Ecsosomau wrinol yn nodi llwybrau llid mewn Anafiadau Acíwt i'r Arennau sy'n Gysylltiedig â Vancomycin

Cyswllt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Linda Awdishu 1,*, Amy Le 1, Jordan Amato 1, Vidhyut Jani 1, Soma Bal 2, Robert H. Mills 1, Marvic Carrillo-Terrazas 1, David J. Gonzalez 1, Ashita Tolwani 3, Anjali Acharya 4, Jorge Cerda 5, Melanie S. Joy 6,7, Paola Nicoletti 8, Etienne Macedo 2, Sucheta Vaingankar 2, Ravindra Mehta 2, Satish P. Ramachandra Rao 9 ac ar ran yr Ymchwilwyr Uniongyrchol †

1 Ysgol Fferylliaeth a Gwyddorau Fferyllol Skaggs, Prifysgol California, San Diego, CA 92093, UDA;a6le@ucsd.edu (AL); jegilmor@ucsd.edu (JA); vgjani@ucsd.edu (VJ); rhmills@health.ucsd.edu (RHM);mac215@health.ucsd.edu (MC-T.); djgonzalez@ucsd.edu (DJG)

2 Ysgol Feddygaeth, Prifysgol California, San Diego, CA 92093, UDA; sobal@ucsd.edu (SB);emacedo@ucsd.edu (EM); svaingankar@health.ucsd.edu (SV); rmehta@ucsd.edu (RM)

3 School of Medicine, University of Alabama, Birmingham, AL 35233, USA; atolwani@uab.edu

4 Albert Einstein College of Medicine, The Bronx, NY 10461, USA; anjali2526@gmail.com

5 Coleg Meddygol Albany, Albany, NY 12208, UDA; jorge.cerda82@gmail.com

6 Is-adran Clefydau Arennol a Gorbwysedd, Ysgol Fferylliaeth a Fferylliaeth Skaggs, Aurora, CO 80045, UDA; MELANIE.JOY@cuanschutz.edu

7 Ysgol Feddygaeth, Prifysgol Colorado, Aurora, CO 80045, UDA

8 Ysgol Feddygaeth Mount Sinai, Efrog Newydd, NY 10029, UDA; paola.nicoletti@mssm.edu

9 Adran Meddygaeth Cellog a Moleciwlaidd, System Feddygol Prifysgol Michigan, Ann Arbor, MI 48109, UDA; satishpr@med.umich.edu

* Gohebiaeth: lawdishu@ucsd.edu; Ffôn.: ynghyd â 858-534-3919

† Darperir aelodaeth o'r Ymchwilwyr Uniongyrchol yn y Cydnabyddiaethau.

Crynodeb:

Cefndir:Defnyddir Vancomycin yn gyffredin fel therapi llinell gyntaf ar gyfer organebau gram-bositif fel Staphylococcus aureus sy'n gwrthsefyll methisilin. Aciwt a achosir gan fancomycinarenanaf(V-AKI) wedi'i adrodd mewn hyd at 43 y cant o gleifion, yn enwedig yn y rhai sydd â chrynodiadau cafn wedi'u targedu'n uwch. Mae union fecanwaith anafiadau mewn pobl yn parhau i fod yn anodd dod i'r golwg, gyda thystiolaeth ddiweddar wedi'i chyfeirio at apoptosis cell tiwbyn procsimol. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom ymchwilio i gynnwys protein ecsosomau wrinol mewn cleifion â V-AKI i egluro ymhellach biofarcwyr o fecanweithiau anafiadau ac ymatebion posibl. Dulliau: Cynhwyswyd samplau wrin gan gleifion â V-AKI a gofrestrwyd yn yr astudiaeth DIRECT ac a oedd yn cyfateb i reolaethau iach o'r UAB-UCSD O'Brien CentreBiorepository yn y dadansoddiad. Echdynnwyd exosomau gan ddefnyddio'r egwyddor gwahardd toddyddion a dyddodiad a achosir gan polyethylen glycol. Pennwyd hunaniaeth a meintioliad protein gan sbectrometreg màs cromatograffaeth hylif di-label (LC/MS). Y creatinin serwm brig cymedrig oedd 3.7 ± 1.4 mg/dL a'r amser iarenanafoedd 4.0 ±3.0 diwrnod. Ar adeg rhyddhau, dangosodd 90 y cant o gleifion adferiad rhannol; Profodd 33 y cant adferiad llawn erbyn diwrnod 28. Datgelodd dadansoddiadau proteomig ar bum sampl rheoli V-AKI a 7 2009 o broteinau ym mhob sampl a phroteinau 251 sy'n gysylltiedig yn sylweddol â V-AKI (Pi-sgôr> 1). Roedd y proteinau gwahaniaethol uchaf yn ategu C3, yn ategu C4, protein rhwymo galectin, ffibrinogen, macroglobwlin alffa, imiwnoglobwlin mu cyson trwm, a serotransferrin.

Casgliad:Mae ecsosomau wrinol yn datgelu uwch-reoleiddio proteinau llidiol ar ôl anaf neffrotocsig mewn V-AKI. Mae angen astudiaethau pellach ar gyfer sampl mawr o gleifion i gadarnhau'r canfyddiadau hyn er mwyn egluro mecanweithiau pathoffisiolegol a dilysu biomarcwyr anafiadau posibl.

Geiriau allweddol:fancomycin; AKI; nephrotoxicity; ecsosomau; llid; ategu; llwybrau imiwnedd

Llysieuyn Cistancheyn gallu trin anaf i'r arennau

Chengdu Wecistanche wedicistanchecynhyrchion ar gyfer trin anaf i'r arennau

1. Rhagymadrodd

Mae Vancomycin yn wrthfiotig glycopeptid a ddefnyddir i drin heintiau Staffylococws awrëws sy'n gwrthsefyll methisilin mewn cleifion sy'n ddifrifol wael. Mae Nephrotoxicity yn ddigwyddiad andwyol difrifol sy'n effeithio ar 10-20 y cant o gleifion sy'n cael eu trin ac mae'n gysylltiedig â hyd arhosiad cynyddol yn yr ysbyty, 30-cyfraddau aildderbyn i'r ysbyty dydd, a 30-marwolaethau dydd [1] o bob achos [1]. Aciwt sy'n gysylltiedig â vancomycinarenanaf(V-AKI) yn gysylltiedig â dos a gyda dechrau therapi 4-17 diwrnod. Er bod V-AKI wedi'i gydnabod ers amser maith fel sgîl-effaith fawr vancomycin, nid yw mecanweithiau neffrowenwyndra wedi'u deall yn dda o hyd. Mae dealltwriaeth o'r ymatebion cellog a moleciwlaidd a ysgogwyd gan vancomycin yn allweddol bwysig i ddeall mecanweithiau a datblygu strategaethau i leihau'r risg o V AKI a chostau cysylltiedig wrth wneud y mwyaf o'i effeithiolrwydd wrth drin heintiau. Ymddengys bod yr ymateb arennol gwenwynig yn cael ei achosi gan effaith uniongyrchol vancomycin ar epitheliwm y tiwbiau procsimol [2]. Hyd yn hyn, mae dulliau tocsigenomig safonol wedi'u cymhwyso i astudio V-AKI mewn modelau llygoden, ond mae astudiaethau dynol yn ddiffygiol [3-5]. Mae modelau anifeiliaid yn dangos bod gweinyddu vancomycin yn achosi straen ocsideiddiol a allai gyfrannu at anaf i'r arennau [6,7]. Un mecanwaith anaf posibl yw trapio'r cyffur yn y celloedd tiwbaidd procsimol gan ei fod yn cael ei gludo gan y cludwyr catation organig (OCTs) ar draws y bilen fasochrol ac i mewn i'r gell tiwbyn procsimol, ond ni nodwyd unrhyw fecanweithiau cludo alllif gweithredol [6 -8].

Fesiglau microcytig sy'n deillio o bilen yw ecsosomau sy'n chwarae rhan allweddol mewn cyfathrebu rhynggellog a chyflenwi protein/asid niwclëig ac sy'n darparu'r potensial ar gyfer darganfod biofarcwyr newydd i gynorthwyo â diagnosis clinigol oarenanaf[9]. Cynigiwyd bod gan ecsosomau fwy o benodolrwydd a sensitifrwydd ar gyfer darganfod biofarcwr, wedi'i briodoli i sefydlogrwydd sbesimenau o'i gymharu â dulliau trawsgrifio a phroteomig gan ddefnyddio samplau serwm ac wrin confensiynol [9]. Yn yr astudiaeth hon, gwnaethom brofi'r ddamcaniaeth bod y newid mewn proteinau ecsosom wrinol mewn ymateb i V-AKI yn helpu i egluro mecanweithiau anafiadau a nodi biomarcwyr newydd ymhlith cleifion ag anaf arennau a achosir gan gyffuriau wedi'i gadarnhau. Ar gyfer hyn, gwnaethom gyflogi pynciau o astudiaeth y Consortiwm Anafiadau Arennol a Achosir gan Gyffuriau (DIRECT), sy'n garfan ryngwladol aml-ganolfan o achosion acíwt a achosir gan gyffuriau a ddyfarnwyd yn glinigol.arenanafa rheolaethau ar sail poblogaeth i archwilio rhagfynegyddion ffarmacogenomeg gan ddefnyddio cysylltiad genom-eang. Disgrifir manylion yr astudiaeth DIRECT yn yr adran Dulliau a chyhoeddiad diweddar gan ein labordy [10].

2. Canlyniadau

Cafodd sbesimenau wrin o 22 o bynciau, 10 achos V-AKI, a 12 rheolydd, eu cynnwys yn y dadansoddiadau. Roedd demograffeg y claf yn debyg rhwng achosion a rheolaethau V-AKI ac fe'u crynhoir yn Nhabl 1. Yn ôl y disgwyl, roedd nifer yr achosion o orbwysedd, diabetes, a methiant y galon yn uwch mewn achosion V-AKI o gymharu â rheolaethau (Tabl 1).

Datblygodd pob achos V-AKI AKI cam 2 neu uwch fel y'i diffinnir gan feini prawf Gwella Canlyniadau Byd-eang Clefyd yr Arennau (KDIGO) (Ffigur 1) [11]. Digwyddodd dyfodiad V-AKI 4.0 ± 3.0 diwrnod ar ôl cychwyn y fancomycin. Dangosir cwrs amser y newidiadau mewn creatinin serwm (Scr) ar ôl derbyniad i'r ysbyty ar ôl rhyddhau o'r ysbyty, ac wedi hynny, yn Ffigur 1.

Ffigur 1. Newidiadau mewn Creatinin Serwm dros Gwrs V-AKI. Mae'r ffigur hwn yn dangos y newidiadau mewn creatinin serwm mewn 10 achos yn ystod cwrs acíwt sy'n gysylltiedig â vancomycinarenanafo dderbyniad i'r ysbyty hyd at ddiwrnod 90 ar ôl yr anaf. Mae'r pwyntiau amser yn cyfateb i bwyntiau amser astudio Consortiwm Anafiadau Arennol a Achosir gan Gyffuriau (DIRECT). Talfyriadau: SCr=creatinin serwm, derbyniad i'r ysbyty =, Predrug=cyn dod i gysylltiad â chyffuriau, DIRI=Diffiniad o anafiadau arennol a achosir gan gyffuriau wedi'i fodloni, DrugDC {{8} } terfynu cyffuriau neu leihau dos, Nadir Scr=serwm isaf ar ôl V-AKI, Disg o'r Ysbyty= rhyddhau o'r ysbyty

Roedd y ffactorau risg sylfaenol mewn achosion V-AKI yn cynnwys sepsis (30 y cant), clefyd y galon (30 y cant), diabetes Mellitus (30 y cant), anemia (20 y cant), amlygiad radiogyferbyniad (10 y cant), clefyd yr afu (10 y cant), a hypoalbwminemia (10 y cant ) ( Ffigur 2 ).

Ar y mwyaf, roedd achosion V-AKI wedi derbyn episodau dosio tri chyffur o vancomycin. Roedd dosau dyddiol vancomycin yn amrywio o 1000 i 4000 mg. Dangosir y nifer cymedrig (amrediad rhyngchwartel (IQR)) o ddyddiau a dreuliwyd ym mhob cyfnod dosio yn Ffigur 3. Roedd crynodiadau plasma cafn vancomycin cymedrig (gwyriad safonol (SD)) sy'n gysylltiedig â dosio episodau 1-3 yn uwch na 20.6 ± 8.1, 29.6 ± 16.3, 38.0 ± 13 mg/L, yn y drefn honno. Fodd bynnag, nid oedd y gwahaniaeth mewn crynodiadau rhwng pob un o'r cyfnodau yn ystadegol arwyddocaol (pennod 1 vs. 2 p=0.5, pennod 2 vs. 3 p=0.41)

Crynhoir data canlyniadau eraill yn Nhabl 2. O ystyried difrifoldeb yr anaf, roedd angen therapi amnewid arennol ar 20 y cant o gleifion. Roedd y marwolaethau mewn ysbytai yn 10 y cant . Ar ôl cael eu rhyddhau o'r ysbyty, ni wnaeth 90 y cant o gleifion wella o V-AKI. Roedd gan chwe chlaf Scr wedi'i fesur ar ddiwrnod 28 ar ôl anaf a phedwar ar ddiwrnod 90. Erbyn diwrnod 28, roedd gan ddau o chwech (33 y cant) o gleifion AKD ond nid oedd gan yr un o'r pedwar claf a oedd yn weddill AKD erbyn diwrnod 90.Arennaucynhaliwyd biopsïau mewn 20 y cant o achosion V-AKI (Tabl 2).

Roedd y 12 sampl a oedd yn gymwys ar gyfer dadansoddiadau ar ôl gosod yr hidlydd ar gyfer paru'r peptidau â'u sbectra cytras, yn cynnwys cyfanswm o broteinau 2009. Dadansoddwyd y proteinau hyn ymhellach. Yn gyntaf, cynhaliwyd dadansoddiad prif gyfesurynnau (PCoA) i gymharu proteome cyffredinol pob sampl. Datgelodd y dadansoddiad hwn wahaniad sylweddol (gwerth p PERMANOVA=0.037) rhwng AKI a samplau rheoli (Ffigur 4), gan ailadrodd y ffenoteip lefel systemig ar y lefel protein ecsosom hefyd, gan gynyddu ein hyder yn y setiau data hyn. . Graddiwyd cryfder y cysylltiad rhwng pob protein a statws V-AKI gan ddefnyddio'r metrig gwerth pi, sy'n cyfuno arwyddocâd gwerth-p â newid plyg [12].

Ffigur 4. Mae Cyfansoddiad Proteome yn Gwahaniaethu Ecsosomau Wrinol Cleifion V-AKI a Rheolyddion. (A) Prif gyfesurynnau dadansoddiad o proteomes sampl. Defnyddiwyd metrig pellter Bray-Curtis i gyfrifo gwahaniaethau rhwng proteome sampl a dangosir plot prif gyfesurynnau. Gwelwyd gwahaniad ar hyd echelinau 1 a 3 rhwng samplau AKI (coch) a samplau rheoli (glas). (B) Boxplot yn crynhoi pellter Bray-Curtis rhwng rheolaeth a samplau AKI. Profwyd y gwahaniad ystadegol rhwng AKI a samplau rheoli a ddangosir yn (A) gan ddefnyddio dadansoddiad cyfnewidiol o brawf amrywiant (PERMANOVA). Dangosir blychau blychau yn crynhoi'r canlyniadau wrth gymharu pellteroedd rheoli neu samplau AKI i reoli samplau.

Nesaf, esgorodd cymariaethau deuaidd rhwng V-AKI a samplau rheoli 42 o broteinau a oedd yn gysylltiedig yn arwyddocaol â ffenoteip AKI a 26 o broteinau sy'n gysylltiedig â ffenoteip rheoli (sgôr Pi > 1) (Tabl Atodol S1). Dangosir plot llosgfynydd sy'n dangos yr arwyddocâd a'r newid plyg sy'n gysylltiedig â phob protein yn Ffigur 5A. Y proteinau gwahaniaethol uchaf ar gyfer achosion V-AKI oedd ffibrinogen, cyflenwad C3, cyflenwad C4, protein rhwymol galectin, macroglobwlin alffa, imiwnoglobwlin mu cyson trwm, a serotransferrin (Ffigur 5B). Perfformiwyd dadansoddiad cyfoethogi set genynnau ymhlith proteinau sylweddol i nodi categorïau o broteinau a newidiwyd mewn cleifion V-AKI a chrynhoir y canlyniadau yn Nhabl Atodol S1. Dangoswyd bod gan sawl protein a oedd yn gysylltiedig â'r ffenoteip AKI swyddogaethau sy'n gysylltiedig â llid a / neu gyfryngu ffenoteip llidiol. Er mwyn profi a allai'r newidiadau protein hyn fod yn gysylltiedig â newidiadau mewn signalau cytocin sylfaenol, perfformiwyd casgliad cytocin, a ddangosodd berthynas gref rhwng proteinau sy'n gysylltiedig ag AKI a chytocinau IL10, IL6, a TNF. Roedd y cytocinau hyn yn cynnwys 2.8, 2.3, a 2.1-plygwch fwy o gysylltiadau â phroteinau sy'n gysylltiedig ag AKI na phroteinau sy'n gysylltiedig â rheolaeth, yn y drefn honno, fel y crynhoir yn Ffigur 5C. Dangosodd rhwydweithiau rhyngweithio protein-protein o broteinau sy'n gysylltiedig ag AKI a chytocinau tybiedig gysylltiadau proinflammatory yn bennaf ymhlith proteinau sy'n gysylltiedig ag AKI fel y crynhoir yn Ffigur 5D.

Ffigur 5. Cysylltiadau lefel protein i V-AKI. (A) Llain llosgfynydd yn dangos arwyddocâd newid plyg a phrawf-t pob protein i statws V-AKI. Dangosir y 10 protein uchaf sy'n gysylltiedig ag AKI a statws rheoli mewn glas a choch yn y drefn honno. Mae proteinau cysylltiedig eraill sy'n seiliedig ar Sgôr Pi > 1 yn cael eu dangos mewn melyn. (B) Cyfrifwyd sgôr Pi, sy'n cyfrif am arwyddocâd newid plyg a phrawf-t ar gyfer pob protein a chaiff y proteinau â'r cysylltiadau cryfaf eu plotio. (C) Topcytocinau sy'n gysylltiedig ag AKI neu broteinau rheoli. Cymerwyd dull casglu cytocinau seiliedig ar rwydwaith a dangosir y cytocinau sy'n dangos y sgorau cyfoethogi cryfaf tuag at naill ai AKI neu broteinau cysylltiedig â rheolaeth. Mae bariau coch yn cynrychioli cytocinau sy'n gysylltiedig â phroteinau sy'n gysylltiedig ag AKI, mae bariau glas yn cynrychioli cytocinau sy'n gysylltiedig â phroteinau sy'n gysylltiedig â rheolaeth. (D) Rhwydwaith rhyngweithio protein-protein o broteinau sy'n gysylltiedig ag AKI a chytocinau casglu wedi'u cyfoethogi gan AKI. Mae ymyl allanol nodau protein wedi'i liwio yn dibynnu ar gysylltiadau â cytocinau pro neu wrthlidiol. Mae maint pob nod yn cynrychioli cryfder cysylltiad ystadegol pob protein â statws AKI.

Cistanche tubulosayn gallu trin anaf i'r arennau

3. Trafodaeth

Rydym yn adrodd ar ddull newydd o ddefnyddio ecsosomau wrinol i lywio mecanweithiau pathoffisiolegol sy'n ymwneud â chyffuriau a achosir gan gyffuriau.arenanafdefnyddio vancomycin fel y gwenwynig arennol prototypical. Un o gryfderau'r astudiaeth hon yw ymgorffori data lefel claf â nodweddion da o'r astudiaeth DIRECT [10] a ddatblygwyd i egluro mecanweithiau gan gynnwys genomeg a achosir gan gyffuriau.arenanaf. Roedd pynciau ag AKI cam 2 neu uwch yn agored i ffactorau risg confensiynol ar y llinell sylfaen. Roedd gan bob pwnc astudiaeth grynodiadau cafn plasma vancomycin sylweddol uwch er gwaethaf derbyn dosau dyddiol yn llai na'r trothwy nephrotoxicity a dderbynnir yn gyffredinol o 4 g y dydd [13]. Ni wnaeth llawer o bynciau wella'n llwyr o V-AKI adeg rhyddhau o'r ysbyty ac roedd ganddynt glefyd acíwt yr arennau am y mis yn dilyn anaf. Yn ôl y disgwyl, ychydig o gleifion a gafodd biopsi arennau.

Dangosodd proteomeg fesigl ecsosom/allgellog wrinol (EV) fod y proteinau gwahaniaethol a dargedwyd ar gyfer achosion V-AKI yn cynnwys cyflenwad C3, cyflenwad C4, protein rhwymo galectin, ffibrinogen, macroglobwlin alffa, imiwnoglobwlin mu cyson trwm , a serotransferrin. Mae'r canfyddiadau exosome hyn yn llywio mecanweithiau anafiadau ar y lefel isgellog/uwch-foleciwlaidd ar gyfer V-AKI ac o bosibl yn gweithredu fel biomarcwyr ar hyd continwwm y broses clefyd a achosir gan gyffuriau.

Mae gan ecsosomau, sy'n bresennol mewn gwaed ac wrin, rolau pwysig mewn cyfathrebu rhynggellog, ceulo, a rheoli gwastraff [14]. Ar ôl aciwt sy'n gysylltiedig â thocsinarenanaf, gall exosomes a ryddhawyd o gelloedd epithelial tiwbaidd gyfathrebu signalau anaf i recriwtio ymdreiddiad macrophage a hyrwyddo llid tubulointerstitial [15]. Fe wnaethom resymu y byddai cynnwys protein exosomau yn amrywio rhwng achosion V-AKI a rheolaethau iach. Roedd dau gant pum deg un o broteinau wedi'u dadreoleiddio mewn V-AKI, ac roedd yn ymddangos bod y rhain yn ymwneud yn bennaf â'r llwybrau llidiol a cheulo. Ymhlith y 251 o broteinau hyn, dangosodd ein dadansoddiad fod cyflenwad C3, cyflenwad C4, protein rhwymo galectin, ffibrinogen, macroglobwlin alffa, imiwnoglobwlin mu cyson trwm, a serotransferrin yn gysylltiedig yn arwyddocaol ag achosion V-AKI.

Yn seiliedig ar ein canlyniadau bod C3 a C4 ymhlith y proteinau ecsosomaidd V-AKI a oedd yn gwahaniaethu orau, rydym yn cynnig bod actifadu system ategu yn gysylltiedig â'r anaf tiwbaidd arennol a achosir gan vancomycin. Mae hyn hefyd yn cytuno'n dda â llenyddiaeth gyhoeddedig bod actifadu'r system ategu yn chwarae rhan mewn glomerulonephritis cymhleth imiwnedd ac amrywiaeth eang o glefydau arennau [16]. Mae difrod i'r arennau sy'n cael ei chyfryngu gan actifadu yn AKI oherwydd isgemia neu amlygiad nephrotocsin wedi'i gysylltu â digwyddiadau llidiol systemig sy'n sbarduno ac yn cyfrannu at anaf organau o bell a marwolaethau cleifion [17]. Mewn modelau o anaf isgemia-atlifiad (IR), mae hypocsia, disbyddiad ATP, a difrod mitocondriaidd yn arwain at gynhyrchu radicalau rhydd o ocsigen ar atlifiad [18]. Mae cytocinau, cemocinau, ac actifadu ategol yn chwyddo'r llid, gan arwain at anaf tiwbaidd acíwt. Yn ogystal, mae llygod diffygiol derbynnydd C3a a C5a yn cael eu hamddiffyn rhag anaf IR [19,20]. Dangoswyd bod anafiad IR yn dadreoleiddio'r cynhyrchiad lleol o gydrannau ategol erbynarencelloedd endothelaidd a thiwbaidd [16,21]. Mae sawl astudiaeth mewn modelau anifeiliaid a phynciau dynol wedi nodi dyddodiad cynyddol o gynhyrchion protein ategol fel C3 a C4 ar hyd y bilen islawr tiwbaidd ar ôl trawma neu anaf yn yaren. Ni ddarganfuwyd bod y lefelau cynyddol hyn o ddyddodion yn bresennol yn arwyddocaol yn y rhanbarth peritubwlaidd neu glomeruli, ond maent wedi'u crynhoi'n drwm yn y bilen tiwbaidd, fel y gwelir mewn biopsïau o fodau dynol ac arennau model anifeiliaid [17]. Gall exosomes ac EVs gludo cydrannau cyflenwad cylchrediad y gwaed pan fydd actifadu cyflenwad yn cael ei ddadreoleiddio [22,23]. Mae nifer o arbrofion cellog ac arsylwadau clinigol wedi cadarnhau bod EVs a ryddhawyd yn cario ac yn modiwleiddio'r proteinau cyflenwad ac, ar yr un pryd, mae eu cynhyrchiad o dan gyflwr llidiol hefyd yn gallu dylanwadu ar nifer y fesiglau cylchrediad y gwaed [23]. Mae'r gyd-ddibyniaeth hon rhwng y ddwy broses yn arwain at y casgliad bod EVs yn arddangos y potensial o fod yn ffynonellau biofarcwyr, targedau, ac asiantau cyflenwi therapiwtig tuag at gyfansoddion ategol ac imiwnofodiwlaidd sy'n berthnasol iawn yng nghwmpas mecanweithiau llidiol AKI. Mae ein canfyddiad bod y samplau V-AKI o gymharu â rheolaethau iach, yn dangos rôl ymatebion imiwn i wenwyndra uniongyrchol fancomycin mewn celloedd tiwbaidd arennau. Yn ogystal â'r holl gynnwys protein uchod, mae ecsosomau/EVs sy'n deillio o wrin hefyd yn cynrychioli biomarcwyr anfewnwthiol posibl fel dewisiadau amgen i fiopsi arennau i ganfod a hysbysu am rôl y system ategu mewn cyffuriau a achosir gan gyffuriau.arenanaf.

Er bod llawer o astudiaethau blaenorol (gweler yr ychydig frawddegau nesaf am gyfeiriadau penodol) wedi canolbwyntio ar rôl galectin-3 (Gal-3) ynarenanaf, prin yw'r data ar y protein rhwymo galectin (Gal-3-bp). Mynegir Gal-3 yn tiwbiau casglu'r aren a swyddogaethau i hyrwyddo nephrogenesis, modiwleiddio rhyngweithiadau cell-gell a matrics-gell, a rheoleiddio llid [24-26]. Henderson et al. adolygu rôl Gal-3 mewn llid a chanfod bod Gal-3 yn elfen allweddol mewn llid cronig ac os daw anaf i feinwe yn rheolaidd. Mae'n hwyluso "walu" anaf meinwe, gan ohirio lledaeniad yr anaf [27]. Yn ogystal, mae Nishiyama et al. dangoswyd mewn llygod mawr ag AKI isgemig bod Gal-3 mRNA wedi'i uwchreoleiddio, a datgelodd yr atlifiad canlynol, imiwn-histocemeg, gynnydd mewn Gal-3 ar draws segmentau neffron [25]. Mae Tsuchiyama et al. Canfuwyd bod rhoi Gal-3 mewn llygod mawr â neffritis serwm nephrotoxic wedi arwain at ostyngiad mewn ysgarthiad protein wrinol, ffurfio cilgant, a llai o ymdreiddiad macroffagau i mewn i glomeruli [28]. Mae hyn yn awgrymu bod Gal{-3 yn chwarae rhan mewn adfywio ar ôl anaf isgemig neu imiwn-gyfryngol. Fel partner cytras Gal-3, byddai rôl sylfaenol Gal-3-bp, a'r rheswm dros ei ddadreoleiddio mewn anafiadau neffrotocsig oherwydd fancomycin ac asiantau eraill, yn ffocws hollbwysig mewn ymchwiliadau yn y dyfodol.

Canfu ein hastudiaeth hefyd fod pob un o’r tair is-uned o ffibrinogen wedi’u dadreoleiddio, mewn cytundeb da â’r data a gyhoeddwyd yn flaenorol. Mae ffibrinogen yn foleciwl plasma dimeric hydawdd ac mae pob dimer yn cynnwys tri polypeptid: alffa, beta, a gama [29]. Mae'n chwarae rhan allweddol mewn hemostasis a cheulo ond dangoswyd hefyd ei fod yn bwysig wrth reoleiddio cyflyrau llidiol-gyfryngol [30-32]. Mae Ajay et al. dangos bod argaeledd ffibrinogen yn bwysig ar gyfer swyddogaeth yr arennau, llid, a goroesi [33]. Ymhellach, gallai ffibrinogen gael effaith gwrth-gludiog ar gelloedd epithelial yr arennau a allai fod yn fuddiol trwy helpu i atal rhwystr tiwbaidd [34]. Mae ffibrinogen yn cael ei gynyddu a'i uwchreoleiddio'n sylweddol yn AKI ac mae wedi'i werthuso'n flaenorol fel biomarcwr posibl ar gyfer canfod AKI yn gynnar [29]. Astudiodd Hoffman et al., y newid mewn ffibrinogen ar ôl isgemia / atlifiad a gweinyddiaeth cisplatin mewn llygod mawr, a chafodd mRNA ei uwchreoleiddio 30 munud ar ôl anaf IR dwyochrog a chyrhaeddodd uchafbwynt yn 48-72 h, ond mewn gweinyddu cisplatin, roedd mynegiant mRNA o ffibrinogen yn canfod yn 24 h [29]. Canfuwyd ffibrinogen wrinol mor gynnar ag anaf ôl-isgemig-atlifiad 3 h a 24 h ar ôl gweinyddu cisplatin yn cyfateb i gynnydd mawr mewnarenanafmoleciwl 1 (KIM-1) [29].

Manteision Cistanche: gall drinanaf i'r arennau

Yn hanesyddol, mae dau fecanwaith pathoffisiolegol gwahanol ar gyfer V-AKI wedi'u derbyn yn gyffredinol, necrosis tiwbaidd acíwt o effeithiau gwenwynig uniongyrchol a neffritis interstitial acíwt. Mae'r epitheliwm tiwbaidd procsimol arennol yn colli cyfanrwydd cytoskeletal, necrosis, ac apoptosis mewn necrosis tiwbaidd acíwt [35]. Mae celloedd necrotig yn rhyddhau moleciwlau sy'n dadreoleiddio'r system imiwnedd gynhenid ​​gan achosi llid a chyflymu anaf tiwbaidd [35]. Yn yr astudiaeth gyfredol, gwnaethom ddangos marcwyr llidiol yn EVs wrinol cleifion â V-AKI. Yn ogystal, canfuom berthynas ymfflamychol rhwng cytocinau IL10, IL6, a TNF a'n prif broteinau gwahaniaethol AKI. Gyda'i gilydd, mae'r data hyn yn awgrymu bod pathoffisioleg V-AKI yn wenwynig tiwbaidd gydag uwch-reoleiddio llid yn ystod y cyfnod o 24-72 h ar ôl anaf.

Mae nifer o gyfyngiadau i'n hastudiaeth. Mae maint sampl bach 22 o gleifion a oedd yn wrywaidd ac yn Cawcasws yn bennaf yn cyfyngu ar gyffredinoli ein canfyddiadau i rywiau, hil ac ethnigrwydd eraill. Ail gyfyngiad i'n hastudiaeth oedd bod gan sampl ecsosom wrinol pob claf symiau amrywiol o gyfanswm protein, gan wneud mesur proteinau penodol yn anodd, yn enwedig ar gyfer y rhai â symiau absoliwt is. Er nad yw hyn o reidrwydd yn gyfyngiad ar yr astudiaeth hon fel y cyfryw, gan fod gallu pob unigolyn i bacio proteinau ar eu hesosomau wrin yn amrywio'n naturiol, mae'r meintiau llai o broteinau mewn rhai unigolion yn cyfyngu ar ein gallu i wneud dadansoddiadau pellach a dod i gasgliadau ystyrlon y gellir eu cyffredinoli. poblogaethau mwy. Trydydd cyfyngiad yw'r sampl pwynt amser sengl sy'n cyfyngu ar ein dealltwriaeth o newidiadau cellog sy'n digwydd ar wahanol gamau o'r continwwm AKI, ee, cyfnod anafiadau uniongyrchol, cyfnod atgyweirio, ac ati. Bydd samplu dilyniannol yn hybu ein dealltwriaeth o gwrs amser cynnwys ecsosomaidd newidiadau, straen ocsideiddiol a achosir gan gyffuriau yn cronni, a dadreoleiddio'r llwybrau imiwnedd wrth atgyweirio. Roedd yr astudiaeth gyfredol yn cynnwys cleifion fel y'u diffinnir gan drothwyon Scr. Mae creatinin serwm yn biomarcwr swyddogaethol arennau amherffaith gan fod drychiadau yn Scr yn aml ar ei hôl hi o'r anaf [36]. Mae hyn yn cyfyngu ar sensitifrwydd a phenodoldeb Scr i ganfod yn gynnararenanaf[36], ac mae astudiaethau wedi dod i'r amlwg yn nodiarenanafbiofarcwyr megisaren anafmoleciwl 1 (KIM1) a neutrophil gelatinase-gysylltiedig lipocalin (NGAL) ar gyfer canfod cynnar o nephrotoxicity [37,38]. Fel yr adroddwyd yn flaenorol, mae gan fiofarcwyr y potensial i ganfod lefelau amlwg ac is-glinigol o achosion a achosir gan gyffuriauarenanaf[39,40].

4. Defnyddiau a Dulliau

4.1. Dewis Cleifion

Cynhwyswyd samplau wrin o 10 claf â V-AKI, a gofrestrwyd yn yr astudiaeth DIRECT [10] a 12 sampl wrin rheoli iach o Biorepository Canolfan UAB-UCSD O'Brien yn y dadansoddiad. Cafodd pynciau rheoli eu paru yn ôl rhyw, hil, a degawd oed â phynciau'r astudiaeth ac nid oedd ganddynt unrhyw amlygiad i vancomycin neu hysbysarenanaf. Mae'r astudiaeth DIRECT yn astudiaeth ryngwladol sy'n archwilio rhagfynegwyr ffarmacogenetig a achosir gan gyffuriauarenanafgan ddefnyddio astudiaeth cysylltiad genom-eang o achosion a rheolaethau ar sail poblogaeth [10]. Cymeradwywyd yr astudiaeth DIRECT gan y bwrdd ymchwil sefydliadol (IRB #121651) a chafwyd caniatâd gwybodus ysgrifenedig gan yr holl gyfranogwyr cyn cofrestru a oedd yn cynnwys darparu sbesimenau wedi'u storio ar gyfer dadansoddiadau yn y dyfodol. Diffiniwyd AKI yn DIRECT fel gostyngiad sydyn yng ngweithrediad yr arennau a ddangosir gan unrhyw un o'r meini prawf canlynol: (1) cynnydd absoliwt mewn creatinin serwm (Scr) (Yn fwy na neu'n hafal i 0.3 mg/dL neu Yn fwy na neu'n hafal i 26.4 µmol/ L) (o fewn 48-h ffenestr amser) o'r gwerth Scr cyfeirnod, (2) cynnydd canrannol yn Scr o Fwy na neu'n hafal i 50 y cant (1.5 gwaith yn fwy o'r cyfeirnod) o fewn saith diwrnod, (3) gostyngiad mewn wrin allbwn (oliguria dogfenedig o<0.5 ml/kg/h="" for="">6 h) er gwaethaf dadebru hylif digonol pan fo'n berthnasol, (4) gostyngiad absoliwt mewn Scr o Fwy na neu'n hafal i 0.3 mg/dL neu Fwy na neu'n hafal i 26.4 µmol/L (o fewn 48- f ffenestr amser) o'r cyfeirnod Scr, a (5) gostyngiad cymharol yn Scr o Fwy na neu'n hafal i 50 y cant (1.5 plyg o'r cyfeirnod) o fewn saith diwrnod. Cofrestrwyd cleifion ag AKI cam 2 neu uwch yn dilyn amlygiad vancomycin yn yr astudiaeth. Casglwyd data clinigol gan gynnwys demograffeg, hanes meddygol, canfyddiadau arholiadau corfforol, arwyddion hanfodol, cemegau gwaed ac wrin, canlyniadau biopsi, a data dosio cyffuriau, ar y pwyntiau amser canlynol: (1) derbyniad i'r ysbyty, (2) cychwyn vancomycin, ( 3) brig anafiadau, (4) rhoi'r gorau i'r cyffur neu leihad dos, (5) datrys anafiadau, (6) rhyddhau o'r ysbyty, (7) 28 diwrnod- a (8) 90 diwrnod ar ôl anaf. Diffiniwyd cyfnod dosio vancomycin fel newid yn y dos neu amlder. Diffinnir clefyd acíwt yr arennau (AKD) fel parhad AKI cam 1 neu fwy Yn fwy na neu'n hafal i 7 diwrnod ar ôl dod i gysylltiad [41]. Roedd cleifion yn cael eu categoreiddio ag AKD adeg rhyddhau o'r ysbyty os oedd cam 1 AKI neu fwy yn parhau a bod yr amser o ddod i gysylltiad â rhyddhau o'r ysbyty yn fwy na saith diwrnod. Cafwyd samplau wrin a gwaed cyfan gan yr holl gyfranogwyr. Dyfarnwyd pob achos o V-AKI gan ddau neffrolegydd annibynnol (EM, JC, RL) i bennu achosiaeth. Mae disgrifiad llawn o'r dulliau wedi'i gyhoeddi eisoes [10].

4.2. Paratoi Exosome a Chasglu Data Proteomig

Casglwyd samplau wrin a gwaed gan gyfranogwyr astudiaeth DIRECT a chafodd samplau eu rhewi ar −80 ◦C cyn paratoi ecsosom. Dewiswyd samplau wrin a ddefnyddiwyd yn y dadansoddiad hwn o'r cyfnod amser agosaf at sarhad yr arennau yn amrywio o 24 i 72 h postarenanaf. Echdynnwyd exosomau o samplau wrin AKI wedi'u rhewi gan ddefnyddio protocol mewnol a ddatblygwyd yn seiliedig ar yr egwyddor gwahardd toddyddion gan ddefnyddio dyddodiad a achosir gan polyethylen glycol (PEG), fel y disgrifir yn y Rao et al. cyhoeddiad diweddar [42] tudalen o'r proteinau exosomal ei wneud cyn trypsinization gel gan ddefnyddio NuPAGE bisTris10 y cant acrylamid 12 gels yn dda i ddatrys 40 µL o brotein o exosomau o'r rheolaeth a-AKI samplau wrin.

Cyfunwyd darnau gel gyda byffer i atal proteolysis a oedd yn cynnwys 75 mM NaCl (Sigma, St. Louis, MO, UDA), 3 y cant sodiwm dodecyl sylffad (SDS, Fischer, Arnold AFB, Tullahoma, TN, UDA), 1 mM NaF (Sigma, St. Louis, MO, UDA), 1 mM beta glycerophosphate (Sigma, St. Louis, MO, UDA), 1 mM beta-glycerophosphate (Sigma, Sigma, St. Louis, MO, UDA), 1 mM sodiwm orthovanadate (Sigma, St. Louis, MO, UDA), 10 mM sodiwm pyrophosphate (Sigma, St. Louis, MO, UDA), 1 mM fflworid phenylmethylsulfonyl (PMSF, Sigma), a 1 × Cwblhau Mini EDTA tabled atalydd proteas am ddim i gyd yn 50 mM HEPES (Sigma, St Louis, MO, UDA), pH 8.5. I broteinau dadnatureiddio, cyfaint cyfartal o 8 M Wrea mewn 50 mM HEPES, pH 8.5 ei ychwanegu a sonication chwiliedydd ei berfformio gan ddefnyddio dau 10- cyfnodau ar 25 y cant osgled. Cafodd proteinau eu lleihau, eu alcylu, a'u diffodd gan ddefnyddio dithiothreitol ac iodoacetamid, fel y disgrifiwyd yn flaenorol [43]. Cafodd proteinau eu gwaddodi trwy ychwanegu asid trichloroacetig (Sigma, St. Louis, MO, UDA) at samplau ar rew, a pelennu proteinau trwy allgyrchiad ar 4 ◦C. Roedd pelenni protein yn cael eu golchi ddwywaith gydag aseton oer-iâ. Sychwyd pelenni protein ar 56 ◦C am 30 munud, yna eu hailddarlledu mewn 1 M wrea mewn 50 mM HEPES ac yna eu treulio dros nos ar dymheredd yr ystafell gyda 6 µg o LysC (Wako, Richmond, Commonwealth of Virginia, USA) ac yna {{27} }h treuliad gyda trypsin gradd dilyniannu (Promega, Fitchburg, SyM, UDA) ar 37 ◦C. Dadhaliwyd samplau trwy C18 Sep-Paks a mesurwyd proteinau [44]. Dadansoddwyd cyfanswm o 1.0 ug o brotein fesul sampl gan sbectrometreg màs cromatograffaeth hylif-tandem (LC-MS [2]) gan ddefnyddio graddiant cromatograffaeth hylif 85 munud ar Easy-nLC 1000 (Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA, UDA) wedi'i gysylltu mewn llinell â sbectromedr màs Orbitrap Fusion (Thermo Fischer Scientific).

Perfformiwyd cromatograffaeth ar golofn 30 cm a dynnwyd gartref a'i phacio, yn driphlyg gyda 0.5 cm, 0.5 cm, a 30 cm o 5 µm C4, 3 µm C18, a 1.8 µm C18, yn y drefn honno, a'u gwresogi i 60 ◦C. Llwythwyd peptidau am y tro cyntaf ar 500 bar a ddilynwyd gan raddiant cromatograffaeth yn amrywio o 6 i 25 y cant acetonitrile dros 70 munud ac yna graddiant 5-munud i 100 y cant acetonitrile, a gynhaliwyd am 10 munud. Perfformiwyd ionization electrospray trwy gymhwyso 2000 V trwy gyffordd T dur di-staen sy'n cysylltu'r golofn ddadansoddol a system Easy-nLC. Dilynwyd pob sampl gan ddau olchiad gan ddechrau gyda graddiant o 3 i 100 y cant acetonitrile dros 15 munud gyda 10 munud ychwanegol ar 100 y cant acetonitrile. Cafodd ystod màs i wefru (m/z) o 375–1500 ei sganio am peptidau â chyflyrau gwefr rhwng 2–6. Defnyddiwyd data wedi'i ganoli ar gyfer meintioli uchafbwyntiau. Cafodd y caffaeliad ei redeg mewn modd ïon positif sy'n dibynnu ar ddata. Chwiliwyd sbectra amrwd yn Proteome Discoverer Fersiwn 2.1 yn erbyn cronfa ddata gyfeirio UniProt (www.uniprot.org (cyrchwyd ar 5 Tachwedd 2017)) ar gyfer Homo sapiens gan ddefnyddio'r algorithm Sequest [18] ochr yn ochr â dull cronfa ddata gwrthdro a ddefnyddir i reoli peptid a darganfyddiad ffug cyfraddau (FDR) i 1 y cant [17]. Yn silico trypsin crynhoad fel y nodir yn y paramedrau chwilio ochr yn ochr â hyd peptid lleiaf o chwe asid amino. Roedd gosodiadau chwilio hefyd yn cynnwys addasiad deinamig ar gyfer ocsidiad methioninau ac addasiad statig o carbamidomethylation cysteinau. Gosodwyd goddefgarwch màs rhagflaenol i 50 ppm a goddefgarwch màs darn o 0.6 Da.

Yn ogystal â pharau sbectrol a chyfyngir proteinau i<1% fdr,="" peptide="" matches="" were="" further="" screened="" to="" only="" include="" peptide="" spectral="" matches="" (psms)="" identified="" with="" high="" confidence.="" the="" summed="" abundance="" of="" the="" area="" under="" the="" curve="" of="" ms1="" peaks="" associated="" with="" psms="" was="" used="" to="" represent="" protein="" abundances.="" to="" help="" account="" for="" run-to-run="" variation="" in="" lc-ms2="" experiments,="" the="" raw="" protein="" abundances="" were="" next="" normalized="" by="" a="" two-step="" process.="" in="" the="" first="" step,="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" average="" abundance="" of="" a="" given="" protein="" throughout="" the="" experiment="" divided="" by="" the="" median="" of="" the="" protein="" averages="" observed="" throughout="" the="" experiment.="" in="" the="" second="" step,="" the="" adjusted="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundances="" observed="" within="" their="" respective="" samples="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundance="" observed="" in="" the="" entire="" experiment.="" records="" of="" the="" normalization="" and="" analysis="" of="" proteomics="" data="" are="" available="" in="" a="" jupyter="" notebook="" form="" at="">

4.3. Dadansoddi Data Proteomeg

Llwythwyd cofnodion o’r dadansoddiad data proteomeg mewn fformat llyfr nodiadau jupyter i gadwrfa Github (cyrchwyd ar 3 Mawrth 2021)). Perfformiwyd dadansoddiad cyfesurynnau egwyddor (PCoA) gan ddefnyddio Qiime2 (fersiwn 2019-7) [45]. Defnyddiwyd y gorchymyn metrigau craidd amrywiaeth amser i gyfrifo pellteroedd rhwng sampl gan ddefnyddio metrig Bray-Curtis a delweddu gan ddefnyddio PCoA. Perfformiwyd dadansoddiad ystadegol o'r pellteroedd rhwng rheolaeth a samplau V-AKI gan ddefnyddio prawf PERMANOVA pâr-ddoeth trwy'r gorchymyn "arwyddocâd grŵp beta-amrywiaeth qiime". Crëwyd delweddiad plot blwch o'r canlyniadau hyn trwy'r pecyn seaborn (cyrchwyd ar 3 Mawrth 2021)). Perfformiwyd cymariaethau deuaidd o achosion V-AKI a phynciau rheoli gan ddefnyddio'r pecyn scipy ((a gyrchwyd ar 3 Mawrth 2021)) gan ddefnyddio prawf-t annibynnol gydag amrywiant anghyfartal. Graddiwyd cryfder y cysylltiad rhwng pob protein a statws V-AKI gan ddefnyddio'r metrig gwerth pi sy'n cyfuno arwyddocâd gwerth-p â newid plyg [12]. Fel y disgrifiwyd yn flaenorol [46] ar y brig, diffiniwyd cysylltiadau arwyddocaol fel rhai â gwerth pi > |1|. Cafodd pob cysylltiad protein â statws V-AKI ei blotio mewn plot llosgfynydd i amlygu ymhellach leoliad y proteinau sydd â'r sgôr uchaf{-10. Perfformiwyd dadansoddiad cyfoethogi set genynnau gan ddefnyddio'r gweinydd DAVID [47], gan gymharu proteinau sylweddol (gwerth pi>|1 |) â chefndir o'r holl broteinau a nodwyd yn y set ddata. Adroddir clystyrau o gyfoethogiadau swyddogaethol cysylltiedig yn Nhabl Atodol S1.

To test for a relationship between V-AKI-associated proteins and inflflammatory cytokines, a recently developed network-based cytokine inference approach was utilized [48]. Briefly, a list of cytokines (TGFb, TNF, IFN, IL1-40, CXCL1-16, CCL1-27) was submitted alongside signifificantly altered proteins (pi-value > |1|) to the STRING-db tool [49]. Connections between proteins were determined using all interaction sources and a minimum interaction score >0.4. Cafodd cytocinau eu hidlo gyntaf i gael o leiaf bum cysylltiad â phroteinau wedi'u newid yn sylweddol. Yna, cymharwyd cyfran y cysylltiadau rhwng pob cytocin a phroteinau sy'n gysylltiedig â V-AKI neu sy'n gysylltiedig â rheolaeth â chyfanswm y cysylltiadau rhwng V-AKI neu broteinau sy'n gysylltiedig â rheolaeth. I gyfrif am wahaniaethau yn nifer y cysylltiadau sydd gan bob cytocin â phroteinau eraill, y gwerth hwn oedd nesaf o'i gymharu â nifer y cysylltiadau oedd gan bob cytocin â phob protein a newidiwyd yn sylweddol. Cafodd y sgorau cyfoethogi ar gyfer cytocinau dethol eu plotio am eu cysylltiadau â naill ai V-AKI- neu broteinau sy'n gysylltiedig â rheolaeth. Yn olaf, delweddwyd chwiliad mireinio o broteinau sy'n gysylltiedig â V-AKI a'r cytocinau â chysylltiadau cyfoethog â phroteinau cysylltiedig â V-AKI am eu rhyngweithiadau gan ddefnyddio fersiwn Cytoscape 3.5.1 [50]. Addurnwyd rhwydweithiau rhyngweithio protein-protein trwy sizing pob protein cysylltiedig â V-AKI yn ôl eu cysylltiad sgôr pi â statws V-AKI a'u lliwio gan gysylltiad tybiedig â'r cytocinau cyfoethog ag effeithiau pro neu wrthlidiol.

cistanche perlysiau draigyn gallu trinanaf i'r arennau

5. Casgliadau

Fe wnaethom geisio deall yn well fecanwaith anafiadau ar gyfer V-AKI o achosion a ddyfarnwyd yn glinigol ac, yn ddiddorol, canfuom fod cyflenwad, protein rhwymo galectin, a ffibrinogen yn arwyddocaol gysylltiedig â V-AKI. Mae canlyniadau astudiaethau blaenorol a'n un ni yn awgrymu rôl y system ategu a llwybrau llidiol yn V-AKI. Er bod angen astudiaethau mwy i ddilysu'r prosesau moleciwlaidd yn y difrod a achosir gan vancomycin a'r llwybrau atgyweirio dilynol, mae'r canlyniadau'n dangos y gall ecsosomau wrinol gyfrannu gwybodaeth bwysig am fecanweithiau pathoffisiolegol a gallant fod yn biomarcwyr ar gyfer a achosir gan gyffuriau.arenanaf.

Cyfraniadau Awdur:

Cysyniadoli, ALl a SPR, methodoleg, SV, SPR, DJG, RM; meddalwedd, DJG, RHM, dadansoddi ffurfiol, ALl, AL, RHM; ymchwiliad, AL, JA, VJ, SB, MC-T., PN; ysgrifennu — paratoi drafft gwreiddiol, AL, JA, VJ, LA; ysgrifennu — adolygu a golygu, RHM, DJG, MC-T., AT, AA, JC, MSJ, EM, RM, PN; goruchwyliaeth, SV, SPR; gweinyddu prosiect, ALl; caffael cyllid, ALl Mae pob awdur wedi darllen a chytuno i fersiwn gyhoeddedig y llawysgrif.

Ariannu:

Ariannwyd yr ymchwil hwn gan y Consortiwm Digwyddiadau Niweidiol Difrifol Rhyngwladol. Cefnogwyd MCT gan Grant Hyfforddi T32 DK007202.

Datganiad y Bwrdd Adolygu Sefydliadol: Cynhaliwyd yr astudiaeth yn unol â chanllawiau datganiad Helsinki, ac fe'i cymeradwywyd gan y Bwrdd Adolygu Sefydliadol (neu'r Pwyllgor Moeseg) prifysgol California, Rhaglen Diogelu Ymchwil Pynciau Dynol San Diego (IRB#121651).

Datganiad Cydsyniad Gwybodus: Cafwyd caniatâd gwybodus gan bob un o’r pynciau a gymerodd ran yn yr astudiaeth

Diolchiadau:

Hoffem gydnabod cyfraniadau’r ymchwilwyr DIRECT: Dinna Cruz, Stuart Goldstein, Patrick Murray, Andrew Davenport, Andrew Lewington, DavidSelewski, Michael Zappitelli, Marlies Ostermann, Li Yang, Bhavna Pandya, Patrick Brophy, DanielaPonce, Julia Steinke, Josee Bouchard, Carlos Irarrazabal, David Askenazi, Nitin Kolhe, RolandoClaure-Del Granado, Nadine Benador, Clare Castledine, Jonathan Barratt, Sunil Bhandari, AlyssaRiley, Ayse Akcan-Arikan, TK Davis, Christopher Farmer, Mark Thomas, Fred Pang, Kar Hui Ng , Hansjoerg Rothe.

Gwrthdaro Buddiannau:

Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

O: ' Ecsosomau wrinol yn Adnabod Llwybrau Llidiol mewn Anafiadau Acíwt i'r Arennau Cysylltiedig â Vancomycin' gan Linda Awdishu

---Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 2784