Mae Straen Probiotig Hyfyw a Lladdwyd gan Wres yn Gwella Imiwnedd y Geg Trwy Godi Crynodiad IgA yn y Mwcosa Geneuol

Haniaethol

Mae imiwnedd mwcosaidd geneuol-trwynol yn chwarae rhan hanfodol wrth amddiffyn y corff rhag ymlediad bacteriol a firaol. Mae cynhyrchion probiotig diogel wedi'u defnyddio i wella imiwnedd dynol ac iechyd y geg. Yn yr astudiaeth hon, gwnaethom wirio effeithiau buddiol tabledi probiotig hyfyw cymysg, sy'n cynnwys Lactobacillus salivarius subsp. salicinius AP-32, Bifdobacterium animalis subsp. lactis CP-9, a Lactobacillus paracasei ET-66, a thabledi probiotig a laddwyd â gwres, sy'n cynnwys L. salivarius subsp. salicinius AP-32 a L. paracasei ET-66, ar imiwnedd y geg ymhlith 45 o gyfranogwyr iach. Rhannwyd y cyfranogwyr ar hap yn grwpiau probiotig hyfyw, probiotig lladd gwres, a phlasebo. Roedd gweinyddu'r driniaeth yn para am 4 wythnos. Casglwyd samplau poer yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6, a mesurwyd poblogaethau Lactobacillus, Bifidobacterium, a Streptococcus mutans a chrynodiad IgA. Cafodd crynodiadau IgA a lefelau TGF-beta ac IL-10 mewn celloedd PBMC eu mesur gan y dull ELISA. Dangosodd y canlyniadau fod lefelau IgA poer wedi cynyddu’n sylweddol ar weinyddu’r ddau beth hyfyw (119.30 ±12.63%, ***P<0.001) and heat-killed (116.78±12.28%, ***P<0.001) probiotics for 4 weeks. Among three probiotic strains, AP-32 would effectively increase the levels of TGF-beta and IL-10 in PBMCs. The oral pathogen Streptococcus mutans was significantly reduced on viable probiotic tablet administration (49.60±31.01%, ***P<0.001). The in vitro antibacterial test confirmed that viable probiotics effectively limited the survival rate of oral pathogens. Thus, this clinical pilot study demonstrated that oral probiotic tablets both in viable form or heat-killed form could exert beneficial effects on oral immunity via IL-10, TGB-beta mediated IgA secretion. The effective dosage of viable probiotic content in the oral tablet was 109 CFUs/g and the heat-killed oral tablet was 1× 1010 cells/g.

budd-daliadau atodiad cistanche-cynyddu imiwnedd

Rhagymadrodd

Y mwcosa llafar-trwynol, y porth ar gyfer cysylltu ag antigenau a fewnanadlir, yw amddiffyniad rheng flaen y system imiwnedd ddynol [1, 2]. Fel arfer, mae firysau neu facteria pathogenig yn goresgyn arwynebau mwcosol y ceudod llafar-trwynol trwy ymladd yn erbyn y system imiwnedd leol a'r microbiota iach [3]. Mae llid a symptomau, gan gynnwys peswch, dolur gwddf, trwyn yn rhedeg, a thwymyn, yn datblygu oherwydd yr ymatebion imiwn yn erbyn firysau a bacteria pathogenig ymledol [4]. Yn ogystal, imiwnoglobwlin A (IgA) yw'r prif ffactor imiwn mewn poer ac mae'n rheoleiddio homeostasis y microbiota llafar [5]. Mae sawl astudiaeth wedi nodi gallu IgA cyfrinachol i amddiffyn y corff rhag haint gan bathogenau firaol, gan gynnwys firws syncytaidd anadlol [6], rotafeirws [7], a firws y ffliw [7]. Swyddogaethau IgA cyfrinachol i amddiffyn epithelia mwcosaidd. Dywedodd Nicolas Millet et al. darganfod y gall IgA mwcosaidd atal dysbiosis commensal Candida albicans yn y ceudod llafar [8]. Mae hefyd yn atal agregu'r pathogen llafar Streptococcus mutans, sy'n achosi plac deintyddol [9].

Yn ogystal, darganfu ymchwilwyr y gall y microbiota llafar a'i metabolion ddylanwadu'n lleol ar imiwnedd yn y rhwystr llafar [10]. Dangosodd astudiaethau blaenorol effeithiolrwydd probiotegau wrth godi crynodiad IgA yn y mwcosa llafar [11]. Roedd Ericson et al. dangos bod gwm cnoi sy'n cynnwys Lactobacillus reuteri yn cymryd rhan yn ymateb imiwn addasol pynciau iach trwy gynyddu lefelau IgA poer [12]. Mewn bodau dynol, mae'r cytocinau imiwnedd TGF-beta ac IL-10 yn cydberthyn i gynhyrchu IgA [13].

Fodd bynnag, mae'n dal yn aneglur a yw lefelau IgA cyfrinachol uwch microbiota trwy cytocinau TGF-beta ac IL-10. Ymhellach, mae'r pathogenau geneuol yn cynnwys S. mutans, P. gingivalis, ac F. nucleatum subsp. dangosodd polymorphism ac A. actinomycetemcomitans gydberthynas uchel â chlefyd periodontol ac anadl ddrwg [14]. Gallai cynhyrchion probiotig fod yn therapi amgen posibl i periodontitis trwy atal pathogenau llafar Fusobacterium nucleatum, ond ni ddangosodd Porphyromonas gingivalis ac Aggregatibacter actinomycetemcomitans unrhyw ostyngiad sylweddol [15]. Gall ychwanegiad probiotig hefyd atal heintiau pathogenig [16]. Adroddwyd bod rhywogaethau allweddol o'r microbiota yn cyfyngu ar dwf niwmonia Streptococcus pathogenig [17]. Felly, gallai cynnal ecosystem ficrobaidd gytbwys trwy dderbyn straeniau probiotig fod yn ffordd amgen o reoleiddio imiwnedd y geg a gwella iechyd y geg. Mae canfyddiadau blaenorol ar atal pathogenau geneuol gan fathau probiotig wedi datgelu bod Lactobacillus salivarius subsp. salicinius AP-32, Bifdobacterium animalis subsp. mae lactis CP-9, a Lactobacillus paracasei ET-66 yn cael effeithiau gwrthfacterol rhagorol in vitro; fodd bynnag, nid trwy fecanwaith cynyddu lefelau H2O2 [18]. Y prif strategaethau ar gyfer straeniau probiotig i gyfyngu ar dwf pathogenig y geg oedd cyd-gasglu pathogenau ar lafar, cynhyrchu biosurfactants, newid amgylchedd y geg, a chynhyrchu sylweddau gwrthficrobaidd [19]. Yn ogystal, dangosodd astudiaeth in vitro fod L. salicinius AP-32 yn cyfryngu mynegiant cytocin llidiol [interleukin (IL)-8, IL-10] mewn celloedd epithelial dynol [20]. Felly, yn yr astudiaeth hon, gwnaethom wirio a yw tabledi probiotig hyfyw cymysg, sy'n cynnwys L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. lactis CP-9, ac L. paracasei ET-66, a thabledi probiotig a laddwyd â gwres, sy'n cynnwys L. salivarius subsp. Salicinius AP-32 a L. paracasei ET-66, wedi gwella swyddogaeth imiwnedd trwy TGF-beta, IL-10 neu wedi codi lefel crynodiad IgA poer. Profwyd swyddogaeth gwrth-bacteriol cymeriant cynnyrch probiotig yn y ceudod llafar.

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd

Cliciwch yma i weld cynhyrchion Gwella Imiwnedd Cistanche

【Gofyn am fwy】 E-bost:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Deunydd a Dulliau

Cyfranogwyr

At ei gilydd, recriwtiwyd 45 o gyfranogwyr iach 20-40 oed a’u rhannu ar hap yn dri is-grŵp: y dabled geneuol probiotig hyfyw, tabled llafar probiotig a laddwyd â gwres, a grwpiau plasebo. Roedd pob grŵp yn cynnwys 15 o gyfranogwyr. Cafodd cyfranogwyr ag arferion bwyta cnau betel ac ysmygu eu heithrio. Rhoddwyd tabledi llafar yn ddall i'r cyfranogwyr. Cymerodd yr holl gyfranogwyr y tabledi llafar deirgwaith y dydd (bore, hanner dydd, a gyda'r nos) am 4 wythnos. Casglwyd samplau poer (2 mL) i fesur crynodiadau IgA a phoblogaethau micro-organeb yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. Cafwyd caniatâd gwybodus gan yr holl gyfranogwyr a gynhwyswyd yn yr astudiaeth hon. Cymeradwywyd y protocol gan Fwrdd Adolygu Sefydliadol Prifysgol Feddygol Chung Shan, Taiwan (CS19052).

Tabledi Llafar Probiotig Hyfyw

Roedd y dabled llafar probiotig hyfyw (1 g) yn cynnwys tri math probiotig hyfyw, L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. lactis CP-9, ac L. paracasei ET-66. Fe wnaethon ni gymysgu 0.01 g o 1011 uned ffurfio cytrefi (CFUs) probiotig sengl yn y dabled lafar. Mesurwyd pob straen probiotig unigol tua 0.33 * 109CFUs/g. Cyfanswm y cynnwys probiotig yn y dabled lafar oedd 109 CFUs/g y gytref. Roedd dos gweithredol y dabled geneuol probiotig yn dilyn gweithiau cyhoeddedig blaenorol [18]. Cafwyd yr holl straeniau probiotig o labordy Biofag Biotech Co., Ltd. (Tainan, Taiwan). L. salivarius subsp. cafodd salicinius AP-32 ei ynysu o berfedd dynol iach a'i adneuo yn Sefydliad Ymchwil a Datblygu'r Diwydiant Bwyd, Taiwan (ID: BCRC 910437) ac ym Mhrifysgol Wuhan, Tsieina (ID: CCTCC-M2011127); B. animalis subsp. cafodd CP lactig-9 ei ynysu o laeth y fron dynol iach a'i adneuo yn Sefydliad Ymchwil a Datblygu'r Diwydiant Bwyd, Taiwan (ID: BCRC 910645) ac ym Mhrifysgol Wuhan (ID: CCTCC-M2014588); Cafodd L. paracasei ET-66 ei ynysu oddi wrth laeth y fron dynol iach a'i adneuo yn Sefydliad Ymchwil a Datblygu'r Diwydiant Bwyd, Taiwan (ID: BCRC 910753) ac yng Nghanolfan Casglu Diwylliant Microbiolegol Cyffredinol Tsieina, Beijing, Tsieina (ID: CGMCC{ {22}}). Lactobacillus. subsp salivarius. cafodd salicinius AP-32 a L. paracasei ET-66 eu meithrin ar blatiau agar de Man, Rogosa, a Sharpe (MRS) (110,660, Merck, Darmstadt, yr Almaen) a'u deor o dan amodau anaerobig cyfadranol ar 37 gradd am 48 h. B. animalis subsp. Cafodd lactis CP-9 ei feithrin ar MRS agar wedi'i ategu â 0.05% cystein a'i ddeor yn anaerobig ar 37 gradd am 48 h. Perfformiwyd cyfrif cytrefi ar gyfer meintioli CFU bacteriol ar ôl meithrin straenau probiotig [18].

system imiwnedd sy'n cynyddu planhigion cistanche

Tabledi Llafar Probiotig a laddwyd gan wres

Roedd y tabledi probiotig llafar a laddwyd gan wres (1 g) yn cynnwys L. salivarius subsp anweithredol. salicinius AP-32 a L. paracasei ET-66. Cafodd y straeniau hyfyw eu meithrin a'u deor, fel y disgrifiwyd yn flaenorol. Yna, anweithredolwyd AP-32 ac ET-66 trwy ddeor y straeniau hyfyw yn y cyfryngau MRS ar 100 gradd am 1 awr. Y cynnwys probiotig yn y dabled lafar oedd 1 × 1010 celloedd / g. Roedd y dos gweithredol o dabledi llafar probiotig a laddwyd gan wres yn dilyn profion in vitro a gyhoeddwyd yn flaenorol [11]. Perfformiwyd yr holl weithdrefnau arbrofol yn labordy Biofag Biotech Co, Ltd (Tainan, Taiwan).

Mesur Poblogaethau Lactobacillus a Bifidobacterium mewn Samplau Poer

Casglwyd samplau poer (2 mL) gan bob cyfranogwr yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. Cafodd y samplau poer (100 µL) eu gwanhau'n gyfresol a'u hychwanegu at MRS platiau. I fesur poblogaethau Lactobacillus, cafodd Lactobacillus ei feithrin a'i ddeor ar blatiau agar MRS o dan amodau anaerobig cyfadranol ar 37 gradd am 48 h. I fesur poblogaethau Bifdobacterium, cafodd Bifdobacterium ei feithrin a'i ddeor yn anaerobig ar MRS agar wedi'i ategu â 0.05% cystein ar 37 gradd am 48 h. Perfformiwyd cyfrif cytrefi ar gyfer meintioli CFU bacteriol ar ôl meithrin straenau probiotig. Cafodd cyfraddau poblogaeth Lactobacillus a Bifidobacterium eu normaleiddio i rif y boblogaeth probiotig yn Wythnos 0. Ystyriwyd bod cyfradd poblogaeth Lactobacillus a Bifidobacterium a gasglwyd yn Wythnos 0 yn 100%. Roedd y dull arbrofol yn dilyn gweithiau a gyhoeddwyd yn flaenorol [18].

Mesur Crynodiad IgA yn y Mwcosa Geneuol

Casglwyd samplau poer (2 mL) gan bob cyfranogwr yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6 a'u cynnal ar 20 gradd . Defnyddiwyd Pecyn ELISA Heb ei Gorchuddio Dynol IgA (Catalog # 88-50600-88; Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, UDA) i ddadansoddi'r crynodiad IgA. Yn gyntaf, fe wnaethom orchuddio gwrthgyrff IgA gwrth-ddynol ar blât ffynnon 96-. Ychwanegwyd IgA poer a oedd yn bresennol yn y sampl neu'r safon at y microwell, ac yna ychwanegwyd gwrthgorff IgA gwrth-ddynol cyfun HRP ar dymheredd ystafell am 1 h. Pibedu swbstrad TMB i bob ffynnon am 30 munud. Yn olaf, mesurwyd y cyngerdd IgA ar sbectroffotomedr ar 450 nm. Perfformiwyd yr holl weithdrefn arbrofol yn driphlyg, yn unol â chyfarwyddiadau'r gwneuthurwr. Ystyriwyd bod y gyfradd grynhoi IgA a gasglwyd yn Wythnos 0 yn 100%. Roedd y dull arbrofol yn dilyn gweithiau a gyhoeddwyd yn flaenorol [18].

cistanche tubulosa-gwella system imiwnedd

Mesur Crynodiad TGF-Beta ac IL-10 yn PBMC

Profi drychiad lefelau TGF-beta ac IL-10 a achosir gan brobiotig yn dilyn yr astudiaeth flaenorol [20]. Cafwyd y celloedd mononiwclear gwaed ymylol (PBMCs) o samplau gwaed rhoddwyr iach (Canolfan Gwaed Tainan, Sefydliad Gwasanaethau Gwaed Taiwan). Roedd allgyrchu gwaed cyfan trwy raddiant Ficoll-Hypaque (Pharmacia, Sweden), a'r ffracsiwn dwysedd golau o'r rhyngwyneb 42.5%-50% yn aneglur. Hadu 4 * 105 celloedd PBMC echdynnu mewn 100 µl RPMI-1640 gyda 1% FBS (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, UDA) i bob ffynnon o 96 platiau ffynnon. Yna ychwanegu 5 * 105 cfu/20 µl triniaeth probiotig at bob PBMC wedi'i hadu'n dda (celloedd: straenau probiotig=1:10). Roedd y rheolaethau cadarnhaol yn ychwanegu 10 µg/ml Phytohaemagglutinin (PHA) (Sigma-Aldrich, Munich, yr Almaen) at ffynhonnau hadu PBMCs ar gyfer cynhyrchu TGF-, IL-10 yn y drefn honno [21]. Cyd-ddiwylliannol probiotegau gyda PBMCs am 48 h. Mesur uwchnatur sy'n cynnwys cytocinau IL-10 a TGF- drwy ddadansoddiad assay immunosorbent-gysylltiedig (ELISA) (Thermo Scientific, Carlsbad, CA, USA). Mesurwyd pob arbrawf a dilynwyd y protocol masnachol o leiaf yn driphlyg.

Gwerthusiad o'r Swyddogaeth Gwrthfacterol mewn Ceudod Geneuol

Mae Streptococcus mutans yn fygythiad cyffredin i iechyd y geg, sy'n achosi pydredd dannedd trwy ffurfio pla neu fiofilm [22]. Casglwyd samplau mutan Streptococcus o'r swabiau, trwy ba rai y casglwyd y mutan S. ar y rhan supragingival, gingivae, a mwcosa llafar, yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. S. mutans yn cael ei gynnal yn tryptig cawl soi (TSB, 5 mL) wedi'i ategu â 50% glyserol. Gwanhawyd cyfrwng S. mutans yn gyfresol a'i ychwanegu at blât Mitis Salivarius-Bacitracin Agar (MSBA, 0.2 U/mL), a ddeorwyd ar 37 gradd am 2 d. Yn olaf, cyfrifwyd nifer y cytrefi S. mutans ym mhob sampl cyfranogwr i gyfrifo cyfraddau goroesi pathogenig; ystyriwyd bod cyfradd goroesi S. mutan a gasglwyd yn Wythnos 0 yn 100%. Roedd y dull arbrofol yn dilyn gweithiau a gyhoeddwyd yn flaenorol [18].

Gweithgarwch Gwrthfacterol In Vitro y Tabledi Geneuol

Oral tablets (1 g) that contained viable (AP-32, CP-9, and ET-66; > 109 CFUs) and heat-killed (AP-32 and ET-66,>Cafodd 1010 CFUs) straen probiotig eu diddymu mewn TSB a chyfrwng trwyth calon yr ymennydd, yn y drefn honno, i gael crynodiad terfynol o 0.1 g/mL. Dim ond y cyfrwng a ddefnyddiwyd ar gyfer y grŵp gwag, tra bod tabledi (1 g) heb unrhyw gydrannau probiotig yn cael eu diddymu yn y cyfryngau priodol ar gyfer y grŵp plasebo. Yna, cyflwynwyd pathogenau llafar (106 CFUs) i'r toddiannau tabledi a'u cyd-deor ar 37 gradd ar gyfer 2 (S. mutans) neu 3 (Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum subsp. polymorphum, ac Aggregatibacter actinomy cetemcomitans) d. Cafwyd pathogenau gan y BCRC. Cyfrifwyd y gyfradd atal pathogenau geneuol (%) fel a ganlyn: (rheolaeth CFUblank - grŵp arbrofol CFU) / rheolaeth CFUblank. Roedd y dull arbrofol yn dilyn profion a gyhoeddwyd yn flaenorol [11].

Dadansoddiad Ystadegol

Defnyddiwyd meddalwedd GraphPad Prism ar gyfer dadansoddiad ystadegol o ganlyniadau prawf-t dwy gynffon. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD) neu gymedr canlyniadau dau neu dri arbrawf annibynnol. Ystyriwyd bod gwahaniaethau ystadegol yn arwyddocaol ar werth P<0.05.

Canlyniadau

Cynyddodd Tabledi Probiotig yn y Boblogaeth Bifidobacterium yn y Ceudod Geneuol

Codwyd y boblogaeth Bifidobacterium yn sefydlog yn y ceudod llafar ar ôl rhoi tabledi probiotig. Cafodd y poblogaethau bacteriol ar ôl triniaethau eu normaleiddio gan boblogaethau bacteriol cyn triniaethau (Cyfradd poblogaeth %=CFU ôl-driniaeth/CFU cyn-driniaeth). Yn y grŵp probiotig hyfyw, cynyddodd cyfradd y boblogaeth yn sylweddol i 244.14 ± 164.96% yn Wythnos 2 (**P<0.01, Fig. 1a) and 438.41±308.58 at Week 4 (***P<0.001), compared to Week 0. The Bifidobacterium population rate remained high at Week 6 (no administration of viable probiotic tablets for 2 weeks after Week 4, 550.16±448.19%, ***P<0.001), compared to Week 0. The Bifidobacterium population number was significantly different between the viable probiotic and placebo groups at Week 6 (**P<0.01). In the heat-killed probiotic group, the Bifidobacterium population was increased at Weeks 2 (149.92±60.47%, **P<0.01) and 4 (199.87±148.64%, *P<0.05), but was decreased at Week 6 after administration of the heat-killed probiotic tablets was stopped for 2 weeks (182.98±163.73%, Fig. 1a).

Cynyddodd Tabledi Probiotig y Boblogaeth Lactobacillus yn y Ceudod Geneuol

Datgelodd y newid yn y boblogaeth Lactobacillus geneuol o ganlyniad i roi tabledi probiotig batrwm tebyg i'r un a ddilynwyd gan y newid yn y boblogaeth Bifidobacterium geneuol. Cafodd y poblogaethau bacteriol ar ôl triniaethau eu normaleiddio gan boblogaethau bacteriol cyn triniaethau. Yn y grŵp probiotig hyfyw, cynyddodd cyfradd poblogaeth Lactobacillus yn sylweddol i 447.74 ± 337.89% yn Wythnos 2 (**P<0.01, Fig. 1b) and 982.27±726.66% at Week 4 (***P<0.001), compared to Week 0. The Lactobacillus population rate was higher at Week 6 (no administration of viable probiotic tablets for 2 weeks after Week 4, 727.57±539.76%, ***P<0.001) than at Week 0. The Lactobacillus population number was significantly different between the viable probiotic and placebo groups at Week 6 (***P<0.001). In the heat-killed probiotic group, the Lactobacillus population was increased at Weeks 2 (256.66±183.78%, **P<0.01) and 4 (312.85 ± 279.71%, *P < 0.05). Additionally, the Lactobacillus number remained but showed no significant difference at Week 6 after the administration of heat-killed probiotics was stopped for 2 weeks (208.00±199.50%, Fig. 1b).

Ffig. 1 a Mesur poblogaethau Bifidobacterium ar arwynebau mwcosaidd y geg. V tabledi probiotig hyfyw; H tabledi probiotig anweithredol a laddwyd gan wres; C tabledi plasebo (rheoli); a bacteria asid lactig LAB. Perfformiwyd casglu a dadansoddi samplau poer yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD). Defnyddiwyd prawf-t dwy gynffon i ddadansoddi gwahaniaethau ystadegol. Nodwyd arwyddocād ystadegol gyda *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001. b Measurement of Lactobacillus populations on the oral mucosal surfaces. V viable probiotic tablets; H heat-killed inactivated probiotic tablets; C placebo tablets (control); and LAB lactic acid bacteria. Collection and analysis of salivary samples at Weeks 0, 2, 4, and 6 were performed. Data were presented as the mean standard deviation (SD). A two-tailed t-test was used to analyze statistical differences. Statistical significances were marked with *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Fe wnaeth Tabledi Probiotig sy'n cynnwys AP-32, ET-66, a CP-9 godi'n sylweddol y Crynodiad IgA yn y Mucosa Geneuol

Gan fod y defnydd o dabledi probiotig (hyfyw neu wedi'i ladd â gwres) wedi'i brofi i godi lefelau Bifidobacterium a Lactobacillus yn y ceudod llafar, dadansoddwyd ymhellach y newidiadau i grynodiad poer IgA, a ddigwyddodd oherwydd y nifer sy'n cymryd cynhyrchion probiotig. Cafodd y lefelau IgA ar ôl triniaethau eu normaleiddio gan lefelau IgA cyn triniaethau. Yn y grŵp probiotig hyfyw, cynyddodd y crynodiad IgA poer ychydig i 10 3.24 ± 8.10% yn Wythnos 2 (Ffig. 2) a 104.81 ± 13.26 yn Wythnos 4, ond heb wahaniaethau ystadegol arwyddocaol. Fodd bynnag, cynyddwyd y crynodiad IgA poer yn y grŵp probiotig hyfyw, o'i gymharu ag yn y grŵp plasebo, yn sylweddol i 119.30 ± 12.63% yn Wythnos 6 (dim gweinyddiaeth tabledi probiotig hyfyw am 2 wythnos ar ôl Wythnos 4), o'i gymharu ag Wythnos 0 ( ***P<0.001). Furthermore, in the heat-killed probiotic group, the salivary IgA concentration was slightly increased at Weeks 2 (102.51± 7.20%) and 4 (104.35 ± 10.27%). The saliva IgA concentration was increased at Week 6 (116.78 ± 12.28%, ***P < 0.001, Fig. 2), compared to Week 0.

Straen Dichonol Cynnydd yn Lefelau IL-10 a TGF-Beta mewn PBMCs

Llwyddodd y rheolaeth bositif o 10 µg/ml Phytohaemagglutinin (PHA) i godi lefelau IL-10 (58.2 ± 7.9 pg/ml, ***P < 0.001, Ffig. 3a) a TGF- (53.4±8 pg/ml, ***P<0.001, Fig. 3b) in PBMCs by comparing to the negative control (PBMCs treated with medium only). Viable strains of CP-9, AP-32 and ET-66 signifcantly increased the levels of IL-10 in PBMCs to 84.2±9 pg/ml (***P<0.001, ##P<0.01), 303.1±170.9 pg/ml (*P<0.05, ##P<0.01) and 98.2±17.5 pg/ml (***P<0.01, ##P<0.01), respectively. Symbol *indicated a significant difference by comparing to the medium-treated control; symbol #indicated a significant difference by comparing to the PHA control (Fig. 3a). Besides, viable strains of CP-9, AP-32, and ET-66 significantly increased the levels of TGF-beta in PBMCs to 23.2 ± 4.7 pg/ml (***P < 0.001), 130.9 ± 16 pg/ ml (***P < 0.001, ###P < 0.001) and 31.4 ± 5.5 pg/ml (***P<0.01), respectively (Fig. 3b).

Ffig. 2 Crynodiad imiwnoglobwlin A (IgA) yn y samplau poer. V tabledi probiotig hyfyw; H tabledi probiotig anweithredol a laddwyd gan wres; C tabledi plasebo (rheoli); a bacteria asid lactig LAB. Perfformiwyd casglu a dadansoddi samplau poer yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD). Defnyddiwyd prawf-t dwy gynffon i ddadansoddi gwahaniaethau ystadegol. Ystadegol

Tabledi Probiotig Yn cynnwys AP-32, ET-66, a CP-9 Gwahardd Poblogaeth S. mutans yn y Poer

Gallai poblogaethau uwch o Bifidobacterium a Lactobacillus a mwy o grynodiad IgA poer gyfrannu at y frwydr yn erbyn micro-organebau pathogenig geneuol. Yn yr arbrawf dilynol, gwnaethom brofi'r newid ym mhoblogaeth y pathogen llafar S. mutans oherwydd ymyrraeth probiotig. Cafodd y poblogaethau bacteriol ar ôl triniaethau eu normaleiddio gan boblogaethau bacteriol cyn triniaethau. Yn y grŵp probiotig hyfyw, gostyngwyd poblogaeth S. mutans yn sylweddol yn Wythnosau 2 (53.55 ± 31.60%, ***P<0.001), 4 (49.60±31.01%, ***P<0.001), and 6 (55.19±42.72%, **P<0.01, Fig. 4). At week 6, S. mutans was significantly inhibited in the viable probiotic group (55.19±42.72%, ***P<0.001), compared to in the placebo group. Furthermore, in the heat-killed probiotic group, the S. mutans population was slightly decreased at Week 2 (85.81±49.87%) and significantly reduced at Week 4 (58.35 ± 33.17%, ***P<0.001). The S. mutans population level in the heat-killed probiotic group (202.81±167.99%) reverted to that in the placebo group (225.05±127.01%) at Week 6 (no administration of heat-killed probiotic tablets for 2 weeks from Week 4) (Fig. 4).

Ffig. 3 Cynyddodd straen hyfyw lefelau IL-10, a TGF-beta, mewn PBMCs. Profwyd lefel IL-10 a b TGF-beta mewn PBMCs drwy drin straeniau probiotig. Ychwanegu 5 * 105 cfu/20 µl straen hyfyw o CP{8}}, AP-32, ac ET-66 at PMBCs 10 µg/ml. Defnyddiwyd ffytohaemagglutinin (PHA) fel rheolaeth gadarnhaol. Y rheolaeth negyddol oedd PBMCs wedi'u trin â RMPI-1640 cyfrwng yn unig. Perfformiwyd profion triphlyg. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD). Defnyddiwyd prawf-t dwy gynffon i ddadansoddi gwahaniaethau ystadegol. Nodwyd arwyddocâd ystadegol gyda P<0.05, P<0.01, P<0.001. The symbol *indicated a significant difference by comparing to the medium-treated control; symbol #indicated significant difference by comparing to the PHA control

Ffig. 4 Mesur poblogaethau pathogenig Streptococcus mutans ar arwynebau mwcosaidd y geg. V tabledi probiotig hyfyw; H tabledi probiotig anweithredol a laddwyd gan wres; C tabledi plasebo (rheoli); a bacteria asid lactig LAB. Perfformiwyd casglu a dadansoddi samplau poer yn Wythnosau 0, 2, 4, a 6. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD). Defnyddiwyd prawf-t dwy gynffon i ddadansoddi gwahaniaethau ystadegol. Nodwyd arwyddocâd ystadegol gyda *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Cadarnhad o Gallu Tabledi Probiotig i Lesteirio Twf Pathogen Geneuol trwy Brawf In Vitro

Datgelodd yr astudiaeth in vitro fod tabledi probiotig hyfyw yn atal cyfradd goroesi pathogenau geneuol yn sylweddol (Ffig. 5a). Cafodd y poblogaethau bacteriol ar ôl triniaethau eu normaleiddio gan boblogaethau bacteriol cyn triniaethau. Gostyngwyd cyfradd goroesi S. mutans, P. gingivalis, F. nucleatum, ac A. actinomy cetemcomitans yn y grŵp probiotig hyfyw, o'i gymharu ag yn y grŵp plasebo, i 4.23% (***P < 0 .001, plasebo=91%), 8.64% (***P < 0.001, plasebo=89%), 5.77% (**P<0.01, placebo=98%), and 6.23% (**P<0.01, placebo=87%), respectively. However, the heat-killed probiotic tablet exerted weaker antibacterial effects than the viable probiotic tablet (Fig. 5b). The survival rate of S. mutans, P. gingivalis, F. nucleatum, and A. antinomy cetemcomitans in the heat-killed probiotic group, compared to in the placebo group, was slightly decreased without statistical significance (82%, placebo=91%), significantly reduced to 53% (*P<0.05, placebo=89%), not inhibited (96.88%, placebo=98%), and significantly reduced to 80% (**P<0.01, placebo=87%), respectively.

Trafodaeth

O'i gymharu â'r grŵp plasebo, byddai poblogaethau llafar Lactobacillus a Bifidobacterium yn cynyddu'n sylweddol trwy fwydo tabledi probiotig hyfyw neu dabledi probiotig lladd gwres am 4 wythnos. Yn ogystal, arhosodd y niferoedd Lactobacillus a Bifidobacterium ar lefelau sylweddol uchel am bythefnos ar ôl atal y defnydd o brobiotegau hyfyw (Ffig. 1a a b). Yn yr un modd, mae Camila Casuccio Almeida et al. dangos y gallai gweinyddiaeth pedair wythnos o driniaeth probiotig barhau i leddfu symptomau mewn cleifion ag anoddefiad i lactos am o leiaf 3 mis ar ôl rhoi'r gorau i fwyta probiotig [23]. Fodd bynnag, dylid gwerthuso effaith barhaus probiotegau mewn triniaeth hirdymor yn y dyfodol. Yn ogystal, cynyddwyd crynodiad IgA poer yn sylweddol wrth roi tabledi probiotig hyfyw sy'n cael eu lladd â gwres. Fe wnaeth y ddau grŵp probiotig a laddwyd gan wres a hyfyw gynyddu IgA poer trwy roi tabledi llafar am 4 wythnos, ond heb ddangos gwahaniaeth ystadegol i'r plasebo. Dangosodd crynodiad IgA mewn grwpiau probiotig a laddwyd gan wres a hyfyw gynnydd sylweddol yn Wythnos 6. Fodd bynnag, dylid ymchwilio ymhellach i fecanwaith drychiad IgA ar ôl rhoi'r gorau i'r weinyddiaeth probiotig am wythnosau 2 (Ffig. 2) Braathen et al. adroddodd ganlyniadau tebyg ar rôl imiwn-modiwleiddio straen probiotig yn y ceudod llafar [24]. Yn ogystal, adroddwyd bod straenau probiotig yn cynyddu crynodiad IgA fecal yn sylweddol mewn hychod a moch bach [25]. Fodd bynnag, mae astudiaethau ar symptomau lleddfu IgA mewn heintiau llwybr anadlu uchaf yn parhau i fod yn annigonol. Gellid ymchwilio i fecanwaith moleciwlaidd manwl atal ac atal heintiadau llwybr anadlu uchaf gan fathau probiotig CP-9, AP-32, ac ET-66 mewn astudiaethau yn y dyfodol. Yn yr astudiaeth bresennol, byddai straen hyfyw CP-9, AP-32, ac ET-66 yn codi lefel IL-10, a TFG-beta mewn celloedd PBMC. Dangosodd AP-32 allu effeithiol i gynyddu IL-10, a TFG-beta mewn PBMCs trwy eu cymharu â rheolaeth bositif PHA (Ffig. 3a a b). Roedd yn rhagdybio y gallai straenau hyfyw CP-9, AP-32, ac ET-66 achosi secretu celloedd B IL-10 a TFG-beta i gynyddu lefelau IgA poer. Fodd bynnag, dylid profi ymhellach y gydberthynas rhwng poer IL-10, TFG-beta, ac IgA poer [26]. Ar ben hynny, mae'n dal yn aneglur a wnaeth probiotegau a laddwyd gan wres godi IgA trwy ysgogi IL-10 a TFG-beta. Dangosodd prawf in vitro fod AP a laddwyd gan wres-32 yn hybu secretion interfferon- ac IL{{{{-12p70}) a gostwng lefelau IL{{{-13}) [27]. Felly, yn yr astudiaeth glinigol hon, mae gallu straen CP-9, AP{-32, ac ET{-66 probiotig a AP a laddwyd gan wres{-32 ac ET-66 straen i atal bacteria pathogenig yn y ceudod llafar ei ddilysu ymhellach (Ffig. 4). Cyflwynodd losinau probiotig hyfyw well gallu gwrth-pathogenig na losinau a laddwyd gan wres trwy secreting asidau organig, peptidau gwrthficrobaidd [28], exopolysaccharides (EPSs) [29] bacteriocins [30] (Ffig. 5a a b). Dylai'r cydrannau gwrthficrobaidd swyddogaethol a gynhyrchir gan straeniau probiotig hyfyw gael eu canfod gan gromatograffaeth hylif perfformiad uchel (HPLC) a chromatograffeg hylif (LC) - sbectrometreg màs yn y dyfodol [31]. Dywedir bod gan y probiotegau a laddwyd gan wres fanteision allweddol probiotegau hyfyw ond heb bryderon diogelwch penodol straeniau probiotig hyfyw [32]. Fodd bynnag, dylid gwirio ymhellach gydrannau gwrthficrobaidd probiotegau lladd gwres.

Ffig. 5 Cadarnhad o allu tabledi probiotig i atal twf pathogenau geneuol trwy brawf in vitro. Dilyswyd gallu tabledi probiotig hyfyw sy'n cael eu lladd gan wres i atal cyfradd goroesi pathogenau geneuol, gan gynnwys Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum, ac Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Grŵp gwag, canolig yn unig; grŵp plasebo, tabledi (1 g) heb unrhyw gydrannau probiotig. Perfformiwyd profion triphlyg. Cyflwynwyd data fel y gwyriad safonol cymedrig (SD). Defnyddiwyd prawf-t dwy gynffon i ddadansoddi gwahaniaethau ystadegol. Nodwyd arwyddocâd ystadegol gyda *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Casgliad

Tabledi probiotig hyfyw cymysg, sy'n cynnwys L. salivarius subsp. salicinius AP-32, B. animalis subsp. CP lactig-9, ac L. paracasei ET-66, a phrobiotegau a laddwyd gan wres, gan gynnwys L. salivarius subsp. Cyflawnodd salicinius AP-32 a L. paracasei ET-66 eu swyddogaethau buddiol trwy godi poblogaethau llafar Lactobacillus a Bifdobacterium, lleihau S. mutanau yn y ceudod llafar, a chynyddu crynodiad IgA poer mewn cyfranogwyr iach. Dilysodd canlyniadau profion in vitro fod probiotegau hyfyw yn atal pathogenau geneuol yn effeithiol, gan gynnwys S. mutans, P. gingivalis, ac F. nucleatum subsp. polymorphism, ac A. actinomycetemcomitans. Imiwnedd mwcosol geneuol-trwynol yw'r amddiffyniad rheng flaen yn erbyn micro-organebau ymledol, ac mae hwn wedi dod yn fater hollbwysig. Felly, bydd yr astudiaeth hon yn cynnig strategaeth amgen (ychwanegiad probiotig) i gynnal imiwnedd y geg ac iechyd y geg.

budd-daliadau atodiad cistanche-sut i gryfhau system imiwnedd

Cyfeiriadau

1. Takaki H, Ichimiya S, Matsumoto M, Seya T (2018) Ymateb imiwn mwcosaidd mewn meinwe lymffoid sy'n gysylltiedig â thrwynol pan gaiff ei roi mewn trwynol gan gynorthwywyr. J Imiwnedd Cynhenid ​​10(5–6):515–521

2. Wu RQ, Zhang DF, Tu E, Chen QM, Chen WJ (2014) Y system imiwnedd mwcosaidd yn y ceudod llafar - cerddorfa o amrywiaeth celloedd T. Int J Llafar Sci 6(3):125–132

3. Dyn WH, de Steenhuijsen Piters WAA, Bogaert D (2017) Microbiota'r llwybr anadlol: porthor i iechyd anadlol. Nat Parch Microbiol 15(5):259–270

4. Wald ER, Guerra N, Byers C (1991) Heintiau llwybr resbiradol uchaf mewn plant ifanc: hyd ac amlder cymhlethdodau. Pediatreg 87(2):129–133

5. Marcotte H, Lavoie MC (1998) Ecoleg ficrobaidd llafar a rôl imiwnoglobwlin poer A. Microbiol Mol Biol Rev 62(1):71-109

6. Weltzin R, Traina-Dorge V, Soike K, Zhang JY, Mack P, Soman G et al (1996) Mae gwrthgorff IgA monoclonaidd mewnol i firws syncytaidd anadlol yn amddiffyn mwncïod rhesws rhag heintiad y llwybr anadlol uchaf ac isaf. J Heintio Dis 174(2): 256-261

7. Ruggeri FM, Johansen K, Basile G, Kraehenbuhl JP, Svensson L (1998) Mae imiwnoglobwlin gwrthrotafeirws A yn niwtraleiddio firws in vitro ar ôl trawscytosis trwy gelloedd epithelial ac yn amddiffyn llygod babanod rhag dolur rhydd. J firol 72(4): 2708-2714

8. Millet N, Solis NV, Swidergall M (2020) Mae IgA mwcosol yn atal dysbiosis Candida albicans cymesurol yn y ceudod llafar. Blaen Immunol 11:2448

9. Katz J, Harmon CC, Buckner GP, Richardson GJ, Russell MW, Michalek SM (1993) Imiwnoglobwlin poer amddiffynnol A yn erbyn haint Streptococcus mutans ar ôl imiwneiddio mewn trwynol ag antigen S. mutan I/II ynghyd ag is-uned B tocsin colera . Heintio Imiwn 61(5): 1964-1971

10. Moutsopoulos NM, Konkel JE (2018) Imiwnedd meinwe-benodol ar y rhwystr mwcosol llafar. Tueddiadau Immunol 39(4): 276-287

11. Lin CW, Chen YT, Ho HH, Hsieh PS, Kuo YW, Lin JH, Liu CR, Huang YF, Chen CW, Hsu CH, Lin WY, Yang SF (2021) Mae lozengines â straen probiotig yn gwella ymateb imiwnedd ac iechyd y geg . Llafar Dis. https://doi.org/10.1111/odi.13854

12. Ericson D, Hamberg K, Bratthall G, Sinkiewicz-Enggren G, Ljunggren L (2013) Poer IgA ymateb i facteria probiotig a mutans streptococci ar ôl defnyddio gwm cnoi sy'n cynnwys Lactobacillus reuteri. Pathog Dis 68(3):82–87

13. Defrance T, Vanbervliet B, Briere F, Durand I, Rousset F, Banchereau J (1992) Interleukin 10 a thrawsnewid beta ffactor twf yn cydweithredu i gymell celloedd B dynol gwrth-CD{40- naïf actifedig i secretu imiwnoglobwlin A. J Exp Med 175(3):671–682

14. Papone V, Verolo C, Zafaroni L, Batlle A, Capo C, Bueno L et al (2015) Canfod a chyffredinolrwydd pathogenau periodontol mewn poblogaeth Uruguayaidd â periodontitis cronig gan ddefnyddio methodoleg confensiynol a metagenomeg. Odontoestomatologia 17(25):23–32

15. Butera A, Gallo S, Maiorani C, Molino D, Chiesa A, Preda C, Scribante A (2021) Dewis amgen probiotig yn lle clorhexidine mewn therapi periodontol: gwerthuso paramedrau clinigol a microbiolegol. Micro-organebau 9(1):69

16. Wang Y, Li X, Ge T, Xiao Y, Liao Y, Cui Y et al (2016) Probiotics ar gyfer atal a thrin heintiau llwybr anadlol mewn plant: adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad o hap-dreialon rheoledig. Meddygaeth 95(31):e4509. https://doi.org/10.1097/ MD.000000000004509

17. Laufer AS, Metlay YH, Gent JF, Fenni KP, Kong Y, Pettigrew MM (2011) Cymunedau microbaidd y llwybr anadlol uchaf a chyfryngau otitis mewn plant. Bio 2(1):e00245-10. https://doi.org/10. 1128/mBio.00245-10

18. Chen YT, Hsieh PS, Ho HH, Hsieh SH, Kuo YW, Yang SF, Lin CW (2020) Gweithgaredd gwrthfacterol o straen probiotig hyfyw a lladdwyd gan wres yn erbyn pathogenau llafar. Lett Appl Microbiol 70(4):310–317

19. Bonifait L, Chandad F, Grenier D (2009) Probiotics ar gyfer iechyd y geg: myth neu realiti? J Can Dent Assoc 75(8):585–90

20. Hsieh PS, An Y, Tsai YC, Chen YC, Chuang CJ, Zeng CT, King AE (2013) Potensial straen probiotig i fodiwleiddio ymatebion llidiol celloedd epithelial ac imiwnedd in vitro. Microbiol Newydd 36(2):167–179

21. Elrefaei M, Burke CM, Baker CA, Jones NG, Bousheri S, Bangsberg DR, Cao H (2009) TGF- ac IL-10 cynhyrchu gan HIVspecifc CD8+ celloedd T yn cael ei reoleiddio gan CTLA-10 {5}} signalau ar CD4+ celloedd T. PloS ONE 4(12):e8194

22. Ranganathan V, Akhila CH (2019) Streptococcus mutans: A yw wedi dod yn brif droseddwr ar gyfer amlygiadau llafar? J Microbiol Exp 7(4):207–213

23. Almeida CC, Lorena SLS, Pavan CR, Akasaka AEM, Mesquita MA (2012) Gall effeithiau buddiol defnydd hirdymor o gyfuniad probiotig o Lactobacillus casei Shirota a Bifidobacterium breve Yakult barhau ar ôl atal therapi mewn cleifion ag anoddefiad â lactos. Ymarfer Nutr Clin 27(2):247–251

24. Braathen G, Ingildsen V, Twetman S, Ericson D, Jørgensen MR (2017) Presenoldeb Lactobacillus reuteri mewn poer yn cyd-daro ag IgA poer uwch mewn oedolion ifanc ar ôl cymeriant losin probiotig. Microbau Budd 8(1):17–22

25. Scharek L, Guth J, Filter M, Schmidt MFG (2007) Effaith y bacteria probiotig Enterococcus faecium NCIMB 10415 (SF68) a Bacillus cereus var. i chi NCIMB 40112 ar ddatblygiad IgG serwm ac IgA fecal hychod a'u perchyll. Arch Anim Nutr 61(4):223–234

26. Ebrahimpour-Koujan S, Milajerdi A, Larijani B, Esmaillzadeh A (2020) Effeithiau probiotegau ar sytocinau poer ac imiwnoglobwlinau: adolygiad systematig a meta-ddadansoddiad ar dreialon clinigol. Cynrychiolydd Gwyddonol 10(1):1–11

27. Ou CC, Lin SL, Tsai JJ, Lin MY (2011) Mae bacteria asid lactig sy'n cael eu lladd gan wres yn gwella potensial imiwnofodiwleiddio trwy wyro'r ymateb imiwn tuag at bolareiddio Th1. J Food Sci 76(5):M260–M267. https://doi.org/10.1111/j.1750-3841.2011. 02161.x

28. Nair MS, Amalaradjou MA, Venkitanarayanan K (2017) Priodweddau gwrthfeirysol probiotegau wrth frwydro yn erbyn pathogenesis microbaidd. Adv Appl Microbiol 98:1–29

29. Wu MH, Pan TM, Wu YJ, Chang SJ, Chang MS, Hu CY (2010) Gweithgareddau exopolysaccharide o bifidobacterium probiotig: Effeithiau imiwnomodwlaidd (ar J774A. 1 macrophages) ac eiddo gwrthficrobaidd. Int J Microbiol Bwyd 144(1):104–110

30. Troednoeth SF, Klaenhammer TR (1983) Canfod a gweithgaredd lactacin B, bacteriocin a gynhyrchir gan Lactobacillus acidophilus. Appl Environ Microbiol 45(6):1808–1815

31. Kim PI, Sohng JK, Sung C, Joo HS, Kim EM, Yamaguchi T, Kim BG (2010) Nodweddu ac adnabod strwythur peptid gwrthficrobaidd, hominin, a gynhyrchwyd gan Staphylococcus hominis MBBL 2-9. Biochem Bioffys Res Commun 399(2):133–138

32. Piqué N, Berlanga M, Miñana-Galbis D (2019) Manteision iechyd probiotegau a laddwyd gan wres (Tyndallized): trosolwg. Int J Mol Sci 20(10):2534