Mae'r RNA M6 A Darllenydd YTHDF2 yn Rheoli Antitumor Cell NK Ac Imiwnedd Gwrthfeirysol Rhan 4

Mae'n hysbys bod YTHDF2 yn gweithredu fel darllenydd m6A, sy'n cydnabod ac yn rhwymo RNAS sy'n cynnwys m6A ac yn rheoleiddio diraddio trawsgrifiadau m6A.
Yna fe wnaethom berfformio imiwnodiad RNA (RIP)-seq gan ddefnyddio gwrthgorff YTHDF2 i fapio trawsgrifiadau targed wedi'u rhwymo gan YTHDF2 mewn celloedd NK. Cafodd safleoedd rhwymo YTHDF2-eu cyfoethogi yn y rhanbarth dilyniant codio protein a 39UTR (Ffig. S5, E, ac F).

Mae'r cysylltiad rhwng darllenwyr a'r cof yn agos iawn. Darllen yw un o'r ffyrdd gorau o wella ein sgiliau cof.

Pan fyddwn yn darllen, mae ein hymennydd yn mynd trwy broses gymhleth. Wrth i ni sganio geiriau a'u trawsnewid yn ystyr, mae ein hymennydd yn creu cysylltiadau niwronau newydd yn gyson. Mae'r cysylltiadau niwronaidd hyn yn ffurfio ein system cof ac yn ein helpu i storio gwybodaeth yn y cof hirdymor.

Yn ogystal, mae darllen yn ysgogi ein dychymyg a chreadigedd, sydd hefyd yn helpu i wella ein cof. Pan fyddwn yn adeiladu delweddau a golygfeydd yn ein meddyliau, mae ein hymennydd yn cymryd rhan weithredol, felly mae mwy o gysylltiadau niwronaidd yn cael eu ffurfio, sy'n cryfhau ein galluoedd cof.

Yn olaf, mae darllen hefyd yn gwella ein ffocws a'n gallu i ganolbwyntio. Pan fyddwn yn canolbwyntio ar ddarllen, mae ein hymennydd yn ymarfer yn gyson dro ar ôl tro, sy'n gwneud ein cof yn gryfach.

Yn gyffredinol, gall darllen gael effaith hynod gadarnhaol ar ein cof. Trwy feithrin yr arferiad o ddarllen ac ysgogi ein hymennydd trwy ddarllen, gallwn wella ein sgiliau cof a mwynhau bywyd cyfoethocach a mwy diddorol. Gellir gweld bod angen i ni wella cof, a gall Cistanche deserticola wella cof yn sylweddol oherwydd bod Cistanche deserticola yn ddeunydd meddyginiaethol Tsieineaidd traddodiadol sydd â llawer o effeithiau unigryw, ac un ohonynt yw gwella cof. Daw effeithiolrwydd Cistanche deserticola o'r cynhwysion actif lluosog y mae'n eu cynnwys, gan gynnwys asid tannig, polysacaridau, glycosidau flavonoid, ac ati. Gall y cynhwysion hyn hybu iechyd yr ymennydd trwy amrywiaeth o lwybrau.

Cliciwch gwybod 10 ffordd i wella cof

Fe wnaethom nodi 3,951 uchafbwynt rhwymo posiblYTHDF2 o 1,290 o drawsgrifiadau, a chanfuwyd 426 (33%) ohonynt â chyfoethogi m6A sylweddol. Dangosodd dadansoddiad cyfoethogi GO fod y trawsgrifiadau targed 1,290 YTHDF2 wedi'u cyfoethogi mewn cyfieithu protein, rhwymo RNA, andRNA splicing (Ffig. S5 G).

Yna fe wnaethom nodi'r trawsgrifiadau targed posibl o drawsgrifiadau gorgyffwrdd trwy RNA-seq, m6A-seq, a RIP-seqand canfod bod set o 29 trawsgrifiad wedi'u rhwymo gan YTHDF2 ac wedi'u marcio â m6A (yng nghelloedd Ythdf2WT ac Ythdf2ΔNK NK) wedi'u mynegi'n wahaniaethol rhwng celloedd NK. o lygod Ythdf2WTand Ythdf2ΔNK (Ffig. 7 G). Yn eu plith, cafodd 12 trawsgrifiad eu huwchreoleiddio a chafodd 17 o drawsgrifiadau eu hisreoleiddio mewn celloedd NK o lygod Ythdf2ΔNK o'u cymharu â'r rhai o Ythdf2WT NKcells (Ffig. 7 G).

Yn seiliedig ar ein nodweddiad swyddogaethol oYTHDF2 a'r dadansoddiad GO o'r data RNA-seq, mae diffyg Ythdf2 yn effeithio ar raniad celloedd NK ac ymlediad, o bosibl trwy hwyluso diraddio mRNA o bwyntiau gwirio cylch-gell neu reoleiddwyr negyddol yn ystod rhaniad celloedd.

Ymhlith y trawsgrifiadau uwch-reoledig 12, adroddwyd bod tri yn rheoleiddio rhannu celloedd neu amlhau yn negyddol, gan gynnwys Mdm2 (munud dwbl murine 2 [MDM2]; Frum et al., 2009; Giono a Manfredi, 2007; Giono et al., 2017), Tardbp ( Protein rhwymo DNA TAR 43 [TDP43]; Ayala et al., 2008; Sanna et al., 2020), a Crebzf (ffactor trawsgrifio CREB/ATFBZIP; Hu et al., 2020; López-Mateo et al., 2012) , gan awgrymu eu bod yn dargedau posibl o gelloedd NK YTHDF2in.

O bwys, mae'r brigau m6A yn cyd-fynd yn dda â safleoedd rhwymo'r YTHDF yn y 39UTR o Mdm2 a Tardbp a gyda'r 59UTR o enynnau Crebzf, fel y dangosir gan Integrative Genomeg Viewer (Ffig. 7 H).

Cadarnhaodd RIP gan ddefnyddio naill ai gwrthgorff m6A neu YTHDF2 followingqPCR fod Mdm2, Tardbp, a Crebzf yn wir wedi'u m6Amethylated a'u cyfoethogi'n bennaf gan YTHDF2 mewn celloedd NK (Ffig. 7, I a J), yn cefnogi data m6A-seq a RIP-seq, sy'n dangos bod y rhain mae tri genyn yn dargedau posibl o gelloedd inNK YTHDF2.

Er mwyn ymchwilio i weld a yw YTHDF2 yn rheoleiddio mynegiant Mdm2, Tardbp, a Crebzf trwy fodiwleiddio'r sefydlogrwydd mRNA, fe wnaethom fesur diraddiad mRNA y tri tharged trwy atal trawsgrifio ag actinomycin D yn NKcells o lygod Ythdf2ΔNK ac Ythdf2WT.

Dangosodd y canlyniadau fod gan Mdm2 a Tardbp, ond nid Crebzf, hanner oes hirach o gelloedd mewnNK o lygod Ythdf2ΔNK o gymharu â llygod Ythdf2WT (Ffig. 7, K-M), sy'n awgrymu bod Mdm2 a Tardbpare yn cael eu rheoleiddio'n uniongyrchol gan YTHDF2 mewn celloedd NK.

Gan ddefnyddio imiwnoblotting, cadarnhawyd bod lefelau protein MDM2 a TDP43 wedi'u huwchreoleiddio mewn celloedd NK o lygod Ythdf2ΔNK (Ffig. S5 H). -siRNA penodol i ddymchwel mynegiant y ddau enyn in vitro (Ffig. S5, I, a J).

Yna fe wnaethom gymharu amlhau celloedd a goroesiad celloedd Ythdf2ΔNKNK â Mdm2 neu Tardbp yn erbyn heb eu dymchwel ym mhresenoldeb IL-15. Dangosodd y canlyniadau y gallai dymchwel Tardbp o leiaf yn rhannol achub y diffyg mewn amlhau celloedd a goroesiad celloedd mewn celloedd NK o lygod Ythdf2ΔNK (Ffig. 7, N, ac O).

Fodd bynnag, ni chafodd y dymchweliad o Mdm2 unrhyw effeithiau achub (Ffig. S5, K, ac L). Mae'r canlyniadau hyn yn dangos bod YTHDF2 yn rheoleiddio amlhau a rhannu celloedd NK o leiaf yn rhannol trwy atal sefydlogrwydd mRNA Tardbp.

Trafodaeth

Yn yr astudiaeth hon, rydym yn adrodd am rolau amlochrog YTHDF2-methylation m6A cyfryngol mewn imiwnedd cell NK. Canfuom fod YTHDF2, un o ddarllenwyr pwysicaf addasiadau m6A, yn hanfodol ar gyfer cynnal homeostasis celloedd NK, aeddfedu, goroesiad cyfryngol IL-15, ac antitumor a gwrthfeirysoledd.

Fe wnaethom hefyd nodi dolen adborth cadarnhaol newydd rhwng STAT5 ac YTHDF2, i lawr yr afon o IL-15, sy'n cyfrannu at swyddogaethau effeithydd a goroesiad mewn celloedd NK llygoden. Mae Ourstudy yn egluro rolau biolegol methylation YTHDF2 neu m6A yn gyffredinol mewn imiwnedd cynhenid ​​​​cell NK. Mae'n llenwi'r bwlch gwybodaeth ynghylch sut mae YTHDF2 yn rheoleiddio'r ymateb imiwn cynhenid ​​​​i drawsnewidiad malaen a haint firaol.

Mae ein canfyddiadau yn darparu cyfeiriad newydd i harneisio antitumorimunity cell NK ac ar yr un pryd hyrwyddo ein dealltwriaeth o addasiadau ofm6A wrth lunio imiwnedd cynhenid.The m6A darllenydd protein YTHDF2 rheoleiddio sefydlogrwydd mRNAs targed (Du et al., 2016; Wang et al., 2014). Mae astudiaethau niferus wedi cefnogi effaith eang YTHDF2 mewn prosesau biolegol amrywiol.

Mae YTHDF2 yn atal ehangu celloedd hematopoieticstem arferol a hunan-adnewyddu ond mae hefyd yn ofynnol ar gyfer cynnal a chadw bôn-gelloedd hematopoietig hirdymor (Li et al., 2018; Mapperley et al., 2021 Paris et al., 2019; Wang et al., 2018a). Yn ddiweddar, mae'r genyn hwn yn ymwneud ag atal llid yn ystod haint bacteriol (Wu et al., 2020a). Mae rôl a mecanwaith YTHDF2 mewn datblygiad tiwmor wedi'u hastudio'n dda.

Mae YTHDF2 yn hyrwyddo datblygiad bôn-gelloedd lewcemig a chychwyn lewcemia myeloid acíwt (Paris et al., 2019). Ar wahân i lewcemia, dangoswyd bod YTHDF2 yn hyrwyddo datblygiad tiwmorau solet, gan gynnwys canser y prostad (Liet al., 2020), glioblastoma (Dixit et al., 2021), a charcinoma hepatocellular (Chen et al., 2018; Hou et al., 2019; Zhang et al., 2020), trwy dargedu trawsgrifiadau amrywiol wedi'u haddasu ar gyfer m6A, megis atalyddion astumor LHPP a NKX3-1 (Li et al., 2020), IGFBP3(Dixit et al., 2021), OCT4 ( Zhang et al., 2020), a SOCS2 (Chenet al., 2018).

Er bod YTHDF2 yn chwarae rhan hyrwyddol mewn cynnydd tiwmor, mae ein hastudiaeth yn datgelu rôl fuddiol YTHDF2 yn yr ymateb imiwn i gelloedd tiwmor, yn enwedig mewn celloedd NK, sy'n elfen allweddol o imiwnedd cynhenid ​​​​yn erbyn heintiau firaol a thrawsnewid malaen.

Felly, dylid bod yn ofalus wrth ddatblygu atalyddion YTHDF2 i dargedu celloedd tiwmor ar gyfer therapi canser gan y gallai atal YTHDF2 amharu ar ymateb gwrth-tiwmor gwesteiwr celloedd NK. Ar y llaw arall, dylai harneisio gweithgaredd antitumor YTHDF2 mewn celloedd NK neu gelloedd imiwnedd eraill ystyried ei effaith bosibl yn gweithredu celloedd ontumor yn uniongyrchol. Dylai targedu YTHDF2 yn wahaniaethol mewn celloedd tiwmor a chelloedd imiwnedd wneud y mwyaf o weithgaredd gwrth-tiwmor.

For more information:1950477648nn@gmail.com