Defnyddiwyd Tetrahymena Thermophila Fel Y Deunydd Arbrofol
Sep 13, 2022
Cysylltwchoscar.xiao@wecistanche.comam fwy o wybodaeth
Yn yr arbrawf hwn, defnyddiwyd Tetrahymena thermophila fel y deunydd arbrofol. Mae T. thermophila yn giliate sy'n byw'n rhydd sy'n bodoli'n eang mewn ecosystemau dyfrol byd-eang ac mae'n debyg i gelloedd metasoaidd o ran strwythur a chymhlethdod swyddogaethol5. Rhoddodd darganfod ribozynnel6 a telomerasel7 yn Tetrahymena hwb mawr mewn ymchwil i fecanwaith gwrth-heneiddio, a wobrwywyd dwy Wobr Nobell8. Oherwydd ei gylch twf byr, diwylliant hawdd, a chefndir genetig clir, mae T. gallai thermophile ddarparu ymchwil deuol in vivo ac in vitro mewn un dyluniad arbrofol. Mae T. thermophila wedi'i ddefnyddio'n llwyddiannus mewn sgrinio cyffuriau a mecanweithiau ffarmacolegol20. Yn bwysicach fyth, mae gwybodaeth am esblygiad moleciwlaidd y teulu T. thermophila glutathione peroxidase wedi'i datgelu9-2. Mae proffil gwybodaeth T.cistanche genghis khangellir cael genynnau thermophila GPX o Gronfa Ddata Genomeg Swyddogaethol Tetrahymena (TetraFGD)(http://tfgd.ihb.ac.cn/) a TGD(http://ww. ciliate.org)22. Deg o'r deuddeg GPX tybiedig wedi'u nodi fel ffosffolipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPx) yng nghronfa ddata gymharol genom Tetrahymena. Gall PHP, GPX sy'n ddibynnol ar seleniwm, leihau hydroperocsid ffosffolipid yn benodol i amddiffyn liposomau lecithin a bioffilmiau rhag difrod ocsideiddiol23.PHGPxin T. thermophila Mae màs moleciwlaidd cyfartalog o tua 21.7 kDa22, sy'n debyg i'r màs moleciwlaidd (20-22). kDa) o'r protein monomer PHGPx a ddisgrifir mewn mamaliaid24. Ar ben hynny, dangosodd nifer fawr o adroddiadau fod mynegiant GPX Tthermophila yn feintiol wahanol ac yn dibynnu ar y ffynhonnell straen (ocsidydd, inducer apoptosis neu fetel)2122 a'r amser datguddio20-24
Trwy gymharu effeithiau dyfyniad dyfrllyd a phrif monomerau G.lucidum ar y gromlin twf a dwysedd uchaf T. thermophila, cafodd yr astudiaeth hon y dyfyniad G. lucidum gwrth-heneiddio gorau. Ymchwiliwyd i fecanwaith gwrth-heneiddio G. lucidum, yn enwedig pennu math gweithredu'r teulu GPX, ar y lefelau moleciwlaidd, cellog ac unigol. Disgwylir i ganlyniadau'r astudiaeth hon gyfrannu at gymhwysiad clinigol cynhyrchion G. lucidum.
Defnyddiau a dulliau
Dyfyniad dyfrllyd Ganoderma lucidum a monomerau. Gan gyfeirio at adroddiad Cuong25,20 g o sych G. lucidum (Changbai Mountain Senbao Specialty Store, Jilin) ei falu a'i dynnu mewn 1000 mL o ddHO. Casglwyd yr echdynnyn dyfrllyd trwy allgyrchiad, ei grynhoi i 100 mL trwy ei sychu dan wactod, a'i storio ar -20 gradd nes ei ddefnyddio.
Prynwyd polysacarid G. lucidum, Asid Ganoderic A, Ganoderal A, a G. lucidum ergosterol oddi wrth Chengdu Must Biotechnology Co., Ltd. Diddymwyd y tri safon hyn mewn methanol yn ôl y dyluniad unffurf a'u hychwanegu at gyfrwng SPP. Diwylliant celloedd a thriniaeth cyffuriau. Darparwyd Tetrahymenathermophila (SB210) gan y Sefydliad Hydrobioleg, Academi Gwyddorau Tsieineaidd, Wuhan, IPR Tsieina. Diwylliwyd T. thermophila mewn deor 28 gradd. Roedd y cyfrwng SPP yn cynnwys 2 y cant (w/v) peptone proteose, 0.1 y cant o echdyniad burum (Oxoid),0.2 y cant o glwcos, a 0.003 y cant o sequestrene. Yn ôl y dyluniad unffurf (Tablau Atodol S1 a S2), dyfyniad dyfrllyd G. lucidum, G. polysacarid lucidum, Asid Ganoderic A, Ganoderal A a G. lucidum ergosterol at y cyfrwng diwylliant. Disodlwyd y grŵp rheoli gan yr un cyfaint o ddŵr distyll dwbl, gyda 3 sampl paral-lel ym mhob grŵp. Ar ôl mynd i mewn i'r cyfnod logarithmiig, cymerwyd samplau bob 2 awr tan y cyfnod dirywiad. Cyfrifwyd dwysedd T. thermophila gan fwrdd cyfrif celloedd gwaed, a lluniwyd y berthynas rhwng dwysedd T. thermophila ac amser.
Dadansoddiad trawsgrifio. Cynhaliwyd yr arbrawf gyda phlât ffynnon 24-, ac roedd pob ffynnon yn cynnwys 900 μL SPP. Yn y grŵp arbrofol, ychwanegwyd 100 μL o echdyniad dyfrllyd 200 mg/mL G. lucidum. Cafodd y grŵp rheoli ei drin â 100 μL ddH O yn lle hynny. Gosodwyd tri sampl cyfochrog ym mhob grŵp.estyniad bywyd cistancheRoedd y grŵp rheoli a'r grŵp arbrofol ill dau mewn cyfnod logarithmig (20 h), a chasglwyd y cyfnod dirywiad (27h) ar gyfer y dadansoddiad trawsgrifomig. Cafodd pob grŵp ei ddyblygu'n fiolegol, a bu'r holl samplau'n destun assay microaray trawsgrifiad cyfan (Biomarker Technologies, Beijing, China). Canfuwyd y proffil mynegiant genynnau gan Arae Mynegiant Affymetrix 3'IVTEr mwyn lleihau effaith mynegiant y genynnau gwerth, RPKM Mwy na neu'n hafal i 5 a FC (Newid Plyg) Defnyddiwyd mwy na neu'n hafal i 2 fel y clriteria i sgrinio genynnau a fynegwyd yn wahaniaethol (DEGs) Defnyddiwyd KOBAS i wireddu dadansoddiad llwybr GeneOntology (GO) a Gwyddoniadur Genynnau a Genomau Kyoto (KEGG). Pennwyd y llwybr cyfoethogi gan y gwerth P-adj wedi'i gywiro Llai na neu'n hafal i 0.05. Dilyswyd y canlyniadau trawsgrifio gan ddefnyddio trawsgrifiad meintiol o'r cefn PCR(RT-qPCR)(Dull gweler y ffeil Atodol). Yna, sefydlwyd y rhwydwaith rhyngweithio protein-protein (PPI) yn seiliedig ar gronfa ddata STRING, a chafodd y genyn canolog ei sgrinio trwy ddefnyddio'r CytoHubla i nodi'r nod canolog ym meddalwedd Cytoscape.
Arsylwi staenio arian a microsgopeg electron trawsyrru (TEM). Roedd y drefn o staenio arian yn unol â dull Foissner26. arsylwyd thermophila o dan ficrosgop olew. Arsylwyd uwch-strwythur T. thermophila gan TEM. TCasglwyd y celloedd a gafodd eu trin â dyfyniad dyfrllyd G.lucidum a'r grŵp rheoli trwy allgyrchu ar 600 × g am 2 funud. Rhagosodwyd celloedd mewn 2.5 y cant o glutaraldehyde a'u cynnal ar 4 gradd am 8 h. Cafodd y samplau eu golchi â PBS (pH7.5) dair gwaith, eu centrifugio ar 3000xg am 5 munud, ac yna eu gosod gydag 1 y cant o osmium tetraoxide (4h). Wedi hynny, perfformiwyd dadhydradu gan ddefnyddio aseton graddiant o 15 y cant i 100 y cant . Yna, cafodd y celloedd eu hymgorffori yn resin gludedd isel Embed 812(TAAB). Wrth halltu ôl-tel, torrwyd adrannau tra-thin (60-80 nm) gan sleisiwr ultrathin. Arsylwyd yr uwch-strwythur gan ficrosgop electron trawsyrru (JEOL JEM-1010, Japan).
Penderfynu difrod celloedd. Canfuwyd lROS mewngellol gan y chwiliedydd fflwroleuol sensitif 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA) 27. Pennwyd gweithgaredd malondialdehyde (MDA) gan gitiau masnachol a ddarparwyd gan Sefydliad Biobeirianneg Nanjing Jiancheng (Nanjing, Jiangsu, Tsieina). Roedd y dull ar gyfer pennu'r gallu i ddileu radicalau hydrocsyl (·OH) fel y disgrifiwyd gan Takemura28. Mynegwyd gallu dyfyniad dyfrllyd G. lucidum i ddileu radical rhydd OH fel dwysedd optegol y grŵp arbrofol llai dwysedd optegol y grŵp rheoli.
Gall Cistanche gwrth-heneiddio
Gweithgaredd PHGPx. Penderfynwyd ar gymhareb ffosffad deunucleotid nicotinamide adenine (NADPH)/NADP* a chymhareb glutathione/glutathione disulfide (GSH/GSSG) gan ddefnyddio Pecyn Meintoli NADP*/NADPH (S0179, Beyotime), Pecyn Assay GSH/GSSG (S0053, Beyotime). cynhaliwyd profion yn unol â phrotocol y gwneuthurwr.
Canlyniadau
Effeithiau dyfyniad dyfrllyd G.lucidum a monomerau G.lucidum ar dwf T. ther-mochila. Fel astudiaethau blaenorol7, G. polysacarid lucidum oedd prif elfen dyfyniad dyfrllyd G. lucidum yn yr arbrawf hwn yn ôl adnabod sbectroffotomedr (Ffig Atodol S1). Dadansoddwyd sylweddau gweithredol dyfyniad dyfrllyd G. lucidum hefyd gan GC-MS. Dangosodd y diagram ïon cyfanswm o'r dyfyniad dyfrllyd G. lucidum fod cydrannau ll yn bodoli yn y dyfyniad dyfrllyd (Ffig Atodol S2). Ymhlith cyfansoddion echdyniad dyfrllyd G.lucidum (Tablau Atodol S3 a S4), G. dewiswyd asid lucidum A, Ganoderal A, a G. lucidum ergosterol yn ôl eu hamser cadw a'u gradd gyfatebol.
Er mwyn cymharu effeithiau dyfyniad dyfrllyd G. lucidum a'r prif monomerau hyn ar dwf T. thermophila, ychwanegwyd dyfyniad dyfrllyd G. lucidum a hydoddiant monomerau G. lucidum at gyfrwng diwylliant T. thermophila. Dangoswyd y canlyniadau yn Ffig.1.Dwysedd uchaf y grŵp rheoli oedd 6 × 104 celloedd/mL ar 24 h. Roedd dwysedd celloedd grŵp echdynnu dyfrllyd G. lucidum o 12 i 20 h bron yr un fath â dwysedd y grŵp rheoli, ond o 20 i 25 awr roedd yn sylweddol uwch na dwysedd celloedd y grŵp rheoli.cistanche nzAr yr un pryd, estynnwyd y cyfnod logarithmig gan 1 h, y dwysedd uchaf oedd 1.15 × 105 celloedd / ml. Er bod dwysedd uchaf grŵp polysacarid G. lucidum yn uwch na dwysedd y grŵp rheoli o 9.7 × 104 o gelloedd/mL, roedd yn is na grŵp echdynnu dyfrllyd G.lucidum. Nid oedd y dwysedd uchaf o asid lucidum G. A, Ganoderal A a G. lucidum ergosterol yn fwy na dwysedd y grŵp rheoli, a ddangosodd nad oedd hydoddion alcohol y monomerau hyn yn ffafriol i dwf T. thermophila. Gellid dod i'r casgliad y gall dyfyniad dyfrllyd G.lucidum sy'n cynnwys amrywiaeth o sylweddau gweithredol hyrwyddo twf T. thermophila yn fwy na'i monomerau.
Effaith gwrth-heneiddio dyfyniad dyfrllyd G. lucidum. Gydag amser diwylliant yn cynyddu, roedd dwyster golau ROS yn y cyfnod dirywiad (Ffig. 2b) yn uwch nag yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 2a). Ar ôl ychwanegu'r dyfyniad dyfrllyd G. lucidum, er bod dwyster fflworoleuedd y cyfnod dirywiad (Ffig. 2d) yn dal i wella o'i gymharu â'r cyfnod logarithmig (Ffig. 2c), roedd yn sylweddol is nag un y grŵp rheoli. Roedd y cynnwys MDA yn y grŵp rheoli hefyd yn uwch yn y cyfnod dirywiad nag yn y cyfnod logarithmig (Ffig.2e). Yn y cyfamser roedd gallu sborion OH yn y cyfnod dirywiad yn is nag yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 2e). Collwyd y cydbwysedd rhwng ocsidiad a rhydwythiad ac roedd y corff yn heneiddio. Ar ôl ychwanegu'r dyfyniad dyfrllyd G. lucidum, roedd y cynnwys MDA yn is na'r hyn yn y grŵp rheoli (colofn chwith yn Ffig. 2e), ac roedd swm yr OH a ysbwrielwyd gan gelloedd yn y cyfnod logarithmig a'r cyfnod dirywiad yn uwch na'r un yn y grŵp rheoli (colofn dde yn Ffig. 2e). Gellir cymharu twf T[thermophila â phroses heneiddio organebau amlgellog trwy ei ddifrod cellog. Wrth i ROS a MDA gronni, rhwystrwyd twf a gostyngwyd dwysedd T. thermophila. Gallai ychwanegu dyfyniad dyfrllyd G. lucidum gynnal y cydbwysedd rhydocs yn T. thermophila a chyflawni effeithiau gwrth-heneiddio.
Dadansoddiad o enynnau wedi'u mynegi'n wahaniaethol a dilysu gan RT-qPCR. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, newidiodd y mynegiant o 11,519 o enynnau yng nghyfnod logarithmig T. thermophila yn sylweddol ar ôl ychwanegu dyfyniad dyfrllyd G. lucidum i SPP. Yn eu plith, cafodd 6201 o enynnau eu huwchreoleiddio a chafodd 5318 o enynnau eu is-reoleiddio.maint pidyn cistancheNewidiodd mynegiant 8772 o enynnau yn sylweddol yn ystod y cyfnod o ddirywiad, ac yn eu plith cafodd 4721 o enynnau eu huwchreoleiddio a 4051 o enynnau eu dadreoleiddio. Mewn astudiaethau blaenorol yn ein labordy, mae'r
adlewyrchwyd effaith gwrth-heneiddio G.lucidum ar Stylonychia yn y mynegai gwrthocsidiol, felly dewiswyd 10 genyn (Tabl Atodol S5) yn ymwneud â gwrthocsidyddion ar hap o blith y DEGs, a dilyswyd cywirdeb y data RNA-seq gan RT- qPCR. Roedd patrymau mynegiant y 10 genyn hyn yn y cyfnod logarithmig a chyfnod dirywiad yn gyson â thuedd y data RNA-seq (Ffig Atodol S3). Dangosodd y canlyniad fod y data RNA-seq yn ddibynadwy ac y gellid ei ddefnyddio ar gyfer dadansoddiad dilynol.
Cyfoethogi GO a dadansoddiadau llwybr KEGG. Roedd y DEGs yn y cyfnod logarithmig yn ymwneud â 14 o brosesau biolegol (BP) gyda 6 math o swyddogaethau moleciwlaidd (MF) ac roeddent yn bodoli ym mhob cydran cell (CC) (Ffig. 3a). Roedd y DEGs yn y cyfnod dirywiad yn ymwneud â 12 BP gyda 4 math o MF ac roeddent yn bodoli mewn 12 CC Y BP mwyaf cysylltiedig yn y ddau gam oedd y broses metabolig, roedd MF yn rhwymol, ac roedd CC yn bilen. Ymhlith y broses metabolig, rhwymo a philen, roedd y genynnau i fyny-reoleiddio yn cyfrif am 70 y cant yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 3b) a 75 y cant yn y cyfnod dirywiad (Ffig. 3c). Mae'r canlyniadau hyn yn dangos y gallai dyfyniad dyfrllyd G. lucidum hyrwyddo cynnal cyfanrwydd cellbilen yn y ddau gam.
Perfformiwyd dadansoddiad cyfoethogi llwybr KEGG i ddadansoddi'r DEGs ymhellach rhwng y ddau gam. Yn y cyfnod logarithmig, roedd 94 o lwybrau wedi'u crynhoi, ac roedd 68 y cant o'r genynnau cyfan yn ymwneud â metaboledd. Yn y cyfnod dirywiad, cyfoethogwyd llwybrau 91, ymhlith y rhain y metaboledd oedd y llwybr mwyaf o hyd, gan gyfrif am 68 y cant . Defnyddiwyd yr 20 llwybr uchaf yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 3d) a'r cyfnod dirywiad (Ffig. 3e) i lunio siart swigen a dangosodd, waeth beth fo'r arwyddocâd neu nifer y genynnau dan sylw, effaith y G.powdr cistanchedyfyniad dyfrllyd lucidum canolbwyntio'n bennaf ar y llwybr metaboledd glutathione. Yn y cyfnod logarithmig, cyfoethogwyd 38 o enynnau a fynegwyd yn wahaniaethol yn y llwybr hwn, gan gyfrif am 45 y cant . Yn y cyfnod dirywiad, cyfoethogwyd 43 o enynnau a fynegwyd yn wahaniaethol yn y llwybr hwn, gan gyfrif am 50 y cant .
Rhwydweithiau rhyngweithio protein-protein (PPI) o DEGs. Bydd egluro DEGs yn llwybr metaboledd glutathione a mewnwelediad i'w rhyngweithio â phroteinau eraill yn helpu i ymchwilio ymhellach i fecanwaith rheoleiddio posibl echdyniad dyfrllyd G. lucidum. Cafodd y cyfnod logarithmig (Ffig.4a) a'r cyfnodau dirywiad (Ffig.4b) yr effeithiau pwysicaf ar GPX1, GPX2, GPX7 a GPX11. Trwy ymholiad cronfa ddata TetraFGD, roedd yr ensymau GPX hyn yn perthyn i PHGPx (Tabl Atodol S6). Felly, mae ensymau gwrthocsidiol, yn enwedig PHGPx, yn chwarae rhan bwysig wrth hyrwyddo twf T. thermophila trwy gymell echdynnyn dyfrllyd G. lucidum.
Gweithgarwch GPS a dilysu swyddogaethau. Mae gweithgaredd PHGPx yn cyfeirio at y gostyngiad yn y gyfradd amsugno NADPH2." Roedd gwerth NADPH/NADP* yng nghyfnod dirywiad y grŵp rheoli yn is na'r hyn yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 5a). Roedd y canlyniad yn awgrymu bod actifedd PHGPx gostwng gyda chynnydd amser meithrin Ar ôl ychwanegu dyfyniad dyfrllyd G. lucidum, roedd gwerth NADPH/NADP plws yn y cyfnod dirywiad yn dal yn is na'r hyn yn y cyfnod logarithmig, ond yn uwch na dau gam y grŵp rheoli. gallai dyfyniad dyfrllyd G.lucidum hyrwyddo gweithgaredd PHGPx.
Gall PHP gataleiddio'n benodol y gostyngiad mewn hydroperocsid ffosffolipid gan glutathione gostyngol (GSH), er mwyn trosi perocsid lipid gwenwynig (PL-PUFA-OOH) i asidau brasterog amlannirlawn anwenwynig (PL-PUFA-OH) yn effeithlon30. Gall newid y gymhareb GSH/GSSH adlewyrchu newid PL-PUFA-OOH a PL-PUFA-OH Oherwydd y gostyngiad mewn gweithgaredd PHGPx (Ffig. 5a), gostyngodd y gymhareb GSH/GSSH yn y grŵp rheoli hefyd gyda cynnydd amser diwylliant (Ffig. 5b). Fodd bynnag, ar ôl ychwanegu dyfyniad dyfrllyd G.lucidum, cynyddwyd y gymhareb GSH/GSSH yn y cyfnod logarithmig a'r cyfnod dirywiad. Trawsnewidiwyd y gwenwynig Intracellular PL-PUFA-OOH yn y grŵp arbrofol yn PL-PUFA-OH nad yw'n wenwynig, a oedd yn fwy na'r grŵp rheoli. Arsylwi morffoleg microsgopig ac uwch-strwythur. Cafodd effaith amddiffynnol dyfyniad dyfrllyd G. Luci-dum ar y bilen ei ddelweddu gan staen arian amonia a TEM. Trwy gymharu cyfnod logarithmig y grŵp rheoli (Ffig. 6a) a chyfnod dirywiad y grŵp rheoli (Ffig. 6c), canfuwyd bod morffoleg celloedd T. thermophila wedi'i ddadffurfio'n ddifrifol gydag estyniad amser diwylliant, a roedd y cnewyllyn yn niwlog, sy'n dangos bod y celloedd yn ymddangos fel pe baent mewn cyflwr heneiddio. Fodd bynnag, yn y grŵp echdynnu dyfrllyd G.lucidum, roedd morffoleg a chyfanrwydd y celloedd wedi'u diogelu'n dda yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 6e) a'r cyfnod dirywiad (Ffig. 6g). Gwelwyd newidiadau uwch-strwythurol yn y celloedd gan TEM. Roedd crib a chyfuchlin y mitocondriaidd yn niwlog yn y cyfnod o ddirywiad (Ffig. 6d) o'i gymharu â'r cyfnod logarithmig (Ffig.6b) yn y grŵp rheoli. Cynyddodd pydredd mitocondria gydag estyniad amser diwylliant. Fe wnaeth ychwanegu dyfyniad dyfrllyd G. lucidum wella morffoleg y mitocondria yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 6f) a'r cyfnod dirywiad (Ffig. 6h). Gwarantodd dyfyniad dyfrllyd G. lucidum swyddogaeth mitocondria, sy'n perthyn yn agos i gyfanrwydd y bilen. Dylid nodi bod y mitocondria yn y grŵp arbrofol yn dangos newidiadau morffolegol yn y cyfnod logarithmig (Ffig. 6f, h), ond ni effeithiwyd ar gyfanrwydd y bilen.
Trafodaeth
Mae gan gymhwyso detholiadau G.lucidum hanes hir mewn meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol a Dwyrain Asia. Mae nifer fawr o astudiaethau wedi dangos eu heffeithiolrwydd. Canfu adroddiadau blaenorol fod dyfyniad dyfrllyd G.lucidum yn cynnwys nid yn unig polysacaridau G. lucidum ond hefyd Glucidum triterpenoids. Yn ôl adroddiadau blaenorol, asid Ganoderma, Ganoderma aldehyde, a Ganoderma ergosterol yw prif gynhwysion G. lucidum triterpene 3. Maent yn gweithredu gyda swyddogaethau atgyweirio gwahanol ar gyfer cell (Tabl 1). Mae dyfyniad dyfrllyd Ganoderma lucidum yn cynnwys amrywiaeth o sylweddau gweithredol, gan integreiddio swyddogaethau'r pedwar sylwedd gweithredol arall, a all nid yn unig wrthsefyll ocsideiddio ond hefyd gadw cyfanrwydd y bilen. Yn yr astudiaeth hon,
Gwiriodd hybu twf dyfyniad dyfrllyd G. lucidum ar T. thermophila y berthynas gynhwysiant hon. Trwy ddadansoddiad o G. lucidum dyfyniad dyfrllyd gan cromatograffaeth llif cyfanswm-ion (Ffig Atodol. S2), gellir canfod bod amser diddymu gwahanol sylweddau gweithredol yn wahanol. Felly mae dyfyniad dyfrllyd G. lucidum yn dod yn doddydd organig cymhleth gydag estyniad yr amser berwi. Credwn y gallai'r sylweddau gweithredol yn echdyniad dyfrllyd G.lucidum weithredu ar wahanol adegau, gan arwain at synergedd. Dylai hon fod yn astudiaeth bellach yn y dyfodol.
Archwiliodd y dadansoddiad o T. thermophila transcriptome effaith dyfyniad dyfrllyd G. lucidum ar fynegiant genynnau yn ystod twf. Ar ôl triniaeth gyda dyfyniad dyfrllyd G. lucidum, ymddangosodd PHGPx yn ddylanwad allweddol mewn dwysedd celloedd ac amser cenhedlaeth. Cadarnhaodd y canlyniad hwn fod echdyniad dyfrllyd G.lucidum yn gweithredu ar y math o deulu GPX sy'n ddibynnol ar seleniwm. Mae PHP yn seleno-protein amlswyddogaethol sy'n cael ei ddosbarthu'n eang yn y corff a all nid yn unig gymryd rhan mewn adweithiau gwrthocsidiol ond hefyd leihau lipidau'r bilen yn uniongyrchol i amddiffyn cyfanrwydd y system bilen40. O'i gymharu â GPXs eraill, mae gan PHGPx gyfaint llai a mwy o hydroffobigedd. Mae llawer o adroddiadau wedi dangos y gall overexpression PHGPx mewn celloedd wrthsefyll ymateb celloedd i mewndarddol (ee, heneiddio) fl ac alldarddol (ee, amgylcheddol) perocsidiad difrod 2-45.PHP yw'r unig ensym sy'n gallu lleihau'n uniongyrchol y PL-PUFA- OOH y bilen i mewn i'r cyfansoddion hydroxyl cyfatebol, a thrwy hynny alluogi terfynu perocsidiad ac amddiffyn y bilen biolegol rhag difrod perocsidiad4647. Y cynnydd yng nghynnwys PL-PUFA-OOH oedd y rheswm dros ddifrod y gellbilen yn y grŵp rheoli yn ystod y cyfnod dirywiad, a ddaeth yn gylch dieflig a chyflymu senescence cell.Yn yr astudiaeth hon, mae cynnwys ROS a MDA (Ffig.2)Cynyddodd T.thermophila yn y grŵp rheoli gyda chynnydd mewn amser diwylliant. Ymddangosodd y bilen anffurfiad difrifol yn y cyfnod dirywiad trwy'r arsylwi morffolegol. Fodd bynnag, pan ychwanegwyd dyfyniad dyfrllyd G. lucidun, cafodd mynegiant PHGPx ei uwch-reoleiddio. Felly, trawsnewidiwyd PL-PUFA-OOH ar y bilen yn PL-PUFA-OH nad yw'n wenwynig, ac mae sefydlogrwydd strwythur y bilen yn cael ei wella yn y cyfnod logarithmig a'r cyfnod dirywiad. Yn ôl arsylwi'r bilen gan staenio arian amonia a TEM, gellid dod i'r casgliad bod dyfyniad dyfrllyd G.lucidum wedi treiddio i'r gellbilen yn ystod y broses dwf. Gallai'r effaith atgyweirio hon ar y gellbilen gymell sylweddau gweithredol dyfyniad dyfrllyd G. lucidum i fynd i mewn i'r cytoplasm a diogelu strwythur pilen y cnewyllyn a'r mitocondria i hyrwyddo metaboledd T. thermophila a chyflawni effeithiau gwrth-heneiddio. Fel y dengys canlyniadau cyfoethogi lKEGG, mae nifer fawr o enynnau gwahaniaethol wedi'u crynhoi yn y llwybrau metabolaidd. Dangosodd y canlyniadau hyn fod dyfyniad dyfrllyd G. lucidum yn fuddiol i fetaboledd glutathione a dileu perocsidau gwenwynig a gynhyrchir gan heneiddio celloedd.
Yn gyffredinol, roedd dyfyniad dyfrllyd G. lucidum yn hyrwyddo mynegiant yr ensym seleniwm-ddibynnol PHGPx yn y teulu GPX. Gallai gwella gweithgaredd PHGPx nid yn unig leihau'r ymateb straen ocsideiddiol in vivo ond hefyd yn benodol ac yn effeithiol leihau dyddodiad lipid y bilen biolegol a chynnal uniondeb y bilen (Ffig.7). O ganlyniad, mae'r sylweddau gweithredol yn echdyniad dyfrllyd G. lucidum yn mynd i mewn i'r celloedd trwy'r bilen gyfan ac yn hyrwyddo eu metaboledd. Creodd hyn gylchred rhinweddol i gyflawni effaith gwrth-heneiddio.
Daw'r erthygl hon o Scientif Reports|(2022) 12:3139|https://doi.org/10.1038/s41598-022-06985-z
