ali.ma@wecistanche.com

Sefydlu model arbrofol cydamserol o osteoporosis ynghyd â chlefyd Alzheimer mewn llygod mawr ac effeithiau deuol echinacoside ac acteosid o Cistanche tubulosa

Yi Chena, et al

ABSENOLDEB

Perthnasedd ethnopharmacolegol: Cistanche tubulosayn feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadol werthfawr a ddefnyddiwyd yn helaeth wrth drin osteoporosis aclefyd Alzheimer. Echinacoside ac acteoside yw'r prif gyfansoddion ynCistanche tubulosasydd â gweithgareddau ffarmacolegol â gwerth ymchwil. Adroddwyd y gallai echinacoside ac acteoside wella dysgu a gallu cof, hyrwyddo amlhau a gwahaniaethu osteoblast.

Nod yr astudiaeth: Echinacoside ac acteoside oCistanche tubulosawedi dangos gweithgareddau sylweddol o wrth-osteoporosis a gwrth-clefyd Alzheimer, er nad yw'r effeithiau hyn wedi'u hastudio ar yr un pryd mewn model llygod mawr. Nod yr astudiaeth hon oedd sefydlu a gwirio'r model osteoporosis ynghyd âclefyd Alzheimerinrats ac ymchwilio i effeithiau dwbl echinacoside ac acteoside ar y model cydamserol hwn.

Deunyddiau a dulliau:Gosodwyd tri grŵp model o ofariectomi (OVX), llawdriniaeth ffug gyda D-galactose ac AlCl3 (D), ofariectomi gyda D-galactos ac AlCl3 (OVX plws D) ar yr un pryd. Ovariectomized y llygod mawr mewn grwpiau trin cyffuriau. Wrth gynnal y pigiad mewnperitoneol o D-galactose a gweinyddu intragastrig oAlCl3 mewn llygod mawr o grwpiau trin cyffuriau, rhoddwyd echinacoside (90 mg/kg/d), acteoside(90 mg) i'r llygod mawr ar lafar /kg/d), a chyffuriau rheoli cadarnhaol valerate estradiol (0.6 mg/kg/d), donepezil HCl (0.8 mg/kg/d), yn y drefn honno. Ar ôl y driniaeth â chyffuriau am 8 wythnos, perfformiwyd prawf Morris Water Maze (MWM) am 6 diwrnod am y tro cyntaf. Yna aberthwyd y llygod mawr i gynaeafu'r gwaed, y groth, y femora, y tibiae, a meinwe'r ymennydd. Defnyddiwyd y serwm ar gyfer profion biocemegol. Defnyddiwyd yr uteri ar gyfer histomorphometreg. Defnyddiwyd y femora cywir ar gyfer Micro-CT a histomorphometreg, yn y drefn honno. Defnyddiwyd y tibiae cywir ar gyfer y prawf biomecanyddol. Defnyddiwyd yr hippocampus a gasglwyd ar y blwch iâ ar gyfer profion biocemegol. Defnyddiwyd yr ymennydd a gasglwyd gan ddarlifiad ar gyfer histomorphometreg.

Canlyniadau:O'i gymharu â'r grŵp Sham, gallai'r grŵp OVX plws D leihau'n sylweddol y gallu dysgu a chof trwy achosi niwed ocsideiddiol, amharu ar niwronau yn yr hipocampws, ac effeithio ar hydrolysis a synthesis acetylcholine. Yn y cyfamser, cynyddodd gweithgareddau BALP a TRAP yn y grŵp OVX plws D yn sylweddol (P <{{0}}.001) o="" gymharu="" â="" grŵp="" sham.="" yn="" ogystal,="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" sham,="" roedd="" y="" dwysedd="" mwynau="" esgyrn="" cymedrig="" yn="" amlwg="" wedi="" gostwng="" (p="">< 0.05),="" cafodd="" y="" màs="" esgyrn="" trabeciwlaidd="" a'r="" microbensaernïaeth="" eu="" dinistrio'n="" sylweddol="" hefyd="" yn="" yr="" ovx="" plus="" dgroup.="" ar="" ben="" hynny,="" gostyngodd="" y="" llwyth="" uchaf="" a'r="" straen="" uchaf="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.01)="" a="" gostyngodd="" yr="" amsugno="" egni="" yn="" fawr="" hefyd="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" sham.="" ar="" ôl="" cael="" ei="" weinyddu="" ag="" echinacoside="" ac="" acteoside,="" nodweddion="" patholegol="" nodweddiadol="" osteoporosis="">clefyd Alzheimereu gwella.

Casgliadau: Y model osteoporosis wedi'i gyfuno âclefyd Alzheimermewn llygod mawr yn ddichonadwy ac wedi'i sefydlu'n llwyddiannus. Dangosodd echinacoside ac acteoside hefyd rai effeithiau sylweddol ar y model cydamserol hwn, a gallent fod yn ymgeiswyr posibl oCistanche tubulosagydag effeithiau dwbl ar gyfer astudiaeth bellach.

Geiriau allweddol: osteoporosis,clefyd Alzheimer, effeithiau deuol,Echinacoside, Acteoside, Cistanche tubulosa

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

Cliciwch i Cistanche UK

1 Rhagymadrodd

Mae osteoporosis yn glefyd esgyrn dirywiol a nodweddir gan golled gynyddol o fàs esgyrn a dinistrio micro-bensaernïaeth, a all gynyddu'r risg o dorri esgyrn brau (Rachner et al., 2011).clefyd Alzheimer(AD) yn glefyd niwroddirywiol cyffredin ymhlith yr henoed a nodweddir gan ddirywiad meddwl parhaus, nam gwybyddol, a cholli gallu i fyw'n annibynnol yn glinigol (Reitz et al., 2011). Ffurfio plac henaint a achosir gan ddyddodiad -amyloid, tanglau niwroffibrilaidd a achosir gan orffosfforyleiddiad tau, a dirywiad niwronaidd yn yr ymennydd yw nodweddion patholegol nodweddiadol AD ​​(Serrano-Pozo et al., 2011). Yn arwynebol, mae OP ac AD yn glefydau cwbl annibynnol gyda gwahanol nodweddion patholeg a chlinigol. Fodd bynnag, gwelir yn aml fod OP ac AD yn cyd-ddigwydd mewn ymarfer clinigol (Zhang et al., 2001; Lui et al., 2003; Luckhaus et al., 2009). Cynyddodd nifer yr achosion o’r ddau glefyd gydag oedran, yn enwedig ymhlith menywod ar ôl diwedd y mislif (Li et al., 2017; Stern, 2012). Roedd mwy a mwy o dystiolaeth yn dangos bod pobl sy’n cael diagnosis o AD yn wynebu risg uwch o OP (Zhou et al., 2014).

Mae angen astudio ac egluro'r berthynas rhwng osteoporosis aclefyd Alzheimerin vitro ac in vivo. Cyn i'r astudiaethau gael eu perfformio, mae'n bwysig dewis y modelau anifeiliaid perthnasol o osteoporosis neuclefyd Alzheimer. Gellid sefydlu'r model osteoporosis trwy sawl math o ddulliau megis rhoi asid retinoig yn fewngastrig, llawdriniaeth ofariectomi, a chwistrelliad mewngyhyrol o glucocorticoidau (Wei et al., 2007; Komori, 2015). Yn arbennig, roedd y model osteoporosis postmenopausal a ysgogwyd gan ofariectomi mewn llygod mawr yn glasurol ac fe'i defnyddiwyd yn eang yn y rhan fwyaf o'r astudiaethau (Miao et al., 2012; Liu et al., 2017). Clefyd Alzheimer achlysurol yw'r prif fath o glefyd Alzheimer. Mae'r modelau anifeiliaid o SporadicGallai clefyd Alzheimercael ei achosi gan wahanol ddulliau megis pigiad o D-galactose neu -amyloid, gweinyddu intragastrig o AlCl3, ac yn y blaen (Bagheri et al., 2011; Gao et al., 2015; Justin Thenmozhi et al., 2017). Yn ogystal, theconjunction model oclefyd Alzheimera achosir gan chwistrelliad mewnperitoneol hirdymor o D-galactos ynghyd ag ovariectomi hefyd wedi'i astudio'n helaeth (Liu et al., 2010; Zhao et al., 2012). Er mwyn datgelu perthnasedd osteoporosis aclefyd Alzheimer, mae angen sefydlu'r model osteoporosis ynghyd âclefyd Alzheimeri astudio mecanweithiau cyffredin meddyginiaethau ar osteoporosis aclefyd Alzheimer.

Cistanche tubulosa(Schenk) Mae Wight yn blanhigyn parasitig, sy'n cael ei ddosbarthu'n bennaf yn yr anialwch yng Ngogledd-orllewin Tsieina. Mae'r coesynnau suddlon sych oCistanche tubulosa(CT) yn cael eu defnyddio fel tonicfeddygaeth enwog o'r enw Cistanches Herba gyda'i enw Tsieineaidd Roucongrong yn y Pharmacopoeia Tsieineaidd (2015). Fe'i hanrhydeddwyd fel 'ginseng yr anialwch' ac fe'i defnyddir yn helaeth ar gyfer trin poenau yn y waist a'r pen-glin, anffrwythlondeb benywaidd, a rhwymedd mewn meddygaeth Tsieineaidd draddodiadol (Jiang a Tu, 2009). Prif gyfansoddion gweithredol CT(Cistanche tubulosa)sef glycosidau ffenylethanoid (PhGs), echinacoside (ECH) ac acteoside (ACT) yw'r cyfansoddion cynrychioliadol yn PhGs (Morikawaet al., 2014). Yn arbennig, mae ECH ac ACT yn nodweddiadol yn cael eu dewis fel themarcwyr ar gyfer rheoli ansawdd mewn CT(Cistanche tubulosa)oherwydd eu cynnwys uchel ac amrywiol weithgareddau ffarmacolegol megis effeithiau niwro-amddiffyn, amddiffyn esgyrn, gwrthocsidyddion, gwrth-heneiddio, a gwella gallu dysgu a chof (Wang et al., 2012; Li et al., 2016). Fodd bynnag, ynghyd ag effeithiau ECH ac ACT ar osteoporosisClefyd Alzheimernad oeddent eto wedi'u hastudio gyda'i gilydd mewn model llygod mawr. Felly, pwrpas yr astudiaeth hon oedd sefydlu model llygod mawr o osteoporosis wedi'i gyfuno âclefyd Alzheimerac archwilio effeithiau echinacoside ac acteosid ar y model cydamserol hwn, er mwyn darparu tystiolaeth arbrofol ar gyfer astudiaeth bellach o fecanwaith moleciwlaidd echinacoside neu acteosid yn yr ymchwil a ganlyn.

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

2 Defnyddiau a dulliau

2.1. Anifeiliaid

Prynwyd llygod mawr Wistar benywaidd wyth deg {{0} wythnos oed (Rhif Tystysgrif: SCXK, 2018-0006), yn pwyso 180–200 g, gan Sino-BritishSIPPR/BK Lab. Animal Ltd (Shanghai, Tsieina) a chodwyd Canolfan Arbrofol Anifeiliaid Fferyllol ym Mhrifysgol Fferyllol Tsieina.

2.2. Cemegau ac adweithydd

Prynwyd hydrad cloral, sodiwm penisilin G, D-galactos, cloridehexahydrate alwminiwm, valerate estradiol, donepezil HCl oddi wrth Aladin Industrial Corporation (Shanghai, China). Cafwyd Echinacoside (HPLC94 y cant) gan Wuhan Yuanchengcreate Technology Co, Ltd (Wuhan, China). Prynwyd Acteoside (HPLC 98 y cant) gan Baoji HerbestBio-Tech Co., Ltd. (Baoji, Tsieina). Prynwyd pecynnau ffosffatase alcalïaidd penodol i asgwrn (BALP), ffosffatase asid sy'n gwrthsefyll tartrad (TRAP), superoxide dismutase (SOD), malonaldehyde (MDA), acetylcholinesterase (AChE), a phrofion imiwn-amsugnol sy'n gysylltiedig â cholineacetyltransferase (ChaT) (ELISA). o Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd. (Shanghai, Tsieina). Cafwyd sefydlyn meinwe cyffredinol gan WuhanServicebio Technology Co, Ltd (Wuhan, Tsieina).

2.3. Modelau a thriniaethau anifeiliaid

Cafodd pob arbrawf anifeiliaid ei awdurdodi a'i oruchwylio gan Bwyllgor Moeseg Anifeiliaid Prifysgol Fferyllol Tsieina. Roedd y llygod mawr yn cael eu cynnal â chylchred golau/tywyll 12 h mewn ystafell a reolir gan dymheredd (22 ± 2 gradd) a'i fwydo â phorthiant pelenni safonol a dŵr tap.

Ar ôl addasu un wythnos, cyrhaeddwyd y model osteoporosis trwy gynnal llawdriniaeth ofariectomi (French et al., 2008). Ar ôl i'r llawdriniaeth ddod i ben, taenellwyd sodiwm penisilin G ar y clwyf am un tro i atal haint. Roedd y llygod mawr wedyn yn cael eu bwydo fel arfer am dair wythnos. Yn ôl y cyfeiriad (Hua et al., 2007; Alawdi et al., 2017), mae'r model oclefyd Alzheimergellid ei achosi gan chwistrelliad mewnperitoneol hirdymor o D-galactos wedi'i gyfuno ag ofariectomi neu roi AlCl3 yn fewngastrig yn y tymor hir. Astudio dichonoldeb y model osteoporosis ynghyd âClefyd Alzheimer, tri grŵp model o ofariectomi (grŵp OVX), llawdriniaeth ffug gyda chwistrelliad mewnperitoneol o 150 mg/kg/d D-galactos a gweinyddu mewngastrig o 30 mg/kg/d AlCl3 (grŵp D), ofariectomi gyda chwistrelliad mewnperitoneol o 150 mg/kg /d Gosodwyd D-galactos a gweinyddu intragastrig o 30 mg/kg/d AlCl3 (OVX a grŵp D) yn yr astudiaeth hon.

Felly, rhannwyd llygod mawr ar hap yn wyth grŵp (n {{0}} grŵp blaen) ar ôl 3 wythnos a’u trin â meddyginiaethau ar lafar am 8 wythnos: grŵp Sham; grŵp OVX; grŵp D; OVX a grŵp D; grŵp triniaeth estradiolvalerate (grŵp EV, OVX plws D ynghyd â 0.6 mg/kg/d estradiolvalerate); grŵp triniaeth HCl donepezil (grŵp DPZ, OVX a D ynghyd â 0.8 mg/kg/d donepezil HCl); grŵp triniaeth echinacoside (ECHgroup, OVX a D ynghyd â 90 mg/kg/d echinacoside); grŵp triniaeth acteosid (grŵp ACT, OVX a D ynghyd â 90 mg/kg/d acteosid). Yn ôl yr Egwyddor Trosi Dos Cyfwerth â Llygoden Fawr Dynol a'r dos o'r cyfeirnod cysylltiedig (Li et al., 2013; Gao et al., 2014), mabwysiadwyd dosau grwpiau trin cyffuriau yn yr astudiaeth hon.

Roedd pwysau corff pob llygoden fawr yn cael ei fesur bob wythnos. Ar ôl y driniaeth gyfan â chyffuriau a barodd am 8 wythnos, perfformiwyd prawf Morris Water Maze (MWM) am 6 diwrnod am y tro cyntaf. Ar ôl hynny, aberthwyd 6 llygod mawr o bob grŵp i gynaeafu'r deunyddiau. Anestheteiddiwyd y llygod mawr gyda chwistrelliad mewnperitoneol o 3.0 mL/kg 10 y cant o gloralhydrad, a chasglwyd gwaed o'r aorta abdominalis. Rhoddwyd y gwaed ar dymheredd ystafell i geulo a'i allgyrchu ar 3500 r/min am 10 munud. Cynaeafwyd y serwm mewn tiwb centrifuge 1.5 ml (NEST Biotechnology) a'i storio ar −80 gradd nes ei ddefnyddio ar gyfer profion biocemegol. Yna casglwyd y uteri, femora, tibiae, a meinweoedd yr ymennydd. Defnyddiwyd yr uteriw ar gyfer histomorphometreg. Defnyddiwyd y femora cywir ar gyfer Micro-CT a histomorphometreg, yn y drefn honno. Defnyddiwyd y tibiae cywir ar gyfer y prawf biomecanyddol. Defnyddiwyd yr hippocampus a gasglwyd ar y blwch iâ ar gyfer profion biocemegol. Ar ôl hynny, cafodd y tri llygod mawr arall o bob grŵp eu darlifo o'r galon â gosodion meinwe halwynog a chyffredinol i gynaeafu'r ymennydd ar gyfer histomorphometreg.

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

2.4. Prawf Drysfa Ddŵr Morris (MWM).

Bu llygod mawr yn destun dysgu cyfeirio gofodol a phrofi cof yn y prawf MWM ar ôl 8 wythnos o ymyrraeth. Perfformiwyd y prawf MWM yn dilyn y dulliau a adroddwyd yn flaenorol (Morris, 1984; Gao et al., 2016). Yn gryno, 5 diwrnod yn olynol gyda phedwar treial y dydd, hyfforddwyd llygod mawr i ddefnyddio amrywiaeth o giwiau gweledol wedi'u lleoli ar wal y pwll i ddod o hyd i lwyfan tanddwr cudd (diamedr 11 cm, uchder 29 cm) mewn pwll crwn (diamedr 130 cm, uchder 50 cm ) llenwi â dŵr carbon inc-arlliwiedig nad yw'n wenwynig. Yn ddychmygol roedd y pwll wedi'i rannu'n bedwar cwadrant, ac roedd pedwar man cychwyn wedi'u lleoli ar groestoriadau'r cwadrantau. Roedd y platfform wedi'i leoli yng nghanol un o'r cwadrantau ac roedd y safle'n gyson yn ystod y treialon. Mewn ectrial, gosodwyd llygod mawr ar hap mewn lleoliadau dethol, yn wynebu tuag at wal y pwll. Daeth pob treial i ben pan gyrhaeddodd y llygoden fawr y llwyfan neu ar ôl 60 s, a chofnodwyd yr amser a aeth heibio fel dihangfa. Roedd llygod mawr yn methu â chyrraedd y platfform yn cael eu harwain ato. Ar ôl treial pob platfform cudd, arhosodd y llygoden fawr ar y platfform am 10 s. Cyfrifwyd yr amser hwyrni cyfartalog o bedwar treial y dydd fel canlyniadau'r hyfforddiant. Ar ddiwrnod 6, bu'r holl lygod mawr yn destun prawf archwilio lle buont yn nofio am 60 s yn y pwll heb unrhyw lwyfan. Cofnodwyd yr amseroedd croesi yn lleoliad y platfform a'r amser teithio yn y cwadrant targed fel y canlyniadau terfynol. Roedd llygod mawr yn cael eu monitro gan acamera wedi'u gosod yn y nenfwd yn union uwchben y pwll, a chafodd yr holl dreialon eu cofnodi a'u dadansoddi gan ddefnyddio rhaglen MORRIS MAZE a gyflenwir gan Beijing zhongshidichuang gwyddoniaeth a thechnoleg datblygu Co., Ltd (Beijing, Tsieina).

2.5. Prawf biocemegol gan ELISA

Yn ôl cyfarwyddiadau'r gwneuthurwr o becynnau ELISA, profwyd y gweithgaredd ffosffatase alcalïaidd (BALP) asgwrn-benodol (BALP), gweithgaredd asidphosphatase sy'n gwrthsefyll tartrate (TRAP), gweithgaredd superoxide dismutase (SOD), a chynnwys amalondialdehyde (MDA) mewn serwm gan BioTekSynergy 2 multi- darllenydd microplate modd (BioTek, UDA). Cafodd y meinweoedd hippocampus o bob grŵp eu golchi â PBS (0.01 M, pH7.4) i dynnu'r gwaed neu'r amhureddau oedd ar ôl ar wyneb y meinwe. Cafodd meinweoedd yr hippocampus ar un ochr eu pwyso ac yna eu torri'n ddarnau bach. ag y bo modd. Cafodd y meinweoedd hippocampus eu homogenized yn ôl y gymhareb o 1: 9 (pwysau meinwe: cyfaint PBS). Cafodd Thehomogenate ei allgyrchu ar 4 gradd, 3000 r/munud am 15 munud. Casglwyd y supernatant a'i wanhau i fesur y crynodiad protein gan ddefnyddio'r dull BCA. Yna profwyd gweithgaredd acetylcholinesterase (AChE), gweithgaredd colin acetyltransferase (ChAT), gweithgaredd superoxide dismutase (SOD), a chynnwys malondialdehyde (MDA) mewn meinwe hippocampus gan ddulliau ELISA.

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

2.6. Histomorphometreg Hippocampus

Roedd meinweoedd yr ymennydd (n=3/group) wedi'u gosod mewn sefydlogydd meinwe cyffredinol. Yna cafodd samplau meinwe'r ymennydd eu golchi, eu dadhydradu ag ethanol graddiant, eu hymgorffori â chwyr paraffin, a'u sleisio'n adrannau coronaidd o 5 μm. Cafodd yr adrannau eu staenio â hematoxylin ac eosin (AU). Ar ôl hynny, tynnwyd y rhannau coronaidd o feinweoedd yr ymennydd gan ficrosgop fflworoleuedd gwrthdro (Nikon, Japan). Gwelwyd yn arbennig newidiadau morffolegol CA1, CA2, CA3, a DG yn yr hippocampus.

2.7. Histomorphometreg groth a morffometreg

Cafodd yr uteri a ddewiswyd (n {{0}}/group) eu gosod mewn sefydlyn meinwe cyffredinol. Yna cafodd samplau meinwe'r groth eu golchi, eu dadhydradu â graddiant ethanol, eu hymgorffori â chwyr paraffin, a'u sleisio'n adrannau traws o 5 μm. Cafodd yr adrannau eu staenio â hematoxylin andeosin (AU). Arsylwyd ar draws adrannau'r groth a thynnwyd llun ohonynt. Dewiswyd pum maes golygfa ar hap, yna mesurwyd diamedr yr adran ardraws groth a thrwch epithelial mwcosol y groth gan ddefnyddio meddalwedd Image-Pro Plus 6.0. Cafodd nifer y chwarennau crothol yn y lamina propria hefyd eu cyfrif.

2.8. Micro-CT(Cistanche tubulosa)

Sganiwyd y femora dde a ddewiswyd (n=3/group) mewn safle gyda phellter y gwrthrych i'r ffynhonnell o 121 mm a phellter y camera i'r ffynhonnell o 171 mm gan ddefnyddio pelydr-X micro SkyScan 1176 Sganiwr tomograffeg gyfrifiadurol (Micro-CT) (Bruker, yr Almaen). Dewiswyd y plât distalgrowth fel yr arwyneb cyfeirio. Gyda phellter o 1 mm o dan yr arwyneb cyfeirio, dewiswyd rhanbarth 1.8 mm o drwch fel maint y diddordeb (VOI, 100 haen). Roedd gan y delweddau graddlwyd canlyniadol faint picsel o 17.76 μm o'r adluniad esgyrn (65 kV, 385 μA). Defnyddiwyd dull cyfuchlinio lled-awtomataidd i ddewis trabeculae o asgwrn cortigol. Defnyddiwyd dulliau mesur 3D uniongyrchol i asesu y cant o gyfaint esgyrn (BV/TV), dwysedd wyneb esgyrn (BS/TV), gwahaniad trabeciwlar (Tb. Sp), rhif trabeciwlar (Tb. N), trwch trabeciwlaidd (Tb. Th), model strwythur mynegai (SMI), ffactor patrwm trabeciwlar (Tb.Pdf) a dwysedd mwynau asgwrn cymedrig (BMD cymedrig) ar gyfer yr un VOI gan ddefnyddio'r CT(Cistanche tubulosa)Rhaglen dadansoddwr (Bruker, yr Almaen). Gwnaed delweddu 3D o'r VOI gan ddefnyddio algorithm rendro addasol gyda meddalwedd CTvol (Bruker, yr Almaen).

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

2.9. Histomorphometreg esgyrn

Cafodd y femora dde a ddewiswyd (n=3/group) eu gosod yn y sefydlyn meinwe cynhwysol ac yna eu dad-galcholi mewn datrysiad o EDTA 10 y cant-2Na am 3 wythnos. Cafodd y samplau wedi'u dad-galchu eu golchi, eu dadhydradu â graddiantethanol, eu hymgorffori â chwyr paraffin, a'u sleisio'n adrannau hydredol o 5 μm. Cafodd yr adrannau eu staenio â hematocsilin ac eosin (AU). Tynnwyd llun adrannau hydredol y femora. Arsylwyd strwythurau meinwe asgwrn pob grŵp, yn enwedig y strwythurau esgyrn trabeciwlar.

2.10. Prawf biomecanyddol

Aseswyd y tibiae cywir (n=4/group) a ddewiswyd ar hap ar gyfer y prawf plygu tri phwynt gan ddefnyddio peiriant profi cyffredinol (SHIMADZU, Japan). Mesurwyd diamedrau'r samplau hyn gan verniercaliper yn yr ystod o 2.16-2.38 mm (d). Yna gosodwyd y sampl ar ddau groesfar cynhaliol gyda phellter o 25 mm (L) rhwng y ddwy rheilen ac roedd crymedd ffisiolegol y sbesimen i fyny. 1.5 mm/munud nes bod y sbesimen wedi'i dorri. Cofnodwyd y grym (F) a'r data dadleoli yn awtomatig i gyfrifiadur a oedd wedi'i ryngwynebu â'r peiriant profi a chafodd y gromlin dadffurfiad llwyth ei blotio ar yr un pryd. Cofnodwyd gwerthoedd llwyth uchaf (N) ac amsugno egni (mJ) gan feddalwedd profi deunyddiau TRAPEZIUM X ar yr un pryd. Cyfrifwyd gwerthoedd straen uchaf (MPa) yn ôl y fformiwla a ganlyn: Straen (σ)=moment plygu (M)/Ffactor adran (Z) =(8 × L × F)/(π × d3).

2.11. Dadansoddiad ystadegol

Cymharwyd canlyniadau'r grwpiau model â'r grŵp Sham, a chymharwyd canlyniadau'r grwpiau sy'n cael eu trin â chyffuriau â'r OVX plus Dgroup. Dadansoddwyd data gan ddefnyddio ANOVA un ffordd ac yna prawf cymharu lluosog Bonferroni gan ddefnyddio meddalwedd Graph Pad Prism 5.0. Mynegwyd y data fel cymedrig ± SD, ac ystyriwyd gwerthoedd P o lai na0.05 yn ystadegol arwyddocaol.

3. Canlyniadau

3.1. Pwysau corff

Dangoswyd pwysau corff wythnosol llygod mawr ym mhob grŵp trwy gydol y driniaeth gyfan o 8 wythnos yn Ffig. 1. O'i gymharu â'r grŵp Sham, cynyddodd pwysau corff llygod mawr yn y grŵp OVX a D, yn enwedig gyda gwahaniaeth sylweddol yn y pedwar cyntaf wythnosau(P < 0.05).="" ar="" ôl="" cael="" eu="" trin="" ag="" ev="" ac="" ech,="" gostyngodd="" pwysau="" corff="" llygod="" mawr="" yn="" amlwg="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" a="" d="" (p="">< 0.05,p=""><>

3.2. Gwerthusiad o'r gallu gwybyddol

3.2.1. Gwerthusiad o allu dysgu yn y cyfnod caffael

Dangoswyd llwybrau nofio cynrychioliadol llygod mawr pob grŵp yn y cyfnod caffael ar y 5ed diwrnod yn Ffig. 2. Rhestrwyd cuddni dianc pob grŵp yn ystod y cyfnod caffael o 5 diwrnod yn Nhabl 1. Ar y diwrnod cyntaf, y dihangfa latency rhwng OVX plws D groupa DPZ grŵp, ACT group dangosodd gwahaniaeth sylweddol (P < 0.{6}}5),="" yn="" y="" drefn="" honno.="" o'r="" ail="" ddiwrnod,="" byrhaodd="" hwyrni="" dianc="" y="" grŵp="" sham="" yn="" sylweddol="" ac="" roedd="" y="" hwyrni="" cyfartalog="" yn="" llawer="" is="" na'r="" grŵp="" ovx="" a="" d.="" yn="" y="" grŵp="" dpz,="" gostyngodd="" y="" cuddni'n="" sylweddol="" (p="">< 0.05)="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" a="" d="" ar="" y="" 3ydd="" diwrnod.="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" sham,="" mae="" hwyrni="" d="" ac="" ovx="" a="" grwpiau="" d="" yn="" amlwg="" wedi="" ymestyn="" (p="">< 0.01,="" p="">< 0.001)="" ar="" y="" 4ydd="" diwrnod.="" yn="" ogystal,="" o'i="" gymharu="" â="" grŵp="" ovx="" a="" d,="" roedd="" hwyrni="" ev,="" dpz="" ac="" ech,="" grwpiau="" act="" wedi'u="" byrhau'n="" sylweddol="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01,="" p="">< 0.001).="" ar="" y="" 5ed="" diwrnod,="" roedd="" hwyrni'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d="" yn="" dal="" yn="" sylweddol="" uwch="" na'r="" grŵp="" sham="" (p=""><0.05), ac="" roedd="" hwyrni="" grwpiau="" ev="" ac="" ech="" yn="" amlwg="" wedi'i="" fyrhau="" (p=""><0.05) o'i="" gymharu="" â'r="" ovx="" plus="">

3.2.2. Gwerthusiad o allu cof yn y treial archwilio

Dangoswyd llwybrau nofio cynrychioliadol llygod mawr pob grŵp yn y treial stiliwr yn Ffig. 3. Fel y dangosir yn Ffig. 4, o'i gymharu â'r grŵp Sham, yr amseroedd croesi ac amser nofio yn y cwadrant targed o OVX, D, ac OVX a grwpiau D wedi gostwng yn sylweddol (P < 0.05,p="">< 0.{8}}1).="" o'u="" cymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d,="" roedd="" amseroedd="" croesi="" ev,="" dpz,="" ac="" ech,="" grwpiau="" act="" yn="" amlwg="" wedi="" cynyddu="" (p="">< {{10}}.05,="" p="">< 0.01)a'r="" amser="" yn="" y="" cwadrant="" targed="" cynyddodd="" grwpiau="" ev="" a="" dpz="" yn="" sylweddol="" hefyd="" (p="">< 0.05,="" p=""><>

3.3. Dadansoddiad biocemegol o serwm

Fel y dangosir yn Ffig. 5A a B, o gymharu â'r grŵp Sham, cynyddodd gweithgareddau BALP a TRAP mewn grwpiau OVX ac OVX plws D yn sylweddol (P < 0.001="" ),="" sef="" nodwedd="" nodweddiadol="" osteoporosis="" trosiant="" uchel="" a="" achosir="" gan="" ofariectomi.="" gostyngodd="" gweithgareddau="" balp="" a="" trap="" mewn="" grwpiau="" ev,="" dpz,="" ech="" ac="" act="" yn="" amlwg="" o="" gymharu="" â="" grŵp="" ovx="" a="" d="" (p="">< {{="" }}.05,="" p="">< 0.01,="" p=""><>

Gallai ofariectomi, pigiad mewnperitoneol o D-galactos, a rhoi AlCl3 yn fewngastrig achosi niwed ocsideiddiol (Muthusami et al., 2{{10}}05; A. Prakash et al., 2 013). Fel y dangosir yn Ffig. 5C Ovariectomi, gallai chwistrelliad mewnperitoneol o D-galactos a rhoi AlCl3 mewn-gastrig achosi niwed ocsideiddiol(Muthusami et al., 20{{20}}5; A. Prakash et al., 2013). Fel y dangosir yn Ffig. 5C a D, roedd gweithgareddau SOD grwpiau OVX, D, ac OVX plws D yn sylweddol is na gweithgareddau'r grŵp Sham (P < 0.05,="" p="">< 0.001),="" a="" chynnwys="" mda="" ovx,="" d,="" a="" cynyddodd="" grwpiau="" ovx="" a="" d="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.001)="" o="" gymharu="" â="" grŵp="" sham.="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d,="" ar="" ôl="" cael="" ei="" drin="" ag="" ev,="" dpz,="" ech,="" ac="" act,="" cynyddodd="" gweithgaredd="" sod="" yn="" sylweddol="" (p=""><0.01, p=""><0.001), a="" gostyngodd="" cynnwys="" mda="" i="" raddau,="" yn="" enwedig="" yn="" y="" grŵp="" ev="" (p=""><>

3.4. Dadansoddiad biocemegol o hippocampus

Fel y dangosir yn Ffig. 6A, roedd gweithgaredd AChE y grŵp OVX a D yn amlwg yn uwch nag un y grŵp Sham (P < 0.05),="" a="" oedd="" yn="" dynodi="" bod="" gallu="" dysgu="" a="" chof="" y="" grŵp="" sham="" gall="" grŵp="" ovx="" plws="" d="" leihau="" gyda="" chyflymiad="" hydrolysis="" yr="" asetylcoline="" yn="" yr="" ymennydd.="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d,="" gostyngodd="" gweithgaredd="" ache="" mewn="" grwpiau="" trin="" cyffuriau="" i="" raddau,="" yn="" enwedig="" yn="" y="" grŵp="" ev="" (p="">< 0.{8}}1).="" fel="" y="" dangosir="" yn="" ffig.="" 6b,="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" sham,="" roedd="" gweithgareddau="" chat="" grwpiau="" ovx,="" d,="" ac="" ovx="" ynghyd="" â="" d="" yn="" amlwg="" wedi="" gostwng="" (p="">< {{0}}.01,="" p="">< 0.001)="" a="" nododd="" y="" gallai="" eu="" gallu="" i="" ddysgu="" a="" chof="" gael="" eu="" dylanwadu="" oherwydd="" eu="" synthesis="" arafach="" o="" acetylcholine="" yn="" yr="" ymennydd.="" o'i="" gymharu="" â="" grŵp="" ovx="" a="" d,="" cynyddodd="" gweithgareddau="" chat="" grwpiau="" ev,="" dpz="" acech,="" act="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01,="" p=""><>

Gallai'r difrod ocsideiddiol hefyd ddigwydd yn yr hippocampus (Dileket al., 2010; Yang et al., 2013). Fel y dangosir yn Ffig. 6C a D, o gymharu â grŵp Sham, gostyngodd gweithgareddau SOD grwpiau OVX, D ac OVX plws D yn sylweddol (P < 0.01,="" p="">< 0.="" 001),="" a="" chynyddodd="" yr="" mda="" yn="" amlwg="" (p="">< 0.01,="" p="">< 0.001).="" ar="" ôl="" cael="" ei="" drin="" ag="" ev,="" dpz,="" ech,="" ac="" act,="" cynyddodd="" y="" gweithgaredd="" sod="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.001)="" a="" gostyngodd="" y="" cynnwys="" mda="" yn="" sylweddol="" (p="">< 0.001)="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="">

3.5. Dadansoddiad o histomorffoleg hippocampus

Fel y dangosir yn Ffig. 7A, roedd y niwronau yn hipocampws y grŵp Sham wedi'u staenio'n unffurf. Yn y cyfamser, roedd nodweddion morffolegol niwronau yn glir gyda'r niwcleolws amlwg. Roedd eu trefniant hefyd yn daclus a chryno gyda nifer fawr ac adeiledd cyfan. Grwpiau InOVX, D, ac OVX ynghyd â D, gostyngodd nifer y niwronau yn yr hipocampws yn sylweddol o'i gymharu â'r grŵp Sham. Trefnwyd y niwronau yn afreolus ac ehangwyd y bylchau. Yn enwedig mewn grwpiau D andOVX a D, canfuwyd llai o niwronau yn yr hipocampws ac roedd y dosbarthiad ohonynt yn wasgaredig. Digwyddodd caryopyknosis a nodweddion morffolegol anrhagweladwy niwronau a niwronau necrotig hefyd yn y grwpiau D ac OVX ynghyd â D. Fel y dangosir yn Ffig. 7B, ar ôl yr ymyriad cyffuriau, roedd nifer y niwronau yn hippocampus grwpiau EV, DPZ, ECH, andACT yn sylweddol uwch na'r hyn yn y grŵp OVX plus D. Ar yr un pryd, roedd yr aliniad rhwng niwronau yn gymharol drefnus a gostyngodd nifer y niwronau â karyopyknosis a necrosis hefyd.

3.6. Pwysau gwlyb croth a dadansoddiad o histomorffoleg crothol a morffometreg

Fel y dangosir yn Ffig. 8, roedd pwysau gwlyb y groth o OVX ac OVX plus Dgroups yn sylweddol is na phwysau'r grŵp Sham (P < 0.05,p="">< 0.="" 01).="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d,="" cynyddodd="" pwysau="" gwlyb="" groth="" y="" grŵp="" ev="" yn="" amlwg="" (p=""><0.01) o="" dan="" effaith="" estradiolvalerate.="" yn="" ogystal,="" cynyddodd="" pwysau="" gwlyb="" groth="" y="" grŵp="" dpz="" ac="" echgroup="" hefyd="" i="">

Fel y dangosir yn Ffig. 9A, roedd croth y grŵp Sham yn organ gyhyrol â waliau trwchus ac roedd yr epitheliwm mwcosol crothol yn epitheliwm un haen o golofn. Dosbarthwyd y lamina propria gyda uterineglands a phibellau gwaed. Roedd yr haen gyhyrol yn cynnwys darnau bwndel o gyhyr llyfn ac roedd y ffibr cyhyrau wedi'i drefnu'n dynn. Mewn grwpiau OVX ac OVX plws D, crebachodd y groth yn sylweddol gyda luminalstenosis. Roedd yr endometriwm a'r haen gyhyr yn sylweddol deneuach nag un y grŵp Sham. Yn ogystal, gostyngodd nifer y chwarennau groth ac roedd y ffibrau cyhyrau yn denau. Fel y dangosir yn Ffig. 9B, o'i gymharu â'r grŵp OVX plws D, cafodd histomorffoleg y groth ei wella i raddau penodol ar ôl cael ei drin ag EV, DPZ, ECH, ac ACT. Yn enwedig yn y grŵp EV, roedd y groth yn sylweddol lawn, roedd yr haen endometriwm a chyhyr yn amlwg yn drwchus. Ymhellach, cynyddodd nifer y chwarennau gwterog ac ehangodd y ffibrau cyhyrau.

Dangoswyd canlyniadau dadansoddiad morffometrig o groth pob grŵp yn Ffig. 10A–C. O'i gymharu â'r grŵp Sham, gostyngodd diamedr y groth, trwch epithelial mwcosol y groth, a nifer y chwarennau groth mewn grwpiau OVX ac OVX plws D yn sylweddol (P < 0.01,="" p="">< 0.001).="" ar="" ôl="" cael="" ei="" drin="" ag="" ev,="" cynyddodd="" diamedr="" y="" groth,="" trwch="" epithelial="" mwcosol="" y="" groth,="" a="" nifer="" y="" chwarennau="" croth="" yn="" amlwg="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plws="" d="" (p=""><0.001). yn="" ogystal,="" roedd="" ech="" a="" act="" hefyd="" yn="" dangos="" y="" duedd="" o="" gynyddu="" uterinediameter,="" trwch="" epithelial="" mwcosol="" groth,="" a="" nifer="" y="" chwarennau="">

3.7. Dadansoddiad micro-CT

Cafwyd delweddau dau-ddimensiwn o drawstoriad yr asgwrn femoralcancellous distal gan feddalwedd Bruker DataViewer a ddangosodd yn Ffig. 11A. Ar ôl ei berfformio gan feddalwedd CTvol, dangoswyd delweddau tri dimensiwn o'r asgwrn trabeciwlar yn rhanbarth VOI o asgwrn canslo distalfemoral pob grŵp yn Ffig. 11B. Ar ben hynny, mae'r cymedrig BMD, BV/TV, salwch meddwl difrifol, Tb. N, Tb. Sp, Tb.Th, BS/TV, aTb. Dangoswyd Pf a ddadansoddwyd gan feddalwedd CTAn hefyd yn Nhabl 2 a Thabl 3.

Fel y dangosir y ffigurau uchod, o gymharu â'r grŵp Sham, mae'n amlwg bod y nifer trabeciwlar a'r arwynebedd trabeciwlar yn y grŵp OVX a D wedi gostwng. Yn y cyfamser, roedd meintioli paramedrau trabeciwlaidd amrywiol hefyd yn dangos bod y cymedrig BMD, BV/TV, Tb. Gostyngodd N, Tb.Th, BS/TV yn sylweddol yn OVX a grŵp D (P < {{0}}.05,="" p="">< 0.01)="" a'r="" salwch="" meddwl="" difrifol,="" tb.="" ysb,="" tb.="" cynyddodd="" pf="" y="" grŵp="" ovx="" a="" d="" yn="" amlwg="" (p="">< 0.01).="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" plus="" d,="" cafodd="" y="" micro-bensaernïaeth="" trabeciwlar="" ei="" wella="" i="" raddau="" ar="" ôl="" cael="" ei="" drin="" ag="" ev="">

3.8. Dadansoddiad o histomorffoleg esgyrn

Dangoswyd adeileddau trabeciwlar asgwrn canslaidd ym ffemora distal pob grŵp yn Ffig. 12. Roedd gan grŵp Sham lawer o drabeculae a oedd yn drwchus ac wedi'u rhyng-gysylltu â rhwydwaith. O'u cymharu â'r Shamgroup, cafodd trabeculae grwpiau OVX ac OVX a D eu lleihau'n sylweddol a'u teneuo. Yn arbennig, dinistriwyd trabeculae grŵp OVX a D yn fawr, ac ni ellid cysylltu'r rhan fwyaf ohonynt ag anetwork. Yn ogystal, roedd trabeculae grŵp D hefyd yn amlwg wedi'i deneuo. Ar ôl cael eu trin ag EV ac ECH, cynyddodd y trabeculae yn sylweddol a chawsant eu tewychu a'u hail-leisio o'u cymharu â'r grŵp OVX a D. Roedd nodweddion morffolegol y grŵp EV yn agos at nodweddion y grŵp Sham. Yn y cyfamser, cafodd strwythurau trabeciwlar grwpiau DPZ aACT eu gwella i ryw raddau hefyd.

3.9. Dadansoddiad biomecanyddol

Dangoswyd canlyniadau'r prawf plygu tri phwynt yn Nhabl 4. O'i gymharu â'r grŵp Sham, gostyngwyd y llwyth uchaf a'r straen mwyaf yn sylweddol (P < 0.{4}}5,="" p="">< 0.01)="" yn="" ovx="" ac="" ovx="" plus="" dgroups,="" a="" gostyngodd="" yr="" amsugno="" ynni="" yn="" fawr="" hefyd.="" ar="" ôl="" cael="" ei="" drin="" ag="" ev="" ac="" ech,="" cynyddodd="" y="" llwyth="" uchaf,="" y="" straen="" mwyaf,="" a'r="" amsugno="" egni="" i="" ryw="" raddau="" o'i="" gymharu="" â'r="" grŵp="" ovx="" a="">

4. Trafodaeth

Datgelodd yr ymchwiliad epidemiolegol i osteoporosis fod nifer y cleifion benywaidd wedyn yn fwy na chleifion gwrywaidd a’i fod yn digwydd yn aml ymhlith yr henoed a menywod ar ôl diwedd y mislif (Chen et al., 2016). Mae osteoporosis wedi effeithio’n ddifrifol ar iechyd yr henoed ac mae wedi dod yn un o’r rhai difrifol problemau cymdeithasol ledled y byd (Bargen, 2009; Roy et al., 2011; Bessette et al., 2011). Mae ymchwil epidemiolegol oclefyd Alzheimerwedi dangos bod mynychder a chyffredinolrwydd oclefyd Alzheimercynyddu'n esbonyddol wrth i'r oedran gynyddu, yn enwedig ymhlith yr henoed dros 65 oed (Sosa Ortiz et al., 2012). At hynny, roedd nifer yr achosion o AD yn sylweddol uwch ymhlith menywod o gymharu â dynion (Mielke et al., 2014). Roedd amcangyfrifon diweddar yn awgrymu bod bron i ddwy ran o dair o'r unigolion wedi cael diagnosis o ADclefyd Alzheimeryn fenywod (Hebert et al., 2013). Yn rhyfeddol, mae mynychder byd-eang AD wedi gosod baich sylweddol ar gymdeithas (Reitzand Mayeux, 2014).

Mae astudiaethau wedi cael eu hadrodd mai'r prif reswm dros osteoporosis ar ôl diwedd y mislif oedd diffyg estrogen (Klein-Nulendet al., 2015). Gallai gyflymu'r gyfradd trosiant esgyrn yn sylweddol a gwneud y gyfradd atsugniad esgyrn yn uwch na'r gyfradd ffurfio esgyrn sy'n arwain at golli màs esgyrn, dirywiad dwysedd mwynau esgyrn, a gostyngiad yng nghryfder esgyrn (Tella a Gallagher, 2014). Ymhellach, dangoswyd hefyd bod merched ar ôl y menopos yn wynebu risg uwch o nam gwybyddol neu ddementia (Rocca et al., 2007). Mae rhai astudiaethau wedi dangos bod estrogen yn chwarae rhan hanfodol wrth drin AD sy'n cynnwys cynnal swyddogaeth hippocampal yn ystod heneiddio (Han et al., 2013), cynyddu gweithgaredd acetyltransferase colin yn yr hippocampus (Gibbs ac Aggarwal, 1998), lleihau agregiad amyloid-beta (Nilsen et al., 2006).

Roedd yn hanfodol dewis y modelau llygod mawr perthnasol ar gyfer astudiaethau osteoporosis aclefyd Alzheimer. Mae'r model osteoporosis a achosir gan ofariectomi wedi'i fabwysiadu'n eang yn yr astudiaethau o osteoporosis (Zhao et al., 2011; Liu et al., 2018). Er bod pathogenesis AD yn amrywiol, mae astudiaethau wedi dangos mai straen ocsideiddiol ac amlygiad alwminiwm oedd achosion pwysig AD (Xiao et al., 2011; Bhattacharjee et al., 2014). Mae D-galactos yn fath o invivo sy'n lleihau siwgr. Pan oedd yn llawer uwch na'r lefel arferol yn y corff, gallai gael ei ocsidio gan galactose oxidase i'r aldehydau na ellid ei fetaboli ymhellach a gallai gael ei gronni i raddau helaeth yn yr ymennydd sydd o ganlyniad yn achosi straen ocsideiddiol ac apoptosis niwrosyt (Cui et al., 2006). Gall alwminiwm groesi'r rhwystr gwaed-ymennydd yn hawdd ac mae ganddo niwrowenwyndra amlwg i'r ymennydd (D. Prakash et al., 2013). Gall achosi dyddodiad niwronau yn allgellog a chymell cynhyrchu rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS), sy'n achosi straen ocsideiddiol a nam mewn niwronau (Walton, 2013). Mae astudiaethau niferus wedi dangos y gallai trin D-galactos ynghyd ag anifeiliaid AlCl3, yn enwedig cnofilod, amharu’n sylweddol ar eu gallu i ddysgu a’u cof (Chiroma et al., 2018). Gallai gymell mynegiant a chroniad A 1-42 yn y cortecs cerebral a hippocampus (Yang et al., 2014). Yn ogystal, mae astudiaethau hefyd wedi nodi y gallai ovariectomi ynghyd â chwistrelliad mewnperitoneol hirdymor o D galactose arwain at y newidiadau pathoffisiolegol sy'n gysylltiedig â chlefyd Alzheimer, megis colled synaptig, nam ar astrocyte, croniad mewngellol A, a tanglau niwroffibrilaidd, a allai fod yn un dwbl. model anafiadau ar gyfer AD (Su et al., 2010).

Yn ein hastudiaeth, gosodwyd tri grŵp model o grŵp OVX, grŵp D, a grŵp OVX ynghyd â grŵp D yn y drefn honno i gadarnhau y gallai'r dull llawdriniaeth ofvariectomi ynghyd â chwistrelliad mewnperitoneol o D-galactos a gweinyddu AlCl3 mewn-gastrig arwain yn well at nodweddion patholegol osteoporosis. aclefyd Alzheimerar yr un pryd.

Defnyddiwyd dulliau lluosog i werthuso'r model osteoporosis ynghyd âclefyd Alzheimer. Mae dysgu a chof yn rhai o'r gweithgareddau lefel uchel yn yr ymennydd.clefyd Alzheimeryn gallu achosi gwahanol raddau o nam gwybyddol (Albert et al., 2011). Mae prawf dysgu a chofio cnofilod yn ddull cyffredin o astudio ymddygiad gwybyddol a mecanweithiau ym maes niwrowyddoniaeth (Kwon et al., 2011). Defnyddiwyd prawf Morris Water Maze (MWM) yn ein hastudiaeth i werthuso gallu llygod mawr i ddysgu a chofio, a ddefnyddiwyd yn helaeth yn yr ymchwil niwrobioleg a niwroffarmacoleg i gnofilod (Gacar et al., 2011). Dangosodd canlyniadau’r prawf MWM fod dihangfa’r grŵp OVX a D wedi cynyddu’n sylweddol a bod yr amseroedd croesi ac amser nofio yng nghwadrant targed y grŵp OVX a D wedi gostwng yn amlwg o’i gymharu â’r grŵp Sham, a oedd yn dangos bod gallu gwybyddol llygod mawr. yn OVX plws D roedd nam difrifol ar y grŵp. Mae Thehippocampus, maes ymennydd sy'n hanfodol ar gyfer dysgu a chof, yn arbennig o agored i niwed yn ystod camau cynnar AD. (Mu a Gage, 2011).Datgelodd y dadansoddiad biocemegol o’r hippocampus fod y gweithgaredd AChE yn amlwg yn uwch a’r gweithgaredd ChaT yn llawer is yn y grŵp OVX a D na’r grŵp Sham, a oedd yn dangos bod y gallu i ddysgu a chofio gall y grŵp OVX plws D fod â nam oherwydd y gostyngiad mewn acetylcholine yn yr ymennydd. Yn ogystal, gallai'r difrod ocsideiddiol hefyd fod wedi effeithio ar swyddogaethau arferol yr hippocampus oherwydd y gostyngiad mewn gweithgaredd SOD a'r cynnydd mewn cynnwys MDA yn y grŵp OVX a D. Dangosodd dadansoddiad histomorffoleg yr hippocampus fod nifer y niwronau wedi lleihau'n sylweddol a bod y niwronau wedi'u trefnu'n afreolus yn y grŵp OVX plws D o'i gymharu â'r grŵp ffug, a ddangosodd fod nam difrifol ar y niwronau yn yr hippocampus.

Aseswyd ffurfiant osteoporosis gan fiocemeg serwm, Micro-CT, histomorffoleg esgyrn, a phrawf biomecanyddol yn ein hastudiaeth. Gweithgareddau BALP a TRAP mewn serwm yw'r mynegai cynrychioliadol mewn ffurfio esgyrn ac atsugniad esgyrn (Rufus et al., 2013). O'u cymharu â'r grŵp Sham, cynyddodd gweithgareddau BALP a TRAP mewn OVX ac OVX ynghyd â Dgroups yn sylweddol, sef nodweddion nodweddiadol osteoporosis trosiant uchel a achosir gan ofariectomi. Yn y cyfamser, digwyddodd difrod ocsideiddiol hefyd yn llygod mawr y grŵp OVX a D ar gyfer lleihau gweithgaredd SOD a chynyddu cynnwys MDA, a gyflymodd y broses osteoporosis ymhellach. Mae micro-CT yn fath o dechneg gyda nodweddion delweddu anfewnwthiol ynghyd â chanfod histolegol cydraniad uchel sy'n arbennig o addas ar gyfer delweddu esgyrn ac ymchwilio i baramedrau esgyrn (Ito, 2011). Dangosodd canlyniadau dadansoddiad Micro-CT fod gostyngiad BMD, colled fawr o fàs esgyrn, a micro-bensaernïaeth trabeculae wedi'u dinistrio wedi'u dangos yn y grŵp OVX plus D o'i gymharu â'r grŵp Sham. Roedd histomorffoleg yr esgyrn hefyd yn dangos bod ytrabeculae wedi'u dinistrio'n sylweddol yn y grŵp OVX a D. Gall osteoporosis gynyddu'r risg o dorri asgwrn, a gellid defnyddio'r prawf biomecanyddol esgyrn i ganfod cryfder esgyrn (Mears et al., 2010). Dangosodd prawf plygu tri phwynt y tibia fod cryfder esgyrn y grŵp OVX a D wedi gostwng yn sylweddol o'i gymharu â'r grŵp Sham. Yn ogystal, datgelodd dadansoddiad o histomorffoleg groth a morffometreg fod theuterws wedi crebachu'n sylweddol, roedd yr endometriwm yn amlwg yn deneuach a bod nifer y chwarennau croth wedi lleihau yn y grŵp OVX plws D o'i gymharu â'r grŵp ffug oherwydd diffyg estrogen.

Cistanche tubulosayn donig adnabyddus mewn meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol sy'n cael effeithiau imiwn-reoleiddio, gwrthocsidydd, gwrth-heneiddio, niwro-amddiffyniad, a hyrwyddo twf osteoblast (Li et al., 2016). Echinacoside ac acteoside yw'r prif gyfansoddion gweithredol ynCistanche tubulosa, ac mae eu heffeithiau ffarmacolegol amrywiol yn deilwng o gael eu hastudio'n fanwl (Fu et al., 2018).

Yn ein harbrawf presennol, cyfunodd effeithiau echinacoside neu acteosideon y model llygod mawr o osteoporosis agRoedd clefyd Alzheimerastudio ymhellach. Dangosodd effeithiau amlwg ar osteoporosis a chlefyd Alzheimer, yn enwedig echinacoside. Dangosodd y canlyniadau y gallai echinacoside gynyddu dysgu a chofiadwy yn sylweddol a gwella camweithrediad gwybyddol trwy hyrwyddo thesynthesis acetylcholine a diogelu'r niwronau yn yr hippocampus. Yn y cyfamser, gallai echinacoside ac acteoside leihau atsugniad esgyrn yn sylweddol trwy leihau gweithgareddau BALP a TRAP.Ymhellach, gallent hefyd yn cynyddu dwysedd esgyrn cymedrig mwynau a chryfder esgyrn drwy atal colli màs esgyrn a gwella microarchitecture trabeculae. Yn ogystal, roedd echinacoside ac acteoside hefyd yn dangos y duedd o wella amodau'r groth. Adroddwyd bod echinacoside ac acteoside yn cael effaith tebyg i estrogen (Wang et al., 2014). Roedd ein hastudiaeth flaenorol hefyd wedi dangos, fel math newydd o ffyto-estrogen, y gallai echinacoside atal osteoporosis yn effeithiol ac atal atsugniad esgyrn ar ôl ofariectomi mewn llygod mawr (Li et al., 2013). Yn ôl y canlyniadau hyn, gall echinacosideor acteoside ddod i rym trwy'r llwybr signalau estrogen neu lwybr arall sy'n gysylltiedig ag estrogen. Yn yr ymchwil ganlynol, bydd sawl dos o echinacoside neu acteoside yn cael eu gosod i ddatgelu'r berthynas dos-effaith a bydd y llwybrau signalau perthnasol yn cael eu hastudio ymhellach i egluro'r mecanweithiau cyffredin o echinacoside neu onosteoporosis acteoside ynghyd âclefyd Alzheimer.

Cistanche tubulosacanysclefyd Alzheimer

5. Casgliad

Mae'r model llygod mawr o osteoporosis wedi'i gyfuno âRoedd clefyd Alzheimerymarferol ac wedi'i sefydlu'n llwyddiannus yn ein hastudiaeth. Yn y cyfamser, echinacoside ac acteoside oCistanche tubulosawedi dangos effeithiau sylweddol gwella'r gallu dysgu a chof, rheoleiddio'r metaboledd esgyrn, lleihau'r difrod ocsideiddiol, a diogelu'r niwronau ar y model cydamserol hwn. Gallai echinacoside ac acteoside fod yn ymgeiswyr posibl ag effeithiau dwbl a darparu'r dystiolaeth arbrofol ar gyfer astudiaeth bellach o fecanweithiau moleciwlaidd yn yr ymchwil ganlynol.

Cyfraniadau awduron

Ysgrifennodd Yi Chen y llawysgrif. Perfformiodd Yi Chen, Ying-Qi Li, a Jia-Yi Fang yr arbrofion. Dadansoddodd Yi Chen y data. Fei Li a PingLi gynlluniodd yr astudiaeth a diwygio'r llawysgrif.

Datganiad o ddiddordeb cystadleuol

Mae'r awduron yn datgan nad oes ganddynt unrhyw fuddiannau cystadleuol yn y llawysgrif hon ac nid oes unrhyw gefnogaeth ariannol sylweddol i'r gwaith hwn a all ddylanwadu ar ei ganlyniad.

O: 'Sefydlu'r model arbrofol cydamserol o osteoporosis wedi'i gyfuno â chlefyd Alzheimer mewn llygod mawr ac effeithiau deuol echinacoside ac acteosid o Cistanche tubulosa' gan Yi Chena, et al

---Cylchgrawn Ethnopharmacology 257 (2020) 112834