Dilyniant Hirdymor i Imiwnedd Mycoplasma Hyopneumoniae-benodol mewn Moch wedi'u Brechu

Haniaethol

Mycoplasma hypopnea symudol yw prif gyfrwng niwmonia ensŵotig mewn moch. Er mwyn lleihau'r colledion economaidd a achosir gan y clefyd hwn, mae brechiad symudol M. hypopnea yn cael ei ymarfer yn gyffredin. Fodd bynnag, nid yw parhad imiwnedd M. hyopneumoniae a achosir gan frechlyn, yn enwedig imiwnedd trwy gyfrwng celloedd, hyd at adeg y lladd wedi'i ymchwilio eto. Felly, ar ddwy fferm fasnachol, cafodd 25 o foch (n{3}}) bacterin masnachol yn fewngyhyrol yn 16 diwrnod oed. Bob mis, dadansoddwyd presenoldeb gwrthgyrff serwm M. hyopneumoniae-specifc ac aseswyd yr ymlediad o TNF- , IFN- , ac IL -17 Mae cynhyrchiad gan wahanol is-setiau celloedd T mewn gwaed gan ddefnyddio profion galw'n ôl. Tybiwyd bod haint naturiol ag M. hyopneumoniae yn y ddwy fferm. Fodd bynnag, arhosodd y moch a astudiwyd yn M. hyopneumoniae negyddol am bron y cyfan o'r treial. Ni welwyd serodrosi ar ôl y brechiad a daeth pob mochyn yn seronegative yn ddau fis oed. Roedd cineteg yr amleddau is-setiau celloedd T yn debyg ar y ddwy fferm. Mycoplasma hypopnea symudol-benodol sy'n cynhyrchu cytocin-gelloedd CD4+CD8+ Canfuwyd celloedd T yng ngwaed moch o'r ddwy fferm yn fis oed, ond bu gostyngiad sylweddol yn yr oedran wrth i'r oedran gynyddu. Ar y llaw arall, gwelwyd amlhau celloedd T ar ôl ysgogiad in vitro M. hyopneumoniae tan ddiwedd y cyfnod pesgi. Ymhellach, ni welwyd gwahaniaethau mewn ymatebion imiwn humoral a gell-gyfryngol ar ôl brechiad M. hyopneumoniae rhwng moch gyda a heb wrthgyrff sy'n deillio o fam. Mae'r astudiaeth hon yn dogfennu'r ymatebion imiwnedd symudol hirdymor M. hypopnea a achosir gan frechlyn mewn moch sy'n pesgi o dan amodau maes. Mae angen ymchwil pellach i ymchwilio i ddylanwad haint naturiol ar yr ymatebion hyn.

manteision cistanche ar gyfer dynion-cryfhau system imiwnedd

Cliciwch yma i weld cynhyrchion Gwella Imiwnedd Cistanche

【Gofyn am fwy】 E-bost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Geiriau allweddol

Hyopneumoniae mycoplasma, moch, astudiaeth hydredol, imiwnedd a achosir gan frechlyn, imiwnedd trwy gyfrwng celloedd

Rhagymadrodd

Un o'r pathogenau anadlol pwysicaf mewn moch yw Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyopneumoniae). Dyma brif asiant niwmonia ensŵotig, sy'n bresennol yn endemig ar y rhan fwyaf o ffermydd, ac mae'n gyfrifol am golledion economaidd sylweddol mewn cynhyrchu moch ledled y byd [1, 2]. Brechu yw'r arfer rheoli a ddefnyddir amlaf i reoli M. hyopneumoniae gan y gall leihau'r arwyddion clinigol a'r colledion perfformiad, a lleihau costau triniaeth [3]. Nod y brechiad M. hyopneumoniae yw cynyddu ymatebion imiwn sy'n benodol i bathogen sy'n ymateb yn gyflym ac yn effeithiol i haint M. hyopneumoniae naturiol. Mae'r rhan fwyaf o frechlynnau M. hyopneumoniae sydd ar gael yn fasnachol ar gyfer moch wedi'u cofrestru i'w rhoi rhwng wythnos a thair wythnos oed [4]. Mae dyfodiad imiwnedd symudol-benodol M. hypopnea yn amrywio o un i bedair wythnos a'i nod yw amddiffyn rhag heintiau yn ystod y cyfnod pesgi cyflawn, hyd at ladd [4]. Yn gyffredinol, mae brechu neu heintiad moch yn sbarduno gwahaniaethu celloedd cof B a chelloedd CD4+CD8+ T, gan sicrhau ymateb imiwnedd cyflym gwrthgorff a gell-gyfryngol ar ôl ail gyswllt â'r pathogen [5] . Gall brechu rhag M. hyopneumoniae arwain at serodrosi a chynnydd mewn gwrthgyrff penodol M. hyopneumoniae yn lleol yn y llwybr anadlol [6-9]. Mewn anifeiliaid wedi'u brechu, arsylwyd lefelau uwch o IFN- -yn cynhyrchu lymffocytau ynghyd â chyfradd lledaeniad lymffocytau uwch ar ôl ysgogiad M. hyopneumoniae in vitro o gymharu ag anifeiliaid heb eu brechu [9-11]. Ymhellach, canfuwyd celloedd T amlswyddogaethol CD4+CD8− a CD4−CD{8+ T, sy'n cynhyrchu INF- a TNF- , ar ôl brechiad M. hyopneumoniae [12]. Fodd bynnag, nid yw'n gwbl glir pa mor hir y mae imiwnedd symudol-benodol a achosir gan frechlyn M. hypopnea yn parhau. Yn y rhan fwyaf o astudiaethau effeithiolrwydd brechlyn M. hyopneumoniae, mae moch eisoes yn cael eu herio ychydig wythnosau ar ôl cael eu brechu i ymchwilio i beswch, paramedrau imiwnedd, llwyth pathogenau, a briwiau ysgyfaint [13-16]. Pan astudiwyd yr effeithiolrwydd hirdymor, mewn treialon maes yn bennaf, yn aml dim ond paramedrau cynhyrchu a briwiau ysgyfaint adeg lladd a archwiliwyd ac ni chafodd paramedrau imiwnedd eu hymchwilio'n wael neu ddim ond yn wael [17-20]. Hyd y gwyddom, nid yw imiwnedd celloedd-gyfryngol penodol i M. hyopneumoniae a achosir gan frechlyn yn benodol o'r eiliad y caiff ei frechu hyd at ladd dan amodau maes wedi'i ymchwilio eto. Ar wahân i frechu moch bach, mae brechu giltiau bridio M. hyopneumoniae yn arfer acclimation a ddefnyddir yn gyffredin [21]. Mycoplasma hyopneumoniae-specifc sy'n cynhyrchu CD4+CD{37}} a chelloedd amlswyddogaethol CD4-CD8− T yn bresennol ar ôl brechu anifeiliaid bridio [22]. Mae gan berchyll sy'n sugno colostrwm o hychod wedi'u himiwneiddio lefelau uchel o wrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc sy'n deillio o'r fam (MDA) ac imiwnedd cell-gyfryngol yn eu gwaed a all barhau hyd at ddiddyfnu neu hyd yn oed yn hirach [7, 22, 23]. Pan fo moch bach yn cael eu brechu yn erbyn M. hyopneumoniae ym mhresenoldeb (lefelau uchel) MDA, mae serodrosi yn aml yn ddiffygiol [24-26]. Fodd bynnag, roedd ymateb amlhau lymffocytau ar ôl ysgogiad in vitro yn sylweddol uwch mewn moch bach wedi'u brechu gan M. hyopneumoniae o'i gymharu â moch bach heb eu brechu, waeth beth fo lefelau MDA [26]. Er bod yr awduron hyn wedi dangos bod yr imiwnedd cell-gyfryngol wedi'i brechu ar frechiad M. hyopneumoniae ym mhresenoldeb lefelau uchel o MDA, mae angen gwahaniaethu ymhellach yr is-setiau celloedd T a'u cynhyrchiad cytocin er mwyn cael gwell dealltwriaeth o'r ymatebion imiwn hyn a gyfryngir gan gelloedd. ac yn y diwedd dylanwad haint naturiol ar yr ymatebion hyn. Amcan yr astudiaeth bresennol oedd ymchwilio i'r ymatebion imiwn digrif a gell-gyfryngol ar frechiad M. hyopneumoniae mewn moch ar ddwy fferm fasnachol. I'r perwyl hwn, cafodd gwrthgyrff serwm ac amlder cynhyrchu a cytocinau gan wahanol is-setiau celloedd T eu monitro o eiliad y brechiad yn 16 diwrnod oed hyd at oedran lladd. Ymchwiliwyd hefyd i ddylanwad posibl M. hyopneumoniae-benodol imiwnedd sy'n deillio o famau ar ymatebion brechlyn doniol a chyfryngau celloedd mewn perchyll.

budd-daliadau atodiad cistanche-cynyddu imiwnedd

Defnyddiau a dulliau

Disgrifiad buches a dewis anifeiliaid....

Two commercial farrow-to-finish farms were included in the study based on the willingness of the farmer to participate. On both farms, circulation of M. hyopneumoniae was assumed based on the presence of the pathogen in tracheobronchial swabs (TBS) taken from fattening pigs in the past. Danbred breeding gilts were reared on farm A and purchased on farm B. On-farm A, the breeding gilts were vaccinated once against M. hyopneumoniae four weeks before first insemination with Ingelvac MycoFLEX® (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany). On-farm B, breeding gilts were vaccinated with Stellamune® Mycoplasma (Elanco, Utrecht, The Netherlands) at six months of age upon arrival at the farm and a second time four weeks later. Furthermore, on-farm B gilts were also booster-vaccinated twice shortly before farrowing. On both farms, sows were not vaccinated against M. hyopneumoniae. Farm A practiced a 5-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. The piglets were vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with an inactivated whole cell J strain-based bacterin (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany), porcine circovirus type 2 (PCV2) (Ingelvac CircoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA, Amer, Spain). Pigs were moved to the fattening unit at 9 weeks of age. Farm B worked in a 4-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. Tey was vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with the same vaccine as in farm A (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and PRRSV (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA). The piglets were moved to the fattening unit at 10 weeks of age. On both farms, five breeding animals (two gilts and three sows of mixed parity) were included in the study. The growing process was monitored by the main investigator and from each litter, five healthy piglets (birth weight>1 kg) yn cael eu dewis, eu rhicio yn y glust, a'u dilyn yn fisol o'r enedigaeth tan y lladd (n{1}} moch bach/fferm). Ni chaniatawyd traws-faethu moch bach â rhicyn clust ac ni chafodd moch wrthfiotigau gweithredol yn erbyn M. hyopneumoniae ar y ddwy fferm yn ystod y treial cyfan.

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd

Astudio dylunio a samplu

Cymeradwywyd yr astudiaeth gan Bwyllgor Moesegol y Gyfadran Meddygaeth Filfeddygol a'r Gyfadran Peirianneg Biowyddoniaeth, Prifysgol Ghent (rhif cymeradwyaeth 2020/31). O'r hychod, casglwyd colostrwm yn ystod y broses borchella. O fewn 6 awr ar ôl porchella, casglwyd TBS (cathetr sugno 60 cm, Medinorm GmbH, Spiesen-Elversberg, yr Almaen) a gwaed mewn tiwb serwm di-haint (gwaed ceuledig) o'r hychod. Yn ddeuddydd oed, cymerwyd gwaed o'r perchyll mewn tiwbiau serwm. O fis i chwe mis oed, cymerwyd gwaed mewn serwm di-haint a thiwbiau EDTA (gwaed heb ei geulo) a TBS o'r perchyll bob mis. Ar fferm A, cafodd moch eu lladd yn 177 diwrnod oed, ac felly, cymerwyd y sampl olaf yn 5.5 mis oed. Ar fferm B, anfonwyd moch i'r lladd-dy yn 191 diwrnod oed felly cymerwyd y sampl olaf yn 6 mis oed. Roedd samplau colostrwm a serwm yn cael eu storio ar -20 gradd a samplau TBS ar -80 gradd nes y gwneir dadansoddiad pellach. Roedd gwaed heb ei geulo'n cael ei brosesu ar unwaith ar gyfer dadansoddiad imiwnedd cell-gyfryngol. PCR digidol ar gyfer canfod M. hyopneumoniae DNA Er mwyn profi presenoldeb M. hyopneumoniae, echdynnwyd DNA o'r samplau TBS gan ddefnyddio pecyn masnachol (cit DNeasy® Blood & Tissue, Qiagen, Venlo, Yr Iseldiroedd) a PCR digidol (dPCR) ) perfformiwyd protocol sy'n targedu'r genyn P102 yn dilyn protocol a ddisgrifiwyd yn flaenorol [27]. Mycoplasma hyopneumoniae gwrthgyrff penodol Dadansoddwyd gwrthgyrff penodol Mycoplasma hyopneumoniae mewn samplau serwm a colostrwm gan ddefnyddio ELISA anuniongyrchol masnachol (prawf M. hyo Ab, IDEXX Laboratories Inc., Westbrook, ME, UDA) yn dilyn cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Ystyriwyd bod samplau yn bositif os oedd y gymhareb sampl-i-bositif (S/P) yn uwch na 0.40 ac yn negyddol os oedd y gymhareb S/P yn hafal i neu'n is na 0.40.

Cynhyrchu cytocin celloedd T

O'r gwaed ffres, heb ei geulo, cafodd celloedd mononiwclear gwaed ymylol (PBMCs) eu hynysu gan ddefnyddio graddiant dwysedd Lym phoprep™ (technolegau Stemcell, couver Van - -, Canada). Perfformiwyd ynysu, ysgogi a staenio'r PBMCs fel y disgrifiwyd yn flaenorol gyda rhai mân addasiadau [22]. Ysgogwyd celloedd dros nos (20 h) gyda bacterin straen M. hyopneumoniae J a wnaed yn fewnol ac ar gyfer pob anifail, cynhwyswyd cyfrwng negyddol a rheolaeth gadarnhaol Concanavalin A (ConA). Gwnaethpwyd y bacterin straen M. hyopneumoniae J yn seiliedig ar y protocol ar gyfer cynhyrchu bacterin M. hyopneumonia F7.2 C [16]. I ymchwilio i gynhyrchu cytocinau, ychwanegwyd Brefeldin A (eBioscience™, San Diego, CA, UDA) at bob ffynnon am y 4 awr olaf o ysgogiad i atal secretiad protein. Ar gyfer staenio allgellog, cafodd y PBMCs eu deor â gwrthgyrff monoclonaidd gwrth-CD3 (clôn PPT3), gwrth-CD4 (clôn 74-12-4), a gwrth-CD8 (clôn 11-295-33). Nesaf, gwrthgyrff eilaidd cyfatebol gwrth-lygoden IgG1 APC-Cy7 (Abcam, Caergrawnt, DU), gwrth-llygoden IgG2b FITC (Biolegend, San Diego, CA, UDA) a gwrth-llygoden IgG2a PE-Cy7 (Abcam, Caergrawnt, DU) eu hychwanegu. Yn dilyn hynny, perfformiwyd cam blocio gyda llygoden IgG1 (10 µg / mL). Yn dilyn staenio arwyneb, cafodd celloedd eu gosod, a'u treiddio, a pherfformiwyd staenio mewngellol ar gyfer TNF- , IFN- , ac IL-17A [22]. Cafwyd data gyda sytomedr llif CytoFLEX (Beckman Coulter, Bea, CA, UDA) a dadansoddwyd y canlyniadau ymhellach gyda meddalwedd CytExpert (Beckman Coulter). Dangosir yr hierarchaeth gatio yn Ffeil Ychwanegol 1.

Assay amlhau celloedd T

Cafodd PBMCs ynysig eu hysgogi in vitro gyda bacterin straen M. hyopneumoniae J mewnol i asesu amlder celloedd T. Disgrifiwyd y protocol a ddefnyddiwyd yn fanwl mewn astudiaeth flaenorol [22]. Ar gyfer y staenio arwyneb, cafodd celloedd eu deor gyntaf â gwrthgyrff monoclonaidd gwrth-CD3, gwrth-CD4, a gwrth-CD8 ac wedi hynny gyda'r gwrthgyrff eilaidd cyfatebol gwrth-lygoden IgG1 APC-Cy7 (Abcam, Caergrawnt, DU), gwrth-lygoden IgG2b FITC (Biolegend, San Diego, CA, UDA), a gwrth-lygoden IgG2a AlexaFluor 647 (Biolegend, San Diego, CA, UDA) ynghyd â propidium ïodid. Cafwyd data gyda sytomedr llif CytoFLEX a dadansoddwyd y canlyniadau ymhellach gyda meddalwedd CytExpert. Dangosir yr hierarchaeth gatio yn Ffeil Ychwanegol 2.

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd

Dadansoddiadau data

Statistical analyses were performed using IBM SPSS® Statistics Version 27 (IBM, Chicago, IL, USA) to compare results within farms. A descriptive analysis was performed for M. hyopneumoniae-specific antibody levels and the frequency of different T cell subsets. Kolmogorov-Smirnov and Shapiro-Wilk tests were used as tests for the normality of the residuals. For normally distributed data, repeated measures analyses of variance were used and post-hoc pairwise comparisons were made with a Bonferroni correction to assess possible differences between successive sampling moments. For not mally distributed data, a non-parametric Friedman test was used together with a Wilcoxon signed rank test with Bonferroni correction to compare the different sampling moments. Descriptive results were given to discuss whether the presence (S/P>{{0}}.40) neu absenoldeb (S/P Llai na neu'n hafal i 0.40) o MDA wedi dylanwadu ar imiwnedd humoral a gell-gyfryngol ar ôl brechiad perchyll.

Canlyniadau

Ar bob fferm, cafodd pum mochyn eu gwahardd yn ystod y treial oherwydd marwolaeth neu golli tag clust. Roedd data'r moch hyn wedi'u cynnwys yn y dadansoddiad tan yr eiliad samplu olaf a gofnodwyd yn gywir.

Presenoldeb haint naturiol gyda M. hyopneumoniae ar y ffermydd

Ar fferm A, roedd pob sampl TBS (o hychod, perchyll, a moch pesgi) wedi profi'n negyddol am bresenoldeb M. hyopneumoniae DNA. Ar fferm B, roedd pob sampl TBS o hychod, perchyll, a moch pesgi wedi profi'n negyddol am bresenoldeb M. hyopneumoniae DNA hyd at bum mis oed. Yn chwe mis oed, roedd pedwar mochyn pesgi wedi profi'n bositif am M. hyopneumoniae gyda 300, 7, 22, a 14 M. organebau hyopneumoniae/µL DNA.

Dyfalbarhad gwrthgyrff M. hyopneumoniae-benodol mewn moch

Ar y ddwy fferm, roedd gan bedair o bob pum hwch wrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc mewn serwm a colostrwm adeg porchella (Ffigurau 1A ac C). Roedd gan berchyll deuddydd oed a oedd yn sugno colostrwm o'r hychod hynny wrthgyrff mamol M. hyopneumoniae-specifc (MDA yn bresennol), tra bod perchyll o hychod seronegyddol hefyd yn seronegative (MDA absennol) (Ffigurau 1B a D). Er gwaethaf brechu yn 16 diwrnod oed, ar y ddwy fferm, gostyngodd lefel gwrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc yn serwm y moch yn sylweddol o ddau ddiwrnod oed i fis, o fis i ddau fis, ac o ddau fis i tri mis oed (Ffigur 1E). Ni welwyd unrhyw wahaniaethau arwyddocaol rhwng yr eiliadau samplu diweddarach. O ddau fis oed ymlaen, roedd pob mochyn, ac eithrio dau ar fferm A yn bedwar mis oed, yn M. hyopneumoniae seronegative. Gostyngodd lefelau gwrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc o berchyll ag MDA dros amser ac yn ddeufis oed cyrhaeddodd yr un lefelau â'r rhai mewn perchyll heb MDA (Ffigur 1F).

Cineteg amleddau is-setiau cell T mewn moch

Yn ystod bywyd mochyn, mae amlder y gwahanol is-setiau celloedd T mewn gwaed yn newid oherwydd aeddfedu'r system imiwnedd a chyswllt â micro-organebau [28]. Er mwyn ymchwilio i cineteg y gwahanol is-setiau celloedd T, gwerthuswyd y PBMCs gwaed o'r rheolaeth cyfrwng heb ei ysgogi gan cytometreg llif. Yn un mis oed, amlder (cyfartaledd %) celloedd CD4− CD8+ T oedd 13.6±2.8% ac 10.5±3.4% mewn moch o ffermydd A a B, yn y drefn honno. Cynyddodd yr amlder hwn yn sylweddol yn ddeufis oed ar y ddwy fferm a dirywiodd yn sylweddol eto yn dri mis oed ar fferm A. O dri mis oed ymlaen arhosodd yn sefydlog ar fferm A, tra ar fferm B gwelwyd cynnydd sylweddol eto yn chwech oed. mis oed (Ffigur 2A). Ar y ddwy fferm, roedd amlder celloedd CD4+CD8− T ar ei uchaf yn un mis oed gyda 37.5±6.0% (fferm A) a 42.3±5.9% (fferm B). Gostyngodd yr amlder hwn yn sylweddol yn ddau fis oed. Ar fferm A, sefydlogodd yr amlder o ddau fis ymlaen, tra ar fferm B digwyddodd y gostyngiad yn fwy graddol (Ffigur 2B). Yn un mis oed, y gymhareb CD4/CD8 oedd 2.8 (fferm A) a 4.0 (fferm B). Gostyngodd y gymhareb yn ddau fis oed ac arhosodd yn is nag 1.0 o dri mis oed ymlaen ar y ddwy fferm. Amledd celloedd CD4-CD8-T mewn moch un mis oed oedd 31.1 ± 7.2% a 25.6 ± 5.4% ar ffermydd A a B, yn y drefn honno. Ar y ddwy fferm, arhosodd yr amlder yn debyg ar ddau fis oed ond cynyddodd yn sylweddol wedi hynny i gyrraedd y lefelau uchaf yn bum mis oed (Ffigur 2C). Roedd amlder celloedd T CD4+CD{{{{8+} T ar ei isaf yn un mis oed gyda 3.3±1.1% a 4.0±1.0% ar ffermydd A a B, yn y drefn honno. Cynyddodd yr amlder hwn yn sylweddol yn ddau fis oed. Ar fferm A, arhosodd yn sefydlog wedyn, tra ar fferm B, cynyddodd ymhellach yn raddol hyd at bedwar mis oed i ostwng yn sylweddol eto yn bum mis oed (Ffigur 2D).

Ffigur 1 Presenoldeb gwrthgyrff Mycoplasma hyopneumoniae-specifc mewn hychod a moch. A, C

Ffigur 2 Amlder misol (%) is-setiau celloedd T CD3+ yng ngwaed moch. A

Ffig. 3 Dyfalbarhad o gylchredeg amlhau celloedd CD3+ T mewn moch. A, B

Ymlediad celloedd T

Dadansoddwyd y PBMCs a symbylwyd gan M. hypopnea moniae i ymchwilio i ganran y celloedd T amlhau. Fel y dangosir yn Ffigurau 3A a B, roedd celloedd T amlhau CD3+ yn bresennol yng ngwaed moch ar bob eiliad samplu ar y ddwy fferm ar ôl ysgogiad in vitro â bacterin M. hyopneumoniae, er bod canrannau rhai anifeiliaid yn uwch ar fferm A. Ar fferm A, bu gostyngiad sylweddol yng nghanran y celloedd T ymledol yn chwe mis oed o gymharu â’r ganran yn bum mis oed, tra ar fferm B, ni allai unrhyw ostyngiad neu gynnydd sylweddol yng nghanran y celloedd T ymledol. cael ei arsylwi. Te CD4−CD8− Celloedd T oedd yr is-set cell T CD3+ amlycaf yn amlhau mewn ymateb i ysgogiad M. hyopneumoniae ar y ddwy fferm, ac yna is-set cell CD4+CD8− T (Ffigurau 3 C a D).

Ffigur 4 Cylchrediad Mycoplasma hyopneumoniae-specifc celloedd T sy'n cynhyrchu CD4+CD8+ yng ngwaed moch ar y ddwy fferm. A

Cynhyrchu cytocin celloedd T

Er mwyn cael gwell dealltwriaeth o bresenoldeb a dyfalbarhad celloedd T M. hyopneumoniae-specifc mewn moch, cafodd TNF- , IFN- , ac IL-17cynhyrchiad gan PBMCs gwaed a ysgogwyd in vitro gyda bacterin M. hyopneumoniae eu gwerthuso gan cytometreg llif. Fel y dangosir yn Ffigur 4, ar y ddwy fferm, roedd celloedd T ysgogol CD8+ yn cynhyrchu cytocinau, a oedd yn fwy amlwg mewn moch o oedran iau. Gostyngodd canran celloedd T TNF- + CD4+CD8+ T yn sylweddol mewn moch ar fferm A o fis i ddau fis oed ac o ddau i dri mis oed ar fferm B. A. gwelwyd gostyngiad sylweddol mewn celloedd T IFN{10}} CD4+CD8+ o fis i ddau fis oed mewn moch ar y ddwy fferm ac o ddau i dri mis oed ar fferm B. Te bu gostyngiad sylweddol yng nghanran y celloedd T CD{13}}CD8+ sy'n cynhyrchu TNF- ac IFN- mewn moch o fis i ddau fis oed ar fferm A ac o ddau i dri mis ar fferm B. Ar un mis O oedran, roedd y ganran o gelloedd T IL-17A+ CD4+CD8+ T yn uwch o gymharu â'r ganran yn ddau fis oed, ond nid oedd y gwahaniaeth hwn yn ystadegol arwyddocaol. Roedd gan y pedwar anifail ar fferm B a brofodd M. hyopneumoniae positif yn chwe mis oed gynhyrchiad cytocin tebyg gan gelloedd T CD4+CD8+ o gymharu â'r anifeiliaid M. hyopneumoniae negatif. Yn ogystal â'r is-set cell T CD{23}}CD8+, gwelsom hefyd wahaniaethau mewn cynhyrchu cytocinau gan is-setiau celloedd T eraill ar fferm B. Mae Ffigur 5 yn dangos data o ymatebion clir a gwahaniaethau sylweddol mewn cynhyrchu cytocinau fesul yr is-setiau celloedd T eraill a ddigwyddodd yn fferm B yn unig. Ar gyfer y paramedrau eraill ac ar fferm A, ni welwyd unrhyw wahaniaethau yng nghynhyrchiad cytocin CD4-CD8+, CD4+CD8− neu CD4− CD8 - celloedd T. Cynyddodd canran y celloedd T IFN- + CD4+CD8− T yn sylweddol, tra gostyngodd canran celloedd T IFN- + CD4-CD8+ yn sylweddol o fis i ddau fis o oed. O bwys, roedd gan y mochyn a oedd yn M. hyopneumoniae positif yn chwe mis oed gyda 7 M. organebau hyopneumoniae/ µL DNA ganrannau uchel o TNF- + CD4+CD8− ac IL-17 A+ CD4−CD8+ celloedd T yn ei waed. Roedd gan y moch M. hyopneumoniae-positif eraill yn chwe mis oed ganrannau tebyg o gelloedd T sy'n cynhyrchu cytocin i'r moch M. hyopneumoniae-negyddol.

Ffigur 5 Cylchrediad Mycoplasma hyopneumoniae-specifc Is-setiau celloedd T sy'n cynhyrchu cytocinau yng ngwaed moch ar fferm B. A

Ar bob fferm, yr oedd M. hyopneumoniae-specifc MDA yn bresennol yn y serum o 20 perchyll deuddydd ac absenol yn y serum o bum perchyll, y rhai a ddaethant o'r hwch heb wrthgyrff serwm M. hyopneumoniae-specifc. Er mwyn ymchwilio i weld a oedd gan MDA ddylanwad ar yr imiwnedd cell-gyfryngol a achosir gan frechlyn M. hyopneumoniae-specifc, gwnaethpwyd y gwahaniaeth rhwng y perchyll ag MDA a heb MDA, ac ymchwiliwyd i wahaniaethau rhwng y ddau grŵp ar gyfer yr is-setiau celloedd T y bu'n arwyddocaol amdanynt. gwelwyd gwahaniaethau mewn cynhyrchu cytocin (Ffigurau 6A-E). Ar fferm B, roedd y ganran o gelloedd T TNF- + CD4+CD8+ T yn tueddu i fod yn uwch mewn moch un mis oed ag MDA, o gymharu â moch un mis oed moch heb MDA. Ar gyfer y celloedd T CD4+CD8+ eraill a oedd yn cynhyrchu cytocinau, roedd y canrannau cyfartalog yn debyg rhwng y ddau grŵp o foch yn fis oed, ar bob fferm. Dros amser, bu tuedd ostyngol yng nghanrannau cyfartalog celloedd T sy’n cynhyrchu cytocinau yng ngwaed moch, gyda dim ond gwahaniaethau bach, os o gwbl, yn chwe mis oed rhwng moch â moch a hebddynt. MDA (Ffigurau 6A–C). Gwelwyd yr un peth ar gyfer IFN{24}}cynhyrchu celloedd CD{8+ T yng ngwaed moch ar fferm B (Ffigur 6D). Yn un mis a dau fis oed, roedd canran gyfartalog y celloedd TNF- + CD4+CD8− T ar fferm B yn debyg ar gyfer moch â MDA neu heb MDA, tra yn chwe mis oed, roedd canran uwch o TNF- -yn cynhyrchu celloedd CD4+CD8− gwelwyd celloedd T yng ngwaed moch heb MDA (Ffigur 6E).

budd-daliadau atodiad cistanche-cynyddu imiwnedd

Trafodaeth

Dyma'r astudiaeth gyntaf sy'n rhoi mewnwelediad i'r ymatebion imiwnedd hirdymor a achosir gan frechlyn M. hyopneumoniae-benodol mewn moch o enedigaeth hyd at ladd dan amodau maes. Roedd ymateb imiwn humoral mewn serwm, a aseswyd gyda'r IDEXX ELISA, yn absennol ar ôl y brechiad ond roedd ymatebion imiwn trwy gyfrwng celloedd yn bresennol. Gwelwyd ymlediad celloedd T ar ôl ysgogiad in vitro M. hyopneumoniae tan ddiwedd y cyfnod pesgi. Ymhellach, yn un mis oed, ar ôl brechiad M. hyopneumoniae, roedd celloedd T CD sy'n cynhyrchu cytocinau M. hyopneumoniae-benodol, sy'n cynnwys celloedd cof T, yn bresennol ond yn gostwng gydag oedran cynyddol . Nid oedd yn ymddangos bod gwrthgyrff mamol yn effeithio ar yr ymatebion imiwn a achosir gan frechlyn humoral a gell-gyfryngol yn ystod oes y mochyn, ac eithrio presenoldeb celloedd T TNF- + CD4+CD8+ . Er mwyn gwerthuso parhad a gwahaniaethau mewn ymateb imiwn mewn perchyll wedi'u brechu gan M. hyopneumoniae ar lefel y fferm, fe wnaethom gynnwys dwy fferm fasnachol. Er y tybiwyd bod cylchrediad M. hyopneumoniae ar y ddwy fferm, roedd y moch a astudiwyd yn parhau i fod yn M. hyopneumoniae negyddol y treial cyfan, ac eithrio pedwar mochyn ar fferm B ar ddiwedd y treial, a oedd yn caniatáu i ni ymchwilio i barhad y brechlyn a achosir gan frechlyn. ymatebion imiwn heb ddylanwad haint naturiol. Nid oedd gan y pedwar mochyn M. hyopneumoniae PCR-positif yn chwe mis oed ar fferm B lefelau gwrthgyrff M. hyopneumoniae-benodol uwch o gymharu â'r moch PCR-negyddol. Ac eithrio un mochyn, nid oedd ganddynt hefyd ganrannau uwch o gelloedd T sy'n cynhyrchu cytocin yn eu gwaed ar ôl ysgogiad in vitro M. hyopneumoniae. Gellid egluro hyn gan y ffaith ei bod yn debygol bod yr haint M. hyopneumoniae wedi digwydd ychydig cyn eiliad y samplu, nad oedd yn caniatáu digon o amser i'r system imiwnedd ymateb i'r haint [29-31]. Mewn tri o'r pedwar mochyn M. hyopneumoniae-positif, roedd y llwyth pathogenau yn y sampl TBS hefyd braidd yn isel.

Ffigur 6 Canran gyfartalog yr is-setiau cell T sy'n cynhyrchu cytocinau-benodol Mycoplasma yn ôl lefelau gwrthgyrff sy'n deillio o fam. AC

Roedd lefelau gwrthgyrff serwm mewn moch deuddydd oed yn cyfateb i lefelau gwrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc mewn serwm a colostrwm o hychod adeg porchella, gan gadarnhau trosglwyddo imiwnedd mamol M. hyopneumoniae trwy laeth tor [22, 23]. Ni welwyd seroconversion ar ôl brechiad M. hyopneumoniae yn 16 diwrnod oed. I'r gwrthwyneb, gostyngodd lefelau gwrthgyrff M. hyopneumoniae-specifc dros amser gyda phob anifail yn dod yn seronegative yn ddau fis oed. Mae'n hysbys bod y brechlyn M. hyopneumoniae masnachol a ddefnyddir yn yr astudiaeth hon yn achosi seroconversion cyfyngedig ar ôl un weinyddiaeth, a arsylwyd hefyd mewn astudiaethau blaenorol [14, 32, 33]. Mewn astudiaeth arbrofol, o frechu perchyll o gwmpas diddyfnu, roedd 40% o'r anifeiliaid wedi serodrosi 3 wythnos ar ôl y brechiad, tra mewn treial maes, dim ond 3 o bob 40 mochyn a gafodd serodrosi 7 wythnos ar ôl y brechiad [14, 32]. Fodd bynnag, nid yw presenoldeb (neu absenoldeb) gwrthgyrff serwm M. hyopneumoniae-specifc ar ôl brechu yn cyfateb i amddiffyniad (neu ddiffyg) rhag haint [14, 25, 34]. Er mwyn amddiffyn y gwesteiwr rhag pathogenau bacteriol mewngellol ac allgellog cyfadranol fel M. hyopneumoniae, mae celloedd cynorthwyydd CD-CD8-T, celloedd T1 a T17 yn bennaf, yn chwarae rhan bwysig. Mae celloedd T1 yn cynhyrchu IFN- , sy'n actifadu macroffagau i ladd y pathogen, tra bod celloedd T17 yn cynhyrchu IL-17A i atgyfnerthu'r rhwystr mwcosaidd [35-38]. Yn ddiweddar, dangoswyd y gellir dod o hyd i ganran isel o gelloedd M. hyopneumoniae yn fewngellol hefyd, ac o ystyried rôl hanfodol celloedd T sytotocsig CD4-CD8+ wrth amddiffyn y gwesteiwr rhag pathogenau mewngellol, mae'r celloedd T sytotocsig hyn gallai hefyd fod yn bwysig i reoli heintiau M. hyopneumoniae [31, 35, 39]. Er mwyn ymchwilio i gineteg y gwahanol amleddau is-setiau celloedd T a gallu'r celloedd T hyn i amlhau ar ôl ysgogiad M. hyopneumoniae in vitro, cafodd PBMCs eu hynysu oddi wrth berchyll ar y ddwy fferm. Roedd patrwm amlder is-setiau celloedd T yn debyg ar y ddwy fferm hyn. Yn ôl astudiaethau eraill, mae canran y celloedd CD4+CD8− T yn uwch na chanran celloedd T CD4-CD{8+ yn iau. Gydag oedran cynyddol, mae canran y celloedd CD4+CD8-T yn gostwng, tra bod canran y celloedd T CD4-CD8+ yn cynyddu gan arwain at ostyngiad yn y gymhareb CD4/CD8 dros amser [40–42]. Mae perchyll yn cael eu geni gyda bron dim celloedd CD4+CD{{8+ T). Mae'r celloedd hyn yn cynyddu gydag oedran pan fydd moch yn dod i gysylltiad â micro-organebau, gan fod gan rai o'r celloedd hyn swyddogaeth cof sy'n benodol i bathogen [5, 22, 42-44]. Fodd bynnag, ar fferm A, arhosodd amlder celloedd CD CD8+ T ar yr un lefel o ddau fis oed ymlaen. Ar fferm B, bu cynnydd graddol hyd at bedwar mis oed, yn ôl y disgwyl, er bod canran celloedd CD{60}CD8+ T wedi gostwng eto wedyn. Mae cymharu is-setiau celloedd T ag astudiaethau eraill yn parhau i fod yn anodd gan na chafodd y PBMCs yn yr astudiaeth hon eu mesur yn uniongyrchol ar ôl samplu gwaed, ond eu deor gyntaf am 20 h cyn mesur canran yr isboblogaethau celloedd T. Parhaodd mycoplasma hyopneumoniae-specifc toreth o gelloedd T CD{{3+ hyd at ddiwedd y cyfnod pesgi, gan gadarnhau presenoldeb celloedd T M. hyo pneumoniae-specifc yng ngwaed moch a gafodd eu brechu yn 16 diwrnod oed. Mae’n bosibl bod cydberthynas rhwng presenoldeb celloedd T lluosogi penodol M. hyopneumoniae ac amddiffyniad rhag niwmonia ensŵotig oherwydd dangosodd ymchwil flaenorol fod gallu PBMCs i amlhau, ar ôl ysgogiad in vitro â’r mitogen ConA, yn cydberthyn â’r ymwrthedd yn erbyn clefydau mewn moch [45 ]. Te CD4−CD8− Celloedd T oedd y prif is-set cell T a oedd yn amlhau ar y ddwy fferm ac yna celloedd CD4+CD8− T gyda'r canrannau'n amrywio dros amser. Mewn moch, mae'r rhan fwyaf o gelloedd CD4-CD8-T yn cynnwys derbynyddion cell δ T amrywiol mewn cyferbyniad â chelloedd T antigen-benodol [31, 42]. Ar ôl heintio moch â phathogenau eraill fel PRRSV, celloedd δ T hefyd oedd y prif ymatebwyr lluosog ar ôl viremia PRRSV [46]. Mae'r celloedd T hynny hefyd yn chwarae rhan wrth gynhyrchu gwrthgyrff niwtraleiddio ar ôl brechu moch yn erbyn twymyn moch clasurol [47]. Ar ben hynny, mewn hylif lavage broncoalfeolar o foch sydd wedi'u heintio â Actinobacillus pleuropneumoniae, gwelwyd cynnydd mewn celloedd CD8 - δ T [48]. Mae angen ymchwil pellach i ymchwilio i rôl celloedd δ T wrth reoli ac amddiffyn rhag heintiau M. hyopneumoniae. Mewn profion adalw, aseswyd is-setiau celloedd T gwahanol ar gyfer cynhyrchu TNF- , IFN- , ac IL-17A. Yn ddeufis oed, bu gostyngiad sylweddol yng nghanran y celloedd TNF- -, IFN- - a TNF- /IFN- -sy'n cynhyrchu CD{89}}CD8+ o'i gymharu â'r canrannau yn un mis oed. Wedi hynny, roedd y canrannau'n amrywiol, naill ai wedi gostwng ymhellach neu aros yn sefydlog dros amser. Gwelwyd yr un patrwm ar gyfer celloedd T IL-17CD{93}}CD8+ T sy'n cynhyrchu A, er nad yw'n arwyddocaol yn ystadegol. Mewn giltiau a frechwyd yn erbyn PRRSV, gwelwyd cynhyrchiad IFN gan PBMCs hefyd tan 42 diwrnod ar ôl y brechiad primo, ond gostyngodd wedi hynny tan 147 diwrnod ar ôl y brechiad [49]. Mae niferoedd cynyddol o lymffocytau sy'n secretu IFN ar ôl y brechiad M. hyo pneumoniae wedi'u dangos yn flaenorol [9, 10].

cistanche byw yn yr anialwchTubulosa

Yn ddiweddar, mae tystiolaeth wedi bod yn cronni bod gan gelloedd T amlswyddogaethol, sy'n cynhyrchu mwy nag un cytocin, rôl ganolog wrth amddiffyn a chlirio pathogenau. Er enghraifft, mewn moch sydd wedi'u heintio â rhywogaeth Chlamydia, mae celloedd CD amlswyddogaethol CD8-T wedi'u cydberthyn ag amddiffyniad [50]. Cynyddodd brechu perchyll yn erbyn M. hyo pneumoniae hefyd y canrannau o gelloedd T CD amlswyddogaethol4+CD8− a CD4-CD8+ [12]. Mewn astudiaeth arall, arweiniodd brechu moch yn erbyn PCV2 at lefelau uwch o gelloedd T TNF- +/IFN- + CD4+CD8+ 24 diwrnod ar ôl y brechiad, gan ostwng eto tua diwedd yr astudiaeth 56 diwrnod ar ôl y brechiad [51]. Yn ein hastudiaeth, gwelsom hefyd fod presenoldeb celloedd T sy'n cynhyrchu cytocinau CD4+CD8+ wedi lleihau dros amser. Canolbwyntiodd yr astudiaeth hon ar lymffocytau gwaed sy'n cylchredeg, ond mae brechu hefyd yn ysgogi ymatebion imiwnedd cell-gyfryngol M. penodol-benodol yn yr ysgyfaint a nodau lymff bronciol [8]. Felly, dylai ymchwil yn y dyfodol ar imiwnedd M. hyo pneumoniae-benodol a achosir gan frechlyn ganolbwyntio hefyd ar ymatebion imiwn lleol sy'n cael eu cyfryngu gan gelloedd. At hynny, i imiwneiddio'r moch bach dim ond un brechlyn M. hyopneumoniae masnachol a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth hon. Gall yr ymatebion imiwn amrywio rhwng brechlynnau gan eu bod yn cael eu dylanwadu gan ffurfio brechlyn (cynorthwyol ac antigen) a'r llwybr gweinyddu [16, 52, 53]. Er enghraifft, mae'n hysbys bod carbopol, y cynorthwyol yn y brechlyn M. hyopneumoniae masnachol a ddefnyddir, yn cyfeirio'r ymateb imiwn tuag at ymateb T1 [54]. Ar bob fferm, roedd pum mochyn bach yn M. hyopneumoniae seronegative, ac yn y serwm o 20 mochyn bach roedd M. hyopneu MDA symudol-benodol yn bresennol. Waeth beth fo'u statws MDA, roedd pob mochyn yn M. hyopneumoniae seronegative yn ddau fis oed, ac ni welwyd serodrosi ar adegau diweddarach. Mae ein canfyddiadau yn cyd-fynd ag astudiaeth flaenorol lle cafodd perchyll saith diwrnod oed gyda MDA a heb MDA eu brechu rhag M. hyopneumoniae [25]. Yn y ddau grŵp, ni welwyd serodrosi ar ôl y brechiad ac roedd pob mochyn yn seronegative 42 diwrnod ar ôl y brechiad. Ar y llaw arall, canfu eraill fod brechiad M. hyopneumoniae ym mhresenoldeb MDA yn arwain at lefelau gwrthgyrff uwch o'i gymharu â moch bach heb eu brechu, ond po uchaf yw'r titer o MDA, yr isaf yw'r ymateb [24, 26]. Er na welir ymateb gwrthgorff bob amser ar ôl brechiad M. hyopneumoniae, anogir ymatebion imiwn M. hyopneumoniae-cyfryngol sy'n benodol i gelloedd [26]. Ni welwyd unrhyw wahaniaeth yn nifer y PBMCs sydd wedi'u hynysu o foch wedi'u brechu gan M. hyopneumoniae waeth beth fo lefelau MDA [26]. Yn ein hastudiaeth, o fewn pob fferm, ni welwyd unrhyw wahaniaethau mewn celloedd T sy'n cynhyrchu cytocin rhwng moch wedi'u brechu gan M. hyopneumoniae gyda MDA a heb MDA yn fis oed. Dim ond ar fferm B, roedd perchyll ag MDA yn tueddu i fod â chanrannau uwch o gelloedd T TNF{47}CD4+CD{8+ T yn un mis oed o gymharu â moch bach heb MDA. Dylid ymchwilio ymhellach i berthnasedd y canfyddiadau hyn mewn astudiaeth sy'n cynnwys nifer fwy a chyfartal o berchyll gyda MDA a heb M. hyopneumoniae-specifc. Dylid cynnal dadansoddiad ystadegol o ddeg hefyd gan na wnaed hyn yn yr astudiaeth hon oherwydd y nifer isel ac anghyfartal o anifeiliaid yn y grŵp heb MDA a chydag MDA. I gloi, dangosodd yr astudiaeth bresennol, er bod serodrosi ar ôl brechu mochyn M. hyopneumoniae yn ddiffygiol, canfuwyd ymatebion imiwn M. hyopneumoniae-cyfryngol yn benodol i gelloedd. Roedd celloedd T CD{54}}CD{55}} amlswyddogaethol sy'n cynhyrchu cytocinau yn bresennol hyd at dri mis oed a gwelwyd celloedd T ymledol tan ddiwedd y cyfnod pesgi sy'n nodi presenoldeb imiwnedd cyfryngol celloedd-benodol i bathogen. yn M. hyopneumoniae moch brechu. Mae'r canlyniadau'n sail i ymchwil pellach sy'n asesu dylanwad haint M. hyopneumoniae naturiol ar imiwnedd a achosir gan frechlyn o dan amodau maes.

Cyfeiriadau

1. Pieters M, Maes D (2019) Mycoplasmosis. Yn: Zimmermann JJ, Karriker LA, Ramirez A, Schwartz KJ, Stevenson GW, Zhang J (golau) Clefydau moch, 11eg arg. Wiley, Efrog Newydd

2. Rycroft A (2020) Nodweddion cyffredinol a dosbarthiad rhywogaethau Mycoplasma mochyn. Yn: Maes D, Sibila M, Pieters M (golau) Mycoplasmas mewn Moch. Acco, tt 26–46

3. Maes D, Segalés J, Meyns T, Sibila M, Pieters M, Haesebrouck F (2008) Rheoli heintiau Mycoplasma hyopneumoniae mewn moch. Milfeddyg Microbiol 126:297-309

4. Garza-Moreno L, Segalés J, Pieters M, Romagosa A, Sibila M (2018) Strategaethau acclimation mewn giltiau i reoli haint Mycoplasma hyopneumoniae. Milfeddyg Microbiol 219:23–29 5. Saalmüller A, Werner T, Fachinger V (2002) T-helper celloedd o naïf i ymroddedig. Milfeddyg Immunol Immunopathol 87:137-145

6. Ruiz AR, Utrera V, Pijoan C (2003) Effaith brechiad hwch Mycoplasma hyopneumoniae ar gytrefu perchyll adeg diddyfnu. J Prod Iechyd Moch 11:131–135

7. Sibila M, Bernal R, Cenllif D, Riera P, Llopart D, Calsamiglia M, Segalés J (2008) Effaith brechiad hwch yn erbyn Mycoplasma hyopneumoniae ar gytrefu hwch a moch bach a serodrosi, a briwiau ysgyfaint moch adeg lladd. Milfeddyg Microbiol 127: 165-170

8. Marchioro SB, Maes D, Flahou B, Pasmans F, Del Pozo Sacristán R, Vranckx K, Melkebeek V, Cox E, Wuyts N, Haesebrouck F (2013) Ymatebion imiwn lleol a systemig mewn moch wedi'u chwistrellu'n fewngyhyrol â hyopneumoniae Mycoplasma anweithredol brechlyn. Brechlyn 31:1305–1311

9. Martelli P, Saleri R, Cavalli V, De Angelis E, Ferrari L, Benetti M, Ferrarini G, Merialdi G, Borghetti P (2014) Ymateb imiwn systemig a lleol mewn moch sy'n cael eu chwistrellu'n intradermally ac yn fewngyhyrol â brechlynnau hyopneumoniae Mycoplasma anweithredol. Milfeddyg Microbiol 168:357–364

10. Thacker EL, Thacker BJ, Kuhn M, Hawkins PA, Waters WR (2000) Gwerthusiad o ymatebion imiwn lleol a systemig a achosir gan chwistrelliad mewngyhyrol o Mycoplasma hyopneumoniae bacterin i foch. Am J milfeddyg Res 61:1384-1389

11. Dyma HW, Han K, Oh Y, Park C, Choo EJ, Kim SH, Lee BH, Chae C (2013) Cymhariaeth o imiwnedd cell-gyfryngol a achosir gan dri bacterin hyopneumoniae Mycoplasma un-dos masnachol mewn moch. J milfeddyg Med Sci 75:245–247

12. Matthijs AMF, Auray G, Jakob V, Garcia-Nicolas O, Braun RO, Keller I, Bruggman R, Devriendt B, Boyen F, Guzman CA, Michiels A, Haesebrouck F, Collin N, Barnier-Quer C, Maes D , Summerfield A (2019) Systemau emu noleg nodweddu fformwleiddiadau brechlyn newydd ar gyfer bacteria Mycoplasma hyopneumoniae. Immunol blaen 10:1087

13. Villarreal I, Meyns T, Dewulf J, Vranckx K, Calus D, Pasmans F, Haeseb- rouck F, Maes D (2011) Effaith brechu ar drosglwyddo Mycoplasma hyopneumoniae mewn moch dan gyflwr ffelt. milfeddyg J 188:48-52

14. Arsenakis I, Panzavolta L, Michiels A, Del Pozo Sacristán R, Boyen F, Haesebrouck F, Maes D (2016) Effeithlonrwydd brechu Mycoplasma hyopneumoniae cyn ac wrth ddiddyfnu yn erbyn her arbrofol haint mewn moch. Milfeddyg BMC Res 12:63

15. Parc C, Jeong J, Choi K, Chae C (2016) Effeithlonrwydd brechlyn deufalent newydd ar gyfer syrcofeirws mochyn math 2 a Mycoplasma hyopneumoniae (Fostera™ PCV MH) o dan amodau arbrofol. Brechlyn 34:270–275

16. Matthijs AMF, Auray G, Boyen F, Schoos A, Michiels A, García-Nicolás O, Barut GT, Barnier-Quer C, Jakob V, Collin N, Devriendt B, Summerfield A, Haesebrouck F, Maes D (2019) Effeithiolrwydd tri brechlyn bacterin arloesol yn erbyn haint arbrofol gyda Mycoplasma hyopneumoniae. Milfeddyg Res 50:91

17. Reynolds SC, St Aubin LB, Sabbadini LG, Kula J, Vogelaar J, Runnels P, Peters AR (2009) Llai o friwiau ysgyfaint mewn moch wedi'u herio 25 wythnos ar ôl rhoi dos sengl o'r brechlyn Mycoplasma hyopneumo niae tua 1 wythnos o oed. milfeddyg J 181:312-320

18. Wilson S, Van Brussel L, Saunders G, Taylor L, Zimmermann L, Heinritzi K, Ritzmann M, Banholzer E, Eddicks M (2012) Mae brechu perchyll yn 1 wythnos oed gyda brechlyn Mycoplasma hyopneumoniae anweithredol yn lleihau briwiau ysgyfaint a gwellhawyr cynnydd dyddiol cyfartalog ym mhwysau'r corff. Brechlyn 30:7625–7629

19. Del Pozo Sacristán R, Sierens A, Marchioro SB, Vangroenweghe F, Jourquin J, Labarque, Haesebrouck F, Maes D (2014) Effeithiolrwydd brechiad cynnar Mycoplasma hyopneumoniae yn erbyn clefyd anadlol cymysg mewn moch pesgi hŷn. milfeddyg Argymhelliad 174:197

20. Cvjetkovíc V, Sipos S, Szabó I, Sipos W (2018) Effeithiolrwydd clinigol dwy strategaeth frechu yn erbyn Mycoplasma hyopneumoniae mewn buches mochyn sy'n dioddef o glefyd anadlol. Porc Iechyd Manag 4:19

21. Garza-Moreno L, Segalés J, Pieters M, Romagosa A, Sibila M (2017) Arolwg ar arferion acclimation gilt Mycoplasma hyopneumoniae yn Ewrop. Porc Iechyd Manag 3:21

22. Biebaut E, Beuckelaere L, Boyen F, Haesebrouck F, Gomez-Duran CO, Devriendt B, Maes D (2021) Trosglwyddo Mycoplasma hyopneumoniae imiwnedd cell-gyfryngol penodol i moch bach newyddenedigol. Milfeddyg Res 52:96

23. Bandrick M, Ariza-Nieto C, Baidoo SK, Molitor TW (2014) Mae imiwnedd colostral gwrth-gorff-gyfryngol a gell-gyfryngol yn cyfrannu at imiwnedd cynhenid ​​​​ac antigen-benodol mewn perchyll. Dev Comp Immunol 43:114-120

24. Hodgins DC, Shewen PE, Dewey CE (2004) Dylanwad oedran a gwrthgyrff mamol ar ymateb gwrthgyrff moch bach newyddenedigol wedi'u brechu yn erbyn Mycoplasma hyopneumoniae. J Prod Iechyd Moch 12:10–16

25. Martelli P, Terreni M, Guazzetti S, Cavirani S (2006) Ymateb gwrthgyrff i haint Mycoplasma hyopneumoniae mewn moch wedi'u brechu gyda neu heb wrthgyrff mamol a achosir gan frechu hwch. J Milfeddyg Med 53:229–233

26. Bandrick M, Theis K, Molitor TW (2014) Mae imiwnedd mamol yn gwella Mycoplasma hyopneumoniae ymatebion imiwn a achosir gan gell trwy frechu mewn perchyll. Milfeddyg BMC Res 10:124

27. Beuckelaere L, Haspeslagh M, Biebaut E, Boyen F, Haesebrouck F, Krejci R, Meyer E, Gleerup D, De Spiegelaere W, Devriendt B, Maes D (2022) Mae gwahanol ymatebion imiwn lleol, cynhenid ​​ac addasol yn cael eu hysgogi gan ddau bacteria hyopneumoniae Mycoplasma masnachol a chynorthwyydd yn unig. Immunol blaen 13:1015525

28. Gerner W, Mair KH, Schmidt S (2022) Imiwn-undod celloedd T lleol a systemig wrth ymladd heintiau firaol a bacteriol moch. Annu Parch Anim Biosci 10:349–372

29. Calsamiglia M, Pijoan C, Bosch GJ (1999) Proffilio Mycoplasma hypopnoea symudol ar ffermydd gan ddefnyddio seroleg a thechneg PCR nythu. J Prod Iechyd Moch 7:263-268

30. Pieters M, Daniels J, Rovira A (2017) Cymharu mathau o samplau a dulliau diagnostig ar gyfer canfod hyopneumoniae Mycoplasma in vivo yn ystod camau cynnar yr haint. Milfeddyg Microbiol 203: 103-109

31. Tizard IR (2018) Imiwnoleg milfeddygol, 10fed arg. Elsevier, St. Louis, Missouri

32. Arsenakis I, Michiels A, Del Pozo Sacristán R, Boyen F, Haesebrouck F, Maes D (2017) Brechiad mycoplasma hyopneumoniae adeg diddyfnu neu ychydig cyn diddyfnu o dan amodau maes: hap-dreial effeithiolrwydd. Cynnig Milfeddyg 181:19

33. Betlach AC, Fano E, Vanderwaal K, Pieters M (2021) Effaith brechiadau lluosog ar drosglwyddo a graddau haint Mycoplasma hyopneumoniae mewn giltiau. Brechlyn 39:767-774

34. Martínez-Boixaderas N, Garza-Moreno L, Sibila M, Segalés J (2022) Effaith imiwnedd sy'n deillio o fam ar ymatebion imiwn a achosir gan frechu moch bach yn gynnar yn erbyn y pathogenau mwyaf cyffredin sy'n gysylltiedig â chymhlethdod clefyd anadlol mochyn. Porc Iechyd Manag 8:11

35. Schroder K, Hertzog PJ, Ravasi T, Hume DA (2004) Interferon- : trosolwg o signalau, mecanweithiau, a swyddogaethau. J Leukoc Biol 75:163-189

36. Dobbs NA, Odeh AN, Haul X, Simecka JW (2009) Rôl amlochrog imiwnedd cyfryngol T mewn pathogenesis ac ymwrthedd i glefyd anadlol Mycoplasma. Tueddiadau Curr Imiwnol 10:1–19

37. Ge Y, Huang M, Yao Y (2020) Bioleg interleukin-17 a'i arwyddocâd pathoffisiolegol mewn sepsis. Blaen Immunol 11:1558

38. Summerfeld A (2020) Ymatebion imiwn yn erbyn heintiau Mycoplasma mochyn. Yn: Maes D, Sibila M, Pieters M (golau) Mycoplasmas mewn Moch. Acco, tt 110–125

39. Raymond BBA, Turnbull L, Jenkins C, Madhkoor R, Schleicher I, Uphof CC, Whitchurch CB, Rohde M, Djordjevic SP (2018) Mae mycoplasma hyopneumoniae yn byw yn fewngellol o fewn celloedd epithelial mochyn. Cynrychiolydd Gwyddonol 8:17697

40. Borghetti P, De Angelis E, Saleri R, Cavalli V, Cacchioli A, Corradi A, Mocchegiani E, Martelli P (2006) Newidiadau lymffocytau T perifferol mewn perchyll newyddenedigol: perthynas â hormon twf (GH), prolactin (PRL) a newidiadau cortisol. Milfeddyg Immunol Imiwnopathol 110:17-25

41. Brown DC, Maxwell CV, Erf GF, Davis ME, Singh S, Johnson ZB (2006) Ontogeni lymffocytau T a nodweddion morffolegol berfeddol mewn moch newyddenedigol ar wahanol oedrannau yn y cyfnod ôl-enedigol. J Anim Sci 84:567-578

42. Stepanova H, Samankova P, Leva L, Sinkora J, Faldyna M (2007) Datblygiad ôl-enedigol cynnar y system imiwnedd mewn perchyll: ailddosbarthu is-setiau lymffocyt T. Cell Immunol 249:73-79

43. Hernández J, Garfas Y, Nieto A, Mercado C, Montaño LF, Zenteno E (2001) Gwerthusiad cymharol o'r CD{2}} CD{3}} a CD{4}} CD{5} } lymffocytau yn yr ymateb imiwn i rwbiwlafeirws mochyn. Milfeddyg Immunol Immunopathol 79:249-259

44. Blanc F, Prévost-Blondel A, Piton G, Bouguyon E, Leplat J, Adréoletti F, Egidy G, Bourneuf E, Bertho N, Vincent-Naulleau S (2020) Mae cyfansoddiad leukocytes cylchredol yn amrywio yn ôl oedran a dyfodiad melanoma yn model biofeddygol moch MeLiM. Blaen Immunol 11:291

45. Jeon RL, Gilbert C, Cheng J, Putz AC, Dyck MK, Plastow GS, Fortin F, Canada P, Dekkers JC, Harding JCS (2021) Ymlediad celloedd mononiwclear gwaed ymylol o berchyll iach ar ôl ysgogiad mitogen fel dangosyddion clefyd gwytnwch. J Anim Sci 99:skab084

46. ​​Cic AR, Amaral AF, Cortes LM, Fogle JE, Crisci E, Almond GW, Käser T (2019) Ymateb cell-T i feirws syndrom atgenhedlu ac anadlol mochyn math 2 (PRRSV). Firysau 11:796

47. Petersen B, Kammerer R, Frenzel A, Hassel P, Dau TH, Becker R, Breithaupt A, Ulrich RG, Lucas-Hahn A, Meyers G (2021) Cynhyrchu a nodweddu cyntaf moch TRDC-knockout diffyg celloedd δT. Cynrychiolydd Gwyddonol 11:14965

48. Faldyna M, Nechvatalova K, Sinkora J, Knotigova P, Leva L, Krejci J, Toman M (2005) Haint Actinobacillus pleuropneumoniae Arbrofol mewn moch bach gyda gwahanol fathau a lefelau o amddiffyniad penodol: dadansoddiad imiwn- genoteipig o is-setiau lymffocytau mewn y cylchrediad a meinwe lymffoid mwcosaidd anadlol. Milfeddyg Immunol Imiwnopathol 107:143-152

49. Sánchez-Matamoros A, Camprodon A, Maldonado J, Pedrazuela R, Miranda J (2019) Diogelwch ac imiwnedd hirhoedlog o weinyddu brechlyn firws byw wedi'i addasu ar y cyd yn erbyn firws syndrom atgenhedlu a anadlol mochyn 1 a brechlyn anweithredol yn erbyn parfofeirws mochyn ac Erysipelothrix rhusiopathiae mewn giltiau bridio. Porc Iechyd Manag 5:11

50. Käser T, Pasternak JA, Delgado-Ortega M, Hamonic G, Lai K, Erickson J, Walker S, Dillon JR, Gerdts V, Mearens F (2017) Chlamydia suis a Chlamydia trachomatis yn cymell celloedd CD4 T amlswyddogaethol mewn moch. Brechlyn 35:91-100

51. Koinig HC, Talker SC, Stadler M, Ladinig A, Graage R, Ritzmann M, Hennig Pauka I, Gerner W, Saalmüller A (2015) brechiad PCV2 induces IFN- / TNF- cyd-gynhyrchu celloedd T gyda rôl bosibl yn amddiffyn. Milfeddyg Res 46:20

52. Xiong Q, Wei Y, Xie H, Feng Z, Gan Y, Wang C, Liu M, Bai F, Xie F, Shao G (2014) Effaith gwahanol fformwleiddiadau cynorthwyol ar imiwnogenigrwydd ac effaith amddiffynnol hyopneumoniae Mycoplasma byw brechlyn ar ôl brechiad mewngyhyrol. Brechlyn 32:3445–3451

53. Maes D, Boyen F, Devriendt B, Kuhnert P, Summerfield A, Haesebrouck F (2021) Safbwyntiau ar gyfer gwella brechlynnau Mycoplasma hyopneumoniae mewn moch. Milfeddyg Res 52:67

54. Gartlan KH, Krashias G, Wegmann F, Hillson WR, Scherer EM, Greenberg PD, Eisenbarth SC, Moghaddam AE, Sattentau QJ (2016) Mae llid di-haint a achosir gan Carbopol yn ennyn ymatebion imiwn addasol cadarn yn absenoldeb patrymau moleciwlaidd sy'n gysylltiedig â phathogenau . Brechlyn 34:2188–2196