Nid yw pob anweddu yr un peth: Effeithiau Gwahaniaethol Ysgyfeiniol Anweddu Canabidiol yn erbyn Nicotin

 ABSENOLDEB

Rhesymeg Mae anweddu wedi dod yn ddull poblogaidd o fewnanadlu sylweddau seicoweithredol amrywiol. Er bod gwerthuso effeithiau anadlol anwedd wedi canolbwyntio'n bennaf ar gynhyrchion sy'n cynnwys nicotin, mae anwedd cannabidiol (CBD) yn dod yn fwyfwy poblogaidd. Ar hyn o bryd nid yw'n hysbys a yw effeithiau iechyd anweddu nicotin a chanabinoidau yn debyg.

Amcanion

Mae'r astudiaeth hon yn cymharu ochr yn ochr ag effeithiau pwlmonaidd anadliad acíwt CBD anwedd yn erbyn nicotin.

Dulliau

Perfformiwyd astudiaethau anadliad in vivo mewn llygod ac arbrofion sytowenwyndra in vitro gyda chelloedd dynol i asesu effeithiau achosi difrod ysgyfeiniol CBD neu erosolau nicotin a allyrrir o ddyfeisiau anwedd.

budd-daliadau atodiad cistanche-cynyddu imiwnedd

Mesuriadau a phrif ganlyniadau

Sgoriwyd llid yr ysgyfaint mewn llygod gan histoleg, cytometreg llif, a lefelau meintioli cytocinau prolidiol a chemocinau. Aseswyd difrod i'r ysgyfaint gan histoleg, mesur gweithgaredd myeloperoxidase, a lefelau neutrophil elastase yn yr hylif lavage broncoalfeolar a meinwe'r ysgyfaint. Aseswyd uniondeb epithelial/endothelial yr ysgyfaint trwy feintioli lefelau protein BAL, gollyngiad albwmin, a gollyngiad FITC-dextran ysgyfeiniol. Pennwyd straen ocsideiddiol trwy fesur y potensial gwrthocsidiol yn y BAL a'r ysgyfaint. Gwerthuswyd effeithiau sytotocsig CBD ac erosolau nicotin ar niwtroffiliau dynol a chelloedd epithelial llwybr anadlu bach gan ddefnyddio system rhyngwyneb hylif aer in vitro. Arweiniodd anadliad aerosol CBD at fwy o newidiadau ymfflamychol, niwed mwy difrifol i'r ysgyfaint, a straen ocsideiddiol uwch o'i gymharu â nicotin. Dangosodd aerosol CBD hefyd wenwyndra uwch i gelloedd dynol o'i gymharu â nicotin.

Casgliadau

Mae anweddu CBD yn achosi ymateb llidiol cryf ac yn arwain at fwy o newidiadau patholegol sy'n gysylltiedig ag anaf i'r ysgyfaint nag anweddu nicotin.

RHAGARWEINIAD

Y 1990au fel dull amgen o ddefnyddio canabis. Roedd anweddyddion canabis yn nodweddiadol yn ddyfeisiadau mawr a oedd yn gwresogi perlysiau canabis sych hyd at anweddu canabinoid. Yn gynnar yn y 2000au, daeth anweddyddion cludadwy llai i'r amlwg fel 'e-sigaréts' ac maent wedi dod yn ddull poblogaidd o roi nicotin.1 Mae e-sigaréts yn gwresogi nicotin mewn hydoddiant yn hytrach nag o ddail tybaco sych. Yn ddiweddar, mae anweddyddion yn y farchnad canabis wedi dilyn trawsnewidiad tebyg, gyda mwy o ddefnydd o echdynion canabis hylifol.2-7 Mae erosolau a allyrrir o gynhyrchion anwedd yn cynnwys nid yn unig sylweddau seicoweithredol fel nicotin a chanabinoidau (tetrahydrocannabinol (THC) a cannabidiol (CBD) yn bennaf)) ond hefyd gwenwynyddion anadlol (ee, fformaldehyd, acrolein, bensaldehyd).8–11 Mae llawer o gyfansoddion cemegol sy'n ymwneud ag anweddu nicotin a chanabinoidau yn debyg, ac mae eraill yn wahanol iawn, sy'n rhoi pwys mawr ar ystyried y materion hyn yng nghyd-destun deall canlyniadau anadlol anweddu y ddau sylwedd. Er enghraifft, gall toddyddion a ddefnyddir mewn cynhyrchion anweddu sy'n cynnwys nicotin a chanabinoid fod yn wahanol, oherwydd priodweddau lipoffilig cannabinoidau.12 Nodwyd asetad fitamin E fel ychwanegyn mewn cynhyrchion anwedd sy'n cynnwys THC a chwaraeodd ran sylweddol yn yr achosion o 2019. o anaf i'r ysgyfaint sy'n gysylltiedig ag e-sigaréts ac anwedd (VALI).13 14 Mae nifer gyfyngedig o astudiaethau ar effeithiau anadlol anwedd wedi canolbwyntio'n bennaf ar gynhyrchion sy'n cynnwys nicotin. Mae astudiaethau in vitro yn awgrymu y gall anwedd nicotin actifadu celloedd imiwnedd ac amharu ar rai o'u swyddogaethau allweddol.15 Dangosodd astudiaethau anifeiliaid fod dod i gysylltiad â nicotin o e-sigaréts yn effeithio'n andwyol ar ymatebion imiwnolegol.16 17 Mae astudiaethau arsylwadol dynol wedi dangos bod anweddu nicotin yn atal nicotin agweddau ar y system imiwnedd gynhenid ​​mewn celloedd epithelial trwynol.18 19 Mae astudiaethau epidemiolegol wedi nodi cysylltiadau rhwng anwedd nicotin a chyflyrau anadlol cronig (peswch cronig, broncitis, asthma).20–24 Ers ymchwil ar y canlyniadau iechyd anadlol ac imiwnolegol cysylltiedig gyda'r defnydd o ganabis wedi canolbwyntio'n gyfan gwbl ar ganabis mwg, 25-31 nid yw'n hysbys ar hyn o bryd a yw effeithiau iechyd anweddu nicotin a chanabinoidau yn debyg. Nod yr astudiaeth hon oedd cymharu, mewn fformat ochr yn ochr, effaith anadliad acíwt cannabinoidau anwedd yn erbyn nicotin.

Tabl 1 Cymhariaeth o gemegau a ganfuwyd mewn cynhyrchion anwedd (hylifau heb eu gwresogi) a ddefnyddir mewn arbrofion datguddiad in vivo ac in vitro

DEUNYDDIAU A DULLIAU

Disgrifir y dulliau a ddefnyddiwyd yn fanylach yn y ffeil atodol ar-lein.

Cynhyrchion anweddu

Fe wnaethom ddefnyddio dau gynnyrch anweddu masnachol, un yn cynnwys CBD a'r llall yn cynnwys nicotin (wedi'i dalfyrru mewn ffigurau fel CBD-vape a Nic-vape). Y pod a oedd yn cynnwys CBD oedd CalmVape o The Kind Group LLC a'r pod a oedd yn cynnwys nicotin oedd Juul gan Juul Labs. Prynwyd y ddau gynnyrch ar-lein yn UDA ym mis Tachwedd 2020. Cafodd codennau CalmVape eu labelu fel rhai sy'n cynnwys 50mg/mL o CBD wedi'i hydoddi mewn cymysgedd o driglyseridau cadwyn canolig (MCT) ac roedd ganddynt flas naturiol. Cafodd Juul ei labelu fel un sy'n cynnwys nicotin 5.0% wedi'i hydoddi mewn cymysgedd o glyserin llysiau propylen glycol (PG) (VG) a blas Virginia Tobacco. Gwnaethom brofi hylifau heb eu gwresogi a hylifau wedi'u gwresogi yn ogystal ag allyriadau a gynhyrchwyd o'r ddau gynnyrch gan ddefnyddio profion cromatograffaeth - sbectrometreg màs a ddilyswyd yn llawn ac a gyhoeddwyd yn flaenorol.32 Rhestrir cynhwysion sylfaenol a nodwyd yn hylifau'r ddau gynnyrch yn Nhabl 1. Rhestrir y cemegau hyn yn fanwl. Darperir atebion wedi'u gwresogi, gan gynnwys cynnyrch o bedwar cyfansoddyn carbonyl a allai fod yn wenwynig (formaldehyd, asetaldehyde, aseton, ac acrolein) mewn aerosolau a allyrrir yn ffigurau atodol ar-lein E1-E4 a thablau atodol ar-lein E1 ac E2.

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd

Llygod

Cafodd llygod gwrywaidd a benywaidd chwe wythnos oed C57BL/6NCr eu caffael o Labordy Charles River (Wilmington, Massachusetts, UDA) a’u cadw dan amodau penodol heb bathogen gyda chylchoedd golau/tywyll o 12/12 awr. Nifer yr anifeiliaid fesul grŵp datguddiad oedd n=10 (5 gwryw a 5 benyw, ac eithrio Nic-vape a oedd yn cynnwys 5 gwryw a 4 menyw; roedd un llygoden fenywaidd yn fach iawn o ran maint ac roedd angen ei hewthaneiddio cyn cwblhau'r astudiaeth ). Perfformiwyd yr holl arbrofion yn unol â'r canllawiau a sefydlwyd gan y Pwyllgor Gofal a Defnydd Anifeiliaid Sefydliadol ac roeddent yn cydymffurfio â holl reoliadau'r wladwriaeth, ffederal a NIH.

Amodau amlygiad anifeiliaid

Cynhyrchwyd erosolau o gynhyrchion anwedd gan ddefnyddio generadur aerosol e-sigaréts a ddisgrifiwyd eisoes.14 33 Defnyddiwyd dyfais Juul i aerosoleiddio'r ddau gynnyrch. Amlygwyd anifeiliaid mewn siambr anwytho 15 L wedi'i haddasu bob dydd i gyfanswm o 20 pwff a gynhyrchwyd dros 1 awr (1 pwff bob 3 munud), 5 diwrnod/wythnos am 2 wythnos. Roedd gan bob pwff gyfaint o 55mL a chafodd ei aerosoleiddio dros gyfnod o 3s. Cynhyrchwyd erosolau o bob cynnyrch anwedd gan ddefnyddio protocol pwffi union yr un fath gyda'r bwriad o ddynwared ymddygiad anweddu anwedd nicotin profiadol.34 Oherwydd diffyg cyhoeddiadau yn disgrifio ymddygiad anweddu ymhlith anweddwyr CBD, dilynwyd yr un protocolau pwffio ar gyfer y ddau gynnyrch. Er na wnaethom fesur CBD yn yr awyr a nicotin y tu mewn i siambrau datguddio anifeiliaid, rydym wedi amcangyfrif yn seiliedig ar gyfaint yr hylif a anweddwyd y dydd, crynodiad CBD a nicotin mewn hylifau, aerosol, a chyfraddau llif aer yr oedd anifeiliaid yn agored i 20.5 mg / ar gyfartaledd. m3 CBD a 22.8 mg/m3 nicotin. Cafodd anifeiliaid rheoli eu hamlygu i aer wedi'i hidlo gan ddefnyddio'r un protocol datguddiad.

Amodau amlygiad in vitro

Roedd celloedd a ddefnyddiwyd mewn arbrofion in vitro yn cael eu hamlygu'n uniongyrchol i bwff a gynhyrchwyd yn ffres mewn system amlygiad caeedig lle cadwyd siambrau rhyngwyneb aer-hylif (ALI) y tu mewn i ddeorydd 37 gradd. Ar gyfer arbrofion ALI, defnyddiwyd yr un dyfeisiau anweddu system gaeedig ac ail-lenwi fformwleiddiadau hylif ag a ddefnyddiwyd ar gyfer yr arbrofion datguddiad in vivo a ddisgrifir uchod. Darperir manylion y dull mewn ffeil atodol ar-lein.

manteision cistanche ar gyfer dynion-cryfhau system imiwnedd

Cliciwch yma i weld cynhyrchion Gwella Imiwnedd Cistanche

【Gofyn am fwy】 E-bost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Asesiad o lid yr ysgyfaint

Sgoriwyd llid yr ysgyfaint gan sytometreg llif, histocemeg, a thrwy feintioli lefelau cytocinau a chemocinau (ffigur atodol ar-lein E5), 14 35 36, a darperir manylion cyflawn mewn ffeil atodol ar-lein.

Asesiad o niwed i'r ysgyfaint

Aseswyd cywirdeb epithelial/endothelial yr ysgyfaint trwy feintioli lefelau protein yn ôl BCA, a gollyngiad albwmin gofod systemig i broncoalfeolar gan ELISA gan ddefnyddio samplau BAL a broncoalfeolar i ollyngiad systemig trwy fesur fflworoleuedd plasma 1 awr ar ôl gosod y stiliwr fflwroleuol yn fewntracheol. Mesurwyd lefelau Neutrophil elastase (NE),37 38 mewn BAL a meinwe'r ysgyfaint gan ddefnyddio pecyn NE ELISA o systemau Ymchwil a Datblygu (Cat. #DY4517-05) yn dilyn protocol y gwneuthurwr. Mesurwyd gweithgaredd myeloperoxidase (MPO) gan assay calorimetric yn y BAL a meinwe'r ysgyfaint39 gan ddefnyddio pecyn assay MPO gan Abcam (Cat. #ab105136) gan ddefnyddio cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Defnyddiwyd staen Oil Red O i ddelweddu macroffagau alfeolaidd llawn lipid.14 Rhoddir manylion yr asesiad yn y ffeil atodol ar-lein. Cafodd gwerthusiadau histolegol mewn rhannau o'r ysgyfaint eu graddio gan batholegydd milfeddygol fel y disgrifiwyd yn flaenorol.40 41

Mesur straen ocsideiddiol mewn llygod BAL a'r ysgyfaint

Mae ymatebion llidiol acíwt yn gorlethu systemau gwrthocsidiol yn gyflym i hybu anaf i'r ysgyfaint.42–44 Pennwyd straen ocsideiddiol trwy fesur y potensial gwrthocsidiol yn y BAL a'r lysates ysgyfaint fel y disgrifir yn y ffeil atodol ar-lein.

Profion sytowenwyndra in vitro

Roedd celloedd epithelial llwybr anadlu bach dynol (hSAECs) o LONZA a neutrophils dynol wedi'u puro yn agored yn uniongyrchol i CBD a gynhyrchir yn ffres ac erosolau nicotin mewn diwylliannau rhyngwyneb aer-hylif. Mae protocol datguddiad a manylion methodolegol yn y deunydd atodol ar-lein. Mesurwyd sytotocsigedd gan ddefnyddio allgáu lliw glas trypan, defnydd lliw coch niwtral, a phrofion apoptosis Annexin V-FITC fel y disgrifir yn y ffeil atodol ar-lein.

Mesur lefelau NE yn y cyfryngau diwylliant PMN

Mesurwyd lefelau NE yn y cyfrwng meithrin celloedd PMN sy'n agored i erosolau ar ôl y cyfnod adfer gan becyn ELISA o systemau Ymchwil a Datblygu (Cat. #DY4517-05) gan ddilyn cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

Assay athreiddedd FITC-dextran

Perfformiwyd athreiddedd paragellog, ar draws monohaen o SAEC dynol sy'n agored i erosolau o ddiwylliannau ALI, i asesu cywirdeb rhwystr a disgrifir manylion yn y ffeil atodol ar-lein.

Dadansoddiad ystadegol

Pennwyd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol rhwng gwerthoedd gradd cymedrig gwahanol grwpiau datguddiad (CBD, nicotin, a rheolyddion aer) trwy berfformio prawf di-barametrig Kruskal-Wallis. Cywirwyd gwerthoedd P ar gyfer profion lluosog gan ddefnyddio'r 'gweithdrefn camu i fyny llinellol dau gam o ddull cyfradd darganfod ffug (FDR) Benjamini, Krieger, a Yekutieli', ac ystyriwyd bod y gwahaniaethau rhwng y ddau grŵp yn ystadegol arwyddocaol ar t.<0.05when FDR was set at Q<0.1. We also evaluated if there were differences between male versus female mice in the responses to inhalation of CBD and nicotine aerosols in comparison with air. All statistical analyses were carried out using GraphPad Prism V.9.3.1 software (GraphPad; La Jolla, California, USA).

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd

CANLYNIADAU

Arweiniodd amlygiad i aerosol CBD at grynhoad mwy o gelloedd imiwnedd cynhenid ​​​​ac addasol yn yr ysgyfaint o gymharu ag amlygiad nicotin

Roedd cyfanswm yr ymdreiddiad celloedd imiwnedd yn sylweddol uwch yn ysgyfaint llygod ar ôl anadlu aerosolau CBD na nicotin neu aer wedi'i hidlo (ffigur 1A). Effeithiwyd llawer mwy ar saith o'r 10 is-set o gelloedd imiwnedd a astudiwyd yn dilyn amlygiad CBD o'i gymharu â nicotin. Datgelodd dadansoddiad imiwnoffenotypig ymdreiddiad ystadegol arwyddocaol o niwtroffiliau CD11b+Ly6G+ yn ysgyfaint llygod ar ôl anadlu CBDaerosolau (14488 o’i gymharu â 3674 neutrophils mewn aer, t.<0.05) as well as following nicotine aerosol exposure (15410 vs 3674 neutrophils in air, p<0.001) (figure 1B). Total numbers of CD11bCD- 11c+Siglec-F+ alveolar macrophages were significantly reduced following CBD-Vape or Nic-Vape inhalation as compared with air-exposed mice (15965 cells in CBD and 18834 cells in NicVape vs 43465 cells in air (p<0.05)) (figure 1C). Inhalation of both CBD and nicotine aerosols resulted in significantly lower numbers of pulmonary interstitial CD11bCD11c+CD206+ macrophages as compared with air-exposed control mice (11460 vs 47319 cells for CBD-Vape, p<0.0001) and 27727 vs 47319 cells for Nic-Vape, p<0.05). The reduction in the numbers of pulmonary interstitial macrophages was significantly greater following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine (11460 cells in CBD-vape vs 27727 cells in Nic-Vape, p<0.05) (figure 1D). CD11bCD11c+arginase-1+ macrophages were significantly reduced following inhalation of both CBD-Vape and Nic-Vape compared with air-exposed control (13450 vs 44009 for CBD-Vape (p<0.001), and 24280 vs 44009 for Nic-Vape (p<0.05)) (figure 1E). However, the reduction in the numbers of CD11bD11c+arginase-1+ macrophages was significantly more following inhalation of CBD aerosols compared with Nic-Vape (13450 cells in CBD-vape vs 24280 cells in Nic-Vape (p<0.05). The number of CD19+ B cells was not statistically different (figure 1F). Following inhalation of CBD aerosols, the numbers of CD8+ and CD4+ T cells in the lungs were, respectively, 3.3-fold (p<0.001) and 5.6-fold (p<0.0001) higher than following nicotine inhalation (figure 1G, H). CD4+IL-17A+ T cells were not altered in the lungs following CBD-Vape or Nic-Vape exposures as compared with air control (figure 1I). CD4+RORγt + T cells, expressing the master transcription factor essential for the differentiation into proinflammatory Th17 cells, were significantly increased following inhalation of CBD aerosols as compared with both nicotine (11983 vs. 2015; p<0.001) and air exposure (11983 vs. 5887; p<0.05) (figure 1J). Furthermore, CBD aerosols resulted in markedly increased infiltration of CD4+Foxp3+ regulatory T cells into the lungs compared with nicotine (4401 cells in CBD-Vape vs 1688 cells in Nic-Vape; p<0.001) (figure 1K). There were no statistically significant differences observed between male and female mice concerning the infiltration of any of the innate and adaptive immune cells, regardless of the different exposure conditions (online supplemental figure E6A–K). Relatively more Oil Red O-positive lipid-laden macrophages were detected in BAL following CBD-aerosol inhalation compared with nicotine aerosol (0.66 vs 0.32; p<0.05) or air-exposure (0.66 vs 0.15; p<0.001) (figure 2A). Lung tissue sections of air-breathing mice contained rare (typically 1–2 positive cells in the entire lung lobe) lipid-containing, Oil Red O-positive intra-alveolar macrophages (online supplemental figure E7A). In contrast, lungs from CBD and nicotine-exposed animals regionally contained one or more Oil Red O-positive macrophages within multiple alveolar lumina that were often adjacent to one another (online supplemental figure E7B, C), with no obvious differences found in males versus females. Histological examination of H&E-stained lung tissue sections from filtered air-breathing control mice showed air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (figure 2B). In contrast, peribronchiolar and/or intrabronchiolar, perivascular, alveolar infiltrates, and interstitial infiltrates of lymphocytes, macrophages, and granulocytes were the predominant findings in the CBD and nicotine-exposed mouse lungs (figure 2C–E). Small focal lesions and occasionally larger and more regionally extensive focal lesions were noted. Lesions were found primarily near terminal bronchioles and often subpleural. The frequency and severity of lesions were greater following CBD aerosol inhalation compared with nicotine. The male mice showed a greater frequency of most lesions as compared with female mice following inhalation of both CBD and nicotine.

Ffigur 1 Effaith amlygiad acíwt i CBD neu erosolau nicotin ar ymdreiddiad celloedd imiwnedd-ysgyfeiniol. Cyfanswm nifer y leucocytes (A), CD11b+ Ly6G+ neutrophils (B), CD11b-CD11c+ Siglec-F + macroffagau (C), CD11b- CD11c+ CD206+ macroffagau (D), CD11b- CD11c+ arginase+ macrophages (E) a niferoedd o gelloedd CD19+ B (F), CD8+ celloedd T (G), CD4+ celloedd T (H), CD4+ IL17A+ (I) a CD 4+ ROR t + celloedd T llidiol (J) a CD4+ FOXP3+ celloedd T (K) yn ysgyfaint llygod sy'n agored i aer, nicotin, neu aerosol CBD eu pennu gan lif cytometreg gan ddefnyddio marcwyr penodol a dilyn strategaeth gatio fel y disgrifiwyd yn flaenorol ac a ddangosir yn ffigur atodol ar-lein 1. Dangosir data fel plotiau blychau gyda wisgers ar y lleiafswm a'r mwyafswm. Ystyrir bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05, the statistical significance of the difference between the two groups is indicated with symbols *p<0.05; ***p<0.001; ****p<0.0001after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with false discovery rate (FDR) correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each exposure condition, n=10 mice (5 males+5 females) (n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape) were used. CBD, cannabidiol.

Cafodd aerosol CBD effaith fodiwlaidd gryfach ar lefelau cytocin nag aerosol nicotin

Canfuom fod anadliad aerosol CBD yn ychwanegu'n sylweddol at lefelau cytocinau IL-5, IL-6, a G-CSF yn y BAL o gymharu â datguddiadau nicotin ac aer (t).<0.01) and enhanced the levels of chemokine KC compared with air-control only (p<0.001) (figure 3A–D). Levels of IL-2 were significantly lower following CBD and Nic-vape aerosol exposures compared with air (p<0.05) (figure 3E). IL-10 and IFN-γ levels were significantly reduced only after CBD aerosol exposure compared with air (p<0.05) (figure 3F, G). IL-1α levels were not significantly different, though there was a trend for the values to be lower following exposure to CBD-Vape aerosols (figure 3H). There were no statistically significant differences observed between male and female mice in the levels of these cytokines or chemokines (online supplemental figure E8A–H and online supplemental table E3).

Arweiniodd amlygiad i aerosolau CBD at fwy o niwed endothelaidd i'r ysgyfaint nag amlygiad i aerosol nicotin

Codwyd cyfanswm y lefelau protein yn y BAL yn dilyn anadliad aerosolau CBD o’u cymharu â rheolyddion aer (435µg/mL o’i gymharu â 287µg/mL; t<0.01) (figure 4A, left panel). Additionally, serum albumin levels leaking into the BAL were markedly increased following CBD aerosol inhalation when compared with both nicotine aerosol (70303ng/mL vs 32741ng/mL in NicVape; p<0.01) and air inhalation (70303ng/mL vs 26042ng/ mL in air control; p<0.0001) (figure 4B, left panel). The systemic leak of FITC-dextran from the lungs into the plasma was markedly higher following CBD aerosol inhalation than Nic-vape aerosol (469.9ng/mL vs 227.6ng/mL in Nic-Vape; p<0.01) or air exposures (469.9ng/mL vs 157.5ng/mL in air control; p<0.0001) (figure 4C, left panel). Furthermore, the FITC-dextran leak following Nic-vape aerosol exposure was not significantly different when compared with air control (227.6ng/mL vs 157.5ng/mL). There were no statistically significant differences observed in the levels of these markers when comparing male with female mice following any of the exposures (figure 4A–C, right panels and online supplemental table E3). It is known that elastase activity in inflammatory diseases increases and correlates with the levels of elastase proteins and neutrophil infiltrates as the disease progresses.45 46 NE levels in the BAL were markedly augmented following inhalation of CBD aerosols (1.8-fold vs air; p<0.001) and Nic-Vape aerosols (1.42-fold vs air; p<0.01) (figure 5A, left panel). The levels of NE measured in lung tissue were significantly increased following CBD-Vape as compared with both Nic-Vape (1.3-fold; p<0.01) and air (1.41-fold; p<0.001) (figure 5B, left panel). There were no statistically significant differences observed in NE levels between male and female mice, measured either in the BAL or lung tissues (figure 5A, B, right panels and online supplemental table E3). We detected higher MPO activity in lung tissues following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine aerosols (~2fold; p<0.05) and air (~8.44fold; p<0.0001) (figure 6A). BAL MPO activity following CBD and nicotine aerosol-inhalation was equivalent, but greater than air controls (p<0.01) (online supplemental figure E9A). There were no statistically significant differences observed in MPO activity between male and female mice, either in lung tissue or in the BAL (figure 6B; online supplemental figure E9B and online supplemental table E3).

Ffigur 2 Newidiadau llidiol yn yr ysgyfaint yn dilyn amlygiad i CBD ac erosolau nicotin trwy anadliad. Ar ddiwedd y datguddiadau, cafodd llygod eu ewthaneiddio, canwlwyd y tracea i gasglu BAL mewn 1% FBS yn PBS, a chynaeafwyd ysgyfaint. (A) Roedd celloedd BAL cytospin ar sleidiau gwydr wedi'u staenio â 0.5% ateb Olew Red O a chelloedd Olew Coch O-positive eu cyfrif fel y disgrifir yn y dulliau. Mae'r canlyniadau'n cael eu darlunio fel plotiau bocs gyda wisgers ar y lleiaf a'r mwyaf. Ystyrir bod gwahaniaeth arwyddocaol rhwng y ddau grŵp yn t<0.05 and indicated with the symbols *p<0.05; ***p<0.001 by performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons using GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for CBD-vape and air exposure and n=9 (5 males+4 females) for Nic-vape). (B–E) Left lung lobes from all mice were embedded, sectioned and H&E stained as described in the methods. (B) (Air): Image of the histologically unremarkable lung from air-breathing control mouse showing air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (arrows). H&E, ×20. (C) Nic-vape: Peribronchiolar lymphocytic, macrophagic (arrowhead) granulocytic infiltrate (circle). H&E, ×20 magnification. B=bronchiolar lumen. (D, E) CBD-vape: Perivascular infiltrates composed of mononuclear (lymphocytes and macrophages) and granulocytic infiltrates (arrows). Intra-alveolar granulocytes (circles) and macrophages (arrowheads) were also present. H&E, ×20 magnification. BD, cannabidiol; B, bronchiolar lumen; FDR, false discovery rate; PBS, phosphate-buffered saline; V, vessel lumen.

Roedd dod i gysylltiad â CBD ac erosolau nicotin yn lleihau potensial gwrthocsidyddion ysgyfeiniol

Bu gostyngiad sylweddol yng nghyfanswm y gallu gwrthocsidiol ym meinwe'r ysgyfaint (t<0.01vs air) and BAL (p=0.001vs air) following inhalation of CBD aerosols (figure 7A; online supplemental figure E10A). However, following nicotine aerosol exposure it was significantly reduced only in the BAL (p<0.01vs air) compared with air (online supplemental figure E10A). We did not observe any statistically significant differences in the antioxidant potential between male and female mice for each exposure group, either in lung tissue or in the BAL (figure 7B; online supplemental figure E10B and online supplemental table E3).

Ffigur 3 Modiwleiddio'r milieu cytocin/chemocine ymfflamychol yn yr hylif BAL yn dilyn anadliad CBD ac erosolau nicotin. Mesurwyd lefelau amrywiol sytocinau a chemocinau cysylltiedig â llid yn y BAL (A-H) llygod ar ôl 2 wythnos o ddod i gysylltiad ag aer, erosolau Nic-Vape, neu erosolau CBD-Vape gan ddefnyddio Pecyn MAP MULTIPLEX fel y disgrifir mewn deunyddiau a dulliau. Dangosir y data fel plotiau blychau gyda wisgers ar y lleiafswm a'r mwyafswm. Perfformiwyd prawf Kruskal-Wallis nad yw'n baramedrig gyda chywiriad FDR ar gyfer cymariaethau lluosog i weld a oedd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol yn bodoli rhwng y ddau grŵp gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, UDA). Ystyrir bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 and is indicated with symbols *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001; ****p<0.0001. In each experiment n=10 for CBD-vape and air exposure (5 males+5 females) and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape). CBD, cannabidiol.

Roedd aerosol CBD yn fwy gwenwynig nag aerosol nicotin i hSAECs ac yn tarfu ar eu cyfanrwydd rhwystr epithelial

Gwelsom pan oedd SAECs dynol yn agored i erosolau CBD am 1 awr mewn vitro, amharwyd yn sylweddol ar forffoleg celloedd epithelial (ffigur 8A, B vs 8C). Dim ond yn dilyn datguddiad aerosol CBD o'i gymharu ag aer y cafwyd cynnydd sylweddol mewn marwolaethau celloedd mewn hSAECs (41% o'i gymharu â 12.5% ​​mewn rheolaeth aer; t<0.05) (figure 8D, E). Even though the cell death following CBD-Vape exposure was higher compared with exposure to nicotine aerosols, it, however, did not reach statistical significance (41% vs. 16% in Nic-Vape). Additionally, exposure to CBD aerosols diminished the epithelial barrier integrity of human SAECs compared with air by 2.1-fold (p<0.05) and while the exposure to nicotine aerosols also showed an increased trend, it was not significantly different compared with air-control (1.7-fold decrease in Nic-Vape vs air control) (figure 8F).

system imiwnedd sy'n cynyddu planhigion cistanche

Roedd aerosolau CBD ond nid erosolau nicotin yn achosi marwolaeth celloedd apoptotig mewn niwtroffiliau dynol wedi'u puro, ond fe wnaeth y ddau wella rhyddhau NE

Arweiniodd amlygiad acíwt i erosolau CBD farwolaeth celloedd amlwg mewn niwtroffiliau dynol wedi'u puro (44.5% marwolaeth celloedd yn dilyn CBDVape o'i gymharu â 14% mewn rheolaeth aer; t<0.0001) and (44.5% vs 21%cell death in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9A). CBD aerosol-induced neutrophil cell death was mainly due to increased apoptosis compared with air (29% vs. 10% in air control; p<0.0001) and compared with Nic-Vape (29% vs. 12% in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9B). Furthermore, both CBD and nicotine aerosols lead to enhanced accumulation of NE levels in the neutrophil cell culture media as compared with air control (2-fold increase in CBD-Vape; p<0.001and 1.45-fold increase in Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). However, the levels were significantly higher following CBD versus nicotine exposure (CBD-Vape 1.4-fold higher than Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). Pictures of human neutrophils after ALI exposures and the 24-hour recovery period are provided in online supplemental figure E12. Importantly, an aliquot of purified neutrophils that were incubated in media (unexposed) for the duration of the experiment showed low cell death (~11%) that was equivalent to values noted in neutrophils exposed to air (~14%) in the ALI chambers (figure 9A), nor was apoptosis or increased NE levels induced (figure 9B, C).

Ffigur 4 Marcwyr difrod i'r ysgyfaint a achosir ar ôl anadliad amlygiad i CBD ac erosolau nicotin. Ar ddiwedd y datguddiadau, cafodd llygod eu ewthaneiddio, cynaeafwyd BAL a mesurwyd lefelau (A) cyfanswm y proteinau a (B) albwmin yn y BAL fel y disgrifir yn yr adran Defnyddiau a Dulliau. (C) Mesurwyd lefelau gollwng FITC-dextran i plasma. Mae'r paneli chwith ym mhob ffigur yn cynrychioli data o wrywod a benywod gyda'i gilydd, tra bod y paneli ar y dde yn cynrychioli data fel gwrywod yn erbyn menywod. Dangosir y canlyniadau fel plotiau bocs gyda wisgers ar y lleiaf a'r uchafswm. Ystyrir bod gwahaniaethau rhwng grwpiau yn arwyddocaol yn t<0.05 and are indicated as symbols **p<0.01, ****p<0.0001, calculated after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by employing GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures and n=9 (5 males+4 females) for the Nic-Vape group. CBD, cannabidiol.

Ffigur 5 Lefelau elastase neutrophil yn yr ysgyfaint wedi'u mesur ar ôl dod i gysylltiad â CBD ac erosolau nicotin. Ar ddiwedd yr 2-wythnos datguddiadau, roedd llygod yn cael eu ewthaneiddio, BAL a'r ysgyfaint yn cael eu cynaeafu, a lysates meinwe yn cael eu paratoi. (A, B) Cafodd lefelau NE yn y BAL a lysates meinwe'r ysgyfaint eu mesur gan ELISA. Mae'r paneli chwith ym mhob ffigur yn dangos data fel gwrywod wedi'u cyfuno, tra bod y paneli ar y dde yn cynrychioli data fel gwrywod yn erbyn Benywod. Dangosir y canlyniadau fel plotiau bocs gyda wisgers ar y lleiaf a'r uchafswm. Defnyddiwyd prawf Kruskal-Wallis nad yw'n baramedrig gyda chywiriad FDR ar gyfer cymariaethau lluosog i weld a oedd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol yn bodoli rhwng y ddau grŵp gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, UDA). Ystyriwyd bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 and is indicated with symbols **p<0.01, ***p<0.001. In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures each and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape. CBD, cannabidiol; NE, neutrophil elastase.

TRAFODAETH

Datgelodd ein canfyddiadau fod effeithiau andwyol ar y system imiwnedd a niwed i'r ysgyfaint ar ôl anadliad amlygiad i gynhyrchion anwedd sy'n cynnwys cannabinoid yn fwy difrifol nag ar ôl dod i gysylltiad ag aerosolau o ddyfais anwedd sy'n cynnwys nicotin. Rydym wedi darganfod effaith niweidiol CBD anwedd yn effeithio ar homeostasis imiwn ysgyfeiniol gan ddefnyddio model llygoden o arbrofion anwedd ac in vitro gyda chelloedd dynol. Datgelodd ein hastudiaethau fod anwedd CBD yn achosi micro-amgylchedd ysgyfeiniol ymledol, gan arwain at grynhoad amlwg o gelloedd imiwn llidiol sy'n dangos gweithgaredd uwch o ffactorau sy'n niweidio meinwe fel MPO ac NE ac yn arwain at anafu'r ysgyfaint trwy brosesau a allai gynnwys straen ocsideiddiol. Er bod sawl astudiaeth wedi archwilio effeithiau anadlol anweddu nicotin, hyd y gwyddom, dyma'r adroddiad cyntaf sy'n dangos bod hyd yn oed amlygiad tymor byr i CBD anwedd yn newid y milieu llidiol yn yr ysgyfaint, gan arwain at niwed i'r ysgyfaint. Mae'n bwysig nodi ein bod wedi defnyddio cynhyrchion anwedd sy'n cynnwys CBD heb THC, i ddileu unrhyw ddylanwad posibl THC ar effeithiau ysgyfeiniol. Oherwydd cyfyngiadau cyfreithiol ar gyrchu cynhyrchion anwedd sy'n cynnwys THC, nid oeddem yn gallu cynnal arbrofion a fyddai hefyd yn cymharu effeithiau anweddu THC. Nododd un astudiaeth ddiweddar y gellir ystyried CBD mewn cynhyrchion anwedd fel rhagflaenydd THC, gan waethygu'r broblem ymhellach trwy achosi effeithiau CBD-annibynnol, wedi'u cyfryngu gan THC sy'n gysylltiedig â'r defnydd cyffredinol o gynhyrchion anweddu canabis.47

At hynny, gallai unrhyw effeithiau gwenwynig anadlol anwedd gael eu gwaethygu gan bresenoldeb cyfansoddion eraill o gynhyrchion anweddu, gan gynnwys gwahanol doddyddion (MCT mewn cynnyrch CBD a PG: VG mewn cynhyrchion nicotin), gwahanol flasau a terpenau sy'n bresennol yn y ddau gynnyrch fel y datgelir gan dadansoddi cynnyrch. Canfuwyd nifer o sgil-gynhyrchion diraddio posibl yn y ddau doddiant wedi'i gynhesu, sy'n awgrymu bod y ddau gynnyrch yn agored i dymheredd uchel. Fodd bynnag, canfuwyd lefelau uwch o gyfansoddion carbonyl mewn aerosol sy'n cynnwys CBD, sy'n awgrymu y gallai'r cynnyrch anweddu CBD a ddefnyddiwyd yn ein hastudiaeth fod wedi bod yn fwy agored i ddiraddiad thermol o'i gymharu â chynhyrchion nicotin. Gall hyn fod oherwydd gwahaniaethau yng nghyfansoddiad cemegol dau hydoddiant a/neu wahaniaethau mewn amodau anweddu y tu mewn i ddyfeisiau anwedd. Roedd nifer o farcwyr llid a difrod ysgyfeiniol a fesurwyd yn ein hastudiaeth yn gyson uwch ar ôl dod i gysylltiad â chynhyrchion anwedd a oedd yn cynnwys CBD na dyfeisiau anwedd a oedd yn cynnwys nicotin. Er enghraifft, rydym yn adrodd bod anadlu olew vape CBD aerosolized wedi achosi gwelliant llawer cryfach yn nifer y celloedd CD4+ a CD8+ T, a niferoedd uchel o niwtroffiliau yn yr ysgyfaint. Gwelwyd proffil tebyg o gynnydd mewn neutrophils a modiwleiddio celloedd CD4+ a CD8+ T yn ysgyfaint claf a oedd wedi anweddu olew canabis gan achosi anaf i'r ysgyfaint a methiant anadlol.3 Mae cysylltiad tynn yn bodoli rhwng celloedd T ymfflamychol, ffactorau symud niwtroffil, a recriwtio niwtroffil mewn anhwylderau llidiol ysgyfeiniol.48 Gallai mwy o filieu llidiol yn yr ysgyfaint ar ôl dod i gysylltiad ag erosolau CBD drefnu bod niwtroffiliau yn cronni a/neu actifadu yn y gofod broncoalfeolar yn uniongyrchol, trwy ryddhau rhai penodol. ffactorau mobileiddio neutrophil megis IL-6, G-CSF, a KC (CXCL1) neu'n anuniongyrchol drwy actifadu macroffagau ysgyfaint preswyl a chelloedd epithelial.49 50 Mae hefyd yn bosibl y gallai erosolau CBD niweidio epitheliwm yr ysgyfaint a chychwyn proses o recriwtio ac actifadu niwtroffil trwy fecanweithiau sy'n cynnwys difrod meinwe lleol.51 Yn wir, rydym yn dangos bod aerosolau CBD yn niweidio cyfanrwydd epithelial ac yn achosi marwolaeth celloedd mewn hSAECs, gan awgrymu y gallai aerosolau CBD achosi niwed uniongyrchol i feinwe'r ysgyfaint ac actifadu DAMPs i gyfryngu llid ysgyfeiniol . Mae'n hysbys bod ymdreiddiad niwtroffil a difa meinwe'r ysgyfaint a achosir gan NE yn cyfryngu difrod ysgyfeiniol a achosir gan fwg sigaréts a chyfanrwydd rhwystr epithelial wedi'i gyfaddawdu.52-56 Mae niwtroffiliau ar ôl eu cartrefu i'r ysgyfaint yn arddangos ffenoteip actifedig ac yn parhau â'r broses ymfflamychol,57 felly fe wnaethom resymu bod gallai cynnydd yn nifer y niwtroffiliau sy'n cronni yn ysgyfaint llygod sy'n agored i erosolau CBD (14488 o'i gymharu â 3674 mewn aer) gael canlyniadau biolegol oherwydd eu statws actifadu. Mae'r celloedd granulocytig hyn yn ffynhonnell dau ffactor pwysig, myeloperoxidase ac NE sy'n ymwneud â gweithgaredd microbicidal ac ailfodelu ysgyfeiniol. Mae'r lefelau uwch o MPO, fel y gwelwyd yn ein hastudiaeth, yn cael eu hystyried yn arwydd straen ymfflamychol ac ocsideiddiol sylweddol mewn nifer o glefydau gan gynnwys anaf i'r ysgyfaint.39 58 Mae protein MPO a ryddheir o niwtroffiliau actifedig yn gweithredu fel modulator awtocrin, gan arddangos sytocinau proinflammatory tebyg i priodweddau i gymell actifadu PMN, mewn modd sy'n annibynnol ar weithgaredd catalytig MPO.59 Felly, yng ngoleuni'r adroddiadau hyn a'n canfyddiadau presennol, rydym yn dadlau y gallai anadliad aerosol CBD cronig achosi micro-amgylchedd proinflammatory cryf a allai fod yn fwy niweidiol i'r ysgyfaint homeostasis a gallai waethygu clefydau presennol yr ysgyfaint ymhellach. Mae’n bosibl y gallai ymdreiddiad neutrophil i’r ysgyfaint ar ôl anadliad aerosol CBD gael ei achosi gan ddadreoleiddio chemocines hydawdd fel KC, ac felly gallai fod yn gyfrifol am lefelau uwch o NE a geir yn y BAL a meinwe’r ysgyfaint. Gan fod datguddiad aerosol CBD wedi arwain at ryddhau NE o niwtroffiliau dynol in vitro, mae hyn yn cefnogi'r casgliad bod gan erosolau CBD y potensial i actifadu neutrophils in vivo yn uniongyrchol a chynyddu llid ysgyfeiniol mewn defnyddwyr. Wrth i lefelau NE a gweithgaredd cysylltiedig gynyddu yn ystod ymatebion llidiol cyfryngol neutrophil,46 felly dim ond fel mynegai o'i weithgaredd y gwnaethom fesur lefelau NE. Yn ogystal, mae'n debygol y bydd effaith andwyol anweddu CBD yn cael ei waethygu gan systemau gwrthocsidiol â nam fel y gwelsom, lle gallai ffactorau fel MPO a achosir gan CBD-Vape chwarae rhan hanfodol.39 58 CD4+ROR t + T celloedd , sy'n mynegi'r prif ffactor trawsgrifio sy'n hanfodol ar gyfer gwahaniaethu i gelloedd Th17 proinflammatory, wedi'u hychwanegu a rhagfynegwyd micro-amgylchedd proinflammatory a achosir gan aerosolau CBD. Gallai mwy o anwythiad o gelloedd rheoleiddio CD4+FoxP3+ T (Tregs) fod yn un mecanwaith y gallai anwedd CBD ei ddefnyddio i ysgogi gwrthimiwnedd. Mae Tregs yn atal actifadu, amlhau, a chynhyrchu cytocin o gelloedd CD4+ a CD{8+ T ac maent yn gysylltiedig ag atal celloedd dendritig trwy is-reoleiddio moleciwlau symbylol.60 Mae Tregs yn mynegi'r derbynnydd IL{-2 -chain , sy'n hwyluso defnydd IL-2 ac felly gallai amddifadu celloedd effeithydd T o argaeledd IL-2, gan gyfrannu at ataliad celloedd effeithydd T.61 Felly, gostyngodd lefelau IL{-2 yn y BAL oherwydd CBD gallai ychwanegiad Tregs a achosir gan aerosol gyfryngu camweithrediad celloedd T ac atal imiwnedd addasol yn yr ysgyfaint, cynyddu tueddiad i heintiau anadlol, a achosi canlyniadau gwael i frechu proffylactig. Gwelsom ostyngiad sylweddol yn nifer y macroffagau interstitial ysgyfaint ar ôl dod i gysylltiad â CBD. Mae Siglec-F+, a ystyrir yn nodweddiadol yn farciwr eosinoffil, wedi'i fynegi'n fawr mewn macroffagau alfeolaidd murine, a phan gaiff ei ddefnyddio ar y cyd â CD11c, mae'n darparu'r adnabyddiaeth fwyaf cywir o macroffagau alfeolaidd yn ysgyfaint y llygoden. Mae astudiaethau blaenorol yn cefnogi'r gostyngiad sylweddol yn niferoedd y macroffagau alfeolaidd CD11bCD11c+Siglec-F+ a welwyd mewn llygod sy'n agored i CBD.62 Nododd astudiaeth gynharach fod amlygiad y GE mewn camweithrediad macrophage alfeolaidd a achosir gan lygod yn gysylltiedig â defnydd gwael o bathogenau, gyda gwelliant cydredol o baich pathogenau ysgyfeiniol a oedd yn cyd-fynd ag amser adfer gohiriedig a mwy o farwolaethau ar ôl haint.16 Gallai gostyngiad amlwg yn nifer yr arginas ysgyfeiniol gwrthlidiol-1+ M2 macroffagau yn dilyn anadliad aerosol CBD gyfrannu ymhellach at homeostasis imiwnedd ysgyfeiniol wedi'i ddadreoleiddio a difrod .63 Gellid priodoli'r micro-amgylchedd proinflammatory uwch a ganfyddir yn yr ysgyfaint yn dilyn anadliad CBD yn rhannol i'r niferoedd gostyngol o macroffagau gwrthlidiol M2 ysgyfeiniol. Gallai niferoedd gostyngol o macroffagau gael effaith sylweddol ar ymatebion ysgyfeiniol i heintiau anadlol, a all gael eu gwaethygu gan macrophage-phagocytosis camweithredol. Felly, arweiniodd amlygiad i erosolau o sigaréts electronig sy'n cynnwys nicotin at leihad mewn ffagocytosis ffliw Haemophilus na ellir ei deipio (NTHI) gan macroffagau, yn bennaf oherwydd presenoldeb cyflasynnau e-sigaréts.64 Gan fod cyflasynnau cyffredin hefyd yn cael eu defnyddio ar gyfer fformwleiddiadau CBD, mae'n codi'r posibilrwydd y gallai camweithrediad macrophage CBD a achosir gan aerosol gael ei ddwysáu trwy ychwanegu cemegau blasu amrywiol.

Ffigur 6 Cynnydd yng ngweithgaredd myeloperoxidase (MPO) yn yr ysgyfaint ar ôl dod i gysylltiad â CBD ac erosolau nicotin. (A, B) Fe wnaethom fesur gweithgaredd MPO mewn lysadau meinwe ysgyfaint o anifeiliaid a ddatgelwyd i nicotin neu CBD aerosol gan ddefnyddio pecyn assay MPO gan Abcam fel y disgrifir yn fanwl yn yr adran deunydd atodol. Mae'r panel chwith yn darlunio data fel gwrywod, tra bod y panel ar y dde yn cynrychioli data fel gwrywod yn erbyn benywod. Dangosir y data fel plotiau blychau gyda wisgers ar y lleiafswm a'r mwyafswm. Perfformiwyd prawf Kruskal-Wallis nad yw'n baramedrig gyda chywiriad FDR ar gyfer cymariaethau lluosog i weld a oedd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol yn bodoli rhwng y ddau grŵp gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, UDA). Ystyriwyd bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 and is indicated with the symbols *p<0.05, ****p<0.0001. In each experiment n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate

Ffigur 7 Newidiadau mewn potensial gwrthocsidiol yn yr ysgyfaint ar ôl dod i gysylltiad â CBD ac aerosolau nicotin. Ar ddiwedd yr amlygiadau i aerosolau nicotin neu CBD, cafodd llygod eu ewthaneiddio a pharatowyd lysadau meinwe'r ysgyfaint. (A, B) Mesurwyd cyfanswm y lefelau gwrthocsidiol mewn lysates meinwe'r ysgyfaint gan ddefnyddio pecyn assay gwrthocsidiol Cayman (Cat # 709001) fel y disgrifir yn fanwl yn yr adran deunydd atodol ar-lein. Mae'r panel chwith yn darlunio data fel gwrywod a benywod gyda'i gilydd, tra bod y panel ar y dde yn cynrychioli data fel gwrywod yn erbyn menywod. Dangosir y data fel plotiau blychau gyda wisgers ar y lleiafswm a'r mwyafswm. Defnyddiwyd prawf Kruskal-Wallis nad yw'n baramedrig gyda chywiriad FDR ar gyfer cymariaethau lluosog i weld a oedd gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol yn bodoli rhwng y ddau grŵp gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, UDA). Ystyriwyd bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 and is indicated by the symbol **p<0.01. In each experiment, n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for the Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

Ffigur 8 Morffoleg celloedd epithelial, sytowenwyndra, a chyfanrwydd rhwystr epithelial celloedd epithelial llwybr anadlu bach dynol (SAEC) yn dilyn dod i gysylltiad ag aerosolau CBD ac nicotin. Cafodd SAECs dynol (0.5miliwn o gelloedd/mewnosodiad diwylliant mewn 6-fformat plât ffynnon) eu meithrin mewn cyfrwng twf cyflawn dros nos a'r diwrnod nesaf yn uniongyrchol yn y rhyngwyneb aer-hylif (ALI) i 110 pwff o aer, nicotin (50mg/ml nicotine) neu CBD (50mg/mL)-yn cynnwys erosolau fel y disgrifir yn y dulliau. Cynhyrchwyd pob erosol mewn cyfaint pwff 55ml fel y disgrifir yn yr adran Dulliau. Ar ddiwedd y datguddiadau, tynnwyd celloedd o'r siambr ALI a'u deor mewn cyfryngau twf cyflawn am 24 awr ar 37 gradd . Ar ôl i'r cyfnod adfer ddod i ben, cafodd celloedd eu delweddu gyntaf (A-C) ar × 200 mewn microsgop cyferbyniad cam (Olympus IX73) ac yna profion gwenwyndra celloedd gan ddefnyddio dull glas trypan (D) (wedi'i fesur fel canran marwolaeth celloedd) neu (E ) dull derbyn coch niwtral (a ddangosir fel y cant o reolaeth aer). Ar gyfer (F) assay athreiddedd FITC-dextran, cafodd 1 miliwn o SAECs dynol / mewnosodiadau diwylliant eu meithrin dros nos a'r diwrnod nesaf yn uniongyrchol agored yn yr ALI i 110 pwff o aer, nicotin (50mg / mL nicotine) neu CBD (50mg / mL) - yn cynnwys erosolau. Ar ôl cwblhau'r datguddiadau, ychwanegwyd crynodiad FITC-dextran ar grynodiad 10mg/mL at y siambr apigol a'i ddeor am 2.5 awr. cynaeafwyd samplau o'r siambr fasochrol a mesurwyd fflworoleuedd gan ddefnyddio tonfeddi Exci485/Emi528 mewn darllenydd plât hybrid H1 synergedd (BioTek). Cyfrifwyd y crynodiad o FITC-dextran yn y siambr fasochrol gan ddefnyddio cromlin safonol. Ystyriwyd bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 and is indicated with the symbol *p<0.05, calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). Results are depicted as box plots with whiskers at min and max from three independent experiments each performed in triplicate as described in online supplemental methods. CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate; SAECs, small airway epithelial cells.

Ffigur 9 Marwolaeth celloedd apoptotig mewn niwtroffiliau dynol wedi'u puro a lefelau neutrophil elastase (NE) a ryddhawyd ar ôl dod i gysylltiad â CBD ac erosolau nicotin. Cafodd niwtroffiliau dynol wedi'u puro o waed cyfan eu hadu ar 0.8miliwn o gelloedd/diwylliant mewnosoder mewn 6-fformat plât ffynnon a'u hamlygu ar unwaith i 110 pwff o Aer, nicotin (50mg/mL nicotin), neu CBD ( 50mg/mL) - sy'n cynnwys aerosolau yn y rhyngwyneb aer-hylif mewn cyfaint pwff 55mL fel y disgrifir yn yr adran Dulliau. Ar ddiwedd y datguddiadau, tynnwyd celloedd o'r siambr ALI a'u hadfer mewn cyfryngau twf cyflawn am 24 awr. Nesaf, mesurwyd marwolaeth celloedd gan ddefnyddio (A) assay allgáu llifyn glas trypan a (B) apoptosis V-FITC anecsin fel y crybwyllwyd yn fanwl yn yr adran Dulliau. Yn syth ar ôl ynysu, cadwyd cyfanswm o'r niwtroffiliau wedi'u puro mewn cyfrwng cyflawn mewn deorydd CO2 fel 'rheolaethau heb eu hamlygu' negyddol am gyfnod cyfan yr assay, i amcangyfrif graddau marwolaeth celloedd, anwythiad apoptosis, neu lefelau NE mewn absenoldeb unrhyw amlygiad. (C) Cafodd lefelau NE eu meintioli mewn cyfryngau cyflyru a gynaeafwyd ar ôl i'r cyfnod adfer ddod i ben trwy berfformio NE ELISA fel y trafodwyd yn yr adran Dulliau. Mae data'n cael eu darlunio fel plotiau bocs gyda wisgers ar y lleiaf a'r mwyaf o arbrofion annibynnol pob un yn driphlyg. Ar gyfer assay apoptosis: data cyfartalog gan n=5 rhoddwyr fesul grŵp. Ar gyfer dull glas trypan: data cyfartalog gan roddwyr rheolaeth heb eu hamlygu, rhoddwyr rheolaeth aer a Nic-Vape n{=7, a rhoddwyr CBD-Vape n{=8. Ar gyfer data cyfartalog assay NE gan n=6 rhoddwyr fesul grŵp). Ystyriwyd bod y gwahaniaeth rhwng y ddau grŵp yn arwyddocaol yn t<0.05 which is indicated by the symbols *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001 calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). ALI, air–liquid interface; CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

Tabl 2 Cymhariaeth o farcwyr amrywiol canlyniadau astudio ar ôl dod i gysylltiad â chynnyrch anwedd sy'n cynnwys CBD (CBD-vape) a chynnyrch anwedd sy'n cynnwys nicotin (Nic-vape)

Mae presenoldeb macroffagau mewn-alfeolaidd llawn lipid a welwyd mewn celloedd a adferwyd o BAL llygod ar ôl anadliad aerosol CBD yn ein hastudiaeth yn ategu adroddiad blaenorol a ddangosodd ddechrau niwmonia lipoid alldarddol mewn claf a anweddodd olewau canabis ac â lipid. macroffagau ysgyfaint llawn.65 Gan fod niwmonia lipoid alldarddol gyda macroffagau ysgyfaint llawn lipid yn nodwedd o EVALI, mae felly'n awgrymu efallai na fydd anadliad olew vape CBD yn ddi-risg ac y gallai arwain at anaf i'r ysgyfaint mewn anwedd canabis. Roedd yr achosion a gyflwynwyd yn adroddiadau clinigol EVALI yn awgrymu cysylltiad aetiolegol cryfach rhwng anweddu canabis a methiant anadlol o'i gymharu ag anwedd nicotin.65-68 Yn wahanol i'n hastudiaethau cynharach mewn llygod a anadlodd VEA (achos tebygol EVALI), yn yr astudiaeth hon, rydym yn ni welwyd presenoldeb macroffagau ewynnog.14 Er y gallai'r risgiau cyffredinol ar gyfer cymhlethdodau ysgyfeiniol sy'n gysylltiedig ag anwedd fod yn is o gymharu ag ysmygu, mae'n ymddangos bod anwedd yn peri risg i iechyd anadlol, yn enwedig mewn anwedd canabis hirdymor. I grynhoi, mae ein hastudiaeth yn sefydlu'n glir bod milieu proinflammatory yn yr ysgyfaint a achosir gan anadliad aerosol CBD yn fwy na'r hyn a achosir gan erosolau nicotin, ac adlewyrchwyd hyn gan aflonyddwch cyfanrwydd rhwystr ysgyfeiniol a niwed i'r ysgyfaint (a grynhoir yn Nhabl 2). Mae hyn yn awgrymu y gallai anweddu canabis o bosibl arwain at ganlyniadau mwy difrifol, gan gynnwys mwy o dueddiad i heintiau anadlol, ymatebion gwael i frechiadau proffylactig, a gwaethygu symptomau mewn cleifion â chlefydau llidiol sylfaenol yr ysgyfaint.16–19 35 36 69 70 Ni welsom unrhyw newidiadau gweladwy yn ymddygiad anifeiliaid yn ystod neu ar ôl y datguddiadau, na newidiadau pwysau o gymharu â rheolaeth aer (ffigur atodol ar-lein E11). Yn yr astudiaeth hon, ni wnaeth datguddiad aerosol nicotin achosi lefelau amrywiol cytocinau/chemocines yn y BAL i'r un graddau o gymharu ag astudiaeth flaenorol.71 Gallai'r rhesymau dros yr anghysondeb hwn fod bod yr awduron hyn wedi mesur lefelau trawsgrifio amrywiol sytocinau yn yr ysgyfaint. homogenates yn dilyn datguddiadau nicotin-aerosol, ac nid yw lefelau trawsgrifio weithiau'n trosi i newidiadau pan gânt eu mesur ar y lefelau protein fel y gwneir gennym ni. At hynny, mae proffil cytocin a modiwleiddio system imiwnedd yn dibynnu ar yr e-hylif penodol, y dull o gynhyrchu aerosol / hyd amlygiad, a chemegau cyflasyn a ychwanegwyd. Er bod gan ganabis fanteision iechyd profedig o ran rheoli poen, cwsg, a lleddfu symptomau cyfog / chwydu a achosir gan gemotherapi mewn cleifion canser ac mewn cleifion sy'n cael trawiadau, 72-76 yn syml, mae diffyg tystiolaeth gadarn am ddiogelwch canabis pan gaiff ei gyflenwi o anweddu. cynnyrch. Yn hyn o beth, mae ein hastudiaeth yn newydd ac yn nodi rôl anadliad aerosol CBD wrth achosi llid ysgyfeiniol a niwed i'r ysgyfaint.

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd

Gan fod ein hastudiaeth wedi defnyddio modelau amlygiad anifeiliaid ac in vitro, mae angen ystyried sawl cyfyngiad wrth allosod canlyniadau a gyflwynir i amlygiad bywyd go iawn mewn bodau dynol. Un o gyfyngiadau’r astudiaeth hon yw ei ffocws oedd ar amlygiad tymor byr yn unig. Mae canlyniad amlygiad cronig hirdymor i erosolau CBD, a'u heffaith ar ymatebion i haint anadlol a / neu frechu proffylactig yn bwysig. Roedd ein methodoleg dod i gysylltiad ag anifeiliaid yn seiliedig ar system datguddiad corff cyfan ac efallai y byddai amlygiad trwyn yn unig yn fwy addas i efelychu datguddiad anwedd profiadol. Er gwaethaf defnyddio system datguddio corff cyfan, fe wnaethom wirio nad oedd dyddodiad ar ffwr anifeiliaid (a waliau cawell) yn cyfrannu at lyncu gronynnau trwy fagu anifeiliaid a thrwy hynny ddylanwadu ar y gwenwyndra a welwyd. Defnyddiasom nifer cyfyngedig o lygod fesul grŵp datguddiad; mae'n debygol y gallai niferoedd mwy o lygod fod wedi cryfhau ein casgliadau astudiaeth ymhellach. Er bod y model ALI in vitro yn darparu dull anadliad-benodol datguddiad ar gyfer cynnal yr astudiaeth fiolegol ar effeithiau iechyd sy'n gysylltiedig â defnyddio cynhyrchion anweddu, mae allosod data o astudiaethau in vitro i risgiau dynol yn parhau i fod yn ddamcaniaethol. Mae angen astudiaethau arsylwi ac arbrofol yn y dyfodol gyda defnyddwyr rheolaidd CBD a chynhyrchion anwedd sy'n cynnwys nicotin i gadarnhau ein canfyddiadau. Yn olaf, yn ein harbrofion, roedd anifeiliaid a chelloedd yn agored i erosolau o'r ddau gynnyrch a gynhyrchwyd yn yr un ffordd. Fodd bynnag, gall defnyddwyr cynhyrchion anweddu sy'n seiliedig ar ganabis ddefnyddio'r cynhyrchion hyn mewn ffordd wahanol iawn nag anwedd nicotin (ee, yn llai aml). Wrth i ddata o astudiaethau arsylwi ymhlith anwedd canabis ddod i'r amlwg, dylid ystyried gwahaniaethau posibl mewn patrymau defnyddio cynnyrch a welir mewn amodau realistig wrth efelychu amlygiad anifeiliaid ac in vitro mewn lleoliadau labordy. Dylai astudiaethau yn y dyfodol ymchwilio i effeithiau anadlol cynhyrchion anwedd sy'n cynnwys sbectrwm eang o ganabinoidau, gan gynnwys THC.

CYFEIRIADAU

1 Adran Iechyd yr Unol Daleithiau a. Defnydd o e-sigaréts ymhlith ieuenctid ac oedolion ifanc: adroddiad y llawfeddyg cyffredinol [PDF–8.47 MB]eicon PDF. Atlanta, GA: Adran Iechyd a Gwasanaethau Dynol yr Unol Daleithiau, CDC, 2016.

2 Borodovsky JT, Crosier BS, Lee DC, et al. Ysmygu, anweddu, bwyta: a yw cyfreithloni yn effeithio ar y ffordd y mae pobl yn defnyddio canabis? Int J Polisi Cyffuriau 2016;36:141–7.

3 He T, Oks M, Esposito M, et al. " Coeden yn y Blodau ": anaf difrifol i'r ysgyfaint a achosir gan anwedd olew canabis. Cymdeithas Ann Am Thorac 2017; 14:468–70.

4 Knapp AA, Lee DC, Borodovsky JT, et al. Tueddiadau sy'n dod i'r amlwg mewn gweinyddu canabis ymhlith defnyddwyr canabis yn eu harddegau. J Iechyd Adolesc 2019; 64: 487-93.

5 Kriegel D. Anweddu mariwana yn erbyn ysmygu: a oes enillydd? 2021. Ar gael: https:// vaping360.com/learn/vaping-vs-smoking-weed/ [Cyrchwyd 15 Medi 2021].

6 Volkow ND, Baler RD, Compton WM, et al. Effeithiau iechyd andwyol defnyddio marijuana. N Eng J Med 2014; 370: 2219–27.

7 Pahr K, Carter A. Canllaw i ddechreuwyr i CBD. llinell iechyd. 2019. Ar gael: https://www. healthline.com/health/your-cbd-guide [Cyrchwyd 19 Awst 2021].

8 Suleiman SA. Gwenwyndra hydrocarbon petrolewm in vitro: effaith n-alcanau, bensen a tholwen ar macroffagau alfeolaidd ysgyfeiniol ac ensymau lysosomaidd yr ysgyfaint. Arch Tocsicol 1987; 59:402–7.

9 Lachenmeier DW, Kuballa T, Reusch H, et al. Bensen mewn sudd moron babanod: cipolwg pellach ar fecanwaith ffurfio ac asesu risg gan gynnwys data defnydd o astudiaeth Donald. Tocsicol Cemeg Bwyd 2010; 48:291–7.

10 Li YS, Li YF, Li QN, et al. Gwenwyndra pwlmonaidd acíwt mewn llygod a achosir gan nanotiwbiau carbon multiwall, bensen, a'u cyfuniad. Yr Amgylchedd Tocsicol 2010; 25:409–17.

11 Anderson RP, Zechar K. Mae anaf i'r ysgyfaint o fewnanadlu olew hash bwtan yn dynwared niwmonia. Cynrychiolydd Achos Respir Med 2019; 26: 171-3.

12 Holt AK, Poklis JL, Heddwch MR. Dadansoddiad ôl-weithredol o gyfansoddion cemegol mewn hylifau e-sigaréts wedi'u rheoleiddio a heb eu rheoleiddio. Cemeg blaen 2021; 9: 752342.

13 Blount CC, Karwowski AS, Shields PG, et al. Fitamin E asetad mewn hylif lavage broncoalfeolar sy'n gysylltiedig ag EVALI. N Eng J Med 2020; 382: 697-705.

14 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. Model anifail o asetad fitamin E wedi'i fewnanadlu ac anaf i'r ysgyfaint tebyg i EVALI. N Eng J Med 2020; 382: 1175–7.

15 Merecz-Sadowska A, Sitarek P, Zielinska-Blizniewska H, ​​et al. Crynodeb o astudiaethau in vitro ac in vivo sy'n gwerthuso effaith dod i gysylltiad ag e-sigaréts ar organebau byw a'r amgylchedd. Int J Mol Sci 2020; 21:652.

16 Susan TE, Gajghate S, Thimmulappa RK, et al. Mae bod yn agored i sigaréts electronig yn amharu ar amddiffynfeydd gwrth-bacteriol a gwrth-firaol ysgyfeiniol mewn model llygoden. PLoS Un 2015;10:e0116861.

17 Hwang JH, Lyes M, Sladewski K, et al. Mae anadlu sigaréts electronig yn newid imiwnedd cynhenid ​​​​a chytocinau llwybr anadlu tra'n cynyddu ffyrnigrwydd bacteria sy'n cytrefu. J Mol Med (Berl) 2016; 94:667–79.

18 Martin EM, Clapp PW, Rebuli ME, et al. Mae defnyddio e-sigaréts yn arwain at atal genynnau imiwn ac ymateb llidiol mewn celloedd epithelial trwynol tebyg i fwg sigaréts. Cell Ysgyfaint Am J Physiol Mol Physiol 2016;311:L135–44.

19 Rebuli ME, Glista-Baker E, Hoffman JR, et al. Mae defnyddio sigaréts electronig yn newid yr ymateb imiwn mwcosaidd trwynol i firws y ffliw sy'n cael ei wanhau'n fyw. Treial clinigol. Am J Cell Respir Mol Biol 2021; 64:126-37.

20 Bloom JW, Kaltenborn WT, Paoletti P, et al. Effeithiau anadlol sigaréts nad ydynt yn dybaco. Br Med J (Clin Res Ed) 1987; 295: 1516–8.

21 Ewyllysiau TA, Pagano I, Williams RJ, et al. Defnydd o e-sigaréts ac anhwylder anadlol mewn sampl oedolyn. Dibynnu ar Alcohol Cyffuriau 2019; 194: 363-70.

22 Xie W, Kathuria H, Galiatsatos P, et al. Cymdeithas defnydd sigaréts electronig gyda chyflyrau anadlol digwyddiad ymhlith oedolion yr Unol Daleithiau o 2013 i 2018. JAMA Netw Open 2020;3:e2020816.

23 Bhatta DN, Glantz SA. Cymdeithas defnyddio e-sigaréts â chlefyd anadlol ymhlith oedolion: dadansoddiad hydredol. Am J Cyn Med 2020; 58:182-90.

24 Li D, Sundar IK, McIntosh S, et al. Cymdeithas ysmygu a defnyddio sigaréts electronig â gwichian a symptomau anadlol cysylltiedig mewn oedolion: canlyniadau trawstoriadol o astudiaeth asesiad poblogaeth o dybaco ac iechyd (llwybr), ton 2. Rheoli Tybiau 2020; 29:140–7.

25 Tashkin DP, Coulson AH, Clark VA, et al. Symptomau anadlol a gweithrediad yr ysgyfaint mewn ysmygwyr trwm arferol marijuana yn unig, ysmygwyr marijuana a thybaco, ysmygwyr tybaco yn unig, a phobl nad ydynt yn ysmygu. Am Parch Respir Dis 1987; 135: 209-16.

26 Tashkin DP. Mariwana mwg fel achos anaf i'r ysgyfaint. Monaldi Arch Cist Dis 2005; 63:93-100.

27 Tashkin DP. Effeithiau ysmygu marijuana ar yr ysgyfaint. Cymdeithas Ann Am Thorac 2013; 10:239–47.

28 Baldwin GC, Tashkin DP, Bwcle DM, et al. Mae mariwana a chocên yn amharu ar swyddogaeth macrophage alfeolaidd a chynhyrchiad cytocin. Am J Respir Crit Care Med 1997; 156: 1606-13.

29 Taylor DR, Poulton R, Moffitt TE, et al. Effeithiau anadlol dibyniaeth ar ganabis mewn oedolion ifanc. Caethiwed 2000; 95: 1669-77.

30 Aldington S, Williams M, Nowitz M, et al. Effeithiau canabis ar strwythur, swyddogaeth a symptomau ysgyfeiniol. Thoracs 2007; 62: 1058-63.

31 Moore BA, Augustson EM, Moser RP, et al. Effeithiau anadlol defnydd marijuana a thybaco mewn sampl yn yr UD. J Gen Intern Med 2005; 20:33–7.

32 Goniewicz ML, Knysak J, Gawron M, et al. Lefelau o garsinogenau dethol a gwenwynyddion mewn anwedd o sigaréts electronig. Rheoli Tob 2014; 23:133–9.

33 Bhat TA, Kalathil SG, Leigh N, et al. Effeithiau acíwt anadliad aerosol cynnyrch tybaco wedi'i gynhesu (IQOS) ar niwed i feinwe'r ysgyfaint a newidiadau ymfflamychol yn yr ysgyfaint. Nicotin Tob Res 2021; 23: 1160-7.

34 Kosmider L, Jackson A, Leigh N, et al. Ymddygiad pwffian circadian a thopograffeg ymhlith defnyddwyr e-sigaréts. Tob Regul Sci 2018; 4:41–9.

35 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. Mae mwg ail-law yn achosi llid ac yn amharu ar imiwnedd i heintiau anadlol. J Immunol 2018; 200: 2927-40.

36 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. Mae AT-rvd1 yn lliniaru mwg ail-law sy'n gwaethygu llid ysgyfeiniol ac yn adfer imiwnedd gwrthfacterol sy'n atal mwg ail-law. J Immunol 2021; 206: 1348-60.

37 Carden D, Xiao F, Moak C, et al. Mae Neutrophil elastase yn hyrwyddo anaf microfasgwlaidd yr ysgyfaint a phroteolysis cadherinau endothelaidd. Cylchgrawn Ffisioleg America - Ffisioleg y Galon a Chylchrediad y Cylchrediad 1998; 275: H385-92.

38 Kawabata K, Hagio T, Matsuoka S. Rôl neutrophil elastase mewn anaf acíwt i'r ysgyfaint. Eur J Pharmacol 2002; 451: 1-10.

39 Khan AA, Alsahli MA, Rahmani AH. Myeloperoxidase fel biomarcwr afiechyd gweithredol: safbwyntiau biocemegol a phatholegol diweddar. Med Sci (Basel) 2018; 6:33.

40 Dietert K, Gutbier B, Wienhold SM, et al. Sbectrwm histopatholegau pathogen-benodol a model-benodol mewn modelau llygoden o niwmonia acíwt. PLoS Un 2017; 12: e0188251.

41 Butt YM, Smith ML, Tazelaar HD, et al. Patholeg anaf i'r ysgyfaint sy'n gysylltiedig ag anwedd. N Eng J Med 2019; 381: 1780–1.

42 Lee WL, Meddyg Teulu Downey. Ysgogi neutrophil ac anaf acíwt i'r ysgyfaint. Curr Opin Crit Care 2001;7:1–7.

43 Fink AS. Rôl rhywogaethau ocsigen a nitrogen adweithiol mewn syndrom trallod anadlol acíwt. Curr Opin Crit Care 2002;8:6–11.

44 Abraham E. Niwtrophils ac anaf acíwt i'r ysgyfaint. Crit Care Med 2003;31:S195–9.

45 Pham CTN. Mae serine Neutrophil yn proteases i fireinio'r ymateb llidiol. Int J Biocemeg Cell Biol 2008; 40: 1317-33.

46 Arecco N, Clarke CJ, Jones FK, et al. Mae lefelau a gweithgaredd Elastase yn cynyddu mewn cyhyrau dystroffig ac yn amharu ar oroesiad celloedd myoblast, amlhau a gwahaniaethu. Cynrychiolydd Gwyddonol 2016; 6: 24708.

47 Czégény Z, Nagy G, Babinszki B, et al. CBD, yn rhagflaenydd THC mewn e-sigaréts. Cynrychiolydd Gwyddonol 2021; 11:8951.

48 Lindén A, Laan M, Meddyg Teulu Anderson. Neutrophils, interleukin-17A a chlefyd yr ysgyfaint. Eur Respir J 2005; 25:159–72.

49 Ma K, Yang L, Shen R, et al. Mae celloedd Th17 yn rheoleiddio cynhyrchu CXCL1 mewn canser y fron. Int Immunopharmacol 2018; 56:320-9.

50 Becker S, Quay J, Koren HS, et al. Mynegiant cyfansoddol ac ysgogol MCP-1, GRO alpha, beta, a gama mewn epitheliwm llwybr anadlu dynol a macroffagau broncoalfeolar. Am J Physiol 1994; 266:L278–86.

51 Potey PM, Rossi AG, CD Lucas, et al. Neutrophils wrth gychwyn a datrys llid ysgyfeiniol acíwt: deall swyddogaeth fiolegol a photensial therapiwtig. J Pathol 2019; 247: 672-85.

52 Heijink IH, Brandenburg SM, Postma DS, et al. Mae mwg sigaréts yn amharu ar swyddogaeth rhwystr epithelial llwybr anadlu ac adferiad cyswllt cell-gell. Eur Respir J 2012; 39:419–28.

53 Aghapour M, Raee P, Moghaddam SJ, et al. Camweithrediad rhwystr epithelial llwybr anadlu mewn clefyd rhwystrol cronig yr ysgyfaint: rôl amlygiad mwg sigaréts. Am J Cell Respir Mol Biol 2018; 58:157–69.

54 Shapiro SD, Goldstein NM, Houghton AC, et al. Mae Neutrophil elastase yn cyfrannu at emffysema a achosir gan fwg sigaréts mewn llygod. Am J Pathol 2003; 163: 2329-35.

55 Antunes MA, Rocco PRM. Emffysema pwlmonaidd a achosir gan Elastase: mewnwelediadau o fodelau arbrofol. Cienc Acad Bras 2011; 83:1385–96.

56 Ghosh A, Coakley RD, Ghio AJ, et al. Mae defnydd cronig o e-sigaréts yn cynyddu lefelau neutrophil elastase a matrics metalloprotease yn yr ysgyfaint. Am J Respir Crit Care Med 2019; 200: 1392-401.

57 Fortunati E, Kazemier KM, Grutters JC, et al. Mae niwtroffiliau dynol yn newid i ffenoteip wedi'i actifadu ar ôl symud i'r ysgyfaint waeth beth fo'r clefyd llidiol. Clin Exp Immunol 2009; 155: 559-66.

58 Ffydd M, Sukumaran A, Pulimood AB, et al. Pa mor ddibynadwy yw gweithgaredd myeloperoxidase yn ddangosydd llid? Clin Chim Acta 2008; 396: 23-5.

59 Lau D, Mollnau H, Eiserich YH, et al. Mae Myeloperoxidase yn cyfryngu actifadu neutrophil trwy gysylltiad ag integrins CD11b/CD18. Proc Natl Acad Sci UDA 2005; 102:431–6.

60 Schmidt A, Oberle N, Krammer PH. Mecanweithiau moleciwlaidd ataliad celloedd T trwy gyfrwng treg. Imiwn blaen 2012; 3:51.

61 Thornton AC, Shevach EM. Mae celloedd T imiwn-reoleiddio CD4+CD25+ yn atal actifadu celloedd T polyclonaidd in vitro drwy atal cynhyrchu interleukin 2. J Exp Med 1998; 188: 287-96.

62 Kalininskiy A, Kittel J, Nacca NE, et al. Amlygiadau i e-sigaréts, heintiau'r llwybr anadlol, ac imiwnedd cynhenid ​​​​amharedig: adolygiad naratif. Pediatr Med 2021; 4:5.

63 Lucas R, Czikora I, Sridhar S, et al. Arginase 1: cyfryngwr annisgwyl o gamweithrediad rhwystr capilari'r ysgyfaint mewn modelau o anaf acíwt i'r ysgyfaint. Immunol blaen 2013; 4:228.

64 Ween AS, Whittall JJ, Hamon R, et al. Ffagocytosis a llid: archwilio effeithiau cydrannau anwedd e-sigaréts ar macroffagau. Cynrychiolydd Corfforol 2017; 5:e13370.

65 Hoyw B, Cae Z, Patel S, et al. Anaf i'r ysgyfaint a achosir gan anwedd: achos o niwmonia lipoid sy'n gysylltiedig ag e-sigaréts sy'n cynnwys canabis. Cynrychiolydd Achos Pulmonol 2020; 2020: 7151834.

66 Abeles M, Popofsky S, Wen A, et al. Anaf i'r ysgyfaint sy'n gysylltiedig ag anwedd a achosir gan fewnanadlu olew canabis. Pediatr Pulmonol 2020; 55:226–8.

67 Adapa S, Gayam V, Konala VM, et al. Gwenwyndra acíwt ysgyfeiniol a achosir gan anwedd canabis: cyfres achosion ac adolygiad o lenyddiaeth. J Sylwer Achos Effaith Uchel Ymchwilio 2020; 8: 2324709620947267.

68 Conuel EJ, Chieng HC, Fantauzzi J, et al. Anaf i'r ysgyfaint sy'n gysylltiedig ag anwedd olew cannabinoid a'i ymddangosiad radiograffeg. Am J Med 2020; 133:865–7.

69 Lugade AA, Bogner PN, Thatcher TH, et al. Mae amlygiad mwg sigaréts yn gwaethygu llid yr ysgyfaint ac yn peryglu imiwnedd i haint bacteriol. J Immunol 2014; 192: 5226-35.

70 Bhat TA, Kalathil SG, Miller A, et al. Mae cyfryngwyr pro-datrys arbenigol yn goresgyn ataliad imiwnedd a achosir gan amlygiad i fwg ail-law. J Immunol 2020; 205: 3205-17.

71 Garcia-Arcos I, Geraghty P, Baumlin N, et al. Mae amlygiad sigarét electronig cronig mewn llygod yn achosi nodweddion COPD mewn modd sy'n ddibynnol ar nicotin. Thoracs 2016; 71: 1119-29.

72 Booz GW. Mae Cannabidiol yn strategaeth therapiwtig newydd ar gyfer lleihau effaith llid ar straen ocsideiddiol. Radic Biol Med 2011; 51:1054–61.

73 Rosenberg EC, Tsien RW, Whalley BJ, et al. Canabinoidau ac epilepsi. Niwrotherapiwteg 2015; 12: 747-68.

74 Academïau Cenedlaethol y Gwyddorau, Peirianneg, Meddygaeth; Is-adran Iechyd a Meddygaeth. Effeithiau therapiwtig canabis a chanabinoidau. Yn: Effeithiau Canabis a Chanabinoidau ar Iechyd: Sefyllfa Bresennol Tystiolaeth ac Argymhellion ar gyfer Ymchwil. Gwasg Academïau Cenedlaethol, 2017.

75 Thiele EA, Marsh ED, Ffrangeg JA, et al. Cannabidiol mewn cleifion â ffitiau sy'n gysylltiedig â syndrom Lennox-gestalt (GWPCARE4): treial cam 3 ar hap, dwbl-ddall, a reolir gan placebo. Lancet 2018; 391: 1085-96.

76 Gweinyddiaeth Bwyd a Chyffuriau yr Unol Daleithiau. Mae'r FDA yn cymeradwyo'r cyffur cyntaf sy'n cynnwys cynhwysyn gweithredol sy'n deillio o farijuana i drin mathau prin, difrifol o epilepsi. 2018. Ar gael: https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ ucm611046.htm [Cyrchwyd 15 Medi 2021].