Cynhyrchu Lipase Gan Yarrowia Lipolytica mewn Eplesu Solid-State Gan Ddefnyddio Sgil-gynhyrchion Ffrwythau Amazon A Chinio Ffa Soya Fel Swbstrad Rhan 2

2.5. Hydrolysis Olew Pysgod

Mae lipasau wedi'u defnyddio wrth hydrolysis asidau brasterog i grynhoi asidau brasterog amlannirlawn (PUFAs) [44,45]. Prif fantais cymhwyso lipasau wrth gynhyrchu asidau brasterog aml-annirlawn yw penodoldeb yr ensym ac adweithiau sy'n digwydd o dan amodau tymheredd cymedrol, sy'n ffafrio cynnal strwythur PUFAs [44]. Mae defnyddio lipas yn well na dulliau cemegol gan eu bod yn darparu glyseridau o gynnyrch isel a phurdeb [46]. Rôl lipasau yn y hydrolysis dethol o asidau brasterog dirlawn (SFAs) ac asidau brasterog mono-annirlawn (MUFAs) o triacylglyserols (TAGs) yw cynhyrchu glyseridau sy'n llawn PUFAs. Egwyddor y dull hwn yw'r rhwystr sterig a achosir gan gyfluniad moleciwlaidd y bondiau dwbl carbon-cis mewn PUFAs sy'n achosi plygu cadwyni asid brasterog. Felly, nid yw'r safleoedd gweithredol ensymatig yn cyrchu bondiau ester yr asidau brasterog hyn gyda'u sgerbydau glyserol [47,48]. Mae buddion niferus yn gysylltiedig â mewnosod asidau brasterog yn y diet fel datblygiad plant, atal clefydau cardiofasgwlaidd, canser, ac anhwylderau meddwl amrywiol (iselder, anhwylder diffyg canolbwyntio, gorfywiogrwydd), yn ogystal â'r potensial gwrthlidiol a gorbwysedd posibl. rheoli [49].

Gall glycoside cistanche hefyd gynyddu gweithgaredd SOD ym meinweoedd y galon a'r afu, a lleihau'n sylweddol y cynnwys lipofuscin a MDA ym mhob meinwe, gan ysbeilio radicalau ocsigen adweithiol amrywiol (OH-, H₂O₂, ac ati) yn effeithiol a diogelu rhag difrod DNA a achosir. gan OH-radicaliaid. Mae gan glycosidau ffenylethanoid Cistanche allu chwilota cryf o radicalau rhydd, gallu lleihau uwch na fitamin C, gwella gweithgaredd SOD mewn ataliad sberm, lleihau cynnwys MDA, a chael effaith amddiffynnol benodol ar swyddogaeth pilen sberm. Gall polysacaridau cistanche wella gweithgaredd SOD a GSH-Px mewn erythrocytes a meinweoedd yr ysgyfaint llygod senescent arbrofol a achosir gan D-galactos, yn ogystal â lleihau cynnwys MDA a cholagen yn yr ysgyfaint a phlasma, a chynyddu cynnwys elastin, wedi effaith sborion dda ar DPPH, ymestyn amser hypocsia mewn llygod senescent, gwella gweithgaredd SOD mewn serwm, ac oedi dirywiad ffisiolegol yr ysgyfaint mewn llygod senescent arbrofol Gyda dirywiad morffolegol cellog, mae arbrofion wedi dangos bod gan Cistanche y gallu gwrthocsidiol da ac mae ganddo'r potensial i fod yn gyffur i atal a thrin clefydau heneiddio'r croen. Ar yr un pryd, mae gan echinacoside yn Cistanche allu sylweddol i ysbeilio radicalau rhydd DPPH ac mae ganddo'r gallu i ysbeilio rhywogaethau ocsigen adweithiol ac atal diraddio colagen a achosir gan radical rhad ac am ddim, ac mae hefyd yn cael effaith atgyweirio da ar ddifrod anion radical rhad ac am ddim thymin.

Cliciwch ar Cistanche Tubulosa

【Am ragor o wybodaeth:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Gall cynhyrchu echdynion ensymau i'w defnyddio mewn prosesau fel hydrolysis fod yn dasg ddrud. Felly, gall ymchwilio i ddeunyddiau crai sy'n lleihau cost cynhyrchu ddarparu dewis arall diddorol. Mae defnyddio biocatalyst solet yn ddymunol oherwydd gellir ailddefnyddio'r biocatalyst solet hwn mewn adweithiau ensymatig, yn ogystal â chael sefydlogrwydd storio rhagorol ar dymheredd ystafell, heb gostau rheweiddio, a rhwyddineb cludo [41]. Ni chafwyd unrhyw adroddiadau ar ddefnyddio biocatalyst solet o Yarrowia lipolytica i gynhyrchu PUFAS trwy hydrolysis ensymatig olew pysgod. Felly, astudiwyd cymhwyso'r echdyniad ensymatig crai a'r biocatalyst solet a gynhyrchwyd gan ddefnyddio cacen olew andiroba a blawd ffa soia (50:50) i werthuso cymhwysiad posibl ensymau yn hydrolysis olew pysgod i gynhyrchu asidau brasterog amlannirlawn ymhellach mewn proses addas. (Ffigur 6). Mae'n bosibl arsylwi gradd uchel o hydrolysis (DH) mewn amseroedd ymateb byrrach gan ddefnyddio biocatalyst solet (63, 70.8, 72.5, a 74.7 y cant) na'r echdyniad ensymatig (47.5, 61.5, 66.5, a 74.8 y cant) ar ôl 24, 48, 72 h, a 144 h, yn y drefn honno.

Mae'r broses hydrolysis ensymatig yn cael ei chymhwyso'n gyson i gael asidau brasterog amlannirlawn crynodedig. Mae Gao et al. [50] cafodd lipas a ddefnyddir yn hydrolysis olew penfras a chynnwys EPA a DHA eu gwella 3.24-plyg ac 1.98-plyg, yn y drefn honno. Mae Aarthi et al. [20] defnyddio lipas crynodedig (1000 U/mL) yn y hydrolysis o olewau pysgod a hefyd yn canfod cyfradd hydrolysis uwch na 60 y cant ar ôl 72 h. Yn y gwaith hwn, cyflawnwyd gwell graddau hydrolysis gan ddefnyddio detholiad ensymatig crai o lipas (hy, heb buro) wrth gymharu'r un amser hydrolysis. Mae awduron eraill wedi astudio hydrolysis olew afu Musteleus mustelus ac olew blubber sêl yn adrodd 75 y cant a 70 y cant o hydrolysis ar ôl 24 a 9 h o adwaith, yn y drefn honno [25,26].

Mae Martins et al. [51] defnyddio lipas masnachol o Burkholderia cepacia (Amano) ar gyfer hydrolysis olew pysgod ac ar ôl 48 h o adwaith, cafodd 55.6 y cant o DHA o'i gymharu â'r uchafswm cynnwys a gyfrifwyd. Yn ein gwaith, mewn astudiaeth ragarweiniol, cawsom 70.8 y cant o hydrolysis ar ôl 48 h o adwaith gan ddefnyddio'r biocatalyst solet.

Hyd yn hyn, mae canfyddiadau o'r fath wedi awgrymu hyfywedd defnyddio sgil-gynhyrchion i gynhyrchu lipas mewn eplesu cyflwr solet fel ffordd o liniaru difrod amgylcheddol, gwerthuso sgil-gynhyrchion, a chost-effeithiolrwydd. Yn ogystal, mae'r canlyniadau'n dangos cymhwysiad posibl yr ensym lipas yn hydrolysis olew pysgod i gynhyrchu asidau brasterog amlannirlawn ymhellach mewn proses addas.

Er gwaethaf bod yn doreithiog mewn sgil-gynhyrchion amaeth-ddiwydiannol cost isel, mae pennu a safoni cyfansoddiad, yn ogystal ag amcangyfrif cost ar gyfer cael y dyfyniad ensymatig a biocatalyst solet o sgil-gynhyrchion amaeth-ddiwydiannol cost isel yn dal yn her, ond yn hynod ddibynnol ar y math o sgil-gynnyrch, natur dymhorol, a maint a gynhyrchir yn ogystal â'r broses a ddefnyddir, a lleoliad daearyddol, ymhlith ffactorau eraill. Felly, rhaid goresgyn materion megis cymhlethdod y gadwyn a'i chostau logistaidd, y defnydd o brosesau cymhleth a chostus, defnydd uchel o ynni, a materion rheoleiddio, ymhlith eraill. Yn yr ystyr hwn, rhaid i brosesu sgil-gynhyrchion oresgyn nifer o rwystrau cyn dod yn economaidd hyfyw, gan gynnwys yr angen i brosesu llawer iawn o ddeunyddiau crai, y gallu i brosesu deunyddiau crai heterogenaidd, logisteg integredig gyda gwahanol ddiwydiannau prosesu, a'r posibilrwydd o integreiddio. proses yn yr uned brosesu i ganiatáu ar gyfer cynhyrchu cynhwysion gwerth uchel, ymhlith eraill [52-55].

3. Defnyddiau a Dulliau

3.1. Deunydd

Prynwyd pryd ffa soia gan Caramuru Alimentos (Goiás, Brasil). Darparwyd cacen olew Andiroba a gynhyrchwyd o echdynnu olew gan Beraca Ingredientes Naturais (Pará, Brasil). Roedd y ddau swbstrad wedi'u safoni ynghylch granulometreg (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).

3.2. Micro-organeb ac Amodau Tyfu Inocwlwm

Roedd Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682, wedi'i ynysu o aber ym Mae Guanabara, Rio de Janeiro, Brasil [56] yn cael ei drin ar 28 ◦C yn YPD - cyfrwng agar (w / v: dyfyniad burum 1 y cant; pepton, 2 y cant; glwcos, 2 y cant; ; agar, 3 y cant). Tyfwyd y celloedd mewn cyfrwng hylif sy'n cynnwys echdyniad burum 1 y cant (w / v), peptone, 2 y cant (w / v), a glwcos 2 y cant (w / v) am 72 h, 160 rpm ar 28 ◦C.

3.3. Nodweddu Sgil-Gynnyrch Amaeth-Diwydiannol

Penderfynwyd ar gyfansoddiad ffisegol-cemegol y pryd ffa soia a chacen olew andiroba o ran lleithder, protein, carbohydrad, lludw, detholiad ether, ffibr anhydawdd, a chynnwys ffibr hydawdd, yn ôl y fethodoleg a adroddwyd gan Gymdeithas y Cemegwyr Dadansoddol Swyddogol (AOAC). ) [57]. Yn ogystal, gan fod cynhyrchu lipas gan Y. lipolytica yn cael ei effeithio gan awyru [58], gwerthuswyd mandylledd y gwely yn SSF yn ôl Hafaliad (1), lle ε yw'r mandylledd (a fynegir yn aer·m−3 gwely m3); ρdrysolid yw dwysedd ymddangosiadol y sampl sych (kg·m−3 ); a ρwetsolid yw dwysedd y sampl ar ôl adio dŵr (kg·m−3 ) [58].

3.4. Cynhyrchu Lipase gan SSF

Paratowyd y matrics solet sy'n cynnwys pryd ffa soia a chacen olew andiroba cyn y brechiad yn yr adweithydd math hambwrdd gyda gwahanol gyfrannau o'r swbstrad a'i awtoclafio ar 121 ◦C am 20 min. Y paramedrau proses sefydlog a ddefnyddiwyd ar gyfer cynhyrchu lipas oedd lleithder o 55 y cant a chrynodiad inocwlwm o 0.71 mg biomas sych / swbstrad g [24]. Deorwyd yr adweithyddion mewn siambr Biocemegol y Galw am Ocsigen (BOD) ar 28 ◦C a chymerwyd samplau aberthol (hy, un adweithydd tebyg i hambwrdd ar gyfer amser samplu) trwy gydol yr eplesiad i'w dadansoddi.

Gwerthuswyd SSF gan ddefnyddio gwahanol gyfuniadau o gacen olew andiroba a blawd ffa soia ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 a 100:0) ar wahanol adegau (0, 12, 24, 32, a 48 h). Wedi hynny, gwerthuswyd ychwanegiad y matrics solet sy'n cynnwys cacen olew andiroba a blawd ffa soia (50:50) trwy ychwanegu 1.5 (y cant w / v) olew soi dros amser (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, a 72 h) i gael cynnydd mewn gweithgaredd lipolytig. Yn ogystal, profwyd presenoldeb Tween 80 (0.001 y cant w / v) yn y cyfrwng eplesu sy'n cynnwys 1.5 (y cant w / v) olew ffa soia. Cafodd eplesu ei fonitro trwy bennu gweithgaredd lipas a phroteas yn ogystal â'r lleithder a'r pH (a ddisgrifir yn Is-adran "3.6. Penderfyniadau dadansoddol").

3.5. Echdynnu Ensym a Chynhyrchu Biocatalyst Solid

Perfformiwyd yr echdyniad ensymau trwy ychwanegu 50 mL o byffer potasiwm ffosffad 50 mM pH 7.0 yn y bio-adweithyddion ac yna deor ar 37 ◦C, 200 rpm, am 20 munud. Yn dilyn hynny, cafodd y deunydd wedi'i eplesu sy'n hongian yn y byffer ei wasgu gan ddefnyddio stwnsiwr gyda syllu a'i allgyrchu ar 3000 rpm am 5 munud. Cafwyd y biocatalyst solet o rewi-sychu'r màs cyfan a gafwyd ar ddiwedd y broses eplesu am 72 h a'i storio ar dymheredd ystafell am 7 mis i wirio'r sefydlogrwydd ensymatig.

3.6. Penderfyniadau Dadansoddol

3.6.1. Gweithgaredd Lipas

Perfformiwyd gweithgaredd lipase gan ddefnyddio'r dull a gynigiwyd gan Freire et al. [59]. Cafodd cyfrwng yr adwaith ei emwlsio mewn homogenizer Ultra Turrax (IKA) gan ddefnyddio 5 y cant (w/v) olew olewydd a 5 y cant (w/v) gwm Arabeg mewn byffer ffosffad 100 mM (pH). 7.0). Ychwanegwyd dyfyniad ensymatig (1 mL) neu 0.5 g o'r biocatalyst solet at 19 ml o'r cymysgedd adwaith a'i ddeor am 20 munud, 200 rpm ar 37 ◦C. Amharwyd ar yr adwaith trwy ychwanegu 20 ml o doddiant aseton-ethanol a chafodd yr asidau brasterog rhydd eu titradu mewn titrator awtomatig (Metrohm 916 - Ti-Touch) gan ddefnyddio hydoddiant 0.04 mol / L NaOH. Diffiniwyd un uned o actifedd lipas (U) fel swm yr ensym sy'n cynhyrchu 1 µmol o asid brasterog y funud, o dan yr amodau assay.

3.6.2. Gweithgaredd Proteas

Cafodd gweithgaredd proteas ei feintioli yn ôl y fethodoleg gan Charney a Tomarelli [60]. Ychwanegwyd dyfyniad ensymatig (0.5 mL) yn 0.5 mL o 0.5 y cant (w/v) hydoddiant azocasein wedi'i baratoi gyda byffer asetad 50 mM (pH) a'i ddeor ar 32 ◦C am 40 mun. Stopiwyd yr adwaith trwy ychwanegu 0.5 mL o hydoddiant asid tri-cloroacetig 15 y cant (w / v) a chafodd y samplau eu centrifugio ar 3000 rpm am 15 munud. Ychwanegwyd y supernatant (100 µL) mewn plât microtiter 96- yn cynnwys 100 µL o 5 M potasiwm hydrocsid, a mesurwyd yr amsugnedd ar 428 nm mewn darllenydd plât microtiter (SpectraMax, Dyfeisiau Moleciwlaidd). Diffiniwyd un uned gweithgaredd fel faint o ensym sy'n gallu hybu cynnydd unedol mewn amsugnedd y funud.

3.6.3. Cynnwys Lleithder a pH

Cafodd cynnwys lleithder ei fonitro gan ddefnyddio cydbwysedd dadansoddwr lleithder (AND MX-50). Mesurwyd y pH ar fesurydd pH (TECNAL, model TR-107 PT100, Brasil).

3.7. SDS-TUDALEN

Perfformiwyd yr electrofforesis yn ôl y dull a adroddwyd gan Laemmli [61] mewn gel polyacrylamid (pentyrru 5 y cant, 15 y cant yn gwahanu, 0.75 mm o drwch). Cymysgwyd y samplau mewn cymhareb (1:4) o gyfuniad o gacen olew andiroba a ffa soia (50:50) gyda byffer sampl yn cynnwys -mercaptoethanol, wedi'i gynhesu ar 95 ◦C am 5 munud, a'i roi ar y gel. Perfformiwyd electrofforesis ar 150 V am 30 munud (Bio-Rad, Hercules, CA, UDA), a datgelwyd y gel gan ddefnyddio Coomassie Blue R-250. Defnyddiwyd marciwr protein safonol (Bio-rad, Hercules, CA, UDA) gyda phwysau moleciwlaidd yn amrywio o 10 i 250 kDa.

3.8. Hydrolysis Olew Pysgod: Cais Posibl

Mesurwyd graddau hydrolysis (DH) olew pysgod trwy bwyso 1 g o olew pysgod ac ychwanegu 25 mL o byffer ffosffad pH 7.0 i wirio cymhwysiad posibl yr ensym wrth hydrolysis olew pysgod. Yna, cynhyrfwyd 5 ml o'r echdyniad ensymatig (37 U) mewn fflasgiau ambr am 168 h. Stopiwyd yr adwaith gyda 20 mL o aseton a chafodd yr asidau brasterog rhydd eu titradu mewn titrator awtomatig â 0.1 M methanolig KOH. Cafwyd yr adwaith yn wag trwy ychwanegu'r ensym yn unig ar ddiwedd yr adwaith.

Cyfrifwyd gradd yr hydrolysis (DH) yn ôl Hafaliad (2):

lle Fel y mae asidedd y sampl; Aa yw'r asidedd o awtohydrolysis; Si yw'r mynegai saponification.

3.9. Dadansoddiad Ystadegol

Cafodd yr holl arbrofion eu hailadrodd dair gwaith. Ym mhob atgynhyrchiad, cynhaliwyd y dadansoddiadau yn driphlyg. Roedd y canlyniadau'n cyfateb i'r gwyriad safonol cymedrig ±. Dadansoddwyd data gan y dadansoddiad un ffordd o amrywiant (ANOVA) tra defnyddiwyd prawf Tukey (p < 0.05) i brofi gwahaniaethau rhwng modd gan ddefnyddio'r Sisvar 5.6.

4. Casgliadau

Roedd y cyfrwng eplesu a gafwyd ar ôl cymysgu cacen olew andiroba a phryd ffa soia yn effeithiol iawn wrth gynhyrchu lipas. Y matrics eplesu a ddewiswyd oedd y cymysgedd o gacen olew andiroba a blawd ffa soia mewn cymhareb 50::50, gan gynhyrchu 63.70 U·g −1 o weithgaredd lipolytig. Cafwyd y gweithgaredd lipolytig uchaf (82.52 U · g −1 ) ar ôl defnyddio'r gymhareb cacen olew andiroba a phryd ffa soia o 50:50 ar ôl ychwanegu Tween 80 (0.001 y cant) ac olew ffa soia (1.5 y cant). Yn y dadansoddiad electrofforetig, canfuwyd bandiau o broteinau a adroddwyd eisoes yn y llenyddiaeth fel YL Lip2 (37 a 40 kDa). Darparodd y cais blaenorol o lipas mewn hydrolysis olew hyd at 63 y cant o hydrolysis ar ôl 24 h. Dangosodd yr astudiaeth hon ei bod yn bosibl cynhyrchu lipas gan ddefnyddio sgil-gynhyrchion o ranbarth Amazon ynghyd â blawd ffa soia a'i gymhwyso i hydrolysis olew pysgod i gynhyrchu asidau brasterog amlannirlawn ymhellach mewn proses addas.

Cyfraniadau Awdur:Cysyniadoli, BDR, ACL a MAZC; Methodoleg, ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL a MAZC; Dadansoddiad ffurfiol, ASSC, JCSS a FVdN; Ymchwiliad, ASSC, JCSS ac FVdN; Adnoddau, ASSC, JCSS a FVdN; Curadu data, ASSC, JCSS a FVdN; Ysgrifennu — paratoi drafft gwreiddiol, ASSC, JCSS, FVdN a CECdS; Ysgrifennu — adolygu a golygu, BDR, CECdS, ACL a MAZC; Goruchwyliaeth, BDR, CECdSACL a MAZC; Gweinyddu prosiectau, BDR, ACL a MAZC; Caffael cyllid, BDR, ACL a MAZC Mae pob awdur wedi darllen a chytuno i fersiwn gyhoeddedig y llawysgrif.

Diolchiadau: Mae'r awduron yn cydnabod y Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES - Cod Cyllid 001); y Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); a'r Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).

Cyfeiriadau

1. Serra, JL; Rodrigues, AMdC; Freitas, RA; Meirelles, AJdA; Darnet, SH; Silva, LHMd Ffynonellau eraill o olewau a brasterau o blanhigion Amazonaidd: Asidau brasterog, offer methyl, cyfanswm carotenoidau, a chyfansoddiad cemegol. Bwyd Res. Int. 2019, 116, 12–19. [CrossRef] [PubMed]

2. Penido, C. ; Conte, FP; Chagas, MS; Rodrigues, CA; Pereira, JF; Henriques, MG Effeithiau gwrthlidiol tetranortriterpenoids naturiol wedi'u hynysu o Carapa guianensis Aublet ar arthritis a achosir gan symosan mewn llygod. Llid. Res. 2006, 55, 457–464. [CrossRef] [PubMed]

3. Penido, C. ; Costa, KA; Pennaforte, RJ; Costa, MF; Pereira, JF; Siani, AC; Henriques, MG Effeithiau gwrth-alergaidd tetranortriterpenoids naturiol wedi'u hynysu o Carapa guianensis Aublet ar athreiddedd fasgwlaidd a achosir gan alergenau a hyperalgesia. Llid. Res. 2005, 54, 295–303. [CrossRef]

4. Santos, KIP; Benjamin, JKF; Costa, KAD; Reis, AS; Souza Pinheiro, WB; Technegau Metabolomeg Santos, UG a ddefnyddir wrth ymchwilio i asidau ffenolig o sgil-gynnyrch amaeth-ddiwydiannol Carapa guianensis Aubl. Arabaidd. J. Chem. 2021, 14, 103421. [CrossRef]

5. Lourenço, JNP; Ferreira, LMM; Martins, GC; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AC: Brasília, Brasil, 2017; t. 36 .

6. Organig, S. Óleo de Andiroba.

7. Conab. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: Brasil, Brasil, 2017; Cyfrol 1, t. 67.

8. Souza, CR; Lima, RMB; Azevedo, CP; Rossi, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: Brasilia, Brasil, 2006; 21p.

9. Oliveira, F.; Souza, CE; Peclat, VROL; Salgado, JM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ; Venâncio, A. ; Belo, I. Optimeiddio cynhyrchu lipas gan Aspergillus ibericus o gacennau olew a'i gymhwyso mewn adweithiau esterification. Bioprod Bwyd. Proses. 2017, 102, 268–277. [CrossRef]

10. Pandey, A. Solid-state fermentation. Biocemeg. Eng. J. 2003, 13, 81–84. [CrossRef]

11. Martinez, O. ; Sánchez, A.; Ffont, X. ; Barrena, R. Gwella biogynhyrchu cyfansoddion arogl gwerth ychwanegol trwy eplesu cyflwr solet o fagasse cansen siwgr a thriagl betys siwgr: Strategaethau gweithredol a chynyddu'r broses. Bioadnodd. Technol. 2018, 263, 136–144. [CrossRef] [PubMed]

12. Ano, T. ; Jin, GY; Mizumoto, S.; Rahman, Llsgr; Okuno, K. ; Shoda, M. Eplesu cyflwr solet o iturin gwrthfiotig lipopeptid A trwy ddefnyddio system adweithydd eplesu cyflwr solet newydd. J. Amgylch. Sci. 2009, 21 (Suppl. S1), S162–S165. [CrossRef]

13. Vandenberghe, LPS; Karp, SG; Oliveira, PZ; Carvalho, JC; Rodrigues, C.; Soccol, CR Pennod 18 - Eplesu Cyflwr Solet ar gyfer Cynhyrchu Asidau Organig. Mewn Datblygiadau Cyfredol mewn Biotechnoleg a Biobeirianneg; Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, Gol.; Elsevier: Amsterdam, Yr Iseldiroedd, 2018; pp. 415–434.

14. Sala, A. ; Vittone, A.S.; Barrena, R. ; Sánchez, A.; Artola, A. Sganio gwastraff amaeth-ddiwydiannol fel swbstradau ar gyfer cynhyrchu bioblaladdwyr ffwngaidd: Defnyddio Beauveria bassiana a Trichoderma harzianum i eplesu cyflwr solet. J. Amgylch. Manag. 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]

15. Banat, IM; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfactants: Y genhedlaeth werdd o gemegau arbenigol a chynhyrchiad posibl gan ddefnyddio technoleg eplesu Solid-State (SSF). Bioadnodd. Technol. 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]

16. Pereira, AS; Sant'Ana, GCF; Amaral, PFF Mango gwastraff amaeth-ddiwydiannol ar gyfer cynhyrchu lipas o Yarrowia lipolytica a photensial y solid eplesu fel biocatalyst. Bioprod Bwyd. Proses. 2019, 115, 68–77. [CrossRef]

17. Brígida, AIS; Amaral, PFF; Coelho, MAZ; Gonçalves, LRB Lipase o Yarrowia lipolytica: Cynhyrchu, nodweddu, a chymhwyso fel biocatalyst diwydiannol. J. Mol. Catal. B Enzym. 2014, 101, 148–158. [CrossRef]

18. Treichel, H. ; Oliveira, D.; Mazutti, MA; Di Luccio, M.; Oliveira, JV Adolygiad ar Gynhyrchu Lipasau Microbaidd. Technoleg Biobrosesau Bwyd. 2010, 3, 182–196. [CrossRef]

19. Mehta, A. ; Guleria, S.; Sharma, R.; Gupta, R. 6—Y lipasau a'u cymwysiadau gyda phwyslais ar y diwydiant bwyd. Mewn Biotechnoleg Microbaidd mewn Bwyd ac Iechyd; Ray, RC, Gol.; Gwasg Academaidd: Caergrawnt, MA, UDA, 2021; pp. 143–164.

20. Aarthy, M. ; Saravanan, P.; Ayyadurai, N.; Gowthaman, MK; Kamini, NR Proses dau gam ar gyfer cynhyrchu dwysfwydydd asid brasterog amlannirlawn omega 3- o olew sardîn gan ddefnyddio Cryptococcus sp. MTCC 5455 lipas. J. Mol. Catal. B Enzym. 2016, 125, 25–33. [CrossRef]

21. Nascimento, FV; Castro, AC; Secchi, AR; Coelho, MAZ Mewnwelediad i ychwanegiad cyfryngau mewn eplesu cyflwr solet o gyrff ffa soia gan Yarrowia lipolytica: Effaith ar gynhyrchu lipas yn yr hambwrdd a bio-adweithyddion gwely wedi'u hinswleiddio. Biocemeg. Eng. J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]

22. Gwerthiant, JCS; Castro, AC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Ychwanegiad o bilion watermelon fel ychwanegwr cynhyrchu lipas ac esterase gan Yarrowia lipolytica mewn eplesu cyflwr solet a'u defnydd posibl fel biogatalyddion mewn adweithiau depolymerization poly(ethylen terephthalate) (PET). Biocatal. Biotrawsnewid. 2020, 38, 457–468. [CrossRef]

23. Aguieiras, ECG; de Barros, DSN; Fernandez-Lafuente, R.; Freire, DMG Cynhyrchu lipasau mewn pryd had cotwm a chymhwyso'r solid wedi'i eplesu fel biocatalyst mewn adweithiau esterification a thrawsesterification. Adnewyddu. Ynni 2019, 130, 574–581. [CrossRef]

24. Souza, CEC; Farias, MA; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Ychwanegu Gwerth at Gyd-gynhyrchion Amaeth-ddiwydiannol o Echdynnu Olew Canola a ffa soia Trwy Gynhyrchu Lipase Gan Ddefnyddio Yarrowia lipolytica mewn Eplesu Solid-State. Gwerthusiad Biomas Gwastraff 2017, 8, 1163–1176. [CrossRef]

25. Ef, H. ; Li, Y. ; Zhang, L.; Ding, Z. ; Shi, G. Deall a chymhwyso rheoliad nitrogen Bacillus: Persbectif bioleg synthetig. J. Adv. Res. 2022; yn y wasg. [CrossRef]

26. Almeida, AF; Taulk-Tornisielo, SM; Carmona, EC Dylanwad ffynonellau carbon a nitrogen ar gynhyrchu lipas gan straen Candida Viswanathan sydd newydd ei ynysu. Ann. Microbiol. 2013, 63, 1225–1234. [CrossRef]

27. Salihu, A. ; Alam, MZ; AbdulKarim, MI; Salleh, Cynhyrchiad HM Lipase: Cipolwg ar y defnydd o weddillion amaethyddol adnewyddadwy. Adnodd. cadwraeth. Ailgylchu. 2012, 58, 36–44. [CrossRef]

28. Liu, X. ; Yu, X. ; Efe, A. ; Xia, J. ; Efe, J. ; Deng, Y. ; Xu, N. ; Qiu, Z.; Wang, X. ; Zhao, P. Eplesu un pot ar gyfer cynhyrchu erythritol o rawn distyllwyr trwy gyd-amaethu Yarrowia lipolytica a Trichoderma reesei. Bioadnodd. Technol. 2022, 351, 127053. [CrossRef] [PubMed]

29. Wang, W. ; Wei, H. ; Alahuhta, M.; Chen, X. ; Hyman, D.; Johnson, DK; Zhang, M.; Himmel, ME Mynegiad Heterologaidd o Ensymau Xylanase mewn Burum Lipogenig Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [CrossRef] [PubMed]

30. Nascimento, FVd; Lemes, AC; Castro, AC; Secchi, AR; Zarur Coelho, MA Safbwynt Esblygiad Dros Dro o Gynhyrchu Lipase gan Yarrowia lipolytica mewn Eplesu Solid-State. Prosesau 2022, 10, 381. [CrossRef]

31. Mandari, V. ; Nema, A.; Devarai, SK Optimeiddio dilyniannol a chynhyrchu lipas ar raddfa fawr gan ddefnyddio cymysgedd tri-swbstrad o Aspergillus niger MTCC 872 trwy eplesu cyflwr solet. Biocemeg Proses. 2020, 89, 46–54. [CrossRef]

32. Mala, JG; Edwinoliver, NG; Kamini, NR; Puvanakrishnan, R. Eplesu cyflwr solet swbstrad cymysg ar gyfer cynhyrchu ac echdynnu lipas o Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. Microbiol. 2007, 53, 247–253. [CrossRef]

33. Barth, G. ; Gaillardin, C. Yarrowia lipolytica. Mewn Burumau Anghonfensiynol mewn Biotechnoleg; Blaidd, K., gol.; Springer: Efrog Newydd, NY, UDA, 1996; pp. 313–388.

34. Moftah, OA; Grbavˇci´c, S.; Zuža, M.; Lukovi’c, N.; Bezbradica, D.; Kneževi’c-Jugovi’c, Z. Ychwanegu gwerth at y gacen olew fel gwastraff o’r diwydiant prosesu olew: Cynhyrchu lipas a phroteas gan Candida gan ddefnyddio mewn eplesu cyflwr solet. Appl. Biocemeg. Biotechnol. 2012, 166, 348–364. [CrossRef]

35. Contesini, FJ; da Silva, VC; Maciel, RF; de Lima, RJ; Barros, FF; de Oliveira Carvalho, P. Ymateb dadansoddiad arwyneb ar gyfer cynhyrchu lipas enantioselective o Aspergillus niger trwy eplesu cyflwr solet. J. Microbiol. 2009, 47, 563–571. [CrossRef]

36. Rigo, E. ; Ninow, JL; Di Luccio, M.; Oliveira, JV; Polloni, AE; Remonatto, D.; Arbter, F. ; Vardanega, R.; Oliveira, D.; Treichel, H. Cynhyrchu lipase trwy eplesu solet o bryd ffa soia gyda gwahanol atchwanegiadau. Gwyddor Bwyd LWT. Technol. 2010, 43, 1132–1137. [CrossRef]

37. Haul, SY; Xu, Y. Eplesu cyflwr solid ar gyfer cynhyrchu 'lipas synthetig cell gyfan' o Rhizopus chinensis ac adnabod yr ensym swyddogaethol. Biocemeg Proses. 2008, 43, 219–224. [CrossRef]

38. Farias, MA; Valoni, EA; Castro, AC; Coelho, Cynhyrchu MAZ Lipase gan Yarrowia Lipolytica mewn Eplesu Cyflwr Solet gan Ddefnyddio Gweddillion Amaeth-Diwydiannol Gwahanol. Cemeg. Eng. traws. 2014, 38, 301–306.

39. Sidhu, P. ; Sharma, R.; Soni, SK; Gupta, JK Cynhyrchu lipas alcalïaidd allgellog gan Bacillus sp thermoffilig newydd. Fola Microbiol. 1998, 43, 51–54. [CrossRef]

40. Corzo, G. ; Revah, S. Cynhyrchiad a nodweddion y lipas o Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. Technol. 1999, 70, 173–180. [CrossRef]

41. Souza, CEC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Nodweddu a Chymhwyso Yarrowia lipolytica Lipase A gafwyd trwy eplesu SolidState yn Synthesis Gwahanol Esters a Ddefnyddir yn y Diwydiant Bwyd. Appl. Biocemeg. Biotechnol. 2019, 189, 933–959. [CrossRef]

42. Fickers, P. ; Fudalej, F.; Dall, MTL; Casaregola, A.S.; Gaillardin, C.; Thonart, P.; Nicaud, JM Adnabod a nodweddu genynnau LIP7 a LIP8 gan amgodio dau lipas triacylglycerol allgellog yn y burum Yarrowia lipolytica. Genet ffwngaidd. Biol. 2005, 42, 264–274. [CrossRef]

43. Cheng, Y.-H.; Hsiao, FS-H.; Wen, C.-M.; Wu, C.-Y.; Dybus, A. ; Yu, Y.-H. Eplesu cymysg pryd ffa soia gan proteas a probiotegau a'i effeithiau ar berfformiad twf ac ymateb imiwn mewn brwyliaid. J. Appl. Anim. Res. 2019, 47, 339–348. [CrossRef]

44. Chakraborty, K. ; Paul Raj, R. Cyfoethogi detholiadol o n−3 asidau brasterog amlannirlawn gyda hyd cadwyn acyl C18-C20 o olew sardîn gan ddefnyddio Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipas. Cemegydd Bwyd. 2009, 114, 142–150. [CrossRef]

45. Zarai, Z. ; Eddehech, A. ; Rigano, F.; Oteri, M.; Micalizzi, G.; Dugo, P.; Mondello, L.; Cacciola, F. Nodweddu monoacylglyserols a diacylglyserols sy'n llawn asidau brasterog amlannirlawn a gynhyrchir trwy hydrolysis olew afu Musteleus mustelus wedi'i gataleiddio gan lipas bacteriol ansymudol. J. Chromatogr. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]

46. ​​Yang, J. ; Cân, X. ; Wang, L.; Cui, C. Dadansoddiad cynhwysfawr o newidiadau metabolaidd yn Schizochytrium sp. straen gyda chynnwys DHA gwahanol. J. Chromatogr. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]

47. Yang, Z. ; Jin, W. ; Cheng, X. ; Dong, Z.; Chang, M.; Wang, X. Cyfoethogi ensymatig o n-3 glyseridau asid brasterog amlannirlawn trwy hydrolysis dethol. Cemegydd Bwyd. 2021, 346, 128743. [CrossRef]

48. Okada, T. ; Morrissey, MT Cynhyrchu n-3 dwysfwyd asid brasterog amlannirlawn o olew sardîn gan Candida rugosa lipas ansymudol. J. Bwyd Sci. 2008, 73, C146–C150. [CrossRef]

49. Riediger, ND; Othman, RA; Suh, M.; Moghadasian, MH Adolygiad systemig o rolau n-3 asidau brasterog mewn iechyd a chlefydau. J. Am. Deiet. Cymdeithasfa. 2009, 109, 668–679. [CrossRef] [PubMed]

50. Gao, K. ; Chu, W. ; Haul, J. ; Mao, X. Adnabod lipas alcalïaidd sy'n gallu cyfoethogi EPA yn well na DHA oherwydd detholedd asidau brasterog a regioselectivity. Cemegydd Bwyd. 2020, 330, 127225. [CrossRef]

51. Martins, PA; Trobo-Maseda, L.; Lima, FA; de Morais Júnior, LlC; De Marco, JL; Salum, TFC; Guisán, JM Omega-3 cynhyrchu gan hydrolysis olew pysgod gan ddefnyddio lipas o gladioli Burkholderia BRM58833 ansymudol a sefydlogi gan dechnegau ôl ansymudol. Biocemeg. Bioffys. Rep. 2022, 29, 101193. [CrossRef] [PubMed]

52. Lemes, AC; Egea, MB; Oliveira Filho, JGd; Gautério, GV; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Dulliau Biolegol ar gyfer Echdynnu Cyfansoddion Bioactif o Sgil-gynhyrchion Amaeth-ddiwydiannol: Adolygiad. Blaen. Bioeng. Biotechnol. 2022, 9, 1–18. [CrossRef] [PubMed]

53. Lemes, AC; Sala, L.; Mwynau, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Adolygiad o'r Cynnydd Diweddaraf mewn Peptidau Bioactif Amgryptio o Wastraff sy'n Gyfoethog o Brotein. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef]

54. Lemes, AC; Coelho, MAZ; Gautério, GV; Paula, LC; Filho, JGdO; Egea, MB Pennod 11 - Gwastraff a Sgil-gynhyrchion Diwydiannol: Ffynhonnell Bwydydd Swyddogaethol, Nutraceuticals, a Biopolymerau. Mewn Biopolymerau mewn Nutraceuticals a Bwydydd Swyddogaethol; Y Gymdeithas Gemeg Frenhinol: Llundain, DU, 2023; 329–360.

55. Pintado, ME; Teixeira, JA Valorização de subprodutos da indústria alimentar: Obtenção de ingredients de valor acrescentado. Bol. Biotecnol. 2015, 1, 10–12.

56. Hagler, AN; Mendonça-Hagler, LC Burumau o ddyfroedd morol ac aberol gyda lefelau gwahanol o lygredd yn nhalaith Rio de Janeiro, Brasil. Appl. Amgylch. Microbiol. 1981, 41, 173–178. [CrossRef]

57. AOAC. Dulliau Dadansoddi Swyddogol AOAC International; Cymdeithas y Cemegwyr Dadansoddol Swyddogol: Washington, DC, UDA, 1995.

58. Castro, AC; Castilho, LdR; Freire, DMG Nodweddu babassu, canola, hadau castor, a chacennau gweddilliol blodyn yr haul i'w defnyddio fel deunyddiau crai ar gyfer prosesau eplesu. Cnydau Prod. 2016, 83, 140–148. [CrossRef]

59. Freire, DM; Teles, EM; Bon, EP; Sant 'Anna, GL, Jr Cynhyrchu lipas gan Penicillium wedi'i gyfyngu mewn eplesydd ar raddfa fainc: Effaith maethiad carbon a nitrogen, cynnwrf ac awyru. Appl. Biocemeg. Biotechnol. 1997, 63–65, 409–421. [CrossRef]

60. Charney, J. ; Tomarelli, RM Dull lliwimetrig ar gyfer pennu gweithgaredd proteolytig sudd dwodenol. J. Biol. Cemeg. 1947, 171, 501–505. [CrossRef] [PubMed]

61. Laemmli, Holltiad Proteinau Strwythurol y DU yn ystod Cynulliad y Pennaeth Bacteriophage T4. Natur 1970, 227, 680–685. [CrossRef] [PubMed]

Ymwadiad/Nodyn y Cyhoeddwr:Mae’r datganiadau, barn, a data sydd ym mhob cyhoeddiad yn eiddo i’r awdur(on) a’r cyfrannwr(wyr) unigol yn unig ac nid MDPI a/neu’r golygydd(ion). Mae MDPI a/neu’r golygydd(wyr) yn ymwadu â chyfrifoldeb am unrhyw anaf i bobl neu eiddo o ganlyniad i unrhyw syniadau, dulliau, cyfarwyddiadau neu gynhyrchion y cyfeirir atynt yn y cynnwys.

【Am ragor o wybodaeth:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】