Dulliau ar gyfer rheoli ansawdd Cistanche deserticola

am ragor o wybodaeth:ali.ma@wecistanche.com

Shi Ziyi, Wu Yun, Zhu Yuemei & et al.

Y feddyginiaeth Tsieineaidd draddodiadolCistancheyw coesyn suddlon yCistanche deserticolaYC Ma neu Cisanche tubulosa (Schenk) Wight gyda dail cennog sych. Mae ganddo swyddogaethau tonifying yang aren, hanfod maethlon a gwaed, coluddion lleithio a charthyddion, ac ati Fe'i defnyddir yn bennaf ar gyfer diffyg yang arennau, diffyg hanfod a gwaed, analluedd ac anffrwythlondeb, dolur a gwendid gwasg a phengliniau, gwendid. cyhyrau ac esgyrn, sychder y coluddion a rhwymedd. Mae ymchwil ffarmacolegol modern yn dangos hynnyCistancheMae ganddo lawer o swyddogaethau megis gwella swyddogaeth rywiol, gwrthsefyll clefyd Alzheimer a chlefyd Parkinson, gwella gallu dysgu a chof, gwrth-heneiddio, gwrth-blinder, amddiffyn yr afu, a charthydd [4]. Mae nifer fawr o astudiaethau wedi cadarnhau bod y glycosidau ffenylethanoid ynCistanche deserticolayn cael effeithiau amlwg ar wella dysgu a gallu cof, gwrthsefyll clefyd Alzheimer a chlefyd Parkinson (4, mae oligosacaridau a phololau yn cael effaith carthydd a charthydd 64 ). Mae "Pharmacopoeia Gweriniaeth Pobl Tsieina" ond yn mesur cynnwys glycosidau ffenylethanoid echinacoside a verbascoside ynCistancheanialwch, ond nid yw'n mesur cydrannau gweithredol ei effaith garthydd, felly mae'n anodd cyflawni dadansoddiad cynhwysfawr o ddeunyddiau meddyginiaetholCistancheanialwch. Rheoli ansawdd. Er mwyn goresgyn y cyfyngiad hwn a sefydlu system gwerthuso ansawdd aml-fynegai sy'n ymwneud â phrif swyddogaethau ac arwyddionCistancheanialwch, defnyddiodd yr astudiaeth hon HPLCELSDP4 i sefydlu dull dadansoddi meintiol ar gyfer betaine, mannitol, ffrwctos, glwcos a swcros yn y deunyddiau meddyginiaethol oCistancheanialwch. Yn ogystal, mae 58 sypiau oCistancheanialwchdefnyddiau meddyginiaethol o wahanol darddiad a 10 swp o ddefnyddiau meddyginiaethol oCistancheyn ardal Hotan o Xinjiang eu profi, a all ddarparu cyfeiriad ar gyfer rheoli ansawdd cynhwysfawr a gwerthuso deunyddiau meddyginiaethol oCistancheanialwchyn y dyfodol.

Cliciwch i cistanche echdynnu budd-daliadau cynnyrch

1 Offeryn ac adweithyddion

1.1 Offerynau

Cydbwysedd electronig Sartorius BT25 S, BS 124 S (Beijing Sartorius Balance Co, Ltd.); Cromatograffaeth Hylif Hylif Agilent 1100; Synhwyrydd Gwasgaru Golau Anweddol ALLTECH 2000ES (EISD); Ultrasonic Cleaner KQ 250 (Kunshan Ultrasonic Instrument Ltd). 1.2 Adweithyddion

Sylwedd rheoli: betaine (swp: {{0}}, purdeb: 99.2 y cant), mannitol (swp: 10053-201304, purdeb: 99.0 y cant), D-ffrwctos (swp: 111504-201703 , purdeb: 99.8 y cant ), D - Glwcos anhydrus (rhif swp: 110833-201506, purdeb: 99.9 y cant), swcros (rhif swp: 111507-201303, purdeb: 99.8 y cant), a brynwyd i gyd gan Sefydliad Cenedlaethol Tsieina ar gyfer Rheoli Bwyd a Chyffuriau.

Mae defnyddiau meddyginiaethol oCistancheanialwcheu casglu ym Mongolia Fewnol, Xinjiang, Gansu a mannau eraill, gyda chyfanswm o 58 sypiau. Fe'u nodwyd gan yr Athro Tu Pengfei o Ysgol Fferylliaeth Prifysgol Peking fel coesau cigog sychCistancheanialwchYCMa o blanhigyn Lidangaceae, fel y dangosir yn Nhabl 3.

Mae defnyddiau meddyginiaethol oCistancheanialwcheu casglu yn ardal Hotan, Xinjiang, mewn cyfanswm o 10 swp. Fe’u nodwyd gan yr Athro Tu Pengfei o Ysgol Fferylliaeth Prifysgol Peking fel coesau cigog sych gyda dail cennog Cistanche tubulosa (Schenk) Wyth planhigyn Liedangaceae, fel y dangosir yn Nhabl 4.

1.3 Adweithyddion

Mae acetonitrile yn gromatograffig pur (Tianjin Boshiqi Technology Development Co, Ltd.), mae methanol yn gromatograffig (Tianjin Saifu Century Technology Development Co., Ltd.), ac mae dŵr yn ddŵr ultrapure.

2 Dulliau a chanlyniadau

2.1 Cyflyrau cromatograffig

Roedd y golofn gromatograffig yn golofn gel polymer ShodexAshaipak NH2P-50 4E (250 mm × 4.6 mm, 5 μm); y cyfnod symudol oedd dŵr asetonitrile (77∶23); cyfradd y llif oedd 0.7 mL·mun-1; tymheredd y golofn oedd 25 gradd; Synhwyrydd gwasgariad golau (ELSD): Tymheredd y tiwb drifft oedd 100 gradd, a chyfradd llif y nwy cludo oedd 3 L·min-1.

2.2 Paratoi datrysiad cyfeirio

Cymerwch swm priodol o betaine, mannitol, ffrwctos, glwcos, a sylwedd cyfeirio swcros, ei bwyso'n gywir, ychwanegu dŵr i wneud hydoddiant cymysg sy'n cynnwys 0.25 mg o betaine, mannitol, ffrwctos, glwcos, a swcros fesul 1 mL, ysgwyd yn dda, a chael.

2.3 Paratoi'r datrysiad prawf

Cymerwch tua 1.0 g oCistanchepowdr meddyginiaethol (wedi'i basio trwy ridyll Rhif 4), ei bwyso'n gywir, ei roi mewn fflasg folwmetrig brown 10 0 mL, ychwanegu 50 mL o 50 y cant o fethanol yn fanwl gywir, ei blygio'n dynn, ei ysgwyd, pwyso iddo, ei socian am 30 munud, ac yna'n ultrasonically (pŵer 250 W, amlder 35 kHz) am 40 munud, tynnwch ef allan, gadewch iddo oeri, pwyswch ef eto, ychwanegwch 50 y cant methanol i leihau'r màs, ysgwyd yn dda, a gadewch saif. Allsugnwch 5 mL o uwchnatur yn union, rhowch ef mewn fflasg gyfeintiol 25 ml, gwanwch i'r marc gyda 50 y cant o fethanol, ysgwyd yn dda, a hidlo trwy bilen micromandyllog 0.2 μm.

2.4 Dull penderfynu

Tynnwch 5 a 10 μL o'r datrysiad cyfeirio yn fanwl gywir a 5 μL o'r datrysiad prawf yn y drefn honno, eu chwistrellu i'r cromatograff hylif, cofnodwch yr arwynebedd brig, a chyfrifwch yn ôl hafaliad logarithmig y dull dau bwynt safonol allanol.

2.5 Prawf addasrwydd system

Yn ôl yr amodau cromatograffig o dan eitem 2.1, tynnwch 5 μ o'r datrysiad cyfeirio a'r datrysiad prawf yn gywir, yn y drefn honno, a'u chwistrellu i mewn i'r cromatograffaeth hylif perfformiad uchel, mesur a chofnodi'r cromatogram, fel y dangosir yn Ffigur 1. Y brigau cromatograffig o'r sampl prawf yn dangos yr un amser cadw â chopaon cromatograffig y sylwedd cyfeirio, roedd y datrysiad yn dda, ac roedd yr amodau cromatograffig yn ymarferol.

Nodyn: A. Sylwedd rheoli; B.CistancheSampl Rhif 49; 1. betaime; 2. ffwngaidd; 3. mannibol; 4. glwcos; 5. sucreve

Ffig. 1 Proffiliau HPLC o'r sylwedd cyfeirio a'r sampl o Cistanche Rhif 49

2.6 Archwilio Perthnasoedd Llinellol

Cymerwch symiau priodol o betaine, manitol, ffrwctos, glwcos, a swcros fel sylweddau cyfeirio, eu pwyso'n gywir, ac ychwanegu dŵr i wneud pob 1 mL sy'n cynnwys betaine 0.496 0 mg, mannitol {{3} }.{4}} mg, ffrwyth 1.0126 mg, glwcos 1.0882 mg, a swcros 0.9922 mg. 0.0992, 0.2480, 0.4960, 0.9920, 1.9840, 2.9760 μ, manitol 0.1988, 0.4970 , 0.9940, 1.9880, 3.9760, 5.9640 μ, ffrwctos 0.5063, 1.012 6. 2.025 2. 4.050 4. 5.063 0. Chwistrellwyd a chanfuwyd cyflyrau cromatograffig, a chofnodwyd yr ardal brig; yna defnyddiwyd gwerth logarithm X (ug) pob swm pigiad sylwedd cyfeiriol fel yr abscissa, a gwerth logarithm Y yr ardal brig oedd y gyfesuryn, a lluniwyd y gromlin safonol. Dangosir y canlyniadau yn Nhabl 1.

Tabl 1 Canlyniadau'r ymchwiliad perthynas llinol

2.7 Prawf manwl

Tynnwch y datrysiad prawf yn gywir (sampl Rhif 49), o dan yr amodau cromatograffig uchod, chwistrellwch 6 gwaith yn barhaus, mesurwch arwynebedd brig pob brig cromatograffig, a chyfrifwch ei werth RSD. Canlyniadau RSDs yr ardaloedd brig o betaine , mannitol , ffrwctos , glwcos a swcros oedd { { }}. roedd yr astudiaeth hon yn dda. 2.8 Prawf ailadrodd

Cymerwch 6 sampl oCistancheanialwch(sampl Rhif 49), paratowch y datrysiad prawf yn ôl y dull o dan eitem 2.3, mesur arwynebedd brig pob brig cromatograffig, a chyfrifwch y cynnwys cyfatebol. Canlyniadau Cynnwys cyfartalog betaine , mannitol , ffrwctos , glwcos a swcros ( n { { }} ) oedd 7.93 y cant , 7.27 y cant , 8.74 y cant , 2.75 y cant a 4.81 y cant , a'r RSDs oedd 2.83 y cant , 1.94 y cant , {{ } . 18}}.97 y cant a 2.60, yn y drefn honno. y cant , 1.40 y cant , sy'n nodi bod gan y dull ailadroddadwyedd da. 2.9 Prawf sefydlogrwydd

Cymerwch y datrysiad prawf (sampl Rhif 49), ei chwistrellu ar 0, 4, 8, 12, 16, a 24 h ar ôl paratoi ar gyfer mesur, a chyfrifwch werth RSD pob brig cromatograffig. Canlyniadau Roedd yr RSDs o betaine , manitol , ffrwctos , glwcos a swcros yn { { } } .61 y cant , 1.92 y cant , 1.34 y cant , 2.83 y cant a { { } } . 69 y cant , yn y drefn honno , yn nodi bod y datrysiad prawf wedi dda sefydlogrwydd o fewn 24 awr. 2.10 Prawf adferiad

Cymerwch 6 sampl oCistancheanialwchgyda chynnwys hysbys (sampl Rhif 49), pwyso 0.25g yn gywir, eu rhoi mewn fflasg gyfeintiol frown 50mL, a lluniadwch 25mL o'r hydoddiant cyfeirio cymysg yn gywir ar grynodiad o 1: 1 (sy'n cynnwys {{10}}.7900 mg o betaine). mL-, ffrwctos 0.7236 mg"mL-1, mannitol 0.8812 mg·mL-1, glwcos 0.2708 mg·mL-1, swcros 0.4883 mg'mL-') i'r sampl, a pharatowyd yr ateb prawf yn ôl y dull o dan 2.3 Wedi'i ganfod yn unol â'r amodau cromatograffig a grybwyllir uchod, wedi'i gyfrifo ei adferiad, dangosir y canlyniadau yn Nhabl 2, sy'n nodi bod gan y dull gywirdeb da.

Tabl 2: Canlyniadau mesur cyfradd adennill sampl o 5 cydran i'w profi (n=6)

3 Trafodaeth

3.1 Dewis cydrannau mynegai

Cyfanswm oligosacaridau oCistancheyw'r rhannau effeithiol oCistanchear gyfer carthyddion. Dadansoddodd yr awdur gyfansoddiad cemegol y rhan hon yn ôl LC-MS a'r sylwedd cyfeiriol, a phenderfynodd fod y rhan hon yn cynnwys betaine, mannitol, ffrwctos, glwcos a swcros yn bennaf. Felly, Dewiswyd y 5 cydran hyn fel cydrannau mynegaiCistancheanialwch, a sefydlwyd y dull penderfynu cynnwys.

3.2 Detholiad o golofnau cromatograffig

Mae'r pum cydran sydd i'w profi, betaine, mannitol, ffrwctos, glwcos a swcros, yn gymharol begynol ac ni ellir eu cadw yn y golofn Cn cam gwrthdro. Yn gyffredinol, mae brigau'n ymddangos o fewn 1-2 munud, ac nid oes modd gwahanu'r cydrannau. Colofnau amino Dyfroedd Bonoapar NH, (300 mm × 4.6 mm, 10 μm) a Phenomenex Bondclone 10 NH, (300 mm × 3.9 mm, 10 μm) ar gyfer gwahaniad siwgr a polyol, a cholofnau amino seiliedig ar bolymer Yn Drechu Carbohydrad ES (250 mm × 4.6 mm, 5 μm), ShodexAshaipak NH2P-50 4E (250 mm × 4.6 mm, 5 μm). Mae'r canlyniadau'n dangos y gall y golofn amino matrics polymer wahanu'r pum cydran hyn yn effeithiol.

3.3 Dewis synhwyrydd

Nid oes gan y pum cydran sydd i'w profi unrhyw amsugno UV amlwg, ac ni ellir pennu cynnwys y synhwyrydd UV yn uniongyrchol. Felly, sefydlodd y papur hwn ddull dadansoddi meintiol ar gyfer cydrannau alcohol siwgrCistancheanialwchgan ddefnyddio HPLC-EISD. Mae'r canlyniadau'n dangos bod gan y dull sensitifrwydd uchel, ailadroddadwyedd da a chywirdeb uchel, a gellir ei ddefnyddio ar gyfer rheoli ansawddCistancheanialwcha deunyddiau meddyginiaethol eraill sy'n cynnwys alcoholau betaine a siwgr.

3.4 Ymchwilio i ddull paratoi'r datrysiad prawf

Cymharwyd gwahanol doddyddion echdynnu gan gynnwys dŵr, 30 y cant methanol, 50 y cant methanol, 70 y cant methanol, methanol, ac ati yn y drefn honno. Dangosodd y canlyniadau, ac eithrio'r gyfradd echdynnu ychydig yn is o 70 y cant o hydoddydd methanol a methanol, nad oedd gwahaniaeth sylweddol mewn toddyddion eraill, felly gwnaed y dewis uniongyrchol. Defnyddiwyd methanol 50 y cant fel y toddydd o dan yr eitem "Determination of Content" oCistancheyn Pharmacopoeia Gweriniaeth Pobl Tsieina, ac fe'i paratowyd yn ôl dull paratoi'r ateb prawf perthnasol, ac yna ei wanhau 5 gwaith i bennu'r cydrannau alcohol siwgr.

3.5 Canfod a dadansoddi samplau â seiliau gwahanol

Yn yr astudiaeth hon, mae cynnwys 5 cydran mewn 58 sypiau oCistancheanialwcha 10 swp oCistancheanialwchpenderfynwyd ar ddefnyddiau meddyginiaethol. Ffracsiynau màs betaine, manitol, ffrwctos, glwcos a swcros mewn 58 swp oCistancheanialwchsamplau oedd 2.73 y cant { {2}}.65 y cant , 2.46 y cant { {6}}.34 y cant , 2.52 y cant { { 1 { { { { { }}}}}.74 y cant , 0.97 y cant { { }}.06 y y cant , 3.15 y cant -27.16 y cant ; Roedd manitol, ffrwctos a glwcos yn 1.00 y cant -13.04 y cant , 2.98 y cant -8.85 y cant , 1.09 y cant -5.33 y cant yn y 10 swp oCistancheni chanfuwyd samplau, yn y drefn honno, a betaine a swcros. Mae cynnwys deunyddiau meddyginiaethol yn amrywio'n fawr ymhlith sypiau, ac nid oes rheol i'w dilyn, sy'n awgrymu bod angen sefydlu safon penderfynu cynnwys i reoli ansawdd deunyddiau meddyginiaethol. Yn ogystal, gall y dull hwn wahaniaethu'n effeithiol rhwng dau fath oCistancheplanhigion sylfaenol, sef,Cistanchenid yw'n cynnwys betaine a swcros, tra bod cynnwys y ddwy gydran hyn yn uwchCistanche deserticola. Mae hyn hefyd yn darparu sail ar gyfer dadansoddi'r gwahaniaethau mewn gwead a chynefin y ddau ddefnydd meddyginiaethol oCistanche deserticola. O'i gymharu â'r deunydd meddyginiaethol oCistanche deserticola, mae'r gwead yn feddalach, ac fe'i gelwir yn lleol fel "Soft Dayun", traCistancheyn cael ei alw'n "Chai Dayun" oherwydd ei fod yn cynnwys swcros (3.15 y cant ~ 27.16 y cant ). ).Cistanche deserticolayn cael ei ddosbarthu'n bennaf yn Alxa ym Mongolia Fewnol, traCistancheyn cael ei ddosbarthu'n bennaf yn ardal Hotan yn Xinjiang, lle mae'r tymheredd yn uwch na'r un yn ardal Alxa, a defnyddir dyfrhau diferu yn aml yn yr ardal leol, ond unwaith y bydd y tymheredd yn gostwng,Cistanchebydd yn dioddef niwed difrifol. Mae gan ddifrod rhewi, ar y naill law, berthynas benodol â'i gynnwys dŵr uchel, ac ar y llaw arall, mae ganddo rywbeth i'w wneud â'r cynhwysion sydd ynddo. Mae Betaine 243 yn sylwedd addasu osmotig pwysig, sy'n chwarae rhan bwysig wrth wella ymwrthedd straen planhigion, megis ymwrthedd i halltedd, sychder, tymheredd isel, a golau cryf. Mae'n union oherwydd y cynnwys uchel o betaine sydd wedi'i gynnwys ynCistanche deserticolabod ganddo well ymwrthedd i halen-alcali, sychder a difrod rhewi naCistanche, ac mae ganddo ddosbarthiad cymharol eang.

3.6 Dadansoddiad oCistancheanialwchsamplau o darddiad gwahanol

Ymhlith y 58 sypiau o anialwchcistanchesamplau deunydd meddyginiaethol, cynhyrchwyd 45 swp o Gynghrair Alxa, Mongolia Fewnol, roedd 3 swp o Wangyedi (Sir Dengkou), Mongolia Fewnol, ac roedd 1 swp yn anhysbys. Roedd gan bob un o'r 49 swp o ddeunyddiau meddyginiaethol gynnwys 5 cydran gwahanol. Fodd bynnag, nid oes gwahaniaeth arwyddocaol. Efallai mai'r rheswm dros y dadansoddiad yw bod y deunyddiau meddyginiaethol i gyd yn cael eu cynhyrchu yn yr un ardal anialwch, mae'r ecoleg a'r amgylchedd daearyddol yn debyg, ac mae ansawdd y cynnyrch yn gymharol unffurf a sefydlog. Cynhyrchir 3 swp yn Sir Minqin, Gansu, a 6 swp o Xinjiang. Yn ôl y dadansoddiad yn Ffigur 2, o'i gymharu â'r deunyddiau meddyginiaethol a gynhyrchir ym Mongolia Fewnol, adlewyrchir y prif wahaniaeth yng nghynnwys ffrwctos a swcros. Roedd cynnwys swcros y deunyddiau meddyginiaethol yn gymharol uchaf, ond o ystyried y nifer isel o samplau o'r ddau darddiad, mae angen gwirio'r casgliad hwn trwy gasglu mwy o samplau. 3.7 Crynodeb

Yn yr astudiaeth hon, sefydlwyd HPLC Wang ISD ar gyfer pennu 5 cynhwysyn gweithredol o garthyddion ar yr un pryd, a oedd yn darparu dull mwy cyfleus, effeithlon a chywir ar gyfer rheoli ansawddCistanche deserticola, ac yn darparu sail ar gyfer gwella safon ansawdd a datblygiad pellach oCistancheanialwch. cyfeirio ystyrlon.

Cyfeiriadau

【1】 Comisiwn Pharmacopoeia y Wladwriaeth. Pharmacopoeia Gweriniaeth Pobl Tsieina: A 【M】. Beijing: Gwasg Gwyddoniaeth a Thechnoleg Fferyllol Tsieina, 2015; 135.

【2】 Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Cynnydd ymchwil ar weithgaredd ffarmacolegol yCistancheArddangosfa. Meddygaeth Lysieuol Tsieineaidd, 2003, 34(9); 113415.

【3】 Xue Haiyan. Jiao Danyuan, Yao Mehefin Statws ymchwil o effeithiau ffarmacolegol cyfanswm glwcosidau yn Cilantro [J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology, 2018, 34(4): 486-488.

【4】 An Chunna, Zhang Hongning, Pu Xiaoping. Cynnydd ymchwil niwroffarmacoleg oCistanche deserticolaArddangosfa [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46(12): 887-890.

【5】 Gao Yuhong, Ke Zunji. Cynnydd ymchwil ar effeithiau ffarmacolegolCistanche deserticolawrth drin clefyd Alzheimer []. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 52(1): 109-112.

【6】 Zhang Baishun, Zhao Xuewen, Chen Shuanghou, et al. Effaith carthydd rhannau ynysig oCistanche deserticolaYmchwil Arbrofol □. Tsieina Journal of Traditional Chinese Medicine, 2003, 10(1I1): 31-32.

【7】 Zhang Baishun, Chen Shuanghou, Zhao Xuewen, et al.Cistanche deserticolaextract galactitol Astudiaeth dos-ymateb ar weithred stôl [J]. Tsieina Journal of Traditional Chinese Medicine, 2003, 10 (12): 28-29.

【8】 Gao Yunjia, Jiang Yong, Dai Fang, et al. Ymchwil ar sylweddau meddyginiaethol oCistanche deserticolaar gyfer carthyddion Ymchwil [J]. Meddygaeth Tsieineaidd Fodern yn Tsieina, 2015, 17(4): 307-311.

【9】 Bao Zhong, Cai Hong, Jiang Yong, et al. Tri gweithgaredd oCistanche deserticolao dan wahanol ffactorau dylanwadol Dadansoddiad Meintiol o Gydrannau J. Meddygaeth Lysieuol Tsieineaidd, 2013, 44 (22): 32233230.

【10】 Bao Zhong, Cai Hong, Jiang Yong, et al. Penderfyniad oCistanche deserticolagan HPLCEISD Cynnwys Galactitol.Journal of Pharmaceutical Analysis, 2007, 27(7): 1004-1006.

【11】 Zhao Kuijun, Liang Lijuan, Bi Dan, et al. Penderfyniad HPLCELSD oCistanchea thiwb Cynnwys galactitol ynCistanche[J]. Tsieina Journal of Traditional Chinese Medicine, 2012, 19(8): 52-54.

【12】 Wang Guiping, Xue Xiaomin, Lu Chao, et al. Effaith betaine ar wella ymwrthedd straen planhigion a'i fecanwaith gweithredu.Jiangxi Agricultural Journal, 2014, 26(8): 2226.

【13】 Wang Qingjie, Wang Li. Adolygiad o ymchwil genynnau ymwrthedd oer planhigion. Economi a Thechnoleg wledig, 2018, 29(8): 23-25.