Kv1.3 Mae Ataliad yn Gwanhau Niwro-fflamiad Trwy Amhariad Ar Arwyddion Calsiwm Microglial

ABSENOLDEB

Yn ystod y 5 mlynedd diwethaf dangoswyd bod atalyddion y sianel potasiwm KV1.3 yn lleihau niwro-llid mewn modelau cnofilod o strôc isgemig, clefyd Alzheimer, clefyd Parkinson, ac anaf trawmatig i'r ymennydd. Ar y lefel systemig, mae'r gweithredoedd buddiol hyn yn cael eu cyfryngu gan ostyngiad mewn actifadu microglia ac atal cynhyrchu cytocin pro-llidiol a nitrig ocsid.

Fodd bynnag, nid oedd y mecanweithiau moleciwlaidd ar gyfer gweithredu ataliol atalyddion KV1.3 ar swyddogaethau microglia pro-llidiol yn hysbys nes i'n grŵp ddangos yn ddiweddar bod sianeli KV1.3 nid yn unig yn rheoleiddio potensial pilen, fel y disgwylir gan sianel potasiwm â giatiau foltedd. , ond hefyd yn chwarae rhan hanfodol wrth alluogi microglia i wrthsefyll dadbolariadau a gynhyrchir gan y signal perygl ATP a thrwy hynny reoleiddio mewnlifiad calsiwm trwy dderbynyddion P2X4. Yma rydym yn adolygu rôl KV1.3 mewn signalau microglial ac yn dangos, yn yr un modd â'u rôl mewn celloedd T, bod sianeli KV1.3 hefyd yn rheoleiddio mewnlifiad calsiwm a weithredir yn y siop mewn microglia.

Mae sianel potasiwm KV1.3 yn sianel ïon a fynegir yn eang mewn celloedd imiwnedd, sy'n chwarae rhan bwysig wrth reoleiddio potensial cellbilen, mudo celloedd, a swyddogaeth celloedd imiwnedd. Mae ymchwil diweddar yn awgrymu y gallai cyfansoddion sy'n atal y sianel potasiwm KV1.3 helpu i hybu imiwnedd y corff.

Mae rheoleiddio'r system imiwnedd yn rhan bwysig o gynnal iechyd da. Fodd bynnag, mae llawer o afiechydon, megis clefydau hunanimiwn, canser, a chlefydau heintus, yn arwain at system imiwnedd gamweithredol. Felly, mae ymchwilwyr wedi bod yn chwilio am ffyrdd o hybu imiwnedd. Mae astudiaethau diweddar yn awgrymu y gallai atalyddion y sianel potasiwm KV1.3 fod yn opsiwn addawol.

Mewn celloedd imiwnedd, mae'r sianel potasiwm KV1.3 yn rheoleiddio potensial pilen, a thrwy hynny effeithio ar swyddogaeth celloedd. Canfu'r astudiaeth, trwy atal y sianel potasiwm KV1.3, ei bod yn bosibl lleihau mudo celloedd T a'u hatal ymhellach rhag ymosod ar gelloedd iach, a thrwy hynny amddiffyn y system imiwnedd rhag dinistr diangen.

Yn ogystal, mae rhai arbrofion wedi canfod y gall atal y sianel potasiwm KV1.3 hefyd hyrwyddo agweddau eraill ar y system imiwnedd. Er enghraifft, mae astudiaethau wedi dangos, trwy atal y sianel hon, y gellir gwella ansawdd a maint celloedd imiwnedd, a thrwy hynny gynyddu ymwrthedd y corff i bathogenau a bygythiadau allanol eraill. Felly, gall atal y sianel potasiwm KV1.3 fod yn ffordd effeithiol o wella imiwnedd.

I gloi, mae'r astudiaeth gyfredol yn awgrymu y gallai atal y sianel potasiwm KV1.3 fod yn ddull addawol o wella swyddogaeth y system imiwnedd a chynyddu imiwnedd cyffredinol y corff. Ond er bod y canfyddiadau hyn yn addawol, mae angen ymchwil pellach i bennu diogelwch ac ymarferoldeb defnyddio'r dull hwn. O'r safbwynt hwn, mae angen inni wella ein himiwnedd. Gall Cistanche wella imiwnedd yn sylweddol. Mae lludw cig yn cynnwys amrywiaeth o gynhwysion sy'n weithgar yn fiolegol, megis polysacaridau, dau fadarch, a Huang Li, a all ysgogi'r system imiwnedd. gwahanol fathau o gelloedd, gan gynyddu eu gweithgaredd imiwn.

Cliciwch ar fanteision iechyd cistanche

Rhagymadrodd

Disgrifiwyd y sianel potasiwm â giatiau foltedd KV1.3 yn wreiddiol mewn celloedd T [1] ac fe'i dilynwyd wedyn fel targed ar gyfer trin clefydau hunanimiwn cyfryngol celloedd T fel sglerosis ymledol, arthritis gwynegol, a soriasis [2-4]. Yn fwy diweddar mae KV1.3 wedi dod i'r amlwg fel targed ffarmacolegol deniadol ar gyfer lleihau'r hyn a elwir yn "niwroinflammation" trwy fodiwleiddio actifadu microglia. Mewn modelau llygoden a llygod mawr o strôc isgemig, mae atalwyr KV1.3 wedi cael eu dangos gennym ni ac eraill i leihau arwynebedd cnawdnychiant a gwella diffyg niwrolegol [5,6]. Mewn modelau llygoden trawsenynnol o glefyd Alzheimer gostyngodd blocâd KV1.3 y llwyth amyloid cerebral, gwell plastigrwydd niwronaidd hippocampal, a gwell diffygion ymddygiad [7].

Yn yr un modd, mewn modelau anifeiliaid lluosog o glefyd Parkinson roedd gweinyddu'r moleciwl bach KV1.3 atalydd PAP{2}} yn atal dirywiad niwronau dopaminergig a chanlyniadau ymddygiadol gwell [8]. Dangoswyd ymhellach bod ataliad KV1.3 neu ddileu genetig yn lleddfu patholeg mater gwyn ar ôl anaf trawmatig i'r ymennydd [9], dirywiad gwybyddol ar ôl llawdriniaeth [10], ac anaf i'r ymennydd a achosir gan ymbelydredd [11]. Ym mhob un o'r modelau anifeiliaid hyn o glefyd niwrolegol sylwyd ar fynegiant cynyddol KV1.3 ar ficroglia sy'n gysylltiedig â phatholeg ac arweiniodd triniaeth â rhwystrwyr KV1.3 at lai o actifadu microglia a llai o lefelau cytocinau llidiol yn ymennydd yr anifeiliaid.

Mae'n ymddangos bod y mynegiant KV1.3 cynyddol sy'n gysylltiedig â chlefydau yn trosi i fodau dynol gan fod mynegiant cryf KV 1.3 hefyd wedi'i ganfod mewn ymennydd dynol postmortem ar microglia mewn ardaloedd cnawdnychiant yn dilyn strôc isgemig [5,12], ar microglia o amgylch placiau amyloid mewn clefyd Alzheimer [ 7,13], ac ar microglia yn y cortecs rhagflaenol a substantia nigra mewn clefyd Parkinson [8]. Gyda'i gilydd, mae'r canfyddiadau calonogol hyn mewn modelau dynol ac anifeiliaid yn awgrymu'n gryf sianeli microglial KV1.3 fel targed therapiwtig ar gyfer lleihau ymatebion llidiol niweidiol yn yr ymennydd. Ond sut mae atalyddion KV1.3 yn gweithio? Sut mae blocio sianel potasiwm wedi'i gatio â foltedd mewn microglia, ac yn ôl pob tebyg hefyd macroffagau sy'n ymdreiddio i'r ymennydd sy'n deillio o monocyt yn lleihau cynhyrchiad cytocin llidiol a niwed i feinwe trwy gyfrwng llid?

Effeithiau rhwystrwyr KV1.3 ar swyddogaeth microglia

Dangoswyd bod llygod newyddenedigol diwylliedig a microglia llygod mawr, yn ogystal â microglia hynod ynysig o ymennydd llygoden neu feinwe wedi'i argraffu microglia o ymennydd llygod mawr, yn mynegi ceryntau KV1.3 trwy glamp clwt cell gyfan sy'n cynyddu'n sylweddol yn dilyn ysgogiad in vitro neu in vivo pigiad mewncerebrofentriglaidd gyda'r TLR-4 ligand lipopolysaccharide (LPS) [14-18]. Defnyddir ysgogiad gyda'r elfen wal gell gram-negyddol LPS yn eang i gymell cyflwr "tebyg i M1" glasurol" o microglia sy'n efelychu llid cyffredinol a fyddai'n gysylltiedig â haint bacteriol [19,20]. Ym maes niwroimiwnoleg, yn ddelfrydol, dylid galw microglia a ysgogwyd gan LPS yn microglia M(LPS) yn seiliedig ar yr ysgogiad a ddefnyddir i gymell polareiddio er mwyn osgoi defnyddio terminoleg M1/M2, a ystyrir yn orsyml [21], ond a ddefnyddir yn eang oherwydd ei therapi therapiwtig. atyniad.

Yn dilyn ysgogiad gyda LPS gellir arsylwi mynegiant KV1.3 cynyddol ar y lefel mRNA a lefel y protein trwy blotio Gorllewinol, imiwn-histocemeg, a dwysedd cerrynt cynyddol wedi'i fesur gan glamp clwt cell gyfan [15-18]. Mae cynnydd tebyg, ond ychydig yn llai dwys mewn mynegiant Kv1.3 yn digwydd pan fydd microglia newyddenedigol diwylliedig yn cael ei ysgogi ag amyloid oligomeric- (AO) neu -synuclein [7,8], dau brotein sy'n cael eu cam-blygu a'u hagregu mewn clefyd Alzheimer neu Parkinson, a a ddefnyddir yn aml i greu model in vitro o ymatebion microglia sy'n gysylltiedig â'r clefyd priodol.

Yn y mathau hyn o systemau in vitro mae ataliad KV1.3 neu ddileu genetig yn lleihau mynegiant a chynhyrchiad cyfryngwyr llidiol lluosog a fesurir ar 24- neu 48-oriau ar ôl actifadu microglia. Tua 20 mlynedd yn ôl adroddodd labordy Lyanne Schlichter fod atalyddion KV1.3 yn atal byrst anadlol a ysgogir gan ester phorbol [22] a DIM cynhyrchiad mewn microglia llygod mawr newyddenedigol diwylliedig, gan leihau lladd niwronau microglia mewn system diwylliant trawswell [16].

Mewn astudiaeth fwy diweddar o'n labordy [17], a gymharodd effeithiau atalyddion KV1.3 a KCa3.1 â'r atalydd microglia a ddefnyddir yn eang minocycline ar microglia llygoden newyddenedigol polareiddio gwahaniaethol, gwelsom fod ataliad Kv1.3 yn lleihau mynegiant a chynhyrchiad o'r cytocinau pro-llidiol IL-1 a TNF- yn 24 a 28 awr ac yn atal dadreoleiddio'r ensymau cysylltiedig â llid cyclooxygenase2 (COX-2) a synthase nitrig ocsid anwythol (iNOS). Mae'n debyg mai'r effaith olaf oedd yn gyfrifol am y cynhyrchiad NO llai a welwyd mewn microglia a gafodd ei drin ag atalyddion KV1.3 ar 24 a 48 awr ar ôl ysgogiad LPS. Yn debyg i'r gwaith cynharach, gwelsom hefyd fod atalyddion KV1.3 yn atal lladd niwronau microglia mewn diwylliannau tafelli hippocampal organotypic 3 diwrnod ar ôl i microglia gael ei actifadu naill ai trwy 1-awr o hypocsia/glycemia i efelychu strôc isgemig [5] neu trwy driniaeth ag amyloid oligomeric- i efelychu actifadu microglia yn AD [7].

Yn ogystal â lleihau actifadu microglia a achosir gan AO, ffenomen y gellir ei dangos yn glir trwy staenio microglia ar gyfer CD11b neu Iba-1 a gwerthuso dwyster fflworoleuedd, canfuwyd hefyd bod yr atalydd KV1.3 PAP{4}} yn atal Nam o nerth hirdymor (LPT) a achosir gan O, a ysgogwyd gan ficroglia (LPT) mewn sleisys hippocampal ac i leihau cynhyrchiad A ysgogwyd gan O o IL-1 , TNF- a NO mewn microglia llygoden diwylliedig [7], tebyg iawn i'r hyn a ddarganfuwyd ar gyfer atalyddion KV1.3 gyda microglia wedi'i ysgogi gan LPS [17,18]. Mewn arbrofion lle ysgogwyd microglia llygoden newyddenedigol diwylliedig o lygod gwyllt a KV1.3 -/- gyda chyfanred -synuclein (SynAgg), sy'n actifadu microglia trwy rwymo i'r derbynyddion adnabod patrwm TLR2 a CD36 [23], y ddau ffarmacolegol KV1. Arweiniodd ataliad gyda PAP-1 a dileu genetig o'r sianel at lai o IL-1 , IL-6, IL-12 a TNF- cynhyrchu ac atalwyd dadreoleiddiad protein llidus NLRP3 yn 24 oed oriau ar ôl ysgogiad microglia [8]. I'r gwrthwyneb, cynyddodd gorfynegiant KV 1.3 mewn llinell gell microglial fynegiant SynAgginduced neu secretion IL-1 , TNF- , IL-6, ac IL-12 ar 24 awr ar ôl symbyliad [8].

Cadarnhaodd astudiaethau amrywiol gan grwpiau eraill fod atalwyr KV1.3 yn lleihau swyddogaethau microglia pro-llidiol wrth ddefnyddio ysgogiadau neu ysgogiadau tebyg sy'n gysylltiedig â phatholegau llidiol eraill. Er enghraifft, mewn microglia llygod mawr diwylliedig a weithredwyd gyda phrotein HIV Tat neu gyda glycoprotein 120 (gp120) i efelychu HIV1-anhwylder niwrowybyddol cysylltiedig, canfuwyd bod ataliad KV1.3 neu ddymchwel â siRNA yn lleihau IL-1 , TNF- , a DIM cynhyrchu a niwrowenwyndra wedi'i atal [24,25]. Gan ddefnyddio model o strôc isgemig ac amddifadedd ocsigen/glwcos o ficroglia diwylliedig Ma et al. adroddodd bod ataliad KV1.3 wedi symud y ffenoteip microglial o ymateb tebyg i M pro-inflammatory i ymateb tebyg i M a llai o actifadu inflammasome NLRP3 [5,6], yn debyg i'r astudiaethau a ddisgrifir uchod mewn modelau o glefyd Parkinson [8].

Gan ddefnyddio celloedd CD11b plws sydd wedi'u hynysu'n ffres, sy'n cynnwys macroffagau sy'n ymdreiddio i CNS a microglia preswyl yr ymennydd o ymennydd llygod a gafodd eu trin yn systematig â LPS ym mhresenoldeb ac absenoldeb y peptid blocio KV1.3 ShK-223, Rangaraju et al. cadarnhawyd bod ataliad KV 1.3 yn lleihau mynegiant cytocinau llidiol fel IL-1 ond dangosodd fod ataliad KV1.3 hefyd yn lleihau mynegiant TAP1 ac yn atal upregulation EHD1 yn CD11b ynghyd â microglia CD45low fel y'i mesurir gan cytometreg llif [26]. Mae TAP1 ac EDH1 yn broteinau sy'n ymwneud â chydosod dosbarth-I MHC a masnachu mewn pobl i wyneb y gell. Felly ymchwiliodd yr awduron nesaf i effaith triniaeth ShK ar fynegiant dosbarth MHC ar ficroglia ynysig acíwt, ac, yn seiliedig ar fynegiant MHC llai, damcaniaethwyd bod cynnydd a achosir gan LPS yng nghapasiti cyflwyno antigenau prosesau dibynnol KV 1 yw microglia, sy'n awgrymu y gallai ataliad KV1.3 leihau cyflwyniad antigen i CD8 ynghyd â chelloedd T sytotocsig.

Mewn dadansoddiad rhwydwaith cydfynegiant pwysol dilynol a gymhwyswyd i setiau data trawsgrifomig microglial o fodelau llygoden clefyd niwrolidiol a niwroddirywiol, nododd yr un grŵp KV1.3 fel rhan o lofnod genyn proinflammatory a oedd hefyd yn cynnwys Tlr2, Ptgs2, Il12b, Il1b, CD44, NFκB, Stat1, a RelA [27]. Gallai rhwystr KV1.3 gyda ShK-223 symud y llofnod pro-llidiol hwn i un gyda mynegiant cynyddol o enynnau gwrthlidiol mewn microglia sy'n gysylltiedig â chlefydau. Yr hyn sy'n ddiddorol yn y cyd-destun hwn, yw bod atalyddion Kv1.3 wedi'u hadrodd mewn astudiaethau eraill i gynyddu ymhellach ymfudiad microglia diwylliedig a ysgogwyd gyda'r cytocinau gwrthlidiol IL-4 ac IL-10 [28] ac i beidio ag effeithio ar ffagocytosis microglial o ficrogleiniau [26] neu hyd yn oed gynyddu ffagocytosis amyloid- [7].

Gyda'i gilydd, mae digon o dystiolaeth felly bod microglia yn mynegi KV1.3 a bod atalwyr KV1.3 yn atal swyddogaethau microglia pro-llidiol, niwrowenwynig ac y gallent hyd yn oed symud microglia tuag at ffenoteip mwy niwro-amddiffynnol. Yma buom yn canolbwyntio’n bennaf ar grynhoi data a gafwyd gyda diwylliannau microglial diwylliedig neu sleisys oherwydd, yn y systemau lleihaol hyn, nid oes amheuaeth bod cnocio, dymchwel, neu rwystr ffarmacolegol yn cael ei effaith yn uniongyrchol trwy atal sianeli microglial KV1.3 ac nid yn anuniongyrchol trwy effeithio. Sianeli KV1.3 mewn celloedd T, celloedd B, celloedd dendritig neu monocytes, sydd i gyd yn mynegi KV1.3 [29], ac a allai felly gyfrannu at effeithiau in vivo atalyddion KV1.3 neu ganfyddiadau a wneir gyda KV1.3 -/- llygod. Fodd bynnag, hoffem nodi yma, yn ogystal ag astudiaethau niferus sy'n dangos mynegiant KV1.3 ar ficroglia mewn cnofilod a bodau dynol trwy imiwn-histochemistry, mae labordy Kettenmann a'n grŵp ni wedi dangos dro ar ôl tro nad yw mynegiant KV1.3 cynyddol ar ficroglia wedi'i actifadu yn unig. ffenomen meithrin meinwe ac y gellir cofnodi ceryntau Kv1.3 o ficroglia mewn sleisys acíwt [30,31] ac o ficroglia hynod ynysig o ymennydd llygod 5xFAD [7] neu o'r ardal gnawdnychiant ar ôl achludiad rhydweli ymennydd canol [5, 12], model ar gyfer strôc isgemig.

Llwybrau signalau yr effeithir arnynt gan ataliad KV1.3 neu fodiwleiddio mynegiant Kv1.3

Mae astudiaethau sy'n ymchwilio i lwybrau signalau (Ffigur 1) y mae atalwyr KV1.3 yn effeithio arnynt i gynhyrchu'r gostyngiadau buddiol hyn mewn swyddogaethau microglia pro-llidiol 24 neu 48 awr yn ddiweddarach wedi arwain at ganlyniadau anghyson braidd, sy'n awgrymu bod effeithiau atalyddion KV1.3 yn ddibynnol ar yr ysgogiad ac efallai y rhywogaeth. Tra bod Fordyce et al. adrodd nad yw atalyddion KV1.3 yn effeithio ar ffosfforyleiddiad p38MAPK mewn microglia llygod mawr newydd-anedig a driniwyd gan LPS [16], mae nifer o astudiaethau eraill sy'n defnyddio microglia llygoden wedi canfod bod atalwyr KV1.3 yn lleihau ffosfforyleiddiad p38MAPK yn gryf yn ogystal ag actifadu NF-κB yn dilyn ysgogiad gyda LPS, AO, SynAgg neu HIV-1 glycoprotein 120 [7,8,24]. Yn y llinell gell microglial, dangoswyd bod BV2 KV1.3 hefyd yn rheoleiddio ffosfforyleiddiad S727 o STAT1 [26]. Yn ddiddorol, p'un a yw rhwystrwyr KV1.3 yn atal trawsleoli NFAT, nid yw un o'r effeithiau a astudiwyd orau o atalyddion KV1.3 mewn celloedd T [2,32,33] wedi'i ymchwilio mewn microglia hyd yn hyn.

Mae'n ymddangos bod y cynnydd mewn mynegiant KV1.3 yn dilyn ysgogi microglia gyda LPS, AO neu SynAgg yn cynnwys llawer o'r un rhaeadrau signalau sy'n cael eu heffeithio gan ataliad KV1.3, ac mae atalyddion KV1.3 fel arfer yn atal cynnydd mewn mynegiant Kv1.3. Mae'r hyrwyddwr KV1.3 yn cynnwys safleoedd rhwymo NF-κB a SP1 lluosog ac atalyddion NF-κB neu p38MAPK yn annibynnol yn lleihau uwch-reoleiddio Kv1.3 a ysgogwyd gan SynAgg mewn microglia [8], gan ddangos bod y p38MAPK a'r llwybrau NF-κB clasurol cyfryngu rheoliad trawsgrifiadol KV1.3 (Ffigur 1). Mae'r teulu Src kinase Fyn yn gweithio i fyny'r afon o'r ffactor trawsgrifio NF-κB trwy reoleiddio trawsleoli niwclear ei gydran p65 [34] a thrwy ffosfforyleiddio'r isoform PKC PKCδ. Mae Sarkar et al. adrodd bod cnocio Fyn yn lleihau'r cynnydd a achosir gan LPS a SynAgg mewn dwysedd cerrynt KV1.3 mewn microglia diwylliedig, effaith y gellir ei dynwared trwy drin microglia ag atalydd Fyn saracatinib neu drwy ddiffyg ar gyfer PKCδ, sy'n awgrymu bod signalau kinase Fyn/PKCδ rhaeadru yn ymwneud â chyfryngu upregulation KV1.3 mewn ymateb i ysgogiadau llidiol [8]. Fel y dangoswyd mewn assay ligation agosrwydd Duolink, mae Fyn yn rhyngweithio'n uniongyrchol â Kv1.3 ac mae'n ffosfforyleiddio'r sianel yn Y135 i gynyddu ei weithgaredd.

Mae Kv1.3 yn rheoleiddio potensial pilen ac yn gwrthsefyll dadbolaru'

Er gwaethaf yr effeithiau lliniaru sydd wedi'u dogfennu'n dda uchod o atalyddion KV1.3 ar niwro-llid in vivo ac ar raeadrau signalau microglial a mynegiant cyfryngwr llidiol a secretion in vitro, roedd y mecanweithiau moleciwlaidd sylfaenol o sut mae atalyddion KV1.3 yn effeithio ar swyddogaethau microglial yn aneglur ers amser maith. Roedd llawer o ymchwilwyr, gan gynnwys ein labordy, yn cymryd yn ganiataol bod KV1.3 yn gwasanaethu'r un swyddogaeth mewn microglia ag yr oedd yn ei gyflawni mewn celloedd T, sef rheoleiddio potensial pilen a mewnlifiad calsiwm [29,32,33].

Mewn celloedd T, mae ataliad KV1.3 yn arwain at ddadbolariad pilen ac yn lleihau mewnlifiad calsiwm trwy sianeli calsiwm sy'n cael eu rhyddhau o galsiwm (CRAC) yn dilyn ysgogiad derbynnydd celloedd T [33,35,36]. Mae angen mewnlifiad calsiwm trwy sianeli CRAC ar gyfer dadffosfforyleiddiad a thrawsleoli niwclear dilynol y ffactor trawsgrifio sy'n ddibynnol ar galsiwm / calmodwlin NFAT [29], sy'n sbarduno trawsgrifio'r cytocin IL-2 [29,33]. Mae IL-2 yn cael ei ryddhau o gelloedd T wedi'i actifadu ar synthesis ac yn ysgogi ehangiad clonal celloedd T mewn modd awtocrin a pharacrin. Trwy atal yr alllif potasiwm gwrthbwyso sy'n angenrheidiol i gynnal mewnlifiad calsiwm trwy sianeli CRAC, mae atalwyr KV1.3 yn amharu ar actifadu celloedd T, yn atal dadffosfforyleiddiad NFAT a thrawsleoli niwclear [32] gan arwain at lai o amlhau celloedd T a llai o gynhyrchu cytocinau llidiol a secretiad o 48 awr. [5,33,35,36].

Fodd bynnag, nid oedd erioed wedi'i brofi mewn microglia, sydd yn wahanol i gelloedd T hefyd yn mynegi'r unionydd mewnol Kir2.1 [17,37,38] a'r sianel potasiwm dwy-mandwll THIK-1 (K2P 13.1) [39], a fyddai atalyddion KV1.3 yn cael yr un effeithiau moleciwlaidd neu pe bai rôl KV1.3 yn cael ei chymryd drosodd gan y sianeli potasiwm eraill hyn. Mewn astudiaeth ddiweddar, aeth ein grŵp i'r afael â'r cwestiwn hwn yn unol â hynny trwy ail-edrych yn gyntaf ar arwyddocâd sylfaenol KV1.3 wrth gynnal potensial y bilen gorffwys a gwrthsefyll dadbolariad [40]. Yn ôl y disgwyl, gostyngodd gorfynegiant o KV1.3 mewn celloedd CHO botensial pilen orffwys dadbolaredig nodweddiadol y celloedd hyn o −20 mV i −50 mV, tra bod ataliad KV1.3 â microglia dadbolaredig ShK-223, sydd yn ei hanfod yn cynnal a mwy o botensial bilen gorffwys hyperpolaredig, a oedd yn ein dwylo ni ar gyfartaledd tua −90 mV mewn microglia diwahaniaeth yn mynegi Kir2.1 yn bennaf ac o gwmpas −65 mV mewn microglia a ysgogwyd gan LPS yn mynegi dwyseddau cyfredol KV1.3 uwch a Kir2.1 is [40].

Er bod KV1.3 felly yn sicr yn cyfrannu at reoleiddio potensial bilen gorffwys mewn microglia (Ffigur 2), credwn mai ei rôl bwysicach, a'r rheswm pam y mae mynegiant Kv1.3 yn cynyddu mewn microglia wedi'i actifadu, yw gallu'r sianel i wrthbwyso eithafol a hirfaith. dadbolaru pilen a all o bosibl effeithio'n negyddol ar iechyd a ffisioleg microglial fel y datgelwyd gan arbrofion chwistrellu cyfredol. Er nad yw pigiadau cyfredol o 25 pA yn gallu dadbolaru KV 1.3 gan fynegi microglia y tu hwnt i −30 mV yn absenoldeb atalyddion, mae microglia sydd wedi'i drin ymlaen llaw gyda rhwystrwyr KV 1.3 yn dadbolaru i botensial plws 50 mV mewn ymateb i'r un pigiadau cerrynt 25 pA [40] , gan awgrymu y gall KV1.3 "clamp" potensial bilen yn agos at botensial trothwy activation y sianel i atal dadbolariadau pilen gormodol (Ffigur 2).

Y sefyllfa mewn ffisioleg microglial lle mae'r gallu hwn yn bwysig yw pan fydd microglia yn agored i ATP allgellog, signal perygl a all gyrraedd crynodiadau yn yr ystod micromolar uchel oherwydd rhyddhau ATP cytosolig o niwronau sydd wedi'u difrodi neu ATP sy'n cynnwys fesiglau synaptig [41], sy'n actifadu sianeli derbynnydd P2X sy'n arwain at ddadbolariadau dwys [42]. Yn ein dwylo ni ein hunain, dangosodd arbrofion clamp cyfredol a gynhaliwyd ar ficroglia diwahaniaeth a ysgogwyd gan LPS fod amlygiad acíwt i 100 μM ATP, sydd allan o'r derbynyddion P2X a fynegir mewn microglia yn actifadu P2X4 yn bennaf, yn arwain at ddadbolariadau mwy amlwg mewn microglia diwahaniaeth, er gwaethaf eu mwy. potensial y bilen gorffwys hyperpolaredig nag yn y microglia KV1.3high wedi'i ysgogi gan LPS, nad oedd yn dadbolaru uwchlaw −40 mV. Roedd rhwystrwyr KV1.3 yn amharu ar y gallu hwn i wrthsefyll dadbolariadau a achosir gan ATP a microglia wedi'i ddadbolaru yn eu presenoldeb [40].

Mae KV1.3 yn modiwleiddio mewnlifiad calsiwm wedi'i gyfryngu gan dderbynyddion P2X4 mewn microglia

Datgelodd arbrofion delweddu calsiwm fod y gallu hwn o sianeli KV1.3 i wrthsefyll dadbolariadau cyfryngol P2X a achosir gan ATP yn gwella mynediad Ca2 ynghyd â microglia trwy dderbynyddion P2X4 wedi'i ysgogi â 100 μM o ATP [40]. Er enghraifft, gwelsom fod y rhwystrwyr KV1.3 ShK-223 a PAP-1 wedi lleihau mewnlifiad Ca2 a achosir gan ATP ynghyd â mewnlifiad trwy dderbynyddion P2X4 mewn microglia gwahaniaethol LPS sy'n mynegi dwyseddau cyfredol KV1.3 uchel, llawer mwy yn gryf nag mewn microglia heb ei symbylu er bod ysgogiad LPS yn is-reoleiddio mynegiant derbynnydd P2X4 mewn microglia diwylliedig. Mewn cyferbyniad, ni chafodd gwarchae KV1.3 unrhyw effaith ar drosglwyddiadau calsiwm a achosir gan ATP mewn microglia a ysgogwyd gan IL-4, sy'n mynegi lefelau isel iawn o KV1.3. Yn ddiddorol, er bod LPS hefyd yn cynyddu KV1.3 ac yn lleihau mynegiant P2X4 ar microglia in vivo, mae mynegiant KV1.3 a P2X4 yn cynyddu ochr yn ochr â gosod strôc isgemig fel y dangosir gan ein labordy ar ficroglia ynysig acíwt o hemisffer ymennydd cnawdnychedig llygod. yn destun strôc isgemig a chan grwpiau eraill ar ficroglia cnofilod a dynol trwy imiwn-histocemeg neu qPCR [5,12,43-46]. Mae hyn yn awgrymu y gallai KV1.3, yn dilyn strôc isgemig, fod yn rheoleiddio'r signalau calsiwm microglial purinergig mwy cymhleth a gychwynnir gan y signal perygl ATP yn gryfach nag in vitro. Mae ATP a malurion niwronaidd eraill yn ardal gnawdnychiant yr ymennydd yn actifadu microglia, sydd wedyn yn cynhyrchu ac yn rhyddhau mwy o gyfryngwyr llidiol yn barhaus o fewn 24 i 72 awr ac felly'n niweidio a lladd mwy o niwronau yn y penumbra gan arwain at ehangiad ymfflamychol o'r cnawdnychiant.

Mae'n debyg bod y mynegiant KV1.3 cynyddol a welir ar ficroglia yn y ffin cnawdnychiant o fewn 2-5 diwrnod [5] yn galluogi microglia actifedig i gynnal signalau calsiwm cryfach trwy'r nifer cynyddol o dderbynyddion P2X4 ac felly i gynhyrchu mwy o gyfryngwyr llidiol, gan niweidio mwy o niwronau. ac ysgogi mwy o ficroglia. Byddai'r ddamcaniaeth hon yn unol â'r canfyddiad bod y PAP atalydd KV1.3-1 wedi lleihau actifadu microglia a lefelau ymennydd IL-1 ac IFN- , gan arwain at tua 40 y cant o ardaloedd cnawdnychiant llai a gwell diffyg niwrolegol sgoriau mewn modelau llygoden a llygod mawr o strôc isgemig [5]. Trwy ddadbolaru atalyddion microglia Kv1.3, mae'n lleihau mewnlifiad calsiwm trwy dderbynyddion P2X4 a ysgogwyd gan ATP a ryddhawyd o niwronau sydd wedi'u difrodi ac felly'n lleddfu gweithrediad llidus NLRP3, NF-κB a ffactorau trawsgrifio eraill sy'n ddibynnol ar galsiwm ymhellach sy'n arwain at lai o gynhyrchiad cyfryngwr llidiol (Ffigur 1) a patholeg llai.

Pa lwybrau mewnlifiad calsiwm eraill mewn microglia sy'n cael eu rheoleiddio gan KV1.3?

Er bod gwarchae KV1.3 yn amlwg yn lleihau mewnlifiad calsiwm a achosir gan ATP trwy dderbynyddion P2X4 [40] ac felly'n rheolydd pwysig o'r llwybr mewnlifiad calsiwm hwn mewn microglia (Ffigur 2), nid dyma'r unig signalau calsiwm sy'n ddibynnol ar KV1.3 neu ATP proses mewn microglia. Yn ogystal â sianeli derbynyddion P2X mae microglia hefyd yn mynegi derbynyddion purinergig metabotropig P2Y a all, yn dilyn actifadu gan ATP neu UTP, achosi rhyddhau calsiwm o storfeydd mewnol [47] ac actifadu Ca2 plus entry (SOCE) a weithredir yn y siop ar ôl disbyddu'r storfeydd calsiwm mewngellol cymharol fach. mewn microglia [38]. Felly, mae'n sicr yn bosibl bod SOCE ychwanegol wedi cyfrannu at y signalau Ca2 plus a ysgogwyd gan ATP yr oeddem wedi'u delweddu a bod rhai o effeithiau atalydd KV1.3 wedi'u cyfryngu trwy leihau SOCE yn ychwanegol.

Mae hon yn ddamcaniaeth debygol iawn gan mai'r mecanwaith moleciwlaidd "clasurol" ar gyfer atalyddion KV1.3 mewn celloedd T yw lleihau SOCE trwy sianeli CRAC yn dilyn actifadu derbynnydd celloedd T ac wedi hynny lleihau actifadu ffactor trawsgrifio a chynhyrchu a rhyddhau cytocin [29,33, 36,48]. Adroddwyd dro ar ôl tro bod microglia llygod mawr a llygoden yn arddangos ceryntau â phriodweddau bioffisegol sy'n nodweddiadol ar gyfer ceryntau CRAC [49,50] ac i fynegi cydrannau moleciwlaidd sianeli CRAC, Orai, a STIM [51,52]. Mae tystiolaeth bellach bod dileu genetig o Orai1, STIM1, a STIM2 yn lleihau cerrynt CRAC a/neu SOCE ac yn atal mudo a ffagocytosis mewn microglia llygoden diwylliedig [52], tra bod gan y rhwystrwr sianel CRAC moleciwl bach CM-EX-137 adroddwyd yn ddiweddar ei fod yn lleihau actifadu microglia a maint briwiau mewn model llygoden o anaf trawmatig i'r ymennydd [53].

Mae rhwystr o sianeli KV1.3 yn gwanhau mynediad calsiwm a weithredir yn y siop mewn microglia a ysgogir gan LPS

Fel arbrawf dilynol i'n papur blaenorol ar rôl KV1.3 wrth reoleiddio mewnlifiad calsiwm cyfryngol P2X4, fe wnaethom yma ofyn yn benodol a fyddai'r atalydd KV1.3 ShK{7}} hefyd yn lleihau SOCE mewn microglia gwahaniaethol LPS , yr un cyflwr ysgogi, lle'r oeddem wedi arsylwi ar y dwyseddau presennol KV1.3 uchaf ac effeithiau mwyaf ataliad KV1.3 ar signalau calsiwm a achosir gan ATP [40]. Gan ddefnyddio'r dangosydd calsiwm cymesurol Fura-2 i olrhain newidiadau yn y crynodiad calsiwm mewngellol rhad ac am ddim ([Ca2 plws ]i) canfuom fod gan microglia gwahaniaethol LPS grynodiad calsiwm cytosolig gorffwys [Ca2 plws ] I a oedd yn amrywio rhwng 60 nM a 370 nM, cyfartaledd o 150 ± 8.8 nM (n=50; Ffigur 3a,c,g), sy'n gyson ag adroddiad blaenorol [54]. Er mwyn cael SOCE, disbyddwyd storfeydd calsiwm mewngellol am y tro cyntaf gyda thapsigargin (Tg), atalydd y reticwlwm endoplasmig Ca2 plws -ATPase, wedi'i gymhwyso mewn toddiant bath heb ei enw Ca2 plus.

Removal of extracellular calcium produced a roughly 25 nM decrease in [Ca2+] I (Figure 3a) indicating the presence of a calcium influx at rest. Subsequent application of Tg (1 μM) elicited small amplitude (>25 nM) drychiadau asyncronaidd yn [Ca2 plus ] I oherwydd symud calsiwm goddefol o siopau. Arweiniodd ail-ddyodiad calsiwm i'r hydoddiant bath at godiad cyflym yn [Ca2 plus ] I uwchlaw'r lefelau gorffwys a achosir gan SOCE. Roedd maint y trosglwyddiadau SOCE a achosir [Ca2 plws ] I ("SOCE brig") wedi'i fesur fel y gwahaniaeth rhwng lefel [Ca2 plus ] I yn y toddiant bath rhydd o Ca2 plws a'r drychiad uchaf [Ca2 plus ] I yn dilyn aildiad calsiwm yn amrywio yn arwyddocaol ymhlith celloedd unigol gyda dosbarthiad SOCE brig yn dangos uchafswm o 120 nM a chynffon hyd at 1800 nM (Ffigur 1b). Mae'r heterogenedd hwn yng nghryfder SOCE yn debygol o gael ei achosi gan amrywiadau mewn potensial pilen orffwys, sy'n darparu'r grym ar gyfer mynediad calsiwm yn ystod SOCE. Canfuwyd bod potensial bilen gorffwys microglia â gwahaniaeth LPS yn amrywio rhwng −90 mV a −40 mV mewn celloedd unigol [40,55] ac felly gallai gyfrif am y gwahaniaethau a welwyd yn SOCE.

Nododd astudiaeth flaenorol fod drychiad mewn gorffwys [Ca2 plus ] I yn gysylltiedig â gallu llai o ysgogiadau allanol fel yr agonist derbynnydd P2Y UTP neu ategu ffactor 5a i ganfod [Ca2 plus ] I dros dro mewn microglia wedi'i actifadu gan LPS [54]. Oherwydd yn ein hastudiaeth roedd lefelau gorffwys [Ca2 plws ]i a gwerthoedd SOCE brig yn amrywio ymhlith celloedd unigol, fe wnaethom archwilio a allai amrywiad mewn gorffwys [Ca2 plus ]i gyfrif am heterogeneity mewn gwerthoedd SOCE brig. Wrth blotio gwerthoedd SOCE brig yn erbyn gorffwys [Ca2 plws ] I, datgelwyd cydberthynas gadarnhaol rhwng SOCE brig a gorffwys [Ca2 plws ] I (Ffigur 3c). Pan rannwyd y data yn ddau grŵp gyda gwerth torbwynt o 600 nM ar gyfer SOCE brig, roedd y berthynas rhwng gorffwys [Ca2 plus ] I a SOCE brig ym mhob grŵp yn gryfach nag yn y boblogaeth gyfan, gan nodi presenoldeb o leiaf dwy gell. poblogaethau, sy'n amrywio o ran maint SOCE a chryfder y cydberthynas rhwng gorffwys [Ca2 plws ] I a SOCE brig. Felly, o fewn y boblogaeth o gelloedd a drinnir gan LPS, nid yw drychiad mewn gorffwys [Ca2 plus ]i yn gysylltiedig yn achosol â gallu llai microglia wedi'i actifadu i ymateb i ysgogiadau allanol gyda [Ca 2 plws] I dros dro, fel yr awgrymwyd yn flaenorol gan Hoffman et al. Mae ein data yn awgrymu y gallai dylanwad cyffredin, megis lefel potensial pilen, a reolir gan amrywiaeth o sianeli, gan gynnwys KV1.3, Kir2.1, a THIK-1, fod yn gyfrifol am y gydberthynas gadarnhaol rhwng gorffwys [Ca2 plus ] I ac uchafbwynt SOCE a arsylwyd yn ein hastudiaeth. Er enghraifft, gallai gorfynegiant neu uwchreoleiddio swyddogaethol sianeli hyperpolareiddio or-begynu'r bilen a chynyddu'r grym gyrru ar gyfer mynediad calsiwm trwy sianeli calsiwm-athraidd sy'n weithredol yn gyfansoddiadol fel sianeli potensial derbynnydd dros dro a weithredir yn fetabolaidd (TRP) a sianeli a weithredir yn y storfa ar ôl disbyddu'r storfa. megis sianeli CRAC.

Pre-incubation of cells with the KV1.3 inhibitor ShK-223 did not significantly affect resting [Ca2+] I (Figure 3d,g), but eliminated peak SOCE responses larger than 300 nM and shifted the maximum of the distribution of peak SOCE values from 130 nM (Figure 3b, control) to 70 nM (Figure 3e, ShK223). The difference between the values of peak SOCE in control cells and cells preincubated with ShK-223 was significant (Figure 3h). The relationship between resting [Ca2+] I and peak SOCE still displayed a mild positive correlation (figure 3f). Taken together, our data indicate that similarly to T lymphocytes, blockade of KV1.3 channels significantly reduces SOCE in LPS differentiated microglia. The extent of the inhibition varied among cells with a greater effect on cells expressing large magnitude (>300 nM) SOCE. Mae nodweddion penodol y celloedd â SOCE brig uchel ac isel i'w pennu o hyd.

O dan amodau ffisiolegol, gellir ysgogi SOCE wedi hynny i storio disbyddiad ar ôl actifadu derbynyddion P2Y cypledig â phrotein G ac mae'n cyfrannu at y drychiad cyfun [Ca2 plus ] I yn ystod actifadu derbynyddion P2Y a P2X a achosir gan agonyddion purinergig cyffredin, megis ATP. Mae maint y SOCE yn amrywio'n sylweddol ymhlith celloedd gwahaniaethol LPS, a all fod yn swyddogaeth y cyfuniad unigryw o fynegiant gwahaniaethol o sianeli a weithredir gan storfa a sianeli sy'n rheoli potensial pilenni, megis KV1.3. Mae gostyngiad mewn SOCE brig gan ShK-223 yn dangos bod sianeli KV1.3 yn rheolyddion cryf o SOCE ac yn datgelu mecanwaith ychwanegol y mae atalwyr KV1.3 yn ei ddefnyddio i wanhau signalau calsiwm ac ymatebion swyddogaethol dilynol (ee cynhyrchu cytocin) yn dilyn trawsgrifiad dibynnol ar galsiwm actifadu ffactor mewn microglia.

Casgliadau

Er ei bod yn sicr yn heriol datrys effeithiau'r cyfraniad ar gelloedd y system imiwnedd ymylol, yn enwedig ar gelloedd T cof a macroffagau sy'n deillio o monocyte, i effeithiau buddiol atalyddion KV1.3 ar lid yn y CNS, mae amlwg bod KV1.3 yn chwarae rhan bwysig wrth reoleiddio potensial pilen, atal dadbolariad a rheoli digwyddiadau signalau calsiwm sydd wedyn yn arwain at actifadu microglia a chynhyrchu cyfryngwr llidiol. Hoffem awgrymu, o safbwynt therapiwtig, ei bod yn fwy na thebyg yn ddymunol atal KV1.3 mewn mathau lluosog o gelloedd system imiwnedd. Fodd bynnag, byddai'n foddhaol iawn yn ddeallusol ac yn ddefnyddiol i ddatblygiad therapi egluro beth yw'r prif darged cellog o atalyddion KV1.3 ac a oes angen i therapiwteg fod yn dreiddiol i'r ymennydd i gael yr effeithiau lliniaru gorau posibl mewn clefydau CNS. Yn ddelfrydol, dylid mynd i'r afael â'r cwestiynau hyn yn ffarmacolegol trwy brofi moleciwlau bach treiddiol i'r ymennydd ochr yn ochr ag atalyddion peptidig KV1.3 â chyfyngiadau ymylol neu wrthgyrff gwrth-KV1.3 [58,59] mewn modelau anifeiliaid o glefyd Alzheimer a Parkinson. Byddai’n addysgiadol iawn hefyd cymharu effeithiau dileu amodol KV1.3 mewn microglia, macroffagau sy’n deillio o monocyte, ac is-setiau celloedd T gwahanol i effeithiau triniaeth cyffuriau er mwyn cael dealltwriaeth fanylach o rôl KV1.3 mewn niwro-llid. a'r targed cellog o atalyddion KV1.3. Fodd bynnag, credwn, ar y lefel gellog, mai rôl sylfaenol KV1.3 bob amser fydd yr hyn a ddisgrifiwyd gyntaf mewn celloedd T, sef rheoleiddio potensial pilen a mewnlifiad calsiwm ac actifadu ffactorau trawsgrifio sy'n ddibynnol ar galsiwm wedi hynny. Yr hyn nad yw weithiau'n cael ei bwysleisio ddigon yn hyn o beth, mae'n debyg bod priodweddau bioffisegol KV1.3 fel ei foltedd hanner-actifadu a'i anactifadu cymharol araf [60,61], yn "gymhwyso" y sianel yn berffaith i wrthsefyll dadbolariadau pilen a thrwy hynny alluogi KV1 .3 nid yn unig i reoleiddio SOCE, fel y disgrifiwyd 30 mlynedd yn ôl mewn celloedd T ond hefyd mewnlifiad calsiwm wedi'i gyfryngu gan dderbynyddion P2X.

Datganiad datgelu

Ni soniodd yr awduron am unrhyw wrthdaro buddiannau posibl.

Ariannu

Cefnogwyd y gwaith hwn gan wobr Sefydliad Cenedlaethol Clefydau Niwrolegol a Strôc NS100294 (i HW) a Grant Partneriaeth Ymchwil Ysgol Feddygaeth UC Davis (i AFF).

Cyfeiriadau

[1] DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, et al. Sianeli â gatiau foltedd K a mwy mewn lymffocytau T dynol: rôl mewn mitogenesis? Natur. 1984; 307(5950):465–468.

[2] Beeton C, Wulff H, Standifer NE, et al. Mae sianeli Kv1.3 yn darged therapiwtig ar gyfer clefydau hunanimiwn sy'n cael eu cyfryngu gan gelloedd T. Proc Natl Acad Sci UDA. 2006; 103 (46): 17414–17419.

[3] Tarcha EJ, Chi V, Munoz-Elias EJ, et al. Ymatebion ffarmacolegol gwydn o'r peptid ShK-186, atalydd sianel Kv1.3 penodol sy'n atal cyfryngwyr celloedd T o glefyd hunanimiwn. J Pharmacol Exp Ther. 2012; 342(3):642–653.

[4] Chandy KG, Norton RS. Atalyddion peptid ar sianeli Kv1.3 mewn celloedd T fel therapiwteg ar gyfer clefyd hunanimiwn. Curr Opin Chem Biol. 2017; 38:97-107.

[5] Chen YJ, Nguyen HM, Maezawa I, et al. Mae atal y sianel potasiwm Kv1.3 yn lleihau cnawdnychiant a llid mewn strôc isgemig. Ann Clin Cyfieithu Neurol. 2018; 5(2):147–161.

[6] Ma DC, Zhang NN, Zhang YN, et al. Mae blocâd sianel Kv1.3 yn lleddfu isgemia cerebral / anaf atdlifiad trwy ail-lunio ffenoteipiau M1/M2 a chyfaddawdu gweithrediad inflammasome NLRP3 mewn microglia. Exp Neurol. 2020; 332: 113399.

[7] Maezawa I, Nguyen HM, Di Lucente J, et al. Kv1.3 Ataliad fel therapi posibl wedi'i dargedu gan ficroglia ar gyfer clefyd Alzheimer: prawf cysyniad cyn-glinigol. Ymenydd. 2018; 141(2):596–612.

[8] Sarkar S, Nguyen HM, Malovic E, et al. Mae Kv1.3 yn modiwleiddio niwro-lid a niwroddirywiad mewn clefyd Parkinson. J Clin Buddsoddi. 2020; 130 (8): 4195–4212.

[9] Reeves TM, Trimmer PA, Colley BS, et al. Targedu sianeli Kv1.3 i leihau patholeg mater gwyn ar ôl anaf trawmatig i'r ymennydd. Exp Neurol. 2016; 283(PtA):188–203.

[10] Lai IK, Valdearcos M, Morioka K, et al. Mae blocio sianeli potasiwm Kv1.3 yn atal niwro-lid ar ôl llawdriniaeth a dirywiad gwybyddol heb amharu ar wella clwyfau mewn llygod. Br J Anaesth. 2020; 125 (3): 298–307.

[11] Peng Y, Lu K, Li Z, et al. Mae blocâd sianeli Kv1.3 yn lleddfu anaf i'r ymennydd a achosir gan ymbelydredd. Neuro Oncol. 2014; 16(4):528–539.

[12] Chen YJ, Nguyen HM, Maezawa I, et al. Mae'r sianel potasiwm KCa3.1 yn darged ffarmacolegol ar gyfer niwro-llid sy'n gysylltiedig ag isgemia / strôc atlifiad. J Metab Llif Gwaed Cereb. 2016;36 (12):2146–2161.

[13] Rangaraju S, Gerio M, Jin LW, et al. Mae sianel potasiwm Kv1.3 yn cael ei fynegi'n fawr gan microglia mewn clefyd Alzheimer dynol. J Alzheimers Dis. 2015;44 (3):797–808.

[14] Norenberg W, Gebicke-Haerter PJ, Illes P. Mae ysgogiadau llidiol yn achosi K newydd ynghyd â cherrynt allanol mewn microglia llygod mawr diwylliedig. Neurosci Lett. 1992;147 (2):171–174.

[15] Kotecha SA, Schlichter LC. Newid Kv1.5 i Kv1.3 mewn microglia hippocampal mewndarddol a rôl mewn amlhau. J Neurosci. 1999; 19(24): 10680-10693. [16] Fordyce CB, Jagasia R, Zhu X, et al. Mae sianeli Microglia Kv1.3 yn cyfrannu at eu gallu i ladd niwronau. J Neurosci. 2005; 25(31):7139–7149.

[17] Nguyen HM, Grossinger EM, Horiuchi M, et al. Mynegiad gwahaniaethol Kv1.3, KCa3.1, a Kir2.1 mewn microglia wedi'i actifadu "yn glasurol" ac "fel arall". Glia. 2017; 65(1): 106–121.

For more information:1950477648nn@gmail.com