Yn Atal Plumbagin - Melanogenesis a Achosir gan MSH mewn Celloedd Melanoma Llygoden B16F10 Trwy Atal Gweithgaredd Tyrosinase

Crynodeb:

Mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod gan plumbagin weithgareddau gwrthlidiol, gwrth-alergaidd, gwrthfacterol a gwrth-ganser; fodd bynnag, ni ddangoswyd eto a yw plumbagin yn atal synthesis melanin a achosir gan hormonau ysgogol alffa-melanocyte (-MSH) i atal hyperbigmentiad. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ddangos bod plumbagin yn atal synthesis melanin a ysgogir gan MSH yn sylweddol mewn celloedd melanoma llygoden B16F10. Er mwyn deall mecanwaith ataliol plymen ar synthesis melanin, fe wnaethom gynnal profion gweithgaredd tyrosinase cellog neu ddi-gell a dadansoddi mynegiant genynnau sy'n gysylltiedig â melanogenesis. Fe wnaethom ddangos bod plumbagin yn atal gweithgaredd tyrosinase yn uniongyrchol yn annibynnol ar y peiriannau trawsgrifio sy'n gysylltiedig â melanogenesis, sy'n cynnwys ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â microffthalmia (MITF), tyrosinase (TYR), a phrotein sy'n gysylltiedig â thyrosinase 1 (TYRP1). Fe wnaethom hefyd ymchwilio i weld a oedd plymio yn wenwynig i keratinocytes dynol arferol (HaCaT) a chelloedd epithelial lens (B3) a allai gael eu hanafu trwy ddefnyddio colur gofal croen. Yn syndod, roedd crynodiadau plymen is (0.5-1 µM) i bob pwrpas yn atal synthesis melanin a gweithgaredd tyrosinase ond nid ydynt yn achosi gwenwyndra mewn keratinocytes, celloedd epithelial lens, a chelloedd melanoma llygoden B16F10, sy'n awgrymu bod plymio yn ddiogel ar gyfer defnydd dermal. Gyda'i gilydd, mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu y gallai effaith ataliol plymio ar bigmentiad ei wneud yn elfen dderbyniol a diogel i'w ddefnyddio mewn fformwleiddiadau cosmetig gofal croen a ddefnyddir ar gyfer gwynnu croen.

Yn ôl astudiaethau perthnasol,cistancheyn llysieuyn cyffredin sy'n cael ei adnabod fel "y llysieuyn gwyrthiol sy'n ymestyn bywyd". Ei brif gydran ywcistanoside, sydd ag effeithiau amrywiol megisgwrthocsidiol, gwrthlidiol, ahyrwyddo swyddogaeth imiwnedd. Y mecanwaith rhwng cistanche agwynnu croenyn gorwedd yn effaith gwrthocsidiol cistancheglycosidau. Mae melanin mewn croen dynol yn cael ei gynhyrchu gan ocsidiad tyrosin sy'n cael ei gataleiddio gantyrosinase, ac mae'r adwaith ocsideiddio yn gofyn am gyfranogiad ocsigen, felly mae'r radicalau di-ocsigen yn y corff yn dod yn ffactor pwysig sy'n effeithio ar gynhyrchu melanin. Mae cistanche yn cynnwys cistanoside, sy'n gwrthocsidydd a gall leihau'r genhedlaeth o radicalau rhydd yn y corff, fellyatal cynhyrchu melanin.

where can i buy cistanche

Cliciwch ar Atodiad Cistanche Tubulosa

Am fwy o wybodaeth:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Geiriau allweddol:plymio; melanogenesis; pigmentiad; tyrosinase

1. Rhagymadrodd

Mae melanin yn cynnwys grŵp o bigmentau wedi'u syntheseiddio mewn melanocytes epidermaidd sy'n chwarae rhan bwysig wrth amddiffyn y croen rhag difrod ymbelydredd uwchfioled (UV) [1]. Mae melanogenesis annormal, naill ai'n cynyddu neu'n lleihau cynhyrchiant melanin, yn gysylltiedig yn agos â nifer o glefydau croen gan gynnwys melanoma ac anhwylderau pigmentiad, megis cloasma a brychni haul [2,3]. Mae biosynthesis melanin yn cael ei gychwyn gan ysgogiadau lluosog gan gynnwys arbelydru UV, cytocinau llidiol, a signalau hormonaidd. Yn benodol, gall hormon ysgogol -melanocyte (-MSH) a ryddheir o keratinocytes UV-agored ysgogi biosynthesis melanin mewn melanocytes epidermaidd trwy actifadu'r echel cAMP-PKA-CREB (elfen ymateb cylchol adenosine monophosphate-protein kinase A-cAMP rhwymol protein) [3] . Mae'r echel cAMP-PKA-CREB wedi'i actifadu yn arwain at gynnydd mewn ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â microphthalmia amgodio mRNA (MITF). Mae MITF yn cynyddu mynegiant genynnau tyrosinase (TYR), protein sy'n gysylltiedig â tyrosinase 2 (TYRP1), a phrotein sy'n gysylltiedig â tyrosinase 2 (TYRP2) ar ysgogiad -MSH mewn melanocytes [3,4]. Yn ogystal, mae llawer o lwybrau signalau sy'n rheoli twf celloedd, gan gynnwys kinases protein-activated mitogen (MAPKs), kinase ymateb allgellog (ERK), ac AKT, yn hanfodol i melanogenesis trwy reoleiddio sefydlogrwydd a gweithgaredd MITF [5].

Mae'r ensym tyrosinase, ocsidas amlswyddogaethol sy'n cynnwys copr, yn chwarae rhan hanfodol mewn biosynthesis melanin trwy gataleiddio'r adweithiau y mae L-tyrosine yn hydroxylated i L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) a L-DOPA yn cael ei ocsidio i o-quinone (dopaquinone). ) [5,6]. Felly, mae rhai atalyddion tyrosinase hefyd yn atal biosynthesis melanin, ac mae'r rhain yn cynnwys resveratrol, arbutin, a honokiol, sydd i gyd wedi'u defnyddio mewn cymwysiadau cosmetig sy'n gwynnu'r croen [7].

does cistanche work

Mae plumbagin yn hydroxyl-naphthoquinone syml, a dynnwyd gyntaf o wreiddiau'r genws Plumbago o blanhigion ac y dangoswyd bod ganddo briodweddau meddyginiaethol rhyfeddol [8]. Adroddwyd am weithgareddau gwrthlidiol, gwrth-ganser, gwrth-alergaidd a gwrthfacterol plwm [8,9]. Yn wir, dywedwyd bod plumbagin yn atal actifadu neutrophil, angiogenesis, a mynegiant colagnase trwy atal topoisomerase-II, gan awgrymu defnyddio plumbagin fel cyffur posibl wrth drin arthritis gwynegol [10]. Yn ogystal, mae sawl adroddiad wedi dangos bod plumbagin yn arddangos gweithgaredd gwrth-ganser mewn mathau lluosog o ganser, gan gynnwys y fron [11], y prostad [12], yr ofari [13], yr ysgyfaint [14], carcinoma'r croen [15], a chanser yr afu [16]. Er ei bod yn dod yn amlwg y gallai plymio fod yn ddefnyddiol fel ymyriad therapiwtig wrth drin afiechydon dynol amrywiol, ni adroddwyd erioed am effaith ataliol plymio ar felanogenesis sy'n gysylltiedig â gorbigmentation.

Yn yr astudiaeth bresennol, fe wnaethom werthuso effeithiau ataliol plymio ar melanogenesis a ysgogwyd gan -MSH. Yma rydym yn dangos bod plumbagin yn atal biosynthesis melanin a achosir gan MSH yn sylweddol mewn celloedd melanoma llygoden B16F10 trwy atal gweithgaredd tyrosinase ond nad yw'n atal mynegiant genynnau wedi'i gyfryngu gan MITF sy'n gysylltiedig â melanogenesis.

2. Canlyniadau

2.1. Adeiledd Cemegol ac Effeithiau Sytotocsig Plumbagin mewn Celloedd Melanoma Llygoden B16F10

Cyn astudio effeithiau gwrth-melanogenig plymen, fe wnaethom asesu'n gyntaf ei wenwyndra mewn celloedd melanoma llygoden B16F10 sy'n cynhyrchu melanin. Dangosir strwythur cemegol plymio yn Ffigur 1A. Dangosir canlyniadau ein hassiad sytowenwyndra lle nad oedd crynodiadau plymen o lai na 5 µM yn effeithio ar hyfywedd celloedd mewn celloedd B16F10 yn Ffigur 1B.

cistanche tubulosa supplement

2.2. Atal Plumbagin - Synthesis Melanin a Anwythwyd gan MSH mewn Celloedd Melanoma Llygoden B16F10

Y tro nesaf fe wnaethom ymchwilio i effeithiau ataliol plymio ar synthesis melanin a achosir gan hormon ysgogol -melanocyte (-MSH) mewn celloedd B16F10. Fe wnaethom ddangos bod plymen yn atal crynhoad melanin a achosir gan MSH yn gryf mewn cyfrwng diwylliedig o gelloedd B16F10 (Ffigur 2A). Er mwyn cadarnhau effaith ataliol plumbagin ar synthesis melanin a achosir gan -MSH, fe wnaethom bennu'r cynnwys melanin allgellog neu fewngellog yn absenoldeb neu bresenoldeb plumbagin mewn celloedd B16F10 a ysgogir gan -MSH. Mae Ffigurau 2B ac C yn dangos bod plumbagin yn lleihau cynnwys melanin allgellog ac mewngellol yn sylweddol.

how to take cistanche

2.3. Nid yw Plumbagin yn Rheoleiddio - Rhaeadrau Mynegiant Genynnau Melanogenesis a Throsglwyddo Signalau a Achosir gan MSH

Gan fod ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â microphthalmia (MITF) yn ffactor trawsgrifio hanfodol sy'n rheoleiddio mynegiant genynnau sy'n gysylltiedig â melanogenesis trwy echel -MSH-PKA-CREB, gwnaethom ymchwilio i weld a allai plumbagin reoleiddio mynegiant genynnau wedi'i gyfryngu gan MITF sy'n gysylltiedig â melanogenesis. Yn gyntaf, fe wnaethom bennu pwynt amser o fynegiant genynnau melanogenesis uchaf ar gyfer MITF, tyrosinase (TYR), a phrotein sy'n gysylltiedig â thyrosinase 1 (TYRP1) o dan ysgogiad -MSH. Caiff MITF ei ddadreoleiddio'n gryf ar ôl triniaeth -MSH am 2 awr (Ffigur 3A). Cafodd TYR a TYRP1 eu huwchreoleiddio'n ddramatig ar ôl 48 h o driniaeth -MSH (Ffigur 3A). Cynyddodd lefelau protein MITF a tyrosinase mewn ymateb i driniaeth -MSH ac ni chawsant eu hatal gan y driniaeth plymen (Ffigur 3B). Yn gyson, nid oedd plumbagin yn atal lefelau mRNA MITF, TYR, a TYRP1 ar ôl ysgogiad -MSH, gan awgrymu nad yw plumbagin yn rheoleiddio'r peiriannau trawsgrifio sy'n gysylltiedig â mynegiant genynnau melanogenesis mewn celloedd B16F10 (Ffigur 3C). Oherwydd bod angen ffosfforyleiddiad ac actifadu AKT, ERK1/2, a CREB (rhaeadrau trawsgludo signal mawr sy'n rheoleiddio melanogenesis) ar gyfer melanogenesis [3], fe wnaethom ymchwilio ymhellach i weld a yw plumbagin yn rheoleiddio'r llwybrau trawsgludo signal hyn sy'n gysylltiedig â melanogenesis. Mae ein canlyniadau, a ddisgrifir yn Ffigur 3D, yn dangos nad yw plumbagin yn newid signalau AKT, ERK1/2, na CREB ar ôl triniaeth -MSH.

cistanche side effects reddit

2.4. Mae Plumbagin yn Atal Gweithgaredd Tyrosinase

Oherwydd y gallai cynhyrchion naturiol sy'n atal tyrosinase uniongyrchol neu anuniongyrchol fod yn ddefnyddiol ar gyfer datblygu colur gwynnu'r croen, fe wnaethom ymchwilio nesaf i effaith ataliol plumbagin ar weithgaredd ensymau tyrosinase. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ddangos bod plumbagin yn atal gweithgaredd enzymatig tyrosinase cellog a achosir gan MSH yn sylweddol mewn celloedd B16F10 (Ffigur 4A). Er mwyn deall a yw plumbagin yn atal gweithgaredd tyrosinase yn uniongyrchol neu'n anuniongyrchol, mesurwyd gweithgaredd tyrosinase di-gell. Mae Plumbagin yn atal yn gryf weithgaredd ocsideiddio L-DOPA tyrosinase sy'n deillio o fadarch hefyd, gan awgrymu bod plumbagin yn atal melanogenesis trwy atal gweithgaredd tyrosinase yn uniongyrchol (Ffigur 4B). Yn ogystal, gwelwyd cynnydd sylweddol mewn gweithgareddau sborionu radical gan ddefnyddio assay 1,{12}}diffenyl{-2-picrylhydrazyl (DPPH) mewn samplau a gafodd eu trin â fitamin C a phlymio mewn crynodiadau yn amrywio o 0.1 i 5 mg/mL. O ganlyniad, dangosodd 5 mg/ml o bagin plymen effaith debyg ar weithgaredd sborionu radical i'r rhai o 0.1 mg/mL o fitamin C (Ffigur 4C).

cistanche for sale

2.5. Nid yw Plumbagin yn wenwynig mewn Keratinocytes Normal a Chelloedd Epithelial Lens

Oherwydd bod colur fel hufen croen i'w ddefnyddio'n allanol ac y gallai sytowenwyndra achosi problemau croen, fe wnaethom ymchwilio ymhellach i weld a yw plymen yn wenwynig i keratinocytes arferol (HaCaT) a chelloedd epithelial lens (B3) ac a allai fod yn ddefnyddiol ar gyfer datblygu gwynnu croen. colur. O ganlyniad, canfuom nad yw crynodiadau plymen is (1-5 µM) yn achosi gwenwyndra mewn celloedd HaCaT a B3, ond eu bod yn effeithiol wrth atal synthesis melanin (Ffigur 5A). Yn ogystal, ni wnaeth plumbagin achosi H2AX yn gysylltiedig â difrod DNA a lleihau proteinau poly (ADP-ribose) polymeras (PARP) cysylltiedig â apoptosis cellog (PARP) a caspase mewn celloedd HaCaT a B3 (Ffigur 5B), sy'n awgrymu y gallai plymogins. fod yn dderbyniol i'w ddefnyddio mewn cynhyrchion gwyngalchu croen heb arddangos unrhyw wenwyndra dermol.

rou cong rong benefits

3. Trafodaeth

Mae Plumbagin yn metabolyn eilaidd sy'n deillio o blanhigion ac mae'n dangos sawl swyddogaeth fiolegol, gan gynnwys gweithgareddau gwrthlidiol, gwrth-ganser, gwrth-alergaidd a gwrthfacterol [8,9]. Fodd bynnag, nid oedd yn hysbys a oedd gan plumbagin effaith ataliol ar felanogenesis yn gysylltiedig â hyperpigmentation a melanoma. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ddangos bod plumbagin yn atal melanogenesis yn gryf mewn celloedd melanoma B16F10, a gallai'r gwaith hwn roi cyfle i ddatblygu colur gofal croen yn seiliedig ar weithgareddau gwrthlidiol, gwrth-alergaidd, gwrthfacterol a gwrth-melanogenesis plymen.

Oherwydd bod upregulation o melanogenesis yn aml yn cael ei arsylwi mewn melanoma malaen gyda lefelau tyrosinase gor-ddweud yn y gwaed yn ogystal â meinweoedd tiwmor, mae'n amlwg bod melanogenesis yn darged posibl ar gyfer cemotherapi o melanoma malaen [1]. Yn yr astudiaeth bresennol, canfuom fod plumbagin yn atal gweithgaredd tyrosinase yn uniongyrchol yn annibynnol ar y peiriannau trawsgrifio sy'n gysylltiedig â melanogenesis (Ffigur 6). Felly, mae ein canlyniadau'n awgrymu y gallai plymio fod yn elfen bosibl o strategaeth ataliol a therapiwtig ar gyfer rheoli melanoma malaen. Yn wir, mae effeithiau gwrth-melanoma, cemosensiteiddio, a radiosensiteiddio plymio ar therapi melanoma wedi'u hadrodd [17-21].

cistanche chemist warehouse

Mewn astudiaethau blaenorol sy'n delio ag effeithiau gwrth-ganser a gwrthlidiol plymen, mae tua 5-10 µM o blymen (yn uwch na'r crynodiad a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth hon) wedi'i ddefnyddio mewn modelau in vitro [17,22 ,23]. Felly, buom yn ymchwilio i effaith wenwynig plumbagin mewn celloedd ymledol, gan gynnwys keratinocytes normal (HaCaT) a chelloedd epithelial lens (B3), y gall colur gofal croen eu niweidio. Dangosodd ein canlyniadau nad yw crynodiadau is, tua 0.5–1 µM o blymen, yn wenwynig i keratinocytes arferol a chelloedd epithelial lens, ond eu bod yn ddigon effeithiol i leihau gweithgaredd tyrosinase a synthesis melanin. Yn ogystal, canfuom hefyd fod plumbagin yn atal melanogenesis yn fwy effeithiol nag 1 mM arbutin neu asid kojic 0.2 mM, sy'n gyfryngau gwynnu croen adnabyddus. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod plumbagin yn ddiogel i'w ddefnyddio fel elfen ar gyfer datblygu colur croen-gwynnu.

Yn yr astudiaeth bresennol, buom yn astudio effeithiau ataliol plumbagin ar yr adwaith ensym tyrosinase gan ddefnyddio profion gweithgaredd tyrosinase cellog a di-gell yn seiliedig ar ocsidiad L-DOPA. Serch hynny, ni wnaethom awgrymu mecanwaith moleciwlaidd manwl gywir o ran sut mae plymio yn atal gweithgaredd tyrosinase. Dylid ymchwilio ymhellach i'r mecanwaith hwn i benderfynu a yw plumbagin yn rhyngweithio'n uniongyrchol â tyrosinase ac yn atal ei weithgaredd ocsidas neu a oes ganddo effeithiau anuniongyrchol sy'n arwain at lai o weithgaredd tyrosinase.

4. Defnyddiau a Dulliau

4.1. Adweithyddion a Gwrthgyrff

Prynwyd Plumbagin, -MSH (M4135), arbutin (A4256), asid kojic (K3125), L-DOPA (333786), a tyrosinase (T3824) wedi'u puro o fadarch gan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, UDA). Gwrthgyrff yn erbyn MITF (#12590), p-AKTS473 (#4060), p-AKTT308 (#13038), p-CREB (#9198), p-ERK1/2 (#4370), ERK1/2 (#9102), Prynwyd H2AX (#9718), PARP (#5625), a caspase-3 (#9665) oddi wrth Cell Signaling Technology (Danvers, MA, UDA). Prynwyd Tyrosinase (sc-7833), a -tubulin (sc-9104) gan Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, UDA).

4.2. Assay Diwylliant Cell a Hyfywedd Cell

Cafodd celloedd B16F10 (celloedd melanoma llygoden), B3 (celloedd epithelial lens dynol), a HaCaT (keratinocyte dynol) eu meithrin yng nghyfrwng Eagle's (DMEM) wedi'i addasu ag Dulbecco, wedi'i ategu â serwm buchol ffetws o 10 y cant a 25 mM o glwcos. Deorwyd y celloedd mewn awyrgylch llaith o 95 y cant o aer a 5 y cant o CO2 ar 37 ◦C. Er mwyn mesur hyfywedd, deorwyd celloedd â chrynodiadau amrywiol o blymen wedi'i hydoddi mewn dimethyl sulfoxide (DMSO) am 48 neu 72 h. Ar ôl deori, golchwyd celloedd diwylliedig â PBS ac yna deorwyd hwy â hydoddiant staenio fioled grisial o 0.5 y cant am 20 munud ar dymheredd yr ystafell. I fesur dwysedd optegol, cafodd celloedd lliw eu deor â hydoddiant sodiwm dodecyl sylffad (SDS) 1 y cant am 15 munud ar dymheredd ystafell, ac yna mesurwyd dwysedd optegol pob ffynnon ar 570 nm (OD570) gan ddefnyddio darllenydd amsugnedd (BioTek, Winooski). , VT, UDA).

4.3. Imiwnoblotting

Defnyddiwyd celloedd diwylliedig gan ddefnyddio 1 y cant IGEPAL (octylphenoxypolyethoxyethanol), 150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH 7.9), 10 mM NaF, a choctel atalydd proteas mewn byffer lysis. Gwahanwyd samplau protein trwy electrofforesis gel sodiwm dodecyl sylffad-polyacrylamid (SDS-PAGE), ac yna trosglwyddwyd y proteinau gwahanedig i bilen difluorid polyvinylidene (PVDF) (Millipore, Billerica, MA, UDA). Cafodd pilenni eu deor dros nos gyda gwrthgyrff cynradd (1:1{{000) ar 4 ◦C, ac yna eu deor â gwrthgyrff eilaidd wedi'u cyfuno â HRP (1:10,000) am 1 awr ar dymheredd ystafell. Delweddwyd proteinau gan ddefnyddio pecyn ECL Prime (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, UDA).

cistanche nedir

4.4. Mesur Cynnwys Melanin Mewngellol ac Allgellog

Cafodd cynnwys melanin ei bennu a'i feintioli gan ddefnyddio dull a ddisgrifiwyd yn flaenorol gydag ychydig o addasiad [2,24]. Ar gyfer dadansoddi cynnwys melanin, cafodd celloedd B16F10 eu meithrin mewn DMEM di-goch ffenol yn cynnwys serwm buchol ffetws 10 y cant. Cafodd celloedd B16F10 eu meithrin â thriniaeth -MSH yn absenoldeb neu bresenoldeb plumbagin am 3 neu 4 diwrnod. Cynaeafwyd y celloedd neu'r cyfryngau diwylliedig a diddymwyd pelenni mewn 1N NaOH sy'n cynnwys 10 y cant DMSO ar 80 ◦C am 1 h. Mesurwyd y cynnwys melanin gan ddefnyddio darllenydd amsugnedd ar 475 nm (OD475), ac yna cafodd cynnwys melanin ei normaleiddio i'r crynodiad protein cellog.

4.5. RNA Ynysu a Meintiol RT-PCR

Tynnwyd cyfanswm RNA o gelloedd B16F10 gan ddefnyddio TRIzol (Invitrogen, Waltham, MA, UDA) a defnyddiwyd 2 µg o gyfanswm RNA ar gyfer synthesis cDNA trwy ddefnyddio pecyn trawsgrifio gwrthdro cDNA gallu uchel (Applied Biosystems, Waltham, MA, UDA). Perfformiwyd PCR meintiol gan ddefnyddio SYBR Green PCR Master Mix (Biosystemau Cymhwysol). Roedd dilyniannau'r preimwyr PCR (50 –30 ) fel a ganlyn: TCAAGTTTCCAGAGACGGGT a CATCATCAGCCTGGAATCAA ar gyfer MITF; ATAGGTGCATTGGCTTCTGG a TCTTCACCATGCTTTTTGGG ar gyfer TYR; CATTTCCAG CTGGGTTTCTC a TGGTCTGTGAATCCTTGGAA ar gyfer TYRP1.

4.6. Assay Gweithgaredd Tyrosinase Cellog

Penderfynwyd ar weithgaredd tyrosinase cellog gan ddefnyddio dull a ddisgrifiwyd yn flaenorol gydag addasiad [25,26]. Cafodd celloedd B16F10 diwylliedig eu deor â -MSH yn absenoldeb neu bresenoldeb plumbagin, ac yna cafodd celloedd eu golchi a'u gorchuddio â PBS yn cynnwys 1 y cant o sodiwm deoxycholate a 0.5 y cant Triton X{{8} }. Ar ôl pennu crynodiad y protein, deorwyd 50 µg o brotein â 2.0 mM L-DOPA a 0.1 M PBS (pH 6.8) am 1 h ar 37 ◦C. Mesurwyd ocsidiad L-DOPA ar 475 nm (OD475) gan ddefnyddio darllenydd amsugnedd. Mesurwyd y gweithgaredd gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol: actifedd tyrosinase ( y cant )=(OD475 o sampl/OD475 o reolaeth) × 100.

4.7. Assay Gweithgaredd Tyrosinase Di-gell

Er mwyn pennu effaith ataliol plumbagin ar weithgaredd tyrosinase, deorwyd tyrosinase madarch wedi'i buro am 2 awr gyda chymysgedd adwaith yn cynnwys 0.1 M PBS (pH 6.8) a 2 mM L-DOPA yn absenoldeb neu bresenoldeb plumbagin . Mesurwyd ocsidiad L-DOPA i dopacrom ar 475 nm (OD475) gyda darllenydd amsugnedd. Mesurwyd y gweithgaredd gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol: actifedd tyrosinase ( y cant )=(OD475 o sampl/OD475 o reolaeth) × 100.

4.8. Assay Gweithgaredd Sialens Radical DPPH

Er mwyn canfod gweithgaredd sborionu radical plumbagin, paratowyd a defnyddiwyd hydoddiant DPPH {{{0}.2 mM DPPH mewn methanol. Gwanhawyd pob sampl â dŵr distyll i grynodiadau terfynol o 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, a 5 mg/mL (plumbagin), neu { {13}}.005, 0.01, 0.05, 0.1, 0.2, a 0.5 mg/mL (fitamin C). Ar ôl yr adwaith, mesurwyd dwysedd optegol (OD) ar 517 nm (OD517) gan ddefnyddio darllenydd amsugnedd. Cyfrifwyd gweithgaredd sborionu radical rhad ac am ddim gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol: Gweithgaredd sborionu radical DPPH ( y cant )=10 − ((ODs/ODc) × 100), lle mae ODs yn cynrychioli amsugnedd y samplau, ac ODc yn cynrychioli amsugnedd y samplau. rheoli cerbydau.

4.9. Dadansoddiad Ystadegol

Dadansoddwyd yr holl ddata gan ddefnyddio prawf-t Myfyriwr heb ei baru ar gyfer dwy gymhariaeth arbrofol a dadansoddiad un ffordd o amrywiant (ANOVA) â phrawf post hoc Tukey ar gyfer cymariaethau lluosog gan ddefnyddio Prism (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, UDA). Cyflwynir data fel cymedrig ± gwyriad safonol (SD). Ystyriwyd bod gwahaniaethau rhwng gwerthoedd cymedrig yn ystadegol arwyddocaol pan oedd y gwerth-p cysylltiedig yn llai na 0.05.

5. Casgliadau

Prif ganfyddiadau'r astudiaeth hon yw bod plumbagin (i) yn atal synthesis melanin a achosir gan -MSH trwy atal gweithgaredd tyrosinase; (ii) nad yw'n effeithio ar y peiriannau trawsgrifio sy'n gysylltiedig â MITF a'r rhaeadrau trawsgludo signal gan gynnwys actifadu AKT ac ERK1/2 sy'n gysylltiedig â melanogenesis; a (iii) nad yw'n achosi gwenwyndra mewn keratinocytes normal (HaCaT) a chelloedd epithelial lens (B3) pan oedd ei grynodiad yn llai na 5 µM. Gyda'i gilydd, mae plumbagin yn diddymu synthesis melanin a achosir gan MSH trwy atal gweithgaredd tyrosinase yn annibynnol ar echel trawsgrifiadol CREB-MITF. Mae'r canlyniadau hyn, felly, yn awgrymu plymio cynnyrch naturiol addawol a diogel ar gyfer lleihau hyperpigmentation trwy ei ddefnyddio wrth ddatblygu colur croen-gwynnu.

cistanche norge

Diolchiadau:Cefnogwyd y gwaith hwn gan Brifysgol Konkuk yn 2016.

Cyfraniadau Awdur:Ji-Hong Lim luniodd a dyluniodd yr arbrofion; Perfformiodd Taek-In Oh, Jeong-Mi Yun, Eun-Ji Park, a Young-Seon Kim yr arbrofion; Dadansoddodd Ji-Hong Lim, Taek-In Oh, a Yoon-Mi Lee y data; Ysgrifennodd Ji-Hong Lim ac Yoon-Mi Lee y llawysgrif.

Gwrthdaro Buddiannau: Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

Byrfoddau

-MSH hormon ysgogol alffa-melanocyte

TYR tyrosinase

L-DOPA L-3,4-dihydroxyphenylalanine

Ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â microphthalmia MITF

TYRP1 protein sy'n gysylltiedig â tyrosinase 1

Elfen ymateb cAMP CREB protein rhwymo

PKA protein kinase A

ERK1/2 kinase allgellog a reoleiddir gan signal 1/2

Cyfeiriadau

1. Riley, PA Melanogenesis a melanoma. Cell Pigment Res. 2003, 16, 548–552. [CrossRef] [PubMed]

2. Bae, JS; Han, M.; Yao, C.; Mae Chung, JH Chaetocin yn atal melanogenesis a achosir gan IBMX mewn celloedd melanoma llygoden B16F10 trwy actifadu ERK. Cemeg. Biol. Rhyngweithio. 2016, 245, 66–71. [CrossRef] [PubMed]

3. D'Mello, SA; Finlay, GJ; Baguley, C.C.; Askarian-Amiri, ME Llwybrau signalau mewn melanogenesis. Int. J. Mol. Sci. 2016. [CrossRef] [PubMed]

4. Kim, HJ; Yonezawa, T.; Teruya, T. ; Woo, JT; Cha, BY Nobiletin, flflavonoid poly ethoxy, endothelin gostyngol-1 ynghyd â phigmentiad a achosir gan SCF mewn melanocytau dynol. Ffotochem. Ffotobiol. 2015, 91, 379–386. [CrossRef] [PubMed]

5. Kang, SJ; Choi, BR; Lee, EK; Kim, SH; Yi, HY; Parc, AD; Cân, CH; Lee, YJ; Ku, SK Effaith ataliol powdr crynodiad pomegranad sych ar melanogenesis mewn celloedd melanoma B16F10; cynnwys llwybrau signalau t38 a PKA. Int. J. Mol. Sci. 2015, 16, 24219–24242. [CrossRef] [PubMed]

6. Kim, JW; Kim, HI; Kim, JH; Kwon, OC; Mab, ES; Lee, CS; Parc, YJ Effeithiau ganodermanondiol, atalydd melanogenesis newydd o'r madarch meddyginiaethol Ganoderma lucidum. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 1798. [CrossRef] [PubMed]

7. Tsao, YT; Huang, YF; Kuo, CY; Lin, YC; Chiang, toiled; Wang, WK; Hsu, CW; Mae Lee, CH Hinokitiol yn atal melanogenesis trwy signalau AKT/mTOR mewn celloedd melanoma llygoden B16F10. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 248. [CrossRef] [PubMed]

8. Padhye, S. ; Dandawate, P.; Yusufifi, M.; Ahmad, A.; Sarkar, FH Safbwyntiau ar briodweddau meddyginiaethol plumbagin a'i analogau. Med. Res. Parch 2012, 32, 1131–1158. [CrossRef] [PubMed]

9. Gupta, SC; Kim, JH; Prasad, S.; Aggarwal, BB Rheoleiddio goroesiad, ymlediad, goresgyniad, angiogenesis, a metastasis celloedd tiwmor trwy fodiwleiddio llwybrau llidiol gan nutraceuticals. Metastasis Canser Parch. 2010, 29, 405–434. [CrossRef] [PubMed]

10. Jackson, JK; Higo, T.; Hunter, WL; Burt, atalyddion Topoisomerase HM fel cyfryngau gwrth-arthritig. Inflflamm. Res. 2008, 57, 126–134. [CrossRef] [PubMed]

11. Ahmad, A. ; Banerjee, A.S.; Wang, Z.; Kong, D.; Mae Sarkar, FH apoptosis a achosir gan Plumbagin o gelloedd canser y fron dynol yn cael ei gyfryngu gan anactifadu NF-κB a Bcl-2. J. Cell. Biocemeg. 2008, 105, 1461–1471. [CrossRef] [PubMed]

12. Aziz, MH; Dreckschmidt, NE; Mae Verma, AK Plumbagin, naphthoquinone meddyginiaethol sy'n deillio o blanhigyn, yn atalydd newydd o dwf ac ymlediad canser y prostad anhydrin hormonau. Canser Res. 2008, 68, 9024–9032. [CrossRef] [PubMed]

13. Thasni, KA; Rakesh, S.; Rojini, G.; Ratheeshkumar, T.; Srinivas, G. ; Priya, S. Roedd signalau celloedd sy'n ddibynnol ar estrogen ac apoptosis yn BRCA1-wedi rhwystro celloedd canser ofarïaidd BG1 mewn ymateb i blymen ac asiantau cemotherapiwtig eraill. Ann. Oncol. 2008, 19, 696–705. [CrossRef] [PubMed]

14. Gomatinayagam, R. ; Sowmyalakshmi, S.; Mardhatillah, F.; Kumar, R.; Akbarsha, MA; Damodaran, C. mecanwaith gwrthganser o plumbagin, cyfansoddyn naturiol, ar gelloedd canser yr ysgyfaint nad ydynt yn fach. Gwrthganser Res. 2008, 28, 785–792. [PubMed]

15. Wang, CC; Chiang, YM; Canwyd, SC; Hsu, YL; Chang, JK; Mae Kuo, PL Plumbagin yn ysgogi arestiad cylchred celloedd ac apoptosis trwy rywogaethau ocsigen adweithiol / llwybrau kinase terfynell N-Mehefin mewn celloedd melanoma dynol A375.S2. Cancr Lett. 2008, 259, 82–98. [CrossRef] [PubMed]

16. Shih, YW; Lee, YC; Wu, PF; Lee, YB; Mae Chiang, TA Plumbagin yn atal ymlediad a mudo celloedd canser yr afu HepG2 trwy leihau cynhyrchiant matrics metalloproteinase-2 ac actifadu urokinase-plasminogen. Hepatol. Res. 2009, 39, 998–1009. [CrossRef] [PubMed]

17. Anuf, AR; Ramachandran, R.; Krishnasamy, R.; Gandhi, PS; Periyasamy, S. Effeithiau gwrth-ymledol Plumbago rosea a'i blymenyn cyfansoddol wedi'i buro ar linellau celloedd melanoma SK-MEL 28. Ffarmacon. Res. 2014, 6, 312–319.

18. Gowda, R. ; Sharma, A. ; Robertson, Meddyg Teulu Effeithiau ataliol synergaidd celecoxib a plumbagin ar dwf tiwmor melanoma. Cancr Lett. 2017, 385, 243–250. [CrossRef] [PubMed]

19. Li, J. ; Shen, Q. ; Peng, R. ; Chen, R.; Jiang, P.; Li, Y. ; Zhang, L.; Mae Lu, J. Plumbagin yn gwella apoptosis cyfrwng TRAIL trwy uwch-reoleiddio derbynnydd marwolaeth mewn celloedd melanoma A375 dynol. J. Prifysgol Huazhong. Sci. Technol. Med. Sci. 2010, 30, 458–463. [CrossRef] [PubMed]

20. Nair, S.; Nair, RR; Srinivas, P.; Srinivas, G. ; Pillai, MR Mae effeithiau radiosensiteiddio plymen mewn celloedd canser ceg y groth trwy fodiwleiddio'r llwybr apoptotig. Mol. Carcinog. 2008, 47, 22–33. [CrossRef] [PubMed]

21. Prasad, VS; Devi, Uned Bolisi; Rao, BS; Kamath, R. Effaith radiosensiteiddio plwm ar gelloedd melanoma llygod a dyfir in vitro. Indiaidd J. Exp. Biol. 1996, 34, 857–858. [PubMed]

22. Li, YC; Ef, SM; Ef, ZX; Li, M. ; Yang, Y.; Pang, JX; Zhang, X. ; Chow, K. ; Zhou, Q. ; Duan, W. ; et al. Mae Plumbagin yn achosi marwolaeth celloedd apoptotig ac awtophagig trwy atal y llwybr PI3K/Akt/mTOR mewn celloedd canser yr ysgyfaint dynol nad ydynt yn rhai bach. Cancr Lett. 2014, 344, 239–259. [CrossRef] [PubMed]

23. Gwiriwr, R. ; Sharma, D.; Sandur, SK; Khanam, A.S.; Poduval, TB Mae effeithiau gwrthlidiol plymen yn cael eu cyfryngu gan ataliad actifadu NF-κB mewn lymffocytau. Int. Imiwnoffarmacol. 2009, 9, 949–958. [CrossRef] [PubMed]

24. Kim, B.; Lee, SH; Choi, KY; Mae Kim, HS N-Nicotinoyl tyramine, deilliad niacinamide newydd, yn atal melanogenesis trwy atal mynegiant genynnau MITF. Eur. J. Ffarmacol. 2015, 764, 1–8. [CrossRef] [PubMed]

25. Lee, HY; Jang, EJ; Bae, SY; Jeon, JE; Parc, HJ; Shin, J. ; Lee, SK Gweithgaredd gwrth-melanogenig Gauguin D, diterpenoid hynod ocsigenedig o'r sbwng morol Phorbas sp., trwy fodiwleiddio mynegiant tyrosinase a diraddiad. Cyffuriau Mawrth 2016, 14, 212. [CrossRef] [PubMed]

26. Winder, AJ; Harris, H. Profion newydd ar gyfer gweithgareddau tyrosine hydroxylase a DOPA oxidase tyrosinase. Eur. J. Biochem. 1991, 198, 317–326. [CrossRef] [PubMed]

Am ragor o wybodaeth: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Serumbone, Sesquiterpene Sinsir Trofannol O Zingiber Officinale Roscoe, Yn Gwanhau - Melanogenesis a Achosir gan MSH mewn Celloedd B16F10 Rhan 2

Serumbone, Sesquiterpene Sinsir Trofannol O Zingiber Officinale Roscoe, Yn Gwanhau - Melanogenesis a Achosir gan MSH mewn Celloedd B16F10 Rhan 1