Astudiaeth Ar Fecanwaith O Fuddiannau Cistanches Wrth Drin Diogelu'r Afu

Crynodeb:I astudio mecanwaith cydrannau gweithredol oCistanchesHerba wrth drin ffibrosis yr afu o safbwynt cyffuriau, afiechydon a thargedau. Casglwyd cydrannau effeithiol Cistanches Herba trwy gronfa ddata ffarmacoleg a llwyfan dadansoddi system meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol (TCMSP), cronfa ddata gwyddoniadur meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol (ETCM), cronfa ddata gynhwysfawr ymchwil meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol (TCMID), cronfa ddata CNKI, PubMed a chronfeydd data eraill. Genynnau targed cydrannau gweithredol oCistanches Herbaeu cael gan gronfa ddata Uniprot, a chasglwyd genynnau clefyd ffibrosis yr afu gan gronfa ddata GeneCards a chronfa ddata OMIM, croestorwyd y targedau cydrannau gweithredol âffibrosis yr afutargedau, a lluniwyd rhwydwaith cydrannau-clefyd meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol. Adeiladwyd rhwydwaith rhyngweithio protein (PPI) gan gronfa ddata Llinynnol a meddalwedd Cytoscape 3.7.1. Cyfoethogwyd swyddogaeth GO a llwybr KEGG gan gronfa ddata DAVID.

Model anifeiliaid offibrosis yr afuei sefydlu, canfuwyd cynnwys LN, HA, PCIII a Col IV mewn meinwe afu llygoden gan becyn ELISA, gwelwyd newidiadau histopatholegol yr afu gan staenio HE a Masson, a chanfuwyd trawsgrifiad mRNA PI3K ac AKT gan fflworoleuedd amser real PCR meintiol. Wyth cydran weithredol o Cistanches Herba, 157 targed a 1 005 targed offibrosis yr afueu casglu a'u sgrinio, a 92 o dargedau yn croestorri â'i gilydd, yn cynnwys 5 prif lwybr signal, gan gynnwys llwybr signal canser, llwybr signal firws hepatitis B, llwybr signal PI3K-AKT, llwybr signal ffactor necrosis tiwmor, proteoglycan a chanser. Dangosodd yr arbrawf anifeiliaid, o gymharu â'r grŵp model, y grwpiau dogn uchel, canol ac isel o gyfanswmglycosidau ffenylethanol, sy'n cynnwys acteoside, o Cistanches Herba (700, 350, 175 mg/kg) yn gallu lleihau'n sylweddol cynnwys LN, HA, PCIII a Col IV ym meinwe iau llygod â ffibrosis yr afu. Dangosodd arsylwi patholegol meinwe'r afu y cyfanswm hwnnwglycosidau ffenylethanol o Cistanches Perlysiau Manteision:gallailleihau anafiadau i'r afua gwellasystem gwrth-heneiddio. Dangosodd y darganfyddiad PCR meintiol fflworoleuedd amser real fod y mynegiant mRNA o PI3K ac AKT ym meinwe iau'r grŵp model wedi'i uwch-reoleiddio'n sylweddol o'i gymharu â grŵp arferol. O'i gymharu â'r grŵp model, gostyngodd mynegiant mRNA PI3K ac AKT yn y grwpiau dos uchel, canol ac isel o gyfanswm glycosidau ffenylethanol o Cistanches Herba yn sylweddol, a gall ei fecanwaith ohirio dilyniant ffibrosis yr afu trwy atal actifadu llwybr PI3K-AKT . Mae cyfanswm glycosidau ffenylethanol Cistanches Herba yn cael effaithgwrth-heneiddio yr afu, sy'n gosod sylfaen ar gyfer astudiaeth bellach ar effeithiau ffarmacolegolCistanches Herba. 

(cliciwch yma i wybod am fuddion cistanche)

Geiriau allweddol:Cistanches Herba; ffarmacoleg rhwydwaith; tocio moleciwlaidd;ffibrosis yr afu;amddiffyn yr afu;

Awdur:ZHANG Bo-rui1, MA Qian-qian1, WANG Wen-yi1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1, ZHAO Mehefin 2, MA Long1*

Ysgol Iechyd y Cyhoedd, Prifysgol Feddygol Xinjiang, Urumqi 830054, Tsieina; Labordy 2Key o Feddygaeth Uygur, Sefydliad Ymchwil Fferyllol Xinjiang, Urumqi 830004, Tsieina

Mae'r afu yn chwarren dreulio bwysig yn y corff dynol, ac unwaith y bydd y clefyd yn digwydd, bydd yn effeithio ar swyddogaeth metabolig arferol y corff dynol. Mae astudiaethau wedi dangos bod,ffordd bwysig o ffurfio canser yr afu yw ffibrosis yr afu.Pan fydd yr afu yn cael ei ysgogi, mae celloedd imiwnedd yn secretu nifer fawr o ffactorau imiwnoreoleiddiol, gan arwain at actifadu a lluosogi celloedd stellate hepatig, synthesis llawer iawn o golagen, a dyddodiad llawer iawn o fatrics allgellog yn yr afu, gan arwain at y ffurfio ffibrosis. Felly, gall rheolaeth ar unrhyw gam o broses clefyd yr afu leihau difrod clefyd yr afu, ac mae'r ymchwil ar drin ffibrosis yr afu yn bwysig iawn.

Yn y blynyddoedd diwethaf, mae astudiaethau wedi dangos bod,Cistancheyn cael effaith iachaol amlwg wrth drin clefyd yr afu, ac yn dangos manteision amlwg wrth drin ffibrosis yr afu.

Gelwir Cistanches Herba, deunydd meddyginiaethol gwirioneddol yn Xinjiang, yn "ginseng anialwch" ac fe'i defnyddiwyd yn glinigol ers miloedd o flynyddoedd.

Buddiannau Cistanche

Mae ymchwil modern wedi dangos bod ganddi weithgareddau biolegol amrywiol megisgwrth-heneiddio, amddiffyn yr afu, lleddfu blinder, gwrth-osteoporosis, carthydd ac yn y blaen.Gwnaethoch chi et al [8] ddangos hynnyCistanchegall ffenylethanoid liniaru graddau ffibrosis yr afu. Canfu Zhang et al[9] y gallai actifadu celloedd stellate hepatig a ffibrosis yr afu gael ei atal ganCistancheliposomau ffenylethanoid. Fodd bynnag, mae effeithiau ffarmacolegolCistanchewrth drin ffibrosis yr afu a'i fecanwaith yn aneglur o hyd ac nid yw'n glir eto.

Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd ffarmacoleg rhwydwaith i adeiladu diagram rhwydwaith "cydran-clefyd-targed-llwybr-targed" [10], ac yna defnyddiwyd rhyngweithio protein a dadansoddiad cyfoethogi targed [11] i ragfynegi'r targedau a thargedau perthnasol oCistanchewrth drinffibrosis yr afu. Mae'r llwybr, trwy dechnoleg tocio moleciwlaidd ac arbrofion anifeiliaid, yn darparu sylfaen ar gyfer effeithiau ffarmacolegol cynhwysion actifCistanchewrth drin ffibrosis yr afu.

1 Deunydd a dulliau Cistanche

1.1 Targedau cysylltiedig â sgrinio o gydrannau gweithredol Cistanche deserticola

1.1.1 Sgrinio cydrannau cemegol gweithredol Cistanche

Gan ddefnyddio "Cistanche" fel y term chwilio, mae'r bio-argaeledd llafar (OB) Yn fwy na neu'n hafal i 30 y cant, cafodd tebygrwydd cyffuriau (tebyg i gyffuriau) eu sgrinio yn Llwyfan Dadansoddi Ffarmacoleg y System Meddygaeth Tsieineaidd Draddodiadol (TCMSP) . , DL) Yn fwy na neu'n hafal i 0.18 fel cynhwysion gweithredol, ac yna wedi'i gyfuno â Chronfa Ddata Gwyddoniadur Meddygaeth Tsieineaidd (ETCM), Cronfa Ddata Cynhwysfawr Ymchwil Meddygaeth Tsieineaidd (TCMID), cronfa ddata CNKI, cronfa ddata PubMed i ategu cydrannau perthnasol Cistanche.

1.1.2 Cydrannau gweithredol Cistanche a thargedau clefyd ffibrosis yr afu

Gan ddefnyddio cronfa ddata Uniprot, cafodd y targedau protein sy'n cyfateb i gydrannau gweithredol Cistanche eu sgrinio. Yna, defnyddiwyd y gronfa ddata anodi genom a chronfa ddata genetig Mendelian i chwilio gyda "ffibrosis yr afu" fel yr allweddair i gael y targedau protein perthnasol yn y gronfa ddata, ac yn olaf cael targedau protein cyffredin y ddau.

1.1.3 Adeiladu a dadansoddi'r rhwydwaith o "gydrannau gweithredol Cistanche - ffibrosis yr afu - targedau protein" Defnyddiwyd y gronfa ddata Llinynnol i adeiladu rhwydwaith o "gydrannau gweithredol Cistanche - ffibrosis yr afu - targedau protein" ar gyfer delweddu. Mae pob nod yn cynrychioli genyn, protein neu gydran weithredol, ac mae'r cysylltiad rhwng nodau yn cynrychioli'r cysylltiad rhwng y gydran weithredol a thargedau cysylltiedig. Mae'r genynnau craidd yn y rhwydwaith yn cael eu dadansoddi yn ôl gradd y rhwydwaith, a cheir y rhwydwaith rhyngweithio protein yn olaf. .

1.1.4 Dadansoddiad cyfoethogi GO a KEGG

Mewnforiodd cronfa ddata David dargedau Cistanche wrth drin ffibrosis yr afu, cynhaliwyd dadansoddiad cyfoethogi GO a KEGG, a'u sgrinio yn ôl gwerth Count.

1.1.5 Tocio moleciwlaidd

Sicrhewch strwythur cemegol 2D prif gydrannau gweithredol Cistanche Cistanche trwy gronfa ddata PubChem, darganfyddwch strwythur 3D y protein targed craidd perthnasol yn y gronfa ddata PDB, perfformiwch docio moleciwlaidd trwy feddalwedd Autodock i gael y safle gyda'r egni rhwymol uchaf, a yn olaf ei ddelweddu trwy brosesu meddalwedd Pymol.

1.2 Arbrofion anifeiliaid mewn Buddiannau Cistanche

1.2.1 Anifeiliaid arbrofol

Prynwyd 60 o lygod gwrywaidd Kunming, gradd SPF, sy'n pwyso 18-22 g, o Ganolfan Anifeiliaid Arbrofol Prifysgol Feddygol Xinjiang. Rhif y drwydded gynhyrchu yw SCXK (newydd) 2018-0002, rhif y drwydded defnydd yw SYXK (newydd) 2018-0003, a'r rhif cymeradwyo moeseg: IACUC-20210326-10.

1.2.2 Prif adweithyddion

Cistanche phenethanoid glycosides (CPhGs) (a brynwyd o Xinjiang Hetian Dichen Pharmaceutical and Biological Co, Ltd., rhif swp: 20180502); Tabledi Cyfansawdd Biejia Ruangan (cynnyrch Mongolia Furui Technology Co, Ltd); laminin llygoden (LN), Llygoden asid hyaluronig (HA), llygoden math III procollagen (PCIII), llygoden math IV colagen (Col IV) ELISA kit.

(Beijing Jianglai Reagent Co., Ltd., rhif swp: JL20286-96T, JL2406-96T, JL20169-96T, JL20128-96T); Datrysiad staenio trichrome Masson (Zhuhai Besso, rhif swp: 20210115); Pecyn staenio hematoxylin ac eosin (AU) (Solebo HE dyedColor Kit G1120); SuperReal Fflworoleuedd Meintioli Meistr Cymysgedd Adweithydd Argraffiad Lliw (SYBR Green, Tiangen FP205-02); Pecyn RT FastKing (Gyda gDNase, Tiangen KR116-02); Transzol i fyny (Full Gold ET111-01).

1.2.3 Prif Offerynnau

HZQ-C llawn-lleithder ysgydwr diwylliant tymheredd cyson (Shanghai Yiheng Offeryn Gwyddonol Co, Ltd); DK-8D gwresogi trydan baddon dŵr tymheredd cyson (Jiangsu Jinyi Instrument Technology Co, Ltd.); HC-3018R allgyrchydd oergell cyflym (Anhui Zhongke Zhongjia Science and Technology Co, Ltd.) Instrument Co, Ltd.); Darllenydd microplate Flash Varioskan, QuantStudio 6 offeryn PCR amser real (Thermo Fisher Scientific, UDA); Retsch Grinder meinwe trwygyrch uchel MM400; ST5020 peiriant staenio aml-swyddogaethol (Shanghai Leica Trading Co, Ltd).

1.2.4 Dull arbrofol

Rhannwyd anifeiliaid ar hap yn grŵp rheoli arferol, grŵp model, grŵp rheoli cadarnhaol (840 mg / kg), grŵp dos uchel CPhGs (CPhGs-H, 700 mg / kg), grŵp dos canolig (CPhGs-M, 350 mg / kg) , Grŵp dos isel (CPhGs-L, 175 mg/kg);

Rhoddwyd Tabledi Cyfansawdd Biejia Ruangan i'r grŵp rheoli cadarnhaol, gan gyfeirio at gyfarwyddiadau'r cyffur (4 tabledi ar y tro, 3 gwaith y dydd; 0.5 g fesul tabled) a'r "Tiwtorial Arbrawf Swyddogaethol" a gyhoeddwyd gan y People's Military Medical Publishing House. Trosi; Mae grwpiau dos uchel, canolig ac isel CPhGs yn seiliedig ar lenyddiaeth berthnasol [17] a chanlyniadau cyn-arbrawf, ac mae grwpiau dos uchel, canolig ac isel o lygod mawr CPhG (500, 250, 125 mg/kg) yn cael eu trosi yn seiliedig ar ddosau llygod mawr. a llygod Cymhareb o 1:1.4, wedi'i drawsnewid yn grwpiau dogn uchel, canolig ac isel o CPhGs (700, 350, 175 mg/kg), 10 llygod ym mhob grŵp; chwistrellwyd y grŵp rheoli arferol gyda'r un faint o halwynog arferol, a chwistrellwyd y llygod yn y grwpiau eraill i gyd chwistrellwyd yr holl lygod yn fewnberitoneol gyda hydoddiant olew olewydd CCl4 10 y cant (5 mL / kg), ddwywaith yr wythnos am 8 wythnos, i sefydlu model llygoden ffibrosis yr afu; rhoddwyd dŵr distyll i'r grŵp rheoli arferol a'r grŵp model trwy gavage, a rhoddwyd dŵr distyll i'r grwpiau eraill trwy gavage. Rhoddwyd y cyfan trwy gludydd ar y dos penodol am 8 wythnos.

1.2.5 Canfod mynegai biocemegol

Canfuwyd cynnwys LN, HA, PCIII, a Col IV mewn homogenad meinwe'r afu trwy ddull ELISA gyda darllenydd microplate, a dilynwyd cyfarwyddiadau'r pecyn yn llym.

1.2.6 Arsylwi histopatholegol o'r afu

Gosodwyd meinwe'r afu gyda 4 y cant o hydoddiant paraformaldehyde, wedi'i ddadhydradu mewn ethanol, wedi'i fewnosod mewn paraffin, ac yna wedi'i dorri i mewn, a'i staenio ag AU a Masson i arsylwi ar adrannau meinwe'r afu.

1.2.7 Canfod trawsgrifiad mRNA PI3K ac AKT trwy PCR meintiol fflworoleuedd amser real

Tynnwyd meinwe iau'r llygoden a'i ychwanegu gydag adweithydd Transzol i fyny i dynnu cyfanswm RNA meinwe iau'r llygoden. Defnyddiwyd RT-PCR i bennu trawsgrifiad mRNA o PI3K ac AKT yn afu llygoden. Dangosir y dilyniannau genynnau cysylltiedig yn Nhabl 1

1.2.8 Dulliau ystadegol

SPSS 21. Defnyddiwyd 0 ar gyfer dadansoddiad ystadegol, a mynegwyd y data fel gwyriad safonol cymedr ± (x ± s);

ANOVA un ffordd ar gyfer cymharu modd rhwng grwpiau; fel arall, defnyddiwyd prawf swm rheng, a lefel y prawf oedd=0.05.

2 ganlyniad o Arbrawf Swyddogaeth Cistanche

2.1 Sgrinio cynhwysion actif Cistanche

Mae cyfanswm o 75 o gydrannau hysbys oCistancheeu sgrinio allan, ac OB Gosodwyd mwy na neu'n hafal i 30 y cant a DL Mwy na neu'n hafal i 0.18 fel y trothwyon sgrinio, a chafwyd 8 cydran gweithredol cymwys: -sitosterol ac arachidonate. , Suzilactone (suchilactone), Liriodendron resin B dimethyl ether (yangambin), quercetin (quercetin), dipicaine (marckine), verbascoside (acteoside), echinacoside (echinacoside), cafwyd cyfanswm o 157 o seiliau targed o gronfa ddata Uniprot

(gweler Ffigur 1).

Ffig. 1 Cistanches Herba-cynhwysyn actif map targed

2.2 Adeiladu rhwydwaith a dadansoddi "cydrannau gweithredol Cistanche deserticola - ffibrosis yr afu - targedau protein"

The GeneCards and OMIM databases were searched to obtain 1 005 targets related to liver fibrosis, and the 157 potential protein targets of Cistanche deserticola and 1 005 protein targets related to liver fibrosis were deduplicated, and Venn diagrams were drawn ( See Figure 2), import 92 common targets into the String database, and perform visual processing to construct a network of "active components of Cistanche deserticola - liver fibrosis - protein targets" (see Figure 3), in which the core targets are: AKT, ICAM1, MMP9, BCL-2, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA, TGFB1, CASP9, etc. degree>Defnyddiwyd 50 fel y trothwy, a lluniwyd y diagram rhwydwaith rhyngweithio protein yn ôl gwerth gradd a sgôr cyfuno (gweler Ffigur 4).

Ffig. 2 Diagram Venn o darged cyffredin clefyd cyffuriau o Cistanches Herba wrth drin ffibrosis yr afu

Ffig. 3 Diagram rhwydwaith o "glefyd targed cydran-cyffredin" o Cistanches Herba wrth drin ffibrosis yr afu

2.2 Adeiladu rhwydwaith a dadansoddi "cydrannau gweithredol o dargedau ffibrosis-yr iau Cistanche"

Cafodd cronfa ddata GeneCards a OMIM 1 005 o dargedau yn ymwneud â ffibrosis yr afu, dad-ddyblygu 157 o dargedau protein posibl o Cistanche deserticola a 1 005 targedau protein yn ymwneud â chlefyd ffibrosis yr afu, a lluniwyd diagramau Venn (gweler Ffigur 2), mewnforio 92 targedau cyffredin i'r gronfa ddata Llinynnol, a pherfformio prosesu gweledol i adeiladu rhwydwaith o "gydrannau gweithredol o Cistanche deserticola - ffibrosis yr afu - targedau protein" (gweler Ffigur 3), a'r targedau craidd yw: AKT, ICAM1, MMP9, BCL{ {10}}, ADRB2, CASP3, MEHEFIN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA

Nodyn: Mae ardal y nod yn y ffigur yn cynrychioli gwerth gradd, ac mae'r trwch cysylltiad yn cynrychioli'r gwerth sgôr cyfunol.

2.3 Dadansoddiad cyfoethogi GO a KEGG

Trwy gronfa ddata David, mewnforiwyd y 92 targed protein wrth drin ffibrosis yr afu/iau i'r gronfa ddata ar gyfer dadansoddiad cyfoethogi (gweler Ffigur 5). Dewiswch y deg cofnod uchaf gyda gwerthoedd Cyfrif cydrannau cellog, prosesau biolegol a swyddogaethau moleciwlaidd. Yn eu plith, mae prosesau biolegol yn cynnwys rheoleiddio cadarnhaol o drawsgrifio DNA, rheoleiddio negyddol apoptosis, heneiddio, ymateb llidiol, rheoliad cadarnhaol o amlhau celloedd, apoptosis, trawsgludiad signal, ac ati Mae swyddogaethau moleciwlaidd yn bennaf yn cynnwys rhwymo ensymau, proteinau, ffactorau trawsgrifio a'r yr un proteinau, rhwymo DNA, rhwymo ïon sinc, ac ati; Mae cydrannau celloedd yn bennaf yn cynnwys cnewyllyn, cytoplasm, amgylchedd allgellog, pilen plasma, cellbilen, mitocondria, ac ati.

Cafodd yr 20 llwybr uchaf eu sgrinio ar sail cronfa ddata David a’r gwerth Count, a chyflawnwyd y dadansoddiad cyfoethogi llwybr ar dargedau posibl Cistanche deserticola wrth drin ffibrosis yr afu (gweler Ffigur 6). Y prif lwybrau a geir yw: PI3K-AKT (gweler Ffigur 7), llwybr signalau TNF, llwybr signalau HBV, ac ati.

Ffig. 5 Dadansoddiad GO o dargedau posibl Cistanches Herba wrth drin ffibrosis yr afu

Ffig. 6 Dadansoddiad cyfoethogi o lwybr signal KEGG

Ffig. 7 Llwybr PI3K-AKT o Cistanches Herba wrth drin ffibrosis yr afu

2.4 Adeiladu rhwydwaith llwybr-targed ffibrosis cynhwysyn-afu gweithredol Cistanche

Prosesu gweledol i adeiladu rhwydwaith o "gydrannau gweithredol o ffibrosis-targed-lwybr-targed yr afu Cistanche deserticola" (gweler Ffigur 8).

Ffig. 8 Cynhwysyn gweithredol Cistanches Herba-afu ffibrosis-llwybr targed-protein

Nodyn: Mae coch yn cynrychioli ffibrosis yr afu; Mae gwyrdd yn cynrychioli cydrannau gweithredol Cistanches Herba; Mae oren yn cynrychioli llwybr, glas yn cynrychioli targed protein, ac mae segment llinell yn cynrychioli'r berthynas rhwng Cistanches Herba a ffibrosis yr afu

2.5 Canlyniadau tocio moleciwlaidd cydrannau gweithredol Cistanche wrth drin ffibrosis yr afu

Y ddwy gydran weithredol bwysicaf oCistanche, Verascoside ac Echinacea, wedi'u tocio'n foleciwlaidd gyda'r targedau albwmin allweddol ICAM1, AKT1, a MMP9 gan feddalwedd Autodock. Dangosir yr egni rhwymo yn Nhabl 2. Mewnforiwyd y canlyniadau i feddalwedd Pymol ar gyfer delweddu, a dangosodd y canlyniadau tocio moleciwlaidd fod verbasin ac AKT yn ffurfio bondiau hydrogen yn safleoedd ASN-54, TYR-272, a LYS-297; Yn ffurfio bond hydrogen yn y safle 10; Mae Verbasin ac MMP9 yn ffurfio bond hydrogen yn yr LEU-188, ALA-189, GLU-227, HIS-230, HIS-236, HIS-226 swyddi;

Mae Echinacea yn ffurfio bondiau hydrogen ag AKT mewn safleoedd GLU-356, HIS-297, ASN-296, ALA-226, LYS-294, a GLU-228 ; mae echinacoside yn ffurfio bondiau hydrogen ag ICAM1 ar safleoedd DA-7, DT-8 , DT-11, DT-12, a DC-13 yn ffurfio bondiau hydrogen;

Mae Verbasin yn ffurfio bondiau hydrogen gyda MMP9 mewn safleoedd HIS-230, HIS-236, HIS-226, GLU-227, ALA-189, LEU-188, TYR-248 (gweler Ffigur 9).

Tabl 2 Egni rhwymol rhwng y prif gydrannau gweithredol a thargedau protein allweddol (kJ/mol)

Ffig. 9 Canlyniadau tocio moleciwlaidd

Sylwer: AF yw'r diagramau tocio moleciwlaidd o acteoside ac AKT, acteosid ac ICAM1, acteosid aMMP9, echinacoside ac AKT, echinacoside ac ICAM1, ac echinacoside ac MMP9, yn y drefn honno.

2.6 Gwahaniaethau yng nghynnwys LN, HA, PCIII a Col IV ym mhob grŵp o lygod

O'i gymharu â'r grŵp arferol, cynyddwyd cynnwys LN, HA, PCIII a Col IV yn y grŵp model, ac roedd y gwahaniaeth yn ystadegol arwyddocaol (P<0.01). the="" contents="" of="" pciii="" and="" col="" iv="" (p="" <="" 0.01)="" indicated="" that="" cphgs="" had="" an="" anti-hepatic="" fibrosis="" effect="" (see="" table="" 3,="" figure="">

Tabl 3 Gwahaniaethau yng nghynnwys LN, HA, PCIII a Col IV mewn llygod o wahanol grwpiau (x  ± s, n = 9)

Nodyn: O'i gymharu â grŵp rheoli arferol,#P<0.01; compared="" with="" model="" group,="">**P<>

2.7 Arsylwi histopatholegol o'r afu

Staenio AU (gweler Ffigur 10): Yn y grŵp arferol, roedd morffoleg hepatocytes yn normal, roedd y lobiwlau hepatig yn gyfan, ac nid oedd dosbarthiad dirywiad a necrosis hepatocytes a chelloedd llidiol. Roedd ardal y porth i'w gweld yn glir, ac roedd hepatocytes wedi'u trefnu'n daclus o amgylch y wythïen ganolog. Roedd gan y grŵp model necrosis punctate hepatocyte amlwg, ymlediad, oedema, ymdreiddiad celloedd llidiol a nifer fawr o ronynnau eosinoffilig. Grwpiau dos uchel, canolig ac isel a pharau positif

Yn y grŵp rheoli, roedd gradd necrosis hepatocytes yn ysgafn, a gostyngwyd y gronynnau eosinoffilig yn sylweddol.

Staenio masson (gweler Ffigur 11): roedd gan y grŵp arferol strwythur morffolegol cyflawn o hepatocytes, a dim ond ychydig o ffibrau colagen a welwyd yn wal y llong ar ôl staenio colagen; yn y grŵp model, roedd nifer fawr o pseudolobules a ffurfiwyd gan ffibrau glas yn amgylchynu ardal y porth, a gwelwyd nifer fawr o wactod. Gallai'r grwpiau dos uchel, canolig ac isel a'r grŵp rheoli cadarnhaol leihau'n sylweddol lefel y ffibrosis hepatig ym meinwe'r afu, a gostyngwyd y ffibrau glas o amgylch ardal y porth yn sylweddol.

Ffig. 10 Effaith CPhGs ar newidiadau histopatholegol hepatig mewn llygod â ffibrosis yr afu a achosir gan CCl4

Nodyn: A: Normal; B: Model; C: Grŵp rheoli cadarnhaol; D: CPhGs-H; E: CPhGs-M; F: CPhGs-L. Yr un peth isod.

Ffig. 11 Effaith CPhGs ar newidiadau ffibrau colagen ym meinwe iau llygod â ffibrosis yr afu a achosir gan CCl4

2.8 Canfod mynegiant mRNA PI3K ac AKT trwy PCR meintiol fflworoleuedd amser real

O'i gymharu â'r grŵp rheoli arferol, cafodd mynegiant PI3K ac AKT mRNA ym meinwe iau'r llygod yn y grŵp model ei uwch-reoleiddio'n sylweddol (P<>

O'i gymharu â'r grŵp model, bu gostyngiad sylweddol yn y mynegiant mRNA o PI3K ac AKT yn y grŵp rheoli cadarnhaol a'r grwpiau dos uchel, canolig ac isel o gyfanswm glycosidau alcohol phenethyl o Cistanche deserticola (P<0.01) (table="">

Tabl 4 Trawsgrifiad o PI3K ac AKT mRNA mewn meinwe iau llygoden (x± s, n = 9)

Nodyn: O'i gymharu â grŵp rheoli arferol, #P<0.01; compared="" with="" model="" group,=""><>

3 Trafodaeth a chasgliadau

Mae proses ddatblygu ffibrosis yr afu yn gymhleth, ac mae cytocinau amrywiol a llwybrau cellog yn "cyfathrebu" ac yn dylanwadu ar ei gilydd, gan ffurfio rhwydwaith cymhleth o ryngweithiadau. Felly, mae therapi un-targed ac un sianel yn anodd gweithio. Mae gan feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadol nodweddion gweithredu aml-gydran, aml-darged a chymhleth, er mwyn rheoleiddio'r corff dynol yn systematig. Mae Cistanche deserticola yn cael yr effaith o amddiffyn yr afu. Ceir cynhwysion gweithredol Cistanche deserticola trwy'r gronfa ddata o feddyginiaeth draddodiadol Tsieineaidd TCMSP a chronfeydd data eraill: Verbasin, echinacoside, -sitosterol, asid arachidonic, suzilactone, Liriodendron Resinol B dimethyl ether, quercetin, dipicaine.

Mae astudiaethau wedi dangos bod glycosidau ffenylethanoid oCistancheyw prif gydrannau gweithredolCistanche, ymhlith yr ystyrir echinacoside a verbascoside fel prif gydrannau bioactifCistanche. Mae effaith glycosidau chrysanthemum yn gysylltiedig âproblem afu

targed a'i wirio gan docio moleciwlaidd.

Echinaceaaverbscoside, fel y prif gydrannau yn Cistanche, chwarae effaith ffibrosis gwrth-hepatig ganrheoleiddio'r apoptosiso gelloedd stellate hepatig. Gall ICAM1, AKT, ac MMP9 fod yn dargedau echinacoside a verbasin wrth drin ffibrosis yr afu. Fel ffactor adlyniad celloedd, mae ICAM1 yn cael ei fynegi'n helaeth yn achos anaf i'r afu. Gall atal ffibrosis yr afu trwy atal gorfynegiant ICAM1. datblygiad. Mae kinase protein serine / threonine (AKT) yn kinase targed pwysig i lawr yr afon o PI3K. Mae AKT wedi'i actifadu yn cael ei actifadu ymhellach i hyrwyddo toreth o gelloedd stellate hepatig a chyflymu dilyniant ffibrosis yr afu.

I'r gwrthwyneb, bydd atal AKT yn atal datblygiad ffibrosis yr afu; Gall MMP{0}} ddiraddio matrics colagen arferol yr afu, dinistrio amgylchedd mewnol celloedd yr afu, hyrwyddo actifadu celloedd stellate hepatig, secretu llawer iawn o golagen, a hyrwyddo datblygiad ffibrosis yr afu. achosion o ffibrosis yr afu; yn yr arbrawf hwn, mae'r defnydd o CCl4 i sefydlu model llygoden o ffibrosis yr afu yn un o'r dulliau modelu clasurol. Mae CCl4 yn cael ei chwistrellu i gorff yr anifail trwy chwistrelliad mewnperitoneol. Cynyddwyd cynnwys PCIII a Col IV yn sylweddol; o gymharu â'r grŵp model, gostyngodd grwpiau dos uchel, canolig ac isel y CPhG yn sylweddol gynnwys LN, HA, PCIII a Col IV; Dangosodd canlyniadau profion AU a Masson, o gymharu â'r grŵp model, y CPhGs uchel, canolig ac Yn y grŵp dos isel, roedd gradd necrosis hepatocyte yn ysgafn, gostyngwyd y gronynnau eosinoffilig yn sylweddol, ac roedd y ffibrau glas o amgylch ardal y porth yn ysgafn. lleihau'n sylweddol. Dangosodd y canlyniadau uchod y gallai ataliad ffibrosis yr afu gan gyfanswm glwcosidau Cistanche deserticola fod yn gysylltiedig â thargedau ICAM1, AKT ac MMP9, ac mae angen canfod mynegiant proteinau cysylltiedig ymhellach.

Mae nifer o ffactorau'n achosi ffibrosis yr afu. Yn eu plith, llwybr PI3K-AKT yw'r llwybr o'r radd flaenaf a geir trwy ddadansoddiad cyfoethogi llwybr. Mae llwybr signalau PI3K-AKT yn ymwneud â rheoleiddio amlhau celloedd ac apoptosis, gan achosi tumorigenesis dynol, a genyn HBV Mae'n un o'r llwybrau pwysig ar gyfer trin ffibrosis yr afu. Gall llwybr PI3K-AKT ysgogi ffurfio pibellau gwaed hepatig, gwella cyflenwad gwaed, ailadeiladu matrics allgellog, rheoleiddio awtoffagy, atal apoptosis hepatocytes, a hyrwyddo lluosogiad hepatocytes, a thrwy hynny arwain at ffibrosis yr afu.

EchinaceaaAr lafaryn gallu atal amlhau ac actifadu celloedd yr afu trwy reoleiddio targedau ICAM1, AKT ac MMP9, yn y drefn honno, a chyfanswmActeosidemewnglwcosidau ffenylethyloCistanchegall ymyrryd â ffibr yr afu trwy gymryd rhan yn y metaboledd ynni,amlhau ac apoptosis o gelloedd yr afu. O gymharu â'r grŵp arferol, roedd lefelau mynegiant PI3K ac AKT mRNA ym meinwe iau'r llygod yn y grŵp model wedi'u huwchreoleiddio'n sylweddol; o'i gymharu â'r grŵp model, roedd cyfanswm glycosidau ffenylethanol Cistanche deserticola yn uchel, canolig ac isel. Gostyngwyd mynegiadau mRNA o PI3K ac AKT yn sylweddol yn y grŵp dos, a gallai'r mecanwaith atal actifadu'r llwybr PI3K-AKT ac oedi dilyniant ffibrosis yr afu.

Acteosideyn cael eu galw hefyd yn ergosteroside a verbascoside. Yn perthyn i gyfansoddion glycosid ffenylpropanoid. Mae'n cael ei dynnu o'r coesau cigog sych gyda dail cennog oCistanche tubulosaYC Ma. Mae'n un o brif gynhwysion effeithiol dyfyniad Cistanche.

Acteosideyn ddosbarth o gyfansoddion â gweithgaredd biolegol cryf, sydd ag effeithiau ffisiolegol amrywiol megis gwrthlidiol, gwella imiwnedd, gwrth-anocsia, chwilota radicalau rhydd, atgyweirio basau DNA, a thrin ffibrosis yr afu.

cliciwch yma i wybod Buddion Cistanche ar ddeiseb afu

I gloi, cyfanswmglycosidau ffenylethanol o Cistancheyn gallu lleddfu ffibrosis yr afu a achosir gan CCl yn effeithiol mewn llygod, a gall y mecanwaith fod yn gysylltiedig ag amlhau ac actifadu celloedd stelad hepatig a gyfryngir gan lwybr signalau PI3K-AKT. Gosod y sylfaen ar gyfer effeithiau ffarmacolegol Cistanche.