Rhan 2 Effeithiau Ataliol Glycosidau Ffenylethanol O Cistanche Tubulosa Ar Serwm Buchol Ffibrosis Hepatig a Achosir gan Albwmin mewn Llygod Mawr
Mar 06, 2022
Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com
Mynegiant NF-κB p65 a cholagen I ar ôl ymyriad cyffuriau mewn celloedd HSC-T6 Er mwyn nodweddu signalau ffibrosis hepatig, pennwyd dau enyn rheoleiddiol allweddol yn yr afu trwy assay RT-PCR. Dangosodd y data fod gan gelloedd tHSC-T6 o'r grŵp rheoli lefelau is o NF- κB a mRNA math colagen I. I'r gwrthwyneb, ysgogodd TGF- 1 gelloedd HSC-T6 i uwchreoleiddio NF-κB (P < 0.01)="" a="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna="" yn="" sylweddol,="" gyda="" lefelau="" uwch="" na="" rhai="" yn="" y="" grŵp="" rheoli.="" ym="" mhresenoldeb="" crynodiadau="" gwahanol="" o="" cphgs="">glycoside ffenylethanoid o cistanche), canlyniadau NF-κB p65 [P NF-κB=0.001 am 100 ug/ml, P NF-κB=0.002 am 75 ug/ml, P NF-κB {{ 11}}.007 ar gyfer 50 ug/ ml, a P NF-κB=0.012 am 25 ug/ml, yn y drefn honno] a Col-I [P Col-I=0.006, P Col -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019, yn y drefn honno] yn dangos mynegiadau gostyngol o'r mRNAs hyn (Ffig. 7).
Dadansoddiad blot gorllewinol o lefel colagen I ar ôl ymyriad cyffuriau mewn celloedd HSC-T6 Mae Ffigur 8 yn dangos lefelau mynegiant protein colagen I mewn celloedd HSC-T6 o'r gwahanol grwpiau arbrofol. Gostyngwyd lefel mynegiant protein colagen I yn sylweddol yn y gwahanol grwpiau dogn o CPhGs(glycoside ffenylethanoid o cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml, a 25 ug/ml) o gymharu â grŵp TGF- 1
Trafodaeth
CPhGs(glycoside ffenylethanoid o cistanche)yn glycosid ffenylethanoid wedi'i ynysu a'i buro o risom Cistanche, a ddefnyddir fel meddyginiaeth lysieuol Tsieineaidd traddodiadol. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, dangoswyd bod gan CPhG allu pwerus i atal anafiadau i'r afu [20]. Felly, ein nod oedd ymchwilio i weld a yw CPhGs yn cael effeithiau ataliol ar ffibrosis hepatitis gan ffibrosis hepatig a achosir gan BSA mewn llygod mawr. Defnyddir BJRG yn gyffredin fel cyffur therapiwtig ar gyfer ffibrosis hepatig yn Tsieina. Mae wedi'i wneud o gragen crwban. Mae Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, ac ati yn cael effeithiau ailgyflenwi Qi a gwaed, lleddfu blinder, meddalu nodau. Yn ogystal, mae astudiaethau blaenorol yn dangos bod ganddo'r swyddogaeth amlwg o rwystro ffibrosis cynnar yr afu, atal amlhau celloedd storio braster, a lleihau synthesis colagen [21]. Felly, defnyddiwyd BJRG fel cyffur cadarnhaol yn yr astudiaeth hon.
Mae newidiadau patholegol ffibrosis hepatig mewn llygod mawr a achosir gan bigiadau BSA yn debyg i'r rhai mewn sirosis porth dynol [22]. CPhGs(glycoside ffenylethanoid o cistanche)lliniaru dos-ddibynnol ar raddfa ffibrosis yr afu ac atal trawsnewid HSC i gelloedd tebyg i myofibroblast, lleihau lefelau uwch o serwm ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 a mynegai'r afu, a mynegiant wedi'i atal yn sylweddol o golagen I, colagen III a TGF- 1 ym meinwe'r afu. Mae camau ffibrosis hepatig yn cydberthyn â lefelau serwm HA, LN ac IV-C, a all, fel marcwyr, chwarae rhan wrth ganfod graddau ffibrosis hepatig [23]. Dywedwyd mai HA yw prif adnodd y matrics allgellog. Bydd IV-C fel elfen hanfodol y bilen islawr yn cael ei syntheseiddio'n helaeth a'i ddyddodi'n drwm yn ystod cyfnodau cynharach sirosis yr afu. Lefelau serwm LN a IV-C yw'r mynegeion o gyfradd trosiant y bilen islawr ac maent yn dangos graddau ffibrosis yn ardal y porth a chapilarïau sinwsoidal [24]. Mae PC III yn farciwr wrth wneud diagnosis o ffibrosis hepatig a sirosis cynnar, ond nid yw ei sensitifrwydd a'i benodolrwydd yn uchel, ac nid oes gwahaniaeth arwyddocaol rhwng y gwahanol gamau o ffibrosis mewn llawer o gyfeiriadau [24, 25].
Cafodd yr astudiaeth hon ganlyniad tebyg. Yn ogystal, mae arsylwadau'r adran H&E a staen trichrome Masson yn dangos meinweoedd arferol yr iau gyda llabedau hepatig amlwg a sinwsoidau hepatig. Roedd strwythur meinwe'r afu yn y grŵp model yn anhrefnus, a disodlwyd meinwe'r afu a'r sinwsoid hepatig gan lawer iawn o feinwe gyswllt. Fodd bynnag, gwelwyd gwelliant sylweddol yn y grwpiau triniaeth o gymharu â'r grŵp model. Yn bwysig, mae mynegiant colagen math I a mynegiant colagen math III yn chwarae rhan hanfodol yn natblygiad ffibrosis hepatig, y gall ei rwystro atal a thrin ffibrosis hepatig. Felly, gallai cynhyrchu a dyddodiad colagen math I a colagen math III ym meinwe'r afu fod yn benderfynydd pwysig o effeithiolrwydd ffibrosis gwrth-hepatig. Mae TGF- 1 hefyd yn cytocin proffilogenig pwysig mewn anaf i'r afu ac mae'n weithgar yn fiolegol gyda chamau ffarmacolegol lluosog [26]. Mae angen cydbwysedd rhwng y camau hyn i gynnal homeostasis meinwe. Mae mynegiant aberrant TGF- 1 yn ymwneud â phathogenesis clefydau'r afu [27, 28]. Mae'n hysbys bod TGF- 1 yn cytocin hanfodol sy'n ymwneud â chyfnodau cynnar ffibrosis yr afu.
Mae straen ocsideiddiol yn sbarduno TGF- 1, gan arwain at yr olaf yn ysgogi cynhyrchu a dyddodiad ECM [29]. Felly, un o'r strategaethau effeithiol i gynhyrchu cyffur ffibrosis gwrth-hepatig yw nodi cyfryngau gwrth-TGF{{- 1}. Dangosodd dadansoddiad imiwnohistocemegol y gallai ymadroddion colagen math I, colagen math III a TGF- 1 ganfod proses patholegol ffibrosis hepatig. Mae mynegiadau'r math colagen I, math colagen III a TGF- 1 yn y grwpiau triniaeth yn gostwng, a oedd yn sylweddol is yn y CPhGs dos uchel(glycoside ffenylethanoid o cistanche)grŵp triniaeth yn arbennig, ac awgrymodd fod CPhGs yn atalydd colagen math I, colagen math III ac atalydd TGF- 1 effeithiol. Yn ôl pob tebyg, gall CPhGs wella gweithgaredd collagenase, gan gynnal cydbwysedd deinamig synthesis a diraddiad ECM, gan ohirio ac atal ffurfio ffibrosis yr afu. CPhGs(glycoside ffenylethanoid o cistanche)nid yn unig y gallai wella ffibrosis hepatig a achosir gan BSA mewn llygod mawr ond gallai hefyd fod yn gysylltiedig ag atal actifadu HSC in vitro. Credir bod actifadu HSC yn cynrychioli cam hanfodol ffibrogenesis. Yn yr astudiaeth hon, dangosodd y canlyniadau fod gweinyddu CPhGs o 25 i 100 ug/ml wedi gwanhau'n rhyfeddol y gostyngiad NF-κB p65, mynegiant colagen I mRNA, a mynegiant protein colagen I yn HSC. Mae NF-κB yn chwarae rhan bwysig wrth fodiwleiddio'r ymateb imiwn i haint neu ysgogiadau [30]. Gall cronni NF-κB mewn celloedd yr afu arwain at recriwtio cytocinau / cyfryngwyr llidiol, gan ysgogi datblygiad ffibrosis [31, 32]. Ar ben hynny, mae colagen hefyd yn fynegai sensitif sy'n adlewyrchu'r lefel ffibrosis ac yn cyfrif am tua 50 y cant o gyfanswm y protein yn yr afu ffibrog [33].
O ganlyniad, gwnaethom ragdybio bod y mecanwaith moleciwlaidd yn erbyn ffibrosis hepato yn gysylltiedig â CPhGs(glycoside ffenylethanoid o cistanche)- anactifadu mynegiant NF-κB wedi'i gyfryngu, lle mae'r budd yn cyfrannu at rolau synergaidd o wanhau imiwnwenwynedd a straen llid ym meinwe'r afu â nam ar y BSA, gan gywiro dysmetaboledd ymhellach i leddfu swyddogaethau'r afu.
Casgliadau
I gloi, mae ein hastudiaethau'n nodi bod GRhGau(glycoside ffenylethanoid o cistanche)gwanhau'n sylweddol faint o ffibrosis hepatig a achosir gan BSA mewn llygod mawr. Gall ei fecanwaith fod yn rhannol o leiaf oherwydd effaith ataliol CPhGs ar gyfansoddiad ECM ac ysgogi diraddio ECM, a/neu trwy ataliad uniongyrchol ar synthesis colagen math I, colagen math III a mynegiant TGF{ {0}}. Felly, roeddem yn disgwyl y gellir defnyddio CPhGs mewn cynhyrchion gofal iechyd neu mewn meddyginiaethau clinigol ar gyfer atal ffibrosis yr afu dynol. Mae angen astudiaethau yn y dyfodol i sefydlu effeithiolrwydd CPhGs fel cyffur ffibrosis gwrth-hepatig cryf.
Byrfoddau
CPhGs:Glycosidau ffenylethanol o cistanche; ASS: Albwm serwm buchol; HSC-T6: Celloedd stelate hepatig; Hyp: Hydroxyproline; BJRG: Tabledi Biejiarangan Cyfansawdd; TGF- 1: Trawsnewid ffactor twf 1; ALT: aminotransferase alanine; AST: Aspartate aminotransferase; HA: Asid hyaluronig; LN: Laminin; PC III: Procolagen Math III; IV-C: Colagen Math IV; NF-κB: Ffactor niwclear kappa-golau-gadwyn-wella celloedd B actifedig; RT-PCR: adwaith cadwynol transcriptase-polymerase gwrthdro; SDS-TUDALEN: Sodiwm dodecyl sylffad-polyacrylamide gel electrofforesis.
Buddiannau cystadleuol Mae'r awduron yn datgan nad oes ganddynt unrhyw fuddiannau cystadleuol. Cyfraniadau awduron TL, JZ, SPY, LM, MT a SLZ luniodd a dyluniodd yr arbrofion. Dadansoddodd SPY, TL a JZ y data. Ysgrifennodd SPY a JZ y llawysgrif. Adolygodd TL, LM a JZ y llawysgrif. Darllenodd a chymeradwywyd y llawysgrif derfynol gan bob awdur. Cydnabyddiaeth Cefnogwyd yr ymchwil hwn gan Sefydliad Cenedlaethol Gwyddoniaeth Naturiol Tsieina (81260624). Hoffai'r awduron fynegi eu diolch diffuant i'r Athro Tao Liu am ei welliannau awgrymedig ar gyfer ysgrifennu'r papur hwn. Manylion yr awdur 1 Adran Tocsicoleg, Ysgol Iechyd y Cyhoedd, Prifysgol Feddygol Xinjiang, Rhif 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur Autonomous
Rhanbarth, Tsieina. 2 Labordy Allweddol ar gyfer Meddygaeth Uighur, Sefydliad Materia Medica o Xinjiang, Urumqi 830004, Tsieina. 3 Rhif 140 Xinhua South Road, Tianshan District, Urumqi 830000Xinjiang Uyghur Rhanbarth Ymreolaethol, Tsieina. Derbyniwyd: 6 Awst 2015 Derbyniwyd: 24 Tachwedd 2015
Cyfeiriadau
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Statws presennol therapïau gwrthfibrotig newydd mewn cleifion â chlefyd cronig yr afu. Ther Adv Gastroenterol. 2011; 4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Celloedd stellate hepatig a ffibrosis yr afu. Compr Physiol. 2013; 3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Pathogenesis o ffibrosis yr afu. Annu Parch Pathol. 2011; 6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Adolygu erthygl: gwrthdroadwyedd sirosis. Bwyd Pharmacol Ther. 2012; 36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. academi gwyddorau Tsieineaidd. 23ain arg. Tsieina: Pwyllgor Golygyddol Flora of China; 2013. t. 1–16.
Comisiwn Ffarmacopoeia Tsieineaidd o Weinyddiaeth Glanweithdra Gweriniaeth Pobl Tsieina. Pharmacopoeia Tsieineaidd, Rhan 1. Tsieina: Tŷ Cyhoeddi'r Diwydiant Cemegol; 2010. t. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Cynnydd ymchwil glycosidau ffenylethanoid o Cistanche tubulosa. Pharm Canol De. 2012; 10:692–5.
Li J, Huang D, He L. Effaith Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) ar wenwyndra atgenhedlu mewn llygod a achosir gan glycoside o Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014; 34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, ac atalyddion agregu platennau o Tamarix Hojnacki Bunge (planhigyn gwesteiwr Herba Cistanches) sy'n tyfu yn Xinjiang. Pharmacogn Mag. 2014; 10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Lleddfu colitis a achosir gan sodiwm sylffad dextran mewn llygod trwy echdyniad o Cistanche tubulosa wedi'i gyfoethogi ag echinacoside. Phytother Res. 2014; 28(1):110–9.