Lleihau Cadwraeth Arennol/Anafiadau Reperfusion gan Hyperthermia Rheoledig Yn ystod Ex Vivo Machine Perfusion

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Thomas Minor1,*,† a Charlotte von Horn1,†

Effaith bosibl reno-amddiffynnol triniaeth sioc-wres byr rheoledig yn ystod persawr peiriant ex vivo ynysig o grafts rhoddwyr cynreperfusiondylid ymchwilio iddynt mewn astudiaeth gynradd yn vitro.DeuluArennau(n = 14) wedi'u hadalw ar ôl 20 munud o waharddiad ar y galon o'r rhoddwr ac yn destun 20 awr o storfa oer statig yn ateb Prifysgol Wisconsin. Cynreperfusion,Arennauyn destun 2 awr o berfeddion peiriant ail-lunio gyda chynnydd graddol yn y tymheredd persawr hyd at 35°C. Yn hanner yArennau(n = 7), gweithredwyd impulse hyperthermig byr (10 munud o berfedd ar 42°C) yng nghyfnod y peiriant. Gwelwyd adferiad swyddogaethol o'r graddfeydd ar ail-ddefnyddio normothermig yn vitro. Arweiniodd triniaeth Hyperthermig at gynnydd o 50% o brotein sioc gwres (HSP) 70 a HSP 27 mRNA ac fe'i hategwyd gan ~ 50% o welliant o sodiwm a glwcos ar ail-ddefnyddio, o'i gymharu â'r rheolaethau. At hynny, gostyngwyd colled arennol o aminotraws aspartate yn sylweddol i draean o'r rheolaethau yn ogystal â cholli protein wrinol, a werthuswyd gan y gymhareb albwmin i creatinine. Daethpwyd i'r casgliad ei bod yn ymddangos bod triniaeth sioc-wres ex vivo yn opsiwn hawdd ei weithredu ac addawol i wella peiriannau hunan-drechol arennol yn erbynreperfusionAnafar ôl cadwraeth sy'n haeddu ymchwiliad pellach mewn modelau rhagflaenol.

Cistanche dr vita opcyn dda iawn iarenreperfusion

Uchafbwyntiau'r Astudiaeth

BETH YW'R WYBODAETH GYFREDOL AM Y PWNC?

✔ Mae sefydlu proteinau sioc-wres (HSPs) mewn meinweoedd lleol yn fecanwaith trechu adnabyddus mewn ymateb i straen amgylcheddol. Mae uwchraddio'r capel moleciwlaidd hynny'n achosi mecanweithiau trwsio a goddefgarwch yn erbyn celloedd dilynolAnaf. Clinigolarentrawsblannu yn fwy a mwy yn dibynnu ar ddefnyddio meini prawf estynedig organau rhoddwyr sy'n dwyn mwy o dueddiad i isgemia/ail-ddefnyddioAnaf. Mae persawr peiriant Ex vivo o grafftiau organau ymylol yn darparu mynediad breintiedig i'r grafft a phersbectif newydd ar gyfer cymhwysiad hawdd a rheoledig o symbyliad hyperthermig i'r organ ynysig er mwyn sbarduno ymatebion sioc wres a llwybrau signalau dadlwytho sy'n effeithio'n ffafriol ar waethygu anaf meinwe yn olynol a gwellaArennoladferiad ar ôl trawsblannu.

PA GWESTIWN A AETH YR ASTUDIAETH HON I'R AFAEL AG EF?

✔ Rydym yn archwilio effaith amddiffynnol bosibl ysgogiad hyperthermig byr yn ystod cyn-drawsblaniad ex vivoarenpersawrar ganlyniad swyddogaethol ar ôl-ischemigreperfusion.

BETH MAE'R ASTUDIAETH HON YN EI YCHWANEGU AT EIN GWYBODAETH?

✔ Mae'r astudiaeth hon yn rhoi rhai arwyddion bod triniaeth hyperthermig yn ystod persawr peiriant arennol ex vivo yn gweithredu fel arf newydd posibl ar gyfer gwella canlyniadau swyddogaethol sydd wedi'u cadw ychydigArennauar reperfusion postischemig. Mae data'n cefnogi rôl berthnasol hSPs o ran lleihau dinistr celloedd a gwella swyddogaeth arennau tiwtor ôl-drosi.

SUT Y GALLAI HYN NEWID FFARMACOLEGOL CLINIGOL

OGY NEU WYDDONIAETH GYFIEITHU?

✔ Mae ychwanegu hyperthermia rheoledig byr at brotocol persawr peiriant normothermig sefydledig yn ddull hawdd ei weithredu ar gyfer cymhwyso clinigol a gall gyfrannu at wella'r broses o adfer organau ar ôl trawsblannu.

Mae trawsblannu arennau clinigol yn dibynnu mwy a mwy ar ddefnyddio meini prawf estynedig organau rhoddwyr sydd wedi'u difrodi cyn eu adalw neu sy'n debygol o fod yn llai na'r gorau posibl

ansawdd. Ynghyd â'r gyfran gynyddol o'r organau hynny sy'n fwy agored i sbardunau niweidiol ar gadwraeth isgemeg, 1,2 newid meinwe

sy'n gysylltiedig ag anaf isgemia/reperfusion yn fater pwysig sy'n tyfu mewn trawsblannu arennol sy'n sbarduno camweithrediad cellog ar ail-ddefnyddio.

Mae sefydlu capel cellog a sbarduno ffenoteip signal amddiffynnol (e.e. , drwy straen thermol isgritigol), yn fecanwaith adnabyddus i leihau newidiadau meinwe sy'n berthnasol i sefyllfa straen ddiweddarach a herio homeostasis meinweoedd.3,4

Mae dyfodiad persawr peiriant ynysig fel dewis amgen neu ategiad i storio oer isgemeg o grafftiau rhoddwyr ymylol wedi agor persbectif newydd ar gyfer cymhwyso her hyperthermig yn hawdd ac yn rheoledig i'r organ ynysig er mwyn sbarduno ymateb sioc wres a llwybrau signalau dadlwytho sy'n effeithio'n ffafriol ar waethygu anafiadau o feinwe yn olynol a gwella adferiad arennol ar ôl trawsblannu.

Gwelwyd bod effaith rag-drefnu'r ymateb i sioc wres yn arbrofol i fod yn gysylltiedig â chynnydd uwch-normal dros dro o cytoresistance5 yn ogystal â bod yn weithredol drwy wella mecanweithiau ail-bâr cellog eilaidd.6 Yn fwy diweddar, dangoswyd y gall sefydlu proteinau sioc-wres (HSPs) roi amddiffyniad hyd yn oed pan gaiff ei ysgogi'n gynnar ar ôl i'r sarhad gwreiddiol i'r feinwe ddigwydd eisoes.7

Mae'r mynediad breintiedig i'r organ ynysig yn atal gofynion beichus ar gyfer gwresogi'r corff cyfan ac yn cael sgil-effeithiau andwyol ar organebau rhoddwyr neu dderbynwyr.

Felly, bwriadwyd i'r astudiaeth hon fod yn ymchwiliad peilot i graffu ar dystiolaeth sylfaenol o driniaeth hyperthermig yn ystod persawr peiriant arennol ex vivo i weithredu fel arf newydd posibl ar gyfer gwella'r arennau sydd wedi'u cadw'n ymarferol ar ôl i'r postischemig gael ei ail-ddefnyddio.

DULLIAU

Cynhaliwyd yr holl arbrofion ar arennau a gafodd eu hadalw o foch Tirrace almaenig benywaidd marw (oedran: 10 wythnos 12 wythnos, pwysau: 25 a 30 kg). Dilynwyd cyfraith ffederal ynghylch diogelu anifeiliaid ac egwyddorion gofal anifeiliaid labordy (cyhoeddiad Sefydliadau Iechyd Cenedlaethol (NIH) rhif 85-23, diwygiwyd 1985). Roedd anifeiliaid yn cael eu trin yn unol â'r rheolau ac ar ôl i'r awdurdodau lleol eu cymeradwyo.

Dilëwyd yr arennau 20 munud ar ôl y cyfnod cadw cylchrediad y gwaed a'u fflysio ar y bwrdd cefn gan ddifrifoldeb 100 cm gydag ateb oer (4°C) Prifysgol Wisconsin nes i'r elifiant ddod yn glir. Ni roddwyd heparin ar unrhyw adeg.

Wedi hynny, roedd grafts yn cael eu storio am 18 awr mewn beaker wedi'i lenwi ag ateb Prifysgol Wisconsin a thymheredd a reoleiddir i 4°C drwy gyfrwng cryothermostat.

Yn y grŵp rheoli, roedd yr arennau wedyn yn destun 2 awr o ocsigen (95% O2; 5% CO2) persawr peiriant normothermig gydag ateb Aqix RS I wedi'i ategu â 40 g/L o albwmin serum buchol. Fel y cynigiwyd yn gynharach, dechreuwyd 8,9 y ffiws mewn hypothermia ac yna cynnydd graddedig hyd at 35°C o fewn y 60 munud cyntaf, a reolir gan griothermostat sy'n cylchredeg.

Yn y grŵp arbrofol, cynhwyswyd cyfnod byr o hyperthermia rheoledig (CH) yn y persawr ynysig

Ex Vivo Heat-Shock Trin Grafts Organau Mân a phrotocol von Horn. Ar ôl cyrraedd 35°, cafodd tymheredd y persawr ei godi dros dro ymhellach i 43°C am 10 munud (Ffigur 1) cyn parhau â'r persawr ar 35°C am weddill y cyfnod o 2 awr. Deilliodd amser ac uchder y cynnydd yn y tymheredd o arbrofion sgrinio cynyddrannol blaenorol sy'n anelu at gael effaith gyson.

Mewn tri arbrawf, rheolwyd pwysau rhannol ocsigen yn y feinwe drwy ddefnyddio synhwyrydd ocsigen optig o fath microfiber, wedi'i gysylltu â mesurydd ocsigen ffibr-optig wedi'i ddigolledu â thymheredd (Microx 4, synhwyro manwl PreSens, Regensburg, yr Almaen), a oedd ar yr un pryd yn cofnodi'r tymheredd cyfatebol drwy brawf thermistor.

Gosodwyd y nodwydd yn rhanbarth corticaidd mewnol yr aren er mwyn dogfennu ocsigen digonol o feinwe hyd yn oed yn ystod cyfnodau hyperthermig o berfeddion.

Model ail-ddefnyddio'r arennau ynysig

Gwerthuswyd adferiad yr arennau o anaf cadwraeth/ail-ddefnyddio gan ddefnyddio model ail-ddefnyddio in vitro, fel y disgrifiwyd yn flaenorol.10

Yn gryno, roedd yr arennau wedi'u fflysio'n oer gyda 100 mL o hydoddiant halwynog ar ddiwedd cyfnod ail-lunio'r peiriant ac yna'n cael eu cadw ar dymheredd ystafell am 20 munud i efelychu'r ail gyfnod isgemia cynnes yn ystod mewnblannu llawfeddygol yn vivo. Defnyddiwyd yr amser hwn hefyd ar gyfer cannwleiddio'r wreter gyda thiwb mawr i ganiatáu ar gyfer casglu wrin wrth ei ail-ddefnyddio.

Rhoddwyd yr arennau mewn siambr plexiglass a reolir yn thermostatig a'u taro drwy'r rhydweli arennol ar bwysau pwls cymedrig o 90 mmHg. Roedd yr ef- rhugl gwythiennol yn draenio'n rhydd i'r gronfa ddŵr. Perfformiwyd ocsigen o'r persawr gyda 95% O2/5% CO2 gan ddefnyddio ocsigenydd ffibr gwag a reolir gan thermomedr. Roedd pwysau'r rhydweli'n cael ei gynnal drwy bwmp rholer a reolir gan servo ar y cyd â throsglwyddydd pwysau sy'n gysylltiedig â'r cannula persawr rhydweli. Casglwyd wrin o'r tiwb Addysg Gorfforol a fewnosodwyd i'r wreter a arweiniwyd i'r tu allan i'r gronfa ddŵr. Cafodd pob 100 mL o wrin a gasglwyd eu hidlo a'u hailddefnyddio i'r gronfa ddŵr mewn trefn

Ffigur 1Arennolmeinwe cortigol pO2 (llinell dotiau) yn ystod persawr peiriant ex vivo mewn perthynas â'r tymheredd persawrus priodol (llinell solet).

cynnal cyfansoddiad electrolyt cyson y persawr dros amser.

Gweithdrefnau dadansoddol

Mesurwyd pwysedd rhannol ocsigen a chrynodiadau persawr o glwcos ac electrolytau mewn dadansoddwr nwy gwaed pH (labordy sylfaen asid ABL 815flex, Radiomedr, Copenhagen).

Pennwyd gweithgareddau ensran o aminotransferase aspartate (AST) a chrynodiadau o creatinine mewn modd arferol drwy adlewyrchu ffotometreg ar uned pwynt gofal Reffltron Plus (Roche Diagnostics, Mannheim, yr Almaen).

Arennolcyfrifwyd cliriad ar gyfer y gwahanol gyfnodau fel creatinine wrinol × llif wrin/creatinine persawrus.

Mesurwyd y crynodiad albwmin yn y ffracsiwn wrin ar ddiwedd yr arbrawf yn ffotometrig gan ddefnyddio'r ymosodiad marw-rwymol gyda gwyrdd bromocresol yng nghanol labordy ysbyty'r brifysgol a normaleiddio swm y protein yn erbyn y crynodiadau cyfatebol o creatinine fel albwmin wrinol i gymhareb creatinine.

Cyfrifwyd y llwyth wedi'i hidlo o sodiwm (FL Na) fel

FL = GFR × Na

FRNa = (FLNa − Na(wrin) ×urineflow)∕FLNa

Cyfrifwyd llwyth wedi'i hidlo ac ad-drefnu ffracsiwn o glwcos yn unol â hynny.

Gwrthdroi trawsgrifio ac adwaith cadwyn polymerase dilynol

Roedd cyfanswm yr RNA wedi'i ynysu o samplau o feinwe wedi'u rhewi o'r cortex allanol a'u dadansoddi fel y disgrifiwyd yn flaenorol.8

Cyfrifwyd gwerthoedd sylfaenol o samplau o feinwe a gymerwyd o'r hanfodolArennauex vivo. Cafodd y canlyniadau eu meintioli gan ddefnyddio'r dull ΔΔCt. Roedd genynnau targed yn cael eu normaleiddio i ddadhydradu glyceraldiffyg 3-ffosffad fel safon fewnol. Cyfrifwyd gwerthoedd mynegiant genynnau plygu ar gyfer pob sampl unigol fel y'u normaleiddio yn erbyn gwerthoedd llinell sylfaen.

Defnyddiwyd y primerau canlynol (a brynwyd gan Qiagen GmbH, Hilden, yr Almaen) yn yr astudiaeth: glyceraldiffyg 3-ffosffad dadhydradu (rhif PPS00192A), HSP72 (rhif PPS00074A), HSP27 (rhif PPS01262), a HO-1 (rhif PPS01191A).

Blot y Gorllewin

Perfformiwyd imiwnedd protein o lysiau celloedd cyfan o'r tu allanArennolcortex gan sodiwm dodecyl sylffad-polyacrylamide gel electrofforesis a throsglwyddo electrofforetig i gofiadwy nitrocellulose, fel y disgrifiwyd yn flaenorol.8 Gwnaed staenio gyda Ponceau S wedi dilysu unffurfiaeth llwytho a throsglwyddo protein.

Roedd y deori gyda gwrthgyrff sylfaenol yn cael ei ffurfio dros nos ar 4°C (dew gwrth-ffosffo a reoleiddir gan signalau alloffer (ERK, Thermo Fisher, #MA5-15174—1:500) neu wrth HSP 72 (StressMarq Biowyddoniaeth, #SCM-100—1:300). Ar ôl deori gyda gwrthgyrff eilaidd sy'n gysylltiedig â'i gilydd (1:1,000) am 1 awr ar dymheredd ystafell, canfuwyd protein drwy well cemiluminescence gan ddefnyddio Sganiwr Blot C-Digit (Li-COR).

Perfformiwyd meintioli cynnwys protein yn ddwysedd gyda fersiwn gel y Cenhedloedd Unedig-SCAN-IT 6.1 (Silk Gwyddonol, Orem UT) fel y'i normaleiddio yn erbyn mynegiant o gyfanswm ERK (Thermo Fisher, #MA5-15174) neu ß-actin (Thermo Fisher, #PA1-46296).

Ystadegau

Mynegir yr holl werthoedd fel modd ±SD ar gyfer n = 7 anifail fesul grŵp a phrofwyd gwahaniaethau rhwng grwpiau gan brawf t di-dâl, dwy ochr gan ddefnyddio cywiriad Welch ar gyfer amrywiannau anghyfartal, os na nodir fel arall. Pennwyd arwyddocâd ystadegol yn P<>

CANLYNIADAU

Persawr peiriant

Yn ystod ail-lunio'r peiriant wedi'i reoli'n ysgafn, arweiniodd hyperthermia dros dro at ostyngiad dros dro yn visi- blew ynArennolmeinwe cortigol pO2 (Ffigur 1), a oedd, serch hynny, bob amser yn aros yn uwch na 200 mmHg ac felly'n amlwg yn cydymffurfio â'r gofynion ffisiolegol yn ystod persawr normothermig yr adroddwyd ei fod yn 30–50 mmHg.11,12

Arennolroedd rhyddhau AST i'r persawr cylchredeg hyd yn oed ychydig yn is yn y grŵp hyperthermia nag o dan amodau rheoli (19.8 ± 12.1 vs. 33.3 ± 25.9 U/L; CH vs. rheolaeth, nid yn arwyddocaol).

Darlleniad Molecwlaidd o hyperthermia dros dro yn ystod persawr peiriant ex vivo

Arweinia cadwraeth ac ail-ddefnyddio at ymsefydlu nodedig o HSPs hyd yn oed o dan amodau rheoli gyda ~ 2-plyd, 8-plyd, a hyd yn oed cynnydd o 100 gwaith o drawsgrifiadau mRNA o gywair- ygenase 1, HSP 27, a HSP 72, yn y drefn honno.

Er hynny, mae hyperthermia dros dro a reolir yn ystod persawr peirianyddol wedi gwella'r cynnydd hwn mewn ymsefydlu genynnau tua 50% ym mhob achos. Canfuwyd bod yr effaith yn arwyddocaol iawn i HSP 27 yn ogystal â HSP 72, ond ni ellid dangos arwyddocâd ystadegol yn ymwneud â sefydlu ocsigenase cywarch 1 (Ffigur 2).

Mae ffosfforiad ERK yn ddigwyddiad signal amddiffynnol cyflym ac ymatebol a allai hefyd hyrwyddo mynegiant hSP 72.13

Ymchwiliwyd iddo fel sgil-effeithiau cynnar straen gwres ar y lefel protein. Datgelodd dadansoddiadau blot y Gorllewin fod hyperthermia dros dro yn ystod y peiriant yn gwella'n sylweddol faint o ffosfforyla ERK yn y feinwe o'i gymharu â'r grŵp rheoli (Ffigur 3). Yn gyfatebol, canfuwyd hefyd bod mynegiant protein o HSP 72 yn cael ei godi'n sylweddol uwchlaw gwerthoedd con-trol ar ôl hyperthermia rheoledig yn ystod persawr y peiriant.

Hyperthermia dros dro yn gwellaArennoladferiad ar ôl cadwraeth

Llif persawrus yn ystod yr ail-gynhyrchu ar gyfartaledd rhwng 300 a 400 mL/munud heb unrhyw wahaniaethau rhwng y ddau

grwpiau. Roedd cynhyrchu wrin hefyd yn debyg yn y ddau grŵp gyda 897 o ± 354 vs. 601 ± 280 mL/90 munud (rheolaeth vs. CH).

Arennolcymerwyd rhyddhau AST fel paramedr o anaf cellog byd-eang ac fe'i dilynwyd yn ystod yr ail-ddefnyddio (Ffigur 4). Gwelir bod triniaeth hyperthermig wedi arwain at werthoedd is i ddechrau ar ddechrau'r ail-ddefnyddio ac wedi lliniaru ymhellach y cynnydd cynyddol yn ystod persawr parhaus.

Arennolgwerthuswyd swyddogaeth celloedd tiwbaidd gan y dadansoddiad o sodiwm ac ad-drefnu glwcos o'r uwchfioled (Ffigur 5). Canfuwyd bod cyfraddau ail-amsugno ffracsiynol oArennau, a oedd gynt yn destun hyperther-mia rheoledig yn ystod persawr peiriant, yn rhagori'n sylweddol ar rai'r grŵp rheoli o ~ 40%.

Er mwyn eithrio'r posibilrwydd bod rheolaethArennauefallai y byddem wedi cael llwythi uwch absoliwt o sodiwm neu glwcos yn yr uwchfioled, gwnaethom hefyd bennu cyfanswm llwyth hidlo'r ddau sylwedd, nad oedd, fodd bynnag, yn wahanol rhwng y ddau grŵp gyda FL Na yn cyfateb i 2.7 ± 0.7 a 2.5 ± 0.8 mmol/munud a FL glu i 24.8 ± 12.1 a 28.6 ± 9.4 mg/min (rheolaeth vs. CH, yn y drefn honno).

Roedd cyfraddau hidlo glomeraidd hefyd yn gyfartal yn y ddau grŵp; gwerthoedd clirio ar gyfer creatinine oedd 0.25 ± 0.06 mL/g/munud yn y grŵp rheoli, ac i 0.24 ± 0.08 mL/g/munud ar ôl CH.

I'r gwrthwyneb, lleihawyd gollyngiadau protein wrinol yn sylweddol yn yArennaua oedd yn destun CH (Ffigur 6).

TRAFODAETH

Mae'r defnydd o bersawr peiriant ex vivo yn cynrychioli tuedd sy'n esblygu o ran rheoli cadwraeth graddiad cyn trawsblannu organau.

Yn ystod y degawd diwethaf, mae persawr peiriant hypothermig wedi'i sefydlu fel dull gwell o gadw o'i gymharu â storfa oer statig syml 14,15 a daeth yn boblogaidd ar gyfer cadw risg uwch yn ogystal â meini prawf cyn-dueddu organau.14–16

Dangoswyd bod symbyliad Pulsatile o'r fasgiwlar yn ystod y cyfnod corporeal ychwanegol 17 yn ogystal â phresenoldeb ocsigen18 yn cynnalArennolhomeostasis a gwellaswyddogaetholdeilliannau ar ôl trawsblannu.

Bu datblygiadau technegol diweddar yn meithrin tuedd newydd tuag at berfeddion peiriant normothermig fel dewis amgen mwy ffisig i'r technolegau persawr hypothermig, sy'n gwneud iawn am y gwariant uwch gan gynnal a chadw homeostasis metabolig a chyfle mwy dilys i werthuso'r graddiad a gedwir cyn trawsblannu.19,20

Y tu hwnt i hyn, mae persawr peiriant normothermig yn llwyfan delfrydol ar gyfer ymyriadau therapiwtig i'r organ ynysig a allai wasanaethu dibenion cyflyru sy'n anelu at leddfu canlyniadau anaf i'r adalw/cadw blaenorol neu i ragamodau yn erbyn anaf i'r ail-ddefnyddio'n ddiweddarach ar ôl isgemia cynnes ac ail-ddefnyddio ar drawsblannu.

cistanche kidney wirkung

Canfuwyd bod triniaeth sioc-wres fel dull therapiwtig yn hyrwyddo mecanweithiau amddiffyn effeithiol iawn yn yr arennau ac yn ysgogi goddefgarwch i inswlin penodol drwy sefydlogi strwythur protein ac uniondeb cellog. Mae'r effaith hon yn seiliedig yn bennaf ar synthesis HSPs penodol, sy'n cael eu mynegi'n gyfansoddiadol yn yr arennau ac y gellir eu rheoleiddio'n fawr mewn ymateb i amrywiaeth o gyflyrau straen.4

Mae'r astudiaeth hon yn dangos bod her hyperthermig fer yn ystod persawr yr arennau ynysig i bob pwrpas yn ennyn adwaith sioc-wres moleciwlaidd, fel y dangosir gan y cyn-drawsgrifio ac ar y lefel protein, ac yn ysgogi signalau goroesi drwy'r llwybr ERK. Felly, nid oedd y weithdrefn a ddisgrifiwyd yn gysylltiedig â hypocia meinweoedd ymddangosiadol, er gwaethaf persawr ynysig heb gludwyr ocsigen ychwanegol.

Mae wedi'i sefydlu o'r blaen, y gallai'r broses o sefydlu HSPs ddechrau o fewn< 1="" hour21="" and="" that="" the="" expression="" of="" hsp="" 72="" increases="" to="" multitudes="" already="" after="" 3="" hours.22="" hsp="" 70="" is="" the="" most="" prominent="" chaperone="" responsive="" to="" hyper-thermic="" stress="" and="" plays="" a="" pivotal="" role="" in="" tissue="" protection="" by="" augmentation="" of="" the="" cellular="" self-defense="">

Mae HSP 72 yn atal camblygu proteinau, 5 yn hwyluso'r gwaith o gael gwared ar brotestiadau sydd wedi'u difrodi, 6 ac yn cymryd rhan mewn ail-lunio ac atgyweirio protein. Wrth gefnogi prosesau trwsio celloedd sy'n llawer llai costus na synthesis de novo. Felly mae HSP 72 yn lleihau anghenion metabolig yn ystod y sefyllfa dyngedfennol wrth ail-ddefnyddio ar ôl anaf cellog 21 ac felly'n helpuadferiad cellogrhag sarhad.

Mae sefydlogi cofiadwy lysosomal 23 yn lleihau anaf cellog gan hydrolasau asid a sefydlu marwolaeth celloedd yn olynol. Ar y lefel moleciwlaidd, mae astudiaethau cynharach yn dangos bod HSP 72 yn actifadu'r llwybr MEK/Erk ac mae'r effaith amddiffynnol berthnasol yn gysylltiedig â Raf, MEK, a ffosfforiad Erk a goroesi celloedd.24,25 Yn unol â hynny, yn ein model, arweiniodd CH at ostyngiad sylweddol yn y datganiad cyffredinol o AST, a gymerwyd fel paramedr difrod cellog cyffredinol. At hynny, roedd y cynnydd cynyddol yn yr AST yn ystod yr ail-ddefnyddio parhaus hefyd yn cael ei ddwysáu'n arbennig gan y driniaeth.

Ynghyd â hyn aeth camau lliniaru sylweddol ocamweithrediad yr arennaugan y canfuwyd bod capasiti ail-amsugno celloedd tiwbaidd yn cynyddu ~ 50% dros werthoedd rheoli.

Mae HSP 27 yn HSP pwysau moleciwlaidd isel a ganfuwyd hefyd yn chwaraewr pwysig yn yr ymateb i sioc-wres amddiffynnol yn yr arennau.4 Dengys astudiaethau ar gelloedd tiwbaidd hyrddod fod cronni HSP 27 mewn celloedd tiwtor procsi yn gysylltiedig â mwy o oroesi ac adfywio.26

Yn seiliedig ar ganlyniadau'r astudiaeth beilot bresennol, mae'n ymddangos bod gweithredu her hyperthermig fer i'r protocol persawr peiriant ex vivo yn ffordd hawdd o gyflyru graddiadau arennau sydd wedi'u cadw ychydig sy'n hyrwyddo gwydnwch i anaf i'r ail-ddefnyddio drwy wella'r peiriannau hunan-drechol cellog. Mae dadlau'n dal i fodoli os dylid gwneud persawr peirianyddol o flaen llaw, yn union ar ôl caffaeliad graft 27 er gwaethaf anghyfleustra logistaidd, neu os yw'n fyr, byddai cyfnod persawr isgemeg ar ôl cludo'r organ drwy storio oer statig yn ddigon ac yn haws ei weithredu mewn trefn glinigol.28,29 Byddai'n bosibl cyflyru'r graddiad gan CH yn bosibl yn y naill fodd neu'r llall.

Fodd bynnag, rhaid bod yn ofalus o ran casgliadau terfynol cynamserol. Mae'r aren ynysig (IPK) yn arf defnyddiol ar gyfer astudiaethau sgrinio swyddogaethol 30 ac mae cydberthyniadau rhwng data IPK a chanlyniadau clinigol yn gwneud y model IPK yn arf defnyddiol posibl ar gyfer gwerthuso swyddogaeth arennol.17,31 Fodd bynnag, mae gallu swyddogaethol eithaf cyson y model wedi'i gyfyngu i ychydig oriau, 32 sy'n atal arsylwadau hirdymor.

Gan y gall mynegiant mwyaf posibl o HSPs barhau i ddigwydd y tu hwnt i'r amser hwn, 22 ni fydd cynnydd pellach posibl o effaith amddiffynnol y driniaeth hyperthermig (e.e., o ran gwell adfywio ar ôl inswlin isgemeg) yn cael ei gyfrif yn ein cynllun peilot. At hynny, mae'n hysbys o astudiaethau cynharach mewn modelau eraill, y gall triniaeth sioc-wres neu orbwysleisio HSP 27 a ysgogwyd gan y lentiviral arwain at liniaru ail-weithgaredd chwyddedig organau targed a anafwyd

ynghyd â gostyngiad sylweddol o ymdreiddiad niwroffilig i'r feinwe.33,34

Mae'n hysbys bod ymdreiddiad Leucocyte, yn ei dro, yn ffenomenon math acíwt blaenllaw sy'n sbarduno adweithiau chwyddedig niweidiol ar ôl isgemia arennol ac ail-ddefnyddio yn vivo.

Fodd bynnag, er mwyn eithrio effeithiau andwyol sy'n cyd-fynd ag actifadu celloedd gwaed ar arwynebau tiwb artiffisial, a fyddai'n anochel mewn model estynedig yn vitro, mae'n ymddangos bod trawsblannu ac ail-ddefnyddio gwirioneddol o dan amodau ffisioleg, gan gynnwys morffoleg llongau naturiol, yn orfodol i fynd i'r afael yn gywir ag effeithiau chwyddedig cellog, nad ymdriniwyd â hwy felly yn yr ymchwiliad peilot presennol.

O'r diwedd, dangosodd canfyddiadau diweddar gryn dipyngwahaniaethau rhwng y rhywiaumewn trawsgrifiadau a fynegir mewn celloedd tiwbiau procsi o ddynion vs. menywod a allai adlewyrchu gwahaniaethau sy'n gysylltiedig â rhyw mewn clefyd cronig yr arennau neu fodiwlau genynnau pro-chwyddedig.35 Yn ein hastudiaeth, dim ond anifeiliaid benywaidd a ddefnyddiwyd, gan osgoi gwahaniaethau tybiedig sy'n gysylltiedig â rhyw yn yr adweithiau sioc-wres. O bosibl, nid yw ymddygiad gwahanol o feinwe gwrywaidd, ar y llaw arall, wedi cael sylw ac felly ni ellir rhoi cyfrif amdano yn yr astudiaeth hon.

I gloi, mae ein data hyd yn hyn yn dangos bod persawr hyperthermig byr ex vivo yn ffordd hawdd o ymsefydlu capel yn y graddiad arennol ynysig sy'n rhoi amddiffyniad parenchymal ar ail-greu cynnar ac yn haeddu cadarnhad pellach gan ddefnyddio modelau trawsblannu vivo gydag amseroedd arsylwi estynedig.

Cydnabod. Mae'r awduron yn cydnabod yn ddiolchgar gymorth technegol gwerthfawr Bastian a Regina Lüer.

Cyllid. Ni dderbyniwyd unrhyw gyllid ar gyfer y gwaith hwn.

Gwrthdaro Buddiannau. Ni ddatganodd yr awduron unrhyw fuddiannau sy'n cystadlu yn y gwaith hwn.

Cyfraniadau'r Awdur. Ysgrifennodd T.M. a C.v.H. y llawysgrif. Cynlluniodd T.M. a C.v.H. yr ymchwil. Perfformiodd T.M. a C.v.H. yr ymchwil. Dadansoddodd T.M. a C.v.H. y data.