Y Biomarcwr Diagnostig ar gyfer Clefydau Arennau Diabetig: Mynegiant MicroRNAs
Mar 26, 2022
Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
RHAN Ⅰ: Proffilio Mynegiad MicroRNA mewn Clefyd Arennau Diabetig
HIROKIISHII, SHOHEI KANEKO, KATSUNORI YANAl, AKINORI AOMATSU, KEIJ HIRAl, SUSUMU OOKAWARA, & YOSHIYUKI MORISHITA
RHAGARWEINIAD
Mae nifer yr achosion o glefyd yr arennau diabetig (DKD) yn tyfu'n gyflym ledled y byd ac mae'n gysylltiedig â beichiau economaidd a chymdeithasol sylweddol oherwydd dyma brif achos clefyd arennol cyfnod olaf ac mae'n gysylltiedig â datblygiad cymhlethdodau fasgwlaidd amrywiol.1. Er mwyn gwella prognosis DKD(clefyd yr arennau diabetig), mae angen ei ddiagnosis cynnar ac asiantau triniaeth benodol. Fodd bynnag, nid yw'r ddau wedi'u sefydlu.
Mae diagnosis diffiniol o DKD (clefyd diabetig yr arennau) yn gofyn am ddadansoddiad histolegol o fiopsïau arennol. Fodd bynnag, mae biopsi arennol yn ymledol, mae'n anodd cael samplau diagnostig, ac nid yw'n briodol ar gyfer ailadrodd gweithdrefnau. Felly, mae sawl moleciwlau serwm neu wrin, megis colagen IV, propeptid terfynell COOH o golagen VI, a derbynnydd ffactor necrosis tiwmor 1 o 2, wedi'u hasesu i'w defnyddio fel marcwyr diagnostig DKD(clefyd yr arennau diabetig),2-4 ond nid oes yr un wedi sefydlu eto ar gyfer defnydd clinigol.5-7
Ynglŷn â thriniaeth DKD(clefyd yr arennau diabetig), dangoswyd bod nifer o gyffuriau, megis atalyddion system renin-angiotensin, atalydd cotransporter sodiwm-glwcos 2, ac analogau peptid tebyg i glwcagon, yn cael effeithiau amddiffynnol yn DKD(clefyd yr arennau diabetig),8-10 ond nid oes yr un yn ddelfrydol. Felly, mae angen brys i nodi biofarcwyr diagnostig ac asiantau therapiwtig ar gyfer DKD(clefyd yr arennau diabetig).
MicroRNAs(miRNAs) wedi denu sylw fel biofarcwyr clefyd-benodol a thargedau therapiwtig ar gyfer afiechydon amrywiol, megis canser a sawl clefyd llidiol.11,12miRNAs(MicroRNAs) yn RNAs bach, di-godio o tua 22 niwcleotidau o hyd sy'n gweithredu fel rheolyddion ôl-drawsysgrifol o enynnau targed a'u proteinau deilliedig trwy achosi diraddiad RNAmiR negesydd a/neu ormes trosiadol.13,14 NAs are thought to be responsible for the regulation of >60 y cant o'r holl lefelau mynegiant protein, a thrwy hynny chwarae rolau canolog ac amrywiol mewn prosesau pathoffisiolegol mewn amrywiol glefydau15.
Mae astudiaethau blaenorol wedi dangos bod nifer o miRNAs(MicroRNAs)yn ymwneud â phathogenesis DKD(clefyd yr arennau diabetig), ac o ganlyniad, gallant gynrychioli biofarcwyr defnyddiol neu dargedau therapiwtig ar gyfer DKD(clefyd yr arennau diabetig).16.17 Fodd bynnag, astudiaethau pellach i ymchwilio i rolau rheoleiddio miRNAs(MicroRNAs)yn DKD(clefyd yr arennau diabetig)yn angenrheidiol a'r miRNAs hyn(MicroRNAs)gellir eu datblygu fel biofarcwyr diagnostig ac asiantau therapiwtig ar gyfer DKD(clefyd yr arennau diabetig). Felly, yn yr astudiaeth bresennol, fe wnaethom ymchwilio i miRNAs(MicroRNAs)ymwneud â DKD(clefyd yr arennau diabetig)a phennu eu potensial fel biofarcwyr penodol neu gyfryngau therapiwtig ar gyfer DKD(clefyd yr arennau diabetig).
manteision stem cistanche
DEUNYDD A DULLIAU
Model anifeiliaid.Roedd llygod yn cael eu cadw mewn ystafell gyda thymheredd a lleithder rheoledig o dan amodau micro-ynysu gwrthfeirysol a di-wrthgyrff. Prynwyd llygod db/db gwrywaidd (C57BLKS/J lar - ynghyd â Leprdb/ ynghyd â Leprdb) a’u llygod sbwriel arferol m/m (C57BLKS/J Iar-m plws /m a mwy) gan y Sefydliad Atgynhyrchu Anifeiliaid (Ibaraki, Japan) . Cafwyd llygod AKITA gwrywaidd (C57BL/6-llygod Ins2Akita/J) a'u cyd-lefelwyr sbwriel arferol (C57BL/6J) gan Japan SLC, Inc. (Tokyo, Japan).
Perfformiwyd isgemia arennol ac atlifiad fel y disgrifiwyd yn flaenorol.18 Yn gryno, anestheteiddiwyd llygod gwrywaidd C57BL/6J (Tokyo Laboratory Animals Science, Tokyo, Japan) ag isoflurane a nodwyd y pedicle arennol dde, ei glymu, a pherfformiwyd neffrectomi dde. Yna cafodd y pedicle arennol chwith ei nodi a'i glampio â chlip microfasgwlaidd an-drawmatig am 45 munud. Tynnwyd y clampiau ar ôl i'r cyfnod o isgemia ddod i ben a chadarnhawyd atlifiad llwyddiannus yn weledol. Roedd llygod a weithredir â ffug yn cael yr un weithdrefn lawfeddygol, heb glampio'r pedicle arennol. Aberthwyd yr anifeiliaid 24 awr ar ôl atlifiad.
Perfformiwyd rhwystr wreterig unochrog fel yr adroddwyd yn flaenorol.19Yn gryno, anestheteiddiwyd llygod gwrywaidd C57BL/6J (Tokyo Laboratory Animals Science) gan ddefnyddio isoflurane, ac yna datgelwyd yr wreter chwith trwy doriad abdomenol llinell ganol, wedi'i glymu'n llwyr â 4-0 sidan ar ddau bwynt, a'i dorri rhwng y rhain. Ni chafodd y grŵp sy'n cael ei weithredu gan ffugenw ei ymrwymo. Cafodd y llygod eu haberthu a chasglwyd eu harennau chwith 7 diwrnod ar ôl llawdriniaeth.
Prynwyd llygod cyflymu heneiddedd gwrywaidd (SAMP1/YitFcsJ) a llygod rheoli (SAMR/YitFcsJ) gan SLC Japan.20Aberthwyd y llygod hyn yn 48 wythnos oed. Cafwyd llygod HIGA gwrywaidd (HIGA/NscSlc) a llygod BALB/cCrSlc, a ddewiswyd fel y straen rheoli oherwydd eu crynodiadau IgA serwm isel, gan Japan SLC.
Casglwyd arennau a gwaed, cafwyd serwm, a chafodd y mwyafrif o'r meinweoedd eu storio ar -80 gradd . Defnyddiwyd yr arennau chwith ar gyfer dadansoddiad histolegol a defnyddiwyd yr arennau dde ar gyfer mRNA a miRNA(MicroRNAs)meintioli. Ar gyfer dadansoddiadau biocemegol, trosglwyddwyd llygod i gewyll metabolaidd unigol ar gyfer casglu 24-h samplau wrin. Mesurwyd albwmin wrinol a chrynodiadau creatinin gan ddefnyddio Pecyn Assay Albwmin Wrinol Llygoden LBIS (math S) (Fujifilm Wako, Shibayagi, Gunma, Japan) a Phecyn Creatinin Lab-Assay (Fujifilm Wako, Osaka, Japan), yn y drefn honno.
Cleifion a phynciau iach.Fe wnaethom recriwtio cleifion â chlefyd cronig yn yr arennau a gafodd fiopsi arennol ym Mhrifysgol Feddygol Saitama Jichi rhwng Mai 2016 a Mai 2019. Recriwtiwyd pump ar hugain o gleifion i'r DKD(clefyd yr arennau diabetig)grŵp a chawsant eu cymharu â chleifion a oedd â chlefydau arennol heblaw cleifion DKD (n{0}}; neffropathi IgA 17, neffropathi pilenog 9, syndrom neffrotig newid lleiaf 6, nephrosclerosis 4, neffritis rhyng-raniadol 3, IgG4-cysylltiedig neffropathi 3, neffritis lupus 2, a chlefydau arennol eraill 6) a chawsant eu paru am eu nodweddion sylfaenol. Adolygwyd pob achos gan sawl patholegydd profiadol i sicrhau bod sbesimenau biopsi yn dangos newidiadau patholegol a oedd yn briodol i gategori'r clefyd ac nad oeddent yn dangos newidiadau sylweddol sy'n nodweddiadol o glefydau eraill. DKD(clefyd yr arennau diabetig)ei ddiagnosio gan ddefnyddio canfyddiadau nodweddiadol cynnydd yn y matrics mesangial, glomerulosclerosis nodular, tewychu pilen islawr glomerwlaidd gwasgaredig, a hyalinosis cydredol o rhydwelïau afferent ac effro.21 Cafwyd diagnosis o ddiabetes mellitus gan ddefnyddio maen prawf Cymdeithas Diabetes America. Amcangyfrifwyd GFR gan ddefnyddio'r Diet in Renal ria.22 Dull clefydau (MDRD), wedi'i addasu ar gyfer y Japaneaid (ml/mun/canlynol: poblogaeth, eGFR, fel; creatinin serwm 1x1.73m²）=0.881×186.3×oed-0.2{{9 }}3×(×0.742 ar gyfer merched).23,24
Dadansoddiad microarray.Mae dadansoddiad o miRNA(MicroRNAs)perfformiwyd mynegiant gan Hokkaido System Science (Hokkaido, Japan). Disgrifiwyd manylion y dadansoddiad micro-arae mewn man arall.25Yn gryno, dadffosfforyleiddiad oedd yr RNA ac yna ei glymu i Cy3-pCp gan ddefnyddio miRNA(MicroRNAs)Cwblhau Adweithydd Labelu a Phecyn Hyb (Agilent Technologies, CA, UDA) a miRNA(MicroRNAs)Pecyn Spike-in (Agilent Technologies). Y miRNA(MicroRNAs)Defnyddiwyd Adweithydd Labelu Cyflawn a Phecyn Hyb i groesi'r cRNAs. Ar ôl hybrideiddio, golchwyd y pelydrau micro-ar gan ddefnyddio Pecyn Golchi Mynegiant Genynnau (Agilent Technologies) a'u sganio â Sganiwr Microarray Agilent. Gwerthuswyd dwyster signalau gyda Agilent Feature Extraction ver.12.0.3.1.mRNA dadansoddiad mynegiant ei berfformio hefyd gan Hokkaido System Science. Cafodd yr RNA ei labelu gan Cy3-gan ddefnyddio Pecyn Labelu Amp Cyflym Mewnbwn Isel, Un Lliw (Agilent Technologies). Croesrywiwyd y samplau cRNA wedi'u labelu i miRNA Llygoden(MicroRNAs)Microarray 8×60K rel.21.0(Agilent Technologies) ar 65 gradd am 17 awr gan ddefnyddio Pecyn Hybrideiddio Mynegiant Genynnau (Agilent Technologies). Ar ôl hybrideiddio, golchwyd y micro-araeau â chydrannau o'r Pecyn Clustogau Golchi Mynegiant Gene (Agilent Technologies) a'u sganio â Sganiwr Microarray Agilent. Gwerthuswyd dwyster signalau gan ddefnyddio Agilent Feature Extraction ver.12.0.3.1.Cyflawnwyd normaleiddio gan ddefnyddio'r dull shifft canradd 90fed, dull a ddefnyddir yn gyffredin ar gyfer microarae, fel y disgrifiwyd yn flaenorol.26 The results were analyzed using GeneSpring software v12.1(Agilent Technologies). Statistical analysis was carried out using one-way ANOVA with a post hoc Tukey honestly significant difference test. Fold changes with a cut-off value>4 a gwerth P<0.05 were="" considered="" to="" indicate="" statistically="" significant="" differences.="" the="" genespring="" single="" experiment="" analysis="" (sea)bioinformatics="" tool="" was="" used="" for="" computational="" analysis="" to="" identify="" potential="" curated="" canonical="" pathways="" that="" were="" enriched="" in="" the="" transcript="" list="" showing="" a="" significant="" gene="" expression="" difference="" between="" the="" control="" mice,db/db="" mice,db/db="">(MicroRNAs)-181b-5p-mimic-PEI-NPs, a llygod db/db ynghyd â control-miRNA(MicroRNAs)-Grwpiau PEI-NPs yn defnyddio cronfa ddata WikiPathways Targed a ragfynegwyd. Chwiliwyd FmRNAs o miRNAs gan ddefnyddio meddalwedd Target Scan.
Tabl I.Rhestr o miRNAs(MicroRNAs)wedi'i fynegi'n wahanol yn arennau llygod AKITA trwy ddadansoddiad micro-arae
Trawsgrifio gwrthdro meintiol amser real-PCR.Manylion y profion meintiol amser real trawsgrifiad-tion-PCR(qRT-PCR) i fesur mRNA a miRNA(MicroRNAs)mae mynegiant yn arennau llygod wedi'u disgrifio'n flaenorol.27I fesur miRNA(MicroRNAs)mynegiant, homogeneiddiwyd samplau arennau gan ddefnyddio homogenydd gwydr a rhwygwr colofn hidlo (colofn peiriant rhwygo QIA; Qiagen, Hilden, yr Almaen), yna echdynnwyd RNA gan ddefnyddio Pecyn Mini miReasy (Qiagen). Cafodd un microgram o bob sampl RNA ei drawsgrifio o chwith yn cDNA gan ddefnyddio'r System PCR miRScript (Qiagen). Yna perfformiwyd qRT-PCR gan ddefnyddio Pecyn PCR Gwyrdd miScript SYBR a paent preimio penodol ar gyfer miRNA-20a-5p, miRNA-34a-5p,miRNA{6} }b-5p,miRNA-129-1-3p, miRNA-129b-5p,miRNA-142a-3p,miRNA{{13}) }a-5p, miRNA-181b-5p, miRNA-223-3p,miRNA-146a-5p, rmiRNA{{20}) }p,miRNA-652-3p,miRNA-342-3p,rmiRNA-6401,a miRNA-6980-5p(miScript Primer Assays; Qiagen), yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Cafodd y lefelau mynegiant eu normaleiddio i lefel U6-snuRNA a chawsant eu cyfrifo fel gwahaniaethau plyg (2-△ACT) o'r lefelau mynegiant rheoli arferol. Nid oedd lefelau mynegiant U6 yn ystadegol wahanol rhwng pob grŵp yn yr astudiaeth hon.
I fesur y miRNA(MicroRNAs)lefelau mewn serwm dynol a llygoden, paratowyd RNA o samplau 300 μL o serwm gan ddefnyddio colofn Plasma miRNA NucleoSpin (Macherey-Nagel, Duren, yr Almaen) a Phecyn Serwm/Plasma miReasy (Qiagen). Yna, cafodd yr RNA ynysig ei drawsgrifio o chwith gan ddefnyddio pecyn miScript I RT (Qiagen).qRT-PCR gan ddefnyddio Pecyn PCR Gwyrdd miScript SYBR (Qiagen).Primers ar gyfer miRNA-20a{-5p ,miRNA{6}}a-5p,miRNA{8}}b-5p,miRNA-129-1-3p,
miRNA(MicroRNAs)-142a-3p,miRNA-1129b-5p,miRNA{4}}a-5p,miRNA{6}}a{{} 7}}p,miRNA-181b-5p,miRNA-455-5p,miRNA-342-3p,n miRNA-223-3p, miRNA-652-3) p,miRNA-6401,a miRNA-6980-5p eu prynu oddi wrth Qiagen. Cafodd lefelau pob miRNA eu normaleiddio i rai miRNA-16 fel rheolydd mewndarddol. Nid oedd lefelau mynegiant serwm miRNA-16a{{{-3}p yn ystadegol wahanol rhwng pob grŵp yn yr astudiaeth hon.
I fesur mynegiant mRNA, homogeneiddiwyd samplau arennau gan ddefnyddio homogenizer gwydr a rhwygwr col-umn hidlo (colofn peiriant rhwygo QIA; Qiagen). Cafodd RNA ei ynysu gan ddefnyddio pecyn Ynysu Cyfanswm RNA RNeasy (Qiagen) a thrawsgrifiwyd 1ug o bob sampl RNA i'r chwith gan ddefnyddio system synthe-sis Llinyn Cyntaf SuperscriptII (Life Technologies, MA, UDA). Perfformiwyd qRT-PCR gan ddefnyddio SYBR GreenER qPCR SuperMix (Technolegau Bywyd).Primers for mouse colagen Math I Alpha 1 Chain, colagen Math IV Alpha 1 Chain oedd prynu gan Takara Bio (Shiga, Japan). Cafodd mynegiant pob mRNA targed ei normaleiddio i fynegiad beta-actin fel y genyn cyfeirio.
Ffig 1 .Map gwres o'r miRNAs a fynegwyd yn wahaniaethol(MicroRNAs)yn arennau llygod AKITA. Mae'r map gwres yn dangos y clystyru hierarchaidd ac amrywiadau systemig yn y mynegiant o miRNAs(MicroRNAs)mewn arennau llygod o bob grŵp (n=4 fesul grŵp). Roedd miRNAs a ddangosir mewn coch yn dangos mynegiant uchel ac roedd y rhai a ddangosir mewn gwyrdd yn dangos mynegiant cymharol isel. (Fersiwn lliw o ffigur ar gael ar-lein.)
Paratoi'r miRNA(MicroRNAs)-181b-5p dynwared.miRNA(MicroRNAs)Cafodd -181b{1}}p a RNA bach wedi'i sgramblo (control-miRNA) eu syntheseiddio gan Ajinomoto Bio-Pharma Services (Osaka, Japan). Dilyniant y miRNA-181b{{5} }p oedd dynwared 5'-AACAUUCAUUCCUGUCGGUGG-GUU-3' a'r rheolydd-miRNA(MicroRNAs)oedd 5'-GGUUCGUACGUACACUGUUCA-3'.
Cyflwyno miRNA(MicroRNAs)-181b-5p-PEI-NPs i'r arennau.Ymchwilio i effeithiau miRNA(MicroRNAs)Defnyddiwyd -181b-5p trin dynwared, NPs llinol seiliedig ar PEI(in vivo jet PEI; Polyplus-transfection, llkirch-graffenstaden, Ffrainc), fel y disgrifiwyd yn flaenorol.27Yn fyr, miRNA(MicroRNAs)-PEI-NPs (miRNA∶ 50ug, cymhareb nitrogen （N) yn y polymer i ffosffad (P) yn yr asidau niwclëig=6) eu hydoddi mewn 200μL o hydoddiant glwcos 5 y cant a'i chwistrellu i lygod db/db trwy gwythïen gynffon, yn unol â phrotocol y gwneuthurwr. Roedd y grwpiau canlynol yn gweithredu fel rheolyddion: (1) sbwriel arferol (m/m), (2) llygod db/db heb eu trin, a (3) llygod db/db wedi'u chwistrellu â rheolaeth-miRNA(MicroRNAs)-PEI-NPs gan ddefnyddio'r un protocol. I asesu potensial therapiwtig miRNA-181b-5p ar gyfer DKD(clefyd yr arennau diabetig), fe wnaethom chwistrellu miRNA-181b-5p-PEI-NPs neu control-miRNA-PEI-NPs i 10-llygod db/db wythnos oed yn wythnosol am 10 wythnos.
Ffig 2.Map gwres o'r miRNAs a fynegwyd yn wahaniaethol(MicroRNAs)yn arennau llygod db/db. Mae'r map gwres yn dangos y clystyru hierarchaidd ac amrywiadau systemig yn y mynegiant o miRNAs yn arennau pob grŵp (n=4 fesul grŵp). Coch, mynegiant uwch; glas, mynegiant is. (Fersiwn lliw o ffigur ar gael ar-lein.)
Histoleg,Fflworoleuedd, a minnaummunohistocemeg.Ar ôl dyrannu'r arennau, gosodwyd rhan gynrychioliadol o bob aren ar unwaith mewn paraformaldehyd 4 y cant wedi'i glustogi gan PBS a'i fewnosod mewn paraffin. Defnyddiwyd adrannau （5 μm） ar gyfer gwrthimiwnedd a staenio asid-Schiff (PAS) cyfnodol. Gwerthuswyd ehangiad mesangial mewn adrannau staen PAS trwy gyfrifo'r mynegai mesangial (M) yn ôl y Model Anifeiliaid o Brotocol Cymhlethdodau Diabetig (AMDCC): arwynebedd (nifer y picsel) staen PAS / cyfanswm arwynebedd (nifer y picsel)o y glomeruli. Cyfrifwyd y MI ar gyfer o leiaf 20 glo-meruli fesul grŵp (3-4 glomeruli y llygoden a chwe llygod e dwbl sownd fesul grŵp). Cy3-labelu oligonucleotides(Cy3-miRNA(MicroRNAs);Takara Bio) i werthuso dosbarthiad arennol miRNA wedi'i chwistrellu'n fewnwythiennol(MicroRNAs)-PEI-NPs, fel y disgrifiwyd yn flaenorol.27Brifly,Cy3-miRNA(MicroRNAs)ei gymhlethu â PEI-NPs a'i chwistrellu'n fewnwythiennol i lygod db / db, yna tynnwyd yr arennau 1 awr yn ddiweddarach. Cafodd adrannau (5-μm o drwch) eu deor am 2 awr ar dymheredd ystafell gyda Lotus tetragonolobus lectin (Labordai Vector, CA, UDA) a DAPI fel gwrthgyfrin. Yna aseswyd lefel y fflworoleuedd gan ficrosgopeg fflworoleuedd (BZ-X710; Keyence, Osaka, Japan) a BZ-X _Meddalwedd dadansoddwr (Keyence). Defnyddiwyd 10}}, Novus Biologicals, CO, USA) ac IV(NB120-6586, Novus Biologicals), a gwrthgorff eilaidd poly-clonaidd gafr yn erbyn llygoden a chwningen HRP(PI-1000, Vector Laboratories) . Cafodd y samplau meinwe eu hymgorffori mewn Cyfansawdd Meinwe-Tek OCT (Sakura Finetek Japan, Tokyo, Japan) a'u rhewi mewn nitrogen hylifol. Cafodd adrannau Cryostat (5-μm o drwch) eu gosod ar sleidiau gwydr wedi'u gorchuddio â silane (Matsunami Glass Ind, Osaka, Japan).
Croesrywio yn y fan a'r lle.ISH ar gyfer miRNA(MicroRNAs)Perfformiwyd -125b-5p a miRNA-181b-5p gan ddefnyddio dwbl digoxigenin wedi'i labelu miRCURY LNA Detection probes(Qiagen). Roedd stiliwr wedi'i sgramblo yn reolaeth negyddol ac roedd U6 yn rheolaeth gadarnhaol. Cynhaliwyd y weithdrefn yn unol â phrotocol y gwneuthurwr.28Brifly, cafodd adrannau arennau llygoden wedi'u mewnblannu â pharaffin (5- μm) eu dadbaraffinio, eu golchi mewn PBS, a'u trin â proteinas K am 10 munud ar 37 gradd C. Yna deorwyd y sleidiau â chwiliedydd â label LNA-digoxigenin (40). nM) mewn siambr llaith dros nos ar 60 gradd Ar ôl golchi, deorwyd yr adrannau dros nos gyda gwrthgorff antidigoxigenin wedi'i gyfuno â ffosffatas alcalïaidd ar 4 gradd . Yna, datblygwyd y sleidiau gan ddefnyddio nitroblue tetrazolium cloride/5-brom{{9} }}cloro-3'-hydoddiant halen ptoluidine indolyphosphatase (Technolegau Bywyd) dros nos yn y tywyllwch ar dymheredd ystafell. Yna cafwyd ffotomicrograffeg o dan ficrosgop golau (BZ-X710; Keyence).
Tabl II.Rhestr o miRNAs(MicroRNAs)wedi'i fynegi'n wahaniaethol yn arennau llygod db/db trwy ddadansoddiad micro-arae
Cymeradwyaeth astudio.Cynhaliwyd yr astudiaeth yn unol ag egwyddorion Datganiad Helsinki ac fe'i cymeradwywyd gan Bwyllgor Moeseg Prifysgol Feddygol Jichi (rhif cymeradwyo 17-023, 11 Hydref 2017). Cafwyd caniatâd gwybodus ysgrifenedig gan yr holl gyfranogwyr. Cymeradwywyd yr arbrofion anifeiliaid gan Bwyllgor Moeseg Anifeiliaid Prifysgol Feddygol Jichi ac fe'u perfformiwyd yn unol â chanllawiau Defnyddio a Gofalu am Anifeiliaid Arbrofol o Ganllaw Prifysgol Feddygol Jichi ar gyfer Anifeiliaid Labordy.
Ystadegau.Dadansoddwyd y data gan ddefnyddio meddalwedd JMP (fersiwn 13.0.0; SAS Institute Inc, Cary, NC, USA). Mynegir canlyniadau fel modd ± SDs. Cymharwyd y moddau gan ddefnyddio dadansoddiad un ffordd o amrywiant, a phe bai gwahaniaethau ystadegol arwyddocaol, cynhaliwyd prawf Tukey post hoc i gymharu modd dau grŵp gwahanol. Ar gyfer newidynnau categorïaidd, dadansoddwyd gwahaniaethau gan ddefnyddio'r prawf chi-sgwâr. Perfformiwyd atchweliad logistaidd a chyfrifwyd AUCs.P<0.05 was="" considered="" to="" represent="" statistical="">
CLICIWCH YMA I RAN Ⅱ & Ⅲ
Byrfoddau:mynegai màs y corff BMI=; DAPI=4,6-diamidin-2-ffenylindole; FITC= fluorescein isothiocyanate; DKD=clefyd yr arennau diabetig; eGFR= amcangyfrif o gyfradd ffltration glomerwlaidd; lipoprotein dwysedd uchel HDL; HIGA= imiwnoglobwlin uchel A; IRI=anaf isgemia-atlifiad; LDL=lipoprotein dwysedd isel; ns= ddim yn arwyddocaol; PEI-NPs= nanoronynnau polyethylenimin;RNU6=U6 Bach Niwclear 1; Llygoden gyflymedig SAMP=; =rheolaeth SAMR ar gyfer y llygoden sy'n cyflymu â heneb; UACR= cymhareb albwmin-i-creatinin wrin; UUO=rhwystr wreteral unochrog
planhigyn cistanche
Nodyn: Mae'r cistanche perlysiau meddyginiaethol Tsieineaidd traddodiadol (a elwir hefyd yn "berlysiau'r ddraig" a "ginseng anialwch"), yn tyfu yn yr anialwch cras a chynnes yn unig. Fel un o'r naw perlysiau anfarwol, mae cynnwys Cistanche (cistanche tubulosa / cistanche deserticola / cistanche anialwch / salsa cistanche) gyda chynhwysion effeithiol cyfoethog fel echinacoside, acteoside, cyfanswm glycosidau ffenylethanoid, flavonoidau, polysacaridau, ac ati. Roedd y cynhwysion effeithiol hyn yn gwneud cistanche yn werthfawr perlysiau maethlon a deunydd bwyd ar gyfer imiwnedd pobl, organau mewnol, a chelloedd yr ymennydd a niwronau, ac ati. Mae'r astudiaethau ffarmacolegol modern wedi cadarnhau effeithiau canlynol cistanche (manteision cistanche): gwella imiwnedd; gwella swyddogaeth rywiol a swyddogaeth yr arennau; gwrth-blinder; wrth heneiddio; gwella cof; clefyd gwrth-Parkinson; clefyd gwrth-Alzheimer; gwrthocsidiad; rhwyddineb-rhwymedd; gwrthlidiol; hyrwyddo twf esgyrn, gwynnu croen; amddiffyn yr afu; etc.
beth yw cistanche