Astudiaeth Ar Dylanwad Imiwnedd Mewn Llygod

I ddysgu mwy o wybodaeth plz cysylltwchdavid.wan@wecistanche.com

Dau o ddeg ar hugain o ddynionDBA/2NCrl(D2N)llygod a ddefnyddir fel straen rheoli wrth ddadansoddi data cefndirDBA/2N-MDXllygod, a gyflwynwyd gyda chanfyddiadau annormal a awgrymwyd o haint. Achos 1: Dangosodd llygoden D2N gwrywaidd {{1})wythnos oed friw plac gwyn yn yr aren chwith (dim symptomau clinigol), a chynhaliwyd archwiliad patholegol o'r aren. Gwelwyd ymdreiddiad celloedd llidiol, niwtroffiliau yn bennaf, yn y tiwbiau ac interstitium yr aren chwith, a chanfuwyd Staphylococcus aureus (S.aureus) o'r segment arennol chwith. Felly, canfuwyd bod y briw hwn ar yr aren chwith yn suppurativetubulointerstitialneffritis a achosir gan haint S. awrëws. Achos 2: Canfuwyd torticollis chwith â cholli pwysau mewn 9-llygoden D2N gwrywaidd wythnos oed. Datgelodd gwerthusiad histologig lid exudative o amgylch tarddiad pharyngeal tiwbiau eustachian, a llid purulent y ddwy glust canol a chlust fewnol chwith gyda ffurfiad crawniad a chlystyrau fel microcolonïau gram-bositif. Nodwyd S. awrëws o ddiwylliannau swab y ddwy gamlas clust allanol. O ganlyniad, achoswyd yr achos hwn o torticollis gan otitis media S. aureus-suppurative a'r rhyngrwyd. Mae S. aureus yn adnabyddus fel pathogen manteisgar gyda'r potensial i achosi clefydau suppurative yn aml i anifeiliaid labordy imiwnogymwys. Fodd bynnag, hyd y gwyddom, nid yw'r achos hwn o haint S. aureus a gyflwynwyd â torticollis mewn llygoden D2N wedi'i adrodd.

Cliciwch yma i ddysgu mwy am Cistanche

Daeth ynysu Staphylococcus aureus (MRSA) sy'n gwrthsefyll methicillin i'r amlwg mewn llygoden labordy yng Nghanolfan Gwyddor Anifeiliaid Labordy y Coleg Meddygol Amddiffyn Cenedlaethol yn 2018 aMRSAdaethpwyd o hyd i ynysigau o lygod hefyd yn yr ystafelloedd llygoden eraill wedi hynny. Ar yr unigion MRSA hyn, perfformiwyd teipio moleciwlaidd fel teipio dilyniant Aml-locws (MLST), teipio Staphylococcus aureus Protein A (sba), teipio SCCmec, a theipio coagulas i benderfynu ar eu genoteipiau. Datgelodd pob ynysydd genoteipiau unfath (ST1, spa t1784, SCCmec math IV, a math coagulase VII), sy'n awgrymu bod yr unigion yn glonau unfath. Cyn ymddangosiad MRSA yn 2018, nid oedd unrhyw ynysu â genoteipiau o'r fath wedi'u hynysu yn y cyfleuster hwn, rhagdybiwyd bod y clôn MRSA wedi'i ddwyn i mewn i'r cyfleuster trwy anifeiliaid dynol neu labordy. STl1 yw'r MRSA cyntaf a gaffaelwyd yn y gymuned i'w adennill o blant yn yr Unol Daleithiau, fodd bynnag, mae ST1 yn cael ei adennill gan bobl ac anifeiliaid ledled y byd ar hyn o bryd. Yn Japan, mae straenau math IV ST1 a SCCmec wedi'u hynysu oddi wrth bobl a chathod, sy'n awgrymu bod ST1 yn cael ei drosglwyddo rhwng bodau dynol ac anifeiliaid. Mae straen MRSA gyda'r genoteipiau hyn ond hefyd gyda sba tl784 wedi'i adennill gan bobl. Ar hyn o bryd, mae'r gwahaniaeth rhwng MRSA a gafwyd yn yr ysbyty, MRSA a gafwyd yn y gymuned, ac MRSA sy'n gysylltiedig â da byw yn fwy amwys. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu y gall llygod weithredu fel cronfeydd MRSA.

Mewn imiwnotherapi canser diweddar, mae gweithgaredd moleciwlau fel PD-1 yn cael ei atal i gynyddu gweithgaredd celloedd imiwn yn erbyn canser. Er gwaethaf yr effaith therapiwtig uchel, mae yna achosion lle mae clefyd hunanimiwn yn datblygu mewn imiwnotherapi canser. Yma, rydym wedi sefydlu system sy'n gallu diraddio PD-1 mewn modd amser-benodol mewn celloedd diwylliedig a llygod gan ddefnyddio'rSystem degron SMash. PD{0}}Cafodd protein ymasiad SMAsh yng nghelloedd Jurkat a CD3 ynghyd â splenocytes ei leihau 1 diwrnod ar ôl rhoi Asunaprevir(ASV) neu Grazoprevir(GRV) sy'n atalyddion proteas NS3/4A. Cafodd twf celloedd adenocarcinoma MC-38 wedi'u brechu mewn llygod PD-1-cherry-SMAsh knockin(KI) ag ASV ei atal o'i gymharu â llygod math gwyllt(WT) a llygod KI heb eu trin. Ar ben hynny, gallai'r llygod WT a drawsblannwyd â chelloedd mêr esgyrn KI ar ôl cael eu harbelydru ag ymbelydredd angheuol wrthod celloedd MC-38 â GRV. Roedd llygod KI yn ymddangos yn iach ac nid oeddent yn dangos unrhyw arwyddion o glefyd hunanimiwn. Rydym yn awgrymu y disgwylir i'r defnydd o'r system degron mewn organebau byw hyrwyddo nid yn unig astudiaethau biolegol amrywiol ond trin afiechydon.

Mae Progesterone (P4) yn cael ei gyfrinachu o'r brych i gynnal beichiogrwydd ac mae'n gweithredu fel rheolydd imiwnedd. Mae glucocorticoid yn un arallimiwn-reoleiddiolsteroid i reoleiddio llid. Yn yr astudiaeth hon, trawsblannwyd celloedd mononiwclear gwaed ymylol dynol (PBMCs) i lygod NOG i gymell clefyd impiad-yn erbyn gwesteiwr (GVHD) a'u defnyddio ar gyfer y gymhariaeth rhwng effeithiau P4 a cortisol (COR). Ysgogwyd PBMCs ym mhresenoldeb crynodiadau amrywiol o P4 neu COR a dadansoddwyd y celloedd gan cytometreg llif (FCM). Aliquots oPBMCseu trawsblannu i lygod NOG, a chwistrellwyd P4 neu COR i'r llygod ddwywaith yr wythnos. Ar ôl 28 diwrnod, perfformiwyd dadansoddiadau FCM ac imiwn-histocemegol. O ganlyniad, roedd crynodiad uchel o P4 yn atal actifadu celloedd T in vitro, tra nad oedd yr ataliad yn parhau ar ôl ei dynnu. Roedd ataliad actifadu celloedd T yn llai mewn triniaeth COR o'i gymharu â P4, ac roedd gorludded celloedd T yn fwy amlwg. Roedd llygod wedi'u chwistrellu gan P4-yn cario mwy o splenocytes, yn enwedig celloedd CD8 T, o gymharu â llygod rheoli. Fodd bynnag, mae mynegiant is CD25, llai o ymdreiddiad o gelloedd T dynol i'r ysgyfaint a'r afu, a llaiGVHDsylwyd ar symptomau. Ar y llaw arall, roedd nifer y splenocytes, yn enwedig celloedd T, mewn llygod wedi'u chwistrellu â COR yn sylweddol is, ac roedd celloedd actifedig / dihysbyddu yn helaeth. Mae'r canlyniadau hyn yn awgrymu bod yn well gan P4 gynnal celloedd T o gymharu â COR in vitro.

Gelwir biliau Helicobacter hepaticus a Helicobacter yn bathogenau sy'n achosi hepatitis a cholitis mewn llygod. Mae bodolaeth sawl achos cadarnhaol yn dal i gael ei gadarnhau'n flynyddol mewn cyfleusterau anifeiliaid arbrofol yn Japan. Mae'n well defnyddio cynnwys cecal neu feces ffres fel sampl ar gyfer profi PCR o H. hepaticus, a H. bilis.

Yn ddiweddar, mae adweithyddion cludo a storio DNA ac RNA wedi'u cynhyrchu gan wahanol weithgynhyrchwyr. Disgwylir mai'r adweithyddion hyn fydd y problemau wrth gludo samplau a ddefnyddir ar gyfer profion PCR fydd yn cael eu clirio. Felly, yn yr astudiaeth hon, archwiliwyd defnyddioldeb yr adweithydd storio asid niwclëig trwy gynnal prawf PCR o Helicobacter gan ddefnyddio cynnwys y cecum a gadwyd gan ddefnyddio'r adweithydd cadw asid niwclëig. O ganlyniad, gallai samplau sy'n cael eu storio am 7 diwrnod gan ddefnyddio'r hydoddiant cadw gael eu canfod Helicobacter ar yr un lefel â'r sampl ffres. O'r uchod, awgrymwyd yn y prawf PCR o Helicobacter, Hyd yn oed os yw'r cludiant yn cymryd dyddiau, mae'n bosibl cynnal y prawf gyda chywirdeb uchel trwy gludo'r sampl sydd wedi'i drochi yn yr adweithydd storio asid niwclëig trwy hedfan oergell.

Rydym wedi datblygu straenau mutant E.coli o'r blaen gan gadw'n sylweddol well at arwynebau solet in vitro trwy addasu'r genynnau sy'n ymateb i newyn maethol. Er mwyn gwerthuso'r rhyngweithio rhwng y straenau E. coli (AEEs) hyn sydd wedi'u gwella gan adlyniad ac amgylchedd berfeddol in vivo, fe wnaethom asesu eu gallu i gytrefu i'r llwybr berfeddol trwy frechu llygod.

Cyn yr arbrawf gwerthuso, fe wnaethom drawsnewid AEEs gyda plasmid yn mynegi luciferase ar gyfer delweddu in vivo. fel yr oeddent yn cael eu brechu trwy'r geg i lygod ymprydio ac yn casglu carthion bob ychydig ddyddiau. Nifer y bywAEEsamcangyfrifwyd trwy fesur y CFU o'r feces a gasglwyd.

O ganlyniad, o'i gymharu â'r straen rheoli, roedd AEEs yn fwy niferus yn y feces am fwy nag wythnos, sy'n dangos cytrefiad gwell yn y llwybr berfeddol. Trwy arsylwi lleoleiddio goleuedd luciferase trwy ddelweddu anfewnwthiol gan ddefnyddio IVIS, canfuwyd hefyd bod AEEs yn tueddu i gytrefu yn y cecum a'r colon.

[Amcan] Ar hyn o bryd, [Pasteurella]niwmotropicawedi cael ei ailddosbarthu fel genws newydd Rodentibacter. O'r rhain, R.pneumotropicus ac R. Healy yw'r prif dargedau ar gyfer monitro microbiolegol mewn cnofilod. Rydym wedi ynysu nifer o Rodentibacter sp. na ellid eu hadnabod fel rhywogaethau o gnofilod. Yn yr astudiaeth hon, rydym yn archwilio nodweddion Rodentibacter sp. ynysu, gan ganolbwyntio ar ffyrnigrwydd bacteriol. [Dulliau] Rodentibacter sp. a oedd wedi'u hynysu o trachea llygod mawr yn cael eu defnyddio ar gyfer yr astudiaeth. Perfformiwyd dilyniant genom drafft ar ddilyniannydd y genhedlaeth nesaf, ac yna, rhagfynegwyd y genynnau sy'n gysylltiedig â ffyrnigrwydd. Mewn arbrofion anifeiliaid, defnyddiwyd llygod Rag2 ar gyfer Rodentibacter sp. haint.|Canlyniadau| Erbyn y dilyniant genom drafft, roedd genyn codio tocsin RTX unigryw wedi'i nodi yn Rodentibacter sp. Roedd dilyniant protein tocsin RTX yn fwy homologaidd i'r rhai a gynhyrchwyd gan Enterobacteriaceae na gan Pasteurellaceae. Mewn arbrawf anifeiliaid, cadarnhawyd niwmonia angheuol neu septisemia i bron pob un o lygod Rag 2 heintiedig. Er na ellid adnabod yr unigyn fel R. pneumotropicus ac R. heylii, gall y rhywogaeth hon sy'n perthyn yn agos fod yn angheuol i anifeiliaid â imiwnedd gwan ym mhresenoldeb ffactorau ffyrnigrwydd megis tocsin RTX.

Yn Rhaglen Datblygu Technoleg Sylfaenol NBRP (2018-2019), fe wnaethom ddilyniannu genomau bacteria pathogenig manteisgar murine, a pherfformioRNAseqo brotosoa mewn llygod, er mwyn datblygu profion PCR ar gyfer yr organebau hyn. Defnyddiwyd y canlyniadau hyn i ddadansoddi Rodentibacter spp. a phrotosoa mewn llygod mawr mewn cydweithrediad â Phrifysgol Kyoto (NBRP Rat). Yma, rydym yn adrodd ar ganlyniadau profion mewn samplau llygod mawr. [Dulliau] Darllenwyd dilyniannau genynnau rRNA 16S o tua 1.5 kbp gan PCR ar gyfer chwe ynysiad llygod mawr o Rodentibacter spp., a phenderfynwyd dilyniant genom drafft un unigyn(#25) gan ddefnyddio Illumina HiSeq 2500. Roedd PCR o gynnwys llygod mawr o lygodyn perfformio yn seiliedig ar ganlyniadau RNAseq o brotosoa llygoden. [Canlyniadau] Roedd dilyniannau genynnau rRNA 16S o bob unigyn yn union yr un fath, a chawsant eu hadnabod fel Rodentibacter Ratti trwy ddadansoddiad OTU. Datgelodd dilyniant ynysig #25 hefyd mai R. Ratti oedd y straen hwn. Rhoddodd PCR ar gyfer protosoa murine ganlyniadau cadarnhaol ar gyfer llygod mawr amoeba. Ni chafwyd unrhyw ganlyniadau cadarnhaol ar gyfer TrichomonasPCRar sbesimenau llygod mawr. [Trafodaeth] Mae'r llygoden fawr yn ynysu Rodentibacter spp. a archwiliwyd yn yr adroddiad hwn R. Ratti i gyd. Mae'n bwysig bod yn ymwybodol o bresenoldeb R. Ratti wrth berfformio profion Rodentibacter mewn llygod mawr. Dangosodd rhai samplau fecal llygod mawr positif ar gyfer llygoden amoeba PCR. Dyma'r cam cyntaf yn natblygiad PCR ar gyfer canfod protosoa mewn llygod mawr.

Mae organebau cnofilod 'Pasteurella pneumotropica' yn facteriwm pathogenig manteisgar sy'n achosi clefydau anadlol mewn llygod a llygod mawr. Fe'u dosbarthwyd yn flaenorol yn y genws Pasteurella, a chynigiwyd sawl math yn betrus fel bioteipiau. Yn 2017, cawsant eu had-drefnu gyda'i gilydd i'r genws Rodentibacter. Cafodd straeniau MaM a MaR eu hynysu oddi wrth lygod a llygod mawr, yn y drefn honno, tua'r 1980au. Yn yr astudiaeth hon, gwnaethom bennu dilyniannau genom y ddau straen a'u cymharu â rhai'r genws Rodentibacter, deunyddiau a MethodsCafwyd y straenau MaM a MaR gan y Sefydliad Cenedlaethol Clefydau Heintus (NIAID).

(Manabu Saito --> Yasushi Ami -->Fumio Ike). Tyfwyd y ddau straen gan ddiwylliant hylifol i echdynnu DNA genomig, a phennwyd y dilyniannau genomig gan ddefnyddio Illumina Hiseq 2500 a PacBio Sequel.[Canlyniadau]Yn seiliedig ar ddilyniant genynnau rRNA 16S, nodwyd y straen MaM fel R.pneumotropicus a'r straen MaR fel R. Ratti. Ymhellach, penderfynwyd ar y dilyniant genom cyflawn (2,213,961 bp) o'r straen MaR (nifer yr operonau rRNA oedd 6 ac amcangyfrifwyd bod nifer y genynnau yn 2,063). [Trafodaeth Mae'r straenau MaM a MaR wedi'u defnyddio fel safonau ar gyfer nodi'Pasteurella pneumotropica' yn Japan. O'r dadansoddiad hwn, fe wnaethom bennu rhywogaeth y ddau fath fel a ganlyn: y straen MaM yw R.pneumotropicus a straen MaR yw R.ratti. Yn rhyfeddol, mae'r canlyniadau hyn yn dangos y gall R. Ratti gael ei ynysu oddi wrth lygod mawr yn Japan.

Mae Clostridium pili i mi (CP) yn agored i heintus mewn amrywiol anifeiliaid labordy gan gynnwys llygod mawr a llygod ac mae'n dangos haint asymptomatig ac eithrio mewn anifeiliaid â imiwnedd gwan. Ystyrir ei fod yn ddiagnosis gwahaniaethol mawr i gynnal cyfleusterau anifeiliaid ac mae'n hysbys ei fod yn effeithio ar ddata arbrofol o astudiaethau anifeiliaid. Mae serodiagnosis (ELISA, IFA) a PCR yn cael eu defnyddio'n gyffredin i wneud diagnosis o CP oherwydd bod ynysu yn y cyfrwng maeth artiffisial yn anodd i CP. Fodd bynnag, adroddir bodolaeth y gwrthgorff amhenodol sy'n nodi'r croes-adweithedd â CP gan ddefnyddio'r serodiagnosis a chaiff ei gydnabod yn aml mewn achos tebyg yn ein cyfleusterau. Ar ben hynny, mae gan y dull PCR derfynau fel dull diagnostig dibynadwy gyda monitro cyfnodol, oherwydd mae CP yn anghanfyddadwy mewn feces ar ôl y titer gwrthgyrff cynyddol. Yn ddiweddar, fe wnaethom archwilio dull gwahanol, gan gadw feces o anifeiliaid bob mis. Fe wnaethom fabwysiadu'r prawf PCR ar gyfer CP nad yw dylanwad y gwrthgyrff yn effeithio arno fel diagnosteg fwy dibynadwy gan ddefnyddio'r feces a gedwir yn barhaus. Yn yr adroddiad hwn, rydym yn dangos enghraifft ddiweddar. (gwrthgorff amhenodol) i arwain at archwilio'r llif sy'n datblygu yn ein cwmni.