Strategaethau Seiliedig ar Aptamer i Hybu Imiwnotherapi yn Rhan 2 TNBC

Yn ogystal, mae aptamers yn goddef nifer o addasiadau cemegol sy'n gwella effeithiolrwydd targedu, proffil ffarmacocinetig, a sefydlogrwydd mewn amgylcheddau biolegol, sy'n ofynnol ar gyfer eu cymwysiadau in vivo [47]. Fel y'i hadolygwyd yn helaeth mewn mannau eraill [27,48], mae'r addasiadau a ddefnyddiwyd fwyaf a gymhwyswyd i aptamers, naill ai yn ystod SELEX neu ar ôl SELEX, i gynyddu eu gwrthiant yn erbyn cnewyllyn yn cynnwys (Ffigur 3): disodli'r 2 0 -grwpiau OH o ribos gyda fflworo, methoxy, thiol neu grwpiau amino; capio neu gylchrediad pennau'r oligonucleotidau; amnewid asgwrn cefn y ffosffodiester ag asgwrn cefn ffosfforothioad; a chyflwyno asidau niwclëig wedi'u cloi. At hynny, gellir cynhyrchu L-aptamers, a elwir yn sbiegelmers, nad ydynt yn cael eu cydnabod gan niwcleasau oherwydd eu bod yn enantiomerau o asidau niwclëig naturiol. Mae addasiadau cemegol hefyd yn cael eu cymhwyso i oresgyn hidlo arennol cyflym aptamers maint bach trwy eu cyfuno â moleciwlau rhy swmpus, fel polyethylen glycol (PEG) neu golesterol, gan gynyddu eu hamser cylchrediad heb effeithio ar hygyrchedd y targed. Mae dulliau soffistigedig hefyd wedi'u datblygu i gyfuno aptamers yn gemegol â therapiwteg eilaidd mewn therapi cyfuniad, ac yn ddiddorol, archwiliwyd strategaethau arloesol i gyflwyno grwpiau cemegol egsotig yn y moleciwl aptamer i ymestyn eu swyddogaeth a goresgyn y diffyg amrywiaeth gemegol mewn asidau niwclëig [49 ].

Mae cnewyllyn yn cyfeirio at ensymau sy'n gallu cyflymu adwaith hydrolysis RNA neu DNA ac sydd ag ystod eang o swyddogaethau biolegol. Yn y system imiwnedd, mae cnewyllyn yn offer pwysig ar gyfer adnabod a chlirio heintiau firaol. Ar ôl i'r firws heintio cell, bydd yn rhyddhau RNA neu DNA i'r gell. Bydd y moleciwlau asid niwclëig hyn yn cael eu hadnabod a'u hydroleiddio gan gnewyllyn y gell heintiedig, gan atal feirws rhag dyblygu a lledaeniad haint.

Yn ogystal, mae cnewyllyn hefyd yn ymwneud â rheoleiddio ymatebion imiwnedd cynhenid ​​​​ac addasol. Gall cnewyllyn reoleiddio lefelau mynegiant genynnau trwy reoleiddio diraddio a sefydlogrwydd RNA neu DNA. Mewn celloedd imiwnedd, mae cnewyllyn yn rheoleiddio ymatebion imiwn fel apoptosis, cyflwyniad antigen, a gwahaniaethu celloedd T.

Ar y cyfan, mae cnewyllyn yn chwarae rhan bwysig yn yr ymateb imiwn, gan gydnabod haint firaol, modiwleiddio mynegiant genynnau, a modiwleiddio'r ymateb imiwn. Felly, mae mecanweithiau lluosog yn bodoli ar gyfer yr effaith ar imiwnedd. O'r safbwynt hwn, mae angen rhoi sylw i wella imiwnedd. Mae Cistanche yn gwella imiwnedd. Mae Cistanche yn gyfoethog mewn gwahanol sylweddau gwrthocsidiol, megis fitamin C, fitamin C, carotenoidau, ac ati Gall y cynhwysion hyn gael gwared ar radicalau rhydd, lleihau straen ocsideiddiol, a gwella imiwnedd. ymwrthedd system imiwnedd.

Cliciwch budd-daliadau cistanche tubulosa

Cynrychiolir strategaeth arall i wella affinedd rhwymol, detholusrwydd targed, a bio-argaeledd in vivo aptamers gan gynhyrchu addaswyr cyfradd araf wedi'u haddasu (SOMAmers). Mae'r rhain yn addasyddion DNA sy'n cario niwcleotidau wedi'u haddasu'n gemegol wedi'u swyddogaethu yn 5-safle wridin gyda nodweddion a all nid yn unig gymryd rhan mewn rhyngweithiadau â'r protein targed ond sydd hefyd yn ffurfio motiffau adeileddol eilaidd a thrydyddol newydd sy'n cynyddu'n sylweddol y repertoire o dargedau hygyrch. i addaswyr [50].

Hyd yn hyn, mae un aptamer wedi'i addasu'n helaeth yn gemegol (o'r enw Macugen), sy'n targedu isoform 165 o ffactor twf endothelaidd fasgwlaidd, wedi'i gymeradwyo ar gyfer trin dirywiad macwlaidd sy'n gysylltiedig ag oedran, ac mae un ar ddeg o addasyddion mewn treialon clinigol ar gyfer trin gwahanol glefydau dynol. [51,52]. Yn eu plith, mae'r aptamer gwrth-niwcleolin AS1411 a'r ffactor gwrth-stromal sy'n deillio o gelloedd 1 NOX-A12 aptamer eisoes wedi cwblhau treialon clinigol cam II ar gyfer therapi canser. Ar ben hynny, mae'r gwrth-protein tyrosine kinase -7 Sgc8 aptamer DNA, wedi'i labelu â 68 Ga, yng nghyfnod cynnar I ar gyfer asesu ei werth diagnostig mewn cleifion colorefrol (ClinicalTrials.gov Dynodwr: NCT03385148).

3. Strategaethau Imiwnedd Seiliedig ar Aptamer ar gyfer Triniaeth TNBC

Mae mwtaniadau genetig ac epigenetig mewn celloedd canser yn arwain at bresenoldeb llawer o antigenau sy'n gysylltiedig â thiwmor y mae'r IS yn eu cydnabod fel rhai nad ydynt yn hunan ac, felly, yn dinistrio celloedd sydd wedi'u treiglo. Fodd bynnag, mae'n hysbys bod celloedd canser yn esblygu sawl mecanwaith i ddianc rhag dinistr imiwnedd a newid y micro-amgylchedd o'u plaid gan arwain at dwf tiwmor, goresgyniad, a metastasis (53 55]).

Nod imiwnotherapi canser yw gwella neu adfer gallu'r GG i ganfod a dinistrio celloedd canser trwy oresgyn y mecanweithiau y mae tiwmorau'n eu defnyddio i osgoi ac atal yr ymateb imiwn. Mae strategaethau trawiadol sy'n seiliedig ar atamer wedi'u datblygu yn yr ychydig flynyddoedd diwethaf i adfer yr Is tuag at gyflwr gwrth-tiwmor yn TNBC. Fel y trafodir isod mae tystiolaeth gynyddol yn dangos gallu atamer i gryfhau gweithgaredd sytotocsig celloedd imiwn, rhwystro pwyntiau gwirio imiwnedd, neu recriwtio celloedd imiwn i gelloedd canser (Ffigur 4).

3.1. Lymffocytau tiwmor-ymdreiddio

Y prif fathau o gelloedd imiwnedd ym micro-amgylchedd TNBC yw TILs, ac mae eu presenoldeb yn gysylltiedig yn sylweddol â chanlyniadau goroesi gwell mewn cleifion â thiwmorau cam cynnar heb eu trin [56]. Mae TILs yn cynnwys yr holl gelloedd CD3 ynghyd â T, a allai hyrwyddo dinistr tiwmor (CD8 ynghyd â chelloedd T sytotocsig) ac ymateb antitumor (CD4 ynghyd â T-helper 1) neu gyfyngu ar ymatebion imiwnedd gwrth-tiwmor (CD4 ynghyd â T-helper 2, gan gynnwys blwch Forkhead P3 ( FOXP3), CD4 ynghyd â chelloedd T rheoleiddiol).

Yn ddiweddar, mae Zhao et al. Cynigiodd strategaeth wreiddiol sy'n manteisio ar allu targedu addaswyr i adeiladu "lymffocyt T super-cytotocsig" ar gyfer ymateb gwrth-tiwmor gwell mewn imiwnotherapi canser [59]. Roeddent yn cynhyrchu nanoronynnau metel-organig-organig asid-diraddadwy a lysosome-targedu a oedd wedi'u llwytho â perforin a gransym B, dau docsin antitumor a gynhwysir mewn lysosomau o CD8 ynghyd â chelloedd T, ac yn swyddogaethol gyda aptamer targedu'r derbynnydd CD63 ar lysosome. Adneuwyd Ca2 plus ar y llwyfan nano i wella ei fiogydnawsedd a sefydlogrwydd a chryfhau gweithgaredd tocsin. Llwyddodd yr awduron i ddefnyddio platfform o'r fath dan arweiniad atamer (o'r enw LYS-NPs) ar gyfer cyfoethogi cynnwys cytotocsig lysosomau o gelloedd CD8 ynghyd â T.

Pan gawsant eu profi ym model llygoden TNBC 4T1, gwnaeth celloedd T ragactifadu ag antigenau penodol 4T wedi'u prosesu a'u hailgyfuno gan LYS-NPs a rhyddhau'r cynnwys lysosomaidd yn synapsau imiwnolegol, gan sbarduno adwaith gwrth-tiwmor cryf (Ffigur 4). Mae gan yr imiwnotherapi arfaethedig seiliedig ar aptamer botensial mawr i oresgyn heriau sylweddol mewn imiwnotherapi celloedd T ar gyfer tiwmorau solet a gynrychiolir yn bennaf gan signalau gwrthimiwnedd cryf, sy'n cymell actifadu celloedd T isel a llai o synthesis a rhyddhau proteinau sytotocsig [60].

3.2. Imiwnedd Checkpoint-Mynegi Celloedd

Adroddodd grŵp Alatrash fod mynegiant y genyn PD-L1 mewn cleifion TNBC yn sylweddol uwch nag mewn cleifion nad ydynt yn TNBC (19]. Mynegir PD-L1, un o'r prif bwyntiau gwirio imiwnedd sy'n gysylltiedig â chelloedd tiwmor, mewn amrywiaeth o gelloedd imiwnedd). , megis macrophages, rhai celloedd T wedi'u actifadu, celloedd B, ac mewn llawer o gelloedd tiwmor solet, gan gynnwys celloedd BC. Mae ei dderbynnydd y protein transmembrane PD-1, yn cael ei fynegi ar wyneb bilen TILs, celloedd NK, macrophages, celloedd dendritig, a monocytes [61] Mae'r rhwymiad rhwng PD-L1 a PD-1 yn achosi ataliad CD8 ynghyd â TILs, gan eu trawsnewid yn ffurf anergig ac, o ganlyniad, osgoi imiwnedd canser.

At hynny, mae'r echelin PD-1/PD-L1 yn modylu o fewn celloedd tiwmor amrywiol lwybrau signalau lluosogi a goroesi megis PI3K/AKT, MAPK, a JAK/STAT [62], ac, yn bwysig iawn, yn TNBC, yr actifadu o'r echel hon yn hyrwyddo pontio epithelial-mesenchymal (EMT), ffenoteip sy'n gysylltiedig â thiwmorau ymosodol a metastatig iawn [63].

Mae gwahanol ddulliau seiliedig ar atamer yn TNBC yn cael eu harchwilio ar hyn o bryd i wrthdroi effeithiau PD-1/PD-L1 (Ffigur 5).

Ffigur 5. Cynrychioliad sgematig o strategaethau seiliedig ar atamer i rwystro echelin PD-1/PD-L1 yn TNBC. (a) nanoronynnau addurnedig TNBC wedi'u llwytho â siRNA gwrth-PD-L1; (b) liposomau gwrth-CD44 a gwrth-PD-L1 atamer-addurnedig wedi'u llwytho â siRNA doxorubicin a gwrth-IDO1; (c) aptamer gwrthPD-L1 wedi'i gyfuno â paclitaxel; (d) aptamer gwrth-EGFR wedi'i gysylltu'n gofalent â gwrth-PD-L1 neu gwrth-CTLA-4 mAbs (gweler y testun am fanylion). Crëwyd gyda BioRender.com (cyrchwyd ar 2 Mawrth 2023).

Yn y cyd-destun hwn, ymchwiliodd ein grŵp, am y tro cyntaf, i gyfuniad rhwng mAb gwrth-PD-L1 gyda aptamer derbynnydd ffactor twf gwrth-blatennau (PDGFR), o'r enw Gint4.T, yn TNBC [64]. Mae Gint4.T yn aptamer RNA sy'n gwrthsefyll niwcleas 20 -fluoropyrimidines (20F-Py) sy'n rhwymo ac yn atal PDGFR a fynegir ar wyneb gwahanol gelloedd canser dynol, gan gynnwys celloedd TNBC [65], a chydrannau TNBC TME, gan gynnwys bôn-gelloedd mesenchymal [66], a chelloedd T [64]. Yn ddiddorol, pan gaiff ei chwistrellu'n fewnwythiennol mewn llygod syngeneig TNBC 4T1, mae'r aptamer yn cryfhau'n gryf effaith mAbs antiPD-L1 wrth atal twf tiwmor a ffurfio metastasis yr ysgyfaint trwy weithredu ar gelloedd tiwmor a chydrannau TME [64].

At hynny, mae'r blocâd cyfun o PDGFR a PD-L1 yn achosi disbyddu celloedd FOXP3 ynghyd â Treg a chynnydd mewn celloedd CD8 ynghyd â T a gransym B yn fwy cyson na monotherapiau sengl. Mae'r canlyniadau hyn yn gosod y sylfaen ar gyfer adeiladu imiwn-gyfuniad dwy-benodol sy'n cynnwys gwrthgorff gwrth-PD-L1 wedi'i gysylltu'n cofalent â Gint4.T aptamer, gan wneud y gorau o effeithiolrwydd therapi cyfuniad. Lluniadau bispecific a gafwyd trwy gysylltu cofalent yn dderbynnydd ffactor twf gwrth-epidermal (EGFR) 20F-Py RNA aptamer ag imiwnofodylyddion gwrth-PD-L1 (10_12) [67] neu wrth-CTLA-4 (ipilimumab) [68] Cynhyrchwyd mAbs gan Passariello et al. a phrofodd ei fod yn cynnal swyddogaethau biolegol y ddau riant, gan wneud gweithgaredd sytotocsig cryf yn erbyn celloedd BC.

Cynrychiolir strategaeth amgen yn lle mAbs gwrth-PD-L1 ar gyfer targedu PD-L1 gan atal PD-L1 trwy dawelu genynnau, sydd â'r potensial i oresgyn rhai rhwystrau cylchol o driniaethau sy'n seiliedig ar mAbs, megis eu hamser a'u cost. -yn cymryd llawer o gynhyrchu, y potensial ar gyfer imiwnogenigrwydd, a sefydlogrwydd isel. At hynny, mae'r strategaeth hon yn caniatáu rhwystro rôl pro-tumorigenig gynhenid ​​PD-L1 cytoplasmig [69] nad yw, yn lle hynny, yn hygyrch gan wrthgyrff. Mae'r posibilrwydd o syntheseiddio addaswyr sy'n targedu celloedd canser â grwpiau swyddogaethol ar eu eithaf, gan ganiatáu'r cyfuniad i fectorau nano, yn ddull trawiadol o gyflwyno, yn benodol i'r tiwmor, cargos RNA (siRNA) ymyrraeth fach, wedi'u llwytho yn y fector nano. , gan oresgyn bregusrwydd siRNAs i gnewyllyn a'u hanallu i fynd i mewn i gelloedd targed. Yn ddiweddar, mae nanoronynnau sy'n seiliedig ar poly (lactig-cydglycolig)-bloc-PEG (PLGAb-PEG) wedi'u llwytho â siRNA gwrth-PD-L1 a'u haddurno â atamer RNA 20F-Py sy'n gallu rhwymo a mewnoli'n benodol i gelloedd TNBC [70,71].

Roedd y fectorau nano cyfun aptamer a ddeilliodd o hynny, ar ôl deori 90 munud ar gelloedd TNBC, yn cyflwyno siRNA yn effeithlon i gelloedd targed, a oedd yn gymwys i achosi ataliad bron yn llwyr o fynegiant PD-L1 [72]. Yn nodedig, mae nano-gludwyr wedi'u haddurno aptamer yn cynnig y posibilrwydd i gysylltu gwahanol ligandau ag wyneb y NPs, gan gynyddu penodoldeb targedu, ac i amgáu therapiwteg lluosog yn y NPs, gan ganiatáu ar gyfer therapïau cyfun effeithiol. Er enghraifft, efallai y bydd gweinyddu cisplatin ar yr un pryd [40] a siPD-L1 [72] gan nanoronynnau polymerig PLGA, yr ydym wedi'u cyfarparu ag aptamers TNBC, nid yn unig yn hyrwyddo gostyngiad mewn sgîl-effeithiau gwenwynig ond hefyd yn gwrthweithio effaith negyddol cisplatin a adroddwyd. gweinyddu ar gyfoethogi PD-L1 ynghyd â chelloedd TNBC osgoi imiwnedd [73].

Yn hyn o beth, mae Kim et al. paratoi nanosystem amlswyddogaethol gyda dau addasydd DNA wedi'u cyfuno ar wyneb allanol liposomau a dwy therapiwteg wahanol y tu mewn i fectorau nano ar gyfer cemoimmunotherapi synergaidd yn TNBC [74]. Yn benodol, fe wnaethant ddefnyddio, ar gyfer targedu celloedd TNBC, yr aptamers DNA gwrth-CD44 [75] a gwrth-PD-L1 [76] a ddewiswyd yn flaenorol, pob un wedi'i addasu'n thiol ac wedi'i gyfuno'n cofalent i grwpiau maleimide o micelles PEGylated-DSPE gan thiol-maleimide cemeg. Llwythwyd liposomau nanosig gyda doxorubicin a siRNA yn ymyrryd â mynegiant IDO1, protein sy'n ffafrio TME gwrthimiwnedd ac sy'n cael ei uwchreoleiddio gan driniaeth doxorubicin. Pan gafodd ei chwistrellu'n fewnwythiennol i lygod tiwmor-xenograft TNBC 4T1, fe wnaeth y fectorau nano leihau twf tiwmor yn gryf ac atal ffurfio metastasis trwy gyfuno'n synergyddol ymsefydlu marwolaeth celloedd imiwnogenig wedi'i dargedu â chanser a gwrthdroi gwrthimiwnedd [74].

Yn ddiweddar, mae gwahanol addaswyr PD-L1 wedi'u cynhyrchu a'u profi fel antagonyddion annibynnol, cyfuniadau deubenodol, ac asiantau dosbarthu therapiwteg mewn modelau llygoden tiwmor yr ysgyfaint, yr afu a'r colon, sydd, yn debyg i wrthgyrff gwrth-PD-L1, yn ymyrryd â yr echel PD-1/PD-L1 drwy rwystro'r PD-L1 (Tabl 2). Mae un aptamer, o'r enw XQ-P3, wedi'i gynhyrchu gan ddetholiad cadarnhaol ar gelloedd PD-L1 sy'n gorfynegi MDA-MB-231 trwy ddefnyddio celloedd cnocio PD-L1 ar gyfer gwrthddewis [77]. Hyd yn oed os nad yw wedi'i brofi mewn vivo eto, mae'n ymddangos yn hynod effeithiol mewn cyd-ddiwylliannau o gelloedd TNBC MDA-MB{{-231 a chelloedd imiwnedd Jurkat trwy rwystro'r rhyngweithio â PD-1 ac adfer swyddogaeth celloedd T. Ar ben hynny, dangosodd cyfuniad aptamer-paclitaxel XP-Q3 effeithiolrwydd gwrth-amlhau mewn celloedd TNBC PD-L1 wedi'u gorfynegi [77].

3.3. Macrophages

Mae macroffagau sy'n gysylltiedig â thiwmor (TAMs) ymhlith y celloedd imiwnedd mwyaf niferus yn y TME o ystod eang o ganserau a gallant weithredu i hybu neu atal ymatebion imiwn gwrth-tiwmor [86,87]. Yn wir, oherwydd eu gradd uchel o blastigrwydd, maent yn symud i ddau ffenoteip amrywiol mewn ymateb i ysgogiadau micro-amgylcheddol amrywiol: M1 wedi'i actifadu'n glasurol, proinflammatory, ac M2 gwrthlidiol wedi'i actifadu fel arall, sy'n dangos proffiliau mynegiant gwahaniaethol i farcwyr arwyneb celloedd a gwahanol gynhyrchu cytocin a chemocin. Mae macroffagau M1 fel arfer yn cyflawni swyddogaethau antitumor, tra bod macroffagau M2 yn hyrwyddo dilyniant tiwmor. Yn y tiwmorau mwyaf ymosodol, gan gynnwys TNBC, mae TAMs yn tueddu i ymdebygu i ffenoteip tebyg i M sy'n cyfrif i raddau helaeth am fethiant therapïau confensiynol a therapïau atal pwynt gwirio imiwnedd. Am y rheswm hwn, nod sawl dull imiwnotherapiwtig arloesol yw targedu a disbyddu macroffagau M2 neu eu hailraglennu i'r ffenoteip a ddymunir [88,89].

I ddewis addaswyr sy'n targedu macroffagau dynol tebyg i M, cymhwyswyd y dull cell-SELEX cyntaf at macroffagau dynol yn deillio o fonocytau sawl rhoddwr a'i begynu i'r ffenoteip tebyg i M [90]. Er nad oedd y M2-aptamer DNA targed gorau sy'n dod o'r detholiad yn gallu gwahaniaethu'r celloedd targed o debyg M0- a monosytau heb eu gwahaniaethu a hefyd wedi'u rhwymo i raddau is i debyg i M macroffagau, fe'i mewnolwyd yn gyflym i CD14 ynghyd â monocytau, gan ddal potensial ar gyfer cymwysiadau dosbarthu cyffuriau wedi'u targedu â monocyte.

Mae cymhwysiad trawiadol arall o aptamers ar gyfer imiwnotherapi tiwmor solet yn cynnwys cryfhau penodoldeb macrophage M1 ar gyfer celloedd tiwmor trwy eu peiriannu ag addasyddion sy'n targedu celloedd canser. Mae imiwnotherapi celloedd derbynnydd antigen T (CAR-T), sy'n trwytho cleifion â chelloedd CAR-T, wedi dangos effeithiolrwydd mawr wrth drin rhai lewcemia a lymffoma ond dim ond canlyniadau cymedrol mewn tiwmorau solet oherwydd anhawster tiwmorau treiddio [91] . Oherwydd gallu cynhenid ​​​​macrophages i dreiddio meinweoedd tiwmor, cynigiwyd sawl dull yn ddiweddar sy'n eu peiriannu'n enetig i fynegi CARs chimerig (CAR-M) ar gyfer targedu celloedd tiwmor a chychwyn ymateb antitumor wedi'i dargedu [92]. Er mwyn goresgyn anfanteision mawr sy'n gysylltiedig â therapïau CAR-M traddodiadol, megis atgynhyrchu isel proteinau peirianyddol a materion diogelwch, mae Qian et al. cynnig dull CAR-M newydd yn seiliedig ar y defnydd o addaswyr [93].

Deorwyd y llinell gell macrophage sefydlog murine, RAW 264.7, yn gyntaf ag adweithydd labelu glycoprotein metabolaidd a oedd yn cynnwys azid a lipopolysaccharid i gynhyrchu siwgrau azido ar wyneb cell M1. Yna, cyfunwyd celloedd M1 gan adwaith cemeg clic i'r aptamer AS1411, sy'n clymu i niwcleolin a fynegir ar sawl cell canser, ac aptamer PD-L1, ar gyfer targedu tiwmor ar yr un pryd a rhwystr pwynt gwirio imiwnedd. Yn bwysig, in vivo, dangosodd delweddu llygod sy'n dwyn 4T1 TNBC ac wedi'u chwistrellu'n fewnwythiennol â chelloedd M1, wedi'u swyddogaethu ag aptamers fflwroleuol, fwy o groniad mewn tiwmorau o gymharu â chelloedd M1 heb eu haddasu. Ar ben hynny, pan gafodd ei brofi am weithgaredd gwrth-tiwmor, achosodd yr M1 a beiriannwyd gan ddau-aptamer leihad cryf mewn twf tiwmor a ffurfiant metastasis, a oedd yn cyd-fynd ag ail-raglennu TME imiwn gyda mwy o ymdreiddiad celloedd T yn y tiwmor a gwell sytowenwyndra celloedd T.

Fel arall, mae Chen et al. aptamers sfferig amryfalent arfaethedig (PSAs) fel strategaeth peirianneg macrophage [94]. Cynhyrchwyd PSAs trwy weithrediad nanoronynnau aur gyda'r aptamer AS1411 wedi'i addasu â thiol a chysylltydd DNA sy'n cario, ar yr eithaf rhydd, grŵp swyddogaethol ar gyfer adweithio â thagiau azid a grëwyd ar M0 macroffagau trwy'r metabolig uchod. labelu ac adweithiau clicio biorthogonaidd (Ffigur 6). Cafodd y trawsnewid ffenotypig o macroffagau an-begynol wedi'u peiriannu i'r isdeip M1 ei actifadu gan belydrau-X in vitro a'i gadarnhau mewn llygod â senografftiau tiwmor 4T1, gan achosi lladd tiwmor-benodol cryf heb arwyddion o wenwyndra systemig.

3.4. Celloedd Lladd Naturiol

Mae celloedd NK yn lymffocytau sytotocsig sy'n perthyn i'r IS cynhenid, sy'n gallu cynhyrchu cytocinau llidiol a chemocinau. Fe'u gelwir yn "llinell amddiffyn gyntaf" oherwydd, yn wahanol i lymffocytau T, nid ydynt yn mynegi derbynyddion celloedd T sy'n benodol i antigen ond yn gweithredu yn erbyn celloedd treigledig heb sensiteiddio blaenorol neu ehangu clonal [95]. Methodd imiwnotherapi mabwysiadol celloedd NK â dangos effeithiolrwydd wrth drin tiwmorau solet, yn rhannol oherwydd y TME gwrthimiwnedd a diffyg penodoldeb celloedd NK i'r tiwmor [96].

Felly, ymhlith y dulliau ar gyfer gwella effeithiolrwydd therapiwtig gwrthganser celloedd NK, mae ymdrech fawr yn canolbwyntio ar roi penodoldeb canser trwy fynegi CARs neu gyfuniad ligandau sy'n targedu tiwmor [97]. Archwiliodd Zu a chydweithwyr aptamers fel asiantau gweithredol targedu canser trwy gysylltu aptamer, sy'n gallu adnabod y derbynnydd CD30 yn benodol, ar gelloedd lymffoma i wyneb naill ai llinell gell fasnachol NK neu gelloedd NK a gafwyd gan dri rhoddwr iach [98]. Dewiswyd yr aptamer math DNA hwn yn flaenorol gan yr un grŵp trwy ddull SELEX hybrid, lle dilynwyd camau dethol ar CD30 ynghyd â chelloedd lymffoma gan gamau dethol ar y protein ailgyfunol CD30 [99]. Addaswyd yr aptamer ar y 30 pen gyda chadwyni hydrocarbon C18 dwbl lipoffilig i'w hangori i bilen celloedd NK, sydd wedi'u harwain felly'n benodol i gelloedd lymffoma i'w lladd [98]. Yn fwy diweddar, cymhwysodd yr un awduron yr un dull yn TNBC trwy atodi aptamer DNA a oedd yn gallu rhwymo protein anhysbys a fynegir ar gelloedd TNBC i wyneb celloedd NK. Roedd celloedd NK wedi'u peiriannu gan Aptamer yn atal metastasis yr ysgyfaint o gelloedd MDA-MB{-231 wedi'u chwistrellu'n fewnwythiennol mewn llygod heb wenwyndra ochr i feinweoedd normal [100].

Er mwyn gwella ymhellach benodolrwydd tiwmor celloedd NK mewn tiwmorau solet, cynhyrchwyd celloedd NK â chyfarpar atamer deuol trwy ddefnyddio aptamer yn targedu celloedd carcinoma hepatogellog a'r aptamer AptPD-L1 [81]. Roedd y celloedd NK wedi'u peiriannu o ganlyniad yn fwy effeithiol na chelloedd heb eu cyfuno neu wedi'u cyfuno â dim ond un o'r ddau addasydd o ran atal twf carsinoma hepatogellog mewn llygod a drosglwyddwyd yn fabwysiadol. Cyfyngiad arall ar effeithlonrwydd imiwnotherapi gyda chelloedd NK yw eu hymdreiddiad annigonol mewn tiwmorau solet. Unwaith eto, mae addaswyr wedi bod yn arfau ardderchog ar gyfer goresgyn y broblem hon. Cynhyrchodd grŵp Hock gyfuniad deubenodol seiliedig ar aptamer sy'n gallu rhwymo c-Met ar yr un pryd, derbynnydd a fynegir yn uchel ar sawl cell tiwmor, ac i'r derbynnydd Fcg III (CD16a), protein a fynegir ar gelloedd NK [101]. Mae'r cyfuniad yn cynnwys y ddau addasydd DNA c-Met a CD16a hynod benodol a gafodd eu hasio gan wahanol gysylltwyr, gan gadw'r pellter ∼65 Å-ddelfrydol ar gyfer rhwymo'r ddau dderbynnydd ar yr un pryd. Llwyddodd y cyfuniad i ddynwared sytowenwyndra cellog sy'n ddibynnol ar wrthgyrff yn effeithlon trwy recriwtio celloedd NK i gelloedd canser. Yn ddiweddarach, cafodd yr un atamer CD16 ei asio i aptamer DNA PD-L1 i gynhyrchu lluniad a allai recriwtio celloedd NK i PD-L1 ynghyd â chelloedd tiwmor ac amharu ar echelin gwrthimiwnedd PD-1/PD-L1 trwy adweithio TILs yn erbyn celloedd tiwmor mewn llygod sy'n dwyn tiwmor [82]. Mae'r dull hwn wedi'i nodi'n arbennig ar gyfer y tiwmorau solet hynny sydd â lefelau uchel o PD-L1, megis TNBC.

4. Casgliadau

Mae'r astudiaethau diweddar a drafodir yma yn dangos yn glir botensial mawr aptamers oligonucleotide i ehangu ein IS i frwydro yn erbyn canserau. Gellir defnyddio aptamers fel cyfryngau gwrthganser yn yr un modd â mAbs ond maent yn rhatach, yn cael eu cynhyrchu'n gyflymach ac yn fwy atgenhedlu, ac yn llai imiwnogenig na gwrthgyrff. Fodd bynnag, rhaid cydnabod bod dyfodiad addaswyr i'r clinig yn profi'n arafach na'r disgwyl; mewn gwirionedd, er bod mwy na 30 mlynedd wedi mynd heibio ers y SELEX cyntaf [25,26], dim ond tri aptamers sydd ar hyn o bryd mewn treialon clinigol ar gyfer triniaeth canser [51].

Mae'r arafu hwn yn bennaf oherwydd rhai heriau sy'n cyfyngu ar effeithiolrwydd aptamers mewn cleifion, megis eu sefydlogrwydd ansicr a'u hanner oes, yn enwedig yn y micro-amgylchedd cymhleth sy'n esblygu'n barhaus sy'n amgylchynu'r tiwmor. Serch hynny, mae'r strategaethau rhyfeddol a ddatblygwyd yn ystod yr ychydig flynyddoedd diwethaf i oresgyn y materion cyfyngol uchod a'r cynnydd diweddar o ran darganfod atamer a'r addasiadau i'w haddasu i unrhyw gymwysiadau dymunol yn ei gwneud yn rhesymol dadlau y bydd y defnydd ymarferol o aptamers yn fuan. gael eu gwireddu ar gyfer canserau fel TNBC, sydd angen opsiynau therapiwtig newydd ar frys.

Cyfraniadau Awdur:

Cysyniadoli, LC; ysgrifennu — paratoi drafft gwreiddiol, LC; ysgrifennu— adolygu a golygu LA, Ad, RN, MF, SC, ac LC Mae pob awdur wedi darllen a chytuno i fersiwn gyhoeddedig y llawysgrif.

Ariannu:

Ariannwyd yr ymchwil hwn gan Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, i LCLA ei gefnogi gan gymrodoriaeth AIRC ar gyfer yr Eidal.

Datganiad y Bwrdd Adolygu Sefydliadol:

Ddim yn berthnasol.

Datganiad Argaeledd Data:

Ddim yn berthnasol.

Diolchiadau:

Rydym yn ddiolchgar i A. Caliendo am drafodaethau craff.

Gwrthdaro Buddiannau:

Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw wrthdaro buddiannau.

Cyfeiriadau

1. Dent, R. ; Trudeau, M.; Pritchard, KI; Hanna, WM; Kahn, HK; Sawka, CA; Lickley, ALl; Rawlinson, E.; Haul, P. ; Narod, SA Canser y fron triphlyg-negyddol: Nodweddion clinigol a phatrymau ailddigwydd. Clin. Canser Res. 2007, 13, 4429–4434. [CrossRef]

2. Derakhshan, F.; Reis-Filho, JS Pathogenesis o Ganser y Fron Driphlyg-Negyddol. Annu. Pathol y Parch. 2022, 17, 181–204. [CrossRef]

3. Lu, JY; Alvarez Soto, A.; Anampa, JD Tirwedd therapi systemig ar gyfer canser y fron triphlyg-negyddol cyfnod cynnar. Barn Arbenigwr. Fferyllydd. 2022, 23, 1291–1303. [CrossRef]

4. Lehmann, BD; Bauer, JA; Chen, X. ; Sanders, ME; Chakravarthy, AB; Shyr, Y. ; Pietenpol, JA Nodi isdeipiau canser y fron triphlyg-negyddol dynol a modelau rhag-glinigol ar gyfer dewis therapïau wedi'u targedu. J. Clin. Ymchwilio. 2011, 121, 2750–2767. [CrossRef]

5. Lehmann, BD; Jovanovic, B.; Chen, X. ; Estrada, MV; Johnson, KN; Shyr, Y. ; Moses, HL; Sanders, ME; Pietenpol, JA Mireinio Isdeipiau Moleciwlaidd Canser y Fron Driphlyg-Negyddol: Goblygiadau ar gyfer Dethol Cemotherapi Neoadjuvant. PLoS ONE 2016, 11, e0157368. [CrossRef]

6. Burstein, MD; Tsmelzon, A.; Poage, GM; Covington, KR; Contreras, A. ; Fuqua, SA; Savage, MI; Osborne, CK; Hilsenbeck, SG; Chang, JC; et al. Mae dadansoddiad genomig cynhwysfawr yn nodi isdeipiau a thargedau newydd o ganser y fron triphlyg-negyddol. Clin. Canser Res. 2015, 21, 1688–1698. [CrossRef]

7. Parc, JH; Ahn, JH; Kim, SB Sut y byddwn yn trin canser y fron triphlyg-negyddol cynnar (TNBC): O'r safon gyfredol i'r strategaethau imiwn-moleciwlaidd sydd ar ddod. ESMO Agored 2018, 3, e000357. [CrossRef]

8. Li, S. ; Bao, C. ; Huang, L. ; Wei, JF Strategaethau Therapiwtig Cyfredol ar gyfer Canser y Fron Metastatig Driphlyg-Negyddol: O Safbwynt Fferyllwyr. J. Clin. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K. ​​; Kratz, F. Terfynau cemotherapi canser confensiynol. Mewn Cyflenwi Cyffuriau mewn Oncoleg: O Ymchwil Sylfaenol i Therapi Canser; Kratz, F., Anfonwr, P., Steinhagen, H., eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, UDA, 2011; Cyfrol 1, tt 1–31.

10. Ferrari, P.; Scatena, C. ; Ghilli, M.; Bargagna, I. ; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Mecanweithiau Moleciwlaidd, Biofarcwyr a Therapïau sy'n Dod i'r Amlwg ar gyfer Cemotherapi Gwrthiannol TNBC. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonzalez-Angulo, AC; Timms, KM; Liu, S.; Chen, H.; Litton, JK; Potter, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; et al. Amlder a chanlyniad treigladau BRCA mewn cleifion heb eu dewis â chanser y fron triphlyg derbynnydd-negyddol. Clin. Canser Res. 2011, 17, 1082–1089. [CrossRef]

12. Robson, M.; Im, SA; Senkus, E.; Xu, B. ; Domchek, SM; Masuda, N.; Delologe, S.; Li, W. ; Tung, N. ; Armstrong, A. ; et al. Olaparib ar gyfer Canser Metastatig y Fron mewn Cleifion â Threiglad BRCA Germline. N. Saesneg. J. Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdal, HP; Yndestad, S.; Elzawahry, A.; Llop-Guevara, A.; Gilje, B. ; Blix, ES; Espelid, H. ; Lundgren, A.S.; Geisler, J. ; Vagstad, G. ; et al. Monotherapi olaparib fel triniaeth sylfaenol mewn canser y fron triphlyg-negyddol heb ei ddewis. Ann. Oncol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J. ; Hurvitz, SA; Gonçalves, A. ; Lee, KH; Fehrenbacher, L.; Yerushalmi, R.; Mina, ALl; Martin, M.A.; et al. Talazoparib mewn Cleifion â Chanser y Fron Uwch a Threiglad BRCA Germline. N. Saesneg. J. Med. 2018, 379, 753–763. [CrossRef]

15. Keung, FY; Wu, Y. ; Badar, F. ; Vadgama, JV Ymateb Celloedd Canser y Fron i Atalyddion PARP Yn Annibynnol o Statws BRCA. J. Clin. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com