Astudio Swyddogaeth Neuroendocrine-Imiwnedd Cistanche Deserticola A'i Gynhyrchion Stemio Gwin Reis mewn Model Llygoden Fawr a Anogir â Glucocorticoid-Ⅱ

3.2.4. Imiwnohistocemeg

Mae apoptosis niwronol yn cael ei reoli gan lawer o enynnau apoptotig ac antiapoptotig, yn bennaf y genyn hyrwyddo apoptosis Bax a genynnau gwrthiapoptotig y teulu genynnau Bcl-2. Lleolir Bcl-2 mewn organynnau adweithiol sy'n cynhyrchu ocsigen fel y mitocondria, reticwlwm endoplasmig, a philenni niwclear. Ychydig o effaith a gaiff Bcl-2 ar radicalau rhydd o ocsigen ond gallatal difrod ocsideiddiol mewn celloedd. Mae Bax yn cludo o'r cytoplasm i'r bilen mitocondriaidd, yn newid strwythur y bilen mitocondriaidd, ac yn hyrwyddo rhyddhau cytochrome c ac anwythiad apoptosis.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

Roedd mynegiant yn y cytoplasm adrenal o brotein Bax a Bcl-2. Roedd y staen yn dangos pob gronyn melyn. O'i gymharu â grŵp BC, cynyddodd dwysedd optegol cyfartalog y protein Bax yn y grŵp MC yn sylweddol (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).

Mae Ffigur 5(b) yn dangos, o gymharu â grŵp BC, fod dwysedd optegol cyfartalog Bcl-2 protein yn y grŵp MC wedi gostwng yn sylweddol (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).

Mae'r protein caspase-3 wedi'i leoleiddio'n bennaf yn y cytoplasm yn ei ffurf wreiddiol mewn meinweoedd normal ac mae ganddo fynegiant isel. Mae arwyddion cadarnhaol yn felyn golau neu felyn brown. O'i gymharu â mynegiant y grŵp BC, cynyddodd mynegiant caspase-3 yn y grŵp MC yn sylweddol (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).

Mewn meinweoedd arferol, lleihawyd mynegiant y genyn Fas, ac roedd y signal cadarnhaol ar gyfer hybrideiddio in situ yn felyn brown. Fel y dangosir yn Ffigur 5(d), o'i gymharu â grŵp BC, cynyddodd dwysedd optegol cyfartalog protein Fas yn y grŵp MC (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).

Mae'r protein FasL wedi'i leoli'n bennaf yn y gellbilen neu'r cytoplasm, ac mae ei signalau positif yn frown. O'i gymharu â grŵp BC, cynyddodd dwysedd optegol cyfartalog y genyn FasL yn y grŵp MC yn sylweddol (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).

Dangosodd y canlyniadau y gallai CD a WCDachosi apoptosis mewn celloedd llidiola lleihau difrod adrenal trwy hyrwyddo mynegiant y protein FasL a rhwymo i'r protein Fas, actifadu protein caspase-3 a sbarduno rhaeadru caspase. Effaith y grŵp WCD-HD oedd y gorau.

3.3. Pennu Gweithrediad Imiwnedd

3.3.1. Mynegai Organ Imiwn

O'i gymharu â rhai'r grŵp BC, gostyngodd cyfernod thymws a mynegai dueg y grŵp MC yn sylweddol (P< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

3.3.2. Canfod Is-setiau Lymffosyt T Mewn Gwaed Ymylol

Roedd canran y celloedd CD4+ yn y cwadrant chwith uchaf a chelloedd CD8+ yn y cwadrant isaf dde yn y CC a phob grŵp cyffuriau yn uwch na'r un yn y grŵp MC. O'i gymharu â'r grŵp BC, gostyngodd y gymhareb CD4+ThCD8+ yn sylweddol yn y grŵp MC (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).

3.3.3. Pennu Lefel IL-10, IL-6, IL-2, TNF-Α, Ac IFN-C Mewn Serwm

Dengys Ffigur 8, o gymharu â lefel y grŵp BC, fod lefel IL-6, TNF- , ac IFN-c wedi cynyddu’n sylweddol (P< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.

3.3.4. Canlyniadau Arbrawf Arsylwi Microsgop Meinwe Lymus

Mae Ffigur 9 yn dangos bod nifer fawr o lymffocytau yn y grŵp BC. Roedd lymffocytau a reticulocytes wedi'u trefnu'n rhydd yn y canol gyda thymocytau crwn neu hirgrwn gwasgaredig. Nid oedd unrhyw necrosis, dim ymdreiddiad celloedd llidiol, a dim newidiadau annormal.

Dangosodd y grŵp MC lawer iawn o feinwe necrosis lymffoid, gyda threfniant anhrefnus o lymffocytau a reticulocytes yn y canol. Diflannodd thymocytau crwn neu hirgrwn, roedd dirywiad celloedd enfawr neu necrosis yn amlwg, ac roedd ymdreiddiad celloedd llidiol gyda newidiadau patholegol annormal.

Yn y grwpiau CD, roedd nodweddion morffolegol lymffocytau wedi dychwelyd i normal, ac roedd trefniant lymffocytau canolog a reticulocytes bron yn normal. Roedd thymocytau crwn neu hirgrwn wedi gwella, ond roedd nifer fach o lymffocytau dirywiol neu necrotig a chelloedd llidiol ymdreiddio yn parhau.

Yn y grwpiau WCD a'r grŵp PC, cafodd nodweddion morffolegol lymffocytau eu hatgyweirio'n well. Roedd y lymffocytau a'r reticulocytes yn y canol wedi'u halinio'n dda, roedd y thymocytau crwn neu hirgrwn bron yn normal, ond roedd nifer fach o lymffocytau ymdreiddio a dirywiol yn parhau.

3.4. Mynegiant Genynnau Protein CaM

Ystyriwyd gwerth RQ (CaM mRNA -actin mRNA) i archwilio mynegiant CaM mRNA. RQ grŵp BC oedd 1. Cynyddodd mynegiant CaM mRNA yn yr hypothalamws yn y grŵp MC yn sylweddol (P< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.

4. Trafodaeth

Mae'r Pharmacopoeia Tsieineaidd [2] yn cofnodi y gellir defnyddio CD a WCD yn y clinig fel y prif fathau o ddarnau decocting. Ar ol ei stemio gyda gwin reis, yeffeithiau gwrth-heneiddio a thonhau arennau-yangeu gwella. Trwy UPLC-QqQ-MS, canfuom y newidiadau meintiol yn y sylfaen deunydd cemegol yn ystod y broses o stemio gwin reis. Roedd glycosidau iridoid yn ansefydlog a gostyngodd cynnwys y glycosidau hyn, gan ddod yn anganfyddadwy hyd yn oed. Newidiodd cynnwys glycosidau ffenylethanol hefyd, a allai achosi newidiadau yn y ffarmacodynameg a'r effaith glinigol.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

Cafodd y model diffyg arennau-yang clasurol ei ailadrodd gan chwistrelliad isgroenol o corticosterone [19]. Gallai corticosterone gorddos atal cyfrinach CRH yn yr hypothalamws. Yn y cyfamser, rhwystrwyd cyfrinach ACTH hefyd. Gostyngodd lefel yr hormon cortecs adrenal, ac felly, gostyngwyd swyddogaeth echel HPA. Mae hypofunction yr echel HPA yn nodwedd gyffredin o ddiffyg aren-yang [20]. Yna mae'r llygod mawr yn dangos ffenomenau "disbyddiad" ac mae'r symptomau'n cyd-fynd â rhai diffyg aren-yang yn y clinig.

Yn y grŵp MC, gostyngodd lefel CRH, ACTH, T, a CORT mewn serwm llygod mawr yn sylweddol (P< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.

Mae modiwleiddio cyfran aelodau teulu Bcl-2 yn un o'r mecanweithiau craidd y mae FasThFasL yn eu defnyddio i gyfryngu'r llwybr derbynnydd marwolaeth, ac mae'r teulu Bcl-2 yn rheoleiddio'r llwybr mitocondriaidd [21]. Mae ffactor Bcl-2 sy’n atal apoptosis a ffactorau sy’n achosi apoptosis, fel Bax, i gyd yn perthyn i’r teulu Bcl-2 [22]. Gellir pennu apoptosis celloedd gan gymhareb gymharol ffactorau sy'n atal apoptosis a ffactorau sy'n achosi apoptosis [23]. Mae gan mitocondria swyddogaeth pwyntiau gwirio canolog ar gyfer sawl math o apoptosis [24]. Dangosodd yr astudiaeth bresennol y gallai CD-MD a WCD ddiddwytho mynegiant Bax a chynyddu Bcl-2 igwella'r diffyg aren-yang. Fas yw'r prif dderbynnydd marwolaeth sy'n achosi apoptosis trwy glymu â'r ligand Fas (FasL) [25]. Cynyddodd mynegiant Fas a FasL yn y grŵp MC, tra cynyddodd y mynegiant hwn yn sylweddol yn y grŵp WCD-MD (P< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).

Mae diffyg swyddogaeth imiwnedd yn un o'r amlygiadau pwysig o ddiffyg aren-yang [28]. Yn yr astudiaeth hon, canfuom fod mynegai dueg a thymws y grŵp WCD-MD wedi gwella'n sylweddol (P< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).

Echel HPA yw'r system reoleiddio bwysicaf oherwydd ei bod yn rheoleiddio secretiad glucocorticoid a'r system endocrin i gynnal swyddogaeth secretory y cortecs adrenal [32]. Roedd gorfynegiant mRNA CaM mewn meinwe hypothalamws yn gysylltiedig â diffyg yang aren. Gallai CD a WCD rwystro'r sianeli calsiwm, atal mynegiant CaM mRNA yn yr hypothalamws, a lleihau mewnlifiad calsiwm, gan leihau gweithgaredd cymhleth CaM.

Mae ffurfio diffyg aren-yang yn broses datblygu clefyd cronig. Nid yw arennau bellach yn gysyniad cwbl anatomegol, ac mae'n derm cyffredinol ar gyfer imiwnedd niwroendocrin a systemau genhedlol-droethol. Mae rhwydwaith niwroendocrine-imiwn (NEI) yn system reoleiddio integredig bwysig [33]. Gall CD a WCD reoleiddio swyddogaeth echel HPAT a gwella adferiad diffyg aren-yang. Mae'r canlyniad hwn yn darparu'r sail arbrofol ar gyfer atal a thrin diffyg aren-yang yn glinigol.