Proffiliau Cemegol Ac Astudiaeth Metabolit O Deserticola Cistanche Amrwd Ac Wedi'i Brosesu mewn Llygod Mawr Gan UPLC-Q-TOF-MSE

E-bost Cyswllttina.xiang@wecistanche.comam fwy o wybodaeth

Haniaethol

Cefndir: Mae prosesu medica materia Tsieineaidd yn dechneg fferyllol nodedig ac unigryw mewn Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol (TCM) a ddefnyddir i leihau sgîl-effeithiau, a chynyddu neu hyd yn oed newid effeithiolrwydd therapiwtig y perlysiau amrwd. Newidiadau yn y cydrannau hanfodol a achosir gan weithdrefn brosesu optimaidd sy'n bennaf gyfrifol am effeithlonrwydd cynyddol y gweithfeydd meddyginiaethol. Effaith fywiog yr aren-yang o win reis wedi'i stemioCistanche deserticola(C.deserticola) yn gryfach na C.deserticola amrwd (CD).

Dulliau: Cynhaliwyd dadansoddiad cymhariaeth gan ddefnyddio'r UPLC-Q-TOF-MS' gyda llwyfan gwybodeg UNIFl i bennu dylanwad prosesu. Perfformiwyd astudiaethau in vitro ar gyfer nodweddu etholwyr yn ogystal âmetabolionyn vivo. Penderfynwyd ar y cydrannau cemegol mewn CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu. Cynhaliwyd y dadansoddiadau ystadegol aml-amrywedd i werthuso amrywiadau rhyngddynt tra defnyddiwyd OPLS-DA ar gyfer cymhariaeth pâr.

Canlyniadau: Datgelodd canlyniadau'r astudiaeth hon amrywiadau sylweddol mewn glycosidau ffenylethanoid (PhGs) airidoidauar ôl prosesu. Canfuwyd cyfanswm o 97 o gyfansoddion yn y detholiadau o CD a'i gynnyrch wedi'i brosesu. Mae PhGs sydd â'r grŵp O-caffeoyl yn y rhan 8-O- -D-glucopyranosyl, fel acteoside, cistanoside C, campneoside Il, osmanthuside wedi gostwng ar ôl cael eu prosesu, tra bod PhGs â 6' -Cynyddodd grŵp O-caffeoyl yn y rhan 8-O- -D-glucopyranosyl, fel isoacetoside, isocistanoside C, isocampneoside l, isomartynoside, yn enwedig yn y grŵp CD-NP. Cynyddodd dwyster echinacoside a cistanoside B y mae eu strwythur yn meddu ar 6'-O- -D-glucopyranosyl moiety hefyd. Mewn astudiaeth in vivo, canfuwyd 10 cydran prototeip a 44 metabolion mewn plasma llygod mawr, feces, ac wrin. Datgelodd y canlyniadau a gafwyd fod prosesu yn arwain at yr amrywiad sylweddol yng nghyfansoddion cemegol CD ac yn effeithio ar warediad y cyfansoddion in vivo, a phrosesau metabolaidd cam Ⅱ yw rhaeadrau allweddol pob cyfansoddyn, ac mae'r rhan fwyaf o'r metabolion yn gysylltiedig ag echinacoside neu acteosid.

Casgliadau: Dyma'r ymchwil cymharu byd-eang cyntaf o gryno ddisg amrwd a CD wedi'i phrosesu. Mae'r canfyddiadau hyn yn ychwanegu at ein dealltwriaeth o effaith prosesu CD ac yn rhoi data pwysig ar gyfer ymchwiliadau effeithiolrwydd yn y dyfodol.

Geiriau allweddol: Cistanche deserticola, Prosesu, UPLC-Q-TOF-MS5, Proffiliau cemegol, Metabolitau in vivo

Rhagymadrodd

Mae prosesu materia medica Tsieineaidd (CMM) wedi dangos cymhwysedd sylweddol mewn ymarfer clinigol Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol (TCM), ac fe'i hystyriwyd yn driniaeth hyfyw ers sawl canrif. Mae hon yn dechnoleg fferyllol unigryw sydd wedi deillio o ddamcaniaeth TCM. Yn dilyn prosesu, mae gwahaniaethau sylweddol yn ymddangosiad, cyfansoddion cemegol, nodweddion, ac arwyddocâd meddyginiaethol pob math o TCMs wedi'u nodi, gan arwain at y rhagdybiaeth y gallai prosesu wella effeithiolrwydd neu leihau effeithiau gwenwynig y TCM.

Am gannoedd o flynyddoedd,Cistanche deserticola(Rou Cong Rong yn Tsieinëeg, CD) yn cael ei ddefnyddio'n gyffredin mewn ymarfer clinigol TCM ar gyfer ategu swyddogaethau'r aren. Mae hefyd yn helpu i lleithio'r coluddyn sy'n arwain at ymlacio'r coluddyn [1].Cistancheei recordio gyntaf yn ShenNongBencaoJing. Fe'i darganfyddir yn gyffredin mewn cynefinoedd cras a lled-gras ar draws Ewrasia a Gogledd Affrica, gan gynnwys Iran , Tsieina , India , a Mongolia [2] . Mae prosesu CD wedi'i wneud trwy stemio â gwin reis o dan bwysau arferol, sy'n ddull paratoi a ddogfennir yn y Pharmacopoeia Tsieineaidd (Jiucongrong yn Tsieineaidd, a elwir yma wedi hyn yn "CD-NP"). Ac mae stemio CD gyda gwin reis o dan bwysau uchel yn ddull paratoi mwy effeithiol (a elwir yn "CD-HP" o hyn ymlaen) [3, 4]. Mae nifer o astudiaethau wedi'u datgelu bod effeithiau ffarmacolegol CD yn wahanol i'w gynhyrchion wedi'u prosesu [5]. Efallai y CD tonify aren-yang ac ymlacio coluddyn, tra ar ôl cael ei stemio gan reis-gwin, byddai effaith ailgyflenwi'r aren-yang yn cael ei gryfhau. Yn ein hastudiaeth gynharach, canfuwyd y gallai CD-NP wella tonifation yr aren a chynnal yang, a lleddfu effaith gwlychu coluddion a baeddu [6-8]. Mewn ymarfer clinigol, cynhyrchion wedi'u prosesu yw'r ffurf a ddefnyddir amlaf.

Yn gyfredol, mae sawl astudiaeth wedi dadansoddi cydrannau cemegol CD, ac yna ynysu ac adnabod mwy na 100 o gyfansoddion [9-11], megis glycosidau ffenylethanol (PhGs),iridoidau, lignans, ac oligosacaridau fel ei brif gyfansoddion cemegol. Dywedwyd hefyd bod llawer o weithgareddau ffarmacolegol PhGs gan gynnwys imiwnofodiwlaidd, niwro-amddiffynnol, hepatoprotective, gwrthlidiol, gwrth-ocsidiol, ac ati.[12-14]. Mae gan iridoidau weithgareddau gwrthlidiol [15, 16]. Datgelwyd hefyd gan astudiaethau cynharach bod rhai cydrannau cemegol yn dangos amrywiadau yn ystod y prosesu [17-20]. Yn seiliedig ar yr adroddiadau hyn, gellir tybio bod yr amrywiadau mewn cyfansoddiad cemegol ar ôl prosesu yn arwain at effeithiau ffarmacolegol amrywiol, y mae angen eu harchwilio ymhellach.

Yn yr astudiaeth gyfredol, perfformiwyd dull sensitif ac effeithiol hy, cromatograffaeth hylif perfformiad uchel iawn ynghyd â TOF-MSE (UPLC-Q-TOF-MSE) ar gyfer dadansoddiad cymharol, a chynhaliwyd astudiaethau in-vitro i ddadansoddi'r darnau yn ansoddol. o CD, CD-NP, a CD-HP ar gyfer egluro eu proffiliau cemegol. Yn gyffredinol, ystyriwyd bod y cemegau alldarddol ag amlygiad uchel mewn organau targed yn gydrannau effeithiol. Felly, mewn llygod mawr, gweinyddwyd CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu ar lafar yn y drefn honno, ac yna eu nodweddu. Mae'r astudiaeth bresennol yn datgelu astudiaeth gymharol (in vitro ac in vivo) o gryno ddisg amrwd a CD wedi'i phrosesu am y tro cyntaf. Byddai'r canlyniadau a gafwyd yn ehangu ein dealltwriaeth o effaith prosesu CD, a allai fod yn ddefnyddiol ar gyfer astudiaethau pellach.

Defnyddiau a dulliau

Defnyddiau

Darparwyd cyfansoddion safonol o ajugol (180120) a 2'-acetyl-acetoside (M0601AS) gan Chendu Pure Chem-Standard Co., Ltd (Chengdu, China). Darparwyd Cistanoside F(MUST-17022620), echinacoside (D1105AS), cistano-side A (M0906AS), ac isoacteoside (M0106AS) gan gwmni Must (Sichuan China); acteoside (O0618AS), salidroside (J0526AS), catalpol (S0728AS), geniposide (A0407AS), ac asid geniposidig (MB6001-S) eu caffael gan Dalian Meilun Bio.Co., Ltd(Dalian, Tsieina).8-epide ocsiloganic asid (B31123) oedd a gafwyd gan Shanghai Yuanye Biological Technology Co, Ltd, Tsieina. Roedd methanol ac asetonitrile o radd MS ac fe'u cafwyd gan Merck KGaA, Darmstadt, yr Almaen. Darparwyd asid methanoig (CH, O,) o radd HPLC gan Merck KGaA (Darmstadt, yr Almaen). Cafodd y dŵr, a ddefnyddiwyd yn yr astudiaeth bresennol ei brosesu trwy system Milli-Q (18.2 MQ, Millipore, Ma, UDA). Darparwyd gwin reis gan Brand Tower Shaoxing Wine Co, Ltd (Zhejiang, China).

Casglwyd Cistanch deserticola oddi wrth Neimenggu wangyedi cistanche Co.Ltd. Nodwyd y samplau gan yr Athro Yanjun Zhai (ysgol fferylliaeth, Prifysgol Liaoning TCM). Cyflwynwyd y sbesimenau i Brifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol Liaoning.

Anifeiliaid

Darparwyd llygod mawr gwrywaidd Sprague-Dawley (gradd SPF) gyda 180-220 g o gyfanswm pwysau'r corff gan Liaoning Changsheng biotechnology Co. Ltd. (Canolfan Adnoddau Anifeiliaid Labordy Talaith Liaoning, rhif trwydded: SCXK-2015-0001). Roedd y llygod mawr hyn yn cael eu cadw mewn ystafell fridio gyda thymheredd wedi'i gynnal a'i gadw'n dda, a lleithder hy, 20-26 gradd, 50-70 y cant am wythnos. Cafodd y llygod mawr eu bwydo â bwyd a dŵr labordy arferol cyn arbrofi. Roedd yr anifeiliaid yn ymprydio dros nos, fodd bynnag, darparwyd y dŵr ad libitum cyn yr arbrawf. Dienyddiwyd llygod mawr gyda 10 y cant o anesthetig hydrad cloral. Cymeradwyodd Pwyllgor Moeseg Anifeiliaid Sefydliadol Ysbyty Taleithiol Meddygaeth Tsieineaidd Liaoning yr holl brotocolau arbrofol (2019.3.25, 2019015).

Paratoi dyfyniad CD, CD-NP, a CD-HP

Cafodd CD-NP, CD-HP eu prosesu o'r un swp o Cistanch deserticola. I baratoi CD-NP, cafodd darnau CD sych (5 mm o drwch, 100 g) eu lleithio â gwin reis (30 mL) a'u stemio ar 100 gradd am 16 h., ac yna eu sychu ar 55 gradd trwy'r popty sychu. Tra bod CD-HP yn cael ei baratoi trwy ymdreiddiad o ddarnau CD sych (5 mm o drwch, 100 g) gyda gwin reis (30 ml), ac yna ei stemio ar 1.25 gwasgedd atmosfferig am 4 h. ac yna ei sychu mewn popty sychu ar 55 gradd.

Mewn fflasg fesur 100 ml, cafodd un gram o'r powdwr ei hidlo trwy ridyll # 4, ac yna ychwanegu 50 y cant o fethanol (50 mL) ac yna ei orchuddio'n dynn a'i gymysgu. Roedd y cymysgedd hwn yn cael ei bwyso, ac yna hanner awr. maceration. Ar ôl maceration, cafodd y gymysgedd ei ultrasonicated (pŵer 250 W, amledd 35 kHz) am 40 munud, ac yna oeri, a phwyso eto. Cafodd y golled o bwysau ei ailgyflenwi â 50 y cant o fethanol, wedi'i gymysgu'n iawn, a'i ganiatáu i sefyll, ac yna hidlo'r uwchnatant ac yna defnyddio'r hidlydd a gafwyd fel yr ateb prawf.

Dadansoddiad MSE o gydrannau gweithredol

Paratoi sylweddau safonol: tubuloside-A (3.02 mg), echinacoside (3.00 mg), 2'-acetylacteoside (2.34 mg), acteoside (2.45 mg), isoacteoside (0.61) mg), cistanoside-F (2.14 mg), salidroside (3.39 mg), geni poside (2.84 mg), ajugol (1.58 mg), catalpol (2.39 mg), asid geniposidig (2.56 mg), a 8-epideoxyloganic asid (2.34 mg) yn cael eu hychwanegu i mewn i ffasg cyfeintiol 10 ml, ychwanegu cyfaint cyson methanol i raddfa, wedi'i ffurfweddu i doddiant cyfeirio crynodiad cyfatebol. Ffurfweddwyd pob un o'r 100 μL yn ddatrysiad cyfeirio cymysg.

Cyflwr dadansoddi MS: Cywirwyd gwerth màs te cyn yr arbrawf, a defnyddiwyd y modd ïon negyddol. Amrediad y màs oedd 50-1200 Da, a chwistrellwyd y sampl trwy bwmp chwistrellu llif. Cyflymder y côn oedd 100 L/awr, gosodwyd y gyfradd llif toddi ar 800 L/h. Roedd y folteddau capilari a chôn yn sefydlog ar 2500 a 40 V, yn unol â hynny. Tymheredd y ffynhonnell ïon a'r nwy toddedig oedd 100 gradd a 400 gradd yn y drefn honno, ac amlder caffael signal oedd 0.5 S−1.

Dadansoddiad UPLC-Q-TOF-MS o ddetholiad CD (15-16 mun), 65 y cant i 55 y cant A (16-18 mun). Y gyfradd llif oedd 0.3 mL min−1, tra bod tymheredd yr ystafell a'r golofn autosampler yn 30 gradd ac 8 gradd ar wahân. Cyfaint y pigiad oedd 1.0 μL.

Cyflawnwyd y gwerthusiad sbectrometrig màs trwy Waters XEVO G{{{{{{{{{{800}}XS QTOF MS (Waters Corporation, Milford, MA, USA), yn cynnwys ffynhonnell ESI. Gosodwyd cyfradd llif nwy nitrogen ar 800 L·awr−1 gyda thymheredd o 400 gradd, gosodwyd tymheredd y ffynhonnell ar 100 gradd, a gosodwyd y nwy côn ar 50 L h−1. Addaswyd foltedd y côn a'r capilari ar 40 a 2000 V, yn unol â hynny. Defnyddiwyd egni gwrthdrawiad y ramp yn yr ystod o 20–30 V. Cafwyd data te-ganolog o'r holl samplau o 50 i 1200 Da, gydag amser sganio 5-o 0.5 s dros amser dadansoddi o 10 munud . Cyflogwyd LockSpray TM ar gyfer dilysu'r manwl gywirdeb màs. Te [M–H] - ïon o enkephalin leucine (200 pg·μL-1 cyfradd llif trwyth 10 μL min−1) ar m/z Defnyddiwyd 554.2615 fel y màs clo. Defnyddiwyd meddalwedd Te MassLynx V4.1 (Waters Co., Milford, UDA) ar gyfer y màs cywir, cyfansoddiad yr ïonau rhagflaenol, a chyfrifiad yr ïonau darn.

Dadansoddi data yn llwyfan Masslynx

Ymhellach, sefydlwyd llyfrgell fewnol yn cynnwys enw'r cyfansoddyn, ei strwythur, a'r fformiwla foleciwlaidd (mewn mol.) yn seiliedig ar lenyddiaeth. Nodwyd yr holl gyfansoddion mewn templed arbennig, a wnaed yn Excel. Yn ogystal, arbedwyd y ffeiliau mol (Chemdraw Ultra 8.0, Cam-bridge soft, USA) a ffeiliau Excel yr holl strwythurau cyfansawdd unigol ar y cyfrifiadur lleol hefyd. Mewnforiwyd y daflen Excel sefydledig â data pwysig yn uniongyrchol i'r llyfrgell wyddonol yn UNIFI

Cyflogwyd UNIFI 1.8.2, Waters, Manceinion, DU i werthuso nodweddion adeileddol, yn enwedig ar gyfer y darnau nodweddiadol a darnio MS. Gosodwyd isafswm arwynebedd brig o 500 ar gyfer canfod brig 2D. Yn ystod uchafbwyntiau 3D datgelu, dewiswyd dwysedd brig ynni isel o fwy na 300 cyfrif a dwyster brig ynni uwch o fwy nag 80 cyfrif. Canfuwyd bod gwall màs hyd at ± 10 ppm ar gyfer cyfansoddion hysbys, a gosodwyd y goddefgarwch amser cadw yn yr ystod o ± 0.1 munud. Dewison ni'r adducts negyddol sy'n cynnwys -H, ynghyd â HCOOH. Cyflawnwyd y gwaith o brosesu'r data crai a gafwyd gan MS trwy feddalwedd UNIFI symlach i nodi'n gyflym y cydrannau cemegol a oedd yn bodloni'r safonau gyda'r gronfa ddata hunan-adeiledig a'r Llyfrgell Meddygaeth Draddodiadol fewnol.

Nesaf, i wirio strwythur cemegol pob cyfansoddyn targed, roedd yr isomerau'n cael eu gwahaniaethu gan eu patrymau darnio MS nodweddiadol a ddatgelwyd yn yr astudiaethau a adroddwyd, a thrwy gymharu amseroedd cadw safonau cyfeirio.

Dadansoddiad Metabolomeg yn seiliedig ar ddadansoddiad ystadegol aml-amrywedd

Cyn prosesu'r data crai, gosodwyd y paramedrau, megis màs yn amrywio o 150 i 1200 Da, ystod amser cadw (0 i 20 munud), dwyster trothwy ( 2000 yn cyfrif), goddefgarwch màs hy, 5 MDA, tra bod ffenestr amser màs a chadw yn 0.20 munud a 0.05 Da, yn y drefn honno. Yn y rhestr ddilynol o'r gronfa ddata, dynodwr yr ïonau oedd yr RT-m/ parau mewn perthynas â'u hamseroedd elution. Ystyriwyd yr un gwerthoedd ar gyfer RT a m/z mewn sypiau amrywiol o samplau fel yr un cyfansoddyn.

Cynhaliwyd dadansoddiad ystadegol aml-amrywedd i werthuso biofarcwyr effeithiol a gyfrannodd yn sylweddol at amrywiadau ymhlith gwahanol grwpiau. Yn ystod y dadansoddiad, defnyddiwyd dadansoddiad prif gydrannau (PCA) i nodi'r gwahaniaethau mwyaf a'r gydnabyddiaeth patrwm ar gyfer cael trosolwg a dosbarthiad. Offeryn modelu yw'r OPLS-DA sy'n darparu delweddiad o lwythiad cydrannau rhagfynegol OPLS-DA i gynorthwyo gwerthuso model. Defnyddiwyd pwysigrwydd amrywiol ar gyfer yr amcanestyniad (VIP) ar gyfer asesu gwerthusiad gwahanol gydrannau, a'rmetabolionwith VIP values>1.0 a gwerth-P<0.05 were="" regarded="" as="" effective="" markers.="" furthermore,="" a="" permutation="" test="" was="" conducted="" for="" providing="" reference="" distributions="" for="" the="" r²/o²values="" that="" could="" show="" the="" statistical="">

Arbrofion anifeiliaid Cafodd llygod mawr eu categoreiddio ar hap yn bedwar grŵp (n{0}} ar gyfer pob grŵp), ac yna rhoddwyd gwahanol echdynion ar lafar: (1) Grŵp rheoli gwag: rhoddwyd halwynog normal i'r llygod mawr (2 mL/100 g) ; (2) Grŵp CD: rhoddwyd dyfyniad CD i'r llygod mawr (2 mL/100 g); (3) Grŵp CD-NP: rhoddwyd dyfyniad CD-NP i'r llygod mawr (2 mL/100 g); (4) Grŵp CD-HP: rhoddwyd dyfyniad CD-HP (2 mL/100 g) i'r llygod mawr. Categoreiddiwyd yr holl grwpiau ymhellach yn dri is-grŵp ar gyfer plasma, wrin, a feces, yn unol â hynny. Ddwy awr yn ddiweddarach, gweinyddwyd pob llygoden fawr ar lafar gyda'r un faint a'r un faint o ddetholiadau.

Ar ôl ei roi, casglwyd samplau gwaed ar 1.0 h, 2.0 h, a 4.0 h mewn tiwbiau polythen heparineiddiedig 1.5 mL (o wythiennau orbitol) , ac yna centrifugation (ar 4500 rpm) o'r holl samplau am 15 munud.

Ar gyfer samplau wrin a feces, cynhaliwyd y llygod mawr mewn cewyll metaboledd, ac yna casglwyd samplau wrin a feces am 24 awr ar ôl eu gweinyddu. Cynhaliwyd centrifugation samplau wrin ar 4500 rpm am 15 munud, tra bod samplau feces yn cael eu sychu yn y cysgod, eu malu'n bowdr, yna cymerwyd 0.2 g, a'i ychwanegu i mewn i 0.5 mL halwynog toddiant, uwchsain am 5 munud, a centrifugio ar 12,000 rpm am 15 munud. Cadwyd yr holl fio-samplau ar −80 gradd tan y dadansoddiad.

Paratoi samplau biolegol. Ychwanegwyd samplau plasma, wrin, a feces gyda 3 cyfaint o fethanol, ac yna fortecs am 3 munud. Nesaf, cynhaliwyd centrifugation (ar 12,000 rpm) o'r cymysgeddau am 10 munud, ac yna trosglwyddo supernatant i'r tiwb EP, ac yna ei sychu gan nitrogen ar 37 gradd. At hynny, ychwanegwyd 200 μL o hydoddiant HCN-H2O (50 y cant). Deg, defnyddiwyd y fortecs ar gyfer cymysgu (1 munud), ac yna centrifugation (ar 12,000 rpm) am 5 munud. Chwistrellwyd y supernatant (5 μL) o'r samplau a gafodd eu trin i'r system UPLC-Q-TOF-MSE.

Cyflwr cromatograffig hylifol a sbectrometrig màs Y dadansoddiad ar gyfermetabolionwedi'i berfformio hefyd gan offeryn Waters UPLC trwy ryngwyneb ESI. Gwnaed gwahaniadau gan ddefnyddio colofn Acquity UPLC HSS T3 (100 mm × 2.1 mm, 1.8 µm), y cyfnod symudol oedd 0.1 y cant asid fformig (A): Acetonitrile (B), y cyflwr elution graddiant oedd 0-3 mun (99.8 y cant →98 y cant A).3-5 mun(98 y cant →95 y cant A),5-8 mun(95 y cant →90 y cant A), { {18}} mun (90 y cant →85 y cant A),12-17 mun(85 y cant →70 y cant A), 17-22 mun (70 y cant →60 y cant A), 22-23 mun (60 y cant →58 y cant A), 23-25 mun (58 y cant A),25-32 mun (58 y cant →45 y cant A), a 32-37 mun (45 y cant →35 y cant A) ),0.4 mL min-1 oedd y gyfradd llif. Gosodwyd tymheredd y golofn a'r ystafell sampl ar 40 gradd ac 8 gradd yn y drefn honno. Defnyddiwyd yr amodau sbectrometreg màs a grybwyllwyd uchod.

Defnyddiwyd strategaeth ar gyfer dadansoddiad systematig o fetabolion mewn meddalwedd bio-samplauUNIFI (1.8.2) ar gyfer prosesu data. Defnyddiwyd y swyddogaeth Cymharu Deuaidd ar gyfer adnabod metabolion effeithiol. Nid oedd metabolion a werthuswyd yn bodoli yn y sampl rheoli cyfatebol nac yn bodoli ar ddwyster ïon isel. Gosodwyd y trothwy dwyster cymharol ar 3 neu 5, a gellid gwerthuso metabolion a oedd yn bodloni'r meini prawf a danlinellwyd. Yna pennwyd metabolion cyffredin a rhagweladwy gan EIC. Ar gyfer chwilio metabolion dau gam, cymhwyswyd swyddogaeth yr NLF. Er enghraifft, yn y meddalwedd UNIFI, gellid gosod y paramedrau ar 176.0321 ar gyfer chwilio am gyfuniadau asid glucuronic posibl. Ar ôl prosesu, gellir gosod colled niwtral yn y dull neu ei nodi. Defnyddiwyd MassFragment ar gyfer pennu neu nodweddu strwythurau metabolion a ganfuwyd, swyddogaeth dehongli sbectrol UNIFI yw'r brif swyddogaeth a ddefnyddir i ddadansoddi darniad eilaidd o gydrannau rhiant. Gellir defnyddio'r swyddogaeth hon ar gyfer gwirio'r llwybr darnio yn gyflym, boed yn rhesymol.

Canlyniadau

Rheol darnio màs o glycosidau ffenylethanoid ac iridoidau

Glycosidau ffenylethanoid yw prif gyfansoddion cemegol CD. Datrysiadau safonol isoacteoside,

cymerwyd cistanoside F, tubuloside A, echinacoside, acteoside, a 2'-acetyl-acteoside, ac yna darparu lefel wahanol o egni gwrthdrawiad (Tabl 1), ac yna cafwyd mapiau MS2 cyfatebol (Ffig. 1).

Datgelodd y dadansoddiad sbectrometrig màs fod gan glycosidau ffenylethanoid batrymau darnio sbectrwm màs tebyg, mae'r llwybrau holltiad yn y modd ïon negyddol yn bennaf yn cynnwys (1) holltiad bond ester: colli grŵp caffeoyl niwtral (C, H, O162.03) ac asetyl niwtral grŵp (C, H, O,42.00);(2) Holltiad glycosidig: colli gweddillion rhamnose niwtral (C.HIO, 146.05) a gweddillion glwcos niwtral (CgHO,162.05). O sbectrometreg màs cydraniad uchel, gellid gwahaniaethu rhwng caffeoyl (162.03) a gweddillion glwcos (162.05).

Cymerwyd iridoids ajugol, catalpol, asid geniposidic, geniposide, a 8- atebion safonol asid oxyloganic epide, ac yna darparu gwahanol egni gwrthdrawiadau, a chafwyd MS'maps cyfatebol (Ffig. 2).

Mae gan glycosidau iridoid batrymau darnio sbectrwm màs tebyg, mae'r llwybrau holltiad yn y modd ïon negyddol yn bennaf yn cynnwys (1) Holltiad glycosidig: Colli gweddillion glwcos niwtral (CHOO, 162.05); (2) Colli CO niwtral, (43.99) a H , O(18.01).

Adnabod y cyfansoddion mewn darnau CD, CD-NP, a CD-HP

Dadansoddiad UPLC-QTOF-MSE

Gwnaed y gorau o amodau cromatograffig. Nesaf, gwerthuswyd cyfansoddion CistancheHerba mewn moddau ïon negyddol a chadarnhaol gyda CEs uchel yn ogystal ag isel. Datgelodd y canlyniadau a gafwyd fod cydnawsedd y modd negyddol yn uwch o'i gymharu â'r modd positif ar gyfer y cyfansoddion hyn. Roedd Ffigur 3 yn dangos cromato-gram ïon brig sylfaenol MS (BPI) wedi'i olrhain gyda brigau wedi'u rhifo. Cafodd dwyster pob ïon a ganfuwyd mewn dadansoddiad UPLC-Q-TOF-MS ei normaleiddio mewn perthynas â'r cyfrif ïon cyfan ar gyfer cynhyrchu matrics data a oedd yn cynnwys gwerth m/z, yr ardal brig normaleiddio, ac amser cadw.

Gwerthusiad o gydrannau CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu ar lwyfan UNIFl

Nodwyd cyfanswm o 97 o gyfansoddion gyda modd -SEM (n=6) o CD a'i gynnyrch wedi'i brosesu (Tabl 2), gan gynnwys glycosidau ffenylethanoid (PhGs), iridoidau, lignans, ac oligosacaridau. Canfuwyd y 95,91, a 94 o gydrannau mewn CD, CD-NP, a CD-HP yn unol â hynny. Yn eu plith, roedd 64 yn ffenylethanoidau, 13 yn iridoidau, a phenderfynwyd 20 math arall o gyfansoddion. Roedd tebygrwydd yng nghyfansoddiad cemegol CD a'i gynnyrch wedi'i brosesu, fodd bynnag, canfuwyd bod maint y cydrannau'n wahanol rhwng CD a'i gynnyrch wedi'i brosesu.

Amrywiadau mewn cydrannau cemegol cynhyrchion wedi'u prosesu Defnyddiwyd meddalwedd Simca-P 13.0 ar gyfer dadansoddi'r matrics data aml-amrywedd. Cyn PCA, roedd pob newidyn yn ganolig ar gymedrig ac ar raddfa Pareto, wedi'i ddilyn gan nodi newidynnau gwahaniaethol posibl. Mewn plot sgôr PCA, roedd pob pwynt yn dangos sampl unigol. Roedd samplau a oedd yn dangos tebygrwydd yn eu cydrannau cemegol wedi'u gwasgaru wrth ymyl ei gilydd, tra bod y rhai a ddangosodd amrywiadau yn eu cydrannau wedi'u rhannu. Fel y gwelir yn PCA(Ffig.4), gwahanwyd y grŵp o CD-HP oddi wrth y grwpiau o CD a CD-NP.

To distinguish CD from CD-HP and CD-NP, OPLS-DA, permutation test, S-plot, and VIP value were developed. (Figs.5, 6,7)The obtained results revealed that many components were key characteristic components of each product. The screening condition was the VIP>1 a P<0.05. from="" the="" date="" of="" the="" s-plot,="" the="" characteristic="" components="" were="" evaluated,="" which="" were="" commonly="" existing="" in="" the="" three="">

O Ffig.8, canfuwyd dwyster acteoside(54), cistanoside C(74), campneoside I(43), osmanthuside (75), a 2'-actylacteoside(80) yn cael y grŵp 4'-O-caffeoyl yn lleihaodd y rhan 8-O- -D-glucopyranosyl (gweler Ffig. 9) ar ôl cael ei phrosesu gan win reis, tra bod dwyster isoacetoside(60), yn castanoside (71),iso-campneoside I (69),isomartynoside (86) wedi cynyddu'r grŵp 6'-O-caffeoyl (gweler Ffig. 9), yn enwedig ar gyfer y grŵp CD-NP. Er bod gan tubuloside B (72) grŵp 6'-O-caffeoyl, yr un fath ag isoacteoside, gostyngodd y dwyster oherwydd ei grŵp 2'-asetyl. Cynyddodd dwyster echinacoside(38) a cistanoside B â grwpiau moiety 6'-O{{{- -D-glucopyranosyl}, ond gostyngodd dwyster tubuloside A (55) hefyd oherwydd ei grŵp 2'-asetyl.

Astudiodd ein tîm ymchwil hefyd sefydlogrwydd thermol acteoside ac isoacteoside a chanfuwyd bod ochr acteo yn ansefydlog mewn hydoddiant dŵr, methanol, a gwin reis melyn, ac y gellid ei drawsnewid yn isoacteoside yn rhannol o dan amodau gwresogi. Ond roedd thermosefydlogrwydd isoacteoside yn well, yn enwedig mewn toddiant gwin reis melyn. Roedd Ffigur 10 yn dangos y newidiadau posibl i PhGs mewn CD wrth brosesu:

Adnabod y metabolion mewn llygod mawr O ddata sbectrometreg màs cydraniad uchel, dadansoddwyd a chymharwyd pwysau moleciwlaidd cywir a chyfansoddiad elfennol metabolion a chyfansoddion moleciwlau proto. Gan fod yr un mathau o gyfansoddion yn TCM yn dangos tebygrwydd mewn addasiadau metabolaidd, gall cydberthynas cyfansoddion ffytocemegol in vitro ymestyn i'w metabolion in vivo. Yn y cyfamser, yn seiliedig ar lwybrau biotransformation confensiynol, daethpwyd i'r casgliad bod newid rhesymol o bwysau moleciwlaidd. Yn olaf, nodwyd y metabolion trwy ddadansoddi sbectra màs MSE y llwybr darnio metabolion a phroto-gyfansoddion yn y sbectrwm màs [21, 22]. O'i gymharu â'r sampl wag, nodwyd ei gydrannau yn vivo yn seiliedig ar y wybodaeth a ddarperir gan sbectrwm màs cromatogram, y posibilrwydd o adwaith metabolig, nodweddion y strwythur cyfansawdd, a rheol darnio ei sbectrwm màs. Gweler Tabl 3.

Adnabod metabolion glycosidau ffenylethanol

Defnyddiwyd llwyfan UNIFI ar gyfer prosesu. Roedd Ffigur 11 yn dangos cromatograff TIC o wrin, feces, a phlasma ar gyfer CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu. O'i gymharu â samplau gwag, nodwyd cyfanswm o 54 o fetabolion mewn llygod mawr, gan gynnwys 10 cydran prototeip a 44 metabolion, lle roedd 24, 49, a 6 mewn feces, wrin, a phlasma, yn unol â hynny.

Yn seiliedig ar fàs cywir, rhaeadru darnio, a cholledion niwtral rhagweladwy trwy fio-drawsnewid, gwerthuswyd cyfanswm o 35 o fetabolion sy'n gysylltiedig â glycosidau ffenylethanoid yn betrus. Mae gan fetabolion cysylltiedig glycosidau ffenylethanoid batrymau darnio sbectrwm màs tebyg, fel y darn decaffeoyl nodweddiadol m/z 461.16{05, yna'n cael ei hydroleiddio ymhellach gan fondiau glycosidig ac ester in vivo, a'i fetaboli i hydroxytyrosol (HT)(m/ z153.0504, C.HO.4.73 mun) ac asid caffeic(CA)(m/z179.0389, CH, O0.77 mun), gweler Ffig.12A.

M11 yn nodi [MH]~am m/ 153.0504 gyda fformiwla hy, C.HO, ac wedi'i nodi fel HT. Cyflwynodd M16 [MH] - ar m/z 329.0851, a oedd yn 176 Da uwch na HT, gan ddatgelu y gallai fod yn fetabolyn glwcwronaidd o HT. Roedd [MH]-yr M26 ar m/z 343.1037,14 Da yn uwch na HT-glucuronide. Felly, nodwyd M26 fel glucuronide HT-methylated. Nodwyd M17 fel sylffad HT yn seiliedig ar ei [MH] - ar m/z 233.0112,80 Da dros yr HT, y gellid ei methylu ymhellach, yna cynhyrchodd M22, a ddangosodd y m / z 247.0278, gan nodi ei fod yn HT- metabolit sulfated methylated. Ystyriwyd bod M7 (m/167.0335) a M5 (m/z 167.0762) yn gynhyrchion ocsideiddio a HT methyl, yn y drefn honno (Ffig.12B).

Nododd M1 [MH] - yn m/z 179.0389, roedd fformiwla moleciwlaidd eglur yn CH-O ac wedi'i nodi fel asid caffeic (CA). Datgelodd M25 [MH] - ar m/ 355.0704, a oedd yn 176 Da uwch na CA, yn dangos y gallai fod yn fetabolyn glucuronidated o CA. Roedd gan M27 m/z 258.994, a oedd 80 Da yn uwch na CA, felly fe wnaethom ei egluro fel CA sylffad, a gallai gynhyrchu M35 (m/z 273.0064). Gan fod M4 yn rhoi'r [MH]7 ar m/z 193.0524,14 Da yn uwch na CA, fe'i nodwyd fel metabolyn methylated CA. Roedd M39 yn metabolyn dadhydroxylation CA, gyda m/z 163.04, a gellid ei sylffio i M32 (m/z 242.9951).

M33(m/z 181.0491, C.HO,9.06 mun) oedd cynnyrch rhydwytho CA, hynny yw 3,4-asid dihydroxy-bensenpropionig, y gellid ei methylated i M19 (m /z 195.0623, C10H12O4, 0.93 mun). Gallai M33 gael ei ddadhydradu i M43, hynny yw 3-HPP (m/z 165.0558, C9H10O3, 11.29 mun), ac M31 (m/z 341.0942, C15H17O9, 8.90 mun) ac M29 (m. 8.52 mun) oedd y cynhyrchion glucuronidated a sulfated (Ffig. 12C).

Ar gyfer y metabolion sy'n gysylltiedig â glycosidau ffenylethanoid, y rhaeadrau metabolaidd allweddol oedd adweithiau metabolaidd cam II, hy, glucuronidation, methylation, a sulfation. Dangosir y rhaeadrau metabolaidd arfaethedig o ffenylethanoidau yn Ffig. 13.

Adnabod metabolion sy'n gysylltiedig ag iridoidau

Trwy ddadansoddi cyfansoddiad elfennol y metabolion, darnio MSE, a llenyddiaeth gysylltiedig, gwerthuswyd cyfanswm o 19 o fetabolion sy'n gysylltiedig ag iridoid yn betrus. Cafodd glycosidau iridoid eu hydrolysu gan fondiau glycosidig i ffurfio eu haglyconau cyfatebol. Roedd y m/z 185.117 ar gyfer M8, 162 Da yn llai nag ajugol, a gynhyrchwyd trwy golli gweddillion glwcos.

M40(m/z 199.0641, Rt 10.91 mun) oedd cynnyrch dadglycosylated catalpol. M45 m/z 169.0487, Rt 12.15 mun) yn llai na 30 Da metabolyn dadglycosylated catalpol, ac fe'i nodwyd fel tynnu moleciwl o CH, O metabolyn. Roedd M34(m/z 151.0352, Rt 9.08 mun), yn golled pellach o metabolit H, O.

Roedd M44(m/z 211.0665, Rt 11.31 mun) yn fetabolyn deglycosylated o geniposide, ac roedd M37(m/z 197.0833, Rt 15.03 mun) yn deglycosylation o 8-asid epideoxyloganic. Gallai adweithiau metabolaidd ar gyfer iridoids gael eu datgelu fel metaboledd cam I o deglycosylation (Ffig. 12D).

Cymhariaeth o broffilio metabolaidd mewn plasma, wrin, a feces rhwng CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu

Cymharwyd 2 brototeip mewn plasma, 7 mewn wrin, a 3 mewn feces. Amsugnwyd 7 prototeip mewn CD, 7 prototeip wedi'u hamsugno mewn CD-NP, ac 8 prototeip mewn CD-HP. Dim ond yn y grŵp feces o CD-NP y canfuwyd M21, a chanfuwyd M38 a M51 mewn grwpiau wrin o CD-HP yn unig. O'i gymharu â metabolion, roedd metabolion union yr un fath mewn plasma, wrin, a feces yn 4, 42, a 21, yn y drefn honno. Roedd 34 metabolion wedi'u hamsugno yn y grŵp CD, 39 yn CD-NP, a 40 yn y grŵp CD-HP. Dim ond mewn grwpiau CD-NP y canfuwyd M5, M7, M40, a M52, tra bod M24, M4l, a M48 newydd eu canfod mewn grwpiau CD-HP.

Gwelwyd amrywiadau yn yr amsugniad yn ogystal â metaboledd cyfansoddion gweithredol mewn cynhyrchion amrywiol wedi'u prosesu o CD. O Ffigur 14, canfuwyd mai dwyster cydgysylltiad HT-sylffad (M17) oedd yr uchaf yn yr wrin, ac yna 3- cyfuniad sylffad HPP (M29), cydgysylltiad sylffad methyl HT (M22), sylffad CA dehydroxylated conjugation(M32), a 3,4-cyfuniad asid sylffad propionig dihydroxy bensen (M19). Roedd cynnwys cynhyrchion metabolaidd yn y grŵp wedi'i brosesu yn uwch nag yn y grŵp CD, yn enwedig ar gyfer M22, M29, M27, M16, M19, M1, M2. Mae gan eu grŵp rhagflaenol 6'-O-caffeoyl yn y rhan 8-O- -D-glucopyranosyl, cyfansoddion, fel hydroxytyrosol briodweddau gwrth-tiwmor, s gwrthlidiol, gwrthfacterol, gwrthfeirysol, ac antifungal [ 23]. Mae asid caffeic yn meddu ar weithgareddau gwrthlidiol, gwrth-ganser a gwrthfeirysol [24]. Roedd yn gyson â'r defnydd clinigol o CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu.

Trafodaeth

TCM yw CD, ac mae ei brif gydrannau bioactif, gan gynnwys PhGs, iridoids, polysacaridau wedi'u dogfennu gan amrywiol astudiaethau ymchwil. Mewn ymarfer clinigol TCM, mae cynhyrchion CD wedi'u prosesu wedi'u defnyddio'n eang o gymharu â rhai amrwd. Bydd y cyfansoddiad cemegol yn cael ei newid yn ystod y prosesu, a all arwain at newidiadau yn yr effeithiau meddyginiaethol (Ffig. 14).

Mae PhGs yn fath o gyfansoddyn ffenolig a nodweddir gan strwythur -glucopyranoside sy'n dwyn moiety hydroxy-phenylethyl fel yr aglycone. Mae'r cyfansoddion hyn yn aml yn cynnwys asid caffeic a rhamnose sydd ynghlwm wrth y gweddillion glwcos trwy gysylltiadau ester neu glycosidig yn y drefn honno. Yn yr astudiaeth gyfredol, mae'r dadansoddiadau ansoddol o CD, CD-NP. a chynhaliwyd CD-HP, a nodwyd cyfanswm o 97 o gyfansoddion, gan gynnwys glycosidau ffenylethanoid (PhGs), iridoids, ac ati. Dangosodd y canlyniadau a gafwyd amrywiadau mewn cyfansoddiad cemegol cyn ac ar ôl prosesu. Gostyngodd dwyster PhGs sydd â'r grŵp 4'-O-caffeoyl yn y rhan 8-O- -D-glucopyranosyl, fel acteoside, cistanoside C, campneoside II, osmanthus-side ar ôl cael eu prosesu, tra bod PhGs gyda

megis isoacetoside, isocistanoside, isocampneoside I, cynyddodd isomartynoside, yn enwedig yn y grŵp CD-NP. Cynyddodd dwyster echinacoside a cistanoside B y mae eu strwythur yn meddu ar 6'-O- -D-glucopyranosyl moiety hefyd. Roedd PhGs â grŵp 2'-asetyl yn aml yn gostwng oherwydd adwaith hydrolysis yn ystod y broses, fel tubuloside B, 2-asetylacteoside.

Cynhaliwyd ymchwiliad i fetabolion a amsugnwyd in vivo ar ôl rhoi CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu ar lafar. Prosesau metabolaidd cam II oedd y rhaeadrau allweddol ac roedd y rhan fwyaf o'r metabolion yn sylffad, glucuronide, a chyfuniadau methylated. Mae gan glycosidau ffenylethanol amsugno a defnydd isel o'r geg. Maent yn anodd cael eu hamsugno i'r gwaed ac yn gweithredu fel epilyddion i chwarae eu rolau ar ôl actifadu metabolaidd in vivo. Ffenylethanoidau a gynhyrchir i ffenyletha-nolaglycone, fel hydroxytyrosol (HT) ac asid caffeic (CA) a'i ddeilliad 3-asid hydroxyphenylpropionig (3-HPP), gall y metabolion hyn gael eu hamsugno'n haws i'r plasma a chael a gwell effaith feddyginiaethol.

CD a'i gynhyrchion wedi'u prosesu. Cyfuniad HT-sylffad (M17) sydd â'r dwyster uchaf yn yr wrin, ac yna 3- cyfuniad sylffad HPP (M29), cydgysylltiad sylffad methyl HT (M22), cydgysylltiad sylffad CA dehydroxylated (M32), a 3,{{ 7}}cyfuniad sylffad asid dihydroxy bensenpropionig (M19). Roedd cynnwys cynhyrchion metabolaidd yn y grŵp wedi'i brosesu yn uwch nag yn y grŵp CD, yn enwedig ar gyfer M22, M29, M27, M16, M19, M1, M2.

Yn gyffredinol, gallai'r cydrannau sy'n dod i gysylltiad uchel â'r organau targed fod yn effeithiol. Mae swm digonol o ffenylethanoidau a'u deilliadau wedi'u gwerthuso a'u pennu in vitro. Acteoside yw'r cyfansoddyn nodweddiadol, y gostyngodd ei gynnwys ar ôl cael ei brosesu gan win reis, a chynyddodd cynnwys isoacteoside, isocistanoside C, isocampneoside I yn gyfatebol. Gellid gwerthuso cynhyrchion diraddio PhGs, fel deilliadau CA a HT, yn y bio-samplau, a gall prosesu gwin reis wella amsugno metabolion in vivo.

Casgliad

Yn yr astudiaeth hon, canfuwyd 97 o gyfansoddion yn y darnau o CD a'i gynnyrch wedi'i brosesu. Digwyddodd diraddiad ychydig o glycosidau o dan dymheredd uchel ac o ganlyniad, cafodd rhai isomerau a chyfadeiladau newydd eu syntheseiddio. Mewn astudiaeth in vivo, cafodd cydrannau prototeip (10) a metabolion (44) eu pennu neu eu gwerthuso'n betrus mewn plasma llygod mawr, feces, ac wrin. Prosesau metabolig Cam II oedd y rhaeadrau allweddol, roedd y rhan fwyaf o'r metabolion yn gysylltiedig ag echinacoside neu acteoside, fel HT, CA a'u deilliadau 3-asid hydroxyphenylpropionig 3-HPP. Gall y metabolion hyn gael eu hamsugno'n haws i'r plasma a chael effaith feddyginiaethol well. Dangosodd y canlyniadau a gafwyd fod cyfansoddiad cemegol CD yn wahanol ac yn effeithio ar warediad y cyfansoddyn in vitro ac in vivo.

Byrfoddau

PhGs: glycosidau ffenylethanoid; CD: Cistanche deserticola; CMM: Materia Medica Tsieineaidd; TCM: Meddygaeth Tsieineaidd Traddodiadol; CD-NP: Gistanche deserticola Wedi'i brosesu trwy stemio â gwin reis o dan bwysau arferol; CD-HP: Cistanche deserticola Wedi'i brosesu trwy stemio â gwin reis o dan bwysau uchel; UPLC-Q-TOF-MS: cromatograffaeth hylif perfformiad uchel iawn ynghyd â TOF-MS; PCA: Dadansoddiad prif gydrannau; VIP: Pwysigrwydd amrywiol ar gyfer yr amcanestyniad; CA: Caffeicacid; HA: Hydroxytyrosol.

Diolchiadau

Ddim yn berthnasol.

Cyfraniadau awduron

Cymerodd LZ, LBN, SJ ran mewn drafftio, ysgrifennu'r llawysgrif. Cynorthwyodd RJ, LPP gyda'r arbrofion anifeiliaid a drafftio a chwblhau'r holl ffigurau a thablau. ZC, HY. Cynorthwyodd ITZ gyda dyluniad a pherfformiad yr astudiaeth hon ac adolygodd y llawysgrif. Darllenodd a chymeradwywyd y llawysgrif derfynol gan bob awdur.

Ariannu

Cefnogwyd y gwaith hwn gan Sefydliad Cenedlaethol Gwyddoniaeth Naturiol Tsieina (Grant Rhif: 81874345) a Sefydliad Gwyddoniaeth Naturiol Talaith Liaoning (Rhif Grant: 2020-MS-223).

Argaeledd data a deunyddiau

Mae'r setiau data a ddefnyddiwyd a/neu a ddadansoddwyd yn ystod yr astudiaeth gyfredol ar gael gan yr awdur cyfatebol ar gais rhesymol.

Datganiadau

Cymeradwyaeth foesegol a chaniatâd i gymryd rhan

Cafwyd cymeradwyaeth foesegol ar gyfer defnyddio anifeiliaid arbrofol ar gyfer yr astudiaeth hon gan Bwyllgor Moeseg Feddygol Prifysgol Liaoning Meddygaeth Tsieineaidd Draddodiadol (Rhif cymeradwyo: 2018YS(DW)-044-01), Roedd yr holl weithdrefnau arbrofol yn yr astudiaeth hon o dan safonau moesegol o Pwyllgor Moeseg Feddygol Prifysgol Meddygaeth Tsieineaidd Draddodiadol Liaoning.

Caniatâd i gyhoeddi

Ddim yn berthnasol.

Diddordebau cystadleuol

Mae'r awduron yn datgan nad oes ganddynt unrhyw wrthdaro buddiannau i'w ddatgelu.

Manylion Awdur

'Adran Fferyllol, Prifysgol Liaoning Meddygaeth Tseiniaidd Traddodiadol, Dalian, Liaoning, Tsieina.' Sefydliad Ymchwil Cyffuriau Grŵp Monos, Ulaanbaatar 14250, Mongolia.

Derbyniwyd: 31 Mai 2021 Derbyniwyd: 17 Medi 2021 Cyhoeddwyd ar-lein: 28 Medi 2021

Zhe Li1, Lkhaasuren Ryenchindorj2, Bonan Liu1, Ji Shi1*, Chao Zhang1, Yue Hua1, Pengpeng Liu1, Guoshun Shan1 a Tianzhu Jia1

Cyfeiriadau

1. Comisiwn Pharmacopoeia Tsieineaidd. Pharmacopeia Gweriniaeth Pobl Tsieina, cyf. I. Beijing: Gwasg Gwyddoniaeth Feddygol Tsieina; 2020. t. 140.
2. Li Z, Lin H, Gu L, Gao J, Tzeng CM. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): un o anrhegion fferyllol gorau meddygaeth Tsieineaidd traddodiadol. Ffarmacol blaen. 2016; 7:41.
3. Liu BN, Shi J, Zhang C, Li Z, Hua Y, Liu PP, Jia TZ. Effeithiau gwahanol ddulliau prosesu sychu ar gyfer Fresh Cistanche deserticola ar gynnwys ei gydrannau. J Chin Med Mater. 2020; 10: 2414-8.
4. Liu BN, Shi J, Jia TZ, Lv TT, Li Z. Optimeiddio'r broses stemio pwysedd uchel ar gyfer Cistanches Herba. Chin Trad Patent Med. 2019; 11: 2576-80.
5. Fan YN, Huang YQ, Jia TZ, Wang J, La-Sika, Shi J. Effeithiau Cistanches herba cyn ac ar ôl prosesu ar swyddogaeth gwrth-heneiddio a swyddogaeth imiwnedd llygod mawr heneiddio a achosir gan D-galactos. Chin Arch Trad Chin Med, 2017; 11:2882–2885.
6. Gao YJ, Jiang Y, Dai F, Han ZL, Liu HY, Bao Z, Zhang TM, Tu PF. Astudiaeth ar gyfansoddion carthydd yn Cistanche deserticola YMCA. Med Chin Modern. 2015; 17(4):307–10.
7. Liu BN, Shi J, Li Z, Zhang C, Liu P, Yao W, Jia T. Astudiaeth ar swyddogaeth niwroendocrine-imiwn Cistanche deserticola a'i gynhyrchion stemio gwin reis yn y model llygod mawr a achosir gan glucocorticoid. Ategiad Seiliedig ar Evid Alternat Med. 2020; 22: 532 1976.
8. Guo Y, Wang L, Li Q, Zhao C, He P, Ma X. Gwella swyddogaeth bywiogi arennau yn y model llygoden gan Cistanches herba sychu'n gyflym ar dymheredd canolig-uchel. J Med Bwyd. 2019; 22(12): 1246-53.
9. Wang T, Zhang X, Xie W. Cistanche deserticola YC Ma, "Anialwch ginseng": adolygiad. Am J Chin Med. 2012; 40(6): 1123–41.
10. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: Trosolwg o'i eiddo cemeg, ffarmacoleg ac ffarmacocineteg. J Ethnopharmacol col. 2018; 219: 233-47.
11. Lei H, Wang X, Zhang Y, Cheng T, Mi R, Xu X, Zu X, Zhang W. Herba Cistanche (Rou Cong Rong): adolygiad o'i ffytocemeg a ffarmacoleg. Tarw Pharm Chem. 2020; 68(8):694–712.
12. Geng X, Tian X, Tu P, Pu X. Effeithiau niwro-amddiffynnol echinacoside yn y model llygoden MPTP o glefyd Parkinson. Eur J Ffarmacol. 2007; 564:66-74.

13. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB. Effaith amddiffynnol tubuloside B ar apoptosis a achosir gan alffa TNF mewn celloedd niwronaidd. Acta Pechod Ffarmacol. 2004; 25(10): 1276–84.
14. Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y, Tu PF. Iridoidau gwrthlidiol o goesau Cistanche deserticola wedi'u meithrin yn Anialwch Tarim. Chin J Nat Med. 2016; 14(1):61–5.
15. Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y, Tu PF. Glycosidau ffenylethanoid gyda gweithgareddau gwrthlidiol o goesynnau Cistanche deserticola wedi'u meithrin yn anialwch Tarim. Ffitotherapi. 2013; 89: 167-74.
16. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Hayakawa T, Muraoka O. Iridoid a glycosidau monoterpene acyclic, kankanosides L, M, N, O, a P o Cistanche tubulosa. Tarw Pharm Chem. 2010; 58(10): 1403–7.
17. Li SL, Song JZ, Qiao CF, et al. Strategaeth newydd i archwilio'n gyflym farcwyr cemegol posibl ar gyfer y gwahaniaethu rhwng Radix Rehmanniae amrwd a phrosesedig gan UHPLC-TOF-MS gyda dadansoddiad ystadegol aml-amrywedd. J Pharm Biomed Rhefrol. 2010; 51(4):812–23.
18. Peng F, Chen J, Wang X, Xu CQ, Liu TN, Xu R. Newidiadau mewn lefelau glycosidau ffenylethanoid, gweithgaredd gwrthocsidiol, a nodweddion ansawdd eraill mewn sleisys deserticola Cistanche trwy brosesu stêm. Tarw Pharm Chem. 2016; 64: 1024-30.
19. Ma ZG, Tan YX. Newidiadau cynnwys chwe glycosid ffenylethanoid o dan amser stemio â gwin yn Desertliving Cistanche. Chin Trad Pat ent Med. 2011; 33(11): 1951–4.
20. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. Effaith y broses stemio ar ansawdd cistanche deserticola postharvest ar gyfer defnydd meddyginiaethol yn ystod sychu haul. Tarw Pharm Biol. 2016; 39(12): 2066-70.
21. Cui Q, Pan Y, Zhang W, Zhang Y, Ren S, Wang D, Wang Z, Liu X, Xiao W. Metabolitau acteoside dietegol: proffiliau, ynysu, adnabod, a galluoedd hepatoprotective. J Cemegydd Bwyd Amaeth. 2018; 66(11):2660–8.
22. Cui Q, Pan Y, Bai X, Zhang W, Chen L, Liu X. Nodweddu metabolion echinacoside ac acteosid o Cistanche tubulosa yn systematig mewn plasma llygod mawr, bustl, wrin a feces yn seiliedig ar UPLC-ESI-Q-TOF -MS. Cromatogr Biomed. 2016; 30(9): 1406–15.
23. Bertelli M, Kiani AK, Paolacci S, Manara E, Kurti D, Dhuli K, Bushati V, Miertus J, Pangallo D, Baglivo M, Beccari T, Michelini S. Hydroxytyrosol: cyfansawdd naturiol gyda gweithgareddau ffarmacolegol addawol. J Biotechnol. 2020; 309: 29-33.
24. Touaibia M, Jean-François J, Doiron J. Cafeic Acid, phore pharmaco amlbwrpas: trosolwg. Mini Parch Med Chem. 2011; 11(8):695–713.

Nodyn y Cyhoeddwr

Mae Springer Nature yn parhau i fod yn niwtral o ran hawliadau awdurdodaeth mewn mapiau cyhoeddedig a chysylltiadau sefydliadol.