Effaith Amddiffynnol Dyfyniad Djulis (Chenopodium Formosanum) Yn Erbyn Heneiddio Croen a Achosir i UV ac Oedran Trwy Leddfu Straen Ocsidiol A Diraddio Colagen Rhan 1

Haniaethol: Mae heneiddio croen yn broses gymhleth sy'n cynnwys tynnu lluniau a straen glyciad, sy'n rhannu rhai llwybrau sylfaenol ac sydd â chyfryngwyr cyffredin. Gallant achosi niwed i'r croen a dirywiad colagen trwy achosi straen ocsideiddiol a chroniad rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS). Mae Chenopodium formosanum (CF), a elwir hefyd yn Djulis, yn rawnfwydydd traddodiadol yn Taiwan. Ymchwiliodd yr astudiaeth hon i fecanweithiau amddiffyn echdyniad CF yn erbyn ymbelydredd uwchfioled (UV) a straen a achosir gan gynhyrchion terfynol glyciad uwch (AGEs). Dangosodd y canlyniadau fod gan echdyniad CF effeithiau gwrthocsidiol cryf a radical rhydd. Gallai leihau cynhyrchu ROS mewngellol a achosir gan UV a chychwyn y system amddiffyn gwrthocsidiol trwy actifadu'r llwybr signalau ffactor niwclear erythroid 2-ffactor cysylltiedig 2 (Nrf2)/heme oxygenase-1 (HO-1) mewn ffibroblastau croen dynol. Mae echdyniad CF wedi'i fodiwleiddio kinase protein wedi'i ysgogi gan mitogen (MAPK) a thrawsnewid llwybrau signalau ffactor twf (TGF-) i liniaru heneiddio croen ocsideiddiol a achosir gan straen. Ar ben hynny, datgelodd y canlyniadau fod detholiadau CF nid yn unig yn hyrwyddo synthesis colagen ond hefyd yn gwella diraddiad colagen a achosir gan heneiddio. Roedd echdyniad CF yn gwanhau cynhyrchiad ROS a achosir gan AGEs ac uwchreoleiddio derbynyddion ar gyfer AGEs (RAGE). Mae'r canlyniadau cyffredinol yn awgrymu bod dyfyniad CF yn darparu strategaeth gwrth-heneiddio effeithiol trwy atal niwed i'r croen rhag straen ocsideiddiol a cholled colagen gyda gweithgareddau gwrthocsidiol, gwrth-ffotograffiaeth ac antiglycation cryf.

Gall glycoside cistanche hefyd gynyddu gweithgaredd SOD ym meinweoedd y galon a'r afu, a lleihau'n sylweddol y cynnwys lipofuscin a MDA ym mhob meinwe, gan ysbeilio radicalau ocsigen adweithiol amrywiol (OH-, H₂O₂, ac ati) yn effeithiol a diogelu rhag difrod DNA a achosir. gan OH-radicaliaid. Mae gan glycosidau ffenylethanoid Cistanche allu chwilota cryf o radicalau rhydd, gallu lleihau uwch na fitamin C, gwella gweithgaredd SOD mewn ataliad sberm, lleihau cynnwys MDA, a chael effaith amddiffynnol benodol ar swyddogaeth pilen sberm. Gall polysacaridau cistanche wella gweithgaredd SOD a GSH-Px mewn erythrocytes a meinweoedd yr ysgyfaint llygod senescent arbrofol a achosir gan D-galactos, yn ogystal â lleihau cynnwys MDA a cholagen yn yr ysgyfaint a phlasma, a chynyddu cynnwys elastin, wedi effaith sborion dda ar DPPH, ymestyn amser hypocsia mewn llygod senescent, gwella gweithgaredd SOD mewn serwm, ac oedi dirywiad ffisiolegol yr ysgyfaint mewn llygod senescent arbrofol Gyda dirywiad morffolegol cellog, mae arbrofion wedi dangos bod gan Cistanche y gallu gwrthocsidiol da ac mae ganddo'r potensial i fod yn gyffur i atal a thrin clefydau heneiddio'r croen. Ar yr un pryd, mae gan echinacoside yn Cistanche allu sylweddol i ysbeilio radicalau rhydd DPPH ac mae ganddo'r gallu i ysbeilio rhywogaethau ocsigen adweithiol ac atal diraddio colagen a achosir gan radical rhad ac am ddim, ac mae hefyd yn cael effaith atgyweirio da ar ddifrod anion radical rhad ac am ddim thymin.

Cliciwch Ar Cistanche Herba ar gyfer Gwrth-ocsidiad

【Am ragor o wybodaeth:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Geiriau allweddol: Chenopodium formosanum; Djulis; ymbelydredd uwchfioled; cynhyrchion terfynol glycation uwch; straen glycation; rhywogaethau ocsigen adweithiol

1. Rhagymadrodd

Diffinnir heneiddio o ganlyniad i ddirywiad cynyddol yn swyddogaeth ffisiolegol celloedd a meinweoedd y corff. Yn ystod heneiddio, mae cronni cynhyrchion sydd wedi'u difrodi yn effeithio'n raddol ar drefniadaeth a chynhwysedd atgyweirio'r meinwe. Mae croen, sef y rhwystr amddiffynnol i'r corff, yn aml yn destun ffactorau cynhenid ​​ac anghynhenid ​​​​heneiddio [1]. Y prif ffactor allanol sy'n cyfrannu at heneiddio croen yw amlygiad i ymbelydredd UV yng ngolau'r haul, a elwir yn ffoto-luniau [2]. Ar wahân i ysgogiadau amgylcheddol, ystyrir bod cronni AGEs yn ffactor mewnol o heneiddio cronolegol sy'n sbarduno'r broses heneiddio croen trwy straen glyciad [3].

Mae'r ddau ROS amgylchedd a gynhyrchir gan olau UV a ROS mewndarddol a ffurfiwyd gan fetaboledd ocsideiddiol yn rheoleiddio straen ocsideiddiol cellog ac yn dinistrio'r matrics allgellog llawn colagen (ECM), sydd nid yn unig yn nodnod heneiddio meinwe gyswllt croen ond hefyd yn brif achos dirywiad croen [ 4]. Mae difrod i groes-gysylltiadau colagen yn gwanhau cywirdeb strwythurol dermol ac yn cynyddu anystwythder a brau y rhwydwaith colagen, a thrwy hynny hyrwyddo ffurfio crychau, colli elastigedd, a sychder y croen [5].

Pelydrau UVB yw'r band tonnau mwyaf niweidiol o ymbelydredd solar sy'n cyrraedd y ddaear, sy'n arwain at straen ocsideiddiol trwy ysgogi ffurfio ROS ac mae'n ymwneud â hyperpigmentation, llid y croen, gwrthimiwnedd, ffoto-luniau, a charcinogenesis [6,7]. Mae'n hysbys bod Nrf2 yn gweithredu fel prif reoleiddiwr amddiffyniad gwrthocsidiol cellog yn erbyn ffoto-ddifrod y croen wedi'i gyfryngu gan ymbelydredd UV. Gall celloedd ddileu straen ocsideiddiol ac atal anafiadau trwy reoleiddio'r llwybr signalau protein 1 (Keap1) sy'n gysylltiedig â Nrf2/Kelch [8,9]. Ar ôl datguddiad UV, mae cynhyrchiad ROS gormodol yn actifadu MAPK a ffactor niwclear-kappa B (NF-κB), sydd, yn ei dro, yn cymell dadreoleiddio metallopeptidasau matrics (MMPs), gan arwain at ddiraddio colagen ac elastin. Yn ogystal, mae protein activator 1 (AP-1) yn atal signalau TGF ac yn arwain at ostyngiad mewn synthesis procolagen [10,11].

Mae AGEs yn grŵp heterogenaidd o foleciwlau a ffurfiwyd o ganlyniad i glyciad, adwaith di-ensymatig digymell rhwng y siwgrau lleihäol a grwpiau amino o broteinau [3]. Mae'r rhyngweithio rhwng AGEs a ​​derbynnydd penodol o AGEs (RAGE) yn sbarduno cynhyrchu ROS ac yn newid mynegiant genynnau mewn anhwylderau sy'n gysylltiedig ag AGEs, megis diabetes a methiant arennol [12,13]. Mae OEDRAN yn cronni mewn proteinau ECM wrth heneiddio, a Nε -(1-Carboxymethyl)-L-lysin (CML) a gynhyrchir trwy addasiad ocsideiddiol yw'r prif brotein glycedig mewn pobl [14,15]. Yn ystod heneiddio cynhenid, mynegir AGEs yn yr epidermis a'r dermis, a gellir arsylwi ar groniad AGEs sylweddol uwch yn y rhannau o'r croen sy'n agored i'r haul [16]. Yn ogystal, mae UV yn gwella dyddodiad AGEs trwy glyciad y rhwydwaith ffibr elastig [17].

Mae Chenopodium formosanum (CF), a elwir hefyd yn Djulis, yn blanhigyn bwytadwy yn Taiwan ac fel arfer caiff ei goginio gyda reis neu miled fel prif fwyd. Ystyrir CF yn fwyd gwerth maethol uchel ac yn ffynhonnell cyfansoddion bioactif ar gyfer iechyd pobl [18]. Ar wahân i lawer o ffibr dietegol, startsh, asidau amino hanfodol sy'n gyfyngedig i grawn, a pholyffenolau [19,20], mae CF hefyd yn cynnwys dosbarth o gyfansoddion sydd â hanes hir o ddefnydd meddyginiaethol, a elwir yn ffytoecdysteroidau [21-24]. Mae astudiaethau blaenorol wedi nodi bod CF yn arddangos nifer o weithgareddau biolegol, gan gynnwys, gwrth-gordewdra [21], gwrthhypertensive [22], gwrthhyperglycemig [25,26], hepatoprotective [27-29], anticarcinogenig [23,24,30,31], ac eiddo gwrth-heneiddio [19,32]. Serch hynny, ni ddatgelwyd hyd yma effeithiau amddiffynnol croen manwl echdyniad CF na'r mecanweithiau sylfaenol yn erbyn heneiddio cynhenid ​​ac anghynhenid ​​y croen sy'n gysylltiedig â straen ocsideiddiol a glyciad. Pwrpas yr astudiaeth hon oedd egluro effeithiau gwrthocsidiol dyfyniad CF ac ymchwilio i fecanweithiau amddiffyn gwrth-heneiddio sylfaenol echdyniad CF yn erbyn diraddiad colagen gan UV ac AGEs mewn ffibroblastau croen dynol.

2. Canlyniadau

2.1. Dadansoddiad Meintiol HPLC-ESI-MS/MS a MRM

Cynhaliwyd y dadansoddiad o gynnwys cyfansoddion bioactif targed mewn echdyniad CF gan gromatograffaeth hylif perfformiad uchel (HPLC)-Màs/MS a'r dulliau monitro adwaith lluosog (MRM). Dangoswyd cromatogram ïon MRM a sbectrwm màs ar fodd ïoneiddiad electrochwistrellu (ESI) o 20- safon hydroxyecdysone a rutin mewn Deunyddiau Atodol. Y trawsnewidiad o'r ïon rhagflaenol ar m/z 481 i'r cynhyrchiad ar m/z 371 ar gyfer 20-hydroxyecdysone (Ffigur S1a) a'r trawsnewidiad o'r ïon rhagflaenol ar m/z 611 i'r cynhyrchiad ar m/z 3 03 ar gyfer rutin (Ffigur S1b) yn cael eu dangos. Dangosodd Ffigur S2 gyfanswm cromatogram ïon (TIC) a chromatogram ïon wedi'i dynnu (EIC) o 20-hydroxyecdysone (m/z 481) a rutin (m/z 611) mewn dyfyniad CF. Cynnwys rutin a 20-hydroxyecdysone mewn dyfyniad CF oedd 14.5 ± 0.4 mg/g a 19.5 ± 0.6 mg/g, yn y drefn honno.

2.2. Gweithgarwch Gwrthocsidiol ac Effaith Scavenging Radical Rhad Detholiad CF

2.2.1. Gweithgaredd Ysgogi Radical Rhad ac Am Ddim DPPH

Mae DPPH yn adweithydd a ddefnyddir yn gyffredin i amcangyfrif cyfanswm gweithgaredd sborionu radical rhydd gwrthocsidyddion trwy ganfod gallu echdynion i ddarparu protonau hydrogen. Dangosodd y canlyniad fod dyfyniad CF yn arddangos gweithgaredd sborion cryf o 40.2 y cant ± 3.3 y cant ar 50 µg/mL ac 89.1 y cant ± 2.6 y cant ar 500 µg/mL, tra bod gweithgaredd sborionu asid ascorbig yn 96.6 y cant ± 2.3 y cant ar 10 µg/mL (Ffigur 1a). Hanner y crynodiad ataliol uchaf (IC50) o echdyniad CF ar sborion radical rhydd DPPH oedd 84.7 ± 13.0 µg/mL.

2.2.2. Lleihau Gallu

Dangosir gallu lleihau'r echdyniad CF a welwyd yn yr astudiaeth bresennol yn Ffigur 1b. Cynhwysedd gostyngol echdynnu CF oedd 51.3 y cant ± 1.0 y cant ar 100 µg/mL a 66.9 y cant ± 1.7 y cant ar 1000 µg/mL. Cynhwysedd lleihau'r asid ascorbig rheoli cymharol (100 µg/mL) oedd 79.7 y cant ± 1.2 y cant .

2.2.3. Superoxide Anion Radical (O2 −) Gweithgaredd Sborion

Y gweithgaredd sborionu radical anion superoxide oedd 82.2 y cant ± 6.1 y cant ar gyfer 250 µg/mL BHA (rheolaeth gymharol) ac yn amrywio o 59.6 y cant ± 3.5 y cant i 73.1 y cant ± 2.6 y cant ar gyfer 100-1000 µg/mL CF.

2.2.4. Hydrogen Perocsid (H2O2) Gweithgaredd Sborion

Roedd y gweithgaredd chwilota hydrogen perocsid yn amrywio o 10.3 y cant ± 1.1 y cant i 61.1 y cant ± 2.3 y cant ar gyfer dyfyniad CF 200–1500 µg/mL ac roedd yn 96.3 y cant ± 2.0 y cant ar gyfer BHA (250 µg/mL) (250 µg/mL) Ffigur 1d). Yr IC50 o ddyfyniad CF oedd 956.5 ± 59.2 µg/mL ar gyfer gweithgaredd sborion hydrogen perocsid.

2.2.5. Gweithgaredd Sborion Radical Hydroxyl (· OH).

Dangosir gweithgareddau sborion radical hydrocsyl echdyniad CF (100–1000 µg/mL) a'r manitol rheoli cymharol (µg/mL) yn Ffigur 1e. Y gweithgaredd chwilota radical hydroxyl o 1000 µg/mL dyfyniad CF oedd 63.3 y cant ± 3.5 y cant, ac roedd gweithgaredd mannitol (2500 µg/mL) yn 69.7 y cant ± 2.2 y cant. Roedd effaith sborion y dyfyniad CF yn debyg i effaith y rheolaeth gymharol, ac roedd yr IC50 o CF ar gyfer gweithgaredd sborion radical hydrocsyl yn 240.7 ± 24.3 µg/mL.

2.2.6. Ion fferrus (Fe2 plws ) Gweithgaredd Chelating

Roedd Ffigur 1f yn dangos gweithgaredd chelating metel y dyfyniad CF a'r rheolaeth gymharol EDTA. Roedd y gweithgaredd yn amrywio o 6.5 y cant ± 1.4 y cant i 67.6 y cant ± 2.5 y cant ar gyfer 100–1000 µg/mL dyfyniad CF, a 97.5 y cant ± 2.0 y cant ar gyfer 100 µM EDTA. Yr IC50 o ddyfyniad CF oedd 625.5 ± 46.0 µg/mL ar gyfer celation metel.

2.3. Detholiad CF Sytowenwyndra a Achosir gan UV wedi'i Laddhau mewn Celloedd Hs68

Er mwyn gwerthuso effaith sytotocsig dyfyniad CF mewn ffibroblastau croen dynol (celloedd Hs68), aseswyd hyfywedd celloedd a gafodd eu trin â dyfyniad CF gan assay MTT. Fel y dangosir yn Ffigur 2a, nid oedd y dyfyniad CF yn achosi sytowenwyndra mewn celloedd Hs68 yn yr ystod crynodiad o 50-250 µg/mL; felly, dewiswyd y crynodiadau hyn ar gyfer yr arbrofion canlynol.

Roedd celloedd Hs68 yn agored i ymbelydredd UVB, a phenderfynwyd hyfywedd y gell i werthuso effaith amddiffynnol dyfyniad CF yn erbyn difrod ffoto. Dangosodd y canlyniadau fod sytowenwyndra a achosir gan ymbelydredd UVB (20-100 mJ/cm2 ) mewn celloedd Hs68 mewn modd sy'n dibynnu ar ddos ​​(Ffigur 2b). Serch hynny, roedd celloedd Hs68 yn agored i UVB (80 mJ/cm2 ) ac wedi hynny yn cael eu trin â dyfyniad CF (100, 150, 200, a 250 µg/mL) am 24 h; Roedd echdyniad CF wedi lleddfu sytowenwyndra a achosir gan UV yn sylweddol (Ffigur 2c).

2.4. Detholiad CF Gostyngiad o Gynhyrchu ROS Mewngellol a Achosir gan UV mewn Celloedd Hs68

Gall ROS achosi protein sy'n gysylltiedig â ffotograffu croen a thrawsgludiad signal i lawr yr afon trwy achosi straen ocsideiddiol mewngellol mewn croen dynol. Mae llifyn fflworogenig yn mesur faint o radicalau rhydd ocsideiddiol yn y celloedd. Ar ôl ymbelydredd â UVB (80 mJ/cm2 ) am 2 awr, ysgogwyd cynhyrchu ROS mewn celloedd Hs68 2.16-plyg o'i gymharu â'r grŵp heb ei arbelydru. Fodd bynnag, roedd triniaeth gyda echdyniad CF 100-250 µg/mL wedi lleihau'r ROS a gynhyrchir yn sylweddol. is-reoleiddiwyd ROS 1.64-plyg o'i gymharu â'r grŵp ymbelydredd fesul echdyniad CF ar 250 µg/mL (Ffigur 3).

2.5. Cychwynnodd CF Extract y System Amddiffyn Gwrthocsidiol trwy Weithredu Llwybr Signalau Nrf2/HO-1 mewn Celloedd Hs68

2.5.1. Effeithiau Echdyniad CF ar Fynegiad a Achosir gan UV o Nrf2/HO-1

O dan amodau arferol, mae Keap1 yn ffurfio cyfadeilad gyda Nrf2 ac yn hyrwyddo hollbresennol a diraddio Nrf2. Fodd bynnag, mae llwybr signalau Nrf2 yn cael ei gychwyn pan fydd celloedd yn cael eu hysgogi gan straen ocsideiddiol amgylcheddol. Yn yr astudiaeth hon, cafodd celloedd Hs68 eu trin â dyfyniad CF i arsylwi ei effeithiau ar lwybr signalau Nrf2 ar ôl ymbelydredd UV. Fel y dangosir yn Ffigur 4, roedd mynegiant Nrf2 a achoswyd gan ymbelydredd UVB (40 mJ/cm2 ) a gostyngodd mynegiant Keap1, tra bod dyfyniad CF (250 µg/mL) wedi achosi mynegiant Nrf2 yn sylweddol o 2.4-plyg o gymharu â'r grŵp ymbelydredd . Ar ôl ymbelydredd UV a thriniaeth gyda echdyniad CF ar 250 µg/mL cynyddodd mynegiant protein HO{{-1 2.{5-plyg. Roedd y canlyniadau'n dangos y gallai dyfyniad CF gychwyn y mecanwaith amddiffyn gwrthocsidiol trwy lwybr signalau Nrf2/HO{{{{{{2}}) ac amddiffyn celloedd rhag straen ocsideiddiol mewn system fiolegol.

2.5.2. Effeithiau Detholiad CF ar Drawsleoli Niwclear a Achosir gan UV o Nrf2

Mae ymbelydredd UV yn hyrwyddo actifadu a thrawsleoli Nrf2 i gnewyllyn celloedd. Yn yr astudiaeth hon, perfformiwyd assay staenio immunofluorescence Nrf2 mewn ffibroblastau croen dynol i bennu lefel actifadu Nrf2. Cynyddodd trawsleoliad Nrf2 o'r cytoplasm i'r cnewyllyn ar ôl ymbelydredd UVB, tra bod y trawsleoliad hefyd wedi'i wella ar ôl triniaeth echdynnu CF (Ffigur 5). Roedd canlyniadau'r assay staenio imiwnfflworoleuedd yn gyson â mynegiant Nrf2 yn Ffigur 4.

2.6. Detholiad CF Llwybr Signalau Cellog sy'n Gysylltiedig â Ffotograffau Croen Modyledig mewn Celloedd Hs68

2.6.1. Effeithiau Dyfyniad CF ar Fynegiad a Achosir gan UV o MMP-1, -3, -9 a TIMP{7}}

Mae ymbelydredd UV yn ysgogi ffosfforyleiddiad MAPK, sy'n sbarduno trawsgludiad signal i lawr yr afon i actifadu ffactor trawsgrifio AP{{{0}} a gwella mynegiant MMP. Pan fydd y croen yn agored i straen ocsideiddiol, mae MMPs yn cael eu huwchreoleiddio, sydd wedyn yn achosi diraddio colagen a ffurfio crychau. Fel y dangosir yn Ffigur 6, cododd ymbelydredd UVB fynegiant MMP-1, -3, a -9 yn sylweddol (2.2-plyg, 1.3-plyg, a 1.5-plyg, yn y drefn honno, o gymharu â'r grŵp rheoli), tra bod dyfyniad CF yn gwanhau mynegiant MMPs. Roedd triniaeth echdynnu CF ar 250 µg/mL yn atal yn sylweddol lefelau mynegiant a achosir gan UVB o MMP-1, MMP-3, ac MMP{-9 o 1.1-plyg, 0 .9-plyg, ac 1.1-plyg, yn y drefn honno, o gymharu â'r grŵp rheoli.

Mae atalyddion meinwe meteloproteinasau (TIMPs) yn atalyddion MMP a fynegir ym meinwe gyswllt y croen. Lleihawyd mynegiant TIMP-1 ar ôl ymbelydredd UVB a'i wella gan echdyniad CF (100–250 µg/mL) (Ffigur 6). Roedd y canlyniadau hyn yn dangos bod triniaeth echdynnu CF yn atal y codiad a achosir gan UV yn lefelau MMP-1, -3, a -9 a gostyngiad mewn TIMP-1; felly, gall dyfyniad CF leihau dadansoddiad matrics allgellog croen a achosir gan UV a chynnal cyfanrwydd strwythurol yn y dermis.

2.6.2. Effeithiau Dyfyniad CF ar Fynegiad wedi'i Achosi gan UV o AP-1 a MAPK

Fe wnaeth ymbelydredd UVB uwchreoleiddio mynegiant pc-Jun a c-Fos (2.4- ac 1.2-plyg o gymharu â'r grŵp rheoli), tra cawsant eu hisreoli gan echdyniad CF (100–250 µg/ mL). Roedd triniaeth gyda detholiad CF wedi lleihau mynegiant pc-Jun a c-Fos yn sylweddol ar 250 µg/mL (Ffigur 7a). Dangosodd Ffigur 7b fod amlygiad UVB wedi cynyddu mynegiant ffosfforyleiddiad p38 ac ERK i 2.1- ac 1.5-plyg o gymharu â chyfanswm lefelau protein mewn celloedd Hs68. Fodd bynnag, roedd triniaeth â detholiad CF (100-250 µg/mL) yn atal gorfynegiant MAPK a achosir gan UVB yn sylweddol. Cafodd ffosfforyleiddiad p38 ac ERK ei atal i lefelau gwaelodol gyda chrynodiad 250 µg/mL o echdyniad CF. Ar ben hynny, gallai dyfyniad CF atal gorfynegiant a achosir gan UV o AP-1, gan amddiffyn y croen rhag tynnu lluniau.

2.6.3. Effeithiau Dyfyniad CF ar Fynegiant Atal UV o TGF- a Smad3

TGF- yn chwarae rhan ganolog mewn synthesis matrics allgellog ac yn rheoli homeostasis colagen yn y dermis dynol. Mae mwy o ROS mewn ffibroblastau yn amharu ar signalau TGF trwy ddadreoleiddio mynegiant TGF- a Smad3, sy'n arwain at golli colagen a dinistrio meinwe ddermol mewn croen oedrannus. Yn yr un modd, yn ein hastudiaeth, roedd ymbelydredd UVB yn is-reoleiddio mynegiant TGF- a Smad3 i atal synthesis colagen. O'i gymharu â'r grŵp rheoli, roedd mynegiant TGF- , a Smad3 yn is yn y grŵp arbelydredig UVB; fodd bynnag, adferodd echdyniad CF (100–250 µg/mL) fynegiant protein yn sylweddol (Ffigur 8).

2.7. Detholiad CF Cynhyrchu ROS wedi'i Wnhau ag AGEs a ​​Mynegiant RAGE mewn Celloedd Hs68

Er mwyn ymchwilio i effaith dyfyniad CF ar straen glyciad, cafodd celloedd Hs68 eu trin â CML. Ar ôl trin y celloedd â CML (100 µg/mL) am 6 h, roedd swm y ROS a gynhyrchwyd 1.92-plyg yn uwch na'r hyn yn y grŵp heb ei drin. Fodd bynnag, roedd triniaeth gyda detholiad CF (100-250 µg/mL) wedi lleihau cynhyrchiant ROS yn sylweddol. Cafodd ROS ei is-reoleiddio 1.30-plyg o'i gymharu â'r grŵp wedi'i drin â CML fesul dyfyniad CF ar 250 µg/mL (Ffigur 9). Ymhellach, cynyddodd CML (100 µg/mL) fynegiad RAGE yn sylweddol i 2.2-plyg o'i gymharu â'r grŵp rheoli, ond cafodd ei wanhau gan driniaeth â dyfyniad CF (Ffigur 10), sy'n dangos bod echdyniad CF wedi lleihau'r anwythiad yn bennaf a achosir gan CML.

2.8. Detholiad CF Synthesis Colagen a Hyrwyddir a Gwell Diraddio Colagen a Achosir i Heneiddio mewn Celloedd Hs68

2.8.1. Effeithiau Detholiad CF ar Synthesis Collagen

Cafodd celloedd Hs68 eu trin â dyfyniad CF (50-250 µg/mL) am 24 h, a mesurwyd mynegiant procolagen math I gan ddefnyddio blotio gorllewinol. Ar ôl triniaeth â dyfyniad CF, cafodd mynegiant procolagen math I ei uwchreoleiddio'n sylweddol (1.7-plyg o'i gymharu â'r grŵp rheoli) (Ffigur 11a). Cyfanswm y cynnwys colagen yn y grŵp rheoli oedd 14.93 ± 1.27 µg/mL a gynyddodd i 39.00 ± 2.39 µg/mL ar ôl triniaeth gyda dyfyniad CF 250 µg/mL (Ffigur 11b). Roedd canlyniadau mynegiant procolagen math I a chyfanswm cynnwys colagen yn nodi bod dyfyniad CF yn hyrwyddo synthesis a chynhyrchu colagen.

2.8.2. Effeithiau Dyfyniad CF ar Ddiraddiad Colagen a Achosir i UV ac OED

Cafodd celloedd Hs68 sy'n agored i ymbelydredd UVB (40 mJ/cm2) neu eu trin â CML (100 µg/mL) eu trin â dyfyniad CF am 24 h. Fel y dangosir yn Ffigur 12a, gostyngwyd cyfanswm y cynnwys colagen yn sylweddol ar ôl ymbelydredd UVB, ac fe wnaeth triniaeth â detholiad CF adfer colagen a chynyddu'n sylweddol ffurfiant colagen ar 250 µg/mL. Dangoswyd canlyniadau tebyg mewn cynhyrchu colagen wedi'i drin â CML a chyfres o ddetholiadau CF. Gwanhaodd dyfyniad CF y gostyngiad yng nghyfanswm y colagen a driniwyd gan CML (Ffigur 12b).

Defnyddiwyd yr assay staenio imiwnfflworoleuedd i bennu lefel colagen mewn celloedd ffibroblast (Ffigur 12c). Fe wnaeth ymbelydredd UVB a thriniaeth CML leihau cynnwys colagen, tra bod detholiadau CF yn gwella diraddiad colagen. Roedd canlyniadau'r asesiad staenio immunofluorescence o echdyniad CF ar golagen yn gyson â'r cynnwys colagen yn Ffigurau 11b a 12a,b.

【Am ragor o wybodaeth:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】