Astudio Swyddogaeth Neuroendocrine-Imiwnedd Cistanche Deserticola A'i Gynhyrchion Stemio Gwin Reis mewn Model Llygoden Fawr a Anogir â Glucocorticoid-Ⅰ

1. Rhagymadrodd

Cistanche deserticola, a elwir yn "ginseng anialwch," yn feddyginiaeth Tseiniaidd traddodiadol sydd wedi cael ei ddefnyddio ers canrifoedd fel perlysiau yang-tonic ar gyferbywiogi'r aren a chryfhau'r yang[1]. Wyth rhywogaeth ac un amrywiad oCistanche Herba wedi'u cofnodi yn Tsieina a dim ondCistanche deserticolaYC Ma aCistanche tubulosa(Schenk) Mae Wight yn cael eu cofnodi yn y Pharmacopoeia Tsieineaidd [2]. Dangosodd astudiaethau ffarmacolegol hynnyCistanches Herbaarddangos neuroprotective [3], immunomodulatory [4], cardioprotective [5], antifatigue [6], gwrthlidiol [7], hepatoprotective [8], gwrthocsidiol [9], gwrthfacterol [10], carthydd [11], ac antitumor effeithiau [12]. Yr eangMae sbectrwm o weithgareddau biolegol adroddedig y genws hwn wedi'i briodoli i'w gyfansoddiad ffytocemegol cymhleth ac amrywiol.Cistanche deserticolayn cynnwys glycosidau ffenylethanol, iridoidau, polysacaridau [13], ac ati Mae cynnwys glycosidau ffenylethanoid yw'r uchaf yn y deunyddiau meddyginiaethol gwreiddiol [14].

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER YMWELD Â'R AREN PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

Mae prosesu Materia Medica Tsieineaidd (CMM) yn dechneg fferyllol draddodiadol i gyflawni'r gwahanol ofynion ar gyfer trin, dosbarthu a gwneud paratoadau yn unol â theori meddygaeth draddodiadol Tsieineaidd. Mae'r cynhyrchion hynny wedi'u prosesu yn cael eu henwi'n ddarnau decoction, a ddefnyddir mewn clinigau. Nod prosesu yw gwella effeithiolrwydd i leihau gwenwyndra cyffuriau crai. Cofnododd Pharmacopoeia Tsieineaidd 2015 y gellid defnyddio sleisys trwchus Cistanche (CD) a Cistanche wedi'i stemio â gwin reis (WCD) fel darnau decoction yn y clinig. Dangosodd ein grŵp ymchwil fod yr effaith garthydd wedi'i lleddfu, a gwellwyd yr effeithiau gwrth-heneiddio a bywiogi aren-yang ar ôl i Cistanche gael ei stemio â gwin reis [15].

Mae swyddogaeth yr echelin hypothalamws-pituitary-adrenal chwarren-thymus (HPAT) yn anhrefnus yn syndrom diffyg yr arennau-yang [16]. Mae gan gleifion â diffyg aren-yang hefyd gamweithrediad imiwnedd helaeth. Mae cysylltiad agos rhwng camweithrediad echel HPA a diffyg imiwnedd. Mae theori rhwydwaith niwroendocrine-imiwn (NEI) yn dangos bod y systemau imiwnedd a niwroendocrin yn rhannu llawer o ligandau a derbynyddion [17], ac mae'r hypothalamws yn cael ei ystyried yn golyn i gysylltu'r niwroendocrin â'r systemau imiwnedd.

Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ailadrodd diffyg aren-yang mewn llygod mawr model gyda chwistrelliad corticosteroid alldarddol ac archwilio mecanwaith y diffyg aren-yang mewn ymateb i wahanol gynhyrchion wedi'u prosesu o Cistanche deserticola o safbwynt swyddogaeth endocrin-imiwn.

2. Defnyddiau a Dulliau

2.1. Deunyddiau ac Adweithyddion

Casglwyd Cistanche deserticola gan Alashan Neimenggu yn 2019.5 a'i nodi fel coesau cigog sych Cistanche deserticola YC Ma gan yr Athro Yanjun Zhai (Ysgol Fferylliaeth, Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Liaoning, Tsieina). Cadwyd y sbesimenau taleb yng Nghanolfan Technoleg Peirianneg Prosesu Liaoning.

Prynwyd cyfansoddion safonol o ajugol gan Chengdu Pure Chem-Standard Co., Ltd. (Chengdu, Tsieina); cistanoside F,echinacoside, cistanoside A, ac isoacteosideeu prynu oddi wrth Must Company (Sichuan Tsieina); prynwyd acteoside oddi wrth Dalian Meilun Bio. Co, Ltd (Dalian, Tsieina). Prynwyd acetonitrile gradd MS a methanol gan Merck KGaA (Darmstadt, yr Almaen). Prynwyd asid fformig gradd HPLC gan Merck KGaA (Darmstadt, yr Almaen). Prynwyd gwin reis gan Zhejiang Brand Tower Shaoxing Wine Co, Ltd (Zhejiang, Tsieina).

Corticosterone (CAS: 50-22-6, purdeb > 98%, TCI Shanghai Development Ltd. Co.), chinkuei shin pils chewan (Beijing Tongrentang Technology Development Co, Ltd.), llygoden fawr ACTH, CRH, T, IL{{ 2}}, IFN-c, TNF- , IL-2, ac IL-10 Prynwyd pecynnau canfod ELISA gan Nanjing Jiancheng Co., Ltd. Darparwyd y pecyn rat cortisol ELISA gan BOSK Co., gwrthgorff rat CD4, gwrthgorff CD8a (rhifau 561833 a 559976), lysate RBC (Solarbio, R1010), datrysiad byffer PBS (Solarbio, P1020-500), TRIzol (MAN0001271), CaM, a -actin preimio i fyny'r afon ac i lawr yr afon eu darparu gan y Guangzhou Invitrogen Co. Reverse Transcription Kit (rhif RR037A) a cDNA Synthesis Kit (rhif 10000068167) eu darparu gan Bole Life Medicine Products (Shanghai) Co, Ltd Clorofform, isopropanol, ethanol 75, ac urethane Roedd yr ateb i gyd yn ddadansoddol pur ac fe'i cynhyrchwyd gan Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. Cynhyrchwyd dŵr Ultrapure gan y system Milli-Q (18.2 MΩ, Millipore, MA, UDA).

2.2. Offerynnau Arbrofol

Marciwr ensym (Thermo, model 3530911931), golchwr plât awtomatig (model HBS- 4009), mesurydd grym gwthio-tynnu arddangos digidol (model VICTOR- 50N), allgyrchydd rhewi cyflym (model Sigma 3k15 ), sbectrophotometer ultramicro (model B-50Q), mwyhadur genynnau (model L96G), PCR meintiol fflworoleuedd amser real (model StepOne), cytomedr llif (model AC66051710132), microtome paraffin (model Laika), microsgop (Olympus , model BS-53), ac offeryn dŵr pur (model F7JA36507).

2.3. Paratoi Samplau ar gyfer UPLC-Q-TOF-MS ac Arbrofion Ffarmacoleg

Proseswyd WCD o'r un swp oCistanche deserticolayn ein labordy. Ar gyfer paratoi WCD, cafodd darnau CD sych (5 mm o drwch) (100 g) eu trwytho â gwin reis (30 mL), wedi'u stemio ar bwysedd uchel (1.25 kPa) am 4 h, ac yna eu sychu ar 55 gradd.

Cafodd y powdrau bras o CD a WCD eu mwydo mewn 10 gwaith 95% ethanol am 0.5 h, eu hechdynnu adlif 3 gwaith bob tro am 1 h, a'u hidlo, a chyfunwyd y hidlyddion 3 gwaith. Adferwyd yr ethanol o dan bwysau llai, a chafwyd y dyfyniad i'w weinyddu. Ychwanegwyd y dyfyniad (1 mL) at 50% methanol, gan ddod â chyfanswm y cyfaint i 20 mL, a'i storio ar 4 gradd ar gyfer dadansoddi cynnwys.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

2.4. UPLC-QqQ-MS Amodau ar gyfer Dadansoddi Detholiad CD a WCD

2.4.1. Amodau Dadansoddol LCThMS

Defnyddiwyd y system UPLC-MSThMS gyda meddalwedd Dadansoddwr MassLynx 4.1 i gyflawni'r broses o gaffael a phrosesu data. Roedd y golofn ddadansoddol yn Acquity UPLC BEH C18 (1{{10}}0 mm × 2.1 mm, 1.7 μm) ar dymheredd o 40 gradd C. Y cyfnod symudol oedd 0.1% hydoddiant dyfrllyd asid ffurfig (A) ac asetonitrile yn cynnwys 0.1% asid fformig (B). Y graddiant elution oedd 0.00–1.00 mun gyda 3% B, 1.01–2.00 mun gyda 3%–11.5% B, 2.01–3.00 mun }} mun gyda 12% B, 3.01–4.00 mun gyda 15% B, 4.01–5.00 mun gyda 20% B, 5.01–6.00 mun gyda 22 % B, 6.01–8.00 mun gyda 25% B, a 8.01–9.00 mun gyda 10% B. Y gyfradd llif oedd 0.3 mLTth min, a chyfaint y pigiad oedd 1.0 μL.

Defnyddiwyd sbectromedr màs pedwarplyg triphlyg Waters (Xevo TQD, Waters Corp., Aberdaugleddau, MA, UDA) sydd â ffynhonnell ionization electrospray (ESI) yn y modd ïon negyddol. Y nwy daddymheru oedd nitrogen gyda chyfradd llif o 500 LThh ar dymheredd o 250 gradd. Mesurwyd yr holl gyfansoddion a ganfuwyd yn y modd monitro adwaith lluosog (MRM); Mae Tabl 1 yn dangos y paramedrau ynni, ac mae Tabl 2 yn dangos y cromliniau graddnodi ar gyfer y cydrannau a ddadansoddwyd.

2.4.2. Paratoi Sylweddau Cyfeirio

Tubuloside A (3.02 mg), echinacoside (3.00 mg), 2′-acetylacteoside (2.34 mg), acteoside (2.45 mg), isoacteoside (0.61 mg), cistanoside F ( Diddymwyd 2.14 mg), salidroside (3.39 mg), asid geniposidig (2.84 mg), ajugol (1.58 mg), a catalpol (2.39 mg) mewn methanol i baratoi datrysiad stoc. Cafodd yr hydoddiant stoc ei wanhau â methanol i gael y crynodiadau priodol ar gyfer yr hydoddiannau safonol gweithio. Roedd yr holl atebion parod yn cael eu storio ar 4 gradd cyn eu defnyddio.

2.5. Paratoi a Grwpio Modelau Anifeiliaid

Prynwyd llygod mawr gwrywaidd SD (180-220 g) gan Liaoning Changsheng Biotechnological Co., Rhif trwydded anifeiliaid: SCXK (Liao) 2015-0001. Roedd pob llygod mawr yn cael eu cynnal gyda mynediad am ddim i fwyd a dŵr ar 25 gradd a lleithder cymharol o 30-50%. Bu'r anifeiliaid dan do am 7 diwrnod cyn yr arbrofion.

Rhannwyd cant o lygod mawr ar hap yn 10 grŵp: grŵp rheolaeth wag (BC), grŵp rheoli model (MC), grŵp rheolaeth gadarnhaol (PC), grŵp rheoli gwin reis (WC), grŵp dos uchel CD (CD -HD), grŵp dos canol CD (CD-MD), grŵp dos isel CD (CD-LD), grŵp dos uchel WCD (WCD-HD), grŵp dos canol WCD (WCD-MD), a Grŵp dos isel WCD (WCD-LD). Y dosau o CD-HDThWCD-HD, CD-MDTh WCD-MD, a CD-LDThWCD-LD oedd 5.48 gTh (kg ∙ d), 2.74 gTh (kg ∙ d), a 1.37 gTh (kg ∙ d), yn y drefn honno. Y dos ar gyfer y grŵp PC oedd 1.646 gTh (kg ∙ d), ac ar gyfer y grŵp WC, 1 mLTth100 g am 40 diwrnod. Ar y 6ed diwrnod ar ôl ei roi, cafodd y llygod mawr eu chwistrellu'n isgroenol gyda'r ataliad dŵr corticosterone (corticosterone + 0.1% dimethyl sulfoxide + 0.1% Tween-80 + 0.9% sodiwm clorid) ac eithrio ar gyfer y grŵp BC [18]. Crynodiad corticosterone oedd 5 gThL, a'r dos oedd 0.1 mLTth100 g. Rhoddwyd halwynog arferol + 0.1% dimethyl sulfoxide + 0.1% Tween- 80 + 0.9% sodiwm clorid trwy chwistrelliad ar yr un dos i'r llygod mawr yn y grŵp BC.

2.6. Pennu Swyddogaethau Echel HPA

2.6.1. Pwysau, Tymheredd, a Phrawf Pŵer Dal

Perfformiwyd prawf pwysau bob 3 diwrnod, a chymerwyd y tymheredd bob 6 diwrnod. yn ystod yr arbrawf. Ar y 39ain diwrnod, mesurwyd cryfder uchaf y goes ôl gan fesurydd gafael. Gosodwyd y llygod mawr ar lwyfannau llyfn, gan wneud i'w braich ôl gydio yn y polyn. Bydd y llygod mawr yn reddfol yn cydio mewn unrhyw wrthrych i atal symud yn ôl pan fydd y gynffon yn cael ei thynnu nes bod y grym tynnu yn fwy na'r gafael. Pan gollodd y llygoden fawr ei gafael, gallai'r rhag-fwyhadur gofnodi'r grym gafael mwyaf yn awtomatig.

2.6.2. Pennu Lefel T, CRH, ACTH, CORT, a Cortisol mewn Serwm

Un awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, anestheteiddiwyd y llygod mawr trwy chwistrelliad mewnperitoneol o hydoddiant urethane (20 gTh100 mL). Yna, casglwyd y samplau gwaed, eu centrifugio ar 3500 r am 15 munud i gael y serwm, a'u storio ar −20 gradd. Mesurwyd y crynodiadau o T, CRH, ACTH, CORT, a cortisol gyda chitiau llygod mawr ELISA yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

2.6.3. Sylwadau Microsgop

Arsylwyd strwythur morffolegol meinwe'r chwarren adrenal gan staenio AU. Gosodwyd meinwe adrenal mewn paraformaldehyde 10%, wedi'i ddadhydradu mewn ethanol, wedi'i wneud yn dryloyw gan hydoddiant xylene, wedi'i fewnosod gan ddulliau confensiynol, wedi'i dorri i 4 μm sleisys trwchus, wedi'i dewaxed â hydoddiant xylene, wedi'i hydradu â'r graddiant ethanol, ac yna wedi'i staenio â hematoxylin ac eosin ateb staenio. Ar ôl cael ei wneud yn dryloyw â xylene, cafodd y plât ei selio â gwm niwtral a'i arsylwi o dan ficrosgop.

2.6.4. Lliwio imiwnohistocemegol o Bax, Bcl-2, Caspase-3, Fas, a Mynegiant Protein FasL yn y Chwarren Adrenal

Cafodd adrannau adrenal llygod mawr wedi'u hymgorffori mewn paraffin eu dadbaraffinio a'u hailhydradu ar ôl cael eu torri ar drwch o 4 μm. Ar gyfer blocio gweithgaredd peroxidase mewndarddol, cafodd yr adrannau eu rhag-deori mewn bloc hydrogen perocsid am 10 munud. Trochwyd adrannau i 0.01 M sitrad (pH 6.0) a'u cynhesu i ferwi. Ailadroddwyd y broses ar ôl 5-10 munud. Ar ôl oeri, golchwyd yr adrannau â PBS (pH 7.2-7.6) 1-2 gwaith, eu gadael ar dymheredd yr ystafell am tua 5 munud, a'u golchi â PBS (pH 7.2-7.6) 2-3 gwaith. Ychwanegwyd yr ateb blocio 5% BSA ar dymheredd yr ystafell, a chafodd yr hylif gormodol ar yr adran ei ysgwyd i ffwrdd 20 munud yn ddiweddarach. Ychwanegwyd gwrthgyrff cynradd gwanedig sy'n benodol ar gyfer FasTh FasL, Bcl-2ThBax, a caspase-3 (1:100 wedi'i wanhau â PBS) a'u deor ar 37 gradd am 1 awr neu 4 gradd dros nos. Cafodd yr adrannau eu golchi 2-3 gwaith gyda PBS (pH 7.2-7.6). Yna, ychwanegwyd IgG gwrth-lygoden gafr biotinylated, a sychwyd yr adrannau ar 20-37 gradd am 20 munud a'u golchi â PBS (pH 7.2-7.6) 4 gwaith am 5 munud. Ar ôl golchi PBS yn drylwyr, cafodd yr adrannau eu deor â chymysgedd o adweithyddion A a B am 30 munud, eu deor â PBS am 45 munud, a'u datblygu'n olaf gyda swbstrad DAB (DAKO) am 30 munud cyn cael ei wrth-staenio ychydig â hematoxylin, wedi'i ddadhydradu, a gosod.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SYNHWYRIAD RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%

2.7. Pennu Swyddogaethau Imiwnedd

2.7.1. Cyfrifo Mynegai Organ Imiwnedd

Un awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, anestheteiddiwyd y llygod mawr trwy chwistrelliad mewnperitoneol o hydoddiant urethane (20 gTh100 mL), ac yna tynnwyd y ddueg a'r chwarren thymws a'u pwyso ar unwaith mewn cwfl di-haint. Cyfernodau pwysau’r ddueg neu’r thymws (%) � pwysau’r ddueg neu’r thymws (mg) Pwysau’r corff (g).

2.7.2. Canfod Is-setiau Lymffosyt T mewn Gwaed Ymylol

Deorwyd splenocytes a hemocytes gyda'r gwrthgyrff monoclonaidd gwrth-CD4 (PE) a gwrth-CD8 (FITC) am 30 munud yn y tywyllwch. Ychwanegwyd 2 ml o lysate erythrocyte, a chymysgwyd yr hydoddiant trwy vortexing. Gadawyd yr ateb mewn tywyllwch am 10 munud a'i allgyrchu am 5 munud. Taflwyd yr uwchnatant, ac yna golchwyd yr hydoddiant 3 gwaith gyda PBS oer iâ a'i ail-ddarparu mewn hydoddiant athraidd PBS. Cafodd o leiaf 10,{11}} o gelloedd eu dadansoddi yn ôl cytometreg llif o fewn 1 awr i bob staen Mab.

2.7.3. Pennu Lefel IL-10, IL-6, IL-2, TNF- , ac IFN-c mewn Serwm

Un awr ar ôl y weinyddiaeth ddiwethaf, anestheteiddiwyd y llygod mawr trwy chwistrelliad mewnperitoneol o hydoddiant urethane (20 gTh100 mL), a chymerwyd gwaed o'r aorta abdomenol. Cafodd y gwaed ei allgyrchu ar 3500 r am 15 munud i gael y serwm a'i storio ar −20 gradd. Canfuwyd y crynodiadau o IL-10, IL-6, IL-2, TNF- , ac IFN-c gyda chitiau llygod mawr ELISA yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr.

2.8. Mynegiad o CaM mewn Meinweoedd Hypothalamws a Hypophysis

Echdynnwyd cyfanswm RNA o'r meinweoedd hypothalamws a hypoffysis gan TRIzol. Gwnaed trawsgrifiad gwrthdro ar 10 μL o gyfanswm RNA yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Dadansoddwyd symiau cyfartal o cDNA trwy qPCR ym mhresenoldeb llifyn rhwymo dsDNA (Promega, UDA) a System PCR Amser Real CFX 96 (Bio-Rad, UDA) i edrych ar y gwahanol enynnau o dan amodau actifadu cychwynnol yn 95 gradd am 10 munud, 40 cylch o ddadnatureiddio ar 95 gradd am 15 eiliad, ac estyniad anelio ar 60 gradd am 1 munud.

Rhoddir preimio ar gyfer CaM ac -actin yn Nhabl 1, a defnyddiwyd -actin fel rheolaeth fewnol. Cafodd pob sampl ei normaleiddio trwy ddefnyddio'r gwahaniaeth mewn trothwyon critigol (Ct) rhwng y genyn targed ac -actin. Defnyddiwyd yr hafaliad canlynol i ddisgrifio'r canlyniad: ΔΔCt � (genyn targed Ct − genyn Ct -actin) grŵp arbrofol - (genyn targed Ct - genyn Ct -actin) grŵp rheoli. Yna cymharwyd lefelau mRNA pob sampl, gan ddefnyddio'r mynegiad 2- ΔΔCt genyn targed. Cyfartaledd oedd canlyniadau pob grŵp (Tabl 3).

2.9. Dadansoddiad Ystadegol

Dadansoddwyd yr holl ddata gan ddefnyddio meddalwedd SPSS (fersiwn 19.0, SPSS Institute Inc., Chicago, IL). Dadansoddwyd gwahaniaethau rhwng grwpiau gyda dadansoddiad mesuriadau ailadroddus un ffordd o amrywiant (ANOVA). Mynegwyd y canlyniadau fel cymedrig ± gwyriad safonol (SD) gan ddefnyddio meddalwedd GraphPad Prism (fersiwn 6.0, San Diego, CA, UDA). Ystyriwyd gwahaniaethau gyda gwerth P llai na 0.05 yn ystadegol arwyddocaol.

3. Canlyniadau Arbrofol

3.1. UPLC-QqQ-MSAnalysis

Er mwyn cyflawni'r gwahaniad gorau, siâp brig, ac amser dadansoddi byr, astudiwyd yr amodau cromatograffig gan gynnwys colofn, cyfnod symudol, a rhaglen graddiant yn ein harbrawf rhagarweiniol. Cyflwynir y cromatogramau nodweddiadol gyda modd MRM yn Ffigur 1.

O Dabl 4, gallwn weld bod cynnwys glycosidau ffenylethanoid yn WCD wedi cynyddu o'i gymharu â rhai CD, yn enwedig ar gyfer echinacoside ac acteosid, tra bod cynnwys iridoidau wedi gostwng yn WCD.

3.2. Rheoliad ar gyfer Swyddogaeth Echel HPA

3.2.1. Pwysau, Tymheredd, a Phrawf Pŵer Dal

Dangosodd llygod mawr y grŵp MC a grwpiau arbrofol symptomau diffyg aren-yang yn raddol ar ôl cael corticosterone. Gwellodd y symptomau, megis colli pwysau, hypothermia, colli llewyrch gwallt, ysbryd gwan, oedi mewn ymateb, a gostyngiad sylweddol yn y defnydd o ddŵr a gweithgaredd, yn fawr yn y grwpiau CD a WCD. Mae Ffigur 2(a) yn dangos y newidiadau pwysau. Cynyddodd pwysau pob un o'r grwpiau cyffuriau, yn enwedig yn y grwpiau CDHD a WCD-HD. Y cynnydd pwysau yn y grŵp MC oedd yr isaf. Mae Ffigur 2(b) yn dangos y newidiadau tymheredd, sef yr isaf yn y grŵp MC, a chynyddodd y tymheredd yn y grwpiau WCD-HD, WCD-MD, a WCD-LD.

Mae Ffigur 2(c) yn dangos bod y pŵer daliannol wedi cynyddu ar gyfer y grŵp BC a phob un o'r grwpiau arbrofol, a grŵp WCD-MD oedd yr uchaf, a ddangosodd fod arwyddion o wendid a achosir gan ddiffyg aren-yang wedi gwella ar ôl ei roi.

3.2.2. Lefelau T, CRH, ACTH, CORT, a Cortisol

Mae Ffigur 3 yn dangos, o gymharu â rhai’r grŵp BC, bod lefel T, CRH, ACTH, a CORT yn y serwm llygod mawr wedi gostwng (P < 0.01) a lefel cortisol wedi gostwng (P < 0.05) yn y grŵp MC. O'i gymharu â rhai'r grŵp MC, cynyddodd lefel T yn y grwpiau WCD-HD a WCD-MD (P < 0.01), lefel y CRH yn y WCD-LD, Gwellodd grwpiau WCD-MD, a WC (P < 0.01), cynyddodd cynnwys ACTH yn y grwpiau CD-HD, WCD-MD, a WCD-HD (P < 0.01), lefel CORT wedi'i huwchraddio yn y Grwpiau CD-MD, WCD-MD, a WCD-HD (P < 0.01) ac wedi'u gwella yn y grwpiau CDHD a WCD-LD (P <0.05), a chynyddodd lefel cortisol ym mhob un o'r grwpiau cyffuriau.

3.2.3. Canlyniadau Arsylwi Microsgop

Gellir rhannu meinwe'r chwarren adrenal yn yr haen cortical a'r haen medulla. Mae'r haenau cortigol yn cynnwys haenau globular, bwndel, a reticular. Mae'r celloedd yn cynnwys mwy o lipidau, ac mae'r haen medulla yn cynnwys celloedd pheochromocytoma yn bennaf ac ychydig bach o feinwe ffibrog. Fel y dangosir yn Ffigur 4, canfuom fod popeth yn normal yn y grŵp BC, tra yn y grŵp MC, roedd gan y cortex adrenal hyperplasia amlwg, atroffi cellog, a dwysedd cynyddol. Tewhaodd y stribed oddfog, a dangosodd y parth fascicularis tryloyw, zona reticularis cul, a chelloedd llai o liw anwastad a thagfeydd capilari. Yn y grŵp PC, roedd y ffiniau cortigol a medwlar yn weladwy. Roedd celloedd y bandiau globular a bwndel wedi'u trefnu'n gyfartal, ac roedd y strwythur morffolegol wedi'i adfer. Gwelwyd yr un adferiad gwell yn y grwpiau WCD, ac roedd yr effeithiau yn y grŵp WCD-MD yn well na rhai'r grwpiau WCD-HD a WCD-LD. Nid oedd morffoleg y chwarren adrenal yn y grwpiau CD cystal â morffoleg y grwpiau WCD.

TUBULOSA CISTANCHE NATURIOL AR GYFER GWELLA SWYDDOGAETH RHYWIOL PHGS75% ECH 30% DEDDF 12%