Rhan 1: Genistein: Moleciwl Arweiniol Naturiol Posibl ar gyfer Dylunio a Datblygu Cyffuriau Newydd Ar Gyfer Trin Nam ar y Cof

Am fwy o wybodaeth, cysylltwchtina.xiang@wecistanche.com

Haniaethol: Genisteinyn foleciwl polyphenolic sy'n digwydd yn naturiol yn yisoflavonesgrŵp sy'n adnabyddus am ei niwroamddiffyniad. Yn yr adolygiad hwn, rydym yn crynhoi effeithiolrwydd genistein wrth wanhau effeithiaunam ar y cof(MI) mewn anifeiliaid. Defnyddiwyd cronfeydd data Scopus, PubMed, a Web of Science i ddod o hyd i'r erthyglau perthnasol a thrafod effeithiau genistein yn yr ymennydd, gan gynnwys ei ffarmacocineteg, bio-argaeledd, effeithiau ymddygiadol, a rhai o'r mecanweithiau gweithredu posibl ar y cof mewn sawl model anifeiliaid. Roedd canlyniadau'r astudiaethau rhag-glinigol yn awgrymu'n gryf fod genistein yn hynod effeithiol wrth wella perfformiad gwybyddol y modelau anifeiliaid MI, yn benodol ym maes cof, gan gynnwys gofodol, adnabod, cadw, ac atgofion cyfeirio, trwy ei allu i leihaustraen ocsideiddiola gwanhauniwro-llid. Amlygodd yr adolygiad hwn hefyd heriau a chyfleoedd i wella’r modd y cyflenwir genistein o gyffuriau ar gyfer trin MI. Ynghyd â hynny, trafodir hefyd yr addasiadau strwythurol posibl a deilliadau genistein i wella ei briodweddau ffisiocemegol a thebygrwydd cyffuriau. Profodd canlyniadau'r adolygiad y gall genistein wella perfformiad gwybyddol a gwella MI mewn gwahanol astudiaethau rhag-glinigol, gan nodi ei botensial fel arweinydd naturiol ar gyfer dylunio a datblygu cyffur niwro-amddiffynnol newydd.

Geiriau allweddol: genistein; isoflavone; nam ar y cof; niwroamddiffyn; ffytomeddygaeth

Cliciwch yma i ddysgu mwy am gynhyrchion

1. Rhagymadrodd

Mae cof yn gyflwr o ennill, cadw, ac adalw gwybodaeth sy'n cynnwys yr holl wybodaeth a gafwyd trwy gydol eich profiad, megis gwirioneddau sy'n hysbys, digwyddiadau a gofir, a galluoedd a feithrinir trwy gydol eich bywyd. Dau brif fath o gof yw atgofion datganiadol ac anddatganol, a'r cyntaf yw'r atgofion dyddiol tra bod yr olaf yn bennaf yn cynnwys atgofion a adalwyd yn atblygol[1. Mae anhwylderau'r cof, a elwir yn aml yn nam ar y cof (MI), yn ddangosyddion allweddol ar gyfer gwneud diagnosis o rai achosion o'r clefyd sy'n gysylltiedig â syndromau. Mae rhai achosion mewn pwynt yn cynnwysAlzheimer, Parkinson's, clefydau Huntington, Korsakoff, a Creutzfeldt-Jakob (Ffigur 1)[2-5]. Mae MI yn effeithio’n bennaf ar y cof datganiadol, fel sy’n wir am amnesia a dementia, ond nid yw hyn bob amser yn wir am yr olaf, gan fod dementia’n cael ei ddiffinio fel dirywiad mewn dau faes gwybyddiaeth neu fwy. Mewn geiriau eraill, nid yw dementia wedi'i gyfyngu i anhwylder cof datganiadol yn unig gan ei fod hefyd yn effeithio ar rannau eraill o'r cof [1].

Gall dementia effeithio ar y cof mewn ffyrdd cynradd ac eilaidd. Gall anabledd cof sylfaenol gynnwys y dirywiad mewn cof datganiadol lle mae clefyd Alzheimer yn arddangosiad da gan fod cof datganiadol yn un o'r meysydd gwybyddol sy'n dioddef o'r dirywiad. Ar y llaw arall, y modd eilaidd y mae gallu cof yn cael ei effeithio yw pan fo diffygion gwybyddol a all rwystro perfformiad cof, ee, dementia anhwylder sylwgar a allai rwystro agweddau lluosog ar berfformiad cof [1].

Ar hyn o bryd, nid oes unrhyw driniaeth wedi'i chadarnhau a all wanhau datblygiad Ml. Serch hynny, mae therapïau gwella cof yn bwysig ar gyfer cynnal swyddogaeth wybyddol claf gyda'r nod o frwydro yn erbyn ffactorau risg MI. Mae gan estrogen, sy'n hormon atgenhedlu, sbectrwm eang o weithredu gyda'i rôl niwro-amddiffynnol. Serch hynny, gall ei botensial fel asiant niwro-amddiffynnol gael ei leddfu gan yr effeithiau lluosogi ac oncogenig ar rai celloedd, gan achosi'r angen i ddatblygu modulatyddion derbynyddion estrogen dethol (SERMs), gan gynnwys y ffyto-estrogenau sy'n digwydd yn naturiol [6] fel genistein.

Genisteinyn isoflavone (Ffigur 2) a geir yn bennaf mewn dyfyniad Glycine max (ffa soia) ymhlith llawer o ffynonellau eraill, megis codlysiau, cnau daear, a phys gwyrdd. Cynhyrchir genistein yn dilyn metaboledd y genistin glycoside sy'n weithredol yn fiolegol [7]. Gan fod llawer o fwydydd Asiaidd traddodiadol yn cael eu gwneud o ffa soia, ee, natto, tofu, a sufu [8], cofnododd gwledydd Asiaidd swm cymharol uchel o gymeriant genistein (25-30 mg/dydd) o'i gymharu â gwledydd y Gorllewin (2 mg). /Dydd). Mewn gwirionedd, mae eplesu ffa soia hefyd yn un o'r ffyrdd gorau o ryddhau genistein heblaw treulio [9].

Datgelodd priodweddau ffarmacolegol genistein fod ganddo'r potensial i fod yn foleciwl plwm wrth drin ystod eang o glefydau, gan gynnwys symptomau ar ôl diwedd y mislif, canser, esgyrn, yr ymennydd a phroblemau'r galon [l0. Gan y credir bod genistein yn pasio'r rhwystr gwaed-ymennydd i gael ei effaith niwro-amddiffynnol, caiff ei gymhwyso'n helaeth wrth ymchwilio i drin clefydau niwroddirywiol, megis clefyd Alzheimer, Huntington, a Sanfilippo (Ffigur 3)[11-13 ]. Mae ymchwiliadau diweddar wedi canolbwyntio ar ei effaith ar MI lle mae genistein yn amddiffyn rhag MI trwy （1） leihau cynhyrchu protein ß-amyloid (A ), (2) atal niwro-llidiol trwy atal celloedd B a weithredir gan ffactor niwclear (NF-kB) , (3) atal gweithgaredd acetylcholinesterase(AChE), (4) lleihau hyperffosfforyleiddiad protein tau i atal maglu ffibr niwronaidd (NFT), (5) uwch-reoleiddio gweithgaredd Apolipoprotein E (ApoE) i leihau dyddodiad o A , a (6) yn cyflawni ei briodweddau gwrthocsidiol a lleihau straen ocsideiddiol trwy ddileu rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) [14-19].

Cynigir trosolwg o nifer o astudiaethau ar genistein yn erbyn MI yn yr adolygiad hwn i ddeall yn well swyddogaethau posibl genistein wrth wella MI. Crynhoir hefyd gynllun astudio pob gwaith pwysig ar Ml, o ran modelau anifeiliaid, methodolegau profi cof, a'i ddos. Yn ogystal, cyflwynir trosolwg o'r data a gasglwyd ar effeithiolrwydd genistein wrth drin MI. Mae'r mecanweithiau amddiffynnol posibl a roddir gan genistein hefyd yn cael eu hamlygu i gau'r bwlch gwybodaeth, o ran ei ddefnyddio fel meddyginiaeth gyflenwol neu gynorthwyydd ar gyfer MI. Mae'r adolygiad hwn hefyd yn amlinellu rhai o'r rhwystrau i gyflenwi cyffuriau genistein ar gyfer triniaeth MI a'r potensial i'w wella. Yn ogystal, trafodwyd amrywiol addasiadau strwythurol a deilliadau genistein er mwyn cynyddu ei briodweddau diogelwch, effeithiolrwydd, ffisiocemegol a thebygrwydd cyffuriau.

2. Disgrifiad o Gynllun yr Astudiaeth

2.1.Anifeiliaid

Defnyddiwyd llygod mawr a llygod mawr yn y mwyafrif o ymchwiliadau. Awdurdodwyd yr holl brotocolau arbrofol gan bwyllgorau lles anifeiliaid y sefydliad perthnasol a'u cynnal yn unol â'r canllawiau ar gyfer defnyddio a gofalu am anifeiliaid labordy.

2.2. Modelau MI

Roedd pob un yn cynnwys astudiaeth a oedd yn canolbwyntio ar wahanol fathau o fodelau MI. Er enghraifft, Rum-manet al. [19]canolbwyntiodd ar Ml a achosir gan hypocsia tra bod Luet al. [20]archwiliwyd diffyg cof a achosir gan amddifadedd cwsg cronig (CSD). Defnyddiodd dwy astudiaeth fodel o MI wedi'i achosi gan streptozotocin (STZ), lle mae Pierzynowska et al. [13] ymchwiliodd i fodel clefyd Alzheimer (AD) a achoswyd gan STZ tra bod Rajput et al. [21]canolbwyntio ar ddiabetes a achosir gan STZ ar gyfer model MI. Ar y llaw arall, roedd modelau MI eraill yn cynnwys nam gwybyddol a achosir gan scopolamine, lipopolysaccharide(LPS), plwm, asid kainic (KA), heneiddio, ac -amyloid [22-27].

2.3. Genistein DOose

During the course of the treatment, all of the selected investigations used purchased genistein (purity>98 y cant). Defnyddiodd y rhan fwyaf o'r ymchwiliadau genisteinat0.5-150 mg/kg. Y ddau ddos ​​mwyaf cyffredin a ddewiswyd mewn modelau MI in-vivo oedd 10 a 20 mg/kg. O ran llwybr gweinyddu, defnyddiodd wyth ymchwiliad genistein llafar, tra mewn dwy astudiaeth fe'i rhoddwyd yn fewnperitoneol (ip). Cyn yr asesiadau ymddygiadol, perfformiwyd triniaeth genistein am o leiaf 4 diwrnod ac uchafswm o 90 diwrnod.

2.4. Proffil Gwenwyndra Genistein

Mewn astudiaeth in vivo, mae Ek et al. [28] ymchwilio i broffil gwenwyndra a ffarmacocineteg genistein mewn llygod. Defnyddiwyd llygod BALB/c benywaidd yn ystod yr astudiaethau, lle cafodd pob llygoden chwistrelliad mewnperitoneol gyda 0.2 mL(10 y cant ) hydoddiant byffer dimethylsulphoxide/ffosffad (DMSO/PBS) yn cynnwys naill ai 0 ,2,20,200,400 a 800 ug o genistein bob dydd am 10 diwrnod. Yn dilyn hynny, cafodd y llygod eu monitro am 14 diwrnod, ac yn dilyn hynny aberthwyd unrhyw lygod a oedd wedi goroesi ar gyfer dadansoddiad histoleg. Nododd y canfyddiadau nad oedd y llygod a gafodd eu trin â genistein yn dangos unrhyw arwyddion o wenwyndra, ac nad oeddent ychwaith yn mynd yn eiddil, yn swrth, nac yn colli unrhyw bwysau, hyd yn oed ar ôl triniaeth â'r dos uchaf o genistein (40 mg/kg). Ymhellach, cafodd genistein ei oddef yn dda yn yr ymchwiliadau diogelwch isgronig a chronig in vivo mewn dosau hyd at 500 mg / kg / dydd a weinyddir ar lafar am hyd at 52 wythnos yn ôl Nasri a Pohjanvirta [29].

2.5. Gweithdrefn Profi Cof

Dywedodd Levin a Buccafusco [30] fod tri phrif gamweithrediad gwybyddol mewn astudiaethau model anifeiliaid, sef (1) modelau ffarmacolegol, (2) modelau gwenwynegol, a (3) modelau a addaswyd yn enetig. Pennwyd seiliau niwral dysgu, cof a sylw trwy ddefnyddio modelau anifeiliaid hollbwysig o nam gwybyddol. Modelau ffarmacolegol yw'r rhai a ddefnyddir amlaf mewn astudiaethau anhwylderau gwybyddol gan eu bod yn darparu'r sail ar gyfer deall rôl y system derbynnydd niwrodrosglwyddydd sy'n ymwneud â phrosesau gwybyddol, megis dysgu, cof a sylw [30].

"Mae'r system cholinergig (muscarinig a nicotinig) a derbynyddion glwtamad, yn bennaf y derbynyddion N-methyl-D-aspartate (NMDA) yn chwarae rolau niwronol hanfodol yn y swyddogaethau gwybyddol. Mae acetylcholine yn cael ei syntheseiddio o'r coelin dietegol ac asetyl coenzyme A trwy'r ensym colin acetyltransferase (CAT) Mae metaboledd acetylcholine yn digwydd yn y synaps niwronaidd, wedi'i hwyluso gan yr ensym acetylcholinesterase.Hyd yma, mae rhai atalyddion cholinesterase wedi'u datblygu i leddfu cof nam, fel donepezil, rivastigmine, a galantamine [31].

Er mwyn achosi nam ar y cof mewn modelau anifeiliaid system cholinergig, defnyddiwyd cyfryngau gwrth-muscarinig, gan gynnwys scopolamine, atropine, pirenzepine, trihexyphenidyl, benztropine, biperiden, a dicyclomine [32]. Antagonyddion derbynyddion nicotinig, megis mecamylamine (gwrthwynebydd derbynnydd nicotinig an-ddewisol nad yw'n gystadleuol), clorison diamine a d-tubocurarine (gwrthwynebyddion nicotinig amhenodol), dihydro- -hydrobromid erythroidine (Dh E; derbynnydd penodol 4 2 Mae antagonist }}), a methyl aconitine (MLA) (gwrthwynebydd derbynnydd 7 penodol), i gyd wedi'u defnyddio i ysgogi diffygion gwybyddol mewn modelau anifeiliaid [33]. Yn yr un modd, mae derbynyddion NMDA hefyd yn chwarae rhan hanfodol mewn swyddogaethau gwybyddol, gan fod eu gweithrediad yn gysylltiedig â photensial hirdymor (LTP) i gryfhau'r trosglwyddiad signal rhwng niwronau. Felly, er mwyn ysgogi nam gwybyddol mewn modelau anifeiliaid trwy'r system derbynnydd glwtamad, mae llawer o ymchwilwyr wedi dewis defnyddio antagonyddion derbynyddion NMDA, megis MK-801, cetamin, a ffenyclicdin (PCP)[34].

Mae gwenwyneg niwrolegol wedi'i chymhwyso'n llwyddiannus wrth ymchwilio i gamweithrediad gwybyddol mewn modelau anifeiliaid. Cyflawnir niwrowenwyndra mewn modelau anifeiliaid trwy ddefnyddio niwrowenwynig, fel plwm, mercwri, a deuffenylau polyclorinedig (PCBs) gan fod y diffygion gwybyddol wedi'u modelu'n dda mewn modelau mwncïod a chnofilod [30]. Mae plwm, yn arbennig, wedi'i adrodd mewn llawer o astudiaethau i achosi straen ocsideiddiol. Mae'n achosi straen ocsideiddiol trwy gynyddu bregusrwydd tuag at rywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) a lleihau gwrthocsidyddion fel catalase (CAT) a superoxide dismutase (SOD). Cynhyrchir ROS yn bennaf gan kinase protein C(PKC) a chelloedd B wedi'u hysgogi gan ffactor niwclear (NF-kB), y gellir eu hysgogi gan amlygiad plwm. Gall plwm hefyd achosi apoptosis celloedd niwronaidd trwy ddynwared ïonau calsiwm a rhwymo'r sianeli ïon calsiwm â gatiau foltedd, gan effeithio ar y cydbwysedd niwrodrosglwyddydd yn yr hipocampws a all achosi apoptosis ac awtophagi. Yn olaf, gall plwm hefyd gymell adweithiau niwrolidiol trwy actifadu NF-kB [24].

Defnyddir Streptozotocin (STZ) yn eang wrth sefydlu diabetes mewn modelau anifeiliaid o glefyd Alzheimer (AD). Mae pigiad intracerebroventricular o STZ yn achosi hyperffosfforyleiddiad o brotein tau a chroniad o -amyloid a all arwain at MI [13]. Defnyddir STZ hefyd i gymell cyflwr diabetig mewn modelau anifeiliaid i ysgogi MI trwy achosi hyperglycemia a hypoinsulinemia. Mae glwcos gwaed uchel yn gyson yn achosi llid a straen ocsideiddiol, yn ogystal ag actifadu kinases lluosog i lawr yr afon sy'n actifadu rhyddhau cytocinau pro-llidiol, megis IL-6, IL-1, a TNF-, niwronau niweidiol pellach (Ffigur 4). Er y gall STZ achosi colli pwysau sylweddol mewn modelau anifeiliaid, wedi'i alinio â symptom mawr o hyperglycemia, gall triniaeth â gwrthhyperglycemics a sensiteiddwyr inswlin leddfu'r diffygion gwybyddol [35].

Mae modelau anifeiliaid a addaswyd yn enetig yn cael eu defnyddio'n gynyddol mewn astudiaethau nam gwybyddol gan y gallant ddynwared rhai diffygion, gan gynnwys clefyd Alzheimer (AD), dyddodiad amyloid, protein rhagflaenydd amyloid (APP), a cnocio derbynnydd colinergig, i'w defnyddio ar gyfer datblygu cyffuriau newydd. 30]. Ar y llaw arall, cyrchir cof gan ddefnyddio gwahanol weithdrefnau arbrofol, gan gynnwys (1) drysfa ddŵr Morris (MWM), (2) prawf osgoi goddefol (PAT), (3) adnabod gwrthrychau newydd (NOR), (4) adnabod lleoliad gwrthrych (OLR), (5)gwahaniaethu ar sail gwrthrych newydd (NOD), (6) drysfa uchel ynghyd â drysfa (EPM), (7) oedi o ran newid gofodol (DSA), (8) atgyfnerthu gwahaniaethol o gyfraddau ymateb isel (DRL), (9 ) Tasg drysfa fraich rheiddiol (RAM), a (10) Y-ddrysfa. Ymhlith yr astudiaethau hyn, MWM, NOR, ac OLR yw'r tri dull a ddefnyddir amlaf ar gyfer profi cof.

2.5.1.Drysfa Ddŵr Morris (MWM)

Mae drysfa ddŵr Morris (MWM) yn bwll dur crwn, sy'n cynnwys dŵr, gyda diamedrau ac uchder gwahanol, yn amrywio o 100-160 cm mewn diamedr a 38-80 cm o uchder. Rhennir y pwll yn bedwar cwadrant tebyg (wedi'u nodi fel NE, SE, NW, a SW) a bydd platfform yn cael ei foddi o dan y dŵr yng nghanol un o'r cwadrantau a nodwyd [19,22]. Cedwir y platfform yn yr un lle trwy gydol y sesiwn brofi.

Mae'r anifeiliaid yn cael eu hyfforddi am ychydig ddyddiau i benderfynu ar leoliad y llwyfan Yn ystod hyfforddiant, maent yn cael eu rhyddhau o wahanol pedrantau tra'n wynebu y cwadrantau Bydd a bydd yn nofio tuag at y llwyfan tanddwr am 60,90, neu 120 s. Os bydd yr anifeiliaid yn methu â dod o hyd i'r platfform yn ystod yr amser a neilltuwyd, byddant yn cael eu gosod ar y platfform am 10 neu 30 eiliad arall i wneud iddynt deimlo'n gyfarwydd. Bydd y cyfnod hyfforddi yn parhau am ychydig ddyddiau cyn y treial gwirioneddol lle bydd inc afloyw diniwed yn cael ei roi y tu mewn i'r pwll i guddio lleoliad y platfform [22]. Rhoddir amser penodol i'r anifeiliaid bennu lleoliad y llwyfan cudd tanddwr. Bydd yr amser a gymerir i asesu'r cof gofodol hirdymor yn cael ei gofnodi. Gellir cynnal asesiad arall hefyd i werthuso cadw cof, lle yn ystod y cyfnod prawf, bydd y platfform yn cael ei dynnu a bydd nifer yr anifeiliaid sy'n croesi ar hen leoliad y platfform targed yn cael ei gofnodi gan ddefnyddio camera fideo [24].

2.5.2.Tasg Osgoi Goddefol (PAT)

Mae'r dasg osgoi goddefol (PAT) yn cynnwys defnyddio cyfarpar sydd wedi'i rannu'n adrannau goleuedig a thywyll sydd wedi'u cysylltu gan giât fach. Yn ystod y cyfnod ymgynefino, gosodir yr anifeiliaid y tu mewn i'r cyfarpar am 15 munud i ymgyfarwyddo â'r amgylchedd newydd. Yn ystod y treial hyfforddi, bydd yr anifeiliaid yn cael eu rhoi y tu mewn i adran dywyll, a bydd sioc drydan fach (39 V am 3s neu 1 mA am 1 s) yn cael ei rhyddhau i'w traed. Ar ôl 24 h o'r treial hyfforddi, cynhelir y prawf gwirioneddol pan fydd pob anifail yn cael ei roi yn y compartment wedi'i oleuo. Bydd y cyfnod cudd cyn iddo fynd i mewn i'r adran dywyll yn cael ei gofnodi hyd at uchafswm o 300 s i asesu cof cadw anifeiliaid o'r sioc drydanol er mwyn osgoi'r adran dywyll pan gawsant y sioc [19,27].

2.5.3. Cydnabod Gwrthrych Newydd (NOR)

Mae'r prawf adnabod gwrthrych newydd (NOR) yn cael ei berfformio i asesu cof adnabod yr anifail. Perfformir y prawf mewn blwch hirsgwar (40 cm × 50 cm × 50 cm) sydd wedi'i baentio mewn du gyda chamera fideo wedi'i osod uwchben y siambr i gofnodi ymddygiad yr anifail. Yn y cyfnod cynefino, gosodir yr anifeiliaid y tu mewn i'r siambr heb bresenoldeb unrhyw wrthrychau am o leiaf 10 munud am dri diwrnod yn olynol. Yn ystod y cyfnod prawf, caniateir i'r anifeiliaid grwydro y tu mewn i'r blwch sy'n cynnwys dau wrthrych union yr un fath (peli plastig yn nodweddiadol) am 5 munud. Ar ôl 30 munud, cynhelir y prawf prawf lle bydd gwrthrych arall o liw gwahanol yn cymryd lle un o'r gwrthrychau. Bydd ymddygiad archwiliadol yr anifeiliaid yn cael ei arsylwi yn seiliedig ar weithred arogli neu gyffwrdd y gwrthrych, Bydd hyd y cysylltiad â phob un o'r gwrthrychau yn cael ei gofnodi i werthuso'r cof adnabod [19,20].

2.5.4.Cydnabod Lleoliad Gwrthrych (OLR)

Defnyddir y prawf adnabod lleoliad gwrthrych i asesu'r cof adnabod, sy'n debyg i'r prawf NOR. Mae'r cyfarpar yn focs hirsgwar (40 × 50 × 50 cm) gyda siambr wedi'i phaentio'n dywyll y tu mewn a chamera fideo wedi'i osod ar ben y siambr i arsylwi ymddygiad archwiliadol yr anifeiliaid. Y gwrthrychau a ddefnyddir yw dwy botel blastig fach, yn union yr un maint a siâp ond yn wahanol mewn lliw. Rhennir y dull yn dri cham: cyfnodau cynefino, ymgyfarwyddo, a chyfnodau prawf [20].

Cyfnod cynefino: Caniateir i'r anifeiliaid grwydro'n rhydd y tu mewn i'r siambr heb unrhyw wrthrychau am 10 munud am dri diwrnod yn olynol.

Cyfnod ymgyfarwyddo: Ar y pedwerydd diwrnod, gosodir yr anifeiliaid y tu mewn i'r siambr yn cynnwys dau wrthrych union yr un fath am 5 munud.

Cyfnod prawf: 30 munud ar ôl i'r cyfnod ymgyfarwyddo ddod i ben, bydd yr anifeiliaid yn cael eu gosod y tu mewn i'r siambr eto, ond bydd gwrthrych gwahanol yn disodli un o'r gwrthrychau gwreiddiol tra bod y gwrthrych gwreiddiol sy'n weddill yn dal i gael ei gadw y tu mewn i'r siambr.

Er mwyn osgoi unrhyw giwiau arogl posibl, mae'r gwrthrychau a llawr y siambr yn cael eu glanhau gan ddefnyddio ethanol 70 y cant ar ddiwedd pob sesiwn brawf. Arsylwyd ymddygiad archwiliadol yr anifeiliaid yn ystod y cyfnod prawf yn seiliedig ar weithred arogli neu gyffwrdd y gwrthrych gan ddefnyddio trwynau'r anifeiliaid [22].

2.5.5. Gwahaniaethu ar sail Gwrthrychau Newydd (NOD)

Mae'r prawf gwahaniaethu gwrthrych newydd yn caniatáu i'r anifeiliaid archwilio dau wrthrych am 5 munud yn ystod y cyfnod ymgyfarwyddo. Ar ôl 4 h, bydd un newydd yn cael ei ddisodli gan un o'r gwrthrychau. Yn dilyn hynny, bydd ymddygiad archwiliadol yr anifeiliaid, megis cnoi, llyfu, sniffian, neu gyffwrdd â'r gwrthrych â'u trwynau [23], yn cael ei gofnodi.

2.5.6. Drysfa Elevated Plus (EPM)

Mae'r ddrysfa plws uchel yn golygu defnyddio offer siâp plws uchel sy'n cynnwys pedair rheilen (braich) hir, dwy ohonynt yn freichiau agored a'r ddwy arall yn fraich amgaeedig. Mae'r ddwy fraich agored wedi'u lleoli ar draws ei gilydd, yn berpendicwlar i'r breichiau caeedig gyda llwyfan yn y canol [36]. Yn ystod y cyfnod hyfforddi, gosodir yr anifeiliaid ar ddiwedd y fraich agored, gan wynebu i ffwrdd o'r llwyfan canolog am dri diwrnod. Mae'r amser cêl trosglwyddo (TLT) yn cael ei gofnodi fel yr amser y mae'r anifeiliaid yn ei gymryd i fynd i mewn i'r fraich gaeedig o'r man cychwyn ar y fraich agored o fewn y 90au. Ar y pedwerydd diwrnod, yn ystod y prawf prawf, cofnodir y TLT 24 h ar ôl y niwed byd-eang i'r ymennydd isgemia-atlifiad (IR) ymennydd, sef y mynegai ar gyfer cof [21].

2.5.7.Oedi Gofodol Amgen (DSA)/Atgyfnerthu Gwahaniaethol o Gyfraddau Ymateb Isel (DRL)

Mae'r newid gofodol gofodol (DSA) ac atgyfnerthu gwahaniaethol o gyfraddau ymateb isel (DRL) yn cynnwys defnyddio offer tebyg, blwch Skinner, sy'n cynnwys dau liferi y gellir eu tynnu'n ôl rhwng peiriannau pelenni gyda phâr o oleuadau ciw yn union uwchben pob lifer. Yn ystod y cyfnod hyfforddi, mae'r anifeiliaid yn cael eu hyfforddi i wasgu'r lifer yn seiliedig ar y golau ciw ar gyfer pelenni bwyd fel atgyfnerthwr, yn seiliedig ar raglen awtosiapio. Er mwyn atal yr anifeiliaid rhag datblygu gogwydd ochr tuag at y lifer, mae'r lifer sy'n gysylltiedig â'r atgyfnerthiad yn cael ei wasgaru â phob pum atgyfnerthwr a ddarperir. Roedd y dasg DSA yn cynnwys oedi wrth bwyso'r lifer ar gyfer 0,3,6,9 neu 18s. Rhennir y meini prawf ymateb araf yn chwe phrif sesiwn hyfforddi, gyda'r ddwy sesiwn gyntaf yn cynnwys amserlen cymhareb sefydlog 1 ar gyfer 200 o dreialon neu 90 munud. Mae'r drydedd a'r bedwaredd sesiwn yn cynnwys amserlen DRL-5, tra bod atgyfnerthu yn dibynnu ar oedi o 5s rhwng ymatebion. Mae'r un peth yn berthnasol i'r ddwy brif sesiwn ddiwethaf gydag amserlen DRL sy'n gofyn am oedi o 10s rhwng ymatebion. Mae'r anifeiliaid yn cael eu profi ar amserlen DRL am o leiaf 30 sesiwn [26].

Tasg 2.5.8.RAM

Defnyddir y ddrysfa fraich rheiddiol (RAM) i asesu'r cof gofodol ac mae'n cynnwys defnyddio drysfa rheiddiol wyth-arf uchel gyda phob braich wedi'i hymestyn o'r llwyfan canolog wythonglog. Ar ddiwedd pob braich, mae cynhwysydd bwyd ar gael i'r arbrofwr adneuo bwyd i'w atgyfnerthu. Serch hynny, yn ystod y cyfnod prawf, dim ond rhai o'r breichiau fydd yn cynnwys pelenni bwyd yn y cynhwysydd bwyd.

Yn ystod y cyfnod hyfforddi, bydd yr anifeiliaid yn cael eu gosod yn y platfform canolog a chaniateir iddynt archwilio'r ddrysfa yn rhydd i gaffael pelenni bwyd. Yn ystod y broses, bydd yr anifeiliaid yn dysgu i beidio â mynd yn ôl i mewn i'r breichiau y maent wedi ymweld â nhw yn yr un treial yn absenoldeb bwyd. Yn y prawf prawf, rhoddir 10 munud i'r anifeiliaid archwilio'r ddrysfa a bwyta'r holl belenni a osodir yn rhai o'r breichiau. Defnyddir y dewisiadau cywir ac anghywir i werthuso perfformiad pob un o'r anifeiliaid. Pe bai'r anifeiliaid yn dychwelyd i'r breichiau heb fwyd y maent wedi ymweld ag ef, bydd yn cael ei ystyried yn gamgymeriad [27].

2.5.9.Y-Drysfa

Defnyddir y prawf Y-ddrysfa gan Bagheri et al.[27] a Shahmohammadi et al.[23] i asesu cof adnabod gofodol yr anifeiliaid. Mae'r cyfarpar a ddefnyddir yn ddrysfa tair braich, lle mae pob braich 120 gradd oddi wrth un arall ac yn debyg i siâp prifddinas "Y". Mae pob un o'r breichiau wedi'i gysylltu gan ran rhyng-gysylltu. Cynhaliwyd y protocol i werthuso dysgu gofodol gan ddefnyddio'r newid digymell y mae'r anifeiliaid yn naïf i natur y ddrysfa. Rhoddir yr anifeiliaid ar ddiwedd un fraich a chaniateir iddynt symud yn rhydd mewn sesiwn 8 munud. Gwelir newidiadau eraill fel ceisiadau llwyddiannus i bob un o'r tair braich ar setiau tripledi sy'n gorgyffwrdd, pob un â breichiau nad ydynt yn ailadrodd. Yna cyfrifir y ganran arall fel cymhareb yr eiliadau gwirioneddol i bosibl × 100.

3. Effeithiolrwydd Genistein

3.1.HypOoxia

Mewn astudiaeth gan Rumman et al. [19] Ymchwiliwyd i effaith genistein ar MI a achosir gan hypocsia gan ddefnyddio llygod albino gwrywaidd o'r Swistir. Mae'r llygod yn cael eu trin yn barhaus â 10,20 neu 30 mg / kg / dydd o genistein po am 28 diwrnod. Datblygwyd model llygod ar gyfer amnesia yn seiliedig ar hypocsia, trwy amlygu'r llygod i lefel isel o ocsigen (10 y cant) bob dydd am gyfnod tebyg i'r un ar gyfer triniaeth genistein. Defnyddiwyd drysfa ddŵr Morris (MWM), prawf osgoi goddefol (PAT), ac adnabod gwrthrychau newydd (NOR) i ymchwilio i effeithiau genistein wrth wella diffygion cof mewn llygod amnesiaidd.

Dangosodd y canlyniadau yn seiliedig ar MWM fod llygod a gafodd eu trin â dosau genistein o 20 a 30 mg/kg yn dangos cuddni isel a chynnydd yn nifer y croesfannau yn y cwadrant platfform. O ran PAT, bu cynnydd mewn hwyrni yn y grwpiau genistein 20 a 30 mg/kg. Yn olaf, yn NOR, dangosodd y ddau grŵp o lygod a gafodd 20 a 30 mg/kg genistein gynnydd yn ymddygiad archwiliadol y gwrthrych newydd o'i gymharu ag ymddygiad y gwrthrych cyfarwydd. Yn gyffredinol, awgrymodd y canfyddiadau y gall triniaeth gyda genistein helpu i leihau diffygion cof mewn MI a achosir gan hypocsia.

3.2.Dibrisiant Cwsg Cronig (CSD)

Mewn astudiaeth arall gan Lu et al. [20] ymchwiliwyd i effeithiau genistein ar amddifadedd cwsg cronig (CSD) a achosir gan MI mewn llygod gwrywaidd Sefydliad Ymchwil Canser (ICR). Cafodd y llygod eu trin â genistein (10,20, neu 40 mg/kg/dydd) bob dydd am 23 diwrnod. Perfformiwyd sefydlu CSD gan ddefnyddio cyfarpar torri cwsg awtomataidd (SIA) a oedd yn cynnwys cylchdro dur gwrthstaen sy'n cylchdroi am 1 munud ar ôl saib o 2 funud am 24 awr y dydd am gyfanswm o 14 diwrnod. Defnyddiwyd drysfa ddŵr Morris (MWM), adnabod lleoliad gwrthrych (OLR), ac adnabod gwrthrychau newydd (NOR) i asesu cof gofodol ac adnabyddiaeth y llygod a achosir gan CSD.

Ar gyfer MWM, roedd gan y grŵp a gafodd ei drin â genistein yn enwedig y grŵp 40 mg/kg lai o hwyrni wrth ddod o hyd i'r llwyfan tanddwr. Yn ogystal, yn y prawf archwilio lle tynnwyd y platfform, bu cynnydd sylweddol yn y niferoedd croesi yn y cwadrant targed ymhlith y genistein 20 a 40 mg/kg. Dangosodd y grŵp a driniwyd gan genistein (20 a 40 mg/kg) fynegai gwahaniaethu sylweddol uwch (DI o'i gymharu â'r grŵp CSD yn OLR. Yn y dasg NOR, roedd dyrchafiad sylweddol yn y DI, yn enwedig ymhlith y genistein 20 a Grwpiau triniaeth 40 mg/kg Yn gyffredinol, mae triniaeth genistein (yn enwedig 20 a 40mg/kg) yn effeithiol o ran lliniaru namau cof a achosir gan CSD.

3.3.Streptozotocin (STZ)

Er mwyn ymchwilio i effaith niwro-amddiffynnol genistein yn erbyn camweithrediad gwybyddol a achosir gan streptozotocin (STZ), rhoddwyd streptozotocin (STZ) i lygod mawr Wistar gwrywaidd trwy chwistrelliad intracerebroventricular (icv) ar gyfer 3 mg / kg cronnol dros ddau bigiad gyda chyfwng 48h [13] ]. Cafodd y llygod mawr eu trin â genistein 150 mg / kg / dydd am 90 diwrnod. Dangosodd y grŵp a gafodd driniaeth genistein lai o hwyrni i nofio tuag at y platfform yn ystod prawf prawf drysfa ddŵr Morris (MWM). Fodd bynnag, yn y prawf archwilio, roedd yr amser a dreuliwyd gan y llygod mawr a gafodd eu trin â genistein yn y cwadrant targed yn sylweddol hirach na'r grwpiau eraill, gan ddangos bod triniaeth genistein yn dangos canlyniadau addawol o ran gwella MI a achoswyd gan STZ.

3.4.Scopolamine

Lu et al.[22] ymchwilio i effeithiau genistein ar MI a achosir gan scopolamine mewn llygod gwrywaidd Sefydliad Ymchwil Canser. Rhoddwyd scopolamine 0.75 mg/kg/dydd i'r llygod yn inperitoneally(ip) am saith diwrnod yn olynol. Rhoddwyd Genistein (10, 20, neu 40 mg / kg / dydd, po) yn ddyddiol i'r llygod am 24 diwrnod. Y profion ymddygiad dan sylw oedd adnabod lleoliad a wrthwynebwyd (OLR) a drysfa ddŵr Morris (MWM) ar gyfer gwerthuso cof gofodol. Yn y dasg OLR, dangosodd y grŵp a gafodd driniaeth genistein (40 mg/kg) gynnydd sylweddol yn y mynegai gwahaniaethu (DI). Ym mhrofion prawf a phrofi MWM, dangosodd y grŵp a gafodd driniaeth genistein lai o hwyrni dianc i leoli'r llwyfan tanddwr a dangosodd niferoedd croesi uwch yn y cwadrant targed, gan nodi y gall triniaeth genistein wella perfformiad gwybyddol.

3.5. Lipopolysaccharides (LPS)

Shahmohammadi et al. [23] cynnal astudiaeth ar effaith triniaeth genistein ar niwro-llid a achosir gan lipopolysaccharide (LPS) ar lygod mawr Wistar albino gwrywaidd. Achoswyd niwro-llid trwy gyflwyno LPS(ip) 500 ug/kg/dydd. Perfformiwyd y driniaeth genistein ddilynol am saith diwrnod ar 10,50 neu 100 mg / kg / dydd. Aseswyd atgofion gofodol ac adnabod gan ddefnyddio drysfa Y, gwahaniaethu gwrthrych newydd (NOD), a thasg osgoi goddefol (PAT). Ym mhob un o’r tri phrawf, cafwyd gwelliannau sylweddol yn y paramedrau dan sylw gan genistein (50 a 100 mg/kg) sy’n cefnogi ymhellach. y gall triniaeth genistein liniaru camweithrediad gwybyddol.

3.6. Streptozotocin (STZ) - Diabetes a Anogir

Cynhaliwyd astudiaeth in vivo gan Rajput et al. [21] ymchwilio i rôl niwro-amddiffynnol genistein ar ddiabetes a achosir gan SIZ mewn llygod gwrywaidd o'r Swistir albino. Cafodd diabetes yn y llygod ei achosi trwy gyflwyno 200 mg/kg o STZ trwy iproute. Anogwyd diabetes i achosi hyperglycemia yn y llygod, a all yn ei dro achosi niwed niwronaidd a achosir gan isgemia-atlifiad (IR). Yn dilyn hynny, gweinyddwyd triniaeth genistein trwy ip i'r llygod diabetig (2.5,5, neu 10 mg / kg / dydd) am 14 diwrnod. Yna gwerthuswyd atgofion gofodol a chadw trwy ddefnyddio drysfa uwch a mwy (EPM) a arweiniodd at ostyngiad yn yr amser cêl trosglwyddo ar gyfer y grwpiau triniaeth genistein (5 a 10 mg/kg) mewn llygod diabetig ag IR. Yn gyffredinol, mae'r canfyddiadau'n awgrymu'n gryf y gellir lleihau diffygion gwybyddol gyda thriniaeth genistein.

3.7.Arwain

Mae Su et al. [24] gwerthuso effaith amddiffynnol triniaeth genistein ar y lefel plwm fel gwenwynig. Rhoddwyd plwm a genistein ar 1 mg/kg/dydd i lygod mawr gwrywaidd Sprague-Dawley am 56 diwrnod. Defnyddiwyd drysfa ddŵr Morris (MWM) i werthuso perfformiad gwybyddol y llygod mawr a dylanwad plwm. Lleihaodd triniaeth Genistein y cuddni i'r platfform yn sylweddol ac achosi niferoedd croesi uwch yn y cwadrant targed mewn profion treialu a stiliwr, gan awgrymu y gall triniaeth genistein leihau effaith MI.

3.8. Atafaelu a achosir gan Asid Kainic (KA).

Mewn astudiaeth gan Khodamoradi et al. [25], ymchwiliwyd i driniaeth genistein am ei effaith bosibl ar drawiad a achosir gan asid kainig (KA) ar lygod mawr Wistar benywaidd. Arweiniodd trawiad a achoswyd gan KA at anafiadau MI ac anafiadau niwronaidd. Rhoddwyd KA i'r llygod mawr trwy'r llwybr intracerebroventricular （icv） (0.5 ug/μL). Yn dilyn hynny, perfformiwyd cyflwyniad KA i'r llygod mawr bedwar diwrnod ar ôl triniaeth genistein ar 0.5 a 5 mg/kg/dydd trwy ip Defnyddiwyd drysfa ddŵr Morris (MWM) i asesu cof gofodol. Yn gyffredinol, mae'r canlyniadau'n awgrymu effeithiau cadarnhaol y genistein tuag at y llygod trawiad a achosir gan KA.

3.9.Heneiddio

Roedd Neese et al. [26] ymchwilio i'r diffygion gwybyddol sy'n gysylltiedig â heneiddio ac astudio effeithiau amddiffynnol posibl genistein wrth liniaru'r diffygion. Fe wnaethant ddefnyddio 14-llygod mawr benywaidd mis oed Long-Evans i efelychu effeithiau heneiddio ar berfformiad gwybyddol. Defnyddiwyd gwasg lifer a blwch Skinner oedi wrth newid gofodol (DSA) ac atgyfnerthiad gwahaniaethol o gyfraddau ymateb isel (DRL) i werthuso'r cof gweithio. Serch hynny, dangosodd y canlyniadau nad yw genistein yn effeithiol o ran gwella diffygion gwybyddol mewn model llygod mawr MI oedrannus.

3.10.-. Amyloid

Roedd Bagheri et al. [27] craffu ar effaith niwro-amddiffynnol triniaeth genistein ar MI a achosir gan -amyloid. -amyloid 1-40 wedi'i chwistrellu icv （4 μL） i lygod mawr Wistar gwrywaidd, ac yna cyflwyno genistein ar lafar (10 mg/kg/dydd). Defnyddiwyd Y-ddrysfa, prawf osgoi goddefol (PAT), a drysfa braich rheiddiol (RAM) i werthuso'r perfformiad gwybyddol lle dangosodd y llygod mawr a gafodd eu trin â genistein gynyddiadau paramedr sylweddol yn Y-ddrysfa a PAT tra mewn RAM, nid oedd dim cynnydd sylweddol yn y dewisiadau cywir o freichiau neu ostyngiad yn y dewisiadau braich anghywir. Yn gyffredinol, awgrymodd y canfyddiadau y gall triniaeth gyda genistein atal MI a achosir gan -amyloid.

Am ragor o wybodaeth, cliciwch ar y ddolen:https://www.xjcistanche.com/news/part2-genistein-a-potential-natural-lead-mol-55084044.html