Detholiad Petal Rhosyn (Rosa Gallica) Yn Gwynnu'r Croen Ac Effeithiau Gwynnu Gwrth-groen

Cyswllt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-bost:audrey.hu@wecistanche.com

Cân Young-Ran,1,* Won-Chul Lim,1,* Ahram Han,1 Myung-hee Lee,1 Eun Ju Shin,1Kwang-Min Lee,1,2 Tae-Gyu Nam,1 a Tae-Gyu Lim1, 3

ABSENOLDEB

Ceisiwyd ymchwilio i effaith detholiadau oPetalau Rosa gallica(RPE) ymlaengwynnu croenagwrth-wrinklegweithgaredd. Gwanhawyd gweithgaredd tyrosinase gan driniaeth RPE, sy'n cyd-fynd â lleihau cronni melanin mewn melanoma B16F10 dynol. Roedd trin croen wyneb gwirfoddolwyr mewn treial clinigol gyda fformiwleiddiad sy'n cynnwys RPE yn gwella disgleirdeb croen (gwerth L*) yn sylweddol. Roedd y mecanwaith sylfaenol a oedd yn gyfrifol yn benderfynol o fod yn gysylltiedig ag actifadu protein kinase wedi'i ysgogi gan mitogen (MAPK). Yn ychwanegol,RPEarddangosgwrth-wrinkleffurfiad ffibroblastau dermol dynol trwy atal lefel matrics metalloproteinase (MMP)-1. Astudiaeth In vivo, rhwystrodd RPE hefyd lefel MMP wedi'i ysgogi gan uwchfioled solar erbyn rheoliad c-Mehefin. Yn gyffredinol, mae ein canfyddiadau'n dangos bod RPE yn dwyn i gofcroenwyna gweithgaredd ffurfio gwrth-wrinkle trwy reoleiddio signalau mewngellol, gan gefnogi ei ddefnyddioldeb fel cynhwysyn gwynnu fforchyn a chynhyrchion cosmetig gwrth-wrinkle.

GEIRIAU ALLWEDDOL: melanin, MMP-1, Rosa gallica, gwynnu croen, ffurfio wrinkle

Dyfyniad cistanche: gwynnu croen

RHAGARWEINIAD

Er bod gan heneiddio croen gyfradd sylfaenol a bennir yn enetig, mae'n broses gymhleth ac aml-ffactoraidd y gellir ei chyflymu gan ffactorau amgylcheddol amrywiol.1 Mae heneiddio croen arferol yn broses gronolegol sy'n digwydd yn naturiol dros amser sy'n cael ei gwaethygu gan heneiddio alldarddol, wedi'i ysgogi gan straen allanol oherwydd golau'r haul, llygryddion atmosfferig , a thymheredd eithafol.2 O'r rhain, datguddiad uwchfioled solar (SUV) (yn arbennig, uwchfioled B [UVB]) yw un o brif achosion ffotograffu'r croen, wedi'i nodi gan or-bigmentation (gorgynhyrchu melanin) awrinkleformation.3 Mae ymbelydredd SUV yn ysgogi cynhyrchu rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) / rhywogaethau nitrogen adweithiol a difrod DNA, gan arwain at brosesau amrywiol sy'n gysylltiedig â heneiddio mewn celloedd croen megis llid, ailfodelu'r matrics allgellog (ECM), marwolaeth celloedd, a hyperpigmentation.4Melanin (pigmentiad du neu frown) yn amddiffyn y croen rhag niwed a achosir gan UV.5 Fodd bynnag, gall cynhyrchu melanin sydd wedi'i ddadreoleiddio neu'n ormodol yn y croen arwain at anhwylderau gorbigmentu gan gynnwys cloasma, brychni haul, a lentigines.6 Arbutin ac asid kojic, sydd wedi'u datblygu i drin y rhain clefydau, yn peri risg ar gyfer canser y coluddion neu ganser yr afu, yn y drefn honno.7 Am y rheswm hwn, bu diddordeb mewn defnyddio deunyddiau naturiol sy'n ardderchog wrth atal cynhyrchu melanin heb sgîl-effeithiau difrifol. Mae melanogenesis yn cael ei ysgogi gantyrosinase, sy'n chwarae rhan hanfodol yng ngham pennu cyfradd cychwynnol y llwybr biosynthetig melanin, ac mae'r ensym hwn yn cael ei sefydlogi a'i actifadu gan TRP{8}} a TRP 2.8 Mae'r trawsgrifiad proteinau melanogenig hyn yn cael ei fodiwleiddio gan ffactor trawsgrifio sy'n gysylltiedig â microffthalmia (MITF). Mae amlygiad UV yn actifadu'r hyrwyddwr MITF ac yn ysgogi mynegiant genynnau tyrosinase, gan arwain at gronni melanin mewn melanocytes. Yn ogystal, mae kinases protein mitogen-activated (MAPKs), sy'n cynnwys y kinase allgellog a reoleiddir gan signal (ERK), c-Jun-N-terminal kinase (JNK), ap38, yn arwain at reolaeth drawsgrifiadol o melanogenesis.8 Yn benodol, ERK a JNK gwyddys eu bod yn rheoleiddio mynegiantMITF yn negyddol,9 tra bod p38 MAPK yn achosi dadelfeniad proteasomal ensymau melanogenig. Mae phosphorylated p38 MAPK, yn ei dro, yn actifadu mynegiant MITF ac ensymau melanogenig.10

Mae proteinau ECM megis colagen, elastin, a phroteoglycans yn bresennol yn y matrics dermol, sy'n rhoi cryfder a gwydnwch i'r croen.11 Yn ystod y broses heneiddio croen, mae newidiadau matrics dermal yn digwydd gan gynnwys newidiadau i gyfrannau colagen, gan arwain yn y pen draw at ffurfio crychau. At hynny, mae arbelydru UV hefyd yn sbarduno dadelfeniad colagenas, pan fydd y straen ocsideiddiol a gynhyrchir yn hwyluso mynegiant matrics proteolytig metalloproteinase (MMPs) sy'n lleihau synthesis colagen a chyflymu diraddio scolagen. efelychu activatorprotein 1 (AP-1; c-Fos/c-Jun), ffactor trawsgrifio sy'n uwchreoleiddio lefel MMPs ymhellach.12 Y proteinau hyn sy'n bennaf gyfrifol am ddiraddio colagen.7 O'r MMPs, MMP-1 yw a elwir yn ensym pwysig sy'n ymwneud â chwalu'r ECM trwy ddadelfennu colagen math I, cydran allweddol yn y dermis.3 Felly, mae ataliad MMP wedi'i ystyried yn strategaeth ymarferol ar gyfer therapi heneiddio gwrth-groen.

Mae'r rhywogaeth Rosa (R.) wedi'i chynnwys yn y teulu Rosaceae ac mae'r genws Rosa yn un o'r planhigion sydd wedi'i ddosbarthu fwyaf. Mae'r rhain yn gnydau masnachol pwysig a ddefnyddir ar gyfer garddio, addurno a phersawr. Fel blodau bwytadwy, mae petalau hefyd yn cael eu defnyddio'n gyffredin fel cynhwysion mewn bwydydd swyddogaethol oherwydd eu lliw, eu blas cyfoethog, a'u gwerth maethol uchel.13 Yn y cyfamser, mae rhosod wedi'u defnyddio fel meddyginiaethau llysieuol ar gyfer trin dysmenorrhea, dolur rhydd a neffritis, gwella cylchrediad gwaed, rheoli poen, a hemostasis.13,14 Gall priodweddau ffisiolegol a arsylwyd gael eu priodoli i'w digonedd o ffytogemegau gan gynnwys cyfansoddion ffenolig, flavonoidau, ac anthocyaninau.15 Yn wir, mae rhai astudiaethau wedi dangos swyddogaethau biolegol sy'n cynnwys gwrth-ocsidiad cryf, gwrth-microbioleg, gwrth-llid, a gwrth-alergedd. .15–17 Yn ddiweddar, adroddwyd gennym fod ethanolextract petal rhosyn yn peri potensial gwrthlidiol i'r croen.18 Yn ogystal, archwiliwyd amodau echdynnu optimaidd petalau rhosyn sy'n cael effaith gwrth-heneiddio ar y croen ar gyfer cymwysiadau diwydiannol.19 Fodd bynnag, er gwaethaf eu argaeledd eang, priodweddau gwrth-heneiddio posibl echdynion petalau rhosyn (RPEs) fforch mae diffyg dealltwriaeth o hyd mewn gofal. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom asesu cymwysiadau posiblRPEmewn gofal croen a'u mecanweithiau moleciwlaidd sy'n gyfrifol.

budd cistanche: Gwrth-heneiddio

DEUNYDDIAU A DULLIAU

Adweithyddion

Prynwyd petalau rhosod o Dwrci trwy GN Bio (Gyeonggi-do, Korea). Prynwyd ateb MTS (CellTiter 96 Aqueous OneSolution Cell Proliferation Assay) gan Promega (Madison, WI, UDA). Prynwyd gwrth-tyrosinase polyclonaidd, gwrth-b-actin, gwrth-ERK, gwrth-MKK4, a gwrth-JNK gan Santa Cruz Biotechnology (CA, UDA). Monoclonal gwrth-ffosffo-MEK (Ser217/221), gwrth-MEK, prynwyd gwrth-ffosffo-MKK4, gwrth-ffosffo-MKK3/6, gwrth-ffosffo ERK, gwrth-ffosffo-JNK, gwrth-MKK3, gwrth-ffosffo-p38, gwrth-p38, a gwrth-ffosffo-c-Mehefin o Technoleg Signalau Cell (Danvers, MA, UDA). Cafwyd Monoclonalanti-MMP-1 a cholagen gwrth-fath I o R&D Systems (Minneapolis, MN, UDA) ac Ab cam (Caergrawnt, y Deyrnas Unedig), yn y drefn honno. Cafwyd hormon ysgogol alffa melanocyte (a-MSH), mushroomtyrosinase, a l-3,4-dihydroxyphenylalanine (l-DOPA) gan Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, UDA).

Paratoi RPE

Roedd petalau rhosyn (10 g) yn cael eu hawyrsychu, eu malu'n fân, a'u cymysgu â 1000 ml o 70 y cant (v/v) ethanol a'u tynnu ar 70 C am 3 gan ddefnyddio echdynnwr soxhlet. Yna cafodd y cynnyrch ei hidlo trwy bapur hidlo Rhif 2 (Whatman, Maidstone, UnitedKingdom). Roedd y toddydd wedi'i ganolbwyntio'n barhaus dan wactod, a chafodd y gweddillion ei lyoffileiddio gan ddefnyddio sychwr rhewi.

Assay gweithgaredd tyrosinase madarch in vitro

Cyflawnwyd yr assay enzymatic trwy fesur ffurfiant DOPAchrome fel y disgrifiwyd yn flaenorol.20 Yn gryno, 40 lLofRPEcafodd sampl (12.5, 25, 50, a 100 LG/mL) ei wanhau i 20 lL o glustogfa PBS. Ar ôl ychwanegu 20 lL o tyrosinase madarch (0.02 mg / mL), cynhaliwyd y deor am 30 munud. Ychwanegwyd swbstrad l-DOPA at y cymysgedd sy'n cynnwys ensym ac yna deorwyd am 15 munud. Yna mesurwyd y cynnyrch dopa chrome ar 475 nm. Defnyddiwyd arbutin a fitamin C fel y rheolaeth gadarnhaol.

Mae dyfyniad Cistanche yn lleihau gweithgaredd tyrosinase

Diwylliant celloedd

Cafwyd celloedd melanoma B16F10 Murine a ffibroblastau dermalaidd dynol sylfaenol (HDFs) o'r Corea Cell LineBank (Seoul, Korea) a Labordai Ymchwil ScienCell (Carlsbad, CA, UDA), yn y drefn honno. Cafodd y ddwy gell eu cynnal yng nghyfrwng Eryr addasedig Dulbecco (DMEM) (GIBCO Invitrogen, Auckland, Seland Newydd) wedi'i ategu â 10 y cant (v/v) serwm buchol ffetws (FBS) ac 1 y cant streptomycin-penisilin (GIBCO Invitrogen) ar 37 C a 5 cant deorydd CO2.

Assay hyfywedd celloedd

Defnyddiwyd yr assay MTS i fesur yr ymlediad o gelloedd melanoma B16F10 dynol a achosir gan RPE. Yn gryno, cafodd y celloedd eu hadu a'u meithrin gyda DMEM yn cynnwys 10 y cant o FBS ac 1 y cant o wrthfiotigau mewn 96-blatiau ffynnon. Yna cafodd y celloedd eu newynu â serwm am 12 awr a'u hychwanegu gydaRPEsamplau (50-1000 LG / mL) am 24 h. Yn dilyn hynny, cafodd datrysiad MTS 10 y cant gan gynnwys methosulfate phenazine ei drin i'r celloedd am 1 h. Mesurwyd gradd y celloedd hyfyw ar 490 nm.

Assay cynhyrchu melanin

Aseswyd ffurfiant melanin mewn celloedd melanoma B16F10 dynol fel yr adroddwyd yn flaenorol.20 Yn gryno, cafodd y celloedd (8 · 103cells/well) eu meithrin mewn platiau chwe ffynnon mewn 2 mL DMEM.Y diwrnod wedyn, cafodd y celloedd eu trin ymlaen llaw gyda RPE (100 a200 lg/mL) am 1 awr cyn ychwanegu MSH 100 nM ac yna ei ddeor ymhellach am 72 h. Ymchwiliwyd i felanin allgellog ar 495 nm.

Dadansoddiad o blotiau gorllewinol

Cafodd samplau protein o gelloedd B16F10, HDFs, a meinwe croen dynol eu gorchuddio â byffer RIPA [20 mM Tris-HCl (pH 7.5) 150 mM NaCl, 1 mM Na2EDTA 1 mM EGTA 1 y cant NP-40 1 y cant sodiwm deoxycholate 2.5 mM pyroffosffad 1 mM b glycerophosphate 1 mM Na3VO4 1 lg/ml leupeptin] a'i fesur gan BCA Protein Assay Kit Pierce. Gwahanwyd y proteinau gan acrylamidegels dodecyl sylffad sodiwm 10 y cant yn seiliedig ar bwysau moleciwlaidd ac yna eu trosglwyddo i bilenni nitrocellulose. Cafodd y pilenni eu rhwystro gyda 1 · hydoddiant albwmin serwm buchol am 1 awr a'u deor gyda'r gwrthgorff cynradd a nodwyd ar 4C am 12 awr. Ar ôl adweithio â marchruddygl gyda gwrthgorff eilaidd wedi'i gyfuno â peroxidase am 1 awr, delweddwyd dwyster mynegiant protein gan ddefnyddio darllenydd cemiluminescence (UVITEC Cambridge).

Pynciau a thriniaethau

Mae galluRPEi wella wynebgwynnu croen was assessed in a double-blind clinical trial in 10 women (>20mlwydd oed). Paratowyd y fformiwleiddiad sylfaenol gan ddefnyddio dŵr wedi'i buro, asid polyacrylig, 1,2-hexanediol, a sodiwmhydrocsid. Ychwanegwyd RPE ar grynodiad o 0.05 y cant (v/v). Dros gyfnod atodol o 6-wythnos, cymhwysodd y pynciau y fformiwla RPE i un ochr i'w hwyneb, ac roedd ochr arall yr wyneb yn cael ei thrin unwaith y dydd gyda dim ond y fformiwleiddiad sylfaen fel rheolydd. Yn ystod y cyfnod prawf, gwaharddwyd y gwirfoddolwyr rhag defnyddio colur eraill.

Gwerthusiad o gyflwr y croen

Gwerthuswyd cyflwr y croen yn unol â phrotocol safonol Sefydliad Gwyddorau Dermatolegol Korea (Seoul, Korea) ac fe'i perfformiwyd ar 22 C - 2 Cand 50 y cant - lleithder o 5 y cant. Ar ôl golchi'r wyneb am 30 munud, archwiliwyd cyflwr croen pob pwnc gan ddefnyddio Skin ColorCatch (Delfin Technologies, Kuopio, Y Ffindir) a chasglwyd sylwadau. Pennwyd y sgoriau gan werth L* (disgleirdeb) a'u mesur yn union cyn y prawf ac 3 a 6 wythnos yn ddiweddarach.

arbelydru SUV

Cynhaliwyd yr arbelydru SUV trwy gyfuno lampau uwchfioled A (UVA) a UVB (Q-Lab Corporation, Cleveland, OH, UDA); mae eu goleuadau'n allyrru ar 340 nm, sy'n dynwared y golau haul gorau posibl a allyrrir rhwng 365 a 295 nm.Y gymhareb UVA i UVB a gynhyrchwyd gan y lamp hwn oedd 94.5 y cant a 5.5 y cant, yn y drefn honno. Ysgogwyd HDFs a meinweoedd croen dynol mewn cyfryngau di-serwm gan arbelydru SUV ar 23 a 46 kJ/m2 gan ddefnyddio lamp UVB, yn y drefn honno.

Paratoi sampl croen dynol

Cafwyd toriadau o groen yr abdomen gan glaf Cawcasws benywaidd (Biopredic International, Saint Gregoire, Ffrainc). Yn gryno, casglwyd y samplau meinwe o'r abdomen ar ôl llawdriniaeth blastig yn unol â FrenchLaw L.1245-2 PDC. Dilynodd yr astudiaeth hon yr holl egwyddorion a nodir yn Natganiad Helsinki. Deorwyd meinwe'r croen mewn cyfrwng priodol 10 y cant FBS a ddarparwyd gan Biopredic International ar 37 C o dan 5 y cant CO2 am 10 diwrnod pan oedd y cyfryngau yn cael eu cyfnewid bob 2 ddiwrnod. Yn ystod y cyfnod rhedeg, roedd y meinwe hefyd yn agored gyda anRPEsampl 1 h cyn arbelydru SUV o 46 kJ/m2 ddwywaith y dydd. Ar ddiwedd y driniaeth, defnyddiwyd y meinwe ar gyfer dadansoddiad imiwn-histocemegol (IHC) neu ddadansoddiad imiwnoblot.

Arsylwi HGI

Cynhaliwyd dadansoddiad IHC gan asiantaeth ymchwil contract ABION (Seoul, Korea). Cafodd meinwe'r croen ei socian mewn 10 y cant o fformaldehyd, ei ddadhydradu trwy raddiant crynodiad ethanol, a'i fewnosod mewn cwyr paraffin. Cafodd peroxidase mewndarddol yr adran ei anactifadu gyda 0.3 y cant H2O2 am 15 munud ac yna ei ddeor â gwrthgorff gwrth-MMP-1 (R&D Systems, Inc., UDA, Canada) am awr.Ar ôl golchi bum gwaith, mae'r deorwyd adrannau â gwrthgyrff eilradd am 20 munud. Cafodd yr adrannau eu staenio ag adweithydd canfod DAB (3,{30-diaminobenzidine) (K3468; DAKO, Glostrup, Denmarc) a'u harsylwi a'u tynnu gan ddefnyddio microsgop golau (BX40; Olympus, Tokyo, Japan).

Dadansoddiad ystadegol

Perfformiwyd yr holl arbrofion o leiaf deirgwaith a mynegwyd data fel gwyriad safonol cymedrig. Gwerthuswyd arwyddocâd ystadegol gan ddefnyddio prawf-t Myfyriwr yn y rhaglen SPSS (Chicago, IL, UDA) a mynegwyd gwahaniaethau arwyddocaol fel P <>

tubulosa cistanche

CANLYNIADAU

Mae RPE yn atal cynhyrchu melanin trwy ataliad tyrosinase

Tyrosinase yw'r unig ensym sy'n cyfyngu ar gyfraddau ar gyfer melanogenesis sy'n bresennol mewn celloedd croen dynol.8 Mewn melanocytes, cynhyrchir DOPA o tyrosine gan tyrosinase, a ocsidir ymhellach yn dopaquinone yn y synthesispathway melanin.7 Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd assay tyrosinase madarch i bennu y gweithgaredd gwrth-melanogenig oRPE. Fel y'i rhoddir yn Ffigur 1A, cafodd RPE effaith ataliol sylweddol ar ddos-ddibynnol ar weithgaredd tyrosinase ac roedd yr effaith ataliol ar 50-100 lM o RPE yn uwch na thatof arbutin a fitamin C. Cadarnhawyd y canlyniadau hyn ymhellach trwy werthuso effaith RPE ar secretion melanin a. mynegiant tyrosinase mewn celloedd melanoma B16F10 wedi'u trin â MSH. Keratinocytes secrete a-MSH i amddiffyn y croen yn erbyn amlygiad UV gormodol, sy'n cymell actifadu melanocytes i gynhyrchu melanin.5 Cadarnhawyd bod a-MSH mynegiant tyrosinase a achosir gan driniaeth a chynhyrchu melanin mewn melanocytes (Ffig. 1B, C). Fodd bynnag, cafodd y mynegiant tyrosinase mewn celloedd B16H10 a achosir gan MSH ei atal yn ddibynnol ar ddos ​​gan driniaeth RPE (Ffig. 1B), yn gyson â'r canlyniadau a ddisgrifiwyd eisoes. Ar ben hynny, gostyngodd RPE (100 a 200 LG/mL) y cynnwys melanin a gynyddwyd yn sylweddol mewn a-MSH-ysgogi melanocytes (Ffig. 1 C). Yn ogystal, cadarnhawyd nad oedd y darn yn achosi sytowenwyndra celloedd mewn crynodiadau o £1000 LG/ml mewn celloedd B16F10 (Ffig. 1D).

Mae RPE yn is-reoleiddio mynegiant MITF trwy ysgogi actifaduMAPK mewn celloedd melanoma B16F10

Gall llwybrau signalau amrywiol gyfryngu ffurfiant pigment melanin. Rheolir melanogenesis gan MAPKs sy'n cael eu categoreiddio'n dri isdeip sy'n cynnwys ERK, JNK, ap38, a'r actifyddion i fyny'r afon MEK, MKK4, neu MKK3/6, trwy reoleiddio mynegiant MITF atyrosinase yn drawsgrifiadol.21 Mae ffosfforyleiddiad p38 MAPK yn rheoleiddiosmelanogenesis trwy ysgogi diraddio proteasomal ensymau melanogenig.6 Gwyddys bod ERK yn is-reoleiddio mynegiantMITF a melanogenesis trwy ffosfforyleiddiad mwy na 160 o broteinau.10 Yn ogystal, mae JNK yn ymwneud ag amlhau ac apoptosis celloedd canser ac mae hefyd yn rheoli melanogenesis trwy ddadreoleiddio mynegiant MITF.

Er mwyn egluro'r mecanwaith sy'n gyfrifol am weithgaredd biolegolRPE, gwnaethom ymchwilio i effaith RPE ar lwybr signalau theMAPK trwy ddadansoddiad blotiau gorllewinol. Fel a roddir yn Ffigur 2, dangoswyd triniaeth RPE hefyd i ffosfforyleiddiad y MEK-ERK, MKK4/7-JNK, a MKK3/6- t38 llwybrau MAPK mewn celloedd B16F10. Yn ogystal, cafodd ffosfforyleiddiad MAPKKs-MAPKs ei wella'n sylweddol gyda chrynodiadau RPE cynyddol. At hynny, gwelsom fod RPE yn lleihau mynegiant MITF. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod RPE yn atal mynegiant MITF a thyrosinase trwy actifadu llwybrau signalau MAPK.

Mae RPE yn cael effaith gwynnu croen ar groen dynol

Yn yr astudiaeth hon, mae effaithRPEar groen dynol cadarnhawyd ymhellach disgleirdeb mewn treial clinigol dwbl-ddall. Derbyniodd pob pwnc gymhwyso dau fformiwleiddiad gwahanol, un gyda 0.05 y cant (v/v) RPE ac un heb RPEon pob hanner eu hwynebau unwaith y dydd am 6 wythnos. Gwerthuswyd disgleirdeb y croen fel y'i haseswyd gan y gwerth L* gan ddefnyddio SkinColorCatch (Delfin Technologies). Fel y nodir yn Ffigur 3, cynyddwyd disgleirdeb y croen ym mhresenoldeb triniaeth gyda'r fformiwleiddiad sy'n cynnwys RPE 0.05 y cant (v/v) yn sylweddol o'i gymharu â'r rheolaethau. Arweiniodd triniaeth RPE am 3 wythnos at gynnydd sylweddol mewn gwerthoedd L*, a chynyddodd yr effaith ymhellach wrth i amser triniaeth barhau.

Mae RPE yn atal diraddio colagen trwy ataliad MAPK-MMP-1 mewn HDFs

Mae arbelydru UV yn cynhyrchu straen ocsideiddiol ac felly'n sbarduno dadelfeniad colagen trwy ysgogi actifadu MMPs.2 Mae MMP-1 yn ffactor pwysig yn y broses ffoto-deunydd oherwydd ei fod yn hollti colagen math I yn benodol.3 Mae mynegiant MMP-1 yn cael ei gyfryngu gan MAPKs megis ERK, t38 MAPK, a JNK, gan gynyddu actifadu ffactor trawsgrifio AP-1 wedi hynny.22 Fel is-uned o AP-1, mae c-Mehefin hefyd wedi'i achosi mewn ymateb i actifadu MAPKs a ysgogwyd gan ymbelydredd UV .23 Ceisiwyd ymchwilio i weld a oedd ylleihau wrinklepennwyd effaith RPE gan faint o ataliad MMP-1 a MMP-1-trawsgludiad signalau cyfryngol i fyny'r afon mewn HDFs arbelydredig SUV. Gwerthuswyd hefyd lefel mynegiant colagen math I sy'n adlewyrchu maint y colagen sydd wedi'i syntheseiddio yn y celloedd. Fel y nodir yn Ffigur 4A, B, arweiniodd arbelydru SUV at lai o fynegiant math Icollagen a mwy o fynegiant MMP-1 mewn HDFs. Fodd bynnag, cafodd mynegiant lefelau colagen math I a ostyngwyd gan arbelydru SUV ei adfer yn ddramatig gan RPEtreatment, a wanhawyd yn sylweddol hefyd y lefelau uwch o fynegiant MMP-1 a achosir gan arbelydru SUV. Yn ogystal, archwiliwyd effaith RPE ar ffosfforyleiddiad a achosir gan SUV ar AP-1 a MAPKs i egluro'r llwybrau signalau sy'n rhan o fynegiant MMP wedi'i gyfryngu gan SUV-1. Dangosodd y canlyniadau fod y cynnydd mewn ffosfforyleiddiad ofc-Mehefin mewn HDF a achosir gan SUV yn cael ei atal yn sylweddol ganRPEmewn modd dos-ddibynnol (Ffig. 4C). At hynny, rhwystrodd RPE ffosfforyleiddiad a achosir gan SUV o MEK ERK, MKK4/7-JNK, a MKK3/{6}}p38 (Ffig. 4D–F). Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod RPE yn lliniaru dirywiad colagen a achosir gan SUV trwy atal mynegiant MMP-1 trwy reoleiddio'r llwybrau signalau AP i fyny'r afon-1 a MAPKs mewn HDFs.

Mae RPE yn lleihau mynegiant MMP-1 a achosir gan SUV trwy is-reoleiddio signalau AP-1 a MAPKK-MAPK mewn meinwe croen dynol

Er mwyn cadarnhau ymhellach briodweddau gwrth-ffotograffiaeth RPEin vivo, gwnaethom rag-drin samplau meinwe croen dynol am 1 awr, ac yna 46 kJ/m2 o arbelydru SUV. Fel y nodir yn Ffigur 5A, cynyddwyd mynegiant MMP-1 yn sylweddol gan amlygiad SUV, traRPEroedd triniaeth yn atal lefelau mynegiant MMP-1 a achosir gan SUV. Yn ogystal, datgelodd dadansoddiad staenio IHC effaith amddiffynnol RPE ar drwch epidermaidd trwy amlygiad SUV trwy nodi lefel mynegiant MMP-1 yn y meinwe croen. Cynyddwyd mynegiant MMP-1 yn y model croen dynol wedi'i drin â SUV, tra bod triniaeth RPE wedi lleihau mynegiant MMP-1 a achoswyd gan SUV (Ffig. 5B). Mae AP-1 yn ysgogi mynegiant MMP-1,24 ac mae MAPKs yn brif gyfryngwyr mynegiant MMP a achosir gan UV trwy reoliad trawsweithredol AP-1.25 Fel y nodir yn Ffigur 5C, Roedd RPE yn atal ffosfforyleiddiad a achosir gan SUV o c-Jun mewn meinwe croen dynol, sy'n dynodi is-reoleiddio gweithrediad trawsgrifio AP-1 gan RPE. At hynny, ataliodd RPE ffosfforyleiddiad a achosir gan SUV o MEK-ERK, MKK4/7-JNK, a MKK3/6-p38 (Ffig. 6). Gyda'i gilydd, mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod RPE yn atal cynhyrchu colagen a achosir gan SUV mewn celloedd dermol a meinwe croen.

dyfyniad cistanche tubulosa

TRAFODAETH

Mae llawer o'r cyltifarau rhosyn addurniadol sy'n bodoli heddiw wedi cael eu defnyddio ers amser maith at ddibenion bwyd a meddyginiaethol. Yn wir, mae cyfansoddion bioactif amrywiol o ddiddordeb yn bresennol yn y planhigyn rhosyn, gan gynnwys cyfansoddion ffenolig.26 Yn flaenorol, fe wnaethom adrodd ar y gweithgaredd llidiol gwrth-croenRPEdefnyddio celloedd epidermaidd llygoden, lle roedd RPE yn lleihau mynegiant COX a achosir gan SUV trwy atal llwybr signalau MAPK.

Mae'r berthynas agos rhwng llid a'r broses heneiddio wedi'i hen sefydlu,28 a cheisiwyd ymchwilio i'r berthynas hon yng nghyd-destungwynnu croenagwrth-wrinklegweithgareddau ffurfio. Fel y nodir yn Ffigur 1, mae gweithgaredd RPE tyrosinase dos-ddibynnol yn atal gweithgaredd in vitro tyrosinase a'i fynegiant mewn celloedd B16F10. At hynny, cafodd canlyniad terfynol pigmentiad croen, cynhyrchu melanin, ei atal gan driniaeth RPE mewn celloedd B16F10. Arweiniodd RPE hefyd at ffosfforyleiddiad MAPKs a'i MAPKKs i fyny'r afon actifydd, ac yna gostyngiad mewn mynegiant MITF (Ffig. 2). Gwyddys bod MAPKs yn ffactorau signalau allweddol sy'n rheoleiddio melanogenesis mewn melanocytes.21 Mae llwybrau TheERK a JNK yn cymryd rhan mewn nifer o gamau trawsyrru signal, ac maent hefyd yn cymryd rhan mewn rheoleiddio MITF, sy'n arwain yn ddilyniannol at ataliad tyrosinase a melanogenesis.9 Yn y cyfamser, mae actifadu p38 MAPK yn arwain at ataliad synthesis melanin trwy achosi diraddio'r protein tyrosinase.6 Gyda'i gilydd, mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod RPE yn atal melanogenesis mewn celloedd B16F10melanoma trwy ataliad o MITF a thyrosinasetranscription, ac mae effaith RPE yn digwydd mewn cysylltiad ag actifadu llwybrau signalau MAPKK-MAPK.

I gadarnhau a yw'rgwynnu croena gweithgareddau gwrth-wrinkleformation o RPE yn ddilys ar gyfer croen dynol, rydym yn trin gwirfoddolwyr gyda RPE am 6 wythnos i werthuso croen whiteningactivity. Fe wnaethom hefyd werthuso meinwe croen dynol ex vivo am 10 diwrnod i asesu'rgwrth-wrinkleeffeithiau ffurfio. Roedd triniaeth gyda'r fformiwleiddiad sy'n cynnwys RPE yn gwella'n sylweddol y gwerthoedd L*, uned fesur ar gyfer gwynder croen (Ffig. 3). Ymhellach, atebodd mwyafrif y gwirfoddolwyr fod cyflwr eu croen, gan gynnwys gwynder, wedi'i wella gan y fformiwleiddiad sy'n cynnwysRPE, yn seiliedig ar arolwg holiadur (data heb ei ddangos).

Ystyrir bod ymbelydredd SUV yn ffactor sylfaenol mewn prosesau sy'n gysylltiedig â chroenio.4 Yn yr astudiaeth hon, nid yn unig adferodd RPE synthesis procolagen ond hefyd ataliodd mynegiant MMP-1 a achosir gan SUV mewn HDFs (Ffig. 4). Ymhellach, dangosodd dadansoddiad staen IHC y gallai RPE wanhau mynegiant MMP1 a achosir gan SUV ym meinwe croen (Ffig. 5B). Yn ogystal, gwnaethom ymchwilio i weld a yw RPE yn dylanwadu ar ffactorau trawsgrifio fel MAPK ac AP-1. Canfuom fod lefelau protein yn uwch mewn HDF arbelydredig SUV a meinwe croen, traRPEllesteirio llwybr MAPKK-MAPK yn sylweddol a gweithrediad AP-1. Ar ôl dod i gysylltiad â SUV, gall y ROS canlyniadol weithredu actifyddion ar gyfer sawl llwybr moleciwlaidd, gan gynnwys llwybr MAPK sy'n actifadu trawsgrifiad AP-1 a ffactor niwclear-kappaB.29 Mae'r llwybrau hyn yn cyfrannu at fynegiant genynnau niferus gan gynnwys MMPs, gan arwain at ddiffyg colagen a crychau.12 Mewn astudiaeth flaenorol, gwnaethom hefyd ddangos bod RPE yn cynnwys crynodiadau uchel o wrthocsidyddion megis anthocyaninau, polyffenolau, a flavonoidau, gan felly ddarparu rhywfaint o allu gwrthlidiol yn erbyn datguddiad SUV.27 Felly, effaith amddiffynnol difrod RPE ar y croen gan ymbelydredd SUV a ddangosir yn yr astudiaeth hon y gellir ei guro i'w allu gwrthocsidiol.

I gloi, gwelsom hynnyRPEyn arddangos gwynnu croen agwrth-wrinkleeffeithiau tra'n atal gweithgaredd tyrosinase a ffurfio melanin mewn melanocytes. Mae'n bosibl y bydd priodweddau gwrth-melanogenig RPE yn dod i'r amlwg trwy weithredu llwybr signalau MAPKK-MAPK. Yn ogystal, mae RPE nid yn unig yn hyrwyddo synthesis procolagen ond mae hefyd yn atal mynegiant MMP a achosir gan amlygiad SUV mewn ffibroblastau croen a meinwe, trwy atal y llwybr MAPKK-MAPK ac actifadu AP-1. At hynny, ni chanfuwyd unrhyw effeithiau negyddol sy'n gysylltiedig â sefydlogrwydd fformiwleiddio yn y gwirfoddolwyr. Mae ein canfyddiadau'n awgrymu y gallai RPE fod yn fioddeunydd amddiffyn croen effeithiol, gyda chymwysiadau mewn triniaeth glinigol a/neu gosmetig ar gyfer pigiad croen a chrychau.

atchwanegiadau cistanche