Effaith Sylweddau Hwmig Deietegol ar Imiwnedd Cellog a Nodweddion Gwaed mewn Perchyll
Oct 16, 2023
Haniaethol: Amcan yr astudiaeth hon oedd pennu effaith sylweddau humig dietegol ar ymateb imiwn a phroffiliau gwaed mewn perchyll. Neilltuwyd cyfanswm o 24 perchyll croesfrid (Gwyn Slofacia × Landrace; 35 diwrnod oed; pwysau corff cyfartalog o 11.67 kg) i ddau grŵp dietegol gyda (arbrofol; 5 g·kg−1 ) neu heb (rheolaeth; 0). g·kg−1 ) ychwanegiad sylweddau hwmig naturiol. Yn yr astudiaeth hon, gwelsom gynnydd sylweddol yng nghyfran y lymffocytau CD4+CD8- (p < {{10}}.001) yn y grŵp arbrofol. Roedd y canlyniadau hefyd yn dangos tueddiad i gynnydd yng ngweithgaredd ffagosytaidd a chynhwysedd amlyncu ffagosytau a niferoedd yr isboblogaethau lymffocytau eraill a fonitrwyd (CD{3+, CD21+, CD4-D). 8+, CD4+CD8+, CD4+CD25+) mewn perchyll yn y grŵp arbrofol o gymharu â'r grŵp rheoli. Cynyddodd ychwanegiad sylweddau hwmig serwm ffosffatas alcalïaidd o'i gymharu â'r grŵp rheoli (p < 0.05). Ni chafodd paramedrau gwaed eraill a fonitrwyd eu heffeithio'n sylweddol gan driniaeth ddeietegol. Daeth i'r casgliad y gallai cynnwys sylweddau humig yn neiet moch bach gael effaith ysgogol ar imiwnedd cellog, heb effaith negyddol ar baramedrau hematolegol a biocemegol.
Geiriau allweddol: sylweddau humig; ffagocytosis; lymffocyt; biocemeg gwaed; haematoleg; perchyll

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd
1. Rhagymadrodd
Mae sylweddau humig (HS) yn ddosbarth o gyfansoddion bioactif organig naturiol nad ydynt yn faethol a ffurfiwyd mewn priddoedd [1]. Maent yn gydrannau hwmws pwysig a'u prif swyddogaeth yw trosglwyddo maetholion o'r pridd i organebau byw. Mae HS yn benodol yn cynnwys asid hwmig, asid fulvic, a humin fel eu prif gyfansoddion [2]. Mae'r cydrannau hyn yn hanfodol ar gyfer twf planhigion [3] a gallant hyrwyddo'r defnydd effeithlon o faetholion gan y planhigyn [4]. Oherwydd y gwaharddiad ar ddefnyddio gwrthfiotigau fel hyrwyddwyr twf yn yr Undeb Ewropeaidd, mae diddordeb mewn ychwanegion bwyd anifeiliaid amgen ar gyfer cynhyrchu anifeiliaid wedi cynyddu [5]. Yn ystod y ddau ddegawd diwethaf, mae'r diddordeb yn y defnydd o HS mewn maeth anifeiliaid wedi cynyddu [2,6]. Gwelodd llawer o awduron welliant yn y paramedrau cynhyrchu ar ôl ychwanegu HS i borthiant yn ystod eu hastudiaethau. Yn ystod y blynyddoedd diwethaf, dangoswyd bod HS wedi ychwanegu at borthiant anifeiliaid monogastrig fel moch, dofednod, a chwningod yn hybu twf [7–10]. Ar ben hynny, mae HS wedi'i ddefnyddio fel asiant imiwn-ysgogol, gwrth-ddolur rhydd, analgig a gwrthficrobaidd mewn practisau milfeddygol [11-13]. Roedd ychwanegu atchwanegiadau biolegol weithgar o natur humig i ddeiet anifeiliaid yn ysgogi prosesau metabolaidd a threuliadwyedd maetholion a hefyd yn ysgogi amsugno rhai elfennau mwynau [14]. Canfu astudiaethau eraill fod HS yn helpu i leihau ysgarthiad amonia o dail ac yn gwella nifer cymharol y lymffocytau gwaed. Mae'r addasiadau a grybwyllir uchod yn helpu imiwnedd yr anifeiliaid [2,8,15]. Fodd bynnag, oherwydd y gwahanol ffynonellau a mathau o baratoadau HS, yn ogystal â'r ffaith nad oes un safon ar gyfer mesur effeithiau HS gwirioneddol, mae eu bio-effaith yn dibynnu ar fanyleb. Yn seiliedig ar ein canlyniadau blaenorol a phrofiadau o astudiaethau dofednod (brwyliaid ac ieir dodwy) ar effaith sylweddau hwmig (mewn crynodiadau o 0.8% a 0.5%, yn y drefn honno) ar y statws imiwnedd ac ymateb imiwn, fe benderfynon ni wirio'r effaith hon mewn perchyll. Gwelsom gynnydd sylweddol mewn gweithgaredd ffagosyt ac ymateb celloedd B, yn ogystal â chynnydd sylweddol yn y gymhareb lymffocytau CD{{21}:CD8+ [16,17]. Yn gyffredinol, nid yw ychwanegiad fel ychwanegyn bwyd anifeiliaid mewn moch wedi'i adrodd yn dda o'i gymharu â dofednod, ac mae astudiaethau gwyddonol ar ddylanwad ychwanegiad HS mewn diet moch ar imiwnedd a metaboledd yn dal yn gymharol gyfyngedig. Felly, cynhaliwyd yr astudiaeth hon, fel treial peilot, i asesu effaith ychwanegiad HS 0.5% ar y dangosyddion imiwnedd, yn ogystal â newidynnau biocemegol a hematolegol yng ngwaed moch bach.

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd
Cliciwch yma i weld cynhyrchion Gwella Imiwnedd Cistanche
【Gofyn am fwy】 E-bost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
2. Defnyddiau a Dulliau
2.1. Dylunio Arbrofol
Cynhaliwyd yr arbrawf yn unol â'r "Gyfarwyddeb Ewropeaidd ar amddiffyn anifeiliaid a ddefnyddir at ddibenion gwyddonol" [18]. Cafodd yr anifeiliaid eu cartrefu mewn stablau achrededig yr Adran Maeth Anifeiliaid a Hwsmonaeth ym Mhrifysgol Meddygaeth Filfeddygol yn Košice, Slofacia, o dan yr amodau sŵhylan gofynnol. Yn ystod yr arbrawf, y tymheredd cyfartalog yn y stabl oedd 20.2 ± 1.5 ◦C, a'r lleithder cymharol oedd 68.5 ± 4.8%. Cymeradwywyd y treial gan Gomisiwn Moeseg Prifysgol Meddygaeth Filfeddygol a Fferylliaeth yn Košice (protocol rhif EKV/2022-11). Rhannwyd cyfanswm o 24 moch bach croesfrid (Gwyn Slofacia x Landrace) 35-ferch undydd yn ddau grŵp (n=12; 50% gwrywaidd a 50% benywaidd yn y ddau grŵp). Cyn dechrau'r arbrawf, cofnodwyd pwysau corff anifeiliaid cyfartalog cychwynnol (BW) o 11.68 ± 1.35 kg yn y grŵp rheoli a 11.65 ± 1.34 kg yn y grŵp arbrofol. Cynhwyswyd y grwpiau arbrofol canlynol yn yr astudiaeth: y grŵp rheoli a'r grŵp arbrofol, lle cafodd diet y grŵp arbrofol ei ategu gan atodiad HS 0.5%. Parhaodd yr arbrawf am 4 wythnos. Defnyddiwyd yr un dietau ar gyfer y ddau grŵp yn yr arbrawf (Tabl 1). Gwireddwyd cyflwyno'r atodiad HS i'r diet ar draul haidd yn y grŵp arbrofol. Roedd y moch yn cael eu bwydo ddwywaith y dydd gyda chymysgeddau porthiant cyflawn. Roedd dŵr yfed ar gael i'r anifeiliaid ad libitum trwy gydol y cyfnod arbrofol. Lluniwyd y cymysgeddau porthiant cyflawn yn yr arbrawf yn unol â'r gofynion maethol gan Šimeˇcek et al. [19]. Cafodd yr atodiad HS naturiol dietegol (HUMAC® Natur AFM; Humac, Ltd., Košice, Slofacia) ei falu a'i buro'n gorfforol gyda Leonardite heb driniaeth gemegol. Dadansoddwyd y cymysgeddau porthiant cyflawn ar gyfer deunydd sych, protein crai, ffibr crai, cyfanswm lludw, startsh, a chyfanswm ffosfforws yn unol â Rheoliad 152/2009 y Comisiwn Ewropeaidd [20]. Dadansoddwyd lefel y calsiwm a sodiwm dietegol gan ddefnyddio dull fflam sbectromedr amsugno atomig (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK). Cyfrifwyd gwerthoedd egni metaboladwy cymysgeddau porthiant cyflawn gyda'r fformiwla yn unol â'r Šimeˇcek et al. [19].
2.2. Samplu a Mesuriadau
Yn wythnos 4, yn y bore ar ddiwrnod olaf yr arbrawf, cymerwyd samplau gwaed gan y twll sinws orbitol o bob mochyn yn unigol yn y ddau grŵp i'w dadansoddi wedyn. Cafwyd serwm trwy allgyrchiad (3000 rpm am 30 munud) a'i storio ar −20 ◦C tan ddadansoddiad. Defnyddiwyd gwaed heparinized i bennu paramedrau hematolegol, profi gweithgaredd ffagosyt, a nodi isboblogaethau lymffosyt.
Tabl 1. Fformiwla a chyfansoddiad cemegol cymysgeddau porthiant ar gyfer moch (ar sail bwydo).

2.2.1. Paramedrau Haematolegol a Serwm Biocemegol
Perfformiwyd cyfrif gwaed cyflawn gyda dadansoddwr haematoleg awtomataidd (Scil Vet ABC™ Haematology Analyzer, yr Almaen). Y newidynnau a werthuswyd yn ein hastudiaeth oedd gwerth hematocrit (HCT), crynodiad haemoglobin (Hb), cyfrif celloedd gwaed coch (RBC), cyfaint corpwswlaidd cymedrig (MCV), a chyfrif cyfanswm celloedd gwaed gwyn (WBC). Mesurwyd paramedrau biocemegol serwm - cyfanswm protein, albwmin, glwcos, wrea, triglyseridau, colesterol, creatinin, aspartate aminotransferase (AST), ffosffatase alcalïaidd (ALP), a ffosfforws gan ddefnyddio dadansoddwr benchtop mynediad cwbl awtomatig (Ellipse, yr Eidal). Pennwyd crynodiad calsiwm mewn serwm trwy gyfrwng sbectromedr amsugno atomig fflam (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK).
2.2.2. Biomarcwr y Perocsidiad Lipid
Mesurwyd y crynodiadau o gynhyrchion perocsidiad lipid (lefelau malondialdehyde, MDA) mewn serwm fel sylweddau adweithiol asid thiobarbitwrig (TBARs) yn ôl y dull addasu sbectroffotometrig a ddisgrifiwyd gan Costa et al. [21]. Yn gryno, cymysgwyd samplau serwm â hydoddiant a oedd yn cynnwys asid trichloroacetig (15%; Merck, Darmstadt, yr Almaen), asid thiobarbitwrig (0.38%; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, UDA), a asid hydroclorig (0.25 N; Mikrochem, Pezinok, Slofacia) a'i gynhesu am 30 munud mewn baddon dŵr berwedig. Ar ôl oeri mewn dŵr iâ a centrifugio, mesurwyd amsugnedd y supernatant ar 535 nm. Penderfynwyd ar y crynodiad o TBARs o'r gromlin safonol a baratowyd gan ddefnyddio 1,1,3,3-tetrameth oxy propane (malondialdehyde-bis (dimethyl acetal); Acros Organics, Geel, Gwlad Belg). Mynegwyd y canlyniadau fel nmol o MDA/mL o serwm.

system imiwnedd sy'n cynyddu planhigion cistanche
2.2.3. Profi Gweithgaredd Ffagocyt ac Adnabod Isboblogaethau Lymffosyt
Defnyddiwyd assay masnachol Phagotest® (Celonic, Munich, yr Almaen) i bennu gweithgaredd ffagosytaidd a chynhwysedd amlyncu'r ffagosytau. Dilynwyd cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr wrth gynnal y prawf. Defnyddiwyd assay immunostaining uniongyrchol i nodi isboblogaethau dethol o lymffocytau. Defnyddiwyd dau gyfuniad o wrthgyrff monoclonaidd gwrth-fochlyn cyfun llygoden: CD3e/CD21 a CD4/CD8a/CD25 yn unol â'r manylebau a roddir yn Nhabl 2. Cafodd gwaed heparinedig yn y swm o 50 µL ei ddeor â gwrthgyrff monoclonaidd am 15 munud yn y tywyllwch ar dymheredd labordy. Ar ôl deori, ychwanegwyd 1 ml o hydoddiant lysis BD FACS at y tiwbiau. Cafodd y tiwbiau eu deor am 20 munud ychwanegol yn y tywyllwch ar dymheredd labordy ac yna eu centrifugio (300 × g am 5 munud). Yna cafodd pelenni celloedd eu golchi a'u centrifugio ddwywaith gyda halwynog byffer ffosffad 1 mL (PBS; MP Biomedicals, Illkirch-Graffenstaden, Ffrainc) ar 300 × g am 5 munud. Yn olaf, cafodd celloedd eu hailddarparu mewn 200 µL o PBS ar gyfer dadansoddiad cytometrig dilynol.
Tabl 2. Manyleb a symiau'r gwrthgyrff monoclonaidd gwrth-fochyn llygoden a ddefnyddiwyd.

Perfformiwyd dadansoddiad gweithgaredd phagocytic yn ogystal ag adnabod isboblogaethau lymffocyt ar cytomedr llif BD FACSCantoTM chwe-liw (Becton Dickinson Biosciences, San Jose, CA, UDA) gan ddefnyddio meddalwedd BD FACS DivaTM. Roedd safle'r celloedd a ddadansoddwyd wedi'u gosod mewn lleiniau dotiau FSC vs SSC. Cafodd granulocytes, monocytes, a'r ddwy boblogaeth gell gyda'i gilydd, yn y drefn honno, eu porthi ar gyfer dadansoddi gweithgaredd phagocytig. Yn seiliedig ar y cynnwys DNA isel yn yr histogram fflworoleuedd coch (FL-2), ni chafodd agregau bacteriol eu dadansoddi ymhellach. Pennwyd canran y ffagosytau gweithredol a'r dwyster fflworoleuedd cymedrig yn yr histogram fflworoleuedd gwyrdd (FL-1). Defnyddiwyd lymffocytau â gatiau (Ffigur 1a,b) i nodi isboblogaethau lymffocytau. Mae lymffocytau CD3+ yn cynrychioli lymffocytau T a lymffocytau CD21+ B (Ffigur 1c). Gwerthuswyd yr isboblogaeth CD4+CD8- fel lymffocytau cynorthwy-ydd T, CD4-CD8+ fel lymffocytau sytotocsig, CD{11}}CD8+ fel lymffocytau T positif dwbl (Ffigur 1d), a CD4+CD25+ fel lymffocytau T rheoleiddiol (Ffigur 1e). Mynegir cyfrannau o lymffocytau mewn canran.
2.3. Dadansoddiad Ystadegol
Gwerthuswyd y canlyniadau'n ystadegol gan brawf-t heb ei baru gyda'r meddalwedd ystadegol GraphPad Prism 8.0. Ystyriwyd gwerth p < 0.05 yn ystadegol arwyddocaol. Mynegwyd y canlyniadau a gafwyd yn yr arbrawf hwn fel cymedr ± gwall safonol y modd (SEM).

Ffigur 1. Strategaeth gatio: (a) pennu lleoliad lymffocytau (coch) ar y llain dot sylfaenol (FSC-A yn erbyn SSC-A); (b) tynnu dyblau ac agregau o'r dadansoddiad; (c) dadansoddiad o gynrychioliad lymffocytau CD3+ a CD21+; (ch) dadansoddiad o gynrychioliad lymffocytau CD4+ a CD8+; (d) canfod cynrychioliad lymffocytau CD4+CD{25+ ar histogram o gelloedd positif CD4+ (wedi'u gatio â gwyrdd).
3. Canlyniadau
3.1. Paramedrau Haematolegol a Serwm Biocemegol
Cyflwynir effeithiau HS ar broffiliau gwaed hematolegol a biocemegol yn Nhabl 3. Y paramedrau gwaed a bennir gan gynnwys cynnwys celloedd gwaed coch, celloedd gwaed gwyn, hemoglobin, hematocrit, cyfaint corpwswlaidd cymedrig, cyfanswm protein, albwmin, glwcos, wrea, triglyseridau , nid oedd y driniaeth HS dietegol yn effeithio ar golesterol, creatinin, AST, Ca, a P. Fodd bynnag, cynyddodd ychwanegiad dietegol â HS weithgaredd ALP (p < 0.05).
Tabl 3. Effaith sylweddau humig ar rai paramedrau hematolegol a biocemegol serwm mewn perchyll

Ni effeithiwyd ar lefel serwm TBAR, cynhyrchion eilaidd perocsidiad lipid (sy'n baramedr pwysig a ddefnyddir wrth benderfynu perocsidiad lipid), gan ychwanegu HS.
3.2. Ymateb Imiwnedd Cellog
Ni chafodd ychwanegu HS at borthiant perchyll effaith sylweddol ar ganran y ffagosytau gweithredol (Tabl 4) a chynhwysedd amlyncu'r ffagosytau (Tabl 5). Canfuwyd gwerthoedd uwch y paramedrau ymateb imiwn cynhenid hyn yn y grŵp arbrofol o'i gymharu â'r grŵp rheoli.
Tabl 4. Effaith sylweddau hwmig ar y gweithgaredd ffagosyt mewn gwaed perchyll wedi'i werthuso fel canran o ffagosytau gweithredol - gweithgaredd ffagosytaidd

Tabl 5. Effaith sylweddau hwmig ar gynhwysedd amlyncu'r ffagosytau wedi'i fynegi fel dwyster fflworoleuedd cymedrig (MFI).


Ffigur 2. Parhad.

Ffigur 2. Effaith sylweddau humig ar ganran y lymffocytau: (a) CD3+; (b) CD21+; (c) CD4+CD8-; (ch) CD4-CD8+; (d) CD4+CD8+; (dd) CD4+CD{{1{0}}; a (g) cymhareb lymffocytau CD4:CD8 yng ngwaed y perchyll. Mae'r golofn sydd wedi'i labelu â seren yn sylweddol wahanol i'r rheolydd (*** p < 0.001).
4. Trafodaeth
4.1. Ymateb Imiwnedd Cellog
Prif amcan ein hastudiaeth oedd olrhain sut roedd sylweddau humig (HS) yn effeithio ar ychydig o wahanol ddangosyddion imiwnedd cellog. Dewiswyd canran y ffagosytau gweithredol a'u gallu amlyncu fel dangosyddion ar gyfer monitro'r effaith ar imiwnedd cellog cynhenid. Yn ein hastudiaeth flaenorol, canfuwyd bod ychwanegu HS at ddeietau ({{0}}.8%) o frwyliaid yn cynyddu gweithgarwch ffagosytaidd yn sylweddol yn ogystal â dwyster fflworoleuedd cymedrig [16]. Yn ogystal, gwelodd ELnaggar ac El-Kelawy [22] gynnydd mewn gweithgaredd phagocytig a mynegai phagocytig ar ôl ychwanegu asid humig i'r diet (0.1, 0.2, a 0. 4%) o ieir Sacco. Cafwyd canfyddiadau tebyg gydag ieir dodwy [17]. Yn yr astudiaeth gyfredol, ni chafodd ychwanegu HS at ddeiet moch bach unrhyw effaith sylweddol ar ffagocytosis. Fodd bynnag, roedd canran y ffagosytau gweithredol yn ogystal â'u gallu amlyncu yn rhifol uwch mewn perchyll wedi'u hategu â HS nag mewn perchyll yn y grŵp rheoli. Yn ôl Sanmiguel a Rondón [23], mae effaith HS ar ffagosytau yn dibynnu ar amser. Canfuwyd bod ychwanegu HS at ddiet (0.1 a 0.2%) o ieir dodwy yn cynyddu'r mynegai ffagosytaidd ar ddiwrnodau 8 a 30 o'r cais, ond wedi'i gymharu i rai Wang et al. [2], a ganfu fod gan foch yr oedd eu porthiant wedi ychwanegu 10% HS ato, gyfrifiadau lymffocytau cymharol uwch. Cafwyd canlyniadau tebyg ar gyfer dofednod, a gafodd eu bwydo â diet wedi'i ategu â 0.15% humate [24], neu a ychwanegwyd at 20 mg o asid humig / kg o bwysau'r corff mewn dŵr yfed [25]. Yn ôl Cetin et al. [24], mae ychwanegu cyfansoddion hwmig at ddeietau ieir dodwy yn arwain at gynnydd sylweddol yn y cyfrifon lymffosyt, y gellir ei briodoli i gynhyrchiad cynyddol o IL-2, yn ogystal â mynegiant yr IL{{29} } derbynnydd ar lymffocytau. Mae'n ymddangos bod sylweddau humig yn gwella gweithgaredd celloedd cynhyrchu IL. Fodd bynnag, ni welodd awduron eraill unrhyw effaith sylweddol ar gyfrif lymffocytau mewn moch a oedd yn cael eu bwydo â phorthiant wedi'i ychwanegu at asid humig [26] yn ogystal ag mewn ieir y rhoddwyd asidau hwmig iddynt yn eu dŵr yfed [27] neu eu diet [22] . Mae ein canlyniadau yn debyg i arsylwadau Mudro ˇnová et al. [16], a ganfu fod canran y lymffocytau CD4 wedi'i gynyddu'n sylweddol ar gyfer brwyliaid sy'n cael ychwanegiad HS (0.8%) o'i gymharu â'r grŵp rheoli. Fe wnaethant hefyd nodi gostyngiad sylweddol mewn lymffocytau CD8+ (lymffocytau sytotocsig T), a arweiniodd at gymhareb CD4:CD8 ystadegol uwch, a ddefnyddir fel arwydd o ysgogiad imiwn. Ar y llaw arall, cynyddodd ieir dodwy sy'n bwydo â diet o 0.5% HS yn sylweddol gyfran y lymffocytau IgM+ sy'n cynrychioli is-boblogaeth o lymffocytau B a lleihaodd yn sylweddol gyfran y lymffocytau CD{3+ sy'n cynrychioli cyfanswm lymffocytau T. Ni effeithiwyd ar gyfran y cynorthwyydd T a lymffocytau cytotocsig T [17]. Yn seiliedig ar ein canlyniadau, yn ogystal ag astudiaethau amrywiol, mae'n dilyn y gall HS gael effaith imiwn-ysgogol y gellir ei dylanwadu gan gyfansoddiad a maint y humates a ddefnyddir, y dull o'u gweinyddu, y rhywogaethau anifeiliaid, ac, yn ôl ELnaggar ac El. -Kelawy [22], trwy fagu anifeiliaid mewn gwahanol ranbarthau o'r byd, yn wahanol mewn hinsawdd. Yn ddamcaniaethol, gall imiwnofodyliad HS gynnwys ffurfio cyfadeiladau o humates gyda sacaridau. Mae'r cyfadeiladau hyn yn rhwymo i wyneb lymffocytau T a chelloedd NK ac yn effeithio ar eu swyddogaeth, gan gynnwys cynhyrchu cytocinau, sy'n dylanwadu ymhellach ar gelloedd eraill y system imiwnedd [28].

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd
4.2. Paramedr Haematolegol a Serwm Biocemegol
Amcan arall yr astudiaeth hon oedd gwerthuso paramedrau gwaed hematolegol a biocemegol dethol o ddeietau sy'n cael eu bwydo gan berchyll wedi'u hategu â HS. Ni chanfuwyd unrhyw wahaniaeth arwyddocaol mewn newidynnau dethol o brotein, egni, a metaboledd mwynau, yn ogystal ag mewn mynegeion hematolegol, rhwng y grŵp arbrofol o anifeiliaid ag atchwanegiadau dietegol HS a'r grŵp rheoli, ac eithrio gweithgaredd ALP yn yr astudiaeth gyfredol. Roedd dangosyddion biocemegol yn ein hastudiaeth o fewn yr ystod gyfeirio ym mhob moch bach, yn ôl Doubek et al. [29] a Kraft a Dürr [30]. Mae ein canfyddiadau yn unol â gwaith blaenorol gan Wang et al. [2], na ddaeth o hyd i unrhyw newidiadau sylweddol yn y celloedd gwaed coch a gwyn yn ystod y treial yn eu hastudiaeth i ddarganfod effeithiau HS ar newidynnau gwaed mewn moch yn pesgi. Ar ôl triniaeth â diet sy'n cynnwys HS, mae Herzig et al. [31], a hefyd Šamudovská a Demeterová [32], arsylwodd gweithgaredd ALP heb fod yn sylweddol uwch mewn ieir. Yn ein hymchwiliad, canfuom fod gan y grŵp arbrofol weithgaredd ALP sylweddol uwch na'r grŵp rheoli. Yn y cyfamser, arhosodd eu gwerthoedd o fewn yr ystod gyfeirio ar gyfer lefelau ALP moch (2–17 kat·L −1 ) [29,30]. Ar y llaw arall, Jad'uttová et al. [33] a Rath et al. [34] sylwi ar ostyngiad sylweddol mewn gweithgaredd ALP mewn ieir ar ôl bwydo gyda HS. Gostyngodd lefelau gwaed ALP mewn brwyliaid a gafodd 1.00% o atodiad porthiant HS, yn ôl yr awduron hyn. Er bod gwerthoedd gostyngol gweithgaredd DDdY yn y Rath et al. [34] astudiaeth yn ystadegol wahanol na'r rheolaethau, nid oeddent yn adlewyrchu unrhyw effaith wenwynig o HS ar organau dethol (cyhyr, arennau, y galon, neu afu). Gall faint o HS a ddarperir gan y diet effeithio ar grynodiad mwynau yn y gwaed. Nid oedd lefelau calsiwm a ffosfforws yn serwm gwaed y perchyll yn cael eu heffeithio gan grynodiad o 0.5%. Gallai gallu HS i gelu metelau, sy'n cael ei ddylanwadu gan lawer iawn o gadwyni ochr asid carbocsilig, fod y rheswm dros y gostyngiad mewn crynodiadau serwm mwynau [34]. Yn ein hastudiaeth, ni chafodd y crynodiadau o galsiwm a ffosfforws yng ngwaed perchyll eu gostwng yn is na'r gwerthoedd cyfeirio trwy ychwanegu HS at gymysgedd porthiant y grŵp arbrofol. Mae MDA yn gynnyrch perocsidiad lipid a achosir gan radicalau rhydd o ocsigen, y gellir ei ddefnyddio fel marciwr i asesu statws gwrthocsidiol a perocsidiad lipid [35]. Penderfynwyd ar MDA fel biomarcwr straen ocsideiddiol trwy fesur lefelau sylweddau adweithiol asid thiobarbitwrig (TBARs) yn y gwaed. Nodweddir gostyngiad mewn straen ocsideiddiol gan ostyngiad mewn lefelau MDA. Mae ymchwil flaenorol wedi dangos y gallai fod gan HS briodweddau gwrthocsidiol, sy'n amddiffyn rhag amrywiaeth o anhwylderau sy'n gysylltiedig â'r straen ocsideiddiol y mae radicalau rhydd yn ei achosi fel arfer. Er enghraifft, mae Wang et al. Canfu [15] y gallai ychwanegiad dietegol sodiwm humate (2000 mg·kg−1 ) wella statws gwrthocsidiol perchyll wedi'u diddyfnu. Fe wnaethant arsylwi gostyngiad sylweddol yng nghynnwys MDA yn y serwm, yn ogystal â chynnydd sylweddol yng nghyfanswm y gallu gwrthocsidiol. Fodd bynnag, mae HS yn ddeunyddiau naturiol gyda chyfansoddiad amrywiol, a all achosi effeithiolrwydd gwahanol, a all hefyd ddibynnu ar y swm a weinyddir ganddynt. Yn yr arbrawf presennol, ni welwyd unrhyw amrywiad yn lefelau serwm MDA (TBARs) y perchyll a borthwyd HS o gymharu â'r grŵp rheoli. Mae ein canlyniadau yn gyson â Zhang et al. [36], a ganfu nad oedd ychwanegu sodiwm humate i'r dietau (0.1, 0.3, a 0.5%) o ieir dodwy yn cael unrhyw effaith ar gyfanswm gallu gwrthocsidiol serwm a gwerthoedd MDA.

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd
5. Casgliadau
Yn seiliedig ar y canlyniadau a gafwyd yn yr astudiaeth hon, gellir dod i'r casgliad y gallai atodiad diet â 0.5% o sylweddau humig gael effaith ysgogol ar rai celloedd imiwnedd mewn perchyll. Roedd cynnydd sylweddol yng nghyfran y lymffocytau CD4+CD{{{}} yn y gwaed. Atchwanegiad â sylweddau humig cynyddu serwm ALP. Fodd bynnag, roedd y gwerthoedd hyn yn dal o fewn yr ystod cyfeirio. Dangosodd y canlyniadau y gall hyd yn oed crynodiad mor isel o HS effeithio'n gadarnhaol ar imiwnedd cellog mewn perchyll. Oherwydd y ffaith bod y crynodiad o sylweddau humig a ddewiswyd gennym yn cael effaith sylweddol yn unig ar rai dangosyddion imiwnedd cellog, bydd angen astudiaethau pellach i ddewis crynodiad priodol a chadarnhau'r effaith ysgogol ar imiwnedd yn y categori hwn o anifeiliaid.
Cyfeiriadau
1. Peña-Méndez, EM; Havel, J. ; Patoˇcka, J. Sylweddau humig - cyfansoddion o strwythur anhysbys o hyd: Cymwysiadau mewn amaethyddiaeth, diwydiant, yr amgylchedd a biofeddygaeth. J. Appl. Biomed. 2005, 3, 13–24. [CrossRef]
2. Wang, Q.; Chen, YJ; Yoo, JS; Kim, HJ; Cho, JH; Kim, IH Effeithiau sylweddau humig atodol ar berfformiad twf, nodweddion gwaed, ac ansawdd cig mewn moch pesgi. Byw. Sci. 2008, 117, 270–274. [CrossRef]
3. Visser, SA Effaith sylweddau humig ar anifeiliaid uwch a dyn, y defnydd posibl o gyfansoddion humig mewn triniaethau meddygol. Mewn Trafodion Cyfarfod Cymdeithas Ryngwladol Asid Hwmig, Sevilla, Sbaen, 1988; p. 27.
4. Stevenson, FJ Humus Cemeg: Genesis, Cyfansoddiad, Adweithiau; Wiley-Inter-Science: Efrog Newydd, NY, UDA, 1994; tt 34–41.
5. Hassan, HMA; Mohamed, MA; Youssef, AW; Hassan, ER Effaith defnyddio asidau organig yn lle hyrwyddwyr twf gwrthfiotig ar berfformiad a microflora berfeddol brwyliaid. Asiaidd-Awst. J. Anim. Sci. 2010, 23, 1348–1353. [CrossRef]
6. Gálik, B. ; Hrnˇcár, C. ; Gašparoviˇc, M.; Rolinec, M.; Hanušovský, O.; Juráˇcek, M.; Šimko, M.; Zábranský, L.; Kovacik, A. Effaith Sylweddau Humic ar Ansawdd Cig Ym Mheshau Ffesant Fferm (Phasianus colchicus). Amaethyddiaeth 2023, 13, 295. [CrossRef]
7. Karaoglu, M.; Macit, M. ; Esenbuga, N.; Durdag, H.; Turgut, L. ; Bilgin, OC Effaith humate atodol ar wahanol lefelau ar berfformiad twf, lladd a nodweddion carcas brwyliaid. Int. J. Poult. Sci. 2004, 3, 406–410.
8. Ji, F. ; McGlone, JJ; Kim, SW Effeithiau sylweddau humig dietegol ar berfformiad twf mochyn, nodweddion carcas, ac allyriadau amonia. J. Anim. Sci. 2006, 84, 2482–2490. [CrossRef]
9. Lacková, Z. ; Zigo, F.; Farkašová, Z.; Ondrašoviˇcová, S. Effaith Sylweddau Humig fel Atchwanegiad Organig ar Berfformiad Tewhau, Ansawdd Cig, a Pharamedrau Biocemegol Dethol Cwningod. Bywyd 2022, 12, 1016. [CrossRef]
10. Kaevska, M.; Lorecova, A.; Videnska, P.; Sedlar, K.; Provaznik, I. ; Trckova, M. Effaith sodiwm humate a sinc ocsid a ddefnyddir mewn proffylacsis o ddolur rhydd ar ôl diddyfnu ar gyfansoddiad microbiota fecal mewn perchyll wedi'u diddyfnu. milfeddyg. Med. 2016, 61, 328–336. [CrossRef]
11. Trckova, M. ; Matlova, L.; Hudcova, H.; Martin, F.; Zraly, Z.; Dvorska, L.; Beran, V. ; Pavlik, I. Mawn fel atodiad ymborth i anifeiliaid: Adolygiad. milfeddyg. Med. -Tsiec. 2005, 50, 361–377. [CrossRef]
12. Weber, TE; van Sambeek, DM; Gabler, NK; Kerr, BJ; Moreland, A.S.; Johal, A.S.; Edmonds, MS Effeithiau asid humig a bwtyrig dietegol ar berfformiad twf ac ymateb i lipopolysaccharid mewn moch ifanc. J. Anim. Sci. 2014, 92, 4172–4179. [CrossRef]
13. Mao, Y. Modiwleiddio perfformiad twf, cyfansoddiad cig, statws ocsideiddiol, ac imiwnedd brwyliaid gan asidau fulvic dietegol. Poult. Sci. 2019, 98, 4509–4513. [CrossRef] [PubMed]
14. Stepchenko, LM Rôl paratoadau humig wrth reoli prosesau metabolaidd wrth ffurfio cynhyrchion biolegol anifeiliaid amaethyddol. Mewn Llwyddiannau a Rhagolygon at Ddefnyddio Sylweddau Hwmig Mewn Amaethyddiaeth; Tŷ Cyhoeddi'r Sefydliad Amaethyddol: Dnepropetrovsk, Wcráin, 2008; tt 70–74. (Yn Rwsieg)
15. Wang, C. ; Ying, J. ; Zou, P.; Zhou, Y.; Wang, B. ; Yu, D.; Li, W. ; Zhan, X. Effeithiau ychwanegiad dietegol sodiwm asid humig a sinc ocsid ar berfformiad twf, statws imiwnedd a gallu gwrthocsidiol perchyll wedi'u diddyfnu. Anifeiliaid 2020, 10, 2104. [CrossRef] [PubMed]
16. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V. ; Pešulová, T.; Košˇcová, J.; Marušˇcáková, IC; Bartkovský, M.A.; Marcinˇcáková, D.; Ševˇcíková, Z.; Marcinˇcák, S. Effaith sylweddau humig ar ficrobiota'r perfedd ac ymateb imiwn brwyliaid. Bwyd Amaeth. Imiwnol. 2020, 31, 137–149. [CrossRef]
17. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V. ; Semjon, B. ; Nad', P.; Košˇcová, J.; Bartkovský, M.A.; Makiš, A.; Buj ˇnák, L.; Nagy, J. ; Mojžišová, J.; et al. Effeithiau ychwanegiad dietegol at sylweddau humig ar baramedrau cynhyrchu, statws imiwnedd a microbiota perfedd ieir dodwy. Amaethyddiaeth 2021, 11, 744. [CrossRef]
18. Comisiwn Ewropeaidd. Cyfarwyddeb 2010/63/EU Senedd Ewrop a'r Cyngor dyddiedig 22 Medi 2010 ar ddiogelu anifeiliaid a ddefnyddir at ddibenion gwyddonol. I ffwrdd. J. Eur. Undeb 2010, 276, 33–79.
19. Šimeˇcek, K. ; Zeman, L.; Heger, J. Gofyniad maethol a thablau o werthoedd maethol porthiant moch, 3ydd arg.; Academi Gwyddorau Amaethyddol Tsiec: Brno, Gweriniaeth Tsiec, 2000; 125p. (Yn Tsieceg)
20. Y Comisiwn Ewropeaidd. Rheoliad y Comisiwn (EC) Rhif 152/2009 dyddiedig 27 Ionawr 2009 sy'n gosod y dulliau samplu a dadansoddi ar gyfer rheolaeth swyddogol ar fwyd anifeiliaid. I ffwrdd. J. Eur. Undeb. 2009, 54, 2–54.
21. Costa, CM; Santos, RCC; Lima, ES Gweithdrefn awtomataidd syml ar gyfer mesur thiol mewn samplau serwm dynol. J. Bras. Patol. Med. Lab. 2006, 42, 345–350. [CrossRef]
22. ELnaggar, AS; El-Kelawy, MI Effaith ychwanegion asid hwmig ar berfformiad cynhyrchiol, cyfansoddion gwaed, ymateb imiwn a nodweddion carcas cyw iâr Sasso. yr Aifft. J. Anim. Prod. 2018, 55, 75–84.
23. Sanmiguel, PR; Rondón, BI Mae atodiad â sylweddau humig yn effeithio ar yr imiwnedd cynhenid mewn ieir haen yn y cyfnod postio. Parch. MVZ Córdoba 2016, 21, 5198–5210. [CrossRef]
24. Cetin, E. ; Guclu, BK; Cetin, N. Effaith humate dietegol ac ychwanegiad asid organig ar straen cymdeithasol a achosir gan ddwysedd stocio uchel mewn ieir dodwy. J. Anim. milfeddyg. Adv. 2011, 10, 2402–2407.
25. Salah, H. ; Mansour, E.; Reham, RR; Abd El Hamid, ES Astudiaeth ar effaith asid humig ar berfformiad twf, imiwnolegol, rhai paramedrau gwaed a rheoli Clostridium berfeddol mewn ieir brwyliaid. Igam ogam. milfeddyg. J. 2015, 43, 102–109. [CrossRef]
26. Kim, K.; Bae, I. ; Cho, J. ; Choi, Y.; Ha, J. ; Choi, J. Effeithiau asid humig ac ychwanegiad powdr dail llus mewn porthiant ar gynhyrchiant, ansawdd gwaed ac ansawdd cig moch pesgi. Gwyddor Bwyd. Anim. Adnodd. 2019, 39, 276–285. [CrossRef] [PubMed]
27. Lala, AO; Okwelum, N.; Irekhore, OT; Ogunlade, BA; Adigun, AA; Elegbede, ALl; Oyedeji, MM Paramedrau haematolegol a biocemegol cyw iâr brwyliaid wedi'u hategu ag asid humig yn y dŵr yfed. Appl. Trop. Amaeth. 2016, 21, 74–78.
28. Terratol, LLC Effeithiau Asid Humic ar Anifeiliaid a Bodau Dynol. Ar gael ar-lein: https://fulvic.info/wp-content/uploads/2019 /01/M-Terratrol_Article{6}}.pdf (cyrchwyd ar 10 Awst 2022).
29. Doubek, J. ; Šlosárková, S.; ˇ Reháková, K.; Bouda, J. ; Scheer, P.; Piperisová, I. ; Tomenendálová, J.; Matalová, E. Dehongliad o Ganfyddiadau Biocemegol a Haematolegol Sylfaenol mewn Anifeiliaid, 2il arg.; Noviko: Brno, Gweriniaeth Tsiec, 2010; p. 102. (Yn Tsieceg)
30. Kraft, W. ; Dürr, UM Klinická Laboratórna Diagnostika vo Veterinárnej Medicíne, arg 1af.; Hajko & Hajková: Bratislava, Slofacia, 2001; tt 1–380. (Yn Slofaceg)
31. Herzig, I. ; Navrátilová, M.; Totušek, J.; Suchý, P. ; Veˇcerek, V. ; Blahová, J. ; Zralý, Z. Effaith asid humig ar groniad sinc mewn meinweoedd brwyliaid cyw iâr. Tsiec J. Anim. Sci. 2009, 54, 121–127. [CrossRef]
32. Šamudovská, A.; Demeterová, M. Effaith diet wedi'i ategu â chyfansoddion humig naturiol a humate sodiwm ar berfformiad a dewiswyd newidynnau metabolaidd mewn ieir brwyliaid. Acta Milfeddyg. Brno 2010, 79, 385–393. [CrossRef]
33. Jad'uttová, I. ; Marcinˇcáková, D.; Bartkovský, M.A.; Semjon, B. ; Harˇcárová, M.; Nagyová, A.; Váczi, P.; Marcinˇcák, S. Effaith sylweddau humig dietegol ar berfformiad pesgi, cynnyrch y carcas, paramedrau biocemeg gwaed a phroffil mwynau esgyrn ieir brwyliaid. Acta Milfeddyg. Brno 2019, 88, 307–313. [CrossRef]
34. Rath, CC; Huff, WE; Huff, GR Effeithiau asid humig ar ieir brwyliaid. Poult. Sci. 2006, 85, 410–414. [CrossRef]
35. Sumida, S.; Tanaka, K.; Kitao, H.; Nakadomo, F. Perocsidiad lipid a achosir gan ymarfer corff a gollyngiad o ensymau cyn ac ar ôl ychwanegiad fitamin E. Int. J. Biochem. 1989, 21, 835–838. [CrossRef]
36. Zhang, AR; Pirzado, SA; Liu, GH; Chen, ZM; Chang, WH; Cai, HY; Bryden, WL; Zheng, AJ Mae atodiad dietegol â sodiwm humate yn gwella ansawdd wyau a swyddogaeth imiwnedd ieir dodwy. J. Appl. Anim. Nutr. 2020, 8, 93–99. [CrossRef]






