthyn yn gadarnhaol â chynnwys sylweddau ffenolig (gweler trafodaeth bellach yn Adran 2.6. Cydberthynas rhwng cyfansoddion cemegol a phriodweddau bioactif).

2.5.3. Gweithgaredd Atal Tyrosinase

Dangosodd detholiadau A.esculenta ataliad tyrosinase positif yn uwch na 90 y cant ar gyfer yr holl ddulliau echdynnu a ddefnyddiwyd, tra nad oedd darnau P.palmaria ac U. Lactuca yn arddangos effeithiau ataliol tyrosinase (Tabl 4). Fodd bynnag, nid oedd gweithgareddau gwrth-tyrosinase darnau A.esculenta yn wahanol (t<0.05) with="" extraction="" methods.="" comparing="" the="" effect="" of="" a.esculenta="" extracts="" with="" the="" quercetin="" solutions="" tested,="" the="" crude="" extracts="" of="" the="" brown="" algae="" showed="" better="" inhibitory="" activities="" than="" these="" solutions(88="" and75%="" for="" the="" 0.5="" and="" 1="" mm="" quercetin="" solutions,="" respectively).="" based="" on="" the="" literature,anti-tyrosinase="" activities="" of="" plants,="" bacteria,="" and="" fungi="" have="" been="" reported="" by="" several="" researchers="" i68i.="" however,="" though="" different="" studies="" suggest="" that="" bioactive="" compounds="" derived="" from="" marine="" algae="" have="" a="" good="" potential="" to="" be="" utilized="" as="" skin="" whitening="" agents="" [13],="" this="" is="" still="" an="" unexplored="" domain="" and="" only="" a="" few="" studies="" have="" been="" carried="" out.="" most="" of="" the="" studies="" performed="" in="" this="" area="" have="" been="" focused="" on="" brown="" algae,="" agreeing="" with="" the="" results="" of="" the="" present="" study="" in="" which="" a.esculenta="" extracts="" exhibited="" the="" best="" anti-tyrosinase="" activities.="" for="" instance,="" phloroglucinol="" derivatives="" and="" phlorotannins,="" common="" secondary="" metabolites="" found="" in="" brown="" algae,="" have="" shown="" inhibitory="" activity="" against="" tyrosinase="" due="" to="" their="" ability="" to="" chelate="" copper="" [69].="" in="" a="" recent="" study,="" the="" extract="" of="" the="" brown="" algae="" lessonia="" trabeculate="" produced="" by="" microwave-assisted="" extraction="" inhibited="" a="" tyrosinase="" activity="" of="" 33.73%[60].in="" another="" study,="" the="" extract="" of="" the="" brown="" algae="" turbinaria="" conoides="" showed="" activity="" as="" an="" antioxidant="" and="" tyrosinase="" inhibitor,="" however,="" in="" this="" case,="" ethanol="" was="" used="" as="" solvent="" [70].="" a="" significant="" correlation="" between="" the="" inhibitory="" potency="" of="" polyphenols="" extracted="" from="" plants="" on="" mushroom="" tyrosinase="" has="" been="" reported="" in="" previous="" studies="" [68].="" likewise,="" the="" results="" of="" this="" study="" suggest="" that="" the="" inhibitory="" activity="" towards="" tyrosinase="" was="" positively="" correlated="" with="" flavonoid="" and="" phenolic="" content="" (see="" section="" 2.6.="" correlations="" between="" chemical="" compounds="" and="" bioactive="">

cistanche แอ ม เว ย์

Mae Tyrosinase yn chwarae rhan bwysig yn y biosynthesis o pigment melanin yn y croen. Mae Melanin yn gyfrifol am amddiffyn rhag arbelydru uwchfioled niweidiol, a all achosi sawl cyflwr patholegol [71]. Yn ogystal, gall greu problemau esthetig pan fydd melanin yn cronni fel smotiau hyperpigmented [72]. Felly, gall ymgorffori atalyddion tyrosinase mewn cynhyrchion cosmetig fod yn ddeniadol oherwydd effeithiau gwynnu a / neu ysgafnhau.

2.5.4. Gweithgaredd Atal Hyaluronidase

Roedd yr holl echdynion gwymon yn arddangos gweithgaredd gwrth-hyaluronidase sylweddol uchel (Tabl 4), gan ddangos canlyniadau tebyg i'r hydoddiannau asid tannig (atalydd hyaluronidase adnabyddus). Yn benodol, dangosodd detholiadau A.esculenta 100 y cant o ataliad ar gyfer yr holl ddulliau a brofwyd. Ar ben hynny, roedd detholiadau U. Lactuca yn arddangos gweithgareddau uwch na 90 y cant o ataliad, lle roedd ataliad y darnau a gynhyrchwyd gan PEF (96.8 y cant o) a'r cyfuniad o PEF ynghyd â HW (97.3 y cant) yn uwch na'r ataliad a gynhyrchwyd gan y poeth traddodiadol dull dŵr 93.4 y cant )(t<0.05). all="" p.palmaria="" extracts="" exhibited="" similar=""><0.05), the="" inhibition="" of="" the="" extracts="" produced="" by="" pef="" was="" (91.9="" %)and="" the="" combination="" of="" pef+hw="" (89.5%)="" and="" the="" traditional="" hot="" water="" method="">

Disgrifiodd awduron eraill hefyd weithgaredd gwrth-hyaluronidase o wahanol ddarnau o wymon, yn enwedig darnau sy'n gyfoethog mewn fflorotanninau o algâu brown [73,74]. Fodd bynnag, hyd eithaf ein gwybodaeth, dyma'r tro cyntaf i weithgareddau ataliol hyaluronidase o ddarnau P.palmata ac U. Lactuca a gynhyrchwyd gan PEF gael eu hadrodd.

Mae asid hyaluronig yn elfen bwysig o'r dermis, lle mae'n ymwneud â thrwsio meinwe, mae'n torri i lawr wrth heneiddio, gan achosi crychau a cholli cadernid croen. Yn yr ystyr hwn, mae atalyddion hyaluronidase yn cynyddu lefel asid hyaluronig y matrics allgellog dermol ar gyfer gwella ymddangosiad croen wyneb sy'n heneiddio [13].cistanchFelly, gallai canlyniadau'r astudiaeth hon agor llwybrau newydd ar gyfer ymelwa ar atalyddion hyaluronidase naturiol o adnoddau algâu gyda defnydd posibl mewn cynhyrchion cosmetig.

I grynhoi, roedd y data a gasglwyd yn ein galluogi i ddod i'r casgliad bod echdynion A.esculenta yn dangos gwell gweithgareddau ataliol yn gyffredinol na P.palmaria ac U.lactuca tuag at yr ensymau a brofwyd. Felly, fel y rhywogaeth gwymon mwyaf addawol gyda gweithgareddau gwrth-enzymatig rhagorol ac felly fe'i dewiswyd ar gyfer astudiaethau pellach yn ein labordy. Er ei bod yn ymddangos bod detholiadau crai o A. esculenta yn ymgeiswyr da ar gyfer arbrofion in vitro, mae angen cynnal astudiaethau pellach i egluro pwy yw'r metabolion sy'n gyfrifol am yr effeithiau biolegol hyn.

2.6.Cydberthynas rhwng Cyfansoddion Cemegol a Phriodweddau Bioactif

Dangosodd y canlyniadau o ddadansoddiad prif gydrannau (PCA) fod prif wahaniad y grwpiau wedi'i ddiffinio gan PC1 a PC2, a oedd yn cyfrif am 71.9 y cant o'r amrywiad yn y data a 14.5 y cant o'r amrywiad yn y data, yn y drefn honno (Ffigur 2). Nodweddwyd y darnau A.esculenta gan gynnwys uwch o flavonoids a chyfansoddion ffenolig, effeithiau ataliol ar ensymau (collagenase, tyrosinase, ac elastase), a gwerthoedd DPPH a FRAP, na'r rhywogaethau eraill, P. palmata, ac U.lactuca. Ar y llaw arall, roedd gan A.esculenta gynnwys carbohydrad is, yn enwedig o'i gymharu â P. palmitate (a oedd wedi'i leoli ar ochr arall y PC1). Roedd yr amrywiad mewn data ar hyd y PC2 yn ymwneud yn bennaf ag ataliad ABTS a hyaluronidase. Fel y nodwyd gan y lleoliad ar y plot, roedd gan P. palmitate gydberthynas gryfach ag ABTS tra bod U.lactuca yn fwy cysylltiedig ag effeithiau ataliad hyaluronidase, o gymharu â'r ddwy rywogaeth hyn.

Dangoswyd cydberthynas gadarnhaol uchel ac arwyddocaol rhwng TPC, TFC, DPPH, FRAP, ac effeithiau ataliol ar golagenase, elastase, a thyrosinase gan ddadansoddiad cydberthynas Pearson (Tabl 5).

faint o cistanche i'w gymryd

Roedd hyn mewn cytundeb ag astudiaethau blaenorol, yn adrodd mai cyfansoddion ffenolig (gan gynnwys flavonoidau) yw'r prif gyfranwyr at weithgaredd gwrthocsidiol amrywiol wymon [75-77]. Mae gweithgaredd gwrthocsidiol uchel darnau o macroalgâu brown wedi bod yn gysylltiedig â grŵp penodol o polyffenolau, fflorotanninau, a'u strwythur moleciwlaidd unigryw. Dywedir bod gan Phlorotannis o algâu brown hyd at wyth cylch ffenol rhyng-gysylltiedig sy'n gweithredu fel trapiau electronau [78,79]. Disgwyliwyd y byddai ABTs yn cyfateb i TPC a pharamedrau gwrthocsidiol eraill. Efallai mai rhesymau posibl yw bod y dulliau’n seiliedig ar wahanol amodau adweithio a bod adweithedd yn amrywio o ran amser ac ystod y cydrannau. Er enghraifft, mae'r ABTSreagent yn adweithio ag ystod ehangach o gwrthocsidyddion na'r radical DPPH [80]. Ar y llaw arall, un o'r cyfyngiadau a grybwyllir ar gyfer ABTS yw adwaith hir ac efallai na fydd yr amser adweithio cyffredinol yn caniatáu cyrraedd pwynt terfyn.

Mae'r canlyniadau'n dangos bod cydberthynas gadarnhaol uchel rhwng TPC a TFC i weithgarwch ataliol collagenase, elastase, a tyrosinase ({{0}}.93-0.99), tra bod y berthynas ag ataliad o hyaluronidase nid oedd mor gryf (r=0.42 a 0.54, yn y drefn honno). Mae hyn yn dangos y gallai cydrannau eraill fod wedi cyfrannu at effaith ataliol y darnau. Mae astudiaethau eraill wedi nodi bod gan polysacaridau weithgaredd atal hyaluronidase, er enghraifft, asid alginig mewn algâu brown [81,82]. Mae angen astudiaethau pellach ar gyfansoddiad cemegol y rhywogaethau macroalgâu ar gyfer effeithiau cyfansoddion ynysig ar yr ensym i werthuso cyfraniad pob cydran gemegol oherwydd yn yr astudiaeth hon canolbwyntiwyd ar echdynion crai. Roedd y canfyddiadau yn cyd-fynd ag astudiaethau blaenorol, gan nodi bod cyfansoddiad cemegol a lefelau bioactifedd y darnau yn amrywio'n sylweddol rhwng y tair llinach (algâu coch, gwyrdd a brown) a rhwng gwahanol rywogaethau sy'n perthyn i'r un ffylwm ac yn cael eu dylanwadu gan oedran. a math o feinwe. At hynny, mae'r cyfansoddiad a'r nodweddion yn dibynnu ar lawer o ffactorau amgylcheddol sy'n effeithio ar ddosbarthiad a thwf macroalgâu. Er enghraifft, golau (ymbelydredd UV), tymheredd, argaeledd maetholion, amlygiad i aer, symudiad dŵr, amlygiad tonnau, a halltedd. Disgrifiwyd y tymheredd fel y ffactor sy'n cael yr effeithiau cryfaf ar ffurfio pigment a chrynodiad maetholion, halltedd, ac ymbelydredd UV fel y ffactorau sy'n dylanwadu ar grynodiad TPC [83].

Mae dosbarthiad gwahanol rywogaethau macroalgâu yn amrywio gyda dyfnder dŵr. Mae safleoedd yn uwch i fyny'r lan yn y parth rhynglanwol neu arfordirol yn fwy o straen gan fod yn rhaid i'r rhywogaethau sy'n tyfu yno wrthsefyll newidiadau lluosog mewn ffactorau anfiotig oherwydd newidiadau llanw. Er enghraifft, effaith sychu aer, arbelydriad solar uchel (ar drai), newidiadau mewn halltedd a thymheredd, ac, o dan amodau tymheredd aer isel, gan gynnwys rhewi. O dan y marc distyll, mae dyfnder cynyddol yn arwain at ostyngiad cyflym iawn mewn dwyster golau a llai o amlygiad i arbelydru.

beth yw cistanche

Mae gan algâu sy'n tyfu yn ystod y llanw sensitifrwydd is i Ymbelydredd UV ac maent yn gwella'n gyflymach o straen solar. Tra bod algâu sy'n tyfu yn y parth isarforol yn fwy sensitif i ymbelydredd UV ac mae ganddynt adferiad is o straen solar [84]. Ar yr un pryd, mae'r golofn ddŵr yn darparu amddiffyniad. Yn yr astudiaeth bresennol, mae'n debyg bod yr amlygiad i olau'r haul yn gryfach ar gyfer P. palmitate, o'i gymharu â'r rhywogaethau eraill. Mae astudiaethau eraill wedi dangos bod ffurfio MAAs yn uniongyrchol gysylltiedig â golau'r haul [85], gan amddiffyn yr organebau rhag ymbelydredd UV-A a UV-B. Ar ben hynny, dangoswyd bod y swm penodol o MAAs wedi gostwng gyda dyfnder casglu cynyddol. Gwyddys bod môr-wiail fel A.esculenta yn tyfu yn y parth isarforol uchaf ond hefyd yn ymestyn i'r rhynglanw isaf ychydig uwchben y marc distyll. Ystyr y golofn ddŵr yn darparu amddiffyniad cryfach nag ar gyfer P. palmitate. Yn ogystal, mae'r nodweddion morffolegol yn wahanol, mae llafnau A.esculenta yn fwy trwchus o'u cymharu â'r ddwy rywogaeth arall. UI. lactuca, sy'n tyfu'n bennaf yn y rhynglanwol a'r isarforol yn gallu ffotosyntheseiddio a thyfu o dan arbelydriadau isel iawn. Dywedwyd bod dod i gysylltiad â golau UVB yn cyflymu adferiad paramedrau ffotosynthetig U.lactuca o effeithiau negyddol golau UVA. Mae'n llai, yn symlach o ran strwythur, ac yn byw'n fyrrach (3 mis) nag A.esculenta (5-7 o flynyddoedd) a P. palmata sydd â thwf newydd bob blwyddyn.

I grynhoi, gellir llunio'r rhagdybiaethau mai'r prif wahaniaethau ym mhhriodweddau'r darnau yw'r amrywiad mewn rhychwant oes, nodweddion morffolegol, ac amodau twf y rhywogaethau algâu.

3. Defnyddiau a Dulliau

3.1. Defnyddiau

Darparwyd gwymon Gwlad yr Iâ U.lactuca (algâu gwyrdd), A.esculenta (algae brown), a P. palmitate (algâu coch) gan gregyn gleision a gwymon Gwlad yr Iâ, a gynaeafodd chwyn môr yn Breidafjordur (Gorllewin Gwlad yr Iâ). cafodd y gwymon eu sychu (i tua 90 y cant o ddeunydd sych), eu melino, a'u dosbarthu wedi'u pecynnu dan wactod. Roedd samplau'n cael eu cadw mewn lle sych a thywyll ar dymheredd yr ystafell nes eu defnyddio.

Tyrosinase o fadarch, L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), elastase o pancreas mochyn, asid asgorbig, N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide(AAPVN), hyaluronidase o ceilliau buchol, cwercetin, a-tocofferol, asid tannig,2,2-diffenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH),2.4,6-Tripyridyl-s-Triazine(TPTZ), Trolox, Folin- Prynwyd adweithydd Ciocalteu, asid galig, a phecyn assay colorimetrig gweithgaredd collagenase (MAK293) gan Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, UDA). Prynwyd halen sodiwm asid hyaluronig gan MakingCosmetics (Redmond, WA, UDA). Roedd yr holl gemegau ac adweithyddion eraill a ddefnyddiwyd yn radd ddadansoddol ac fe'u cafwyd gan VWR International, LLC. Defnyddiwyd dŵr deionized (Elix Essential, Merck, Darmstadt, yr Almaen) ar gyfer echdynnu a pharatoi atebion seiliedig ar ddŵr.

3.2.Cynllun Arbrofol

Defnyddiwyd dyluniad ffactoraidd ar gyfer gwerthuso effeithiau rhywogaethau gwymon Gwlad yr Iâ (U. Lactuca, A. esculenta, P. palmitate) a thriniaeth echdynnu (echdynnu dŵr poeth (HW,95 gradd), echdynnu gyda chymorth PEF (PEF) a'r cyfuniad o'r ddwy dechneg (PEF ynghyd â HW), ar gyfansoddiad echdynion a bioactifedd (Tabl 6) Cyflawnwyd yr echdyniad yn driphlyg ar gyfer pob grŵp a dadansoddwyd pob echdyniad a ddyblygwyd yn driphlyg.

bioflavonoid

3.3. Echdynnu Bioactifau o Wymon Gwlad yr Iâ

Mae ecsbloetio biomas macroalgaidd ar wahanol lefelau wedi ysgogi gwyddonwyr i archwilio technegau echdynnu mwy ecogyfeillgar, effeithlon a chost-effeithiol, yn seiliedig ar ddulliau echdynnu gwyrdd. Yn y gwaith hwn, gwerthuswyd echdynnu gyda chymorth PEF fel dull newydd a gwyrdd i gynhyrchu darnau swyddogaethol, tra defnyddiwyd echdynnu dŵr poeth traddodiadol i gymharu. Ar ben hynny, astudiwyd effaith cyfuniad y ddau dechneg, triniaeth PEF o macroalgâu ac yna'r echdynnu dŵr poeth traddodiadol, ar yr adferiad bioactif. Oherwydd yr electroporation disgwyliedig a gynhyrchir yn y cellbilenni ar ôl y driniaeth gorfforol, gallai'r echdynnu canlynol â dŵr poeth hwyluso ymhellach rhyddhau'r deunydd mewngellol [86], gan gynyddu'r maes echdynnu. Amser ar ôl triniaeth mae angen i'r deunyddiau wasgaru allan o'r celloedd [87,88], ac yn yr arbrawf hwn, arhosodd yr ataliadau dros nos nes bod yr hylif (dyfyniad) wedi'i wahanu o'r mwydion.

O ran cyfrwng echdynnu, defnyddiwyd dŵr distyll i gynhyrchu'r echdynion gwymon i oresgyn cyfyngiadau o ran defnyddio toddyddion gwenwynig a organig. Profodd dŵr i fod yn doddydd da ar gyfer echdynnu nifer o gyfansoddion bioactif o wymon [46,89-91], ac mae'n gyfeillgar i'r amgylchedd. Yn ogystal, defnyddir dŵr yn gyffredin ar gyfer echdynnu gyda chymorth PEF gan ei fod yn ddargludydd da ar gyfer trydan.

3.3.1. Gweithdrefnau Echdynnu

Ar gyfer pob atgynhyrchiad ym mhob grŵp, roedd gwymon (15 g) yn cael eu socian dros nos ar dymheredd ystafell (22 gradd ) mewn dŵr wedi'i ddad-ïoneiddio (300 mL). Yna, cafodd yr ataliad ei drin â PEF (PEF), wedi'i gynhesu (HW), neu'r ddau wedi'u trin a'u gwresogi gan PEF (PEF ynghyd â HW). Cadwyd yr ataliadau dros nos mewn oergell ac yna eu hidlo â phapur hidlo bras (20 um). Yna cafodd y hidlwyr (darnau) eu storio ar 4 gradd tan eu dadansoddiadau.

Cyflawnwyd yr echdyniad pwls â chymorth maes trydanol gan ddefnyddio generadur curiadau a adeiladwyd yn fewnol. Roedd ganddo gynhwysydd FuGHCK-200-2000 (Fu.G.Elektronik GmbH, Rosenheim, yr Almaen) a bwlch gwreichionen (18.5 kV OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Wiese-baden, yr Almaen). Cynhyrchodd yr offer PEF gorbys dadfeiliad esbonyddol gyda lled o 0.96 us ac osgled o 18 kV. Defnyddiwyd siambr drin plexiglass gyda'r dimensiynau (L × H × W) 20 × 8 × 2.5 cm, gyda'r pellter byrraf rhwng yr electrodau plât i drin yr ataliadau gyda maes trydan 8 kV / cm ar 1.2 Hz am 10 munud . Paratowyd y darnau HW trwy gynhesu'r crogiant mewn bicer mewn baddon dŵr thermostatig a'i gadw ar 95 gradd am 45 munud. Ar gyfer y maes trydan pwls cyfunol a thriniaeth wresogi, cafodd yr ataliadau eu trin â PEF ac yna eu rhoi mewn bicer, eu gwresogi mewn baddon dŵr, a'u cadw ar 95 gradd am 45 munud.

3.3.2. Dargludedd, pH, a Mesuriadau Tymheredd

Mesurwyd dargludedd trydanol a pH ataliadau gwymon ar ôl socian ac ar ôl y triniaethau echdynnu, ar dymheredd ystafell, gan ddefnyddio mesurydd pH (Mesur Benchtop pH / Dargludedd Orion StarTM A215, Thermo Scientific, Waltham, MA, UDA) gyda synhwyrydd dargludedd. ac electrod cyfuniad triawd pH/ARC. At hynny, cofnodwyd newidiadau tymheredd oherwydd triniaethau.

3.4. Proffiliau Sbectrol Detholiad Gwymon

Mesurwyd sbectra amsugno UV-VIS o'r gwahanol ddarnau o wymon yn yr ystod o 200 i 450 nm gan ddefnyddio pelydr dwbl Thermo Scientific Evolution 350 UV-Vis Spectrophotometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, UDA) gyda chuvettes cwarts 1 cm. Perfformiwyd tri sgan ar gyfer pob echdyniad o wymon.

3.5. Pennu Cyfanswm Cynnwys Polyphenolic

Pennwyd cyfanswm y cynnwys ffenolig (TPC) mewn echdynion gwymon trwy ddefnyddio'r adweithydd Folin-Ciocalteu yn dilyn dull wedi'i addasu ychydig a ddisgrifiwyd gan Zhang [92] gan ddefnyddio Spectrophotometer Microplate Sky Multiskan (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA USA). Cyfrol o Cymysgwyd 20 μL o echdyniad gwymon neu hydoddiant safonol cyfresol gyda 100 μL o adweithydd Folin-Ciocalteu (10 y cant mewn dŵr distylliedig) Ar ôl 5 munud, ychwanegwyd 80 μL o hydoddiant sodiwm carbonad 7.5 y cant (/w). wedi'i ddeor ar dymheredd ystafell a thywyllwch am 30 munud Mesurwyd amsugnedd ar y donfedd o 760 nm Defnyddiwyd dŵr distyll yn wag Defnyddiwyd cromlin safonol o asid galig i bennu cyfanswm y cynnwys ffenolig a'i fynegi fel ug o gyfwerthion asid galig （ GAE ） fesul gram o ddeunydd sych （ug GAE/g wneud）.

3.6. Pennu Cyfanswm Cynnwys Flavonoid

Pennwyd cyfanswm y cynnwys flavonoid (TFC) mewn darnau gwymon gan y dull a ddisgrifiwyd gan Kamtekar 【93】 a'i addasu i 96-microplates ffynnon. Yn gryno, cymysgwyd cyfaint o 25 μL o echdyniad gwymon neu hydoddiant safonol cyfresol â 100 μL o sodiwm nitraid (0.375 y cant w/o). Ar ôl 5 munud, ychwanegwyd 25 μLof clorid alwminiwm (3 y cant w/o) at y cymysgedd a'i ddeor am 6 munud ar dymheredd ystafell. Yna, ychwanegwyd 100 μL o sodiwm hydrocsid (2 y cant w/ø）) at y cymysgedd a'i gymysgu. Ar unwaith, mesurwyd amsugnedd ar y donfedd o 510 nm. Defnyddiwyd dŵr distyll ac ethanol fel bylchau. Defnyddiwyd cromlin safonol o quercetin (wedi'i hydoddi mewn ethanol) i bennu cyfanswm y cynnwys ffenolig a'i fynegi fel ug o'r hyn sy'n cyfateb i quercetin （QE） fesul gram o ddeunydd sych （ug QE/g do）. 3.7.Penderfynu Cynnwys Carbohydradau

Mesurwyd y cynnwys siwgr am ddim yn ôl y dull a ddisgrifiwyd gan [94], gydag addasiadau bach. Ychwanegwyd 50 μL o hydoddiant ffenol (4 y cant) a 250 μL o asid sylffwrig （96 y cant ） i 100 μL o sampl neu hydoddiant safonol. Ar ôl 10 munud o ddeori ar dymheredd ystafell, darllenwyd amsugnedd y cymysgedd ar 490 nm. Defnyddiwyd cromlin safonol o glwcos i bennu cyfanswm y cynnwys carbohydrad a'i fynegi fel mg o'r hyn sy'n cyfateb i glwcos (GluE) fesul gram o ddeunydd sych (mg GluE/g do).

3.8. Priodweddau Gwrthocsidiol Detholiad Gwymon

3.8.1.2,2 Diffenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) Assay Crafu Radical Rhad ac Am Ddim

Penderfynwyd ar y gweithgaredd gwrthocsidiol (DPPH) o ddarnau gwymon yn dilyn y fethodoleg a ddisgrifiwyd yn flaenorol 【94 】 gyda rhai addasiadau. Yn gryno, ychwanegwyd 200 μL o 10.825 × 10-5 M hydoddiant DPPH at 100 uL o sampl (1:1 mewn methanol) mewn plât ffynnon 96-. Cymysgwyd yr un cyfaint o DPPH â safon 50μL ynghyd â methanol 50μL. Yna cafodd y samplau a'r safon eu deor mewn lle tywyll ar dymheredd yr ystafell am 30 munud. Mesurwyd yr amsugnedd ar donfedd 517 nm. Defnyddiwyd dŵr distyll fel gwag. Cyfrifwyd y gallu i sborionu'r radical DPPH gan ddefnyddio'r hafaliad canlynol: lle mai rheolaeth yw amsugnedd y rheolaeth (hydoddiant DPH heb sampl), sampl A yw amsugnedd y sampl prawf (hydoddiant DPPH ynghyd â sampl prawf), a'r A sampl yn wag yw amsugnedd y sampl yn unig (sampl heb hydoddiant DPPH) ac Amethanol gwag yw amsugnedd methanol yn unig. Defnyddiwyd gwrthocsidyddion masnachol (asid asgorbig, asid galig, a -tocopherol) fel rheolaethau cadarnhaol.

3.8.2.Ferric Ion Lleihau Gwrthocsidiol Pŵer (FRAP) Assay

Mesurwyd gweithgaredd FRAP yn ôl dull Benzie a Strain [95]. Yn gryno, byffer asetad (300mM,pH3.6), 2.4, 6-tripyridyl-s-triazine(TPTZ)10mM mewn 40mMHCl, a FeCl; Cymysgwyd 6H-O (20 mM) yn y gymhareb o 10:1 i gael yr adweithydd FRAP sy'n gweithio. Deorwyd cymysgedd yr adwaith ar 37 gradd am 10 munud. Cymysgwyd sampl A50 μL o bob dyfyniad â 150 μL o hydoddiant FRAP gweithio am 8 munud ar dymheredd ystafell. Mesurwyd amsugnedd y cynnyrch lliw, Ferrous-TPTZ ar donfedd 593 nm. Mynegwyd gwerthoedd FRAP o echdynion gwymon fel uM o gyfwerth Trolox (TE) fesul gram o ddeunydd sych.

3.8.3.2,2 Assay-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-asid sulfonic)(ABTS)

Perfformiwyd y dadansoddiad gan ddefnyddio protocol dad-liwio ABTS [76] gyda rhai addasiadau. Cynhyrchwyd catation radical ABTS (ABTS plus ) trwy adweithio ABTS(66mg) ag 10 mL o hydoddiant potasiwm persylffad (2.45 mM). Gadawyd y cymysgedd yn y tywyllwch ar dymheredd ystafell am 12-16 h cyn ei ddefnyddio. Cafodd hydoddiant ABTS plus ei wanhau â dŵr i amsugnedd o 0.700 ar 734 nm. Trosglwyddwyd y cymysgedd adwaith (200 ul) i ficroplate, ychwanegwyd 50 μL o'r sampl ac yna 150 μL o'r hydoddiant adweithydd. Ysgwyd y plât am 10 s ar gyflymder canolig, a mesurwyd yr amsugnedd ar 734 nm ar ôl 5 munud o ddeor ar dymheredd yr ystafell. Paratowyd cromlin safonol trwy blotio ataliad A734nm o safonau Trolox fel swyddogaeth eu crynodiadau. Cyfrifwyd gwerth cynhwysedd gwrthocsidiol cyfatebol Trolox (TEAC) y samplau gan ddefnyddio'r hafaliad a gafwyd o atchweliad llinol y gwerthoedd cromlin safonol a amnewidiwyd A734nm ar gyfer pob sampl:

3.9. Gweithgareddau Gwrth-Ensymatig Detholiad Gwymon

3.9.1. Assay Atal Collagenase

Defnyddiwyd pecyn profi lliwimetrig gweithgaredd collagenase (MAK293), a brynwyd gan Sigma-Aldrich, i bennu ataliad colagenas o echdynion gwymon. Roedd y pecyn yn mesur gweithgaredd colagenas gan ddefnyddio peptid synthetig (FALGPA) sy'n dynwared strwythur colagen. Perfformiwyd y weithdrefn yn unol â chyfarwyddiadau'r pecyn.

3.9.2. Assay Ataliad Elastase

Ymchwiliwyd i ataliad elastase o echdynion gwymon yn ateb byffer TRIS gyda'r dull wedi'i addasu fel y disgrifiwyd yn gynharach 【96 】. Yn gryno, cymysgwyd 100 μL o hydoddiant TRISbuffer 0.1 M (pH8.0) （pH8.0）, 25 μL o elastase （1 U/mL mewn byffer TRIS） a darnau sampl 25μL a deorwyd am 15 munud ar 30 C cyn ychwanegu'r swbstrad i ddechrau'r adwaith. Ar ôl amser deori, ychwanegwyd 50μL o hydoddiant AAAPVN 2 mM. Yna, cafodd yr amsugnedd ar 420 nm ei fonitro am 20 munud gan ddefnyddio darllenydd microplate o dan dymheredd cyson o 30 C. Yn olaf, cyfrifwyd ataliad elastase mewn canran gan ddefnyddio'r hafaliad: lle mae rheolaeth Abs yn amsugno'r assay gan ddefnyddio'r byffer yn lle atalydd (sampl) ac Absmpleis amsugno'r echdynion sampl. Defnyddiwyd Quercetin fel rheolaeth gadarnhaol. Defnyddiwyd byffer Tris yn wag.

3.9.3. Assay Atal Tyrosinase

Perfformiwyd assay ataliol Tyrosinase yn ôl y dull a ddisgrifiwyd yn flaenorol gan 【66】 gan ddefnyddio L-DOPA fel swbstrad. Cymysgwyd 20 μL o'r sampl, 10 μL o hydoddiant tyrosinase madarch （50 U/mL mewn byffer ffosffad）, ac 80 μL o glustogfa ffosffad (pH=6.8) mewn microplate a'i ddeor ymlaen llaw ar 37Cfor 5 mun. Yna, ychwanegwyd 90 uL o L-DOPA (2 mg / mL). Cafodd ffurfiant dopacrom ei fonitro ar unwaith am 20 munud ar 475 nm mewn darllenydd microplate o dan dymheredd cyson o 37 gradd. Cyfrifwyd ataliad y cant o ensym tyrosinase gan ddefnyddio'r hafaliad: lle mae rheolaeth Abs yn amsugnedd y assay gan ddefnyddio'r byffer yn lle atalydd (sampl) a sampl yw amsugnedd y darnau sampl. Defnyddiwyd Quercetin fel rheolaeth gadarnhaol. Defnyddiwyd byffer ffosffad yn wag.

3.9.4. Assay Atal Hyaluronidase

Mesurwyd gweithgaredd ataliol Hyaluronidase fel y disgrifiwyd yn flaenorol gan [66] gydag ychydig o addasiadau. Cyfrol o 100 math ulof-1-hyaluronidase ceilliau Sbovine (2100 U/mL) hydoddi yn 0.1 M cymysgwyd byffer asetad (pH 3.5) â 100 μL o echdyniad a'i ddeor ar 37 gradd am 20 munud. Ychwanegwyd cyfaint o 200 μL o 6mM o galsiwm clorid at y gymysgedd adwaith, ac yna deorwyd y gymysgedd ar 37 gradd C am 20 munud. Cafodd yr hyaluronidase wedi'i actifadu Ca2 a mwy hwn ei drin â 250 uL o hyaluronate sodiwm (1.2 mg / mL) wedi'i hydoddi mewn byffer asetad 0.1 M (pH 3.5) ac yna ei ddeor mewn baddon dŵr ar 37 gradd am 40 munud. Ychwanegwyd 50 μL o 0.9 M sodiwm hydrocsid a 100 μL o 0.2 M sodiwm borate at y cymysgedd adwaith ac yna deor mewn baddon dŵr berw am 5 munud. Ar ôl oeri i dymheredd ystafell, ychwanegwyd 250 uL o hydoddiant p-dimethylaminobenzaldehyde (DAMB) at y gymysgedd adwaith. Paratowyd yr ateb DAMB trwy doddi 0.25 go DAMB mewn 21.88 mL o asid asetig 100 y cant a 3.12 ml o asid hydroclorig 10N. Cafodd y grŵp rheoli ei drin â 100 μL o 5 y cant o ddŵr yn lle echdyniad. Mesurwyd yr amsugnedd ar y donfedd o 585 nm ar ôl 45 munud. Cyfrifwyd canran ataliad ensymau gan ddefnyddio'r hafaliad canlynol: lle mae rheolaeth Abs yn amsugnedd y assay gan ddefnyddio'r byffer yn lle atalydd (sampl) a sampl Abs yw amsugnedd y darnau sampl. Defnyddir asid tannig fel safon gyfeirio.

3.10.Dadansoddiad Ystadegol

Cyfrifwyd cyfartaledd y dadansoddiad triphlyg o bob dyfyniad a'i ddefnyddio i ddarganfod y gwerthoedd cymedrig a gwyriadau safonol ar gyfer pob grŵp (n=3). Defnyddiwyd modelau llinol cyffredinol (GLM) ar gyfer ffactorau sefydlog i werthuso prif effeithiau a rhyngweithiadau dwy ffordd y ffactorau arbrofol (rhywogaethau a dulliau echdynnu) ar newidynnau mesuredig. At hynny, defnyddiwyd ANOVA a phrawf Tukey-Kramer i nodi arwyddocaol (t<0.05)differences between="" the="" groups.="" pearson="" correlation="" was="" used="" to="" evaluate="" linear="" relationships="" between="" the="" variables.="" principal="" component="" analysis="" (pca)="" was="" used="" to="" detect="" structure="" in="" the="" relationship="" between="" measured="" variables="" and="" experimental="" factors.="" the="" pca="" reduces="" voluminous="" data="" to="" a="" small="" set="" of="" linear="" combinations="" of="" related="" variables(i.e.,="" factors)="" based="" on="" patterns="" of="" correlation="" among="" the="" original="" variables.="" the="" resulting="" linear="" attribute="" combinations="" can="" be="" used="" for="" profiling="" specific="" product="" characteristics="" based="" on="" the="" variables="" studied.="" all="" statistical="" analyses="" were="" performed="" using="" ncss="" 2020="" statistical="" software="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" kaysville,="" ut,="">

4. Casgliadau

Dangosodd canlyniadau’r arbrawf sgrinio cyntaf hwn botensial tair rhywogaeth o wymon o Wlad yr Iâ trwy ddarparu effeithiau buddiol effeithiol trwy sawl llwybr. Roedd y dull gwyrdd a ddatblygwyd gan ddefnyddio meysydd trydan dyfrllyd pyls yn dangos canlyniadau tebyg i'r echdynnu dŵr poeth traddodiadol, gan ddangos nifer o fanteision megis ei natur anthermol ac amser echdynnu byrrach (10 munud vs. 45 munud). Ymhlith y tair rhywogaeth algaidd, dangosodd y macroalgae brown A.esculenta y cynnwys uchaf o TPC a TFC hefyd yn arddangos y galluoedd gwrthocsidiol mwyaf Ar ben hynny, roedd echdynion dŵr A.esculenta yn arddangos gweithgareddau ataliol gwell na P. palmaria ac U. Lactuca tuag at collagenase, elastase, tyrosinase, a hyaluronidase yw'r rhywogaeth gwymon mwyaf addawol gyda gweithgareddau gwrth-ensymatig ardderchog i'w defnyddio mewn gwynnu croen, gwrth-heneiddio ac iechyd y croen. Yn ddiddorol, roedd y darnau A.esculenta a gynhyrchwyd gan y dull PEF yn dangos ataliad collagenase o 91 y cant, yn uwch na'r gweithgaredd atal a ddangosir gan yr echdynnu dŵr poeth traddodiadol a hyd yn oed yn uwch na'r atalydd a ddarperir gan y pecyn masnachol. I gloi, mae ein hastudiaeth ragarweiniol yn awgrymu bod echdynion sy'n seiliedig ar wymon o Wlad yr Iâ, yn enwedig y darnau o'r macroalgâu brown A. esculenta, a gynhyrchir gan echdyniad dyfrllyd â chymorth meysydd trydan, yn gynhwysion swyddogaethol posibl y gellid eu defnyddio fel cyfansoddion gweithredol ar gyfer fformwleiddiadau cosmetig a cosmetig. yn y dyfodol agos.

Daw'r erthygl hon o Mar. Drugs 2021, 19, 662. https://doi.org/10.3390/md19120662 https://www.mdpi.com/journal/marinedrugs