Trawsblannu Arennau

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

RHAGARWEINIAD

Arennautrawsblaniadyw'r dewis gorau ar gyfer cam olaf triniaeth clefyd cronig yn yr arennau. Ar hyn o bryd, mae gwrthodiad wedi'i gyfryngu gan wrthgyrff (AMR), a nodweddir gan bresenoldeb gwrthgorff penodol gan roddwr (DSA) wedi'i gyfeirio at antigen leukocyte dynol (HLA), wedi dod i'r amlwg fel prif achos difrod cronig i'r impiad arennau, sy'n cyfyngu i raddau helaeth ar oroesiad hirdymor yr impiad. (1, 2). Fodd bynnag, mae cynlluniau presennol wedi methu â chyflawni canlyniadau addawol yn y clinigoltrin AMB (1, 3, 4). Felly, mae angen brys i nodi biofarcwyr posibl a ffactorau risg ar gyfer ymwrthedd gwrthficrobaidd ar ôl trawsblannu aren, sy'n hanfodol ar gyfer triniaeth a chanlyniadau cleifion.

Mae tystiolaeth gronnus yn awgrymu, o dan amgylchiadau llidiol, y gall celloedd B wahaniaethu i plasmablastau sy'n cuddio gwrthgyrff a chelloedd B rheoleiddiol (Bregs), sef is-set cell B arbennig sy'n secretu cytocinau gwrthimiwnedd, yn enwedig interleukin (IL)-10. (1, 5–7). Felly, mae plasmablasts yn cynhyrchu alloantibodies, gan arwain at AMB, tra bod Bregs yn arddangos swyddogaethau imiwn-reoleiddio ac yn helpu i ysgogi homeostasis imiwn. Felly, adroddwyd bod cysylltiad agos rhwng Bregs a'r ymwrthedd i ymwrthedd gwrthficrobaidd ar ôl trawsblaniadau aren (1, 8, 9).

Er nad yw marcwyr wyneb penodol is-setiau Breg wedi'u nodi eto mewn bodau dynol (1), mae astudiaethau blaenorol wedi nodi pedwar is-boblogaeth gyffredin o Bregs: cof Bregs (mBregs) a ddiffinnir gyda'r CD19 ynghyd â CD24 ynghyd â CD27 plws (10), Bregs trosiannol ( tBregs) wedi'i ddiffinio gyda CD19 plws CD24 plws CD38 plws (10, 11), IL-10-cof cynhyrchu Bregs (IL-10 plws mBregs) wedi'i ddiffinio gyda CD19 plws CD24 plws CD27 plws IL-10 plws (12), ac IL{-10-cynhyrchuBregs trosiannol (IL-10 plws tBregs) wedi'i ddiffinio gyda CD19 plws CD24 plws CD38 plws IL-10 plws (13). Mae Laguna-Goya et al. adroddwyd bod y gostyngiad mewn tBregs ac IL-10 ynghyd â tBregs yn gysylltiedig yn gadarnhaol â gwrthodiad acíwt ar ôl trawsblaniadau aren (14). Fodd bynnag, mae Zhou et al. adroddodd bod mBregs, yn hytrach na tBregs, wedi gostwng yn sylweddol mewn pum claf â gwrthodiad acíwt ar ôl trawsblaniad afu (10). Ar ben hynny, mae Shabir et al. adrodd nad oedd tBregs yn gysylltiedig â gwrthodiad alografft arennau mewn tri chlaf AMR (15). Yng ngoleuni'r canlyniadau anghyson hyn, mae angen egluro ymhellach pa isboblogaeth Breg sy'n chwarae rhan hanfodol mewn cleifion AMB ar ôl trawsblaniadau aren.

Yn yr astudiaeth bresennol, cymharwyd y cyfrannau o bedwar is-boblogaeth o Bregs cylchredol ymhlith y grwpiau iach, sefydlog (ST), ac AMB. Yna, penderfynwyd bio-ddosbarthiad cell B, IL-10, a chemocinau yn impiadau arennau cleifion iach, ST, ac AMR. Ymhellach, ymchwiliwyd i ddeinameg y pedwar is-boblogaeth o Bregs sy'n cylchredeg mewn cleifion ST am 90 diwrnod ar ôl llawdriniaeth. Mae'r canlyniadau presennol hyn, ynghyd â'r rhai a adroddwyd gan astudiaethau blaenorol (1), yn awgrymu mai cylchredeg IL-10 ynghyd â mBregs ac IL-10 ynghyd â tBregs yw'r isboblogaethau Breg mwyaf blaenllaw sy'n cyfrannu at ymwrthedd ymwrthedd gwrthficrobaidd.

Powdwr Cistanche tubulosayn atalafiechydon yr arennau, cliciwch yma i gael y sampl

Geiriau allweddol:Ffenoteipio Breg, trawsblannu aren, gwrthodiad trwy gyfrwng gwrthgyrff, homeostasis, dynameg

DEUNYDDIAU A DULLIAU

Cleifion a Grwpiau

Darparodd pob claf gydsyniad gwybodus wedi'i lofnodi cyn yr astudiaeth. Cymeradwywyd yr astudiaeth bresennol gan Bwyllgor Moeseg Ysbyty Cysylltiedig Cyntaf Prifysgol Zhengzhou (2018-KY-72). Rhif cofrestru treial clinigol yw ChiCTR1900022501.

Rhannwyd y cleifion hyn yn dri grŵp: (1) grŵp rheoli iach (iach, n=9): rhoddwyr arennau iach o fewn 18-55 oed (yn rhydd o afiechyd), sy'n cynnwys brodyr a chwiorydd a phriod y derbynwyr; (2) derbynwyr â grŵp swyddogaeth impiad sefydlog (ST, n=25): cleifion o fewn 18-55 oed, yr oedd eu swyddogaeth arennau yn sefydlog (yn rhydd o haint neu wrthodiad cyn ac ar ôl trawsblannu aren) yn ystod yr apwyntiad dilynol cyfnod (Yn fwy na neu'n hafal i 6 mis); (3) derbynwyr ag AMR grŵp (AMR, n=18): cleifion o fewn 18-55 oed, a gafodd ddiagnosis o AMR. Cafwyd grafftiau arennau o dderbynyddion gyda ST ac AMRrhoddwr aren iachs. Cafodd y diagnosis gwahaniaethol rhwng y grwpiau ST ac AMR ei gadarnhau gan ddau batholegydd arennau, yn ôl consensws Banff 2017 (3, 16).

Gwaed Ymylol, Meinweoedd Arennau, a Samplau Celloedd

Casglwyd y samplau gwaed ymylol o'r grŵp iach cyn llawdriniaeth, ac ar 1, 7, a 14 diwrnod ar ôl llawdriniaeth. Casglwyd samplau a gafwyd gan y grŵp ST cyn y llawdriniaeth, ac ar 1, 7, 14, 30, a 90 diwrnod ar ôl llawdriniaeth. Casglwyd samplau a gafwyd gan y grŵp AMB pan gafwyd gwrthodiad (cyn y therapi gwrth-wrthod ar gyfer AMB). Roedd celloedd mononiwclear gwaed ymylol (PBMCs) yn cael eu hynysu oddi wrth

5 ml o waed gan centrifugation graddiant Ficoll-Paque a'i gadw gyda 10 y cant dimethyl sulfoxide (Solarbio Inc., Beijing, Tsieina) mewn nitrogen hylifol.

Casglwyd sbesimenau biopsi arennol nodwydd craidd a gafwyd o'r grŵp iach cyn llawdriniaeth ar gyfer biopsïau arennau rhoddwr amser-sero. Casglwyd sbesimenau biopsi arennol nodwydd graidd a gafwyd gan y grŵp ST 90 diwrnod ar ôl y llawdriniaeth ar ôl i weithrediad eu harennau sefydlogi oherwydd y biopsi protocol. Yng ngoleuni'r ail nam ar y tyllau yn swyddogaeth yr arennau, gwrthododd pob claf AMB y biopsi arennol craidd nodwydd ar ôl therapi gwrth-wrthod ar gyfer AMB. Felly, dim ond pan gafwyd gwrthodiad (cyn y therapi gwrth-wrthod ar gyfer AMB) y casglwyd sbesimenau biopsi arennol nodwydd craidd o'r grŵp AMB. Darparodd cyfanswm o dri rhoddwr iach, naw claf ST, a naw claf AMR gydsyniad gwybodus wedi'i lofnodi cyn y biopsi arennol nodwydd craidd. Gwrthododd y chwe rhoddwr iach sy'n weddill, 16 o gleifion ST, a naw claf AMR y biopsi arennol nodwydd craidd oherwydd ofn gwaedu mawr mewn cysylltiad â'r biopsi. Cafodd celloedd sengl eu hynysu o sbesimenau biopsi arennol nodwydd craidd tri rhoddwr iach, tri chlaf ST, a thri chlaf AMR, trwy gyfuno daduniad mecanyddol â diraddiad ensymatig y matrics allgellog, sy'n cynnal cyfanrwydd strwythurol meinweoedd (Pecyn Datgysylltiad Meinwe Aml 1; Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, yr Almaen). Cadwyd celloedd yr arennau â 10 y cant deumethyl sulfoxide (Solarbio Inc., Beijing, Tsieina) mewn nitrogen hylifol, ac roedd y sbesimenau biopsi arennol nodwydd craidd sy'n weddill wedi'u hymgorffori mewn paraffin ar 4 gradd.

Cytometreg llif

Cafodd celloedd sy'n cael eu storio mewn nitrogen hylifol eu dadmer yn gyflym mewn baddon dŵr wedi'i osod ar 37 gradd am 3 munud. Deorwyd cyfanswm o 2–3 × 106 PBMC gyda choctel ysgogi celloedd gwanhau 1640 Sefydliad Coffa Roswell Park (500 ×), a oedd yn cynnwys y PMA (Phorbol 12-Myristate 13-Acetate), a ionophore calsiwm (Ionomycin), ac atalyddion trafnidiaeth protein Brefeldin A a Monensin, (eBioscience, San Diego, CA), ar 37 gradd gyda 5 y cant CO2 am 5 h. Cafodd celloedd marw eu heithrio trwy eu staenio ag 7-Aminoactinomycin D (Thermo Fisher Scientific, Pittsburgh, PA, UDA), a chafodd marcwyr wyneb Bregs eu staenio â gwrthgyrff wedi'u labelu â fflworochrome (CD19 gwrth-ddynol Brilliant Violet 421™, phycoerythrin). (PE)/Cy7 gwrth-ddynol CD24, Alexa FluorR647 gwrth-ddynol CD27, Alexa FluorR488

CD38 gwrth-ddynol, a CD45 gwrth-ddynol Brilliant Violet 510™; y rheolyddion isoteip priodol: Llygoden Violet Gwych 421™

IgG1 k Rheoli Isoteip, PE/Cy7 Llygoden IgG2a k Rheoli Isoteip, Alexa FluorR647 Llygoden IgG1 k Rheoli Isoteip, Alexa FluorR488 Llygoden IgG1 k Rheoli Isoteip, a Fioled Gwych

510™ Llygoden IgG1 k Rheoli Isoteip; Biolegend, San Diego, CA,

UDA) am 30 munud ar 4 gradd, gydag amddiffyniad rhag golau. Ar gyfer y staenio mewngellol, cafodd celloedd eu staenio â gwrthgyrff yn targedu cytocinau mewngellol Bregs (PE gwrth-ddynol IL-10; y rheolaethau isotype priodol: PE Rat IgG1 k Rheoli Isoteip; Biolegend, San Diego, CA, UDA) ar gyfer 30 munud ar dymheredd ystafell, gyda diogelwch rhag golau. Dadansoddwyd y celloedd wedi'u labelu gan ddefnyddio offeryn BD Biosciences Canto II (BD Biosciences, UDA). Cafwyd cyfanswm o 100,000 o ddigwyddiadau yn y giât lymffocyt. Perfformiwyd y dadansoddiad data gan ddefnyddio meddalwedd FlowJo (Tree Star, San Carlos, CA, UDA).

Imiwnohistocemeg

Immunohistochemistry staining of CD19, IL-10, and C-X-C motif chemokine 13 (CXCL13) in kidney tissues was performed, respectively. Brieflfly, 4 mm sections obtained from formalin-fifixed, paraffifin-embedded kidney tissue samples were incubated with 1:500-diluted anti-CD19, 1:1000-diluted antiCXCL13 (rabbit anti-human; Abcam, Cambridge, UK), and 1:500-diluted anti-IL-10 (rabbit anti-human; Absin, Shanghai, China) primary antibodies overnight at 4°C, followed by Horseradish Peroxidase-conjugated 1:20,000-diluted goat antirabbit secondary antibody (Abcam, Cambridge, UK) for 1 h at room temperature and then 3,3′-diaminobenzidine for another 10 min. DAPI appears in blue. Immunohistochemistry images were acquired with an Aperio ScanScope AT Turbo (Aperio, Vista, CA). Numbers of CD19, IL-10, and CXCL13 positivities were scored as follows: 0 positivity, score = zero; 1–5 positivities, score = one; 6–10 positivities, score = two; 11–20 positivities, score = three; >20 positif, sgôr=pedwar

Dadansoddiad Ystadegol

Yn yr astudiaeth rheoli achosion nythu, cyflawnwyd dadansoddiad cromlin nodwedd gweithredu derbynnydd (ROC) gan MedCalc v18.11.3. Perfformiwyd gweddill y dadansoddiadau ystadegol gan ddefnyddio IBM SPSS 21.0. Mynegwyd data mesur a ddosberthir fel arfer gyda homogenedd o amrywiant fel gwyriad safonol cymedrig ± (x ± s) a'u dadansoddi trwy brawf-t sampl annibynnol (cymhariaethau rhwng grwpiau) neu ddadansoddiad un ffordd o amrywiant (cymhariaethau rhwng grwpiau). Mynegwyd data mesur nad oedd ganddo ddosbarthiad arferol neu homogenedd amrywiant mewn canolrif gydag amrediad rhyngchwartel (IQR) a'i ddadansoddi gan brawf Mann-Whitney U (cymhariaethau rhwng grwpiau) neu'r prawf Kruskal-Wallis (cymhariaethau ymhlith grwpiau). Dadansoddwyd data cyfrif yn ôl prawf c2, prawf c2 wedi'i gywiro, neu union brawf Fisher, yn ôl yr angen. Mesurau ailadroddus unffordd dadansoddiad o amrywiant

yn cael ei ddefnyddio ar wahanol adegau. P-gwerthoedd<0.05 were="" considered="" statistically="">

CANLYNIADAU

Nodweddion Sylfaenol y Cleifion

Cynhwyswyd cyfanswm o naw rhoddwr iach, 25 o gleifion ST, a 18 o gleifion ymwrthedd gwrthficrobaidd yn yr astudiaeth bresennol. Fel y dangosir yn Nhabl 1, nid oedd rhyw y derbynwyr, oedran, mynegai màs y corff (BMI), neffropathi cychwynnol, diffyg cyfatebiaeth HLA, CNIs, amser isgemia cynnes, ac amser isgemia oer yn amrywio rhwng grwpiau, na rhwng grwpiau (P > 0.05, i bawb). Fodd bynnag, roedd mynychder positifrwydd gwrth-ddosbarth I a gwrth-ddosbarth II DSA yn y grŵp AMB yn sylweddol uwch, o gymharu â'r rhai yn y grŵp ST (P < 0.001="" ar="" gyfer="" gwrth="" -dosbarth="" i="" dsa,="" p="">< 0.001;="" p="0.001" ar="" gyfer="" gwrth-ddosbarth="" ii="" dsa).="" ymhellach,="" o="" gymharu="" â="" chleifion="" st,="" roedd="" gan="" gleifion="" ymwrthedd="" gwrthficrobaidd="" sgorau="" sylweddol="" uwch="" mewn="" twbwlitis="" (t),="" llid="" interstitial="" (i),="" a="" capillaritis="" periwbwl="" (ptc)="" (p="0.012" ar="" gyfer="" t;="" p=""><0.001 ar="" gyfer="" i="" a="" ptc)="" ),="" yn="" ôl="" dosbarthiad="" banff="" (normal,="" sgôr="0;" ysgafn,="" sgôr="1;" cymedrol,="" sgôr="2;" difrifol,="" sgôr="3))" (3,="" 16)="" (="" tablau="" atodol="" 1="" a="">

echinacoside cistanchecanys diabetes