Mae Elastas A Gwaethygu Imiwnedd Cynhenid ​​Niwtroffil Yn Ymwneud ag Amlygiadau Aml-weldgar o COVID-19

Haniaethol

Cefndir:

Mae llawer o ddadleuon yn awgrymu y gallai niwtroffiliaid chwarae rhan amlwg yn COVID{0}}. Fodd bynnag, nid yw rôl cydrannau allweddol imiwnedd cynhenid ​​​​neutrophil mewn ffurfiau difrifol o COVID-19 wedi haeddu digon o sylw. Ein nod oedd gwerthuso cyfranogiad neutrophil elastase, histone-DNA, a DNases mewn amlygiad systemig ac aml-organ o COVID-19.

Mae nifer a gweithgaredd neutrophils yn ddangosyddion pwysig sy'n adlewyrchu statws imiwnedd y corff. Pan fydd y corff yn cael ei ysgogi gan haint neu lid, bydd neutrophils yn cynyddu'n gyflym ac yn mynd i mewn i'r meinwe difrodi neu safle llidiol, gan ryddhau digon o ensymau a phroteinau i gael gwared ar sylweddau niweidiol. Mae'r gallu ymateb cyflym hwn yn gwneud neutrophils yn rhan bwysig o amddiffyniad imiwnedd y corff. Ar yr un pryd, mae neutrophils hefyd yn cymryd rhan yn y broses o reoleiddio imiwnedd. Gallant gydweithredu â chelloedd imiwnedd eraill i reoleiddio ymateb imiwn y corff a chynnal cydbwysedd y system imiwnedd. Mewn rhai cyflyrau clefyd, megis clefydau hunanimiwn, adweithiau alergaidd, ac ati, bydd cynnydd neu weithgaredd annormal neutrophils yn effeithio'n negyddol ar system imiwnedd y corff, gan sbarduno ymatebion llidiol diangen a difrod meinwe. Mewn bywyd bob dydd, rhaid inni hefyd roi sylw i'n imiwnedd. Gall Cistanche wella ein imiwnedd ym mywyd beunyddiol. Gall y polysacaridau mewn cig reoleiddio ymateb imiwn y system imiwnedd ddynol a chynyddu straen celloedd imiwnedd. Y gallu i wella effaith bactericidal celloedd imiwnedd.

Cliciwch ar fanteision iechyd cistanche

Dulliau:

Gwnaethom gynnal astudiaeth amlganolfan o farcwyr imiwnedd cynhenid ​​​​neutrophil mewn 155 o achosion a recriwtiwyd yn olynol mewn canolfan sgrinio, ysbytai lleol, a dau ysbyty prifysgol rhanbarthol. Gwerthuswyd yr achosion yn ôl marcwyr clinigol a biolegol o ddifrifoldeb ac amlygiadau aml-organ a'u cymharu â 35 o reolaethau iach.

Canlyniadau:

Cynyddwyd y gwaed neutrophil elastase, histone-DNA, myeloperoxidase-DNA, a dsDNA rhad ac am ddim yn ddramatig, a gostyngwyd gweithgaredd DNase gan 10-plyg, o gymharu â rheolyddion. Roedd Neutrophil elastase a histone-DNA yn gysylltiedig â derbyniadau gofal dwys, tymheredd y corff, niwed i'r ysgyfaint, marcwyr canlyniadau cardiofasgwlaidd, methiant arennol, a mwy o interleukin-6 (IL-6), IL-8 , a CXCR2. Roedd Neutrophil elastase yn rhagfynegydd annibynnol o sgôr tomograffeg gyfrifiadurol niwed i'r ysgyfaint COVID-19 a nifer yr organau yr effeithiwyd arnynt, mewn dadansoddiadau aml-amrywedd. Roedd y crynodiadau gwaed cynyddol o drapiau allgellog NE a neutrophil yn gysylltiedig â gwaethygu ysgogiad niwtroffil trwy grynodiadau uwch IL-8 a CXCR2 a mwy o DAMPs serwm, ac â dirywiad amhariad mewn NETs o ganlyniad i'r gostyngiad dramatig mewn DNase yn y gwaed. gweithgaredd.

Casgliad:

Mae ein canlyniadau yn nodi rôl allweddol gwaethygu imiwnedd cynhenid ​​​​neutrophil yn COVID-19. Gallai Neutrophil elastase a DNase fod yn fiofarcwyr posibl ac yn dargedau therapiwtig ar gyfer amlygiadau systemig difrifol o COVID-19.

ABSENOLDEB GRAFFIG

Mae lefelau gwaed neutrophil elastase a histone-DNA yn gysylltiedig ag amlygiadau difrifol a systemig ac aml-organ o COVID-19. Mae crynodiadau gwaed uwch o neutrophil elastase a thrapiau allgellog neutrophil yn gysylltiedig â gwaethygu ysgogiad niwtroffil trwy'r llwybr IL-8/CXCR2 actifedig. Gallai Neutrophil elastase a DNase fod yn fiofarcwyr posibl ac yn dargedau therapiwtig ar gyfer amlygiadau systemig difrifol o COVID-19.

1|RHAGARWEINIAD

Mae clefyd coronafeirws 2019 (COVID-19) yn cynhyrchu digwyddiadau thromboembolig ac amlygiadau aml-organ, gan gynnwys y galon, yr afu, a'r arennau.1,2 Maent yn deillio'n rhannol o ymglymiad gormodol imiwnedd cynhenid3 a storm cytocin a gynhyrchir gan lymffocyt a actifadu macrophage.4-6 Mae dadleuon yn awgrymu bod niwtroffiliau hefyd yn chwarae rhan amlwg yn ffurfiau difrifol y clefyd sy'n bygwth bywyd.6-9 Fodd bynnag, mae cyfranogiad niwtroffiliau mewn canlyniadau systemig ac aml-organ o COVID-19 wedi haeddu sylw annigonol.8

Mae gan neutrophils arsenal o strategaethau amddiffynnol sy'n cynnwys rhyddhau gronynnau gwrthficrobaidd a neutrophil elastase (NE), a ffurfio trapiau allgellog neutrophil (NETs). pathogenau.6,8 Nododd astudiaeth fod dau farciwr o NETs, ​​DNA di-gell a myeloperoxidase (MPO)-DNA, wedi cynyddu mewn cleifion COVID-19 mewn ysbytai o gymharu â 30 o reolaethau a'u bod yn cydberthyn â phrotein C-adweithiol, D-dimer, lactate dehydrogenase, a neutrophil count.9 absoliwt

Dangosodd astudiaeth arall gan ein grŵp fod lefel MPO-DNA yn cynyddu yng nghyfnod cynnar haint coronafeirws syndrom anadlol acíwt difrifol 2 (SARS-CoV-2), mewn achosion dydd.10 Mae homeostasis cylchredeg NETs yn dibynnu ar NE a DNase 1 a DNase 11L3.6 Mae NE a NETs gormodol yn y gwaed yn cynhyrchu briwiau fasgwlaidd a meinwe mewn niwmonia firaol acíwt, sy'n debyg i'r rhai a welwyd mewn haint COVID-19.6,11,12 Er gwaethaf y dystiolaeth hon, boed NE, Nid yw DNases, a histone-DNA yn ymwneud ag amlygiadau aml-weledol o COVID-19 wedi'u gwerthuso hyd yma.

Yr astudiaeth bresennol yw'r un gyntaf, a astudiodd NE, cyfanswm gweithgaredd DNase, a histone-DNA mewn achosion COVID-19 a recriwtiwyd mewn canolfannau sgrinio, ysbytai lleol, ac ysbytai rhanbarthol i'w gwerthuso yn ôl difrifoldeb y clefyd ac aml-organ amlygiadau. Gwelsom fod NE yn rhagfynegydd annibynnol o'r anaf aml-organ a gynhyrchir gan COVID-19. Roedd rhyddhau NE a NETs yn gysylltiedig ag actifadu neutrophil gan batrymau moleciwlaidd sy'n gysylltiedig â difrod serwm (DAMPs) a'r llwybr IL-8/CXCR2.

2|DEUNYDDIAU A DULLIAU

2.1|Recriwtio cleifion a nodweddion clinigol poblogaeth yr astudiaeth

Cofrestrwyd astudiaeth NICO (Imiwnedd Cynhenid ​​Neutrophil mewn COvid-19) gan Fwrdd Adolygu Sefydliadol Ymchwil Glinigol (DRCI) Ysbyty Athrofaol Nancy (Rhif 2020PI087) ac fe'i cymeradwywyd gan y Pwyllgor Moesegol. Gwnaethom gynnal astudiaeth groestoriadol olynol o 155 o gleifion cadarnhaol a recriwtiwyd ar ôl caniatâd gwybodus mewn canolfan sgrinio, ysbytai lleol, ac adrannau meddygaeth ac unedau gofal dwys dwy ganolfan ysbyty prifysgol yn y cyfnod pandemig uchaf o COVID-19 yn Ffrainc. Dilynwyd canllawiau EQUATOR a BRISQ ar gyfer adrodd ar ddata clinigol a biolegol a'r defnydd o sbesimenau biolegol. Nodweddwyd yr haint gan RT-PCR ar sbesimenau swab trwynol. Mynychodd y 34 o bynciau cerdded yn olynol y ganolfan sgrinio yn ystod wythnos gyntaf y clefyd, fel y disgrifiwyd yn flaenorol.10 Fe wnaethom recriwtio 121 o gleifion ychwanegol yn yr ysbyty ar gyfer COVID{10}} mewn adrannau meddygol ysbytai lleol yn rhanbarth Tours (n -19 {11}}) ac Ysbytai Prifysgol Rhanbarthol Marseille a Nancy (n=78).

Yn eu plith, cafodd 13 driniaeth mewn unedau gofal dwys. Canolrif yr oedi rhwng dechrau'r symptomau a samplu gwaed oedd 7 diwrnod (IQR: 4-13) mewn adrannau meddygol a 13 diwrnod (IQR: 4-14) mewn unedau gofal dwys. Gwnaethom adrodd ar nodweddion clinigol a chanlyniadau cleifion mewn ysbytai a restrir yn Nhabl S1. Gwerthuswyd sgorio difrod i'r ysgyfaint gan domograffeg gyfrifiadurol mewn 5 gradd (sgôr CT), fel y disgrifiwyd.13 Roedd y grŵp rheoli yn cynnwys pynciau iach, heb unrhyw gysylltiad ag achosion heintiedig a negyddol ar gyfer sgrinio COVID-19.

2.2|Samplu gwaed ac asesiad biolegol

Defnyddiwyd y sera ar ôl cwblhau profion biocemegol a orchmynnwyd gan y clinigwr. Storiwyd y samplau sy'n weddill yn yr un amodau ymhlith grwpiau, ar −20 gradd yn y 24 awr ar ôl tynnu gwaed yn ôl. Assayed marcwyr biocemegol arferol yn dadansoddwyr Cobas 8000 (Roche Diagnostics, y Swistir) ac Atellica (Eschborn, yr Almaen).

2.3|Mesur elastase, MPO-DNA, cyfadeiladau DNAhistone, dsDNA, a cytocinau mewn serwm

Mesurwyd lefelau cylchredeg o gyfadeiladau histone-DNA mewn serwm gan y Pecyn Canfod Marwolaeth Cell ELISA (Roche Diagnostics, Sigma-Aldrich, UDA), fel y disgrifiwyd yn flaenorol.14 Adroddwyd ar werthoedd mewn unedau amsugnedd 450 nm. Mesurwyd cyfadeiladau DNA-MPO trwy ddisodli'r gwrthgorff gwrth-histone gyda gwrthgorff polyclonal cwningen yn erbyn myeloperoxidase (Merck, Darmstadt, yr Almaen). Pennwyd crynodiad NE gan ddefnyddio Pecyn ELISA Dynol Neutrophil Elastase (Invitrogen, Carlsbad, UDA). Adroddwyd ar werthoedd mewn ng/ml. Cafodd dsDNA di-gell ei feintioli gan ddefnyddio Pecyn Assay Quant-iT PicoGreen® dsDNA, ar ôl tynnu'r cefndir (Invitrogen). Assayed IL-6, IL-8, a CXCR2 gan ELISA Kits o Reagentbio Ireland Ltd, Dulyn, Iwerddon, IL-1 gan Invitrogen, HMGB1 gan Novus Biologicals (Centennial, USA), a TNF- gan ELISA Kit o R&D Systems Inc. (Minneapolis, UDA).

2.4|Cyfanswm actifedd deoxyribonuclease (DNase) mewn serwm trwy assay trylediad ensymau rheiddiol sengl (SRED)

Cafodd y gweithgaredd DNase ei feintioli ar gel agarose sy'n cynnwys 0.13 mg. mL−1 DNA o sberm eog mewn byffer yn cynnwys 100 mM MES pH 6.5, 20 mM MgCl2, 2 mM CaCl2, a SYBR Diogel DNA Gel Stain (Invitrogen, Technoleg Bywyd) fel y disgrifiwyd.15,16 Roedd dau ficrolitr o serwm wedi'u lleoli yn ffynhonnau. Deorwyd geliau am 24 awr ar 37 gradd mewn siambr llaith. Cofnodwyd fflworoleuedd DNA-SYBR gyda sganiwr fflworoleuedd.

2.5|Meintioli NETs wedi'u rhwymo mewn celloedd mewn niwtroffiliau wedi'u deor â serwm cleifion

Er mwyn pennu a yw serwm cleifion COVID-19 yn dylanwadu ar NETs sy'n rhwym i gelloedd, cymysgwyd gwaed un rhoddwr iach (1:1 cyf/cyfrol) â sera claf cyn triniaeth PMA a'i ddeor am 6 awr, fel y disgrifiwyd.14 Cyflawnwyd lysis celloedd coch trwy ychwanegu 1 ml o adweithydd FACS Lyse (BD Biosciences; gwanhad 1:10) am 5 munud. Yna ychwanegwyd albwmin serwm buchol (BSA, 1 ml ar 2 y cant) mewn halwynog wedi'i glustogi â ffosffad (PBS), a chafodd y cymysgedd ei allgyrchu ar 1000 g am 10 munud. Dadansoddwyd y pelenni a ail-daliwyd yn PBS gan ddefnyddio cytomedr llif Gallios (Beckman Coulter, Villepinte, Ffrainc). Roedd y strategaeth gatio yn canolbwyntio'n ddilyniannol ar (i) gelloedd CD66-positif ac yna (ii) celloedd H3Cit-positif ac MPO-positif.

2.6|Assay ar gyfer rhyddhau DNA in vitro NET o niwtroffiliau gan serwm claf

Ailddaliwyd niwtroffiliau ynysig yn RPMI 1640, a chafodd celloedd 1 × 105 eu hadu mewn 96-blatiau meithrin meinwe ffynnon, fel y disgrifiwyd.14 Cafodd platiau eu deor ar 37 gradd i ganiatáu i gelloedd lynu. Yn dilyn ysgogiad gyda 100 µl o 0.1 ng/ml PMA am 4 h, deorwyd ffynhonnau ag 1 U/ml MNase neu DNase 1 (y ddau o Worthington) am 10 munud neu 10 µl claf neu serwm rheoli am 6 h, ac yna 2 mM Ychwanegwyd EDTA i atal gweithgaredd niwcleas. Cafodd y cynnwys DNA a ryddhawyd yn yr uwchnatant ei feintioli gan ddefnyddio Pecyn Assay Quant-iT PicoGreen® dsDNA (Invitrogen). Ystyriwyd bod swm y DNA a ryddhawyd yn 100 y cant mewn neutrophils heb eu symbylu o roddwyr iach.

2.7|Dadansoddiadau ystadegol

Dangosir yr holl newidynnau meintiol fel yr amrediad canolrifol a rhyngchwartel (IQR, 25-75ed canradd), a newidynnau ansoddol fel canrannau a chyfwng hyder 95 y cant (95 y cant CI). Defnyddiwyd profion nad ydynt yn barametrig pan nad oedd dosbarthiad data yn normal. Perfformiwyd dadansoddiadau univariate gan ddefnyddio'r prawf chi-sgwâr neu brawf union Fisher ar gyfer newidynnau categorïaidd a'r profion Mann-Whitney U a'r Kruskal-Wallis a chydberthynas rheng Spearman ar gyfer newidynnau parhaus. Perfformiwyd cymariaethau pâr post hoc rhwng is-grwpiau gan ddefnyddio prawf Conover. Wedi hynny, gwnaethom ddadansoddiad o nodweddion gweithredu derbynnydd (ROC) i edrych am y trothwyon gorau posibl sy'n gysylltiedig â chanlyniadau clefydau.17 Wedi hynny, gwnaethom ddadansoddiad o nodweddion gweithredu derbynnydd (ROC) i chwilio am y trothwy gorau posibl sy'n gysylltiedig â chanlyniadau clefydau, yn ôl DeLong et al.17 Y newidyn dosbarthiad a ddefnyddiwyd yn y dadansoddiad ROC oedd y canlyniad afiechyd a astudiwyd.

For each ROC analysis, we reported the area under the receiver operating characteristic curve (AUROC) and the associated p-value. The exact binomial method was applied to estimate the 95% confidence intervals (CIs) of the AUROC. The optimal diagnostic cutoff was defined using the Youden index J. Bias-corrected and accelerated (BCa) bootstrap interval after 10,000 iterations for the Youden index and its associated values was performed.18 Clinical and biological criteria were used to define organ injuries (see the Methods section in this article's Online Repository at www.jacionline.org). Bias-corrected and accelerated (BCa) bootstrap interval after 10,000 iterations for the Youden index and its associated values were performed.18 In step #2, using multivariable logistic regression analysis, we assessed whether the ROC-defined threshold defined for elastase (>593 ng/L) yn gysylltiedig â "nifer yr organau yr effeithiwyd arnynt yn fwy na neu'n hafal i 2" ar ôl cyfrif am ddryswyr posibl. Fe wnaethom asesu gwahaniaethu model gan ddefnyddio dadansoddiad ROC (AUROC a 95 y cant CI) a graddnodi model gan ddefnyddio prawf daioni ffit Hosmer a Lemeshow ac ystadegau Nagelkerke R2.19

In step #3, we assessed the association between elastase level (>neu Llai na neu'n hafal i 593 ng/L) a demograffeg cleifion, hanes meddygol, a chanlyniadau clefydau. Roedd angen maint sampl o 7 claf fesul grŵp i ganfod cynnydd Mwy na neu hafal i 200 y cant a 38 o gleifion i ganfod cynnydd Mwy na neu hafal i 100 y cant mewn elastase cymedrig rhwng grwpiau , gyda 1- ar 80 y cant ac ar 0.05. Perfformiwyd dadansoddiadau ystadegol gan ddefnyddio MedCalc, fersiwn 19.1 (MedCalc Software, Ostend, Gwlad Belg), a Stata SE, fersiwn 12.1 (College Station, Texas, USA), yn seiliedig ar gamgymeriad math I dwy ochr gyda lefel alffa o 0.05.

3|CANLYNIADAU

3.1|Mae NE, MPO-DNA, a histone-DNA wedi'u cynyddu'n ddramatig, a gostyngwyd gweithgaredd DNase yn ddramatig mewn COVID-19 yn ystod y dydd ac yn yr ysbyty

cleifion

Roedd gan y 34 o achosion symudol oedran cymedrig (plws /-SD) o 42 + /-17 o flynyddoedd a chymhareb rhyw (M/F) o 0.88. Roedd gan bob un o leiaf ddau symptom gan gynnwys twymyn, peswch sych, a dyspnea am lai nag wythnos. Nid oedd gan yr un ohonynt ffurf ddifrifol ar y cam hwn o'r afiechyd. Adroddir nodweddion clinigol y 122 o achosion mewn ysbyty yn Nhabl S1, ac adroddir ar eu marcwyr biolegol, gan gynnwys IL-6, IL-8, CXCR2, TNF- , IL-1, a HMGB1 yn Nhabl S2, ac adroddir ar nodweddion y 35 o reolaethau iach yn Nhabl S3. Adroddir lefelau gwaed NE, MPO-DNA, histone-DNA, a dsDNA cleifion COVID-19 cerdded ac ysbyty yn Nhabl S4. Roeddent yn sylweddol uwch na'r rhai a adroddwyd mewn pynciau rheoli. Mewn cyferbyniad, roedd y gweithgaredd DNase byd-eang 10-plyg yn is mewn achosion COVID-19 (Ffigur 1A, B).

Nid oedd y crynodiad serwm o gydrannau NE a NET yn gysylltiedig ag oedran a rhyw ymhlith grwpiau, ac roedd y crynodiad serwm o 1 antitrypsin (AAT), prif atalydd gwaed NE, yn normal (Tabl S2). Roedd y crynodiad o NE yn sylweddol uwch mewn ysbytai yn erbyn achosion symudol a chleifion a gafodd eu trin mewn gofal dwys yn erbyn ysbytai lleol ac adrannau meddygol ysbytai prifysgol (Ffigur 1A). Dosbarthwyd NE mewn dau glwstwr o grynodiadau uchel ac is mewn achosion dydd a chleifion yn yr ysbyty yn adrannau meddygol ysbytai prifysgol rhanbarthol. Roedd gan y clystyrau gyda'r crynodiadau uchaf werthoedd tebyg i'r rhai a adroddwyd mewn unedau gofal dwys (Ffigur 1A). Fel y gwelwyd ar gyfer cydrannau NE a NET, roedd y crynodiad o dsDNA yn uwch mewn cleifion a dderbyniwyd i unedau gofal dwys (Ffigur 1B). Yn ogystal, roedd y crynodiad serwm o gydrannau NE a NET yn gysylltiedig â nifer yr organau yr effeithiwyd arnynt (Ffigur 1C).

3.2|Mae NE, histone-DNA, a chyfanswm gweithgarwch DNase yn gysylltiedig â difrifoldeb ac amlygiadau aml-weledol o COVID-19

Astudiwyd y cysylltiadau rhwng elastase, DNA cyfunedig myeloperoxidase, cymhleth histone-DNA, a nodweddion clinigol a biolegol cleifion (Tabl 1). Fe wnaethom adrodd am gydberthynas sylweddol o NE â histone-DNA, MPO-DNA, biomarcwyr o ddifrifoldeb afiechyd, SaO2 adeg derbyn i'r ysbyty, leukocytes, neutrophils, cymhareb neutrophil-i-lymffosyt, LDH, marcwyr risg cardiofasgwlaidd a thrombotig, gan gynnwys Troponin-T ( cTnT), ffibrinogen, a D-dimer, a marcwyr methiant arennol, gan gynnwys wrea a creatinin (Tabl 1 a Ffigur 2). Gwelsom hefyd gysylltiad sylweddol rhwng NE ac IL-6, IL-8, a CXCR2, ond nid â TNF , IL-1 , a HMBG1 (Ffigur 3). Adroddwyd bod cysylltiad sylweddol rhwng histone-DNA â sgôr tomograffeg gyfrifiadurol (sgôr CT) niwed i'r ysgyfaint, 13 marcwyr risg cardiofasgwlaidd a thrombotig,13 (Tabl 1) gan gynnwys cTnT a ffibrinogen, marcwyr methiant arennol, gan gynnwys wrea a creatinin, a marcwyr llid, gan gynnwys protein C-adweithiol, ferritin, a thymheredd y corff (Ffigur S1). Mewn cyferbyniad, roedd MPO-DNA yn gysylltiedig yn unig â leukocytes (p=0.005) a neutrophils (p=0.004), ac ar arwyddocâd gwannach, gyda D-Dimer (p=0 .045) a ffibrinogen (p=0.047). Roedd cyfanswm gweithgaredd DNase yn gysylltiedig â phosphatase alcalïaidd (PAL) a chyfanswm bilirubin, tra bod dsDNA yn gysylltiedig â ferritin yn unig (Tabl 1).

FFIGUR 1 Neutrophil elastase (NE), myeloperoxidase-DNA (MPO-DNA), histone-DNA, a (B) dsDNA di-gell a chyfanswm gweithgaredd DNase mewn serwm o 155 o achosion COVID-positif. Recriwtiwyd achosion symudedd symptomatig (n=34) mewn canolfannau sgrinio a chleifion mewn ysbytai (n=122) ​​mewn ysbytai lleol (n=43) ac adrannau meddygol (n=65) a unedau gofal dwys (n=13) o ddau ysbyty prifysgol rhanbarthol. Roedd gwerthoedd-p crynodiadau NE rhwng grwpiau fel a ganlyn: iach yn erbyn cerdded<0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.7870; ambulatory versus medical department 0.0028; ambulatory versus intensive care <0.0001; proximity hospital versus medical department 0.0003; proximity hospital versus intensive care <0.0001; and medical department versus intensive care 0.0239. The p-values of MPO concentrations between groups were healthy versus ambulatory <0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.1237; ambulatory versus medical department 0.8589; ambulatory versus intensive care 0.1276; proximity hospital versus medical department 0.1463; proximity hospital versus intensive care 0.5811; and medical department versus intensive care 0.1482. 

Roedd gwerthoedd-p gwerthoedd histone_DNA rhwng grwpiau yn iach yn erbyn cerdded<0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.0013; ambulatory versus medical department 0.0525; ambulatory versus intensive care <0.0001; proximity hospital versus medical department 0.2740; proximity hospital versus intensive care 0.0.0033; and medical department versus intensive care 0.0003. The thresholds (dotted lines) were evaluated in healthy controls recruited several months before the epidemy. 

Amcangyfrifwyd bod trothwy NE yn 73 ng/ml a rhai MPO-DNA yn 0.562 AU (450 uned amsugnedd nm), histone-DNA yn 0.591 AU, sef cyfanswm gweithgaredd DNase ar 9.94 U/ml, a serwm dsDNA ar 95.60 ng/ml (C) NE, MPO-DNA, a histone-DNA yn ôl nifer yr organau y mae COVID yn effeithio arnynt-19. Cymharwyd data o (A), (B), a (C) gan brawf Mann-Whitney. Mae'r llinellau toredig yn cynrychioli'r toriadau a ddiffinnir gan y cymedr ynghyd â 2 wyriad safonol ar gyfer NE, MPO-DNA, histone-DNA, a DNA di-gell, a'r cymedr - 2 wyriad safonol ar gyfer gweithgaredd DNA.

3.3|Cywirdeb diagnostig NE, MPO-DNA, histone-DNA, dsDNA, gweithgaredd DNase, a cytocinau cysylltiedig ar gyfer canfod canlyniadau afiechyd mewn dadansoddiadau nodwedd gweithredu derbynnydd (ROC)

Fe wnaethom berfformio dadansoddiadau ROC i asesu cywirdeb diagnostig NE, MPO-DNA, a histone-DNA ar gyfer rhagfynegi canlyniadau sy'n gysylltiedig â chlefydau (Tabl S5 a plot Coedwig yn Ffigur 4). Roedd gan NE drothwyon sylweddol ar gyfer derbyniadau i unedau gofal dwys, methiant anadlol, dirlawnder ocsigen gwaed<85%, and the presence of at least two affected organs (Figure 4). The latter was best predicted with a cutoff at 593 ng/ml of NE. Histone-DNA had significant thresholds for admission into intensive care units, kidney injury, and blood oxygen saturation <85%. MPO-DNA had significant thresholds for heart decompensation, kidney injury, respiratory failure, and blood oxygen saturation <85%. The ROC analyses identified also very significant cutoffs for IL-6, IL-8, and CXCR2 for admission into intensive care units, heart decompensation, kidney injury, and respiratory failure. In contrast, we did not observe these associations with IL-1β and TNF-α.

3.4  |  Associations between NE >593 ng/ml a nodweddion a chanlyniadau cleifion

In univariate analyses, NE >593 ng/ml was significantly associated with CT score, blood oxygen saturation, respiratory failure, presence of at least two affected organs, and admission into the intensive care unit (Table S6). We retained chronic kidney disease, diabetes, and hypertension as potential confounders in multivariable analyses (Table S7). In the multivariable models that were used to account for the collinearity issue, NE >Roedd 593 ng/ml yn gysylltiedig yn annibynnol â sgôr CT a phresenoldeb o leiaf dwy organ yr effeithiwyd arnynt (Tabl S8). Roedd gan y model aml-newidyn optimaidd arwynebedd o dan nodweddion gweithredu derbynnydd (AUROC) o 0.876 (95 y cant CI, 0.758-0.950) a chanran o achosion yn gywir dosbarthu o 85 y cant . Gwnaethom ddadansoddiadau cydgordiad rhwng toriadau o NE a cytocinau wrth ragfynegi o leiaf dwy organ yr effeithiwyd arnynt. Fe wnaethom adrodd bod 70.4 y cant a 72.7 y cant o NE gyda CXCR2 ac IL-6, yn y drefn honno (Ffigur 3).

3.5|Mae sera cleifion yn lleihau cadw NETs ac yn cynyddu rhyddhau dsDNA mewn niwtroffiliau rheoli ynysig

Astudiwyd NETs o niwtroffiliau rheoli wedi'u rhwymo gan gelloedd wedi'u deor â sera claf gan ddefnyddio cytometreg llif. Gwelsom lai o gadw NETs rhwymedig celloedd, a oedd yn adlewyrchu rhyddhau cynyddol, o gelloedd wedi'u deor â sera claf yn erbyn rheolaeth (Ffigur 5A). Astudiwyd ymhellach ryddhau dsDNA o niwtroffiliau rheoli a gynhyrchir gan sera claf. Gwelsom gynnydd o dsDNA yn cael ei ryddhau o niwtroffiliau a ddeorwyd â sera claf yn erbyn rheolaeth (Ffigur 5B). Cafodd ataliad NE a phroteasau serwm serwm eraill â aprotinin 10 μM effaith ataliad wan ar ryddhau dsDNA (Ffigur 5C). Gyda'i gilydd, roedd y data hyn yn awgrymu bod y sera gan gleifion yn cynyddu rhyddhau cydrannau o NETs, ​​gyda rôl gyfyngedig o NE.

4|TRAFODAETH

Our study showed that NE, global DNase activity, and components of NETs are involved in the early and later steps of COVID-19. NE and histone-DNA were associated with clinical manifestations and biomarkers related to pulmonary damage, cardiovascular manifestations, renal insufficiency, and inflammation. Elastase >Roedd 593 ng/ml yn rhagfynegydd annibynnol o anafiadau aml-organ mewn dadansoddiad aml-amrywedd.

Mae'r cynnydd dramatig yn lefelau gwaed NE a NETs mewn achosion cerdded yn dangos eu rhan yn yr ymateb gwesteiwr cynnar i SARS-CoV-2, fel y gwelwyd yn flaenorol ar gyfer niwmonia firaol arall.4,6,11,20 Y cynnydd mewn NE ac mae NETs i'w gweld o hyd yng nghyfnod diweddarach yr haint, fel y gwelir mewn achosion mewn ysbytai, yn enwedig y rhai a recriwtiwyd yn yr uned gofal dwys bythefnos ar ôl i'r symptomau ddechrau. Mae celloedd epithelial alfeolaidd o'r ysgyfaint sydd wedi'u heintio â firws y ffliw yn ysgogi NETosis.21 Fodd bynnag, mae dadl ar effeithiau andwyol yn erbyn effeithiau amddiffynnol NETs mewn syndrom trallod anadlol acíwt (ARDS).22,23 Mae'r H3 citrullinated a DNA di-gell yn adlewyrchu'r cynhyrchu trapiau allgellog gan neutrophils, granulocytes, a monocytes.23,24 Mae'r cynnydd dramatig yng nghrynodiad gwaed NE yn adlewyrchu'n fwy penodol actifadu neutrophils.24,25 I'w nodi, mae crynodiad NE yn cydberthyn yn well â llid alfeolaidd na chyfrif niwtroffil, mewn acíwt syndrom trallod anadlol.25,26.

Roedd NE, ond nid histone-DNA ac MPO-DNA, yn rhagfynegydd annibynnol o ddifrod aml-organ mewn-19 cleifion COVID. Mae'r canlyniad hwn yn adlewyrchu rôl amlwg NE yn rhyddhau cydrannau NET a mecanweithiau imiwnedd cynhenid ​​​​neutrophil.24 Mae NE yn cael ei ddosbarthu mewn meinweoedd a gwaed trwy ddirywiad neu ryddhau gyda NETs.24,27-29 Mae sefydlu ROS trwy haint firaol yn actifadu MPO , sydd wedyn yn actifadu rhyddhau NE.29,30 Mae'r gydberthynas hynod arwyddocaol rhwng NE a histone-DNA a MPO-DNA yn dangos rôl NE mewn ffurfio NET. Ar ysgogiad niwtroffil, mae NE yn trawsleoli i'r cnewyllyn, lle mae'n cymryd rhan mewn diraddiad histone cyn iddo ryddhau gyda deunydd DNA/cromatin NETs.6,30 Yn bwysig, mae NE sy'n gysylltiedig â NETs yn parhau i fod yn weithredol ac yn dianc rhag gweithgaredd gwrth-proteas mewndarddol AAT. 31 Gall NE achosi niwed i feinwe yn yr ysgyfaint, y galon, yr afu, y llestri, a'r arennau a chael effeithiau prothrombotig mewn haint firaol.6,26,31–37

Mae diraddio cydrannau matrics allgellog (ECM) gan NE yn cynhyrchu'r un anafiadau i'r ysgyfaint a fasgwlaidd â'r rhai a welwyd mewn sbesimenau awtopsi o gleifion COVID-19.34-39 Cysylltiadau NE a histone-DNA â SaO2 adeg derbyn i'r ysbyty a Mae sgôr CT o niwed i'r ysgyfaint o COVID-18 yn gyson â'u heffeithiau mewn heintiau firaol ysgyfaint eraill.6,12,40 Mae eu cysylltiadau â troponin-T, D-dimer, a ffibrinogen yn awgrymu eu rôl yn yr effeithiau prothrombotig a adroddir yn COVID-19.39–41 Nid yw'r anaf myocardaidd yn ystod COVID-19 wedi'i ddeall yn glir.42–44 Mae'r mecanweithiau'n cynnwys haint firaol uniongyrchol, thrombosis, microfasgwlaidd, ac anaf myocardaidd sy'n gysylltiedig â llai o ocsigen yn cael ei gyflenwi a rhyddhau cytocinau.34,43,45 Gallai'r cTnT cynyddol sy'n gysylltiedig ag NE fod yn eilradd i thrombosis coronaidd a cnawdnychiant myocardaidd a/neu myocarditis.34,43,44 Gallai NE a NETs hefyd gyfrannu at gysylltiad anaf i'r galon drwy effeithiau systemig yn yr arennau ac organau eraill.2,45,46 Mae cysylltiadau NE a histone-DNA ag wrea a creatinin yn awgrymu eu rhan yn yr anaf acíwt i'r arennau a adroddwyd mewn tua 30 y cant o gleifion COVID.33,47-49 .

Mae ein hastudiaeth yn cyfrannu at ddealltwriaeth well o fecanweithiau patholegol COVID-19 trwy dynnu sylw at rôl allweddol tarfu ar imiwnedd cynhenid ​​​​neutrophil yn ystod ac ar ôl dyblygu firaol, fel y crynhoir yn y crynodeb graffigol. Mae IL-6, IL-8, a TNF- yn cyfrif am y cytocinau sy'n gysylltiedig yn bennaf â difrifoldeb COVID-19.50 Gwnaethom gadarnhau'r cysylltiad hwn ar gyfer IL-6 ac IL{{7} }. Roedd cydberthynas gadarnhaol rhwng crynodiadau IL-1 uwch a difrifoldeb y clefyd mewn sawl astudiaeth.51 Fodd bynnag, ni welsom unrhyw gysylltiad rhwng IL-1 â chanlyniadau difrifoldeb COVID-19, fel yr adroddwyd yn flaenorol mewn a meta-ddadansoddiad diweddar.52 Mae'r canlyniadau hyn yn gyson ag astudiaeth maint mawr diweddar, lle canfuwyd IL-1 yn wael ac, o ganlyniad, dim ond gwerth rhagfynegol ymylol o ddifrifoldeb y clefyd oedd ganddo.50 IL{{17 }} ac IL-8 yn cael eu cynhyrchu ar NF-κB actifadu macroffagau alfeolaidd heintiedig trwy fecanweithiau sydd yn ôl pob tebyg yn cynnwys Bruton tyrosine kinase (BTK).53 Dangosir hyn gan yr effeithiau clinigol addawol a gynhyrchwyd gan yr atalydd BTK acalabrutinib mewn cleifion â COVID difrifol-19.53 IL-8 yn gweithredu fel chemokine sy'n ysgogi niwtroffiliaid drwy ei rwymo i CXCR2, sy'n dderbynnydd cemocin mawr o neutrophils.15 Felly, mae'r cynnydd dramatig mewn NE mewn COVID difrifol{{27 Gall }} fod yn gysylltiedig ag actifadu niwtroffil gan y llwybrau IL-8/CXCR2.16 Mae LDH, ferritin, a D-dimer yn cydberthyn yn fawr ag NE a gallent adlewyrchu actifadu macrophage COVID-19.49, 54

I'r gwrthwyneb, gallai NE a NETs hefyd chwarae rhan mewn actifadu macrophage a phrosesu cytocinau pro-llidiol.3,6,36-38 Fe wnaethom adrodd am ostyngiad dramatig mewn gweithgaredd DNase byd-eang mewn serwm, a allai gymryd rhan mewn NETosis trwy ddiraddio llai o darnau DNA cromatin sy'n cylchredeg (haniaeth graffigol).55–58 Mae'n werth nodi bod model llygoden Dnase1–/– Dnase1 l3–/- sy'n agored i bathogenau yn cynhyrchu briwiau ysgyfaint tebyg i'r rhai a welwyd mewn cleifion â thrallod anadlol a/neu sepsis ac awtopsïau o cleifion COVID-19.40,59 Yn gyson, nododd astudiaeth ddiweddar fod llai o weithgaredd o DNase I mewn niwmonia bacteriol a firaol mewn plant.60.

Fe wnaeth sera cleifion COVID{0}} leihau cadw celloedd NETs a chynyddu rhyddhau dsDNA o niwtroffiliau gan roddwyr iach. Cafwyd canlyniadau tebyg o'r blaen gyda serwm COVID-19 gan ddefnyddio'r llifyn cell SYTOX Green i feintioli NETs.9 Mae'r canlyniadau hyn yn dangos y gall y NETosis gael ei sbarduno gan ysgogiadau mewndarddol sy'n cael eu rhyddhau yn y gwaed gan feinweoedd anafedig fel DAMPs, gan gynnwys dsDNA am ddim .61 Ymddengys nad yw HMGB1 yn ymwneud â chynnydd mewn NETosis, gan na chynyddwyd ei grynodiad mewn achosion COVID-19, fel yr adroddwyd yn flaenorol.62

Mae ein hastudiaeth yn agor safbwyntiau therapiwtig. Mae'r gweithgaredd NE gormodol a adroddwyd yn ein hastudiaeth yn awgrymu gwerthuso'r defnydd o atalyddion NE cryf cenhedlaeth newydd, gan gynnwys lonodelestat (POL6014), alvelestat, CHF6333, ac elafin mewn COVID-19.8,27 Mae'r gostyngiad dramatig mewn DNase a adroddwyd yn mae ein hastudiaeth hefyd yn awgrymu gwerthuso'r defnydd o ailgyfunol deoxyribonuclease I (dornase alfa) a/neu DNase 1L3.63-65 Un effaith ddisgwyliedig yw rhyddhau NE o NETau diraddiedig, gyda mwy o NE rhydd yn y gwaed ac o ganlyniad gwell effeithiolrwydd atalyddion NE. 30 Am y rheswm hwn, credwn y dylid ystyried cysylltiad atalyddion DNase ag atalyddion NE wrth drin COVID-19. Opsiwn therapiwtig arall i'w ystyried fyddai'r defnydd o atalyddion CXCR2 i rwystro recriwtio ac actifadu niwtroffiliau. Gallai amharu ar NE a/neu ryddhau NETs yng nghyfnod cynnar COVID-19 gynhyrchu buddion ond hefyd risgiau sy'n gysylltiedig â lleihau imiwnedd cynhenid ​​​​y gwesteiwr. Mewn cyferbyniad, rydym yn rhagdybio y gallai'r strategaeth hon leihau'r amlygiadau systemig o COVID-19 yng nghyfnod ôl-dyblygiad y clefyd.

Dioddefodd ein hastudiaeth gyfyngiadau. Ni allem adrodd yn systematig ar bob biofarcwr ym mhob claf. Ni chaniataodd y gwerthusiad recriwtio a thraws-adrannol i ni astudio cineteg NE a NETs trwy ddilyniant cleifion. Fodd bynnag, roeddem yn gallu cymharu’r crynodiad o NE a NETs mewn cleifion symptomatig cerdded a recriwtiwyd yn ystod wythnos gyntaf COVID-19 a chleifion yn yr ysbyty yn ystod ail i bedwaredd wythnos y clefyd. Roedd recriwtio amlganolog mewn ysbytai lleol ac ysbytai prifysgol rhanbarthol yn gryfder yn ein hastudiaeth ar gyfer gwerthuso achosion â difrifoldeb clefydau cyferbyniol. Roedd cofnodi data clinigol yn gynhwysfawr yn ein galluogi i gynnal dadansoddiad aml-amrywedd o gysylltiad NE a NETs â difrifoldeb a difrod aml-organ o COVID-19, ar ôl addasu gorfodol ar gyfer hanes meddygol.

I gloi, mae ein hastudiaeth yn tynnu sylw at y cynnydd dramatig mewn NE, gweithgaredd DNase, a NETs yn ystod cam cyntaf COVID{0}} a'u rôl allweddol yn nifrifoldeb y syndrom trallod anadlol acíwt a systemig cardiofasgwlaidd, arennol a llidiol. amlygiadau yn ystod cam diweddarach y clefyd. Maent yn awgrymu gwerthuso NE, DNase 1, a NETs fel targedau therapiwtig posibl.

DIOLCHIADAU

Cofrestrwyd astudiaeth NICO gan Fwrdd Adolygu Sefydliadol Ymchwil Glinigol (DRCI) Ysbyty Athrofaol Nancy (Rhif 2020PI087) ac fe'i cymeradwywyd gan Bwyllgor Moesegol Ysbyty Athrofaol Nancy. Nid oedd gan yr awduron unrhyw wrthdaro buddiannau i'w ddatgan.

GWRTHDARO DIDDORDEB

Nid oedd gan yr un o'r awduron unrhyw berthnasoedd ariannol â'u hunain a'u teulu agos / eraill arwyddocaol.

CYFRANIADAU AWDUR

Roedd gan JL Guéant fynediad llawn i'r holl ddata, goruchwyliodd yr astudiaeth, ac mae'n cymryd cyfrifoldeb am gywirdeb a chywirdeb y dadansoddiad data. JL Guéant a V Regnault luniodd a dyluniodd yr astudiaeth. Cafodd JL Guéant, V Regnault, RM Guéant-Rodriguez, A Oussalah, a P Lacolley y data, dadansoddi'r data, neu ddehongli'r data. Roedd JL Guéant yn ymwneud â phrif ddrafftio'r llawysgrif. Roedd V Regnault, RM Guéant-Rodriguez, ac A Oussalah yn ymwneud â drafftio rhannau penodol yn rhannol. Adolygodd pob awdur y llawysgrif yn feirniadol. Mae RM Guéant-Rodriguez, Julien Fromonot, ac A Oussalah yn ymwneud â rheoli cronfa ddata. Bu RM Guéant-Rodriguez ac A Oussalah yn ymwneud â dadansoddiadau ystadegol.

CYFEIRIADAU

1. Zhou P, Yang XL, Wang XG, et al. Achos niwmonia sy'n gysylltiedig â coronafirws newydd o darddiad ystlumod tebygol. Natur. 2020; 579:270-273.

2. Grasselli G, Zangrillo A, Zanella A, et al. Nodweddion gwaelodlin a chanlyniadau 1591 o gleifion sydd wedi'u heintio â SARS-CoV-2 a dderbyniwyd i ICUs yn Rhanbarth Lombardia, yr Eidal. JAMA. 2020; 323(16): 1574.

3. Azkur AK, Akdis M, Azkur D, et al. Ymateb imiwn i SARS-CoV-2 a mecanweithiau newidiadau imiwnopatholegol yn COVID-19. Alergedd. 2020; 75:1564-1581.

4. McGonagle D, Sharif K, O'Regan A, Bridgewood C. Rôl cytocinau gan gynnwys interleukin-6 mewn niwmonia a achosir gan COVID a chlefyd tebyg i syndrom actifadu macrophage. Autoimmun Parch. 2020; 19:102537.

5. Mo P, Xing Y, Xiao YU, et al. Nodweddion clinigol niwmonia COVID-19 anhydrin yn Wuhan, Tsieina. Clin Infect Dis. 2020:ciaa270. [Epub o flaen llaw]. https://doi.org/10.1093/cid/ ciaa270

6. Papayannopoulos V. Trapiau allgellog neutrophil mewn imiwnedd ac afiechyd. Nat Parch Immunol. 2018; 18:134-147.

7. Lagunas-Rangel FA. Cymhareb neutrophil-i-lymffosyt a chymhareb protein adweithiol lymffocyt-i-C mewn cleifion â chlefyd coronafeirws difrifol 2019 (COVID{8}}): meta-ddadansoddiad. J Med Firol. 2020; 92(10):1733-1734.

8. Barnes BJ, Adrover JM, Baxter-Stoltzfus A, et al. Targedu ysgogwyr posibl COVID-19: trapiau allgellog neutrophil. J Exp Med. 2020; 217: e20200652.

9. Zuo Y, Yalavarthi S, Shi H, et al. Trapiau allgellog niwtroffil yn COVID-19. JCI. Mewnwelediad. 2020; 5:e138999.

10. Gueant JL, Fromonot J, Gueant-Rodriguez RM, Lacolley P, Guieu R, Regnault V. Blood Myeloperoxidase-DNA, biomarcwr ymateb cynnar i haint SARS-CoV-2? Alergedd. 2020. [Epub o flaen llaw]. https://doi.org/10.1111/all.14533

11. Cortjens B, de Boer OJ, de Jong R, et al. Mae trapiau allgellog neutrophil yn achosi rhwystr i'r llwybr anadlu yn ystod clefyd firws syncytaidd anadlol. J Pathol. 2016; 238:401-411. 12. Twaddell SH, Baines KJ, Grainge C, Gibson PG. Rôl newydd trapiau allgellog neutrophil mewn clefyd anadlol. Cist. 2019; 156:774-782.

13. Li K, Fang Y, Li W, et al. Gwerthusiad meintiol gweledol delwedd CT a dosbarthiad clinigol clefyd coronafeirws (COVID-19). Eur Radiol. 2020; 30:4407-4416.

14. Popovic B, Zannad F, Louis H, et al. Cynnydd a ysgogir gan endothelaidd mewn cynhyrchu thrombin plasma sy'n nodweddu ffenoteip hypercoagulable newydd mewn methiant acíwt y galon. Int J Cardiol. 2019; 274:195-201.

15. Uddin M, Watz H, Malmgren A, Pedersen F. Llid netopathig mewn clefyd rhwystrol cronig yr ysgyfaint ac asthma difrifol. Immunol blaen. 2019; 10:47.

16. Didangelos A. COVID-19 gorlid: beth am niwtroffiliau? mSffer. 2020; 5:e00367-e00420.

17. DeLong ER, DeLong DM, Clarke-Pearson DL. Cymharu'r ardaloedd o dan ddwy neu fwy o gromliniau nodwedd gweithredu derbynnydd cydberthynol: dull di-barametrig. Biometreg. 1988; 44:837-845. 18. Efron B, Tibhirani RJ. Cyflwyniad i'r bootstrap. Gwasg CRC 1994.

19. Nagelkerke NJD. Nodyn ar ddiffiniad cyffredinol o'r cyfernod penderfynu. Biometrika. 1991; 78:691-692.

20. Funchal GA, Jaeger N, Czepielewski RS, et al. Mae protein ymasiad firws syncytaidd anadlol yn hyrwyddo ffurfiant trap allgellog niwtroffil dibynnol TLR gan neutrophils dynol. PLoS Un. 2015;10:e0124082.

21. Pillai PS, Molony RD, Martinod K, et al. Mae Mx1 yn datgelu llwybrau cynhenid ​​i ymwrthedd gwrthfeirysol a chlefyd angheuol y ffliw. Gwyddoniaeth. 2016; 352:463-466.

22. Bendib I, de Chaisemartin L, Mekontso Dessap A, Chollet-Martin S, de Prost N. Deall rôl trapiau allgellog neutrophil mewn cleifion â niwmonia difrifol ac ARDS. Cist. 2019; 156:1278-1280.

23. Granger V, Faille D, Marani V, et al. Gall monocytau gwaed dynol ffurfio trapiau allgellog. J Leukoc Biol 2017; 102:775-781.

24. Kettritz R. Proteasau serine niwtral o niwtroffiliau. Imiwnol Parch. 2016; 273:232-248.

25. Lengas A, Poletti V, Pacifico L, di Domizio C, Patelli M, Spiga L. Llid acíwt ar yr ysgyfaint: neutrophil elastase yn erbyn niwtroffiliau yn y lavage broncoalfeolar - neutrophil elastase yn adlewyrchu dwyster llidiol gwell. Gofal Dwys Med. 1994;20:354-359.

26. Polverino E, Rosales-Maer E, Dale GE, Dembowsky K, Torres A. Rôl atalyddion neutrophil elastase mewn clefydau'r ysgyfaint. Cist. 2017; 152:249-262.

27. Korkmaz B, Moreau T, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3 a cathepsin G: priodweddau ffisiocemegol, gweithgaredd, a swyddogaethau ffisiopatholegol. Biochimie. 2008; 90:227-242.

28. Faurschou M, Borregaard N. gronynnau Neutrophil a fesiglau secretory mewn llid. Mae microbau'n heintio. 2003; 5:1317-1327.

29. Mae Papayanopoulos V, Metzler KD, Hakkim A, Zychlinsky A. Neutrophil elastase a myeloperoxidase yn rheoleiddio ffurfio trapiau allgellog neutrophil. J Cell Biol. 2010; 191:677-691.

30. Kolaczkowska E, Jenne CN, Surewaard BGJ, et al. Mecanweithiau moleciwlaidd o ffurfio a diraddio NET a ddatgelir gan ddelweddu mewnbythol ym masgwleiddiad yr afu. Cymmun Nat. 2015; 6: 6673.

31. Taylor S, Dirir O, Zamanian RT, Rabinovitch M, Thompson AAR. Rôl neutrophils a neutrophil elastase mewn gorbwysedd rhydwelïol pwlmonaidd. Blaen Med (Lausanne). 2018; 5:217.

32. Nakazawa D, Marschner JA, Platen L, Anders HJ. Trapiau allgellog mewn clefyd yr arennau. Arennau Int. 2018; 94:1087-1098.

33. Mae Doring Y, Libby P, Soehnlein O. Trapiau allgellog Neutrophil yn cymryd rhan mewn clefydau cardiofasgwlaidd: mewnwelediadau arbrofol a chlinigol diweddar. Circ Res. 2020; 126:1228-1241.

34. Efydd-da-Rocha E, Santos-Silva A. Atalyddion elastase neutrophil a chlefyd cronig yn yr arennau. Int J Biol Sci. 2018; 14:1343-1360.

35. Alam SR, Newby DE, Henriksen PA. Rôl yr atalydd elastase mewndarddol, elafin, mewn anaf cardiofasgwlaidd: o epitheliwm i endotheliwm. Biochem Pharmacol. 2012; 83:695-704.

36. Clancy DM, Henry CM, Meddyg Teulu Sullivan, Martin SJ. Gall trapiau allgellog neutrophil wasanaethu fel llwyfannau ar gyfer prosesu ac actifadu cytocinau teulu IL-1. FEBS J. 2017; 284:1712-1725.

37. Alfaidi M, Wilson H, Daigneault M, et al. Mae Neutrophil elastase yn hybu secretiad beta interleukin o endotheliwm coronaidd dynol. J Biol Chem. 2015; 290:24067-24078.

38. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3, a cathepsin G fel targedau therapiwtig mewn clefydau dynol. Pharmacol Rev. 2010;62:726-759.

39. Ackermann M, Verleden SE, Kuehnel M, et al. itis endothelaidd fasgwlaidd yr ysgyfaint, thrombosis, ac angiogenesis mewn Covid-19. N Engl J Med. 2020; 383:120-128.

40. Bikdeli B, Madhavan MV, Jimenez D, et al. COVID-19 a chlefyd thrombotig neu thromboembolig: goblygiadau ar gyfer atal, therapi gwrththrombotig, a dilyniant: adolygiad o'r radd flaenaf gan JACC. J Am Coll Cardiol. 2020; 75:2950-2973.

41. Driggin E, Madhavan MV, Bikdeli B, et al. Ystyriaethau cardiofasgwlaidd ar gyfer cleifion, gweithwyr gofal iechyd, a systemau iechyd yn ystod y pandemig COVID-19. J Am Coll Cardiol. 2020; 75:2352-2371.

42. Babapoor-Farrokhran S, Gill D, Walker J, Rasekhi RT, Bozorgnia B, Amanullah A. Anaf myocardaidd a COVID-19: mecanweithiau posibl. Gwyddor Bywyd. 2020; 253: 117723. 43. Doyen D, Moceri P, Ducreux D, Dellamonica J. Myocarditis mewn claf â COVID-19: achos troponin uwch a newidiadau ECG. Lancet. 2020; 395: 1516.

44. Renu K, Prasanna PL, Valsala GA. Pathogenesis coronafirws, cyd-forbidrwydd a difrod aml-organ - Adolygiad. Gwyddor Bywyd. 2020; 255: 117839. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2020.117839

45. Libby P. Y galon yn COVID-19: prif darged neu wyliwr eilaidd? Gwyddoniaeth Cyfieithu Sylfaenol JACC. 2020; 5(5):537-542.

46. ​​Cheng Y, Luo R, Wang K, et al. Mae clefyd yr arennau'n gysylltiedig â marwolaeth cleifion â COVID-19 yn yr ysbyty. Arennau Rhyngwladol. 2020. 97:829-838.

47. Oussalah A, Gleye S, Clerc Urmes I, et al. Mae defnydd hirdymor Atalydd ACE/ARB yn gysylltiedig â chamweithrediad arennol difrifol ac anaf acíwt i'r arennau mewn cleifion â COVID difrifol-19: canlyniadau o garfan canolfan atgyfeirio yng ngogledd-ddwyrain Ffrainc. Clin Infect Dis. 2020; 71(9):2447-2456.

48. Cheng Y, Luo R, Wang K, et al. Mae clefyd yr arennau'n gysylltiedig â marwolaeth cleifion â COVID-19 yn yr ysbyty. Arennau Int. 2020; 97:829-838.

49. Liu T, Zhang J, Yang Y, et al. Rôl interleukin-6 wrth fonitro achosion difrifol o glefyd coronafeirws 2019. EMBO Mol Med. 2020; 12: e12421.

50. Del Valle DM, Kim-Schulze S, Hsin-Hui H, et al. Mae llofnod cytocin ymfflamychol yn helpu i ragweld difrifoldeb a marwolaeth COVID-19. Nat Med. 2020;26:1636-1643.

51. Gao YD, Ding M, Dong X, et al. Ffactorau risg ar gyfer cleifion COVID-19 difrifol a difrifol: adolygiad. Alergedd. 2020; https://doi. org/10.1111/all.14657.

52. Akbari H, Tabrizi R, Lankarani KB, et al. Rôl proffil cytocin ac is-setiau lymffocyt yn nifrifoldeb clefyd coronafeirws 2019 (COVID{2}}): adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad. Gwyddor Bywyd. 2020; 258: 118167.

53. Roschewski M, Lionakis MS, Sharman YH, et al. Atal tyrosine kinase Bruton mewn cleifion â COVID-19 difrifol. Sci Immunol. 2020; 5(48):eabd0110.

54. Colafrancesco S, Alessandri C, Conti F, Priori R. COVID-19 wedi mynd yn ddrwg: cymeriad newydd yn sbectrwm y syndrom hyperferritinemia? Autoimmun Parch. 2020; 19:102573.

55. Takeshita H, Yasuda T, Nakajima T, Hosomi O, Nakashima Y, Kishi K. Llygoden deoxyribonuclease I (DNase I): nodweddu biocemegol ac imiwnolegol, strwythur cDNA a dosbarthiad meinwe. Biochem Mol Biol Int. 1997; 42:65-75.

56. Ueki M, Takeshita H, Fujihara J, et al. Mae'r alel Cawcasws-benodol mewn amryffurfiau niwcleotid sengl nad ydynt yn gyfystyr â'r genyn sy'n amgodio deoxyribonuclease I-like 3, a allai fod yn berthnasol i hunanimiwnedd, yn cynhyrchu ensym anactif. Clin Chim Acta. 2009; 407:20-24.

57. Ueki M, Kimura-Kataoka K, Takeshita H, et al. Gwerthusiad o'r holl polymorphisms niwcleotid sengl nonsynonymous (SNPs) yn y genynnau amgodio deoxyribonuclease dynol I ac I-debyg 3 fel PCE swyddogaethol a allai fod yn gysylltiedig ag awtoimiwnedd. Cylchgrawn FEBS. 2014; 281:376-390.

58. Keyel PA. DNA mewn iechyd ac afiechyd. Dev Biol. 2017; 429:1-11.

59. Jiménez-Alcázar M, Rangaswamy C, Panda R, et al. Mae DNases gwesteiwr yn atal cuddio fasgwlaidd gan faglau allgellog neutrophil. Gwyddoniaeth. 2017; 358:1202-1206.

60. Chen D, Yang XL, Shen ZB, et al. Arwyddocâd trap allgellog neutrophil a'i farcwyr yn y diagnosis cynnar o niwmonia a gafwyd yn y gymuned mewn plant. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2019;21:868-875.

61. Denning NL, Aziz M, Gurien SD, Wang P. DAMPs a NETs yn Sepsis. Immunol blaen. 2019; 10: 2536.

62. Chen L, Long X, Xu Q, et al. Mae lefelau serwm uwch o S100A8/ A9 a HMGB1 adeg derbyn i'r ysbyty yn cydberthyn â chanlyniadau clinigol israddol mewn-19 cleifion COVID. Cell Mol Immunol. 2020; 17:992-994.

63. Zitter JN, Maldjian P, Brimacombe M, Fennelly KP. Anadlu Dornase alfa (Pulmozyme) fel triniaeth anfewnwthiol o atelectasis mewn cleifion sydd wedi'u hawyru'n fecanyddol. J Gofal Crit. 2013; 28(218): e1-e7.

64. Pottecher J, Noll E, Borel M, et al. Protocol ar gyfer TRAUMADORASE: treial clinigol arfaethedig, ar hap, amlganolfan, dwbl-ddall, a reolir gan placebo o dornase alfa wedi'i aerosoleiddio i leihau nifer yr achosion o hypoxemia cymedrol-i-ddifrifol mewn cleifion trawma awyru. Treialon. 2020; 21: 274.

65. Fuchs TA, Jimenez-Alcazar M, Göbel J, Englert H.Engineered ensymau DNAse a defnydd mewn therapi. 2019.

GWYBODAETH GEFNOGOL

Gellir dod o hyd i wybodaeth ategol ychwanegol ar-lein yn yr adran Gwybodaeth Ategol.

Am fwy o wybodaeth: 1950477648@nn.gmail.com