Penderfynu'n Gyflym ar Chwe Chydran Effeithiol mewn Cistanche Tubulosa Ger Sbectrosgopeg Isgoch Bron

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Xinhong Wang, Xiaoguang Wang a Yuhai Guo

Crynodeb:

Mae penderfynu meintiol ar gydrannau effeithiol lluosog mewn planhigyn penodol fel arfer yn gofyn am lawer iawn o gynhyrchion naturiol dilys. Yn yr astudiaeth hon, rydym yn cynnig dull cyflym ac annistrywiol ar gyfer pennu ar yr un pryd echinacoside, verbascoside, mannitol, swcros, glwcos, a ffrwctos mewnCistanche tubulosatrwy sbectrosgopeg bron isgoch (NIRS). Cynhaliwyd sbectrosgopeg adlewyrchiad gwasgaredig bron-isgoch (DRS) a chromatograffaeth hylif perfformiad uchel (HPLC) ar 116 swp o samplau Cistanche tubulosa. Proseswyd y data DRS gan ddefnyddio amrywiaeth arferol safonol (SNV) a dulliau cywiro gwasgariad lluosog (MSC). Defnyddiwyd atchweliad rhannol sgwariau lleiaf (PLSR) i adeiladu modelau graddnodi ar gyfer cydrannau o ddiddordeb yn Cistanche tubulosa. Yna aseswyd pob model trwy gyfrifo'r gwall sgwâr cymedrig gwraidd graddnodi (RMSEC), y cyfernod cydberthynas graddnodi (r). Penderfynwyd bod gwerthoedd r pob un o'r chwe model graddnodi yn fwy na 0.94, sy'n awgrymu bod pob model yn ddibynadwy. Felly, gellir cymhwyso'r modelau NIR meintiol a adroddwyd yn yr astudiaeth hon i feintioli cynnwys chwe chydran feddyginiaethol yn gywir mewnCistanche tubulosa.

Geiriau allweddol: Cistanche tubulosa; cromatograffaeth hylif perfformiad uchel; sbectrosgopeg isgoch bron; sgwariau lleiaf rhannol

Rhagymadrodd

Cistanche(Hoffmg. Et Link) yn genws phanerogamic lluosflwydd o'r teulu Orobanchaceae o blanhigion. Mae'r rhan fwyaf o rywogaethau sy'n perthyn i'r genws Cistanche wedi cael eu defnyddio fel planhigyn meddyginiaethol ers milenia yn Tsieina; bod ag enw da fel tonydd uwchraddol; ac fe'u gelwir yn "Ginseng yr Anialwch" [1,2].Cistanche tubulosayn barasit gorfodol o wreiddiau'r planhigyn lluosflwydd Tamarix Chinensis. Mae wedi'i ddogfennu yn y Pharmacopoeia Tsieineaidd fel ffynhonnell ddilys Cistanches Herba (enw Tsieineaidd: Roucongrong) o rifyn 2005 [3] . Cychwynnwyd ymchwil ffarmacolegol modern ar rywogaethau Cistanche yn yr 1980au [4]. Dangosodd ymchwiliadau ffarmacolegol fod gan echdynion planhigion Cistanche sbectrwm eang o weithgareddau, megis gwella diffyg arennau a rhwymedd henaint, hyrwyddo'r gallu i ddysgu a chofio, clefyd gwrth-Alzheimer, gwella imiwnedd, gwrth-heneiddio, gwrth-blinder, ac ati. [1,5–7]. Yn ystod y tri degawd diwethaf, mae astudiaethau ffarmacolegol cynhwysfawr a systematig wedi'u cyfuno ag ymchwiliadau ffytocemegol i oleuo sail faterol effeithiau buddiol gwreiddiau planhigion Cistanche. Mae'r arolygon hyn yn dangos mai glycosidau ffenylethanoid (PhGs) oedd y prif gydrannau effeithiol mewn planhigion Cistanche gan chwarae rolau allweddol ar gyfer trin diffyg arennau, analluedd [8], gwrth-heneiddio [9], a chlefyd gwrth-Alzheimer [10]. Roedd angen cynnwys dau PhG (echinacoside a verbascoside) yn Pharmacopoeia Tsieineaidd. Yn y cyfamser, mae carbohydradau fel mannitol, swcros, glwcos a ffrwctos mewn planhigion Cistanche yn berchen ar y swyddogaeth garthydd ac mae clystyrau carbohydradau o blanhigion Cistanche wedi'u defnyddio ar gyfer trin rhwymedd [11].

Adnoddau gwyllt oCistanche tubulosayn cael eu dosbarthu'n bennaf yn yr ardal o amgylch Anialwch Taklamakan yn Rhanbarth Ymreolaethol deheuol Xinjiang yn Tsieina. Yn debyg i lawer o rywogaethau eraill a ddefnyddir fel meddyginiaethau Tsieineaidd traddodiadol (TCMs), mae C. tubulosa o werth economaidd mawr a bron wedi diflannu yn ei gynefin gwyllt oherwydd gor-gasglu. Dechreuodd tyfu C. tubulosa yn y 1990au yn Tsieina i sicrhau cyflenwad o ddeunyddiau crai ar gyfer Cistanches Herba yn ogystal â diogelu adnoddau planhigion gwyllt. O 2017 ymlaen, mae bron i 13 mil ha o C. tubulosa wedi'i drin yn bodoli yn Hotan Prefecture yn Xinjiang [12,13]. Mae galw am ddatblygiadau mewn technoleg plannu er mwyn ehangu'r amaethu yn ogystal â gwella ansawddCistanche tubulosa.

Prif bwrpas meithrinCistanche tubulosayw cynhyrchu Cistanches Herba, gan fod yn gyfoethog yn y cydrannau effeithiol hynny. Fodd bynnag, gall llawer o ffactorau effeithio'n sylweddol ar gynnwys y cydrannau effeithiol yn Cistanches Herba, megis PhGs ac oligosacaridau, yn ystod y cynhyrchiad [12,13]. Dylid archwilio system ganfod amser real o ansawdd C. tubulosa. Felly, mae angen datblygu dull trwybwn uchel i lenwi'r gofyniad o ddadansoddi nifer fawr o samplau o fewn cyfnod byr o amser yn llawn. Yn draddodiadol, roedd penderfyniad y cydrannau effeithiol sylfaenol hynny, megis PhGs a charbohydradau, yn C. tubulosa fel arfer yn cael ei gyflawni gan ddefnyddio cromatograffaeth hylif perfformiad uchel (HPLC) [14,15]. Er ei fod yn gywir ac yn ddibynadwy, mae'n cymryd llawer o amser ac yn llafurus ar gyfer casglu a phrosesu data. Yn ogystal, mae angen llawer iawn o amser ac ymdrech hefyd ar gyfer paratoi sampl sydd fel arfer yn cynnwys malurio, echdynnu a hidlo profion HPLC. Felly, mae angen egwyddor glir ac offeryn hawdd ei weithredu i gael swm cymharol fawr o ddata. Yn ffodus, defnyddiwyd sbectrosgopeg bron-is-goch (NIRS) yn helaeth i asesu cynhyrchion amaethyddol [16], bwyd [17], samplau meddygol [18], a chynhyrchion fferyllol [19] oherwydd ei fod yn gyflym yn ogystal ag yn annistrywiol. Felly, gallai NIRS gydweddu'n union â'r gofynion ar gyfer mesuriadau effeithlon o TCMs, ac nid yw'n syndod bod NIRS wedi'i gymhwyso ar gyfer adnabod ansoddol [20,21] a meintioli cyfansoddion [22] mewn TCMs.

Yn yr astudiaeth hon, pennwyd cynnwys chwe chydran effeithiol, gan gynnwys echinacoside, verbascoside, mannitol, swcros, glwcos, a ffrwctos mewn 116 sypiau o samplau C. tubulosa a gasglwyd o Hotan Prefecture yn Xinjiang ymhlith 2013-2015 yn gyntaf gan HPLC. Wedi hynny, sefydlwyd modelau graddnodi'r chwe chydran hyn gyda'r dull atchweliad rhannol sgwariau lleiaf (PLSR). Yna cafodd y modelau hyn eu dilysu gyda'r cyfernod cydberthynas a gwallau rhagfynegi yn y setiau graddnodi. Dangosodd y canlyniadau y gellid defnyddio'r dull datblygedig fel dull dibynadwy ar gyfer dadansoddiad meintiol o C. tubulosa.

Canlyniad

Dadansoddiad HPLC

Penderfynwyd ar gynnwys echinacoside a verbascoside gan ddull HPLC-UV wedi'i ddiffinio'n dda yn y llenyddiaeth [3,23] a phennwyd pedwar carbohydradau (manitol, swcros, glwcos, a ffrwctos) gan ddull HPLC-ELSD wedi'i ddiffinio'n dda yn y llenyddiaeth [24] ar gyfer pob un o'r 116 sampl. Disgrifiwyd dulliau paratoi samplau a phenderfynu yn Adrannau 3.1 a 3.3. Mae Ffigur 1 yn dangos cromatogramau nodweddiadol y safonau cymysg. Gellir gweld bod y chwe chydran effeithiol wedi'u gwahanu fel gwaelodlin ac felly gellid eu meintioli. Dilyswyd y dull HPLC cyn y prawf sampl. Rhestrir prif ganlyniadau'r dull HPLC yn Nhabl 1. Dangosir perthynas llinol ffafriol (r=0.9998) ac adferiad (98.5 y cant) o'r dull penderfynu echinacoside yn y canlyniadau, yr un canlyniad â'r holl pum cydran. Felly, gellir pennu cynnwys y chwe chydran effeithiol yn gywir. Mae’r holl ystodau cynnwys a bennwyd wedi’u crynhoi yn Nhabl 1.

Dadansoddiad NIRS

Mae Ffigur 2 yn dangos sbectra NIR (4000–10,000 cm−1 ) y samplau C. tubulosa. Ymddangosodd brigau amsugno sylweddol o 4000 cm−1 i 7500 cm−1 ym mhob sampl, tra bod amrywiadau ysgafn yn ymddangos o 7500 cm−1 i 10,000 cm−1. Digwyddodd drifft gwaelodlin y sbectra NIR oherwydd bod ffactorau megis maint a lliw gronynnau yn effeithio'n hawdd ar y sampl (Ffigur 2A). Defnyddiwyd rhag-driniaethau mathemategol o'r sbectra i leihau dylanwad gwybodaeth ddiangen i ryw raddau. Roedd y rhag-driniaethau mathemategol yn cynnwys tarddiad cyntaf (deilliad 1af), ail ddeilliad (2il ddeilliad), amrywiaeth arferol safonol (SNV) a chywiro gwasgariad lluosog (MSC). Mae Ffigur 2B yn dangos 2il ddeilliad sbectra NIR C. tubulosa, a gwelir yn amlwg yr amrywiadau sylweddol a ddigwyddodd o dri rhanbarth, 4000–4500 cm−1, 5000–5500 cm−1, a 7000–7500 cm−1. .

Sefydlu Modelau Graddnodi Meintiol

Mae atchweliad rhannol sgwariau lleiaf (PLSR) yn ddull modelu clasurol ac mae wedi'i gymhwyso'n eang mewn modelau meintiol oherwydd ansawdd uchel y canlyniadau. Mae manteision PLSR yn cynnwys ei allu rhagweld da a symlrwydd cymharol. Mae PLSR hefyd wedi'i gymhwyso'n eang wrth sefydlu modelau graddnodi meintiol o TCMs [25]. Yn seiliedig ar y sbectra NIR wedi'i drin ymlaen llaw, a model dadansoddi meintiol NIR ar gyfer y chwe chydran effeithiol yn C. tubulosa ei sefydlu gan ddefnyddio'r dull PLSR gyda data dadansoddi HPLC fel y gwir werthoedd. Rhannwyd y 116 sampl ar hap yn setiau calibradu a dilysu gyda chymhareb 3:1. Dewiswyd yr amodau mwyaf addas ar gyfer y graddnodi gan RMSEC isel a chyfernod cydberthynas uchel.

Dewis y Band Tonnau ar gyfer y Modelau Calibro

Roedd dewis band tonnau addas yn gam pwysig ar gyfer adeiladu modelau graddnodi. Yn yr astudiaeth hon, cymharwyd sbectra cyfwng NIR o 4000–7500 cm-1 (a argymhellir gan feddalwedd dadansoddwr TQ) a 4000–10,000 cm-1. Gwelwyd bod yr amrediad hwn yn anaddas ar gyfer y graddnodi ar y cyfwng rhwng 4000 cm-1 a 7500 cm-1 o Dabl 2. Felly, yn yr astudiaeth gyfredol, y cyfyngau sbectrol ar gyfer y chwe cyfansoddyn cemegol oedd dewiswyd pob un o'r cyfwng o 4000 i 10,000 cm-1 trwy gymharu perfformiadau RMSEC a chyfernod cydberthynas.

Dewis y Nifer Gorau o Ffactorau ar gyfer y Modelau Calibro

Mae'r PLSR yn esbonio uchafswm yr amrywioldeb yn y data trwy leihau dimensiwn y data sbectra trwy gyfrifo ffactorau. Ymddangosodd y broblem "tanffitrwydd" oherwydd gwybodaeth annigonol a ddeilliodd o nifer cyfyngedig o ffactorau; fodd bynnag, bydd dewis y ffactorau sy'n fwy na'r gwerthoedd optimwm a gyflwynwyd yn y model yn achosi'r broblem "gorffitrwydd". Bydd naill ai "tanffitrwydd" neu "orffittedness" yn lleihau pŵer rhagfynegol y modelau sefydledig [22]. Mae Ffigur 3 yn dangos y berthynas rhwng RMSECV a ffactorau ar gyfer pob un o'r chwe chyfansoddyn. Felly, dewiswyd y ffactorau hynny sy'n cyfateb i werthoedd isaf RMECV. Rhestrir y detholiad gorau o ffactorau ar gyfer y modelau graddnodi yn Nhabl 3.

Detholiad o Ragdriniaeth Sbectrol ar gyfer y Modelau Calibro

Ffactor dylanwadol mwyaf hanfodol arall ar gyfer modelau graddnodi yw rhag-driniaeth sbectrol sydd â'r nod o leihau dylanwad gwasgariad a drifft gwaelodlin, gwella cymarebau signal-i-sŵn, a chael gwared ar amrywiadau afreolaidd. Defnyddiwyd dulliau cywiro gwasgariad lluosog (MSC) a dulliau amrywiad arferol safonol (SNV) i ddileu dylanwad gwasgariad ymbelydredd arferol. Er mwyn datrys effeithiau drifft gwaelodlin, cymharwyd sbectra deilliadol 1af ac 2il a dewiswyd yr 2il ddeilliad [26]. Ar gyfer yr effaith ddymunol, gwnaethom lyfnhau'r sbectra ag algorithm hidlo Savitzky-Golay (SG) cyn tarddiad i atal chwyddo sŵn. Mae Tabl 3 yn dangos y wybodaeth am ragdriniaeth sbectrol a'i ganlyniadau ar gyfer y modelau graddnodi.

Gwerthusiad o'r Modelau Sefydledig

Dylai fod gan fodel graddnodi NIRS da werthoedd RMSEC a RMSEP isel, yn ogystal â chyfernod cydberthynas uchel (r) a gwahaniaethau bach rhwng RMSEC ac RMSEP [27-29]. Sefydlwyd modelau graddnodi'r chwe chyfansoddyn a ddewiswyd yn unol â'r gweithdrefnau a grybwyllwyd uchod (Tabl 3). Gwerthoedd RMSEC ac r ar gyfer y set graddnodi o echinacoside oedd 27.6 a 0.9808, yn y drefn honno. Rhestrir paramedrau perfformiad modelau cyfansawdd cemegol eraill yn Nhabl 3, a gallwn ddod i'r casgliad bod y modelau sefydledig yn dod i'r amlwg canlyniadau rhagfynegiad boddhaol, a gellir eu defnyddio ar gyfer dadansoddiad meintiol cyflym o C. tubulosa. Dangosir lleiniau gwasgariad o'r chwe chyfansoddyn cemegol yn Ffigur 4 i wneud y modelau graddnodi yn fwy disgrifiadol ac a arsylwyd yn weledol. Fel y dangosir yn Ffigur 4, digwyddodd mân wahaniaethau rhwng y gwerthoedd rhagfynegol a mesuredig, oherwydd bod y rhan fwyaf o ddotiau wedi'u dosbarthu o amgylch y gromlin atchweliadol gyda hafaliad fel y=x. Felly, gwelwyd perfformiadau rhagfynegol rhagorol yn Ffigur 4.

Defnyddiau a Dulliau

Paratoi Sampl

Casglwyd cant un ar bymtheg o samplau C. tubulosa o Hotan Prefecture yn rhanbarth ymreolaethol Xinjiang o 2013 i 2015. Cafodd yr holl samplau eu meithrin, ond fe'u casglwyd ar wahanol gamau twf. Roedd pwysau ffres y samplau yn amrywio o 20 g i 1000 g. Ar ôl sychu yn yr haul, cafodd y samplau sych eu malu a'u hidlo trwy ridyll rhwyll 60- [3,23].

Casglu Data Sbectrosgopig NIR

Casglwyd sbectra NIR y samplau ar gyfwng 8 cm-1 dros y rhanbarth sbectrol o 4000–10,000 cm-1 gyda System Antaris MXFT-NIR (Thermo Scientific, Madison, WI, UDA) yn meddu ar addasydd adlewyrchiad ffibr optegol llaw. Cafwyd pob sbectrwm trwy gyfartaledd o 64 sgan. Caniatawyd i bob sampl gydraddoli i dymheredd ystafell (25. C) cyn sganio sbectra NIR i sicrhau bod y samplau'n cael eu dadansoddi ar yr un tymheredd. Cadwyd y lleithder yn y labordy ar lefel amgylchynol.

Casglu Data HPLC

Paratoi Echdynnu

Echdynnwyd un gram o bowdr C. tubulosa gyda 50 mL o 50 y cant methanol mewn fflasg gonigol gyda ultra-sonigation (500 W, 40 kHz) am 30 munud. Storiwyd y darn ar 4 ◦C. Cafodd uwchnatur y dyfyniad ei hidlo i gael sampl ar gyfer dadansoddiad HPLC [3,23].

Penderfyniad ar yr un pryd o Echinacoside a Verbascoside gyda HPLC-UV

Cynhaliwyd dadansoddiad cromatograffig hylifol ar system Shimadzu UHPLC (Shimadzu, Kyoto, Japan) yn cynnwys dwy uned danfon toddyddion LC{{0}ADXR, pwmp AD LC-20, samplwr SIL-20ACXRauto , popty colofn CTO-20AC, synhwyrydd DAD SPD-M20A, degasser DGU-20A3R, a rheolydd ICBM-20A.

Cadwyd colofn ES Carbohydrad Grace Prevail (150 × 2.1 mm, 2.7 mm) a ddefnyddiwyd ar gyfer y gwahaniadau cromatograffig ar 35 ◦C. Roedd y cyfnod symudol yn cynnwys acetonitrile (A) a 0.1 y cant o asid ffurfig dyfrllyd (B) ac fe'i cyflwynwyd yn dilyn y rhaglen graddiant fel a ganlyn: 0–7 mun, graddiant llinol o 10–20 cant A; 7–15 mun, 20 y cant A; a 15-20 mun, graddiant llinol o 20-10 y cant A. Cyd-gyfradd y cyfnod symudol oedd 0.4 mL/munud. Perfformiwyd monitro UV ar 330 nm.

Penderfynu Manitol, Swcros, Glwcos a Ffrwctos ar yr un pryd â HPLC-ELSD

Perfformiwyd HPLC ar system LC cyfres Agilent 1100 (Palo Alto, CA, UDA) sy'n cynnwys degasser aG1322A, pwmp cwaternaidd G1311A, autosampler G1311A, rheolydd tymheredd colofn G1316A, a synhwyrydd DADD G1315B.

Defnyddiwyd colofn ES Carbohydrad Sigma Prevail (4.6 × 250 mm, 5 µm) ar gyfer gwahaniadau cromatograffig a'i chynnal ar dymheredd colofn o 25 ◦C. Roedd y cyfnod symudol yn cynnwys asetonitrile a dŵr (77:23, v/v) a chynghreiriad isocrataidd yn cael ei gyflenwi ar gyfradd arall o 0.7 mL/munud. Cafodd yr elifiant ei fonitro gan ddefnyddio synhwyrydd gwasgaru golau anweddol (ELSD) gyda pharamedrau rhagosodedig [23,24].

Prosesu Data

Defnyddiwyd TQ Analyst (fersiwn 8.0, Thermo Scientific, Madison, WI, USA) i rannu'r setiau graddnodi a dilysu, rhag-drin y sbectra yn fathemategol, sefydlu'r modelau graddnodi, a chyfrifiannau eraill. Defnyddiwyd tarddiad (fersiwn 9.1) i wneud y ffigurau.

Casgliadau

Diolchiadau: Cefnogwyd y gwaith hwn gan Brosiect Cynllunio Gwyddoniaeth a Thechnoleg Cenedlaethol Tsieina(2015BAD29B00-04).

Cyfraniadau Awdur: Xinhong Wang luniodd a dyluniodd yr arbrofion. Perfformiodd Xinhong Wang a Xiaoguang Wang yr arbrofion. Ysgrifennodd Xinhong Wang a Yuhai Guo y papur.

Gwrthdaro Buddiannau: Mae’r awduron yn datgan nad oes unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfeiriadau

1. Jiang, Y.; Tu, PF Dadansoddiad o gyfansoddion cemegol mewn rhywogaethau cistanche. J. Chromatogr. 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]

2. Xu, R. ; Chen, J.; Chen, S.-L.; Liu, T.-N.; Zhu, W.-C.; Xu, J. Cistanche deserticola Ma drin fel cnwd newydd yn Tsieina. Genet. Adnodd. Evol Cnwd. 2008, 56, 137–142. [CrossRef]

3. Golygu Pwyllgor Pharmacopoeia Tsieineaidd. Pharmacopoeia Tsieineaidd, arg 2005; Wasg Diwydiannol Cemegol: Beijing, Tsieina, 2005; Cyfrol 1, t. 90.

4. Kobayashi, H.; Komatsu, J. Cyfansoddwyr cistanchE herba (1). Yakugaku Zasshi 1983, 103, 508–511. [CrossRef] [PubMed]

5. Cân, ZH; Lei, L. ; Tu, PF Datblygiadau mewn ymchwil i weithgaredd ffarmacolegol mewn planhigion llethu cistanche. Dolen et. Gên. Traddodiad. Perlysieuyn. Cyffuriau 2003, 34, 473–476.

6. Xiong, Q. ; Kadota, A.S.; Tani, T.; Namba, T. Effeithiau gwrthocsidiol ffenylethanoidau o Cistanche deserticola. Biol. Pharm. Tarw. 1996, 19, 1580–1585. [CrossRef] [PubMed]

7. Xuan, GD; Liu, CQ Ymchwil ar effaith glycosidau ffenylethanoid (PEG) y Cistanche deserticola ar wrth-heneiddio mewn llygod oedrannus a achosir gan D-galactose. J. Chin. Med. Mater. 2008, 31, 1385–1388.

8. Sato, T. ; Kozima, S.; Kobayashi, K.; Kobayashi, H. Astudiaethau ffarmacolegol ar Cistanchis Herba. I. Effeithiau cyfansoddion Cistanchis Herba ar ryw ac ymddygiad dysgu mewn llygod dan straen cronig. Yakugaku Zasshi 1986, 105, 1131–1144. [CrossRef]

9. Shen, CY; Jiang, JG; Yang, L.; Wang, DW; Zhu, W. Cynhwysion gweithredol gwrth-heneiddio o berlysiau a nutraceuticals a ddefnyddir mewn meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol: mecanweithiau ffarmacolegol a goblygiadau ar gyfer darganfod cyffuriau. Br. J. Ffarmacol. 2016, 11, 1395–1425. [CrossRef] [PubMed]

10. Li, N.; Wang, J.; Ma, J. ; Gu, Z. ; Jiang, C.; Yu, L. ; Fu, X. Effeithiau Neuroprotective Therapi Herba Cistanches ar Gleifion â Chlefyd Alzheimer Cymedrol. Evid. Ategiad Seiliedig. Altern. Med. 2015, 2015. [CrossRef] [PubMed]

11. Gao, JY; Jiang, Y.; Dai, F.; Han, ZL; Liu, HY; Bao, Z. ; Zhang, TM; Tu, PF Astudiaeth ar Gyfansoddion carthydd yn Cistanche deserticola YC Ma. Mod. Gên. Med. 2015, 17, 307–310.

12. Tu, PF; Chen, QL; Jiang, Y.; Guo, YH; Yang, TX; Wang, XY; Aierkan, M.; Li, XB; Du, Y. ; Nan, ZD; et al. Technegau tyfu Cistanche tubulosa a'i gwesteiwr Tamarix spp. Mod. Gên. Med. 2015, 17, 349–358.

13. Tu, PF; Jiang, Y.; Guo, YH; Tian, ​​YZ; Li, XB; Wang, XY; Wei, J. ; Chen, QL; Aierkan, M. Datblygu diwydiant ecolegol cistanches herba ar gyfer hyrwyddo gwareiddiad ecolegol y rhanbarth anialwch gorllewinol. Mod. Gên. Med. 2015, 17, 297–301.

14. Lu, DY; Zhang, JY; Yang, ZY; Liu, HM; Li, S.; Wu, BJ; Ma, ZG Dadansoddiad meintiol o cistanches herba gan ddefnyddio cromatograffaeth hylif perfformiad uchel ynghyd â chanfod araeau deuod a sbectrometreg màs cydraniad uchel ynghyd â dulliau cemegometrig. J. Medi Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef] [PubMed]Moleciwlau 2017, 22, 843 9 o 9

15. Jiang, Y.; Li, SP; Wang, YT; Chen, XJ; Tu, PF Gwahaniaethu cistanches perlysiau yn ôl olion bysedd gyda chromatograffeg hylif perfformiad uchel-arae canfod-sbectrometreg màs. J. Chromatogr. 2009, 1216, 2156–2162. [CrossRef] [PubMed]

    ---