Mynd yn Ficro mewn Clefyd Arennau Leptospirosis Ⅱ

4. Ymatebion Imiwnedd Gwesteiwr i Leptospira spp.

Prif lwybr Leptospira yw treiddiad uniongyrchol pilenni mwcaidd neu groen agored trwy waed, meinweoedd, wrin, neu ddŵr halogedig, sy'n ymledu trwy'r cylchrediad systemig ac yn lledaenu i sawl organ, megis yIau, ysgyfaint, a tiwbyn procsimol o'rneffron yn yr arennau, lle gall luosi a goroesi am fis [51]. Yn y cyfnod cychwynnol o haint, yymateb imiwnedd cynhenidyn chwarae rhan sylfaenol fel y llinell amddiffyn gyntaf mewn leptospirosis, gan effeithio ar ymatebderbynyddion adnabod patrwm, ffagocytosis macrophage, sefydlu allgellogcronni neutrophil, aymyrraeth y system gyflenwi [52].

Mae'rymateb imiwnmewn bodau dynol yn chwarae rhan hanfodol yn ydatblygu arwyddion clinigol, fel y mae ffactorau ffyrnigrwydd rhai mathau o bathogenau. Mae'r rhan fwyaf o leptospirosis dynol yn asymptomatig neu'n ysgafn, a dim ond 10% o achosion sy'n datblygu ffurfiau difrifol gyda methiant aml-organ a chyfraddau marwolaeth uwch sy'n gysylltiedig âstorm cytocina statws imiwn-barlys. Mae rhywogaethau pathogenig yn ysgogi ymateb humoral yn y cyfnod bacteremia, er bod ymddygiad dilynol yymateb imiwnyn aneglur. Mewn astudiaethau o gleifion ag amlygiadau clinigol lluosog o leptospirosis, mae difrifoldeb y darlun clinigol wedi'i gysylltu â lefelau amrywiol o cytocinau serwm, megis TNF- , IL-10, ac IL-6 [53], ond mae'r casgliad hwn yn parhau i fod yn ddadleuol [54]. Mae'r amodau hyn wedi arwain at fwy o ddiddordeb mewn deall yr ymateb imiwn yn gyffredinol a'r digwyddiadau biolegol sy'n digwydd yn ystod haint.

FAINT O HYD MAE'N EI GYMRYD I CISTANCHE WEITHIO?

4.1. Leptospira a'r System Ategol

Mae gweithgaredd proteolytig proteasau Leptospiral yn erbyn y matrics allgellog yn caniatáu i'r haint fynd i mewn i'r llif cylchrediad gwaed. Y system ategu yn y system cylchrediad gwaed yw un o brif fecanweithiau'r ymateb imiwn cynhenid ​​​​i Leptospira pathogenig. Fodd bynnag, mae Leptospira wedi datblygu strategaethau i ddianc rhag ymosodiad y system ategu trwy rwymo proteinau i ategu moleciwlau a chynhyrchu proteasau, fel thermolysin, ensym metalloproteinase thermostable niwtral sy'n effeithio ar y gadwyn protein C3. Mae straenau pathogenig yn rhwymo ffactor H (FH), yn ategu protein sy'n gysylltiedig â ffactor H 1 (FHR-1), protein tebyg i ffactor H 1 (FHL-1), a phrotein rhwymo C4b (C4BP), i gyd y maent yn gyfrifol am atal y system ategu [55]. Mae yna dair prif strategaeth ar gyfer osgoi cyflenwad atodol o Leptospira pathogenig [55,56] trwy ymyrraeth rheoleiddwyr cyflenwad gwesteiwr, proteas lletyol, a phroteas bacteriol. Ar gyfer rheolyddion cyflenwad, mae Leptospira yn defnyddio Ffactor H (FH; rheolydd llwybr cyflenwad amgen) a phrotein rhwymo C4 (C4BP; rheolydd llwybrau cyflenwad clasurol a lectin) i gyflymu pydredd y trawsnewidiadau C3 a hefyd yn gweithredu fel cofactors ar gyfer Ffactor I am holltiad C3b a C4b [57,58]. Mae protein leptospiral (LcpA), ynghyd â vitronectin (Vn; rheolydd llwybr terfynell) yn rhwymo C9 ac yn atal ei bolymeriad [59], a thrwy hynny o bosibl yn rhwystro ffurfiad cymhleth sy'n ysgogi pilen (MAC) [60]. Yn ogystal, mae Leptospira pathogenig yn rhwymo nifer o broteasau gwesteiwr, megis actifadydd plasminogen math Urokinase (uPA), sy'n cymell plasmin gweithredol [61] (proteas serine) ar gyfer treulio C3b, C4b, a C5 ar wyneb Leptospira [62]. Ar ben hynny, gall metalloproteasau a thermolysin, y proteas Leptospira mewndarddol, hollti ac anactifadu nifer o broteinau ategol (C2, C3, C4, a Ffactor B) [60]. Mae'r cyfuniad o reoleiddwyr ategu, o'r Leptospira gwesteiwr a pathogenig, yn hwyluso cytrefiad bacteriol yn organau targed y gwesteiwr [63].

4.2. Leptospira a Neutrophils

Yn ystod haint, mae rhywogaethau pathogenig Leptospira yn ysgogi actifadu cryf o neutrophils ac ymateb pro-llidiol. Mae neutrophils yn bwysig i reoli micro-organeb, ond maent hefyd yn cyfrannu at ddifrod meinwe yn y gwesteiwr. Dangoswyd bod lefelau isel o groniad niwtroffil allgellog oherwydd gweithgaredd niwtroffil isel yn y cylchrediad yn cynyddu leptospiremia, gan nodi y gallai ffurfio mewnfasgwlaidd recriwtiadau niwtroffil fod yn hanfodol i atal lledaeniad cynnar Leptospira pathogenig [64].

4.3. Leptospira a Macrophages

Yng nghyfnod cychwynnol haint Leptospira, mae macrophages yn chwarae rhan bwysig wrth ddileu'r spirochete. Mae'r mecanwaith effeithydd hwn ynghyd ag ymateb cytocin effeithlon yn gysylltiedig â rheolaeth phagocytig a lledaeniad haint, er bod Leptospira spp. dangoswyd ei fod yn ysgogi apoptosis mewn macroffagau trwy'r llwybr Fas/FasL-caspase-8/{-3 ac yn hwyluso eu goroesiad ac amlhau yn y lletywr oherwydd rhyddhau apoptosis sy'n achosi ffactorau mitocondriaidd ac endonuclease mewn heintiedig macroffagau [65]. Mae ymchwil diweddar wedi'i gynnal ar ficro-drawsgriptome macroffagau sydd wedi'u heintio â Leptospira i bennu'r mecanweithiau epigenetig, megis rheoleiddio ôl-drawsgripsiwn gan RNA. Mae Macrophages sydd wedi'u heintio â Leptospira wedi dangos bod microRNAs (miRNAs) yn cael eu rheoleiddio gan haint â'r spirochete, gan ddangos bod y rheoliad hwn yn hanfodol bwysig yn ymateb y celloedd system imiwnedd hyn yn haint Leptospira [66]. Mewn macroffagau dynol, mae gan actifadu'r llid a gyfryngir gan rywogaethau ocsigen adweithiol a chathepsin lysosomaidd B a gynhyrchir gan haint Leptospira lefelau amlwg o NLRP3 ac IL-18, sy'n ffafrio cynhyrchu IL-1 ac yn arwain at lefel uchel posibilrwydd ffagocytosis a modelu cyflym rhai cytocinau sy'n cydberthyn ag ymwrthedd i leptospirosis [67].

4.4. Ymateb Doniol i Leptospira

Nodweddir yr ymateb digrif penodol yn erbyn Leptospira gan gynhyrchu gwrthgyrff IgM ac IgG ar drydydd diwrnod dechrau'r symptom. Yn ogystal, mae cynhyrchiad IgA wedi'i adrodd o'r diwrnod cyntaf i'r nawfed mis ar ôl yr haint; mewn gwirionedd, mae'r cynnydd mewn IgM wedi'i ddefnyddio fel mesur amgen yn y diagnosis cynnar o leptospirosis [68]. Mae effaith yr ymateb humoral mewn pobl â leptospirosis yn caniatáu i'r diagnosis serolegol gael ei wneud ar ôl haint naturiol [69]. Efallai mai'r agwedd bwysicaf ar yr ymateb humoral yn haint Leptospira yw ffurfio gwrthgyrff amddiffynnol. Mae brechlynnau sydd ar gael ar hyn o bryd ar gyfer leptospirosis yn cynnwys paratoadau celloedd cyflawn ac mae ganddynt gyfyngiadau, megis effeithiolrwydd isel, sgîl-effeithiau lluosog, cynhyrchu cof imiwnedd isel, a diffyg croes-amddiffyn ar gyfer gwahaniaethau serovar. Felly, mae angen datblygu brechlynnau newydd ar gyfer rheoli clefydau, ac mae ymchwil yn cael ei gynnal ar hyn o bryd i gynhyrchu brechlynnau rhag imiwneiddio genetig [70]. Mae OMPs Leptospira wedi cael eu hystyried yn antigen, gyda gwell imiwnogenedd ar gyfer lymffocytau B, sy'n cynnwys yr epitopau adeileddol OmpL187- 98, OmpL1173-191, OmpL1297-320, LipL4130-48, LipL- {9}}, a LipL41263-282 [71]. Mae'r epitopau hyn yn ymgeiswyr addawol ar gyfer datblygu brechlyn cyffredinol.

4.5. Ymateb Imiwnedd Addasol i Leptospira: Celloedd T a Sytocinau

Mae rhywogaethau pathogenig o Leptospira yn achosi ymateb imiwn wedi'i gyfryngu gan lymffocytau T a B, ynghyd â mynegiant cytocinau a all fod yn gysylltiedig â siartiau disgyrchiant. Mae actifadu celloedd T yn ystod heintiad â Leptospira yn cychwyn yr ymateb llidiol, yn bennaf trwy gynhyrchu cytocinau. Mae hyn yn hanfodol wrth ddileu haint yn gynnar, ond gall cynhyrchu cytocinau pro-llidiol heb ei reoli hefyd arwain at orgynhyrchu cytocin a ddilynir gan gyflwr imiwn-barlys, a all arwain at sepsis a methiant aml-organ. Mae lymffocytau T yn cynhyrchu IL-1, IL-6, IL-12, interferon (IFN)- , a TNF- , sy'n gweithredu fel chemo-atynwyr i recriwtio lewcocytau ar safle'r haint. Yn ddiddorol, yn ex vivo, roedd y celloedd δ T naïf yn amlhau mewn diwylliannau o gelloedd mononiwclear gwaed ymylol (PBMCs) wedi'u hysgogi ag antigenau Leptospira ynghyd â chynhyrchu IL-17 ac IFN [72]. Ar ben hynny, tra bod llygod tebyg i wyllt wedi'u heintio â leptospirosis yn dangos lefelau uwch o ddigonedd o cytocinau, gan gynnwys IL-4, IL-10, ac IL-13 o gymharu â llygod heb eu heintio, murine cronig a achosir gan Leptospira dangosodd neffritis (Daf1-/- llygod) fynegiant uwch o actin cyhyrau llyfn, IL-10, IL-13, ond dim gwahaniaeth o IL-12 ac IL{{21} } lefel [73]. Fel y cyfryw, gall Daf1 ac IL-17 chwarae rhan amddiffynnol hanfodol yn natblygiad CKD fel y cysylltiad rhwng CKD murine a achosir gan Leptospira â ffibrosis arennol [72,73]. Fodd bynnag, mae'r ddamcaniaeth o ymateb cytocin dethol mewn dilyniant afiechyd yn dal i fod yn amhendant mewn leptospirosis dynol hyd yn hyn. Mewn cleifion â leptospirosis difrifol a chyfranogiad ysgyfeiniol, cafwyd lefelau uwch o IL-6, CXCL8, ac IL-10 o gymharu â chleifion â leptospirosis ysgafn [53]. Mae'r crynodiadau uchel hyn o cytocinau mewn cleifion â leptospirosis yn amlygu eu rôl allweddol yn natblygiad leptospirosis difrifol.

Mewn cleifion â haint difrifol, canfyddir lymffocytau CD4+ T â phroffil pro-inflammatory a chynhyrchwyr IL-2 ac IFN- tra bod CD4+ CD25high producer IL-10 bron yn absennol. Nid yw'n ymddangos bod rheoleiddio ymateb imiwn wedi'i gyfryngu gan lymffosyt T yn atal niwed i feinwe a gynhyrchir gan yr ymateb llidiol i Leptospira. Mewn lymffocytau CD4+ T mewn bodau dynol â leptospirosis difrifol, mae cynhyrchiant TNF- a chytocinau pro-lidiol eraill yn uwch nag yn y rhai â ffurf ysgafn y clefyd, sy'n dangos y gellir defnyddio'r cytocinau hyn fel marcwyr o difrifoldeb yng nghyfnod imiwnolegol yr haint [74]. Mae cynhyrchu IL-10 wedi'i gysylltu â'r risg o farwolaeth mewn pobl â leptospirosis; fodd bynnag, roedd astudiaeth a gynhaliwyd ar fodau dynol agored ac asymptomatig yn cysylltu cynhyrchu'r cytocin hwn â rheoli'r ymateb llidiol a goroesi [74]. Yn ystod haint Leptospira, mae cyfryngwyr llidiol a gweithred rhai celloedd leukocyte, megis lymffocytau T, yn cael eu rheoleiddio'n gyflym mewn unigolion gwrthsefyll, mewn cyferbyniad â'r hyn sy'n digwydd mewn unigolion â ffurfiau difrifol o leptospirosis [75].

I grynhoi, nid yw'r ymateb imiwn i haint Leptospira yn cael ei ddeall yn llawn oherwydd ymddygiadau clinigol cleifion â leptospirosis, sy'n rhyngweithio â gwahanol ffactorau ffyrnigrwydd y genom bacteriol, sy'n rhoi gallu pathogenig solet i Leptospira.

5. Amlygiadau Clinigol

Mae amlygiadau clinigol leptospirosis yn amrywiol, yn amrywio o symptomau ysgafn, amhenodol, megis symptomau tebyg i ffliw (twymyn, myalgia, a chur pen), i symptomau difrifol ynghyd ag anafiadau organau cam olaf (ee, AKI, methiant hepatig acíwt. , a diathesis gwaedu, a elwir hefyd yn syndrom Weil), hemoptysis acíwt o hemorrhage ysgyfeiniol, dryswch acíwt o feningoenceffalitis aseptig, a methiant y galon acíwt o myocarditis acíwt neu is-aciwt [7]. Yn unol â hynny, mae'r tri dangosydd o haint leptospirosis a amheuir yn cynnwys (i)salwch twymyn acíwt, (ii) clefyd melyn, a (iii)anaf acíwt i'r arennau[12]. Rhagfynegyddion math difrifol o leptospirosis yw myalgia difrifol ar y dechrau, tueddiad gwaedu difrifol, a chlefyd melyn amlwg. Yn ddiddorol, mae presenoldeb y naill neu'r llall yn bodoli eisoesclefyd cronig yn yr arennau(maint aren bach) neu arennau chwyddedig, tagfeydd ag anwria yn gysylltiedig â'r canlyniad gwaethaf [12]. Felly, dylai cleifion â chlefyd arennol sy'n gysylltiedig â leptospirosis gael eu trin yn brydlon.

6. Diagnosis

6.1. Diagnosis Clinigol

Mae diagnosis o leptospirosis yn seiliedig ar hanes amlygiad, ffactorau risg, ac amlygiadau clinigol. Gall mynegai uchel o amheuaeth osgoi niwed i organau yn ddiweddarach. Fodd bynnag, mae symptomau leptospirosis yn aml yn cael eu camgymryd am achosion eraill o syndrom twymyn acíwt, megis haint dengue, malaria, hepatitis, a chlefyd hunanimiwn gweithredol. Mae diffyg arwyddion pathognomonic o leptospirosis yn golygu bod y diagnosis yn seiliedig yn betrus ar werthusiad twymyn a myalgia mewn cleifion o ardal endemig. Am y rheswm hwn, mae diagnosis labordy o leptospirosis yn hanfodol.

6.2. Diagnosis Labordy

Mae'n anodd gwneud diagnosis o leptospirosis yn y labordy, yn enwedig yn ystod y cyfnod acíwt. Gellir ei berfformio trwy adnabod spirochetes neu eu cydrannau yn uniongyrchol mewn hylifau corfforol neu feinweoedd, ynysu leptospir mewn diwylliant, neu ganfod gwrthgyrff penodol trwy gydol gwahanol gyfnodau clinigol. Mae'n anodd gwahaniaethu rhwng leptospirosis a salwch, fel malaria, twymyn dengue, rickettsia, ffliw, hepatitis, a thwymyn melyn oherwydd ei ymddangosiad clinigol annelwig. O ganlyniad, mae angen profion labordy i gadarnhau'r diagnosis. Mae canfod gwrthgyrff yn erbyn leptospir, leptospir eu hunain, neu eu hasid deocsiriboniwclëig yn sail i'r profion hyn (DNA). Mae diagnosis labordy cyfredol yn cynnwys adnabod yn uniongyrchol (canfod Leptospira spirochetes neu DNA yn y samplau neu ynysu'r organeb oddi wrth sbesimenau) a chanfod anuniongyrchol (diagnosis serolegol neu seroleg ar gyfer adnabod haint Leptospiral, sy'n seiliedig ar ganfod gwrthgyrff penodol yn erbyn amrywiol). Antigenau leptosbiradol) (Tabl 1).

6.2.1. Archwiliad Microsgopig Uniongyrchol, Diwylliant, a Chanfod Antigen

Troellau tenau, llachar, gweithredol symudol yw leptospir gyda nyddu cyflym nodweddiadol (symudedd plycio) o dan y microsgop maes tywyll confensiynol (DFM) ac mae angen tua 10 leptospir/ml i ganfod un gell fesul cae. Gydag wythnos yn hirach yn ystod yr haint, mae tua 10% wedi marw mewn cynnyrch DFM (o 100 i 90%). Er mwyn gwella'r sensitifrwydd, mae sawl dull staenio arbennig; Warthin - Staeniad arian serennog [76] a gwrthimiwnedd (immunohistochemistry, immunofluorescence, dal antigen imiwnmagnetig, a staenio immunoperoxidase [77]) sy'n gofyn am y gwrthgyrff sylfaenol serovar penodol (ar wahân neu gyfuniad).

Tabl 1. Profion labordy ar gyfer diagnosis leptospirosis.

LAMP, ymhelaethu isothermol dolen-gyfryngol; PCR, adwaith cadwyn polymeras; NGS, dilyniant cenhedlaeth nesaf; IHA, hemagglutination anuniongyrchol; ELISA, assay immunosorbent-gysylltiedig ag ensymau; IgM, imiwnoglobwlin M; MAT, prawf agglutination macrosgopig; MCAT, prawf agglutination microcapsule; DNA, asid deocsiriboniwcleig; DFM, microsgopeg maes tywyll

Ar yr un pryd, mae diwylliant Leptospira o waed, wrin, hylif serebro-sbinol, a meinwe biopsi yn bosibl yn ystod yr ychydig ddyddiau cyntaf i 10 diwrnod ar ôl i symptomau salwch ddechrau (cyfnod leptospirosis). Oherwydd eu bod yn tyfu'n araf (amser dyblu 6-8 h), yn gyflym, ac yn dueddol o gael eu halogi, rhaid cadw'r samplau meithrin am o leiaf 3-4 mis cyn cael eu taflu fel rhai negyddol) gyda dim ond 23% o sensitifrwydd ond mae angen. ar gyfer y prawf sensitifrwydd cyffuriau [6]. O'r herwydd, mae cyfryngau EMJH (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris) (cymhleth albwmin oleic) yn cynnwys albwmin serwm buchol (ffracsiwn V), Tween 80, thiamine amoniwm clorid, monopotasiwm ffosffad, ffosffad deuodiwm, a maetholion amrywiol [78] sydd fwyaf. a ddefnyddir yn gyffredin, tra bod angen y cyfryngau T80/40/LH mwy arbenigol (polysorbate 40, hydrolysad lactalbumin, superoxide dismutase, a serwm cwningen), ar gyfer rhai serovarau [79]. Ar gyfer unigedd sylfaenol yr ystod fawr ac amrywiol o leptospires pathogenig cyflym, mae Hornsby-Alt-Nally (HAN), yn ymddangos yn gyfrwng da [80].

Mae canfod antigenau Leptospiral gan immunoperoxidase, immunofluorescence, neu system dal antigen imiwnomagnetig wedi'i ddatblygu ar gyfer sbesimenau â beichiau bacteriol isel neu ni ellir defnyddio microsgopeg maes tywyll ond nid yw'n cael ei berfformio'n rheolaidd oherwydd y cyfyngiad ar wrthgorff cynradd [77]. Mewn cyferbyniad, adnabyddiaeth asid niwclëig gyda mwyhad DNA newydd; adwaith cadwyn polymeras (PCR) (hy, PCR nythu, PCR meintiol [qPCR]), ymhelaethu isothermol dolen-gyfryngol (LAMP), a dilyniannu cenhedlaeth nesaf (NGS) yn werthfawr ar gyfer diagnosis labordy cynnar a chywir, yn enwedig gyda'r Ynysu leptospira gan ddefnyddio brechiad cyfryngau biolegol a hybrideiddio DNA (prob DNA) [81,82]. Gellir ymhelaethu ar amrywiaeth o dargedau Leptospiral (fel RNA ribosomal 16S) neu DNA ar gyfer diagnosis [83] ac mae PCR amser real (RT-PCR) yn fwy sensitif a phenodol na PCR safonol [84]. Oherwydd y gallai rhai paent preimio RT-PCR rwymo i safle amhenodol, gan arwain at ganlyniadau positif ffug, mae'r profion PCR amlblecs amser real mwyaf diweddar wedi'u datblygu gan ddefnyddio dwy set o preimwyr [85]. Mae PCR nythu hefyd yn helpu i ganfod safleoedd DNA mwy penodol a sensitif gyda setiau ychwanegol o breimwyr [86,87]. Fodd bynnag, y tueddiadau presennol ar gyfer diagnosis leptospirosis yw'r defnydd o dechnegau serolegol a moleciwlaidd, megis PCR ac ELISA (haws na'r safon aur MAT serolegol), ar gyfer gwledydd sy'n gyfyngedig o ran adnoddau [88,89]. Yn ogystal, mae'r dechneg LAMP [90] i ganfod genyn rRNA 16S (rrs), yn gost-effeithiol, yn gyflym ac yn gynnyrch uchel ar gyfer canfod y leptospirau pathogenig yn yr wrin. Ar hyn o bryd, NGS yw'r dull diwylliant-annibynnol mwyaf manwl gywir ar ddadansoddi genom craidd mewn hylifau'r corff (gwaed ac wrin) [91] a chyfeiriad profion leptospirosis yn y dyfodol fyddai symud tuag at ddosbarthiad moleciwlaidd leptospir, sy'n goresgyn y cyfyngiad ar ynysu diwylliant leptospir oddi wrth samplau clinigol. Felly, mae gwerth PCR yn y diagnosis clinigol o leptospirosis yn arbennig o dda ac mae nifer o dechnegau modern yn dod i'r amlwg

6.2.2. Canfod Gwrthgyrff Gwrth-Leptospira

Defnyddir sawl diagnosis serolegol; er enghraifft, profion gwrthgyrff genws-benodol (hemagglutination anuniongyrchol [IHA], assay imiwnosorbent sy'n gysylltiedig ag ensymau [ELISA], Lepto Dri Dot [agglutination latecs], aglutination microcapsule [MCAT]), a phrofion gwrthgyrff serovar-benodol (prawf aglutination microsgopig [ MAT]) [92,93]. O’r herwydd, meini prawf MAT ar gyfer diagnosis yw (i) cynnydd pedwarplyg mewn sera pâr (serodrosi’r haint presennol) neu (ii) titer uchel sengl (Yn fwy na neu’n hafal i 1:400 neu 1:800, yn uwch mewn epidemig ardaloedd) (seropositivity) (gall gwrthgyrff barhau am beth amser ar ôl cael eu heintio neu'r croes-adwaith â chlefydau eraill). Yn ogystal, mae MAT yn gofyn am banel byw o'r holl serovarau Leptospira yn y rhanbarth, gyda phanel o serovarau wedi'u safoni'n lleol [93,94] yn dilyn Sefydliad y Byd ar gyfer Iechyd Anifeiliaid (19 antigen yn cynrychioli 15 serogroups) [95]. Oherwydd bod modd canfod gwrthgyrff 5-7 diwrnod ar ôl yr haint, gall y prawf MAT fod yn negyddol (titer < 1:50) yn ystod ychydig ddyddiau cyntaf yr haint. Gellir cyflawni diagnosis o leptospirosis gan samplau wrin [96] gan ddefnyddio seroleg a chanfod moleciwlaidd (16S rRNA), yn enwedig mewn cleifion â haint diweddar (MAT Mwy na neu'n hafal i 1:800 neu ELISA IgM-positif neu'r ddau) [97] .

Gydag adnoddau cyfyngedig, mae sgôr rhagfynegiad clinigol [98] yn seiliedig ar yr hanes clinigol perthnasol a phrofion labordy cysylltiedig â sgorio mewn saith agwedd fel a ganlyn: hypotension (3), clefyd melyn (2), poen cyhyrau (2), AKI (1.5) , hemoglobin isel (3), hypokalemia gyda hyponatremia (3), a neutrophilia (1) yn cael ei gynnig (sgôr cryno torbwynt o 4 sydd â'r arwynebedd o dan gromlin nodwedd weithredu'r derbynnydd {{10}}.78 ( 95% CI 0.68–0.89) ar gyfer diagnosis leptospirosis [77]). Gallai'r sgôr tebygolrwydd Thai-Lepto-ar-derbyn hwn fod yn arf diagnostig ar gyfer diagnosis cynnar rhagdybiol o leptospirosis mewn cleifion sy'n cyflwyno ag amheuaeth glinigol ddifrifol o'r clefyd.