Newidiadau Histopatholegol mewn Gilliau, Afu, Arennau A Chyhyrau Ictalurus Punctatus a Gasglwyd O Lygryddion Ardaloedd o Afon

edmund.chen@wecistanche.com

BYDD CISTANCHE YN GWELLA SWYDDOGAETH YR AREN/ARENOL

Haniaethol

Mae carthffosiaeth heb ei drin a gwastraff diwydiannol o ddinas Faisalabad yn cael eu gwaredu i Afon Chenab trwy Brif Ddraen Chakbandi (CMD). Mae'r prosiect presennol wedi'i gynllunio i ymchwilio i effeithiau'r llygredd dŵr croyw hwn ar gorff pysgod Ictalurus punctatus. Casglwyd sbesimenau o'r rhywogaeth hon o bysgod i fyny'r afon ac i lawr yr afon o fynedfa CMD i Afon Chenab. Tagellau pysgod, afu,arenac roedd cyhyrau o ranbarthau dorsolateral o bysgod yn destun histopatholeg. Defnyddiwyd pysgod fferm a physgod o ardaloedd i fyny'r afon fel rheolaeth. Dangosodd pysgod a gasglwyd o safleoedd arbrofol llygredig ddifrod sylweddol mewn organau dethol. Dangosodd meinweoedd Gill annormaledd ar ffurf dyrchafiad yn yr epitheliwm cynradd, ymasiad, gwagio, hypertroffedd, a necrosis. Tra bod meinweoedd yr afu yn destun dirywiad hepatocytes, necrosis, hepatocyte gronynnog mitocondriaidd, ac ymledu sinwsoid.Arennauroedd meinweoedd yn dangos bod mwy o le yn y bwmyn a glomerwlws cyfyngedig a neffronau dirywiol. Gwelwyd oedema, necrosis, ac atrophy ym meinweoedd cyhyrau pysgod o ardaloedd llygredig. Roedd pysgod o'r ardal i fyny'r afon yn dangos tagell lamellae ymdoddedig, ymdreiddiad celloedd llidiol, hypertroffedd a gwagio mewn hepatocytes.Arennaumeinweoedd yn dangos presenoldeb celloedd tiwbaidd niwclear, dinistriolarennoltiwbiau, hemorrhage, a necrosis yn epitheliwm tiwbaidd. Gwelwyd bylchau o fewn myofibril hefyd yn y cyhyrau. Roedd sbesimenau o bysgod rheoli yn dangos nad oedd unrhyw amrywiad mewn tagellau, afu,aren, a chyhyrau. Datgelodd yr astudiaeth bresennol fod cydberthynas gref rhwng maint y difrod i feinwe a halogiad amgylcheddol. Mae canfyddiadau presennol hefyd yn gorfodi rhybuddion byd-eang i amddiffyn ein cyrff dŵr a physgod i achub y boblogaeth ddynol.

Geiriau allweddol:meinwe'r arennau; arennau; tiwbiau arennol; corpwscles arennol; arennol

1. Rhagymadrodd

Mae dŵr yn cael ei lygru oherwydd gwastraff trefol a diwydiannol. Ym Mhacistan, y boblogaeth sydd â mynediad at ddŵr yfed glân mewn ardaloedd trefol yw 56 y cant, tra mewn ardaloedd gwledig, mae'n 45 y cant (Farooq et al., 2008). Ym Mhacistan, mae tua 2000 miliwn galwyn o ddŵr carthion y dydd wedi'i ychwanegu at ddyfroedd wyneb (Martin et al., 2006). Ym Mhacistan mae tua 6634 o ddiwydiannau wedi'u cofrestru, ac mae 1228 ohonynt yn cael eu hystyried yn hynod o lygredig, mae Afon Chenab yn derbyn llygryddion ar ffurf carthion a gwastraff diwydiannol yn gollwng o wahanol ardaloedd a'r ardal gyfagos trwy wahanol ddraeniau. Mae dinas Faisalabad yn ychwanegu carthffosiaeth a gwastraff diwydiannol i Afon Chenab trwy CMD. Mae llygredd yn cyfathrebu afiechydon yn uniongyrchol i bobl fel clefydau anadlol, dolur rhydd, cardiofasgwlaidd a niwrolegol (Ullah et al., 2014). Trwy fwydo ar sylweddau niweidiol bwyd llygredig, mae biogronni yn y gadwyn fwyd (Kim et al., 2016). Mae'r cemegau hyn trwy gadwyn fwyd yn cyrraedd bodau dynol ac yn arwain at fio-chwyddiadau. Mae catfish yn bysgodyn addurnol gyda bwyd o ansawdd uchel, gwerth, a ffynhonnell dda o fitamin D hefyd (Miller a Mitchell, 2009). Mae cathbysgod yn byw ar y gwaelod ac mae'n well ganddynt fyw gyda swbstradau tywod a graean. Mae amrywiadau histolegol yn gweithredu fel biofarcwr o halogiadau dŵr croyw. Gellir pennu effeithiau uniongyrchol ac anuniongyrchol ar feinweoedd anifeiliaid trwy histopatholeg (Paithane et al., 2012; Schwaiger et al., 2004). Cynlluniwyd y prosiect hwn i amcangyfrif effeithiau llygredd dŵr croyw ar gyhyrau, tagellau,arennau, ac afu Ictalurus punctatus trwy histopatholeg.

BYDD CISTANCHE YN GWELLA CLEFYD YR ARREN/ARENAU

2. Deunydd a Dulliau

2.1. Caffael pysgod

Mae Prif Ddraen Chakbandi (CMD) yn ychwanegu llawer iawn o gemegau gwenwynig o amrywiaeth o ddiwydiannau a gwastraff carthffosiaeth i Afon Chenab sy'n ddigon da i leihau ei chynhyrchiant dŵr trwy newid y paramedrau ansawdd dŵr sy'n angenrheidiol ar gyfer twf fflora a ffawna dyfrol. Cynaeafwyd pysgod o Afon Chenab ym Mhacistan trwy ei hyd 30 km i fyny'r afon i waredu gwastraff CMD a 30 Km i lawr yr afon tuag at Head Trimu ar lledred 31.570 gradd N a hydred 72.534 gradd E. Casglwyd sbesimenau o gathod môr o'r ardaloedd hyn (04 safle) gan defnyddio rhwydi tagell. Casglwyd pysgod i'w rheoli o Ddeorfa bysgod Muzafarghar. Daethpwyd â'r sbesimenau hyn i Labordy Ymchwil, Adran Sŵoleg,

2.2. Samplu dŵr

Casglwyd samplau dŵr o bob safle cynhaeaf pysgod mewn poteli dŵr polyethylen 1.5L gyda chymorth samplwr dŵr. Cludwyd y samplau dŵr hyn i'r Labordy Ymchwil Pysgodfeydd a'u dadansoddi o fewn 24 awr ar gyfer metelau trwm dethol (Boyd, 1981). Canfuwyd crynodiad metelau gan gitiau metel (System Dadansoddi Spectroquant, Merck) a chan ddefnyddio sbectroffotomedr amsugno atomig fflam ocsid nitraidd/asetylene (cyfres 2000, High-Technologies Corporation, Chiyoda, Tokyo, Japan).

2.3. Histopatholeg

Mabwysiadwyd y weithdrefn ganlynol ar gyfer histopatholeg (Sultana et al., 2016). Gills, afu,aren, cafodd meinweoedd cyhyrau eu gosod mewn sera 4-6 awr. Roedd hydoddiant sefydlogi yn cynnwys alcohol absoliwt, fformaldehyd, ac asid asetig rhewlifol mewn cymhareb o (60ml: 30ml: 10ml), yn y drefn honno. Ar ôl sefydlogi, cafodd tafelli meinwe eu tagio a'u dadhydradu mewn graddau esgynnol alcoholig. Cliriwyd meinweoedd a'u mewnosod mewn mowldiau gyda chwyr paraffin am 45 i 60 munud ar 58 gradd yn y popty. Tynnwyd swigod a rhewwyd blociau cwyr gyda meinweoedd mewnosod i'w caledu. Torrwyd meinweoedd ar 2.5-darnau micron gan microtome. Rhoddwyd yr adrannau yn y popty ar 37 gradd am dros nos. Roedd meinweoedd wedi'u staenio â staen hematocsilin a'u gwrth-staenio ag Eosin. Roedd y rhannau hyn wedi'u mowntio gyda Jac y Neidiwr a chafodd y clawr ei osod ar sleidiau a'i roi mewn deorydd am un noson. Archwiliwyd sleidiau o dan ficrosgop a thynnwyd llun ohonynt yn 10X-60X. Gwelwyd y newidiadau histopatholegol trwy gymharu â rheolaeth a llenyddiaeth ddiweddar.

BYDD CISTANCHE YN GWELLA HEINTIAD YR AREN/ARENAU

3. Canlyniadau a Thrafodaeth

Canfuwyd bod yr holl baramedrau ansawdd dŵr a ddadansoddwyd CMD i lawr yr afon yn ddigon uwch na'r terfynau a ganiateir a ddiffinnir gan WHO (2013) (Tabl 1). Dangosodd sbesimenau arbrofol nifer o newidiadau mewn tagellau, afu,arena strwythur y cyhyrau. Mae pigau'n gweithredu fel rhwystr yn erbyn tocsinau, mae'n lleihau'r nifer sy'n cymryd tocsinau a'u chwyddo mewn organau eraill. Oherwydd cyswllt rheolaidd â thagellau dŵr, mae tagellau'n agored yn uniongyrchol i lygredd. Roedd sbesimenau o gathod môr a gasglwyd o Afon Chenab i lawr yr afon CMD yn nodi ymasiad o lamellae eilaidd, gwagoli a hypertroffedd yn y tagellau (Ffigur 1). Wrth godi epithelial cynradd (Ffigur 2) a tagell lamellae ymdoddedig, gwelwyd ymdreiddiad celloedd llidiol a hypertroffedd mewn cathbysgod a gasglwyd o Afon Chenab i fyny'r afon i geg CMD (Ffigur 3). Nododd sbesimen rheoli o Ictalurus punctatus histoleg arferol tagellau sy'n nodi lamellae sylfaenol tagellau sy'n cynnwys mwcws, epitheliwm a bwa tagell (Ffigur 4) ac epitheliwm tagell yn cynnwys celloedd epithelial (Ffigur 5). Roedd capilarïau gwaed a chelloedd piler hefyd yn cael eu hystyried yn normal mewn lamellae eilaidd (Ffigur 6).

Mae'r afu yn organ fawr sy'n cyflawni swyddogaethau metabolaidd. Mae metelau trwm yn cronni yn yr afu ac yn cynhyrchu gwahanol anomaleddau ynddo. Dangosodd histopatholeg oddi ar iau sbesimen i lawr yr afon ddirywiad hepatocytes a chynnydd yn nifer y mitocondria (Ffigur 7). Dangosodd yr un meinweoedd necrosis ac ymlediad sinwsoid (Ffigur 8). Gwelwyd llwch mewn hepatocytes hefyd mewn sbesimenau o gathbysgod a gasglwyd o lan yr afon i fynedfa CMD i Afon Chenab (Ffigur 9). Roedd sbesimenau o bysgod rheoli yn dangos bod gan hepatocytes normal, rhydwelïau hepatig a dwythellau casglu bustl lobwlau gwahanol (Ffigur 10).Arennauchwarae rhan fawr mewn ysgarthiad a homeostasis. Fodd bynnag,arendangosodd meinweoedd cathbysgod a gasglwyd o CMD i lawr yr afon fod mwy o le i'r bwmyn a glomerwlws cyfyngedig (Ffigur 11).Arennaudangosodd meinweoedd sbesimenau i fyny'r afon gelloedd tiwbaidd niwclear ac yn ddinistriolarennoltiwbiau (Ffigur 12) a hemorrhage (Ffigur 13). Roedd y sbesimen rheoli yn dangos neffronau normal gyda normalarennolcorpwscles, capilarïau Bowmen arferol o amgylch y glomerwlws a ffurfio tufftiau glomerwlws normal (Ffigur 14).

gallai fod oherwydd cynnydd mewn gweithgaredd resbiradol ensymatig. Canfuwyd y tebygrwydd mewn canlyniadau gan Vasanthi et al. (2013) yn achos Magill cephalus oherwydd llygredd metel trwm yn Aber Ennore. Canfuwyd cydlyniad yn y canlyniadau gan Marchand et al. (2012), Rajeshkumar et al. (2015), a Sina et al. (2015). Canfuwyd paraleleliaeth mewn canlyniadau gan Abdel-Moneim et al. (2012) amgodiad o hysbysiadau Orechomius. Pwysleisiodd fod gwagio hepatocyte a necrosis mewn meinweoedd parenchymal yn cael eu hysgogi oherwydd dŵr wedi'i halogi â metelau trwm o dri lleoliad amrywiol o ddyfrhau Al-Hassa. Mae llid yn amharu ar lif gwaed gwythiennol porthol, a all gael ei arwain at ymledu sinwsoid.

Histopatholeg yarendangos necrosis ar epitheliwm tiwbaidd, dinistriolarennoltiwbylau, hemorrhage, mwy o le bowmen a glomerwlws cyfyngedig. Adroddwyd hefyd am astudiaeth debyg gan Camargo a Martinez (2007) yn achos prochliodus lineatus oherwydd gweithgareddau anthropogenig o elifion amaethyddol, diwydiannol a domestig i nant Apertados. Gallai necrosis epitheliwm tiwbaidd fod oherwydd tocsin, anaf a haint, a arweiniodd at farwolaeth celloedd heb ei reoleiddio. Cafwyd canlyniadau tebyg gan Sarasquete et al. (2003) yn achos Mugil a Barbus. Pwysleisiwyd y crebachu glomerwlws a chynhyrchwyd drychiad gofod capsiwl bowman gan ollyngiad achlysurol Lindane yn Afon Barbate. Nododd Dhevakrishnan a Zaman (2012) amgáu L. Rohita fod dirywiad mewnarennolroedd tiwbylau, necrosis a dirywiad glomerwlws o ganlyniad i ddŵr diwydiannol heb ei drin, tra gallai hemorrhage gael ei achosi oherwydd camffurfiad y gwaed.arennolrhydweli neu yn bodoli eisoesarennoltiwmorau. Adroddodd yr astudiaeth gan Mohamed (2009) yn achos Tilapia zillii a Solea Vulgaris a welodd ddirywiad mewn tiwbiau arennol, hemorrhage, necrosis yn yr ardal ffocws ac atroffi mewn glomeruli wedi'i achosi gan wastraff amaethyddol, diwydiannol a domestig a ollyngwyd i lyn Qarun yn yr Aifft. Adroddwyd canfyddiadau tebyg hefyd gan Yokote (1982) rhag ofn Cyprinus Carpio pan oedd yn agored i garthffosiaeth.

BYDD CISTANCHE YN GWELLA POEN YN YR AREN/ARENIAD

Yn yr astudiaethau hyn, dangosodd meinwe cyhyrau catfish ofod intramyofibril, dirywiad, oedema, necrosis ac atroffi yn y cyhyrau. Nodwyd anghysondebau tebyg hefyd gan El-Shebly ac Elbaghdady (2011) yn ddwys o Ewinedd tilapia lle gwnaethant dynnu sylw at feysydd ffocws necrosis, atroffi a dirywiad gwagol mewn bwndel cyhyrau oherwydd llygredd olew i Afon Nîl. Adroddwyd gan Ullah et al bod bwndel cyhyrau yn tewychu a gwahanu ag oedema mewnol, dirywiad gwagol, atroffi a man canolog necrosis oherwydd dŵr halogedig â metelau trwm mewn pyllau yn Ludhiana. (2014) yn achos C. Carpio. Adroddwyd am anghysondebau tebyg gan Patnaik et al. (2011) rhag ofn C. Carpio. Gall oedema gael ei achosi oherwydd ymdreiddiad hylif i feinweoedd cyhyrau sy'n cynhyrchu chwyddo yn y cyhyrau. Adroddodd Mohamed (2009) yr anomaleddau canlynol hefyd o ganlyniad i wahanol lygryddion. Astudiwyd sawl newid histopatholegol gan Dhevakrishnan a Zaman (2012) mewn perthynas â L. Rohita. Pwysleisiwyd bod necrosis, oedema mewngyhyrol a byrhau bwndel cyhyr yn cael eu cynhyrchu oherwydd llygredd diwydiannol. Gwelwyd oedema, hollti cyhyr a dirywiad hyaline gan Ibrahim (2013) yn achos Clarias gariepinus oherwydd dŵr halogedig o ddraen El-Rahawy yn yr Aifft. Bydd y canfyddiadau hyn yn ddefnyddiol wrth asesu monitro amgylcheddol a chynllunio strategaethau i liniaru effeithiau eco-wenwynegol chwyddo llygredd mewn dŵr croyw, ffawna dyfrol sy'n benodol i bysgod ac yn anuniongyrchol i boblogaethau dynol.