Ymateb i Lactococws Lactis Mewn Trwynol W136 Mae Atchwanegiad Probiotig mewn CRS Anhydrin yn Gysylltiedig â Modiwleiddio Llid Di-Math 2 Ac Adfywio Epithelial

Cyfiawnhad:

Rydym wedi dogfennu'n flaenorol, mewn unigolion â rhinosinwsitis cronig (CRS) sy'n anhydrin i lawdriniaeth, bod defnyddio Lactococcus lactis W136 byw mewn trwynol, bacteriwm probiotig, yn gwella symptomau sinws-benodol, SNOT-22, ac agwedd mwcosaidd ar endosgopi, ynghyd â gostyngiad mewn pathogenau sinws a chynnydd mewn bacteria amddiffynnol. Mae'r gwaith presennol yn archwilio'r mecanweithiau moleciwlaidd sy'n sail i'r arsylwadau hyn gan ddefnyddio trawsgrifiad o'r mwcosa sinws.

Mae lactococcus lactis yn probiotig a all gynnal iechyd pobl trwy reoleiddio microflora berfeddol a gwella imiwnedd. Dyma'r berthynas rhwng lactococcus lactis ac imiwnedd:

1. Helpu i wella imiwnedd: Gall lactococcus lactis hyrwyddo cyfanrwydd ac ymateb imiwn y rhwystr mwcosaidd berfeddol, a hyrwyddo amlhau ac actifadu celloedd imiwnedd mwcosol berfeddol, a thrwy hynny wella imiwnedd dynol.

2. Lleihau adweithiau alergaidd: Pan fydd y system imiwnedd allan o gydbwysedd, bydd yn arwain at adweithiau alergaidd. Fodd bynnag, gall Lactococcus lactis leihau'r achosion o adweithiau alergaidd trwy reoleiddio cyflwr actifadu celloedd imiwnedd yn y corff.

3. Gwrthwynebiad i bathogenau: Gall lactococcus lactis atal twf ac atgenhedlu bacteria a firysau niweidiol trwy waharddiad cystadleuol a chynhyrchu sylweddau gwrthfacterol, a thrwy hynny wella imiwnedd dynol.

I gloi, mae presenoldeb lactococcus lactis yn chwarae rhan bwysig mewn imiwnedd dynol. Gall pobl hyrwyddo gwella imiwnedd trwy fwyta bwydydd llawn L. lactis neu ychwanegu at probiotegau L. lactis. Felly, mae angen inni wella imiwnedd a deall pwysigrwydd imiwnedd. Gall cistanche wella imiwnedd. Mae Cistanche yn cynnwys amrywiaeth o gynhwysion sy'n weithgar yn fiolegol, megis polysacaridau, madarch, a Huangli. Gall y cynhwysion hyn ysgogi celloedd amrywiol y system imiwnedd a chynyddu eu gweithgaredd imiwnedd.

Cliciwch ar fanteision iechyd cistanche

Dull:

Brwshys epithelial a gasglwyd yn rhagolygol fel is-astudiaeth o'r. Defnyddiwyd treialon clinigol lactisW136 i archwilio ymatebion epithelial i ychwanegiad microbiom gan ddefnyddio dadansoddiad biowybodeg heb ragdybiaeth o ddadansoddiad mynegiant genynnau. Casglwyd samplau gan bedwar ar hugain o gleifion â CRS sy'n anhydrin i reolaeth feddygol a llawfeddygol yn rhagolygol yn ystod treial clinigol yn asesu effaith 14 diwrnod o ddyfrhau trwynol AGB gyda 1.2 biliwn CFU o facteria probiotig L. lactis W136 byw (CRSwNP {{8}). }, CRSsNP=7). Casglwyd brwshys sinws dan arweiniad endosgopig fel rhan o'r astudiaeth gychwynnol, a pherfformiwyd brwsio yn union cyn ac ar ôl y driniaeth. Yn dilyn echdynnu RNA, aseswyd samplau gan ddefnyddio Illumina HumanHT-12 V4 BeadChip. Cyfrifwyd mynegiant genynnau gwahaniaethol, a pherfformiwyd dadansoddiad cyfoethogi llwybr i nodi prosesau a allai fod yn gysylltiedig.

Canlyniadau:

Aseswyd trawsgrifiadau a llwybrau a nodwyd yn wahaniaethol ar gyfer y boblogaeth gyffredinol a ffenoteipiau clinigol CRSwNP a CRSsNP. Roedd patrymau ymateb i driniaeth yn debyg ar draws pob grŵp, gan awgrymu llwybrau ar gyfer rheoleiddio imiwnedd a rheoleiddio celloedd epithelial. Mae'r rhain yn debyg i'r patrymau gwelliant a welwyd yn dilyn triniaeth lwyddiannus gyda llawdriniaeth sinws endosgopig neu azithromycin.

Casgliad:

Mae proffilio mynegiant genynnau yn dilyn cymhwyso bacteria byw i'r epitheliwm sinws afiach yn amlygu goblygiadau cydrannau lluosog yr echelin rhwystr llid-microbiome-epithelaidd sy'n gysylltiedig â CRS. Mae'n ymddangos bod yr effeithiau hyn yn cynnwys adfer epithelial a modiwleiddio imiwnedd cynhenid ​​​​ac addasol, gan gefnogi'r diddordeb posibl o dargedu'r epitheliwm sinws a'r microbiome fel therapïau CRS posibl.

Rhagymadrodd

Sicrheir homeostasis ceudod sinws trwy ryngweithio parhaus y rhwystr epithelial â microbiota preswyl, sy'n gwasanaethu nid yn unig ymatebion imiwn ond hefyd gwahaniaethu ac adfywio epithelial. Mae rhinosinwsitis cronig (CRS) yn gyflwr llidiol ar y llwybrau anadlu uchaf o darddiad ansicr a nodweddir gan amhariad ar homeostasis arferol gyda llid meinwe dilynol, dysbiosis microbiome, a chamweithrediad epithelial (1) Mae newidiadau nodweddiadol yn cynnwys ymdreiddiad gyda chymysgedd amrywiol o Math 2 a Celloedd llidiol Math 1 / Math 17, a swyddogaeth epithelial ac adfywiad â nam, ynghyd â dysbiosis microbiome cydredol (2). Mae pathogenau lluosog wedi'u cysylltu, ond mae Staphylococcus Aureus yn cynrychioli pathogen aml a phroblem, yn enwedig yn CRSwNP ac yn y boblogaeth oedrannus (3). Er bod digwyddiadau cychwynnol sy'n arwain at ddatblygiad afiechyd i'w nodi o hyd, credir bod parhad y newidiadau meinwe hyn yn adlewyrchu camweithrediad y tri philer amddiffynnol, gan ymddwyn fel echel epitheliwm-llid-microbiome sy'n sicrhau iechyd y ceudod sinws a'i. leinin epithelial.

Mae'r cysyniad sy'n dod i'r amlwg y bydd rheoli afiechyd yn llwyddiannus yn effeithio ar bob un o'r tair cydran o'r echelin, naill ai'n uniongyrchol neu'n anuniongyrchol trwy effeithiau i lawr yr afon, yn awgrymu bod y tair cydran yn cynrychioli targedau ar gyfer triniaeth CRS. Er bod camweithrediad imiwnedd wedi bod yn brif darged therapi ers amser maith (5), mae'n gynyddol amlwg y gall targedu cydrannau eraill yr echelin, megis yr epitheliwm, hefyd fodiwleiddio afiechyd yn llwyddiannus (6) Er enghraifft, triniaeth lwyddiannus gydag ElexacaftorTezacaftor-Ivacaftor (6). Mae Trikafta), meddyginiaeth newydd a ddefnyddir mewn ffibrosis systig (CF) sy'n adfer mynegiant diffygiol CFTR, yn gysylltiedig â datrysiad bron yn gyflawn o glefyd sinws sy'n gysylltiedig â CF, fel y gwelwyd gan welliant mewn symptomau ac adfer agwedd epithelial bron yn normal, hyd yn oed yn absenoldeb therapi gwrthfiotig cydredol (7).

O ystyried llwyddiant modiwleiddio swyddogaeth epithelial, gall modiwleiddio'r microbiome felly gynrychioli strategaeth arall, ac mae ychwanegiad microbiome trwynol â bacteria probiotig a weinyddir yn fewnnasol wedi'i awgrymu'n flaenorol fel ffordd newydd o drin CRS (8, 9). Rydym wedi dangos o'r blaen bod gweinyddiad mewn trwynol o facteria Lactococcus lactis W136 yn cael ei oddef yn dda ac yn gwella symptomau, agwedd endosgopig y mwcosa, ac ansawdd bywyd cleifion â CRS (9). Gwelwyd effeithiau modiwleiddio microbiome hefyd, gyda digonedd cynyddol o Dolosigranulosum Pigrum, pathobiont buddiol tybiedig a nodwyd yn ddiweddar mewn oedolion a phlant fel rhywogaeth bacteriol sy'n gysylltiedig ag iechyd yn y trwyn, sinysau, nasopharyncs, ac adenoid. Dangosodd dadansoddiad is-grŵp yn ôl ffenoteip clinigol ostyngiad yn y doreth o Staphylococcus aureus mewn cleifion â CRSwNP a gostyngiad mewn straeniau lluosog o Pseudomonas Aeroginosa yn CRSsNP (9).

Er bod yr arsylwadau diddorol hyn yn awgrymu effaith ychwanegiad microbiomau ar CRS, mae'r mecanweithiau sy'n sail i'r newidiadau hyn i'w disgrifio o hyd. Roeddem felly'n dymuno nodweddu ymhellach fecanweithiau moleciwlaidd y newidiadau hyn ar lefel y meinwe trwy archwilio newidiadau mewn mynegiant genynnau a achosir gan y driniaeth probiotig L. lactis W136 yn y mwcosa sinws.

Dulliau

Cyfranogwyr a dylunio astudio

Defnyddiwyd brwshys epithelial a gasglwyd yn rhagolygol fel is-astudiaeth o dreial clinigol L. lactis W136 i archwilio ymatebion epithelial i ficrobiome gan ddefnyddio dadansoddiad biowybodeg heb ragdybiaeth o ddadansoddiad mynegiant genynnau. Mae'r L. lactis W136 ar gyfer y treial CRS wedi'i ddisgrifio'n fanwl mewn man arall (9). Cafwyd cymeradwyaeth gan Health Canada ar gyfer gweinyddu bacteria L. lactis W136 byw yn fewnrwythol (rhif cofrestru Health Canada: 191920) a Bwrdd Adolygu Sefydliadol CHUM a phwyllgor Moeseg (Cofrestriad Rhif 12.288) cyn perfformiad y treial (dynodwr Clinicaltrials.gov: NCT04048174 ). Derbyniodd pedwar ar hugain o gleifion â CRS sy'n anhydrin i therapi meddygol a llawfeddygol blaenorol 14-gwrs diwrnod o ddyfrhau sinws AGB yn cynnwys 1.2 × 109 CFU o L. lactis W136 byw. Nid oedd unrhyw gleifion wedi derbyn corticosteroidau geneuol na therapi gwrthfiotig cyfoes na systemig yn ystod y 30 diwrnod blaenorol. Dim ond dyfrhau halwynog a ganiateir ar gyfer lleddfu symptomau. Roedd cleifion wedi'u heithrio<18 years, CF, with technical reasons for endoscopic sinus surgery (ESS) failure, active sinus infection with purulence, pain, and/or hyperthermia, or with immune suppression from disease or medication.

Casglwyd brwsio epithelial o dan reolaeth endosgopig gan ddefnyddio brwsh sytoleg gastrig ar lefel y toriad blaen cyn y cais probiotig cyntaf yn D0, a'r diwrnod ar ôl y driniaeth ddiwethaf yn D14. Echdynnwyd cyfanswm RNA gan ddefnyddio RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Toronto, On, Canada). Perfformiwyd mynegiant genynnau yng Nghanolfan Arloesi Genome Quebec (Montreal, Qc, Canada) gan ddefnyddio'r Illumina HumanHT-12 V4 BeadChip (Illumina, San Diego, CA, Unol Daleithiau).

Dadansoddi data mynegiant genynnau

Allforiwyd data stiliwr amrwd Illumina o BeadStudio a'u sgrinio am ansawdd. Cynhaliwyd rhag-brosesu a dadansoddi ystadegol gan ddefnyddio iaith ystadegol R a phecynnau meddalwedd o Bioconductor fel y disgrifiwyd gan Huber et al. (10). Cymhwyswyd normaleiddio meintiol, ac yna trawsnewidiad log2.

Mynegiant genyn gwahaniaethol

Ar gyfer pob stiliwr, gosodwyd model llinol pâr gan ddefnyddio pecyn LIMMA o Bioconductor gyda ffactor blocio rhoddwr. Mae'r pecyn LIMMA yn gweithredu prawf-t wedi'i gymedroli a ddefnyddir i gymharu mynegiant genynnau cyn ac ar ôl rhoi L. lactis yn D0 a D14 yn y drefn honno. Addaswyd gwerthoedd P o'r gymhariaeth ddilynol ar gyfer profion lluosog yn unol â dull Benjamini a Hochberg (11). Roedd y dull hwn yn rheoli'r gyfradd darganfod ffug (FDR), a osodwyd i 0.05.

Dadansoddiad cyfoethogi llwybrau

Perfformiwyd Dadansoddiad Cyfoethogi Setiau Genynnau (GSEA) gan ddefnyddio pecyn Bioconductor FGSEA gan ddefnyddio setiau genynnau o'r Gronfa Ddata Llofnod Moleciwlaidd (MsigDB, http://www.broad.mit.edu/gsea/msigdb): Hallmark (h.all.v5. 0.symbols.gmt) (12).

Llwybrau sy'n gysylltiedig â GSEA Addaswyd gwerthoedd-P ar gyfer cywiriadau prawf lluosog gyda thoriadau FDR o 0.05. Perfformiwyd GSEA i asesu a oedd llwybr biolegol hysbys neu setiau o enynnau unigol wedi'u cyfoethogi'n sylweddol ymhlith y genynnau a restrwyd gan y prawf-t cymedroledig yn dilyn y dadansoddiad mynegiant genynnau gwahaniaethol.

Canlyniadau

Fel y disgrifiwyd yn flaenorol yn yr astudiaeth glinigol, cwblhaodd pob un o'r 24 o gleifion a gafodd L. lactis W136 yr astudiaeth (Ffigur 1) (9). Rydym wedi cynnwys cleifion â symptomau ac arwyddion parhaus o CRSsNP neu CRSwNP er gwaethaf cael llawdriniaeth dechnegol ddigonol a defnydd parhaus o therapi meddygol mwyaf posibl, gan gynnwys dyfrhau budesonide cyfaint uchel ar ôl llawdriniaeth (CRS "anhydrin"). Amlinellwyd nodweddion gwaelodlin y boblogaeth yn Endam et al. (9). Yn gyffredinol, fe wnaeth 14 diwrnod o driniaeth ag L. lactis wella symptomatoleg sinws-benodol, sgôr SNOT{-22, ac agwedd mwcosaidd ar endosgopi, gyda newidiadau microbiome buddiol. Aseswyd mynegiant genynnau gwahaniaethol rhwng amodau cyn ac ôl-driniaeth ar gyfer samplau pâr yn unig yn (i) Holl CRS (N=20), (ii) is-grŵp CRSwNP (N=16) (iii) is-grŵp CRSsNP (N=4), ac (iv) Ymatebwyr (N=10) (fel y'i diffinnir gan ostyngiad mewn sgôr SNOT-22 o 8.9 neu fwy). Roedd yr ymatebwyr yn cynnwys cleifion CRSwNP (N=8) a CRSsNP (N=2). Roedd yr asesiad trawsgrifiad yn dangos gwahaniaethau sy'n gysylltiedig â thriniaeth. Trawsgrifiadau genynnau unigol gyda FDR Llai na neu'n hafal i 5 y cant a Mwy na neu'n hafal i 1.2-nodwyd newid plyg mewn mynegiant yn unig yn y grwpiau "Pob CRS" ac yn yr is-grŵp CRSwNP (Tabl 1 ac Atodol deunydd). O'i gymharu â CRSwNP, cafodd mynegiant ychydig iawn o enynnau ei addasu'n arwyddocaol ar ôl triniaeth yn CRSsNP, yn ôl pob tebyg o ganlyniad i'r nifer isel o unigolion yn yr is-grŵp hwnnw. Mynegiant genynnol Mae mapiau gwres o'r genyn uchaf wedi'i fynegi'n wahaniaethol (Ffigurau Atodol S1–S4) yn datgelu patrymau mynegiant genynnau gwahaniaethol tebyg ar gyfer pob poblogaeth, gan awgrymu patrwm ymateb cyffredin.

Perfformiwyd dadansoddiad cyfoethogi llwybr i nodi mecanweithiau sylfaenol posibl o ymateb i driniaeth (Ffigur 2 a Ffigur Atodol S5). Nodwyd llwybrau â chysylltiad arwyddocaol ar gyfer pob grŵp a datgelwyd bod triniaeth â Lactococcus Lactis W136 wedi arwain at ddadreoleiddio cylchred cellog, twf, a llwybrau amlhau. Er bod llwybrau dilysnod cyfoethog yn debyg rhwng grwpiau, roedd y gwahaniaethau'n fwy arwyddocaol ym MhOB grŵp CRS a CRSwNP. Yn nodedig, mae'n ymddangos bod mecanwaith cyffredin yn cynnwys uwch-reoleiddio cylchred celloedd a thrawsgrifio (targedau E2F, pontio epithelial-mesenchymal, pwynt gwirio G2M, targedau MYC, secretiad protein, gwerthyd mitotig), rheoliad rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) (hypocsia, llwybr ROS, ffosfforyleiddiad ocsidiol). Roedd modiwleiddio imiwnedd hefyd yn cael ei nodi gan uwchreoleiddio llwybrau signalau (signalu PI3K-AKT-MTOR, signalau MTORC1, signalau beta TGF) ynghyd ag is-reoleiddio ymatebion imiwn addasol (gwrthodiad alografft) a Math 1-(interferon alpha). ymateb, ymateb interfferon-gama). Mae mynegiant gwahaniaethol mewn llwybrau arwyddocaol dethol yn dangos patrwm cyson o adnewyddiad epithelial gwell mewn ymateb i driniaeth probiotig. Roedd atgyfnerthu'r llofnod trawsgrifio hwn yn y boblogaeth a gyfyngwyd i ymatebwyr SNOT-22 yn dangos bod y rhain yn gysylltiedig â gwelliannau clinigol a arsylwyd. Roedd llwybrau'n debyg rhwng ffenoteipiau CRSsNP a CRSwNP, gan awgrymu mecanwaith effaith cyffredin yn y ddwy boblogaeth (Tabl 2). Mae llwybrau a nodwyd wedi'u grwpio'n fras i gylchred Cell a gwahaniaethu, rheoliad Rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS), atgyweirio DNA, a llwybrau cysylltiedig â Llid. Er bod grwpiau bach yn amharu ar ddadansoddiad, mae canlyniadau'n dangos mecanwaith ymateb cyson ar draws grwpiau.

Trafodaeth

Rydym yn archwilio mecanweithiau sy'n tanategu'r ymateb i weinyddu L. lactis W136 byw mewn trwynol mewn cleifion â CRS anhydrin gan ddefnyddio trawsgrifomeg. Mae hyn yn ategu ein deunydd a adroddwyd yn flaenorol ar y newidiadau microbiome a welwyd gyda gweinyddiaeth AGB o 1.2 biliwn CFU o Lactococcus Lactis W136 yn uniongyrchol i'r ceudodau trwynol a sinws (9). Mae astudiaeth flaenorol gan Martensson et al. (8) adroddwyd gweinyddu intranasal o gymysgedd o lactobacilli sy'n deillio o wenyn mêl, ni welwyd unrhyw newid yn cyfryngwyr samplu na'r sinonasal microbiome. Yn fwy diweddar, roedd Lactobacillus a weinyddwyd yn fewnnasol yn cael ei oddef yn dda gan bynciau CRS, nid oedd asesiad clinigol na mecanistig o ganlyniadau (9).

Mae'r gwaith presennol yn defnyddio dulliau trawsgrifio i ddeall seiliau mecanistig effeithiau probiotegau amserol ar yr wyneb trwynol a sinws. Rydym yn disgrifio bod gweinyddiaeth L. lactis yn gysylltiedig â mynegiant genynnau gwahaniaethol sy'n cynnwys llwybrau biolegol nid yn unig yn gysylltiedig â rheoleiddio imiwnedd, ond hefyd rheoleiddio epithelial, fel yr awgrymir gan nodi llwybrau sy'n cyfrannu at amlhau celloedd, signalau goroesi, ac atgyweirio difrod DNA. . Mae newidiadau trawsgriptomig sy'n gysylltiedig â therapi probiotig L. lactis W136 felly'n awgrymu effaith fuddiol ar ddilyniant cylchred celloedd ac adfer swyddogaeth epithelial.

Mae uniondeb cellog a strwythurol yn hanfodol ar gyfer swyddogaeth briodol y rhwystr epithelial. Rydym wedi dogfennu o'r blaen bod ymateb epithelial i glwyfo yn cael ei amharu yn CRS (9). Gallai gwelliannau a welwyd yn y treial clinigol hwn sy'n awgrymu adfywio ac atgyweirio epithelial gwell adlewyrchu gwelliant yn y prosesau hyn.

Rydym yn adrodd bod swyddogaeth imiwnedd wedi'i isreoleiddio'n gyson yn dilyn triniaeth, gyda gostyngiadau yn yr ymateb interfferon, ymdreiddiad ac actifadu celloedd T, ac adwaith alografft. Mae modiwleiddio imiwnedd yn nodwedd o probiotegau (13), felly nid yw'n syndod ei weld yn cael ei ddangos yma. Gall signal ar gyfer modiwleiddio signalau interfferon alffa a gama adlewyrchu gostyngiad yn y cydrannau nad ydynt yn Math 2 o'r ymateb CRS ymfflamychol (14), lle mae lefelau uchel parhaus o interfferon yn cael effeithiau andwyol trwy amharu ar gryfder a chydlyniad ymatebion imiwn dilynol a rhwystro. swyddogaeth cellog (15). Gall y newidiadau hyn gyfrannu at ddatblygiad nodweddion pontio epithelial i mesenchymal CRS (16). Ar ben hynny, mae lefelau uchel o gyfryngwyr llidiol Math 1 yn gysylltiedig â nam swyddogaethol mewn atgyweirio epithelial mewn celloedd epithelial anadlol (17).

Mae hyn yn gyson â'n canlyniadau. Roedd gweinyddiaeth L. lactis hefyd yn gysylltiedig â mynegiant genynnau gwahaniaethol yn cynnwys llwybrau biolegol sy'n gysylltiedig â rheoleiddio epithelial, fel yr awgrymwyd gan nodi llwybrau sy'n cyfrannu at amlhau celloedd, signalau goroesi, ac atgyweirio difrod DNA. Mae newidiadau trawsgriptomig sy'n gysylltiedig â therapi probiotig L. lactis W136 felly'n awgrymu effaith fuddiol ar ddilyniant cylchred celloedd ac adfer swyddogaeth epithelial. Mae uniondeb cellog a strwythurol yn hanfodol ar gyfer swyddogaeth briodol y rhwystr epithelial (18).

Rydym wedi dogfennu o'r blaen bod amhariad ar ymateb epithelial i glwyfo yn CRS (19). Mae gwelliannau a welwyd yn y treial clinigol hwn yn awgrymu y gallai adfywio ac atgyweirio epithelial gwell felly adlewyrchu gwelliant yn y prosesau hyn.

Ni ddisgwylir dyfnder ac ehangder effeithiau ychwanegiad probiotig L. lactis W136 ar weithrediad cellog ac epithelial, fodd bynnag, mae'r rhain yn gyson ag adroddiadau blaenorol yn dangos gwell ail-epithelialeiddio o keratinocytes yn dilyn clwyfo â Lactobacillus rhamnosus GG lysate mewn model profi crafu (20) a'n dealltwriaeth esblygol o glefyd CRS. Mae rhwystr epithelial yn chwarae rhan bwysig yn y broses afiechyd. Yn ogystal â'i rôl fel rhwystr corfforol i bathogenau a llidwyr, mae celloedd epithelial yn gyfrifol am gychwyn a chydlynu ymatebion amddiffynnol (6). Wrth i adfywiad a thrwsio epithelial gael eu newid mewn cleifion â CRS, mae'r cynnydd mewn mynegiant genynnau mewn agweddau lluosog ar y cylch cellog yn awgrymu effaith fuddiol gweinyddu atodiad L. lactis intranasal ar adfer swyddogaeth celloedd epithelial a dilyniant cylchred celloedd. Gwelwyd y newidiadau hyn ar ôl dim ond 14 diwrnod o driniaeth o gymharu â hyd y driniaeth a ddefnyddiwyd mewn astudiaethau eraill, sef pedwar mis. Felly, disgwylir i'r effaith fuddiol fod yn fwy gydag ychwanegiad L. lactis parhaus.

Gyda'i gilydd, mae'r canfyddiadau hyn yn dangos bod gweinyddu L. lactis W136 yn dylanwadu ar brosesau lluosog sy'n ymestyn y tu hwnt i reoleiddio imiwnedd, gan awgrymu effeithiau ar y rhwystr epithelial a all o bosibl fodiwleiddio cyfansoddiad y microbiome.

Astudio cyfyngiadau

Nid yw’r astudiaeth hon yn dreial cyfochrog a reolir gan grŵp, ac nid oes modd cymharu’n uniongyrchol â dyfrhau halwynog yn unig. Serch hynny, yn y treial clinigol, roedd defnydd dyfrhau halwynog yn unig yn ystod y cyfnod rhedeg i mewn yn gysylltiedig â gwaethygu symptomau CRS a dirywiad yn yr agwedd mwcosaidd ar ôl tynnu meddyginiaethau yn ôl. Hefyd, mae maint y sampl yn gymharol fach, yn enwedig yn y grwpiau "CRSsNP" ac "Ymatebwyr" sy'n llai na'r "boblogaeth gyffredinol". Serch hynny, mae patrwm yr ymateb yn debyg ar draws grwpiau ac felly ni ddylid diystyru canlyniadau.

Yn ogystal, nid oes unrhyw gofnod a yw halwynog yn unig yn dylanwadu ar fynegiant genynnau. Er y dangoswyd nad yw dyfrhau halwynog yn dylanwadu ar gyfansoddiad microbiome mewn cleifion CRS (5) nid yw hyn wedi'i asesu mewn treial cymharol o fynegiant genynnau. Fodd bynnag, roedd cleifion eisoes wedi derbyn pythefnos o rinsio halwynog yn unig yn ystod y 14-cyfnod rhedeg i mewn diwrnod heb unrhyw fudd clinigol, felly mae'n annhebygol y bydd newidiadau yn eilradd i halwynog yn unig. Yn olaf, aseswyd newidiadau ar ôl dim ond 14 diwrnod o driniaeth, sy'n gyfnod triniaeth byr, o'i gymharu ag astudiaethau eraill mewn CRS anhydrin (21). Gallai'r effeithiau a arsylwyd felly fod yn fwy gyda gweinyddiaeth fwy estynedig.

Casgliad

Mae'r asesiad trawsgrifiad yn awgrymu bod gwelliannau yn dilyn cymhwyso bacteria byw i'r epitheliwm sinws heintiedig mewn CRS anhydrin yn ymddangos fel pe baent yn cynnwys cydrannau lluosog o'r echel rhwystr llid-microbiome-epithelaidd sy'n gysylltiedig â CRS. Mae therapi probiotig L. lactis W136 yn dylanwadu ar adferiad epithelial a modiwleiddio imiwnedd cynhenid ​​​​ac addasol, gan gefnogi'r diddordeb posibl o dargedu'r epitheliwm sinws a'r microbiome fel therapïau CRS posibl.

Cymerwch Neges Gartref

Mae proffilio trawsgriptomig yn awgrymu bod effeithiau bacteriwm Lactococcus lactis W136 probiotig byw ar yr epitheliwm sinws afiach mewn CRS anhydrin yn cynnwys nid yn unig modiwleiddio llid Math 1 a microbiome ond hefyd yn golygu adfer cyfanrwydd yr echel rhwystr epithelial.

Datganiad argaeledd data

Mae'r cyfraniadau gwreiddiol a gyflwynwyd yn yr astudiaeth wedi'u cynnwys yn yr erthygl/Deunyddiau Atodol, gellir cyfeirio ymholiadau pellach at yr awdur cyfatebol.

Datganiad moeseg

Mae'r astudiaethau yn cynnwys cyfranogwyr dynol eu hadolygu a'u cymeradwyo gan Cafwyd cymeradwyaeth gan Health Canada ar gyfer gweinyddu intranasal o facteria L. lactis W136 byw (rhif cofrestru Health Canada: 191920) a Bwrdd Adolygu Sefydliadol CHUM a phwyllgor Moeseg (Cofrestriad Rhif 12.288) o'r blaen perfformiad y treial (dynodwr Clinicaltrials.gov: NCT04048174). Darparodd y cleifion/cyfranogwyr eu caniatâd gwybodus ysgrifenedig i gymryd rhan yn yr astudiaeth hon.

Cyfraniadau awdur

SA-R: Recriwtio cleifion, dadansoddi data, adolygu llenyddiaeth, paratoi llawysgrif. OH: dadansoddi data, adolygu llenyddiaeth, paratoi'r llawysgrif. LEM: Dyluniad yr astudiaeth, recriwtio cleifion, casglu data, a chanlyniadau. AF-M: Prosesu a dadansoddi data mynegiant genynnau a llwybr. AP: cenhedlu'r astudiaeth, dadansoddi data, adolygu llenyddiaeth, paratoi'r llawysgrif. ARF: dadansoddi data, paratoi'r llawysgrif. MD: cenhedlu'r astudiaeth, cynllun yr astudiaeth, dadansoddi data, paratoi'r llawysgrif. Cyfrannodd pob awdur at yr erthygl a chymeradwyo'r fersiwn a gyflwynwyd.

Ariannu

MD: Cronfeydd Ymchwil Merck, Prifysgol McGill, Montreal, Canada (treial clinigol Probiotig), Cronfeydd mewnol. CHUM (Dadansoddiad mynegiant).

Gwrthdaro buddiannau

MD: Deiliad Ecwiti, Therapïau Probionase Inc. Ariannu treialon clinigol: Pfizer, AstraZeneca, GlaxoSmithKline, a Sanofi.

Nodyn y cyhoeddwr

Mae’r holl honiadau a fynegir yn yr erthygl hon yn eiddo i’r awduron yn unig ac nid ydynt o reidrwydd yn cynrychioli rhai eu sefydliadau cysylltiedig, na rhai’r cyhoeddwr, y golygyddion, a’r adolygwyr. Nid yw unrhyw gynnyrch y gellir ei werthuso yn yr erthygl hon, neu honiad y gall ei wneuthurwr, ei warantu na'i gymeradwyo gan y cyhoeddwr.

Deunydd atodol

Ffigur Atodol S1. Asesiad trawsgriptomig o ymateb i Lactococcus lactis W136 mewn trwynol ym mhob claf CRS. Map gwres o'r 5 genyn uchaf 0 wedi'u mynegi'n wahaniaethol gyda FDR < 0.05.

Ffigur Atodol S2. Asesiad trawsgrifomig o ymateb i Lactococcus lactis W136 mewn trwynol yn yr is-grŵp sinwsitis cronig gyda pholypau trwynol (CRSwNP). Map gwres o'r 5 genyn uchaf 0 wedi'u mynegi'n wahaniaethol gyda FDR < 0.05.

Ffigur Atodol S3. Asesiad trawsgrifomig o ymateb i Lactococcus lactis W136 mewn trwynol yn yr is-grŵp sinwsitis cronig heb bolypau trwynol (CRSsNP). Map gwres o'r 5 genyn uchaf 0 wedi'u mynegi'n wahaniaethol gyda FDR < 0.05.

Ffigur Atodol S4. Asesiad trawsgriptomig o ymateb i Lactococcus lactis W136 mewn trwynol yn is-grŵp yr ymatebydd. Map gwres o'r 5 genyn uchaf 0 wedi'u mynegi'n wahaniaethol gyda FDR < 0.05.

Ffigur Atodol S5. Ymateb trawsgrifio i 14 diwrnod o Lactococcus lactis W136. Dadansoddiad Mynegiant Set Genynnau (GSEA) o ymateb i driniaeth. (a) Pob claf CRS, (b) sinwsitis cronig gyda pholypau trwynol (CRSwNP), (c) sinwsitis cronig heb bolypau trwynol (CRSsNP), (d) Ymatebwyr. Mae mynegiant gwahaniaethol mewn llwybrau arwyddocaol dethol yn dangos patrwm cyson o adnewyddiad epithelial gwell (TARGEDAU E2F, TROSGLWYDDO MESENCHYMAL EPITHELIAL, PWYNT GWIRODYDD G2M, TARGEDAU MYC V1, TARGEDAU MYC V2, ADRAN PROTEIN, SPINDLE MITOTIG), Trwsio DNA cynyddol (N P53 P53 RESPATH DRAGETS). , UV YMATEB I FYNY), rheoliad rhywogaethau ocsigen adweithiol (ROS) (HYPOXIA, LLWYBR RHYWOGAETHAU Ocsigen adweithiol, OXIDATIVE PHOSPHORYLATION), actifadu llwybrau signalau (SIGNALING PI3K AKT MTOR ARWYDDO, ARWYDDO MTORC1, ARWYDDO TGF BETA) a dadreoleiddio signalau addasu imiwn (GWRTHOD ALOGGRAFT, YMATEB INTERFERON ALPHA, YMATEB GAMMA INTERFERON). Mae gan bob llwybr a gyflwynir FDR < {{1}0}}.05. Cyflwynir data fel sgorau cyfoethogi normaleiddio (NES) lle mae gwerthoedd > 0 yn cynrychioli dadreoleiddio a gwerthoedd < 0 yn cynrychioli is-reoleiddio wrth gymharu'r rhai nad ydynt yn ymateb ag ymatebwyr.

Cyfeiriadau

rhinosinwsitis cronig oedolion. Nat Parch Dis Primers. (2020) 6(1):86. doi: 10.1038/s41572-020-00218-1

2. Kato A, Schleimer RP, Bleier BS. Mecanweithiau a phathogenesis rhinosinwsitis cronig. J Alergedd Clin Immunol. (2022) 149(5):1491–503. doi 10.1016/j.jaci. 2022.02.016

3. Fokkens WJ, Lund VJ, Hopkins C, Hellings PW, Kern R, Reitsma S, et al. Papur safbwynt Ewropeaidd ar rhinosinwsitis a pholypau trwynol 2020. Rhinoleg. (2020) 58(Suppl S29):1–464. doi: 10.4193/rhin20.600

4. Maniakas A, Asmar MH, Renteria AE, Nayan S, Alromaih S, Endam LM, et al. Azithromycin mewn rhinosinwsitis cronig anhydrin risg uchel ar ôl llawdriniaeth sinws endosgopig a dyfrhau corticosteroid: treial dwbl-ddall, ar hap, a reolir gan blasebo. Int Fforwm Alergedd Rhinol. (2021) 11(4):747–54. doi 10. 1002/alr.22691

5. Akdis CA. Mae'r rhagdybiaeth rhwystr epithelial yn cynnig dealltwriaeth gynhwysfawr o darddiad clefydau alergaidd a chlefydau anhrosglwyddadwy cronig eraill. J Alergedd Clin Immunol. (2022) 149(1):41–4. doi 10.1016/j.jaci.2021.11.010

6. Stapleton AL, Kimle AJ, Goralski JL, Mehdi Nouraie S, Branstetter BF, Shaffer AD, et al. Mae Elexacaftor-lumacaftor-ivacaftor yn gwella canlyniadau sinonasal mewn ffibrosis systig. J Cyst Ffibros. (2022) 21(5):792–9. doi 10.1016/j.jcf.2022.03.002

7. Mårtensson A, Greiff L, Lamei SS, Lindstedt M, Olofsson TC, Vasquez A, et al. Effeithiau microbiome bacteriol asid lactig gwenyn mêl ar symptomau trwynol dynol, commensals, a biomarcwyr. Fforwm Rhyngwladol Alergedd a Rhinoleg (IFAR). (2016) 6(7):956–63. doi 10.1002/alr.21762

8. Mårtensson A, Abolhalaj M, Lindstedt M, Mårtensson A, Olofsson TC, Vásquez A, et al. Effeithiolrwydd clinigol microbiome bacteriol asid lactig cyfoes mewn rhinosinwsitis cronig: hap-dreial rheoledig. Laryngosgop Ymchwilio Otolaryngol. (2017) 2(6):410–6. doi: 10.1002/lio2.93

9. Endam L, Alromaih S, Gonzalez E, Madrenas J, Cousineau B, Renteria A, et al. Mae cymhwyso Lactococcus Lactis W136 yn fewnryddol yn ddiogel mewn cleifion rhinosinwsitis cronig â llawdriniaeth sinws blaenorol. Cell Flaen Heintio Microbiol. (2020) 10:440. doi 10.3389/dringo.2020.00440

10. Huber W, Carey VJ, Bonheddwr R, Anders S, Carlson M, Carvalho BS, et al. Trefnu dadansoddiad genomig trwybwn uchel gyda Bioconductor. Dulliau Nat. (2015) 12(2):115–21. doi 10.1038/nmeth.3252

11. Benjamini Y, Hochberg Y. Rheoli cyfradd y darganfyddiadau ffug: ymagwedd ymarferol a phwerus at brofion lluosog. JR Stat Soc, B. (1995) 57(1):289–300. doi 10.1111/j.2517-6161.1995.tb02031.x

12. Korotkevich G, Sukhov V, Sergushichev A. Dadansoddiad cyfoethogi set genynnau cyflym. bioRxiv. (2019). doi: 10.1101/060012

13. Raheem A, Liang L, Zhang G, Cui S. Effeithiau modiwlaidd probiotegau yn ystod heintiau pathogenig gyda phwyslais ar reoleiddio imiwnedd. Immunol blaen. (2021) 12:616713. doi 10.3389/femme.2021.616713

14. Delemarre T, Holtappels G, De Ruyck N, Zhang N, Nauwynck H, Bachert C, et al. Llid niwtroffilig sylweddol fel rhan reolaidd o rhinosinwsitis cronig math 2 difrifol gyda pholypau trwynol. J Alergedd Clin Immunol. (2021) 147 (1):179–188.e2. doi 10.1016/j.jaci.2020.08.036

15. Matarazzo L, Hernandez Santana YE, Walsh PT, Fallon PG. Y teulu cytocin IL-1 yw ceidwad imiwnedd rhwystr. Cytocin. (2022) 154:155890. doi 10.1016/j. i.2022.155890m

16. Li R, Ong SL, Tran LM, Jing Z, Liu B, Parc SJ, et al. Cywiriad awdur: Mae llid a achosir gan IL cronig yn rheoleiddio ffenoteipiau cof pontio epithelial-i-mesenchymal trwy addasiadau epigenetig mewn canser yr ysgyfaint celloedd nad ydynt yn fach. Cynrychiolydd Gwyddonol (2020) 10:377. doi: 10.1038/s41598-020-61341-3

17. Maillé E, Trinh NTN, Privé A, Bilodeau C, Bissonnette É, Grandvaux N, et al. Rheoleiddio prosesau atgyweirio epithelial llwybr anadlu ffibrosis arferol a systig gan TNF- ar ôl anaf. Am J Physiol Cell Ysgyfaint Mol Physiol. (2011) 301:L945–55. doi 10.1152/plymio.00149.2011

18. Hellings PW, Steelant B. Rhwystrau epithelial mewn alergedd ac asthma. J Alergedd Clin Immunol. (2020) 145(6):1499–509. doi 10.1016/j.jaci.2020.04.010

19. Valera FCP, Ruffin M, Adam D, Maillé É, Ibrahim B, Berube J, et al. Mae Staphylococcus aureus yn amharu ar atgyweirio epithelial sinonasal: effeithiau mewn cleifion â rhinosinwsitis cronig â pholypau trwynol a phynciau rheoli. J Alergedd Clin Immunol. (2019) 143(2):591–603.e3. doi 10.1016/j.jaci.2018.05.035

20. Mohammed Saeed W, Cruickshank S, McBain AJ, O'Neill CA. Mae Lactobacillus rhamnosus GG lysate yn cynyddu ail-epithelialization o brofion crafu keratinocyte trwy hyrwyddo mudo. Cynrychiolydd Gwyddonol (2015) 5:16147. doi: 10.1038/srep16147

21. Bachert C, Han JK, Desrosiers M, Hellings PW, Amin N, Lee SE, et al. Effeithlonrwydd a diogelwch dupilumab mewn cleifion â rhinosinwsitis cronig difrifol gyda pholypau trwynol (LIBERTY NP SINUS-24 a LIBERTY NP SINUS-52): canlyniadau o ddau ganolfan amlganolfan, ar hap, dwbl-ddall, a reolir gan blasebo, cyfochrog -treialon grŵp cam 3. Lancet. (2019) 394(10209): 1638–50. doi: 10.1016/S0140-6736(19)31881-1

For more information:1950477648nn@gmail.com